專利名稱：一種螺旋藻提取液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于海洋生物加工技術(shù)領(lǐng)域，更明確地說是涉及一種螺旋藻中提 取螺旋藻葉綠素、螺旋藻藻藍(lán)蛋白、螺旋藻多糖的提取液及其制備方法。
背景技術(shù)：
螺旋藻是一種含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖礦物質(zhì)、維生素以及多種微量元 素等的海洋綠色生物，多年來被應(yīng)用于藥品、保健品和飲料等。但是，以螺 旋藻干粉制成的片劑和膠囊居多，即將螺旋藻干粉直接添加到食品中，導(dǎo)致 口感不好，也不利用消化和吸收，尤其是在飲料中產(chǎn)生沉淀和懸浮物。而且， 由螺旋藻提取的主要成分多為藻藍(lán)蛋白和多糖，而缺乏螺旋藻葉綠素成分。 同時(shí)，螺旋藻葉綠素為堿性物質(zhì)，在酸性飲料中會(huì)析出而使?fàn)I養(yǎng)成分受到破 壞，難以溶解在飲料中，所以為了保留該成分必須進(jìn)行特殊處理。
而現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)于螺旋藻中葉綠素成分的保留的提取液及制備方法和 添加到飲料中的應(yīng)用，都沒有相關(guān)技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的，就在于克服上述缺點(diǎn)和不足，提供一種螺旋藻中提取螺 旋藻葉綠素、螺旋藻藻藍(lán)蛋白、螺旋藻多糖的提取液及其制備方法。
本發(fā)明所述的螺旋藻提取液，主要含有螺旋藻葉綠素、螺旋藻藻藍(lán)蛋白、 螺旋藻多糖。
本發(fā)明所述的螺旋藻提取液的制備方法，提取方法主要包括提取葉綠 素、藻藍(lán)蛋白的提取、組合酶解、熱水提取等過程，即包括(1)螺旋藻葉
綠素的提取及其鐵鈉鹽的制備取螺旋藻粉在無水或30~ 100w/w(重量比) 水的食用酒精中浸泡，藻和酒精混合比例最好為1: 2,室溫下，5~48小時(shí)， 反復(fù)提取，離心取上清液，獲葉綠素；葉綠素經(jīng)皂化和鐵鹽取代，得穩(wěn)定的 螺旋藻葉綠素鐵鈉鹽，再經(jīng)過糊精包埋，包埋率達(dá)到95%以上；
(2)藻藍(lán)蛋白的提取取提取過葉綠素的螺旋藻粉，用蒸餾水或去離 子水浸泡，藻和水混合比例最好為1: 2， w/w(重量比)，室溫下攪拌過 夜，超聲波反復(fù)提取，離心取上清液，獲藻藍(lán)蛋白，噴霧干燥得水溶性藻藍(lán)
蛋白產(chǎn)物；
(3)游離氨基酸、寡肽、寡糖的提取提取藻藍(lán)蛋白后的藻渣加蒸餾 水或去離子水2 - 5倍，加溶菌酶和果膠酶或其它纖維素酶水解最好1 - 2小 時(shí)，再分別加胃蛋自酶、木瓜蛋自酶、淀粉酶、胰蛋白酶各水解最好0.5-l小時(shí)，離心，取上清液，獲游離氨基酸、寡肽、寡糖；
-(4)螺旋藻多糖的提取酶解后的藻渣加蒸餾水或去離子水2-5倍， 在8(TC以上熱水中攪拌提取，酶解蛋白質(zhì)成分，離心合并上清液，獲螺旋 藻多糖<■
該發(fā)明還可以包括(5)飲料用尤其啤酒專用螺旋藻提取液制備。將螺 旋藻葉綠素、螺旋藻藻藍(lán)蛋白和螺旋藻多糖等成分適當(dāng)組合得到專門用于飲 料特別是啤酒生產(chǎn)的螺旋藻提取液產(chǎn)品。
上述螺旋藻制備方法提取充分，所得營(yíng)養(yǎng)液包括螺旋藻葉綠素、螺旋藻 藻藍(lán)蛋白、螺旋藻多糖等成分，其中螺旋藻葉綠素含量達(dá)到8%以上。
本發(fā)明所述的螺旋藻提取液及其制備方法，提取過程中保留了螺旋藻葉 綠素成分，并可用于飲料尤其是啤酒添加，且不污染環(huán)境，操作方便，易用 于工業(yè)化生產(chǎn)。


