專利名稱：一種預(yù)測(cè)前列腺癌易感性的檢測(cè)試劑和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)測(cè)前列腺癌易感性的檢測(cè)試劑和方法，更具體的說是通過測(cè)定與前列腺癌相關(guān)基因GPRC6A的第二外顯子上rs2274911位點(diǎn)多態(tài)性預(yù)測(cè)受試者對(duì)于前列腺癌的易感性，該方法可用于疾病的輔助診斷和新藥開發(fā)，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
前列腺癌(prostate cancer, PCa)是發(fā)生在男性生殖系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤。美國在對(duì)1975-2006癌癥發(fā)病率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)后，估算2010年P(guān)Ca新發(fā)病例為217，730例，位居男性好發(fā)腫瘤中第一位，PCa的死亡人數(shù)估計(jì)為32，050，在男性腫瘤死亡率中位居第二。年齡是PCa的一個(gè)重要風(fēng)險(xiǎn)因素，年齡45歲以下的基本很少發(fā)病，隨年齡的增長而增加。美國癌癥協(xié)會(huì)統(tǒng)計(jì)，40歲以下的男性PCa發(fā)病率為1/8499,40-59歲男性中為1/38，60_69歲男性中為1/15，70歲以上男性中則為1/8。隨著我們國家人口老齡化，PCa的發(fā)病率在我國正逐年上升，上海標(biāo)化發(fā)病率從1973 1975年的1. 8/10萬上升至1997 1999年的
5.5/10萬，貴州省南部地區(qū)部分縣市PCa的發(fā)病率已從1994 1998年的1. 72/10萬上升到2004 2008年的4. 28/10萬，成為威脅我國男性健康的公共問題。目前進(jìn)行PCa遺傳病因研究，多采用大規(guī)模全基因組關(guān)聯(lián)研究和小樣本多人群中的驗(yàn)證，并且GWAS鑒定的多個(gè)PCa易感SNPs已在多個(gè)不同人群中被復(fù)制確定，證明了 SNPs作為基因組標(biāo)志的關(guān)聯(lián)分析方法在PCa遺傳研究中的有效性。SNPs是指染色體基因組水平上單個(gè)核苷酸變異引起的DNA序列多態(tài)性，在人群中的頻率需>1%，SNPs是雙等位基因標(biāo)記，這種單堿基變化中有70. 1%為同型堿基之間的轉(zhuǎn)換如G/A或T/C，29. 1%為發(fā)生在嘌呤和嘧啶之間的顛換。SNPs包含了已知多態(tài)性的80-90%，是最常見的遺傳變異。由于生存的選擇壓力導(dǎo)致SNP在單一基因和整個(gè)基因組中的分布呈不均勻性。SNPs在基因非編碼區(qū)的數(shù)量是編碼區(qū)的4倍，總數(shù)可達(dá)3百萬個(gè)。SNPs以其密度高(平均每Ikb就有I個(gè))、代表性強(qiáng)(位于基因內(nèi)部的SNPs可能直接影響蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平)、遺傳穩(wěn)定性好(同微衛(wèi)星多態(tài)性比較而言)、易于自動(dòng)化分析(因SNPs在人群中為雙等位基因標(biāo)記，可簡單以“+ / -或1/0”直接分型)等特點(diǎn)成為很好的遺傳標(biāo)志。GPRC6A(G蛋白偶聯(lián)受體C家族6組A亞型)(G protein-coupled receptor, family
C,group 6, member A,GPRC6A)基因是Wellendorph P等在2004年發(fā)現(xiàn)提出的，編碼G蛋白偶聯(lián)受體C家族6組A成員,G蛋白偶聯(lián)受體(G protein-coupled receptors, GPCRs)是一類有7次跨膜區(qū)域，是人類基因組上由約近千個(gè)基因編碼的大的受體家族，在許多生理病理進(jìn)程包括發(fā)育、造血、血管生成、炎癥、精神障礙、代謝疾病及病毒感染等中起重要作用。研究表明許多GPCRs和他們的配體參與腫瘤發(fā)生發(fā)展，如內(nèi)皮縮血管肽類通過與GPCRs相互作用介導(dǎo)組織分化、發(fā)育和細(xì)胞增殖，通過增強(qiáng)細(xì)胞增殖抑制凋亡和調(diào)節(jié)基質(zhì)成分在PCa和其他腫瘤中起重要作用。許多趨化因子受體如CXCR4、CXCR2、CCR7等在許多腫瘤表達(dá)上調(diào)，在腫瘤生長、侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用。許多被稱為內(nèi)皮分化基因家族的GPCRs是溶血磷脂酸或鞘氨醇-1-磷酸鹽的受體，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、遷移和生存。