專利名稱：丹參多糖在制備抗氧化藥物或保健品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及丹參多糖在制備抗氧化藥物或保健品中的新用途。
背景技術(shù)：
氧化所產(chǎn)生的自由基與身體的許多疾病相關(guān)，自由基除會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生傷害外，還能發(fā)動(dòng)自由基連鎖反應(yīng)，進(jìn)一步惡化、傷害體內(nèi)組織。目前已知有許多疾病皆因自由基過量而引起的。如腫瘤、高脂血癥、免疫力低下、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、急性呼吸窘迫癥候群等。因此，抗氧化劑在衰老和防治相關(guān)疾病越來越受到人們的重視。目前，人們已開發(fā)研究出大量的抗氧化劑用于食品、藥品、以及化妝品行業(yè)。例如，依達(dá)拉奉(3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮，Edaravone)是第一種用于治療腦梗死的藥物，可清除自由基，抑制脂質(zhì)過氧化，從而抑制腦細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞的氧化損傷；依布硒啉(Ebselen)具有類似谷胱甘肽過氧化物酶的活性，能有效保護(hù)腦梗死或蛛網(wǎng)膜下腔出血患者的大腦功能；黃酮類化合物，如木犀草素、蘆丁、槲皮素、橙皮苷等均具有較好的抗氧化效果，可以用于心血管病和腫瘤的預(yù)防；從茶葉中提取的茶多酚被廣泛用于食品添加劑，其抗氧化能力高于維生 E 1(Γ20倍。因此，抗氧化劑的研究和開發(fā)在醫(yī)藥保健及食品行業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景。丹參(fehia mi It ionrrhiza Bge)為雙子葉唇形科植物，是我國最常用的傳統(tǒng)中藥之一，始載于《神龍本草經(jīng)》，被列為上品，歷代本草著作均有收載。丹參味苦，性微寒，主要有祛瘀止痛、活血調(diào)經(jīng)、養(yǎng)血安神之功效，被廣泛應(yīng)用于心血管疾病的治療。丹參的主要活性成分包括水溶性的丹參多糖、丹參酚酸和脂溶性的丹參酮類，目前國內(nèi)外對(duì)水溶性丹參酚酸和脂溶性丹參酮類成分的研究較多，而對(duì)丹參多糖研究較少， 蔡幼清在(丹參根中的精制多糖對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腎病的作用，國外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊(cè))， 1995，第4期)研究發(fā)現(xiàn)丹參梗中提取的多糖給腎病模型和肝損傷模型實(shí)驗(yàn)小鼠口服和肌注，能減少小鼠尿蛋白的排泄，抑制血清膽固醇和脂質(zhì)過氧化濃度的提高。姚瑩華等(丹參多糖對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用，中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，第6期)初步研究發(fā)現(xiàn)，丹參多糖能降低LPS誘導(dǎo)的急性肝損傷模型小鼠肝組織中MDA含量，升高GSH含量，降低血清ALT含量，對(duì)小鼠急性肝損傷有顯著的保護(hù)作用。宋雨鴻在《丹參多糖抗小鼠免疫性肝損傷及其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的研究》中發(fā)現(xiàn)丹參多糖有抗免疫性肝損傷的作用，這種作用的實(shí)現(xiàn)不僅表現(xiàn)在直接的保肝降酶方面，還對(duì)肝損傷后小鼠的免疫功能起到調(diào)節(jié)作用，通過免疫功能的調(diào)控進(jìn)一步發(fā)揮保肝降酶作用，體外實(shí)驗(yàn)說明丹參多糖在一定濃度范圍內(nèi)對(duì)淋巴細(xì)胞有較強(qiáng)的增殖作用，并且還有促進(jìn)相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)及分泌的作用。丹參多糖具有多種生物活性，但其抗氧化活性尚未見的報(bào)導(dǎo)。目前，主要的體外抗氧化活性測(cè)試的方法主要有體外清除· OH的能力法、體外清除超氧自由基的能力法、DPPH自由基清除法和抗氧化能力指數(shù)(Oxygen Radical Absorbance Capacity, 0RAC)的測(cè)定方法。其中，前三種方法都是采用吸光光譜檢測(cè)，其測(cè)試結(jié)果不穩(wěn)定，干擾因素較多。ORAC抗氧化能力指數(shù)的測(cè)定采用發(fā)射光譜檢測(cè)，其主要優(yōu)點(diǎn)有
(1)靈敏度高，檢出限低其檢出限一般為10-，10-6g/L，甚至更低，通常較吸收光譜法高2、個(gè)數(shù)量級(jí)；
(2)選擇性強(qiáng)0RAC法的光譜比較簡(jiǎn)單，特征性強(qiáng)，而且有激發(fā)光譜和發(fā)射光譜，選擇的余地大，如果某幾種物質(zhì)的激發(fā)光譜相似，就可以從發(fā)射光譜的差異進(jìn)行鑒別和分析；
(3)ORAC法可提供比較多的物理參數(shù)可提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜和三維光譜及熒光強(qiáng)度、熒光效率、熒光壽命等多種物理參數(shù)。這些參數(shù)反映了分子的各種特性，能從不同角度提供研究對(duì)象的分子信息。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供丹參多糖在抗氧化活性方面的新應(yīng)用。本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)丹參多糖提取物具有良好的抗氧化能力，可以有效的
清除自由基。體外生化試驗(yàn)證明，丹參多糖ORAC指數(shù)較高，具有顯著的抗氧化能力，可有效清除自由基。能應(yīng)用于制備具有抗氧化作用的藥物。


圖1為實(shí)施例1所得丹參多糖提取物的不同濃度的ORAC指數(shù)。
具體實(shí)施例方式以下經(jīng)過具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例1
取丹參藥材2 kg，粉碎成細(xì)粉，加入藥材量10倍體積(V/W)水，在20°C下攪拌提取2 次，每次30分鐘。提取過程加鹽酸調(diào)節(jié)pH=3，提取完后過濾得濾液，經(jīng)真空干燥得丹參多糖提取物。經(jīng)分析該提取物糖含量為51. 22%。實(shí)施例2實(shí)施例1所得丹參多糖的抗氧化能力測(cè)定
在96孔板中加入20 μ L磷酸鹽緩沖液，再加處理好樣品待測(cè)液20 μ L (實(shí)施例1所得丹參多糖提取物)，接著依次加入AAPH 140 μ L和緩沖液20 μ L，最后添加Disodium fluorescein 20 μ L (終濃度63 nmol/L)啟動(dòng)反應(yīng)并迅速將酶標(biāo)板置于熒光酶標(biāo)儀(預(yù)置溫度37°C )中開始測(cè)定。采用動(dòng)力學(xué)方式，每2 min測(cè)定一個(gè)點(diǎn)，至熒光強(qiáng)度衰減為零為止。 根據(jù) ORAC (Oxygen radical absorbance capacity)測(cè)定公式計(jì)算出其 ORAC 值。抗氧化劑的氧自由基清除能力ORAC值，又稱為抗氧化劑的抗氧化能力指數(shù)，是通過熒光衰退曲線的保護(hù)面積與20 ymol/L標(biāo)準(zhǔn)抗氧化物質(zhì)Trolox (—種α -生育酚的水溶液類似物)的保護(hù)面積相比得出。其計(jì)算公式為
ORAC值(U/ml) = RX[( AUCSample-AUC+AAPH ) / (AUCTrolox-AUC+AAPH)] R為樣品稀釋倍數(shù)，AUC為熒光衰退曲線下面積。測(cè)定其結(jié)果見圖1。結(jié)果顯示丹參多糖具有顯著的抗氧化活性，且隨著劑量的增加而增強(qiáng)。
權(quán)利要求
1.丹參多糖在制備抗氧化藥物或保健品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了丹參多糖在制備抗氧化藥物或保健品中的應(yīng)用。本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)丹參多糖ORAC指數(shù)較高，具有顯著的抗氧化能力，可有效清除自由基。
文檔編號(hào)A23L1/30GK102366420SQ20111033061
公開日2012年3月7日 申請(qǐng)日期2011年10月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月27日
發(fā)明者劉忠云, 劉菊妍, 張聰琪, 李金華, 楊麗, 汪濤, 葛發(fā)歡, 許定舟, 鐘鳴 申請(qǐng)人:廣州漢方現(xiàn)代中藥研究開發(fā)有限公司