圖1為螺旋藻葉綠素的提取及其鐵鈉鹽的制備工藝流程。 具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1。參照?qǐng)D1說明本發(fā)明所述的螺旋藻提取液的制備方法。 第一步，螺旋藻葉綠素的提取及其鐵鈉鹽的制備。
用食用無水酒精提取螺旋藻中的葉綠素，取螺旋藻粉5g在無水食用酒 精中浸泡，其中藻酒精為1: 2, w/w,室溫下過夜，反復(fù)提取2-4次， 離心取上清液，獲葉綠素；再用5。/。NaOH溶液皂化，石油醚萃取，在酸性 條件下用11 % FeS04溶液實(shí)現(xiàn)鐵鎂置換，沉淀物經(jīng)丙酮溶解后，加2 % NaOH 的乙醇溶液成鹽，過濾，水洗，真空干燥，制成螺旋藻葉綠素鐵鈉鹽，經(jīng)過 P-環(huán)狀糊精包埋，包埋率達(dá)到95%，則葉綠素提取率達(dá)到66.1%，制品得 率占藻粉的1.2%。
第二步，藻藍(lán)蛋白的提取，.
取提取過葉綠素的螺旋藻粉5g,用蒸餾水浸泡，藻水為1 : 2， w/w (重量比)，室溫下攪拌過夜，加入復(fù)合酶1.5%，該復(fù)合酶藻為1.5 : 100, w/w為纖維素酶組合物，用以破壞細(xì)胞壁。超聲波反復(fù)提取2-3次，超 聲波功率為900W,超聲每次提取時(shí)間25min。離心取上清液，獲藻藍(lán)蛋白水 溶液；
工藝流程為稱量螺旋藻藻粉—浸泡、攪拌—超聲波反復(fù)破碎細(xì)胞-離 心取上清液—藻藍(lán)蛋白產(chǎn)物。
第三步，游離氨基酸、寡肽、寡糖的提取。
提取藻藍(lán)蛋白后的藻渣加蒸餾水或去離子水2-5倍，加溶菌酶和果膠 誨或其它纖維素酶水解最好l-2小時(shí),再分別加胃蛋自酶、木瓜蛋自酶、 淀粉酶、胰蛋白酶各水解最好O. 5-l小時(shí)，離心，取上清液，獲游離氨基 酸、寡肽、寡糖。
第四步，螺旋藻多糖的提取。
酶解后的藻渣加蒸餾水2 - 5倍，在8CTC攪拌，將提取液經(jīng)3 000 r min-l 離心20 min ,留上清液，將殘?jiān)M(jìn)行2次提取，將提取液經(jīng)3 000 r min- 1離心 20min。將兩次離心所得上清液合并，加入中性蛋白酶，蛋白酶藻為1.0: 100, w/w,以酶解蛋白。在45。C反應(yīng)3小時(shí)，經(jīng)透析后得到螺旋藻活性多 糖溶液。
第五步，飲料尤其是啤酒專用螺旋藻提取液制備。
將前述四步獲得的螺旋藻葉綠素、螺旋藻藻藍(lán)蛋白和螺旋藻多糖等成分 根據(jù)需要適當(dāng)組合，得到專門用于飲料尤其是啤酒生產(chǎn)的螺旋藻提取液產(chǎn) 品。其中螺旋藻葉綠素的含量超過8%。 -
本發(fā)明所述的螺旋藻提取液及其制備方法，提取過程中保留了螺旋藻葉 綠素成分，并可用于飲料尤其是啤酒添加，且不污染環(huán)境，操作方便，易用 于工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明參照實(shí)施例進(jìn)行說明，但保護(hù)范圍不限于此，在本發(fā)明技術(shù)范圍 內(nèi)具有普通技術(shù)人員可以經(jīng)過簡(jiǎn)單的變換，而獲得本發(fā)明同樣的技術(shù)效果， 同樣在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種螺旋藻提取液，含有螺旋藻藻藍(lán)蛋白、螺旋藻多糖、螺旋藻葉綠素，其特征是螺旋藻葉綠素含量超過8％。
2.如權(quán)利要求1所述的螺旋藻提取液的制備方法，其特征是包括下述 步驟(1)螺旋藻葉綠素的提取；(2)藻藍(lán)蛋白的提取；(3)游離氨基酸、 寡肽、寡糖的提??；(4)螺旋藻多糖的提取
3.如權(quán)利要求2所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特征是所述 的步驟(1)經(jīng)過糊精包埋。