如肺腺癌或肺腺癌3期時(shí)許多化學(xué)因子受體、神經(jīng)肽受體、激素受體等PAR2 (GPRll)、Edg2 (GPR2)等GPCRs表達(dá)上調(diào)；乳腺癌或乳腺癌3期時(shí)PAR2和CXCR-4表達(dá)增加；PCa時(shí)CXCR_3、GPR68等在PCa組織表達(dá)高于正常前列腺組織，其他腫瘤胃癌、轉(zhuǎn)移黑色素瘤等的發(fā)展中也有多種GPCRs參與。據(jù)估計(jì)，市場(chǎng)上接近30%的藥物靶標(biāo)是GPCRs或者與其相關(guān)的信號(hào)通路，其研發(fā)依據(jù)部分為許多疾病與GPCRs的變異和多態(tài)性關(guān)聯(lián)，因此研究GPCRs與腫瘤包括GPCRs的多態(tài)性與腫瘤的關(guān)聯(lián)可以為以干擾GPCRs或其介導(dǎo)的信號(hào)通路為基礎(chǔ)的藥物研發(fā)提供理論依據(jù)。GPRC6A基因的功能已有研究，GPRC6A廣泛表達(dá)在腦和外周組織，在睪丸、腎臟、骨骼肌中高表達(dá)。GPRC6A敲除的小鼠表現(xiàn)為代謝綜合征成骨細(xì)胞缺陷介導(dǎo)的骨鈣化，腎臟處理鈣磷異常，脂肪肝，糖耐受和類固醇合成紊亂等性狀。最近的體內(nèi)體外GPRC6A功能研究也表明其是一個(gè)調(diào)節(jié)PCa生長和腫瘤發(fā)展相關(guān)的靶分子。再者，GPRC6A是骨-胰腺分泌環(huán)中調(diào)節(jié)骨鈣素應(yīng)答的基因，骨-胰腺分泌環(huán)調(diào)節(jié)胰島素信號(hào)通路，而胰島素受體和胰島素樣生長因子也在許多研究中被證明與PCa相關(guān)。從GPRC6A可以調(diào)節(jié)激素和影響胰島素信號(hào)通路這兩方面支持基因上位點(diǎn)的變異可能會(huì)影響PCa的易感性。2010年，Takata R等鑒定了位于RFX6基因上的rs339331和PCa風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)，此后，此位點(diǎn)在歐洲人群和中國人群中復(fù)制驗(yàn)證。結(jié)合以上對(duì)GPRC6A功能的分析，我們推測(cè)GPRC6A基因?yàn)镻Ca易感基因并且選擇了位于其外顯子的rs2274911，在273個(gè)PCa患者和606個(gè)對(duì)照人群中分型后進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果確定了 rs2274911與中國人群PCa關(guān)聯(lián)。

rs2274911在染色體上位置為117，237，396，位于GPRC6A的第二外顯子上，該外顯子有304個(gè)bp，rs2274911是距離該外顯子5’端76bp的SNP位點(diǎn)，此位點(diǎn)所在基因組位置可能會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄mRNA，及翻譯氨基酸序列發(fā)生改變，進(jìn)而影響蛋白質(zhì)行使功能。經(jīng)查詢檢索，截至目前，GPRC6A基因rs2274911與PCa風(fēng)險(xiǎn)還未見有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的是提供一種檢測(cè)前列腺癌易感性基因的方法。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種檢測(cè)前列腺癌易感性基因的試劑，包括PCR引物和含有該引物的試劑盒。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種檢測(cè)前列腺癌易感性的核苷酸序列，為序列表SEQ ID No.1所示核苷酸序列。所述核苷酸序列為GPRC6A基因第二外顯子上包含單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的核苷酸片段。圖1為GPRC6A基因結(jié)構(gòu)及rs2274911多態(tài)性變異位點(diǎn)的示意圖，GPRC6A基因包含有6個(gè)外顯子，rs2274911位點(diǎn)標(biāo)在GPRC6A基因圖中第6外顯子相應(yīng)位置。所述單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的基因型為TT時(shí)，前列腺癌易感性最高；基因型為TC或CC時(shí)，前列腺癌易感性較低。一組檢測(cè)前列腺癌易感性的引物，能擴(kuò)增得到GPRC6A基因第二外顯子上包含單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的檢測(cè)前列腺癌易感性的核苷酸序列。所述引物的核苷酸序列分別為序列表SEQ ID No. 2和序列表SEQ ID No. 3所示。一種前列腺癌易感性基因的檢測(cè)方法，包括如下步驟(I)抽提樣品的基因組DNA，擴(kuò)增GPRC6A基因第二外顯子包含單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的核苷酸片段；(2)檢測(cè)步驟(I)產(chǎn)物中單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的基因型，基因型為TT時(shí)，前列腺癌易感性最高；基因型為TC或CC時(shí)，前列腺癌易感性較低。所述步驟(I)中的核苷酸片段為序列表SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，rs2274911位點(diǎn)位于該核苷酸序列的+501位。所述擴(kuò)增GPRC6A基因第二外顯子的包含單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的核苷酸片段，使用的一組引物的核苷酸序列分別為序列表SEQ ID No. 2和SEQ ID No. 3所示。本發(fā)明提供了一種檢測(cè)前列腺癌易感性的診斷試劑盒，其中含有本發(fā)明特異性擴(kuò)增GPRC6A基因外顯子rs2274911位點(diǎn)的引物對(duì)和用于PCR擴(kuò)增檢測(cè)的試劑盒的常規(guī)組件、試劑、緩沖液等，本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知這些常規(guī)組件和檢測(cè)方法。本發(fā)明試劑盒中的全部組分、含量、來源和使用方法如下一種預(yù)測(cè)PCa的試劑盒，供10人份檢測(cè)應(yīng)用，由以下試劑組成IOu L 10XPCR 緩沖液(購自 Pharmacia)，2 U L IOmM dNTP 混合液(購自 Pharmacia),2 u L Taq DNA 聚合酶(2unit/U L)(購自 Takara),IuL Fl引物，為SEQ ID NO. 2所示的核苷酸序列，濃度為lOpmol/ii L ；IuL Rl引物，為SEQ ID NO. 3所示的核苷酸序列，濃度為lOpmol/ii L ；8u L lOXL C-green PLUS飽和熒光染料；(購自美國Idaho公司)2 u L寡核苷酸內(nèi)參引物各0. 5 u L，濃度為lOpmol/ii L，其中低溫內(nèi)參引物F為SEQID NO. 4所示的核苷酸序列，低溫內(nèi)參引物R為SEQ ID NO. 5所示的核苷酸序列，高溫內(nèi)參引物F為SEQ ID NO. 6所示的序列，高溫內(nèi)參引物R為SEQ ID NO. 7所示的核苷酸序列；64 ii L 純水。使用方法I) PCR擴(kuò)增通過PCR擴(kuò)增GPRC6A基因的外顯子部分片段，制備混合液=IOXPCR反應(yīng)緩沖液 Iu L，10mmol/L dNTP 0. 2 u L, Taq DNA 聚合酶 0. 2 y L，10pmol/L 上游引物0. 11^，10 11101/1下游引物0.1uLjIOXLC Green PLUS飽和熒光染料0. 8 y L，寡核苷酸內(nèi)參0. 2 ii L (高、低溫寡核苷酸內(nèi)參上、下游引物各0. 05 ii L)(序列見表1)，基因組DNAl ii L，加去離子水至10 u L0 PCR反應(yīng)條件為95°C預(yù)變性5min，95°C變性lmin，54°C退火30s，72°C延伸6s，總共45個(gè)循環(huán)，72°C總延伸7min。在進(jìn)行高分辨熔解曲線分析之前，進(jìn)行變性和復(fù)性處理95°C 30s, 25 °C 2min，94°C 30s，24°C 4min。PCR 時(shí)于每一體系中加入 20 yl 的石蠟油，以防止液體揮發(fā)。2)基因型判定將PCR產(chǎn)物移入HRM專用96孔板內(nèi)，在Light scanner TMHR-196上進(jìn)行HRM分析，用Light Scanner Call IT軟件對(duì)采集后的曲線進(jìn)行分析，根據(jù)熔解曲線的差異判定基因型。GPRC6A基因第二外顯子單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911在制備診斷或治療前列腺癌的試劑或藥物中的用途。本發(fā)明的測(cè)定方法測(cè)定了來源于人的基因組DNA，樣品沒有限制，如體液(血液、腹水及尿液等)、組織細(xì)胞(如肝組織)等。通過提取和純化這些樣品可制備基因組DNA。調(diào)整基因組DNA的濃度，使其盡可能的一致。以基因組DNA為模板，可擴(kuò)增出含GPRC6A外顯子突變位點(diǎn)rs2274911的核酸片段，以獲取測(cè)定的大量樣本。這種通過擴(kuò)增含GPRC6A外顯子突變點(diǎn)的DNA片段獲得的樣品，特別適于用作測(cè)定材料。在進(jìn)行基因輔助診斷時(shí)，本發(fā)明優(yōu)先適用于測(cè)定根據(jù)GPRC6A外顯子突變位點(diǎn)rs2274911突變類型存在的輔助診斷試劑，輔助診斷試劑包括作為必要成分的特定試劑，其對(duì)應(yīng)于用于測(cè)定rs2274911基因突變類型的方法。按采用的測(cè)定方法來選擇適當(dāng)?shù)奶囟ㄔ噭?，如DNA片段和/或用于PCR擴(kuò)增步驟的引物。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明首次闡明了 GPRC6A外顯子rs2274911多態(tài)性位點(diