專利名稱：：益生菌/非益生菌組合的制作方法益生菌/非益生菌組合0001本申請要求2006年9月19日提交的臨時申請U.S.S.N.60/845,652號的優(yōu)先權(quán)。
技術(shù)領(lǐng)域：
0002本發(fā)明涉及促進(jìn)胃腸健康的方法，這是通過攝取一種組合物來實(shí)現(xiàn)的，所述組合物包括一種或多種益生微生物(probioticmicroorganisms)、-種或多種碳水化合物來源和一種或多種抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品(resistantproteinproducts)。
背景技術(shù)：
：0003淀粉產(chǎn)品是飲食中重要且主要的組成成分。淀粉，一種復(fù)雜的碳水化合物，是由兩種類型的多糖分子組成的，即直鏈淀粉，由a-1，4-D-葡糖苷鍵連接的D-脫水葡萄糖單元組成的主要為線性且柔性的聚合物，和支鏈淀粉，由a-l,6-D-葡糖苷鍵連接的線性鏈組成的支鏈聚合物。淀粉主要是在小腸中被a-淀粉酶所消化。a-淀粉酶水解a-l，4-D-葡糖苷鍵，但是不水解a-l,6-D-葡糖苷鍵，這導(dǎo)致支鏈淀粉部分的水解較不完全。0004研究已經(jīng)表明淀粉和纖維素膳食的更深層次的重要性?？墒忱w維的消費(fèi)對于飲食健康特別重要，而且已經(jīng)顯示有助于預(yù)防或治療某些疾病，例如結(jié)腸癌。一般地，可食纖維被定義為植物材料中的多糖和殘余(remnants),它們對人的消化酶進(jìn)行的水解(消化)具有抗性，而且可包括這樣的成分例如非淀粉多糖、木質(zhì)素和次要成分，比如蠟狀物、角質(zhì)和軟木脂。由于富含可食纖維的食物潛在的健康益處，許多國家己經(jīng)建議把增加這類食物的消費(fèi)作為他們飲食方針的一部分。0005已經(jīng)知道，一些天然發(fā)生的淀粉和某些淀粉加工操作可能導(dǎo)致淀粉轉(zhuǎn)變成具有胰腺淀粉酶抗性的淀粉，簡稱為抗性淀粉?？剐缘矸鄣挚贡幌矸勖咐缫认賏-淀粉酶消化以及在小腸中的吸收，但是進(jìn)入大腸，在大腸里被結(jié)腸的微生物群落(microflora)發(fā)酵，主要產(chǎn)生短鏈的脂肪酸和氣體。研究文獻(xiàn)表明，結(jié)腸微生物對抗性淀粉的這種發(fā)酵具有大量的有益效果，包括改善結(jié)腸健康和降低諸如憩室病和結(jié)腸癌的疾病的發(fā)病率。另外，因?yàn)樗钡竭M(jìn)入大腸才被利用，在那里被發(fā)酵產(chǎn)生短鏈脂肪酸，抗性淀粉具有降低的熱量值，并且就這些特性而言，它具有可食纖維的益處。0006根據(jù)抗性原因，抗性淀粉(RS)在文獻(xiàn)中已經(jīng)被分成四類。RS1是在物理上不可及的淀粉，是由于顆粒包埋入蛋白質(zhì)基質(zhì)內(nèi)或植物細(xì)胞壁內(nèi)。RS2是顆粒狀淀粉，其抵抗胰腺a-淀粉酶的消化。RS3是回生(retrograded)非顆粒狀淀粉，這是淀粉或淀粉食物經(jīng)過熱/潮處理形成的。RS4是化學(xué)改性的淀粉，其抵抗被a-淀粉酶消化，包括淀粉酯(例如乙?；?、淀粉醚(例如羥丙基化)、交聯(lián)的淀粉(例如三偏磷酸鈉和三聚磷酸鈉)等等。0007生產(chǎn)各種類型的抗性淀粉產(chǎn)品的各種方法已經(jīng)有所報道，包括在美國專利號5,593,503和6,664,389中公開的那些方法。0008蛋白質(zhì)是飲食中另一個主要且重要的部分。由氨基酸組成的蛋白質(zhì)被身體利用以獲得生長、保養(yǎng)和全面的健康。蛋白質(zhì)可來源于動物或植物，在食品和飼料中起到許多功能性的作用。它們是重要的營養(yǎng)物質(zhì)，并且能夠起到比如產(chǎn)生香味和顏色等功能性作用。0009研究已經(jīng)表明，所有蛋白質(zhì)的消化并不是都一樣的。一些蛋白質(zhì)可能在小腸中不能被消化和吸收，進(jìn)入大腸就能被結(jié)腸的微生物群落作為一種氮源來利用。某些抗性蛋白質(zhì)的存在可以改變細(xì)菌種類的相對比例。0010健康個體的胃腸道內(nèi)的微生物群落保護(hù)宿主免受病原體入侵。然而，在小孩、老人和健康狀態(tài)受影響的病人體內(nèi)，這一保護(hù)屏障的效果較差。個體可能存在不同程度危害到其健康的狀況從輕微的應(yīng)激和相關(guān)事件，例如飲食上的變化、情感和營養(yǎng)上的應(yīng)激，到極端的情況，例如免疫受到危害的病人和經(jīng)受放射學(xué)(輻射)治療和化療的病人。0011己經(jīng)被描述，益生微生物對胃腸道內(nèi)的另一微生物或微生物群施加抗微生物效應(yīng)，該效應(yīng)是指益生菌制劑的作用。這些直接適用于益生菌的使用，以提高對腸內(nèi)的致病微生物和它們能夠產(chǎn)生的病原體的抵抗性。這些類型的相互作用包括競爭性集落化(competitivecolonisation)以及粘附和生長抑制。0012競爭性集落化是指這樣的事實(shí)有益的益生菌，在獲取可利用的營養(yǎng)物質(zhì)或結(jié)腸上皮上的增殖位點(diǎn)方面，在與病原體的競爭中能夠成功勝出。由于許多胃腸道病原體粘附到結(jié)腸粘膜上是感染的第一步，如果這種粘附能被抑制，這對于宿主是有益的。乳酸桿菌(lactobacilli)產(chǎn)生抑制腸毒素大腸肝菌粘附到腸粘膜的成分，這已有報道。此外，在益生菌生長期間產(chǎn)生的各種化合物已經(jīng)顯示出可抑制病原體生長。這些化合物包括諸如乳酸、醋酸、reuterin和細(xì)菌素(bacteriocins)等的有機(jī)酸。有機(jī)酸降低pH，并因此能間接影響病原體的生長。此外，乳酸和醋酸能對微生物有毒性作用。