專利名稱：免疫調(diào)節(jié)性寡糖的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療和/或預防免疫疾病的方法，所述方法包括給予寡糖。
背景技術(shù)：
免疫系統(tǒng)具有不同的與抗原反應(yīng)的可能方式。對于免疫反應(yīng)類型的決定性步驟是 不同T細胞亞群的刺激。所謂的Thl細胞主要產(chǎn)生刺激細胞免疫反應(yīng)的細胞因子(IFN- γ、 IL-12、IL-2)。相反，Th2細胞主要產(chǎn)生IL-4、IL-5和IL-10。這些細胞因子增強IgE介導 的變態(tài)反應(yīng)和炎癥，并認為其也參與嗜酸性粒細胞(即接受伊紅染色的白細胞)的募集、增 殖、分化、維持和存活，這能導致嗜酸性粒細胞增多。嗜酸性粒細胞增多是許多Th2介導的 疾病例如哮喘、變態(tài)反應(yīng)和特應(yīng)性皮炎的標志。Thl和Th2相關(guān)細胞因子起拮抗作用，在正 常生理情況下Thl/Th2反應(yīng)處于良好控制的平衡中。Thl和Th2反應(yīng)都不占優(yōu)勢。如果失 衡，Thl或Th2免疫反應(yīng)之一占主導則在一些病理狀態(tài)中起作用或者是造成這些病理狀態(tài) 的原因。過度的Thl免疫反應(yīng)最終可能導致自身免疫，個體自身物質(zhì)的分解，如胰島素依 賴型糖尿病、多發(fā)性硬化病、克隆氏病、尋常天皰瘡、自身免疫性血小板減少性紫癜、自身免 疫性溶血性貧血。過度的Th2反應(yīng)導致對不應(yīng)該導致任何免疫反應(yīng)的外來成分的極度敏感，例如變 態(tài)反應(yīng)及相關(guān)疾病如特應(yīng)性皮炎、哮喘、職業(yè)性哮喘、食物過敏(例如牛奶過敏、蘋果過敏、 花生和其它堅果過敏、羽扇豆過敏)、過敏性鼻炎(例如花粉過敏)、塵螨過敏和其它形式的 超敏反應(yīng)如全身性變態(tài)反應(yīng)和急性蕁麻疹。已發(fā)現(xiàn)在任何類型的應(yīng)激情況下均有Th2反應(yīng)增加和/或Thl反應(yīng)減少的相對 改變，因此其導致了向Th2反應(yīng)的偏移。這些相對改變例如在免疫衰老、癌癥患者、慢 性感染、運動過度、社會沖突或高工作負荷、接觸毒性成分或輻射和代謝性應(yīng)激導致的營 養(yǎng)不良、惡病質(zhì)或食欲缺乏引起的營養(yǎng)不良中觀察到。(Janeway (2001) Immunob iology 5th edition, Garlandpublishing ISBN 0-8153-3642-χ ;Roitt 等(2001)Immunology 6th edition, Harcourt publishing limited，ISBN-0-7234—31892)。雙歧(Bifidogenic)作用被認為是例如減少和/或預防細菌感染的原因。已知寡 糖能顯示雙歧作用。已描述酸性寡糖具有有利的作用。WO 02/42484描述了酯化果膠水解產(chǎn)物用于治 療感染和/或預防有害物質(zhì)與真核細胞的粘附。DE 4223613描述了通過厭氧發(fā)酵使用例如 果膠酶從果膠樣物質(zhì)中制備不飽和糖醛酸苷(uronide)的方法。該制備可用于重金屬中毒 的醫(yī)學治療。酸性和中性寡糖的組合物也已被描述。EP 1105002描述了包含反式半乳寡 糖、菊糖和半乳糖醛酸寡糖的益生元(prebiotic)組合物。US 6576251描述了用于預防與生物體粘附有關(guān)的癥狀例如流行性感冒的唾液酸寡糖(二唾液酸乳-N-四糖 (disialolacto-N-tetraose))和半乳寡糖的組合。WO 01/60378描述了用于防止病原體與 上皮表面粘附的不飽和果膠水解產(chǎn)物與中性寡糖的混合物。已知包含脂類、蛋白質(zhì)、糖類、維生素和選自含有半乳糖的二糖或多糖及其衍生 物、含有N-乙酰神經(jīng)氨酸的糖類及其衍生物中至少一種的嬰兒制劑(EP 1332759)。

發(fā)明內(nèi)容