4. 如權(quán)利要求2或3所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特征是 所述的步驟(1)為取螺旋藻粉在無水或30~100， w/w水的食用酒精中浸 泡，反復(fù)提取，離心取上清液，獲葉綠素；葉綠素經(jīng)皂化和鐵鹽取代，再經(jīng) 過糊精包埋，得穩(wěn)定的螺旋藻葉綠素鐵鈉鹽。
5. 如權(quán)利要求2所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特征是所述 的步驟(2)為取提取過葉綠素的螺旋藻粉，用蒸餾水或去離子水浸泡，撹 拌，超聲波反復(fù)提取，離心取上清液，獲藻藍(lán)蛋白，噴霧千燥得水溶性藻藍(lán) 蛋白產(chǎn)物。
6. 如權(quán)利要求2所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特征是所述 的步驟(3 )為提取藻藍(lán)蛋白后的藻渣加蒸餾水或去離子水2 - 5倍，加溶菌 酶和果膠酶或其它纖維素酶水解l小時(shí)以上，再分別加胃蛋自酶、木瓜蛋自 酶、淀粉酶、胰蛋白酶各水解0.5小時(shí)以上，離心，取上清液，獲游離氨基 酸、寡肽、寡糖。
7. 如權(quán)利要求2所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特征是所述 的步驟(4)為酶解后的藻渣加蒸餾水或去離子水2-5倍，在8(TC以上熱 水中攪拌提取，離心合并上清液，經(jīng)蛋白酶酶解，獲活性多糖。
8. 如權(quán)利要求3或4所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特征是 所述的步驟(1)中的糊精的包埋率為95%以上。
9. 如權(quán)利要求3或4所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特征是所述的步驟(1)中的糊精為e-環(huán)狀糊精。
10. 如權(quán)利要求6所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特征是步驟 (3)中加溶菌酶和果膠酶或其它纖維素酶水解1-2小時(shí)，加胃蛋自酶、木 瓜蛋自酶、淀粉酶、胰蛋白酶各水解O. 5- l小時(shí)。
11.如權(quán)利要求2至9任一所述的一種螺旋藻提取液的制備方法，其特 征是還包括步驟(5)飲料尤其是啤酒專用螺旋藻提取液制備將螺旋藻葉 綠素、螺旋藻藻藍(lán)蛋白和螺旋藻多糖等成分根據(jù)需要組合，其中螺旋藻葉綠 素的含量超過8%，得用于飲料尤其是啤酒生產(chǎn)的螺旋藻提取液產(chǎn)品。
全文摘要
一種螺旋藻提取液和制備方法，提取液中的營(yíng)養(yǎng)成分主要包括螺旋藻葉綠素、螺旋藻藻藍(lán)蛋白、螺旋藻多糖等，其中螺旋藻葉綠含量超過8％。其制備方法主要包括提取葉綠素、藻藍(lán)蛋白的提取、游離氨基酸、寡肽、寡糖的提取、螺旋藻多糖的提取等過程，尤其是在提取螺旋藻葉綠素的過程中經(jīng)過糊精包埋。該制備方法提取充分，并保留了螺旋藻葉綠素成分，可用于飲料尤其是啤酒添加，且不污染環(huán)境，操作方便，易用于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C12C5/00GK101348754SQ20071013068
公開日2009年1月21日 申請(qǐng)日期2007年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月16日
發(fā)明者單連菊, 偉 樊, 王可欣, 董建軍, 錢中華 申請(qǐng)人:青島啤酒股份有限公司