Reuterin，其抑制很寬范圍的細(xì)胞的生長，是由在存在甘油的條件下生長的羅伊氏乳桿菌(丄acto^c"/MweMteW)產(chǎn)生的。許多細(xì)菌素已經(jīng)報道是由乳酸桿菌產(chǎn)生的，例如嗜酸桿菌素(Acidophilin)、嗜酸乳菌素(Acidolin)、乳酸殺菌素(Lactocidin)、細(xì)菌素(Bacteriocin)、Blugarican、乳醇菌素(Lactolin)、乳酸菌素(Lactobacillin)和短乳桿菌素(Lactobrevin)。它們具有很寬范圍的活性，或者特異性地抑制范圍很有限的緊密相關(guān)的微生物的生長。例如，孚L酸桿菌屬某禾中育b對C7o^〃W/w附表現(xiàn)出特異的拮抗效應(yīng)。0013在人和動物的胃腸道的各個區(qū)域存在不同水平的特定細(xì)菌群。此外，已經(jīng)顯示，各個屬和種的特定菌株在消化道的一個區(qū)域到另一個區(qū)域是變化的。0014在胃腸道內(nèi)尤其是大腸內(nèi)寄住的微生物對人類的健康能夠產(chǎn)生有利的或不利的影響，這是許多科學(xué)家的論點(diǎn)。這些微生物，通過產(chǎn)生毒素、代謝副產(chǎn)物、短鏈脂肪酸和類似物，影響宿主的生理狀況。0015內(nèi)臟微生物群落的組成和數(shù)量可以受到疾病、生活方式、旅行和其他因素導(dǎo)致的狀況或壓力的影響。如果可以促進(jìn)能對個體的健康狀況產(chǎn)生有利影響的微生物到大腸內(nèi)寄住，這將提高宿主的生理健康狀況。0016有益微生物或益生菌的引入，通常是由攝取飲料、酸乳酪、膠囊和其它形式物質(zhì)中的生物體來實(shí)現(xiàn)的，這樣，所述生物體以存活的狀態(tài)到達(dá)大腸。0017令人驚訝的是，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，胃腸健康可受益于組合物的攝取，所述組合物包括一種或多種益生微生物、一種或多種碳水化合物來源和一種或多種抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品。
發(fā)明內(nèi)容0018本發(fā)明涉及一種促進(jìn)胃腸健康的方法，這是通過攝取組合物來實(shí)現(xiàn)的，所述組合物包括一種或多種益生微生物、一種或多種碳水化合物來源和一種或多種抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品。大腸健康得益于下面的一個或多個方面增加的排泄物重量、降低的排泄物pH、增加的碳水化合物發(fā)酵和蛋白質(zhì)發(fā)酵的改善。0019如本文所使用，術(shù)語碳水化合物來源意圖指高直鏈淀粉碳水化合物、高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品和寡果糖(fmcto-oligosaccharides),其包括但不限于低聚果糖，例如果糖-(fructo-)、半乳糖-(galacto-)、麥芽糖-(malto-)、異麥芽糖-(isomalto-)、龍膽-(gentio-)、7^11-(xylo-)、palatinose—、；^d隱(soybean-)(^^^帛，糖和水蘇糖)、殼多糖-(chito陽)、瓊脂-(agaro-)、新瓊脂-(neoagaro-)、a-葡糖-、P-葡糖-、cyclo-inulo-、糖基蔗糖(glycosylsucrose)、乳果糖(lactulose)、乳蔗糖(lactosucrose)和木蔗糖(xylsucrose);和多糖，例如高直鏈淀粉和面粉。0020如本文所使用，術(shù)語抗性淀粉(RS)，被定義為在健康個體的小腸內(nèi)不被吸收的淀粉和淀粉降解產(chǎn)物的總和，而且可以采用本領(lǐng)域已知的各種測試方法進(jìn)行測量。在下文所描述的測試中，本文所使用的抗性淀粉是通過用胰腺a-淀粉酶進(jìn)行的處理來測量的。0021如本文所使用，術(shù)語抗性淀粉產(chǎn)品，被定義為以重量計含有5-100%的抗性淀粉的產(chǎn)品。0022如本文所使用，正常直鏈淀粉意圖指含有250個到12,500個D-脫水葡萄糖單元且其凝膠滲透色譜("GPC")峰分子量為大約200,000的直鏈淀粉。0023如本文所使用，低分子量直鏈淀粉意圖指主要由ci-l，4-D-葡糖苷鍵連接的含有大約30到250個脫水葡萄糖單元且其GPC峰分子量為大約15,000的基本上線性的聚合物。0024如本文所使用，高直鏈淀粉意圖指一種產(chǎn)品，其對于麥或水稻面粉來說含有至少大約27%的直鏈淀粉，而對于其它來源來說含有至少大約50%的直鏈淀粉，這是按其淀粉的重量來計算的，如通過實(shí)施例部分中詳述的電位滴定法(potentiometricmethod)所測量的。0025如本文所使用，抗性蛋白質(zhì)意圖指在健康個體的小腸內(nèi)不被吸收的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)降解產(chǎn)物的總和，而且可以采用本領(lǐng)域已知的各種測試方法進(jìn)行測量。如本文所使用，抗性淀粉是采用下文所描述的測試來測量的。0026如本文所使用，術(shù)語抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品，被定義為以重量計含有5-100%的抗性蛋白質(zhì)的產(chǎn)品。0027如本文所使用，益生菌或益生微生物意圖指活的微生物膳食添加劑，其通過改善其腸內(nèi)的微生物平衡對宿主哺乳動物產(chǎn)生有益的影響。這是由R.Fuller(AFRCInstituteofFoodResearch,ReadingLaboratory,UK)在JournalofAppliedBacteriology,1989.66,pp.365-378."ProbioticsinManandAnimals—AReview"中提供的定義。0028如本文所使用，益生元成分(prebioticcomposition)是至少部分地不可消化的食品成分，其通過選擇性地促進(jìn)結(jié)腸中已經(jīng)存在的一種或有限數(shù)量種微生物的生長、活性或兩者而對宿主產(chǎn)生有益的影響。0029如本文所使用，合生素成分(synbioticcomposition)可以是引入到宿主哺乳動物包括人體內(nèi)的酸乳酪、膠囊或其他形式，其中益生元與活的微生物食物添加劑被聯(lián)合使用?；畹奈⑸锸澄锾砑觿┩ㄟ^改善其腸內(nèi)的微生物平衡對宿主動物產(chǎn)生有益的影響。0030如本文所使用，胃腸意圖包括胃、小腸和大腸。大腸意圖包括結(jié)腸和直腸，而且在人類中意圖包括結(jié)腸、直腸和盲腸。具體實(shí)施方式在本說明書以及所附的權(quán)利要求中，詞語"包括(comprisesorcomprising)"意圖指包含隨后描述的要素，但并不排除其它要素，這是開放式的。0031本發(fā)明涉及一種促進(jìn)胃腸健康的方法，這是通過攝取組合物來實(shí)現(xiàn)的，所述組合物包括一種或多種益生微生物、一種或多種碳水化合物來源和一種或多種抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品。大腸健康得益于下面的一個或多個方面增加排泄物的重量、降低排泄物的pH、增加碳水化合物的發(fā)酵和改善(降低)蛋白質(zhì)的發(fā)酵。0032益生菌或益生微生物意圖包括攝取后能對宿主哺乳動物產(chǎn)生有益影響的一個或多個種類，而且可以包含本領(lǐng)域已知的任何種類，其包括但不限于雙歧桿菌，例如假長雙歧桿菌(^y:尸^w^/cwgMw)、乳酸雙歧桿菌(A/長雙歧桿菌(A/Zo"giwO、嬰兒雙歧桿菌(^y:/"/a"似)和兩歧雙歧桿菌(A/6zy^Mm);擬桿菌(Bactow^y)，例如普通擬桿菌(Ba".和脆弱擬桿菌(Sa".Fragz7");梭菌，例如丁酸梭菌(C7.^2)Wcmw);真細(xì)菌();梭桿菌(F歸kcten.謂)；丙酸桿菌(/V—函'kz"en.畫)；鏈球菌；腸球菌；乳球菌；葡萄球菌；消化鏈球菌(戶eptoy化eptococc^);乳桿菌(Z^ctokd〃ws義例如嗜酸孚L桿菌(丄actoZj(3c/〃twa"V/op/2z7w)。益生微生物也包括酵母，例如酵母菌(&cc/^omj;cM)。然而，本發(fā)明不限于這些特定的微生物。在一個實(shí)施方案中，益生微生物是雙歧桿菌。0033所使用的碳水化合物來源可以是本領(lǐng)域已知的任何碳水化合物來源，包括但不限于淀粉、面粉、谷類、豆類、多糖和寡糖。該碳水化合物來源選自高直鏈淀粉碳水化合物、高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品和寡果糖。在一個實(shí)施方案中，碳水化合物來源是至少部分地抵抗消化并被發(fā)酵并且這樣就能產(chǎn)生丁酸鹽的碳水化合物來源。在本發(fā)明的一個方面，所使用的碳水化合物來源是抗性淀粉產(chǎn)品，包括RS1、RS2、RS3和RS4種類。在本發(fā)明的另一方面，碳水化合物來源是高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品。在本發(fā)明的另一方面，碳水化合物來源是寡果糖。0034抗性淀粉產(chǎn)品可以是在自然界中發(fā)現(xiàn)的或者用自然界中發(fā)現(xiàn)的淀粉制成的。如本文所使用的天然淀粉是一種如在自然界中發(fā)現(xiàn)的淀粉產(chǎn)品。通過標(biāo)準(zhǔn)培育技術(shù)獲得的由植物衍生而來的淀粉也是合適的，所述技術(shù)包括雜交、易位、倒位、轉(zhuǎn)化或者任何其它的在其中引入變異的基因或染色體工程方法。另外，由可采用己知的突變培育標(biāo)準(zhǔn)方法產(chǎn)生的上述種類組分的誘導(dǎo)突變和變異所培育的植物獲得的淀粉，在本文也是適合的。0035淀粉的典型來源是谷類、塊莖、根、豆類和果實(shí)。天然來源可以包括玉米(玉蜀黍)、豌豆、馬鈴薯、甜薯、香蕉、大麥、小麥、稻米、西米、莧屬植物、木薯、竹芋、美人蕉或高粱，以及其高支鏈淀粉或高直鏈淀粉品種。如本文所使用，術(shù)語"高支鏈淀粉"意指以重量計含有至少約90%、尤其至少約95%、更尤其至少約98%的支鏈淀粉的淀粉。如本文所使用，術(shù)語"高直鏈淀粉"意圖包括這樣的淀粉，其對于小麥或水稻面粉來說含有至少大約27%的直鏈淀粉，而對于其它來源來說含有至少大約50%的直鏈淀粉，特別地至少大約70%，更特別地至少大約80%，以上均按重量計。0036在一個實(shí)施方案中，所使用的碳水化合物來源提取自植物來源，其具有直鏈淀粉補(bǔ)充劑(extender)基因型，這種材料的淀粉包含以重量計小于大約10%的支鏈淀粉。這種材料衍生自植物繁殖群體，尤其玉米，其是種質(zhì)選擇的遺傳合成物(geneticcomposite),包含以重量計至少75%的正常直鏈淀粉，在一種實(shí)施方式中，至少80%的正常直鏈淀粉，這是采用丁醇分級/排阻色譜技術(shù)測得的。此淀粉進(jìn)一步包括以重量計小于大約10%,在一個實(shí)施方案中小于5%的支鏈淀粉，以及另外的大約8%至25%的低分子量直鏈淀粉。此淀粉提取自含淀粉植物的谷粒，所述植物具有隱性的直鏈淀粉補(bǔ)充劑基因型(recessiveamyloseextendergenotype),連同許多的直鏈淀粉補(bǔ)充齊廿改性劑基因(amyloseextendermodifiergenes)。這種淀粉和制備方法在美國第5,300,145號專利中有所描述，其在此引用以作參考。0037在一個實(shí)施方案中，所使用的碳水化合物來源是高直鏈淀粉的抗性淀粉產(chǎn)品。在一個實(shí)施方案中，抗性淀粉產(chǎn)品是經(jīng)過化學(xué)、物理和/或酶處理或改性的淀粉。0038在另一個實(shí)施方案中，所使用的抗性淀粉產(chǎn)品是一種含有RS2型抗性淀粉的產(chǎn)品，包括那些經(jīng)過濕熱處理修飾以增加產(chǎn)品中的抗性淀粉重量百分比的淀粉產(chǎn)品，那些通常在高直鏈淀粉碳水化合物材料中發(fā)現(xiàn)的淀粉產(chǎn)品和/或那些在美國第5,593,503和5,902,410號專利中描述的淀粉產(chǎn)品。在另外一個實(shí)施方案中，所使用的碳水化合物來源是含有RS3型抗性淀粉的抗性淀粉產(chǎn)品，包括那些在美國第5，281，276和5，409，542號專利中描述的淀粉產(chǎn)品。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所使用的碳水化合物來源是含有RS4型抗性淀粉的抗性淀粉產(chǎn)品，包括經(jīng)過化學(xué)改性的淀粉，所述改性選自氧化、交聯(lián)、醚化、酯化、酸化、糊精化和其混合，以及那些在美國第5,855,946號專利中描述的淀粉產(chǎn)品。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，抗性淀粉對酶的敏感程度是通過改變淀粉的構(gòu)象或結(jié)構(gòu)來改變的，例如通過酸或酶的稀釋作用(thinning)和雙官能團(tuán)試劑的交聯(lián)作用。在另一個實(shí)施方案中，高直鏈淀粉抗性淀粉的淀粉分解被改性，從而提供了淀粉顆粒，其特征在于能夠從顆粒的表面延伸至內(nèi)部的紋孔(pits)或侵蝕(erosions)。這些紋孔允許酶進(jìn)入到被溶解的淀粉顆粒的酶更敏感核心。含有低或正常直鏈淀粉的淀粉也能提供RS來源，尤其是如果它們以其天然形式被消費(fèi)或者如果它們已經(jīng)通過某些方式(例如物理的、熱水的、酶的、酸的、化學(xué)的，等等)被改性。0039在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所使用的碳水化合物來源是寡糖，并且在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，碳水化合物來源是低聚果糖。適合于本發(fā)明的低聚果糖可以包括任何可用于消費(fèi)的低聚果糖。目前可得到的商業(yè)上的低聚果糖包括但不限于果糖-(fructo-)、半乳糖(galacto)、麥芽糖-(malto-)、異麥芽糖-(isomalto-)、龍膽-(gentio-)、木糖-(xylo-)、palatinose-、大豆-(soybean-)(包括棉子糖和水蘇糖)、殼多糖-(chito-)、瓊月旨-(agaro陽)、新瓊月旨-(neoagaro陽)、a誦葡糖-、P匿葡糖-、cyclo陽inulo-、糖基蔗糖(glycosylsucrose)、乳果糖(lactulose)、乳蔗糖(lactosucrose)和木蔗糖(xylsucrose)。然而，將被本領(lǐng)域的技術(shù)人員了解的是，其它的寡糖也將適合包含在本發(fā)明的組合物里。0040蛋白質(zhì)來源可以是任何抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品，包括那些單細(xì)胞或多細(xì)胞動物或植物來源?？剐缘鞍踪|(zhì)產(chǎn)品包括但不限于來源于肉、魚、玉米、水稻、小麥、燕麥、粟、豌豆、花生、大豆、西米、木薯、竹芋、芋頭和豆的蛋白質(zhì)。在一個實(shí)施方案中，抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品來源于植物。在另一個實(shí)施方案中，蛋白質(zhì)來源是合成的，包括寡蛋氨酸。在另一個實(shí)施方案中，抗性淀粉產(chǎn)品來源于谷類來源，在另外一個實(shí)施方案中，來源于馬鈴薯。蛋白質(zhì)來源也可以是面粉、提取物或分離物的形式。0041在本發(fā)明的一個方面，益生微生物是雙歧桿菌，碳水化合物來源是高直鏈淀粉玉米(maize)抗性淀粉，抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品是分離物形式的馬鈴薯蛋白質(zhì)。0042組合物中的每個成分可以以任何比例存在。在一個實(shí)施方案中，在每10克組合物中含有大約1(^-1(^CFU益生微生物，在一個實(shí)施方案中，在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有大約1(^-10UCFU益生微生物，在另一個實(shí)施方案中，在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有大約108-101QCFU益生微生物。在一個實(shí)施方案中，在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有大約0.5g-大約9.5g的碳水化合物來源，在一個實(shí)施方案中，在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有大約lg-大約8g的碳水化合物來源，在另一個實(shí)施方案中，在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有大約5g-大約7g的碳水化合物來源。在一個實(shí)施方案中，在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有大約0.5g-大約9.5g的抗性蛋白質(zhì)，在一個實(shí)施方案中，在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有大約lg-大約6g的抗性蛋白質(zhì)，在另一個實(shí)施方案中，在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有大約2g-大約4g的抗性蛋白質(zhì)。0043所述組合物可以被包括人類在內(nèi)的哺乳動物攝取，以促進(jìn)胃腸健康，在一個實(shí)施方案中，促進(jìn)大腸健康，在另一個實(shí)施方案中，促進(jìn)遠(yuǎn)端腸的健康。大腸健康得益于下面的一個或多個方面增加排泄物的重量、降低排泄物的pH、增加碳水化合物的發(fā)酵和減少蛋白質(zhì)的發(fā)酵。排泄物的pH降低是由于增加了短鏈脂肪酸的含量，尤其是醋酸鹽和丁酸鹽，以及降低了氨含量。碳水化合物發(fā)酵勝于蛋白質(zhì)發(fā)酵，因?yàn)樘妓衔锇l(fā)酵的副產(chǎn)品主要是有益的，而蛋白質(zhì)發(fā)酵的副產(chǎn)品則不是。所述組合物的攝取也導(dǎo)致最高的丁酸鹽/氨比率以及最高的排泄物重/甲酚比率。所述組合物可被用于預(yù)防和/或治療胃腸癌、肝性腦病、前列腺癌、便秘、腹瀉、炎性腸病、腸激躁病(irritableboweldisease)、腸易激綜合癥(irritablebowelsyndrome)、腸憩室病(diverticulardisease)、痔瘡、骨質(zhì)疏松癥、骨折、胰島素抵抗和胰島素敏感。所述組合物也可被用來增加骨骼中礦物質(zhì)密度，和控制胰島素、葡萄糖和礦物質(zhì)的生物利用度/平衡。0044本發(fā)明的組合物可被應(yīng)用于任何食物或飲料產(chǎn)品(在下文中統(tǒng)稱為食物)。在一個實(shí)施方案中，所述食物是人工培養(yǎng)的奶產(chǎn)品，例如酸奶酪、干酪和酸奶油。所述組合物可以以從器官感覺和生理學(xué)的角度看均為消費(fèi)者可接受的任何數(shù)量添加，并且以食物的重量計，在一個實(shí)施方案中以大約0.1%至50%的量使用，在另一實(shí)施方案中以大約1%至25%的量使用。0045所述組合物也可用于藥物產(chǎn)品或營養(yǎng)產(chǎn)品，包括但不限于合生素組合物、糖尿病食物和添加劑、療效食物、用于控制血糖響應(yīng)和血糖指數(shù)的食物，及藥片和其他藥物劑型。0046所述組合物也可用于牲畜或?qū)櫸锏脑~料。實(shí)施方式0047下面的實(shí)施方式被提出以進(jìn)一步闡明和解釋本發(fā)明，而且在任何情況下不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是一種限制。1.一種組合物，包括益生微生物、碳水化合物來源和抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品，其中所述碳水化合物來源選自高直鏈淀粉碳水化合物、高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品和低聚果糖。2.—種兩組分組合物，包括含有選自益生微生物、碳水化合物來源和抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品中的兩種成分的第一組分，和含有剩余成分的第二組分。3.—種三組分組合物，包括含有益生微生物的第一組分、含有碳水化合物來源的第二組分和含有抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品的第三組分。4.實(shí)施方式1中的組合物，其中所述益生微生物選自雙歧桿菌(Bifiobacterium)、擬桿菌(Bacteroids)、梭菌(Clostridium)、真細(xì)菌(Eubacteria)、梭桿菌(Fusobacterium)、丙酸桿菌(Propionibacterium)、鏈球菌(Streptococcus)、腸球菌(Enterococcus)、孚L球菌(Lactococcus)、葡萄球菌(Staphylococcus)、消化鏈球菌(Peptostreptococcus)、乳桿菌(Lactobacillus)禾口酵母菌(Saccharomyces)。5.實(shí)施方式l中的組合物，其中所述益生微生物是雙歧桿菌。6.實(shí)施方式1中的組合物，其中所述抗性淀粉產(chǎn)品是高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品。7.實(shí)施方式6中的組合物，其中所述高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品是經(jīng)過化學(xué)的、物理的和/或酶的處理或改性的淀粉。8.實(shí)施方式7中的組合物，其中所述抗性淀粉產(chǎn)品是經(jīng)過化學(xué)改性的淀粉，其中所述化學(xué)作用選自氧化、交聯(lián)、醚化、酯化、酸化、糊精化和其混合作用。9.實(shí)施方式7中的組合物，其中所述抗性淀粉產(chǎn)品是已經(jīng)經(jīng)過濕熱處理的物理改性淀粉，以增加所述產(chǎn)品中的抗性淀粉重量百分比。10.實(shí)施方式1中的組合物，其中所述抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品是馬鈴薯蛋白質(zhì)。11.實(shí)施方式1中的組合物，其中所述益生微生物是雙歧桿菌，所述碳水化合物來源是高直鏈淀粉抗性淀粉，所述抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品是馬鈴薯蛋白質(zhì)。12.實(shí)施方式1或11中的組合物，其中在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有104-1012CFU的益生微生物，含有大約0.5g-9.5g的碳水化合物來源，含有大約0.5g-9.5g的抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品。13.實(shí)施方式1或11中的組合物，其中在每10克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有108-101QCFU的益生微生物，含有大約5g-7g的碳水化合物來源，含有大約2g-4g的抗性蛋白質(zhì)口廣叩o14.實(shí)施方式1或11中的組合物，其中所述組合物選自食品、飲料產(chǎn)品、藥物產(chǎn)品和營養(yǎng)品。15.—種促進(jìn)胃腸健康的方法，包括攝取實(shí)施方式1或11中的組合物。16.—種促進(jìn)遠(yuǎn)端大腸健康的方法，包括攝取實(shí)施方式1或11中的組合物。17.實(shí)施方式16中的方法，其中排泄物重量被增加，排泄物的pH被降低，碳水化合物的發(fā)酵被增加，和/或蛋白質(zhì)的發(fā)酵被減少。18.—種增加在胃腸道內(nèi)產(chǎn)生的短鏈脂肪酸數(shù)量的方法，包括攝取實(shí)施方式l或ll中的組合物。19.一種增加在胃腸道內(nèi)產(chǎn)生的選自醋酸鹽、丙酸鹽和丁酸鹽的短鏈脂肪酸數(shù)量的方法，包括攝取實(shí)施方式1或11中的組合物。20.—種增加在胃腸道內(nèi)產(chǎn)生的丁酸鹽數(shù)量的方法，包括攝取實(shí)施方式1或11中的組合物。21.—種增加排泄物重量的方法，包括攝取實(shí)施方式1或11中的組合物。22.—種預(yù)防或治療選自胃腸癌、肝性腦病、前列腺癌、便秘、腹瀉、炎性腸病、腸激躁病、腸易激綜合癥、腸憩室病、痔瘡、骨質(zhì)疏松癥、骨折、胰島素抵抗和胰島素敏感的病癥的方法，包括攝取實(shí)施方式1或11中的組合物。23.—種增加骨礦物質(zhì)密度的方法，包括攝取實(shí)施方式1或11中的組合物。24.—種控制或平衡胰島素、葡萄糖和/或礦物質(zhì)的生物利用度的方法，包括攝取實(shí)施方式1或11中的組合物。實(shí)施例0048下面的實(shí)施例被提出以進(jìn)一步闡明和解釋本發(fā)明，而且在任何情況下不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是一種限制。除非另外注明，所有的份數(shù)和百分?jǐn)?shù)都是以重量計的，所有的溫度都是攝氏溫度rc)。0049下面的成分在整個實(shí)施例中被使用。1)來自高直鏈淀粉玉米的抗性淀粉產(chǎn)品，其中抗性淀粉的含量為65%，這是基本成分(從NationalStarchandChemicalCompany,USA購買)。2)從馬鈴薯分離出的抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品，其中抗性蛋白質(zhì)的含量為16%(從日本Hokuren公司購買)；將pH調(diào)整到5.0-5.5之后通過蒸氣凝結(jié)的方式從馬鈴薯汁中制備。3)乳酸雙歧桿菌(^/^oZac/en'wm/ac似)(LAFTIB94)，1010CFU/g(從澳大利亞DSMSpecialties購買)。0050下面的測試步驟在整個實(shí)施例中被使用。A.模擬消化(SimulatedDigestion)-(根據(jù)Englystetal.，EuropeanJournalofClinicalNutrition,1992,46,S33-S50進(jìn)行改進(jìn))-食物樣品像被咀嚼一樣被磨碎或切碎。粉末狀淀粉樣品被篩選出250微米或更小的顆粒大小。稱出500-600mg±0.1mg的樣品并將其加入樣品管。在每個管內(nèi)加入10ml的胃蛋白酶(0.5%)、瓜爾膠(guargum)(0.5%)和鹽酸(0.05M)溶液。0051制備空白和葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)管。空白為20ml的含0.25M醋酸鈉和0.02%氯化鈣的緩沖液。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液是將10ml醋酸鈉緩沖液(上面描述的)和10ml的50mg/ml的葡萄糖溶液混合制得的。標(biāo)準(zhǔn)液按一式兩份制備。0052酶混合物是通過將18g的豬胰酶(pancreatin)(SigmaP-7545)加入到120ml去離子水中，混合均勻，然后在3000Xg下離心10分鐘而制成。收集上清液，加入48mg的干轉(zhuǎn)化酶(invertase)(Sigma1-4504)和0.5ml的AMGE(NovoNordisk)。0053樣品管在37。C預(yù)溫育30分鐘，然后從水浴中取出，加入10ml的醋酸鈉緩沖液和玻璃球/彈球(為了在搖動過程中幫助樣品的物理分解)。00545ml酶混合物加入到樣品、空白和標(biāo)準(zhǔn)管中。試管在37。C的水浴中以大約180次/min的速度水平搖動。"零"時刻代表酶混合物第一次加入到第一個試管中。0055120分鐘后，從溫育樣品中取出0.5ml等份試樣，并將其放到另一個含20ml66。/。甲醇的管中(用以終止反應(yīng))。l小時后，等份試樣在3000Xg下離心IO分鐘。0056試管中葡萄糖的濃度是采用葡萄糖氧化酶/過氧化酶法測定的(MegazymeG/wco"^s^;;尸racet/w"eGLC9/96)。這是一種比色方法。0057淀粉的消化程度是通過計算相對于葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的葡萄糖濃度來確定的，其中使用了轉(zhuǎn)換因子(conversionfactor)0.9?？剐缘矸鄣臄?shù)量是從100%中減去在120分鐘時消化的淀粉的百分?jǐn)?shù)(基于干重計算)確定的。0058每批樣品分析都包括未煮過的玉米淀粉的參照樣品。玉米淀粉的被承認(rèn)的消化百分比數(shù)值是<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>'Meogel淀粉，從NationalStarchandChemicalCompany,Bridgewater,NJ,USA購買的玉米淀粉。因而，玉米淀粉將含有大約20%的抗性淀粉。l通過電位滴定法測定直鏈淀粉含量00590.5g淀粉(l.Og磨碎的谷類)樣品在10ml濃氯化鈣溶液(以重量計大約30%)中加熱到95。C持續(xù)30分鐘。該樣品被冷卻至室溫，用5ml2.5。/。的醋酸雙氧鈾溶液稀釋，充分混合，在2000rpm下離心5分鐘。然后過濾樣品得到清液。淀粉濃度通過旋光測量法用1cm的旋光管進(jìn)行測定。然后將樣品的等份試樣(通常5ml)直接用標(biāo)準(zhǔn)化的0.01N碘溶液滴定，同時用Pt電極和KC1參比電極記錄電位。到達(dá)拐點(diǎn)所需要的碘的數(shù)量被直接測作結(jié)合碘。通過假定1.0g直鏈淀粉將結(jié)合200mg的碘，來計算直鏈淀粉的量。^蛋白質(zhì)可消化性的測定0060蛋白質(zhì)的可消化性是用Wistar大鼠體內(nèi)測定的，用酪蛋白作為參比蛋白質(zhì)。大鼠被分別關(guān)養(yǎng)在金屬網(wǎng)籠里，用三種飲食中的一種——無蛋白質(zhì)飲食、含10%蛋白質(zhì)分離物的飲食和含10%酪蛋白的飲食，飼養(yǎng)10天。每天記錄食物的攝取量和體重，在實(shí)驗(yàn)期的最后三天收集糞便。測量飲食中氮的攝取量和糞便中的氮。0061抗性蛋白(％)=100—真正的消化蛋白質(zhì)(％)其中，真正的消化蛋白質(zhì)(％)=[攝取的氮一(排泄糞便中的氮一在無蛋白飲食情況下排泄糞便中的氮)]/攝取的氮xioo實(shí)驗(yàn)飲食中的成分<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>注意AIN是標(biāo)準(zhǔn)的大鼠飲食，對于它，許多飲食操作被進(jìn)行，以進(jìn)行大鼠飼養(yǎng)研究，并且是本領(lǐng)域熟知的。^大鼠研究.益生菌/非益生菌組合的效用0062雄性Sprague-Dawley大鼠被關(guān)養(yǎng)在底部為金屬絲網(wǎng)的塑料籠里。每組12只大鼠，用8種不同飲食中的一種飼養(yǎng)4周的時間。所述飲食是改良的AIN-76飲食(見下表)，由無纖維飲食組成，或由加入了三種成分的相同飲食組成，所述三種成分或者單個地加入，作為兩成分組合，或者作為三成分組合加入。蛋白質(zhì)分離物替代酪蛋白(占飲食中的19%),高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品取代常規(guī)的玉米蛋白(占飲食中的10%)，并加入占飲食的1%的益生菌。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>0063在實(shí)驗(yàn)的最后階段，對每只大鼠收集其新鮮糞便3天。在最后一天，將每只大鼠處死，并將大腸取出，切割，清洗以進(jìn)行后續(xù)的分析。大腸內(nèi)含物也被取出以進(jìn)行后續(xù)的分析。0064被測量的參數(shù)包括(1)糞便——重量、pH、包括總短鏈脂肪酸、醋酸鹽、丙酸鹽和丁酸鹽在內(nèi)的短鏈脂肪酸(SCFA)，和氨；和(2)尿——甲酚(見下表)。0065食用三成分組合物(飲食8)的飲食的大鼠，比食用無成分組合物、單成分組合物或兩成分組合物的大鼠，表現(xiàn)出更高的糞便重量和更低的糞便pH。另外，對于三成分組合來說，糞便丁酸鹽氨、糞便重量氨和糞便重量尿甲酚的比率是最高的。對于三成分組合來說，總短鏈脂肪酸以及醋酸鹽和丁酸鹽的濃度，是高的。整體上，飲食8(三成分組合)，比該組合的任何一部分，都對所測量的參數(shù)產(chǎn)生更大的影響。<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>權(quán)利要求1.一種組合物，包括益生微生物、碳水化合物來源和抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品，其中所述碳水化合物來源選自高直鏈淀粉碳水化合物、高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品和低聚果糖。2.—種兩組分組合物，包括含有選自益生微生物、碳水化合物來源和抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品中的兩種成分的第一組分，和含有剩余成分的第二組分。3.—種三組分組合物，包括含有益生微生物的第一組分、含有碳水化合物來源的第二組分和含有抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品的第三組分。4.權(quán)利要求1-3中的任一項的組合物，其中所述益生微生物選自雙歧桿菌(5辨o6ac/e〃'w附)、擬桿菌(5"cferaz'A)、梭菌(C/os/n'(i/M附)、真細(xì)菌CEw6a"en'a)、梭桿菌CFz^oZ^cterz'wm)、丙酸桿菌(尸ra//ow'6acten'ww)、鏈球菌(5Vreptococci/51)、月l/球菌(&7eracoccw力、乳球菌(Lactococ，)、葡萄球菌y/ococc—、消化鏈球菌(尸eptos^eptococc^)、乳桿菌(丄actoZac/〃i^)禾口酵母菌OSacc/zaramjKcas1)。5.權(quán)利要求4的組合物，其中所述益生微生物是雙歧桿菌。6.權(quán)利要求1-5中的任一項的組合物，其中所述抗性淀粉產(chǎn)品是高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品。7.權(quán)利要求6的組合物，其中所述高直鏈淀粉抗性淀粉產(chǎn)品是經(jīng)過化學(xué)的、物理的和/或酶的處理或改性的淀粉。8.權(quán)利要求7的組合物，其中所述抗性淀粉產(chǎn)品是經(jīng)過化學(xué)改性的淀粉，其中所述化學(xué)作用選自氧化、交聯(lián)、醚化、酯化、酸化、糊精化和其混合作用。9.權(quán)利要求7的組合物，其中所述抗性淀粉產(chǎn)品是已經(jīng)經(jīng)過濕熱處理被物理改性的淀粉，以增加所述產(chǎn)品中的抗性淀粉重量百分比。10.權(quán)利要求l-9中的任一項的組合物，其中所述抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品是馬鈴薯蛋白質(zhì)。11.權(quán)利要求1-10中的任一項的組合物，其中所述益生微生物是雙歧桿菌，所述碳水化合物來源是高直鏈淀粉抗性淀粉，所述抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品是馬鈴薯蛋白質(zhì)。12.權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物，其中在每IO克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有104-1012CFU的益生微生物，含有大約0.5g-9.5g的碳水化合物來源，含有大約0.5g-9.5g的抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品。13.權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物，其中在每IO克益生微生物/碳水化合物來源/抗性蛋白質(zhì)組合物中含有108-101QCFU的益生微生物，含有大約5g-7g的碳水化合物來源，含有大約2g-4g的抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品。14.權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物，其中所述組合物選自食品、飲料產(chǎn)品、藥物產(chǎn)品和營養(yǎng)品。15.—種促進(jìn)胃腸健康的方法，包括攝取權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物。16.—種促進(jìn)遠(yuǎn)端大腸健康的方法，包括攝取權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物。17.權(quán)利要求16的方法，其中排泄物重量被增加，排泄物的pH被降低，碳水化合物的發(fā)酵被增加，和/或蛋白質(zhì)的發(fā)酵被減少。18.—種增加在胃腸道內(nèi)產(chǎn)生的短鏈脂肪酸數(shù)量的方法，包括攝取權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物。19.一種增加在胃腸道內(nèi)產(chǎn)生的選自醋酸鹽、丙酸鹽和丁酸鹽的短鏈脂肪酸數(shù)量的方法，包括攝取權(quán)利要求l-ll中的任一項的組合物。20.—種增加在胃腸道內(nèi)產(chǎn)生的丁酸鹽數(shù)量的方法，包括攝取權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物。21.—種增加排泄物重量的方法，包括攝取權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物。22.—種預(yù)防或治療選自胃腸癌、肝性腦病、前列腺癌、便秘、腹瀉、炎性腸病、腸激躁病、腸易激綜合癥、腸憩室病、痔瘡、骨質(zhì)疏松癥、骨折、胰島素抵抗和胰島素敏感的病癥的方法，包括攝取權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物。23.—種增加骨礦物質(zhì)密度的方法，包括攝取權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物。24.—種控制或平衡胰島素、葡萄糖和/或礦物質(zhì)的生物利用度的方法，包括攝取權(quán)利要求1-11中的任一項的組合物。全文摘要本發(fā)明涉及促進(jìn)胃腸健康的方法，這是通過攝取組合物來實(shí)現(xiàn)的，所述組合物包括一種或多種益生微生物、一種或多種碳水化合物來源和一種或多種抗性蛋白質(zhì)產(chǎn)品。大腸健康得益于下面的一個或多個方面增加排泄物的重量、降低排泄物的pH、增加碳水化合物的發(fā)酵和改善蛋白質(zhì)的發(fā)酵。文檔編號C12N1/00GK101148642SQ200710154060公開日2008年3月26日申請日期2007年9月13日優(yōu)先權(quán)日2006年9月19日發(fā)明者A·M·比克特,G·P·楊,I·L·布朗,R·L·劉申請人:國家淀粉及化學(xué)投資控股公司