專利名稱：用以收集血液,優(yōu)選是外周血,以生產(chǎn)干細(xì)胞的試劑盒的制作方法
用以收集血液，優(yōu)選是外周血，以生產(chǎn)干細(xì)胞的試劑盒
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是有關(guān)于一種用以收集血液，優(yōu)選是外周型血液，以生產(chǎn)成體干細(xì)胞的 試齊U盒。
背景技術(shù)：
近年來(lái)，由于在至目前為止被視為不治之癥的病癥中的治療獲得的成功，使干 細(xì)胞(StemcellS)在治療上的應(yīng)用已受廣泛認(rèn)可。然而，獲取干細(xì)胞的已知方法耗時(shí)、費(fèi)力且昂貴。多能干細(xì)胞(pluripotent stem cells，PSC)是一可獲取的來(lái)源，不僅用于研究，而 且亦可用于創(chuàng)造藥物及用于移植(Wagers A.J.等人，2002; Griffith L.G.等人，2002)。現(xiàn)有胚胎及成體干細(xì)胞前者衍生自8天大的囊胚(blastocysts)，同時(shí)成體干細(xì) 胞則可主要獲取自骨髓、脂肪或肌肉組織、外周血(peripheral blood)及臍帶。干細(xì)胞的定義是可不斷的發(fā)展，在此時(shí)，并沒(méi)有普遍的共識(shí)或標(biāo)準(zhǔn)的方法能用 以分離它們或辨識(shí)它們。對(duì)所有這類細(xì)胞而言，胚胎(embryonic，ES)，及成體、造血 Chaemopoietic，HSC)及間質(zhì)(mesenchymal，MSC)細(xì)胞兩者(Kuwana Μ.等人，2003)， 各種基因標(biāo)記(market)已被辨識(shí)出來(lái)，其中的某些可共用于許多細(xì)胞類型(Condomines M.等人，2006 ； Kang W.J.等人，2006 ； Zhao Y.等人，2003 ； Rabinovitch M.等人， 1976)。此時(shí)，研究更被定向至由胚胎組織、胎兒及臍帶分離出的干細(xì)胞的應(yīng)用上，但 其造成合法性及道德上的問(wèn)題。最重要的是，從今天起，這些干細(xì)胞的應(yīng)用具有各種反向缺陷，例如感染風(fēng) 險(xiǎn)、移植時(shí)的被排斥風(fēng)險(xiǎn)，以及在某些哺乳動(dòng)物(例如馬)中發(fā)展為畸胎瘤(teratomas)。為克服這些問(wèn)題，于“在活體內(nèi)(in vivo)”的治療中，已知的為使用自體干細(xì) 胞，優(yōu)選分離自骨髓、脂肪組織或外周血。最初來(lái)自成體干細(xì)胞，通過(guò)透導(dǎo)分化的特異 性因子在所需的細(xì)胞株內(nèi)作用可使干細(xì)胞“在試管內(nèi)(in vitro)或在活體外(ex vivo)”進(jìn) 行分化步驟，及獲得的分化后細(xì)胞株隨后可進(jìn)行移植步驟。在這些方法中，由于分化細(xì) 胞被重新引入相關(guān)生物體內(nèi)卻不被辨識(shí)為自身細(xì)胞，而具有排斥現(xiàn)象的缺點(diǎn)，其起因于 它們?cè)谠谠嚬軆?nèi)誘導(dǎo)分化的步驟中失去了自身辨識(shí)的因子。在人體中，由外周血取出干細(xì)胞必需通過(guò)稱為血液分離術(shù)(aphaeresis)或自細(xì)胞 單采術(shù)(leucoaphaeresis)的工藝來(lái)確保其純度。細(xì)胞由由血液中萃取、收集，接著在化 學(xué)治療或放射線治療后立刻接種(inoculated)至病患體內(nèi)。在血液分離術(shù)中，其持續(xù)6至8小時(shí)，血液由手臂靜脈或由頸部或胸部的靜脈中 取出，并通過(guò)移除干細(xì)胞的機(jī)器。血液因此被純化，并返回病患體內(nèi)，然而收集到的細(xì) 胞則通過(guò)液態(tài)氮來(lái)冷凍保存(Condomines M.等人，2006 ； Kang WJ.等人，2006)。此技 術(shù)，除了痛苦外，亦對(duì)病患造成極大壓力。最重要的是，此技術(shù)未對(duì)循環(huán)中的干細(xì)胞提 供真實(shí)的區(qū)別性及/或純化。已知的主要純化技術(shù)為
-使用生長(zhǎng)因子或血小板衍生物(TGF-B、VEGF)，但萃取這些因子的經(jīng)濟(jì)成本 過(guò)于昂貴(Hou M.等人，2006)。_分離出取自骨髓的干細(xì)胞，其可以純化及因而純15%含在萃取材料內(nèi)的細(xì)胞 可用于治療；_由脂肪組織分離出干細(xì)胞，其需要來(lái)自捐贈(zèng)者先前手術(shù)切除的大量組織，且不 容許靜脈注射；-IGF-I (類胰島素生長(zhǎng)因子 1)，亦稱為 Tendotrophin (Fiedler J.等人，2006)；-UBM(膀胱基質(zhì))此為豬只的衍生物，含有細(xì)胞激素(但非核細(xì)胞)，其誘導(dǎo) 傷口的結(jié)疤愈合，但非損傷區(qū)域的再生(ZhangYS等人，2005)。另一已知方法由ZhaoY.等人揭露于"人類外周血單核細(xì)胞衍生子集做為多能干 細(xì)胞(A human peripheral blood monocyte-derived subset acts as pluripotent stem cells)“文獻(xiàn)
及W02004/043990的專利中。此是一種制備衍生自單核細(xì)胞的干細(xì)胞的方法，其包含的 步驟是由外周血分離出單核細(xì)胞；使其接觸有絲分裂成分，接著在適合細(xì)胞增殖的條 件下作用于來(lái)自外周血的單核細(xì)胞的培養(yǎng)物。此方法，最初需要一分離單核細(xì)胞的步驟，及接著需要一在培養(yǎng)工具內(nèi)的擴(kuò)增 步驟，其極為費(fèi)時(shí)，約15至20天，以便獲取有效數(shù)量的干細(xì)胞，且無(wú)法獲取多能干細(xì) 胞，也就是，無(wú)特異性且適合直接接種并在短時(shí)間后即進(jìn)入病患體內(nèi)者。又，在由單核細(xì)胞制備干細(xì)胞的架構(gòu)中，已見(jiàn)于文獻(xiàn)W02005/046570A、 W02007/131200A及W003/083092A。然而，由于它們必需實(shí)施血液的初步純化以單純 分離細(xì)胞部分(亦即單核細(xì)胞)及隨后實(shí)施擴(kuò)增以獲取所需的干細(xì)胞，因此這些文獻(xiàn)所述 的方法耗費(fèi)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間(即15至40天的等級(jí))，以獲取可接受的干細(xì)胞數(shù)量。按上文所述，其顯然需要由易于取得的來(lái)源使成體干細(xì)胞的擴(kuò)增方法，或分離 及純化等達(dá)到完備，來(lái)源特別是血液，優(yōu)選為外周血，其亦可獲得適用于藥物治療的干 細(xì)胞。另亦顯然需要在可能的最短時(shí)間內(nèi)由血液開(kāi)始生產(chǎn)干細(xì)胞，血液優(yōu)選是外周 的，因而能及時(shí)干預(yù)治療病患。本發(fā)明的目的因此是達(dá)成一種試劑盒(kit)，用以收集血液，優(yōu)選是外周血，以 生產(chǎn)多能干細(xì)胞，因而可以快速的開(kāi)始生產(chǎn)多能干細(xì)胞。申請(qǐng)人:已設(shè)計(jì)、試驗(yàn)及實(shí)施本發(fā)明，以克服先前技術(shù)情況的缺點(diǎn)，進(jìn)而獲得這 些及其他目的與優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提出及其特征在于獨(dú)立權(quán)利要求中，同時(shí)從屬權(quán)利要求說(shuō)明本發(fā)明其他 特征或主要發(fā)明概念的變化。在試管內(nèi)成長(zhǎng)及純化血液的方法，血液優(yōu)選是外周血，其是由本作者所研發(fā)并 揭示于國(guó)際專利申請(qǐng)案PCT/EP2007/059531，其亦在本申請(qǐng)人名下，且整個(gè)納入此處以 供參考，其用以獲取成體多能干細(xì)胞并包含一第一步驟，具有二子步驟(a) —第一子步驟，用以在取得血液后，通過(guò)在8至15nM莫耳濃度之間(優(yōu)選 是IOnM)的MCSF(巨噬細(xì)胞集落刺激因子)的試管內(nèi)處理，來(lái)成長(zhǎng)外周血干細(xì)胞。
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(b) —第二子步驟，優(yōu)選通過(guò)Ficoll梯度法的分級(jí)分離來(lái)進(jìn)行純化。根據(jù)實(shí)施的試管內(nèi)處理的條件，所述第一成長(zhǎng)子步驟可能具有易變的時(shí)間，利 用干細(xì)胞標(biāo)記CD90、CD90/34、CD34及CD117鑒識(shí)，作者實(shí)驗(yàn)證實(shí)利用MCSF的試管 內(nèi)處理的時(shí)間介于24至96小時(shí)之間，優(yōu)選是介于48至72小時(shí)之間，可以達(dá)成長(zhǎng)的穩(wěn)定 性。此條件被視為是最佳條件。第二子步驟的純化基本上用以破壞紅血球。第二步驟，則使用由步驟(b)取得的半成品，并提供(C)通過(guò)在35至55nM莫 耳濃度之間(優(yōu)選是50nM，最優(yōu)選是45nM)的MCSF的試管內(nèi)處理，以成長(zhǎng)由步驟(b) 純化的多能干細(xì)胞。利用MCSF的濃度，細(xì)胞保持在成體多能干細(xì)胞的表現(xiàn)型(phenotype)。第二步驟可能具有在24至96小時(shí)之間變化的時(shí)間，優(yōu)選是在48至72小時(shí)之 間。已觀察到，相反的是，使用濃度大于55nM (例如70nM)的MCSF已24小時(shí)后，
細(xì)胞仍未保持在多能干細(xì)胞的表現(xiàn)型。特別是，步驟(a)在取出血液后的分離及利用MCSF在懸浮液內(nèi)的先前成長(zhǎng)可以 增加干細(xì)胞的百分比。隨后的步驟(b)則可獲取成體多能干細(xì)胞，其一旦注射到病患， 將在活體內(nèi)直接分化，而不會(huì)造成排斥或感染現(xiàn)象。此生產(chǎn)法的效果可通過(guò)干細(xì)胞標(biāo)記CD90、CD90/34、CD34及CD117的存在來(lái) 證實(shí)，以及通過(guò)實(shí)際上干細(xì)胞未在接下來(lái)的分裂或擴(kuò)增時(shí)失去自身辨識(shí)的因子來(lái)證實(shí)。 此類干細(xì)胞在注射到病患體內(nèi)后不會(huì)有附加效應(yīng)，例如排斥、感染、畸胎瘤發(fā)育等現(xiàn) 象，且能“在活體內(nèi)”分化并表現(xiàn)為多能干細(xì)胞。作者觀察到一旦根據(jù)欲治療的活生物體的病理需求由局部或靜脈注射“在活體 內(nèi)”(及非“在試管內(nèi)”，如同在先前技術(shù)情況的已知方法中通過(guò)適當(dāng)成長(zhǎng)因子及/或化 學(xué)刺激物(Gulati R.等人，2003; Katz R.L.等人，2002; OkazakiT.等人，2005))獲得巨 噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞及肝細(xì)胞的所有形態(tài)及化學(xué)特性， 則細(xì)胞即可通過(guò)分裂或擴(kuò)增而成長(zhǎng)。此方法相較目前為止用來(lái)收集干細(xì)胞的其他方法具 有更少侵入性、無(wú)痛(不同于血液分離術(shù))及具經(jīng)濟(jì)效益。最后，也可能輕易獲取這些細(xì)胞以及接著能將它們長(zhǎng)時(shí)間保存(例如在液態(tài)氮 內(nèi)冷凍)，因而使根據(jù)本發(fā)明方法獲取的細(xì)胞適用于自體移植及適用于許多病癥的治療 (不同類型的損傷、代謝疾病、急性及慢性神經(jīng)和發(fā)炎病癥)。根據(jù)本發(fā)明的一特征，根據(jù)上述方法的一種用以收集血液(優(yōu)選是外周血)以 生產(chǎn)多能干細(xì)胞的試劑盒，包含至少一第一容器，能容納取出的血液(例如由一試管取 出)，其含有一抗凝血?jiǎng)┘癕CSF物質(zhì)。通常，所述第一容器是由玻璃制成。利用本試劑盒，可以收集血液(優(yōu)選是外周血)，以利用上述方法快速開(kāi)始成長(zhǎng) 及生產(chǎn)干細(xì)胞，因此可使其生產(chǎn)更為快速。相較于先前技術(shù)情況通過(guò)直接在完整血液中操作，本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)因此是可 在極有限的時(shí)間內(nèi)(甚至僅48小時(shí))獲得足夠數(shù)量的多能干細(xì)胞。因此，根據(jù)本發(fā)明的 收集血液的試劑盒被建議做為一種直接由血液(優(yōu)選是外周血)獲取多能干細(xì)胞的快速有 效方案。
典型的，在本發(fā)明的試劑盒的試管中的MCSF濃度是在約2至20nM莫耳濃度之 間變化，優(yōu)選是在約8至IOnM莫耳濃度之間。通常，肝素(heparin)或乙二胺四乙酸(EDTA)用以做為抗凝血?jiǎng)??？鼓獎(jiǎng)┑拇嬖趯?duì)于避免血液開(kāi)始凝結(jié)而言是必需的，而MCSF則是負(fù)責(zé)干細(xì) 胞的成長(zhǎng)及擴(kuò)增的步驟。根據(jù)本發(fā)明的一變化實(shí)施例，試劑盒可包含一個(gè)或以上的容器，不同于第一容 器，例如一試管。后者優(yōu)選至少內(nèi)壁由一種材料制成，例如塑膠材料，例如為以紅外線 及/或伽瑪射線處理過(guò)的聚丙烯(PP)，其避免所述干細(xì)胞附著于壁面上且因而造成它們 的聚集，其是一種被認(rèn)為應(yīng)避免的條件。通常，對(duì)后者而言，其是一第二容器，以容納 所述獲取的干細(xì)胞并用于靜脈注射使用，以及是一第三容器，具不同尺寸，并用于局部 使用。在所述容器內(nèi)生產(chǎn)的干細(xì)胞可立即被使用，或它們可被保存在液態(tài)氮內(nèi)，因而 它們可在發(fā)生需求時(shí)隨后再被使用。根據(jù)另一變化例，所述數(shù)個(gè)容器，即一個(gè)用于取出血液并含有抗凝血?jiǎng)┘?MCSF的容器與那些用以保存的容器兩者，皆可利用序號(hào)、共同特征、順序或根據(jù)預(yù)定 標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)生者來(lái)加以辨識(shí)，以促使在制備干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)或運(yùn)送期間的辨識(shí)作業(yè)。為了單一性辨識(shí)，可以使用條碼及/或射頻識(shí)別技術(shù)(RFID)標(biāo)簽，可讀式或可 讀/寫式，以應(yīng)用于容器上，并配合使用相關(guān)光學(xué)或電磁讀取器。上述方法的第一成長(zhǎng)子步驟優(yōu)選是在血液被采樣后立即開(kāi)始，因而血液不會(huì)在 此時(shí)凝結(jié)。用語(yǔ)“在...后立即”，意指在取出血液及其凝結(jié)之間可能的最短時(shí)間，以在血 液取出后可能的最短時(shí)間內(nèi)避免血液凝結(jié)及開(kāi)始干細(xì)胞的擴(kuò)增。換句話說(shuō)，用語(yǔ)“在...后立即”意指的事實(shí)是干細(xì)胞的成長(zhǎng)是在血液由病患體 內(nèi)取出后就立即開(kāi)始了，考慮到，就本發(fā)明而言，需要在血液凝結(jié)前開(kāi)始擴(kuò)增步驟。事實(shí)上，剛由病患體內(nèi)取出的血液被置入具有抗凝血?jiǎng)┘癕CSF的試管中?？?凝血?jiǎng)┳柚鼓钠鹗迹鳰CSF的同時(shí)存在則可快速開(kāi)始擴(kuò)增步驟及確保將開(kāi)始治療 病患的時(shí)間最小化。此定義也包含在血液樣本(優(yōu)選是外周血)由病患體內(nèi)取出的情況下，抗凝 血?jiǎng)┍患尤耄宰柚故艿奖４娌襟E處理(其不會(huì)改變其生產(chǎn)干細(xì)胞的能力)后的血液的凝結(jié)。