至今，認為給予(酸性)寡糖通過刺激雙歧菌群和防止病原體與上皮組織的粘附 而提供有利的作用。本發(fā)明的發(fā)明人現(xiàn)已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，免疫系統(tǒng)功能的全身性標記物受給予(酸 性)寡糖的影響。該發(fā)現(xiàn)開辟了寡糖應(yīng)用的新領(lǐng)域，尤其是用于至多能通過免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié) 來治療的疾病。“調(diào)節(jié)(modulaion或modulaing)”是指特定的特性、質(zhì)量、活性、物質(zhì)或反應(yīng) 的增加或降低。換言之，令人驚奇地發(fā)現(xiàn)酸性寡糖和中性寡糖能夠刺激全身性免疫反應(yīng)。本發(fā)明的發(fā)明人還令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，不同的寡糖對免疫系統(tǒng)有不同的刺激作用。 已發(fā)現(xiàn)酸性寡糖的給予(相對地)刺激Thl反應(yīng)并降低Th2細胞因子的釋放(例如IL-10、 IL-4和IL-5)。還發(fā)現(xiàn)酸性寡糖和中性寡糖的組合給予協(xié)同刺激免疫系統(tǒng)，尤其是通過降 低Th2反應(yīng)和增加Thl反應(yīng)來協(xié)同刺激免疫系統(tǒng)。在本發(fā)明的另一方面，發(fā)現(xiàn)寡糖可有利地用于恢復Thl/Th2反應(yīng)的失衡，并用于 治療和預防與Thl/Th2失衡相關(guān)的病癥。尤其是，令人驚奇地發(fā)現(xiàn)任選與中性寡糖組合的酸性寡糖的給予能夠恢復Thl/ Th2失衡和/或維持有利的Thl/Th2平衡。還發(fā)現(xiàn)優(yōu)選與中性寡糖組合的酸性寡糖能夠刺 激Thl反應(yīng)。本發(fā)明的發(fā)明人還認為，酸性和中性寡糖的給予刺激Th3，即增強調(diào)控性T細 胞活性。認為刺激Thl反應(yīng)部分地通過抑制Th2反應(yīng)實現(xiàn)。因此，本發(fā)明提供用于如下的方法-調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)；-刺激免疫系統(tǒng)的發(fā)育，尤其是在年齡為0-1歲的人中；-增強全身性免疫反應(yīng)；-治療和/或預防Thl/Th2失衡；和/或-治療和/或預防至多能通過免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)治療的疾??；其中所述方法包括給予酸性寡糖，優(yōu)選酸性和中性寡糖，更優(yōu)選酸性寡糖和兩種 在化學上不同的中性寡糖。換言之，因此可以說，酸性寡糖對炎癥細胞因子(Thl反應(yīng))具有有益作用。另外， 酸性寡糖和中性寡糖的組合對炎癥細胞因子(Th2反應(yīng))具有有益作用。
具體實施例方式本發(fā)明涉及治療和/或預防哺乳動物中免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥的方法，所述方法包括 給予所述哺乳動物包含治療有效量的酸性寡糖和中性寡糖的組合物，即酸性寡糖和中性寡 糖在生產(chǎn)組合物中的用途，所述組合物用于治療和/或預防哺乳動物中免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥。
另一方面，本發(fā)明涉及酸性寡糖和中性寡糖在生產(chǎn)用于增強哺乳動物中免疫反應(yīng) 的組合物中的用途和/或調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的方法中的用途。另一方面，本發(fā)明涉及包含5-50en%脂類、10-60en%蛋白質(zhì)、15至90en%碳 水化合物、酸性寡糖和中性寡糖并優(yōu)選熱量密度為0. 5-2kcal/ml的食物組合物，其中 所述酸性寡糖包含至少一個末端糖醛酸單元；并且所述中性寡糖選自纖維二糖、纖維 糊精、B-環(huán)糊精、不消化的糊精、龍膽寡糖、葡寡糖、異麥芽寡糖、異麥芽糖、異麥芽三 糖(isomaltriose)、潘糖、明串珠菌二糖、帕拉金糖(palatinose)、theanderose、D-塔 格糖、D-來蘇-己酮糖、乳蔗糖、α-半乳寡糖、β-半乳寡糖、反式半乳寡糖、乳果糖、 4' _半乳糖基乳糖(4' -galatosyllactose)、合成的半乳寡糖、左聚糖型果聚糖、菊糖 型果聚糖、If-β -呋喃果糖基霉菌赤蘚醛糖(lf-β -fructofuranosylnystose)、木寡糖 (xylooligosaccharide)、lafinose、乳鹿糖禾口阿拉伯寡糖(arabinoo 1 igosaccharide)。另一方面，本發(fā)明涉及治療和/或預防免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥的方法，所述病癥選自 自身免疫性病癥、遺傳或條件誘導的免疫缺陷、接種支持(supportfor vaccination)、1型 變態(tài)反應(yīng)、2型變態(tài)反應(yīng)和3型變態(tài)反應(yīng)，所述方法包括給予所述哺乳動物包含治療有效量 的酸性寡糖的組合物。一些認為相當大部分地由Th2免疫反應(yīng)、IL-4/IL-5細胞因子誘導和/或嗜酸性 粒細胞增多(以及對根據(jù)本發(fā)明的治療的相應(yīng)反應(yīng))引起/介導的疾病包括哮喘、過敏性 鼻炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、Ommen氏綜合征(嗜酸性粒細胞增多綜合征)。這些是非病毒和非 腫瘤性Th2介導的疾病的實例，它們用本發(fā)明的方法有效治療顯然不可能已被預見。特別 優(yōu)選的本發(fā)明的方法用于治療與嗜酸性粒細胞增多相關(guān)的疾病，例如哮喘和過敏性鼻炎。對特定病癥的治療有效量可由本領(lǐng)域技術(shù)人員經(jīng)劑量探索試驗(dose-finding study)常規(guī)地確定。免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，給予優(yōu)選與中性寡糖組合的酸性寡糖給個體提供有益的全身作用。全 身是指作為血液和/或淋巴(全身)循環(huán)的結(jié)果來影響整個機體。一方面，本發(fā)明提供調(diào)節(jié)和/或增強免疫系統(tǒng)的方法，所述方法包括給予酸性和 中性寡糖。該方法可合適地用于平衡Thl/Th2反應(yīng)的方法，尤其是通過刺激Thl反應(yīng)而平 衡Thl/Th2反應(yīng)的方法。因此，包含本發(fā)明寡糖的組合物是本發(fā)明的一部分，認為所述寡 糖例如刺激免疫系統(tǒng)成熟、通過增強免疫系統(tǒng)來增強對病原體的抵抗力和/或支持免疫系 統(tǒng)。另一方面，本發(fā)明提供治療和/或預防免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥的方法，所述方法包括 給予所述哺乳動物包含治療有效量的酸性寡糖的組合物。另一方面，本發(fā)明提供增強哺乳動物中免疫反應(yīng)的方法，所述方法包括給予哺乳 動物包含任選與中性寡糖組合的酸性寡糖的組合物。尤其令人驚奇地，腸道給予本發(fā)明寡糖提供有益的全身作用。因此，本發(fā)明的方法 優(yōu)選包括腸道給予，更優(yōu)選口服給予酸性寡糖或酸性和中性寡糖。在另外的實施方案中，本發(fā)明的方法涉及將寡糖給予嬰兒，優(yōu)選年齡0-6歲的人， 優(yōu)選年齡O至1歲的人。由于該群體中有特定的Thl/Th2比率失衡(在許多病例中Th2占 優(yōu)勢)，所以本發(fā)明的方法可適用于恢復該群體中的失衡。還認為給予優(yōu)選與中性寡糖組合的酸性寡糖促進新生兒(胃)腸道成熟，使得本發(fā)明的方法和組合物尤其適于給予早產(chǎn)嬰 兒。在優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明的方法涉及刺激0-6歲，優(yōu)選0至1歲的人個體中免疫系統(tǒng) 的成熟。下面描述可合適地用于本發(fā)明方法的組合物的其它優(yōu)選組分特征，例如蛋白質(zhì)、 碳水化合物、脂類、重量克分子滲透濃度、粘度和熱量密度。免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥優(yōu)選選自自身免疫性病癥、遺傳或條件誘導的免疫缺陷、接種 支持、1型變態(tài)反應(yīng)、2型變態(tài)反應(yīng)、3型變態(tài)反應(yīng)和4型變態(tài)反應(yīng)?？珊线m地治療的自身免疫性病癥包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎小球腎炎、結(jié)節(jié)性 多動脈炎、鏈球菌感染后(poststreotococcal)急性腎小球腎炎、格雷夫斯病、重癥肌無 力、胰島素抵抗性糖尿病、橋本氏甲狀腺炎、溶血性貧血、惡性貧血、肺出血腎炎綜合征、尋 常天皰瘡、自身免疫性血小板減少性紫癜、急性風濕熱、混合型原發(fā)性冷球蛋白血癥、自身 免疫性惡性(preniciopus)貧血、自身免疫性阿狄森氏病、白癜風、低血糖癥、新生兒狼瘡 疹、IDDM(胰島素依賴型糖尿病)、類風濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化病、銀屑病、硬皮病、克隆氏 病、IBD(炎癥性腸病)、神經(jīng)病變，優(yōu)選胰島素抵抗性糖尿病?？珊线m地治療的遺傳或條件誘導的免疫缺陷病癥包括免疫衰老、孤獨癥、慢性疾 病例如癌癥、COPD (慢性阻塞性肺病)、AIDS、關(guān)節(jié)炎、糖尿病、食欲缺乏、惡病質(zhì)、吞咽困難、 腎衰竭、放射引起的營養(yǎng)不良、患慢性潰瘍和應(yīng)激尤其是社會壓力后應(yīng)激的患者、慢性感染 或吸煙、空氣污染、放射、化學治療。由于在患有獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)和/或人免疫缺陷病毒(HIV)感染的 個體中刺激免疫系統(tǒng)尤其重要，所以在優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明特別提供治療和/或預防 AIDS和/或HIV感染的方法，所述方法包括腸道給予本發(fā)明的酸性寡糖，優(yōu)選與本發(fā)明的 中性寡糖組合。本發(fā)明還提供治療和/或預防患有AIDS和/或HIV感染的個體中的腹瀉 的方法，所述方法包括腸道給予本發(fā)明的酸性寡糖，優(yōu)選與本發(fā)明的中性寡糖組合。本發(fā)明 的(酸性)寡糖優(yōu)選在營養(yǎng)基質(zhì)，即包含脂類、蛋白質(zhì)和碳水化合物的組合物中提供給患有 AIDS和/或HIV感染的個體。可合適地治療的變態(tài)反應(yīng)包括1型變態(tài)反應(yīng)遺傳性過敏癥、哮喘、花粉癥、濕疹、 食物過敏、藥物過敏；2型變態(tài)反應(yīng)新生兒溶血癥、自身免疫性溶血性貧血、強直性脊柱 炎、急性前葡萄膜炎；3型變態(tài)反應(yīng)阿圖斯反應(yīng)、血清??；4型變態(tài)反應(yīng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)、 接觸性過敏、乳糜瀉。還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的方法可合適地用于支持接種處理，例如增強接種處理的 效果。這些包括在術(shù)語免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥中。在接種前、接種時和/或接種后優(yōu) 選(經(jīng)口)給予優(yōu)選與中性寡糖組合的酸性寡糖。尤其是白喉-破傷風_百日咳 (diptheria-tetanu-spertussis)、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、麻疹/腮腺炎/風疹、肺炎球菌綴合 物、嗜血桿菌B綴合物、乙型肝炎、甲型肝炎、水痘、流感的接種效果可合適地被增強。優(yōu)選地，本發(fā)明的方法涉及治療和/或預防營養(yǎng)不良、遺傳性過敏癥、哮喘或 COPD。本發(fā)明還涉及酸性寡糖在生產(chǎn)組合物中的用途，所述組合物用于治療和/或預防 選自自身免疫性病癥、遺傳或條件誘導的免疫缺陷(優(yōu)選不是AIDS)、接種支持、1型變態(tài)反 應(yīng)、2型變態(tài)反應(yīng)和3型變態(tài)反應(yīng)的免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥。
酸性寡糖術(shù)語酸性寡糖是指包含至少一個酸性基團的寡糖，該酸性基團選自N-乙酰神經(jīng) 氨酸、N-乙醇酰神經(jīng)氨酸、游離或酯化的羧酸、硫酸基團和磷酸基團。該酸性寡糖優(yōu)選是聚 己糖。優(yōu)選地，至少一個前述的酸性基團位于酸性寡糖的末端己糖。優(yōu)選地，酸性寡糖具有 如式1所示的結(jié)構(gòu)，其中末端己糖(左側(cè))優(yōu)選包含雙鍵。優(yōu)選地，酸性寡糖含有在末端己 糖單元的羧酸，其中所述羧酸基團可為游離的或酯化的。WO 01/60378和/或WO 02/42484 中提供了制備可合適地用于本發(fā)明的方法和組合物中的酯化果膠水解產(chǎn)物的方法，這兩篇 文獻在此引入本文作為參考。除了末端己糖單元外，己糖單元優(yōu)選是糖醛酸單元，更優(yōu)選是半乳糖醛酸單元。在 這些單元上的羧酸基團可以是游離的或(部分)酯化的，優(yōu)選至少10%是甲基化的(參見 下文)。式1聚合的酸性寡糖
權(quán)利要求
包含酸性寡糖和中性寡糖的組合物在生產(chǎn)用于i)刺激患有AIDS和/或HIV感染的患者的免疫系統(tǒng)或ii)治療和/或預防AIDS和/或HIV感染的組合物中的用途，所述組合物包含治療有效量的酸性寡糖和中性寡糖，其中所述酸性寡糖由果膠或藻酸鹽制備，且所述中性寡糖選自果寡糖、半乳寡糖和反式半乳寡糖，并且所述組合物還包含脂肪、蛋白質(zhì)和碳水化合物。
2.權(quán)利要求1的用途，其中所述組合物包含兩種在化學上不同的中性寡糖，它們是-選自半乳寡糖和反式半乳寡糖的半乳糖基中性寡糖；和-選自菊糖、果菊糖和果寡糖的果糖和/或葡糖基中性寡糖。
3.權(quán)利要求2的用途，其中半乳糖基中性寡糖的平均DP為2至10，且果糖和/或葡糖 基中性寡糖的平均DP為10至60。
4.權(quán)利要求1-3之任一項的用途，其中所述酸性寡糖的聚合度為1至250。
5.權(quán)利要求1-3之任一項的用途，其中所述組合物包含5至50en%脂肪、10至60en% 蛋白質(zhì)、15至80en%碳水化合物、果寡糖和半乳寡糖，并且其中所述果寡糖的平均DP為10 至60，而所述半乳寡糖的DP為2至10。
6.權(quán)利要求5的用途，其中所述組合物的重量克分子滲透濃度為50至500m0sm/kg。
7.酸性寡糖和中性寡糖在生產(chǎn)組合物中的用途，所述組合物用于用以治療和/或預防 哺乳動物中免疫系統(tǒng)相關(guān)病癥的方法中，所述方法包括給予所述哺乳動物包含治療有效量 的酸性寡糖和中性寡糖的組合物。
8.具有下式的酸性寡糖在生產(chǎn)用于治療和/或預防AIDS和/或HIV感染的組合物中其中R選自氫、羥基或酸性基團；且選自R2、R3、R4和R5中的至少一個表示N-乙酰神經(jīng)氨酸、N-乙醇酰神經(jīng)氨酸、游離或 酯化的羧酸、硫酸基團和磷酸基團，而R2、R3、R4和R5中其余的表示羥基和/或氫；且 η為1-5000的整數(shù)。的用途，
全文摘要
本發(fā)明涉及包含酸性寡糖和中性寡糖的組合物在生產(chǎn)用于(i)刺激患有AIDS和/或HIV感染的患者的免疫系統(tǒng)或(ii)治療和/或預防AIDS和/或HIV感染的組合物中的用途，所述組合物包含治療有效量的酸性寡糖和中性寡糖，其中所述酸性寡糖由果膠或藻酸鹽制備，且所述中性寡糖選自果寡糖、半乳寡糖和反式半乳寡糖，并且所述組合物還包含脂肪、蛋白質(zhì)和碳水化合物。
文檔編號A23L1/29GK101987107SQ20101016750
公開日2011年3月23日 申請日期2004年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月24日
發(fā)明者京特·伯姆, 勞拉·姆拉貝, 約翰·加森, 貝恩德·施塔爾, 阿爾詹·保羅·福斯 申請人:努特里奇亞有限公司