必要時(shí)，血液是由儲(chǔ)存位置取出，并進(jìn)行上述干細(xì)胞的擴(kuò)增步驟，亦即，加入 MCSF,以便極快速的獲取所需數(shù)量的干細(xì)胞。采樣及保存血液(優(yōu)選是外周血)的程序因此也在本發(fā)明的范疇內(nèi)，所述程序能 在合適的血液庫(kù)及隨后的應(yīng)用中生產(chǎn)干細(xì)胞，必要時(shí)，也可通過(guò)加入MCSF來(lái)生產(chǎn)多能 干細(xì)胞。通常，在由儲(chǔ)存位置取出血液后，其被置入已含有濃度在2至20nM之間(優(yōu)選 是在8至IOnM之間)的MCSF的試管中。此舉可以避免保存干細(xì)胞的復(fù)雜及昂貴程序，其例如可如上述般使用液態(tài)氮， 及替代僅使用現(xiàn)有保存血液技術(shù)。
具體實(shí)施方式請(qǐng)參照附

圖1所示，根據(jù)本發(fā)明的一種用以收集外周血以生產(chǎn)多能干細(xì)胞的的 試劑盒10，其包含一由玻璃制成的第一試管12，含有MCSF物質(zhì)14，及在此例中含有肝 素16。在所述試管11中的MCSF濃度是由約8nM至IOnM。所述試劑盒包含另二試管18及20，由塑膠材料制成，例如聚丙烯(PP)，其是以 紅外線及/或伽瑪射線處理過(guò)。一第二試管18用以保存取得的細(xì)胞以供靜脈注射使用，以及一第三試管20，可 供局部使用。重要的是所述試管12、18及20確保其內(nèi)含物的無(wú)菌條件。所有試管12、18及20皆設(shè)有一個(gè)別的瓶塞22、24，以將其密封。所述瓶塞22、24可為壓力、螺絲或其他。所述容器12的瓶塞22例如可為壓力式。各所述試管18及20的瓶塞24例如可為螺絲式。所述第二試管18的尺寸為高115mm (毫米)，直徑17mm，厚度0.3mm，容量 12mL(毫升)，而所述第三試管20的尺寸為高110mm，直徑30mm，厚度0.3mm，容 量 40mL。接著進(jìn)行本發(fā)明利用MCSF的擴(kuò)增，由外周血分離出的細(xì)胞在“在活體內(nèi)(in vivo)”做為多能干細(xì)胞(PCS)，并適用于解決數(shù)個(gè)月無(wú)法治愈的損傷或病癥，或僅可利 用典型方法及/或藥物緩慢治療等課題。材料及方法采樣各外周血樣本，約0.5至7毫升的血，由馬及狗的下肢取出，并立即置入含有適 量肝素及MCSF (IOnM)的試管中。其他的抗凝血?jiǎng)鏓DTA，可在任一情況中使用。此時(shí)，實(shí)施第一子步驟的在試管內(nèi)(in vitro)處理，其由于MCSF而具有干細(xì)胞 的分裂及預(yù)先成長(zhǎng)。純化血液樣本以1 5稀釋在磷酸鹽緩沖液(PBS，Phosphate Buffer Saline)內(nèi)，其內(nèi) 含有氯化銨NH4Cl (200mM)，以造成紅血球的細(xì)胞溶解，接著在10,OOOg下離心，以PBS 液清洗2次，并再于200g下離心。取得的有核細(xì)胞在37°C下培養(yǎng)7至12小時(shí)，優(yōu)選10 至12小時(shí)，并通過(guò)Ficoll梯度法的分級(jí)分離來(lái)進(jìn)行純化，接著利用RPMI培養(yǎng)液1640 (生 命科技公司，格蘭島，紐約)分離及清洗3次。一旦純化，細(xì)胞則在50ng/ml (納克/毫升)的45nM的MCSF存在下另培養(yǎng)24至 72小時(shí)，以獲取約95%具CD 90表現(xiàn)型(通過(guò)使用FACScan由貝克頓迪金森公司的流式 光度計(jì)進(jìn)行細(xì)胞螢光判讀分析來(lái)決定的)的細(xì)胞，接著加以擴(kuò)增，以獲取局部或10,OOOg 離心處理所需的細(xì)胞數(shù)量，并在具約90X103細(xì)胞/毫升的濃度來(lái)懸置在PBS液內(nèi)，以用 于靜脈注射治療。
免疫染餼法為了使細(xì)胞表現(xiàn)型態(tài)(cytophenotyping)，細(xì)胞先在PBS液內(nèi)清洗，接著以含4% 甲醛的PBS液在20°C下固定到一載玻片(slide)上約20分鐘。為了辨識(shí)細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，細(xì)胞可被0.5%的“Triton X-100”試劑在20°C下通 透5分鐘，接著以一級(jí)抗體(稀釋于含牛血清蛋白的PBS液中)培養(yǎng)1小時(shí)(以限斷 特定的抗原結(jié)合位)。在三次連續(xù)清洗后，載玻片接著以二級(jí)抗體(共軛結(jié)合有最適當(dāng) 的螢光染劑FITC或四甲基羅丹明B異硫氰酸(tetramethylrhodamine B isothiocyanate, TRITC)或Cy 5)培養(yǎng)45分鐘。所有二級(jí)抗體使用Jackson免疫研究公司提供的驢子做為宿主進(jìn)行發(fā)育。免疫細(xì)胞化學(xué)是在4°C下及飽和濕氣大氣下進(jìn)行。在三次清洗后，載玻片使用 "gelvatol_PBS"液來(lái)進(jìn)行固定。接著，通過(guò)螢光顯微鏡及使用內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)抗甘油三磷酸脫氫酶的直接免疫螢光染 色(Cortex Biochem公司生產(chǎn)的多克隆羊抗體，圣利昂多，加洲)來(lái)獲得螢光影像。做為負(fù)對(duì)照組及為了標(biāo)定螢光背景水平標(biāo)準(zhǔn)，以特殊抗體培養(yǎng)后的載玻片被用 以做為與相關(guān)樣本同種的型式。上述方法用以辨識(shí)所有標(biāo)記(CD90、CD90/34、CD34及CD117)，這些標(biāo)記報(bào)
告于下列表格。表格以MCSF(PSC)處理的細(xì)胞及由外周血分離出的小噬細(xì)胞的表征。
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權(quán)利要求
1.一種用以收集血液，優(yōu)選是外周血，以生產(chǎn)多能干細(xì)胞的試劑盒，其特征在于 其包含至少一第一容器(12)，能容納取出的血液，且其含有抗凝血?jiǎng)┘癕CSF(巨噬細(xì)胞 集落刺激因子)物質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于在所述第一容器(12)內(nèi)的MCSF的濃 度是包含在約2nM及約20nM之間。
3.如權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于在所述第一容器(12)內(nèi)的MCSF的濃 度是包含在約8nM及約IOnM之間。
4.如權(quán)利要求1、2或3所述的試劑盒，其特征在于所述抗凝血?jiǎng)楦嗡鼗蛞叶?四乙酸。
5.如上述任一權(quán)利要求所述的試劑盒，其特征在于其包含一封閉元件(22)，用于 所述第一容器(12)。
6.如上述任一權(quán)利要求所述的試劑盒，其特征在于其亦包含至少一第二容器(18、 20)，是至少內(nèi)壁由一種避免所述干細(xì)胞附著的材料所制成。
7.如權(quán)利要求6所述的試劑盒，其特征在于所述材料例如是以紅外線及/或伽瑪射 線處理過(guò)的聚丙烯(PP)。
8.如權(quán)利要求6或7所述的試劑盒，其特征在于其包含一封閉元件(24)，用于各 容器(18、20)。
全文摘要
一種用以收集血液，優(yōu)選是外周血，以生產(chǎn)多能干細(xì)胞的試劑盒(10)，包含至少一第一容器(12)，能容納取出的血液，且其含有抗凝血?jiǎng)┘癕CSF(巨噬細(xì)胞集落刺激因子)物質(zhì)。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK102015108SQ200980109851
公開(kāi)日2011年4月13日 申請(qǐng)日期2009年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月18日
發(fā)明者亞歷山德拉·甘巴庫(kù)爾塔, 馬科·波力提尼 申請(qǐng)人:銷售工程股份公司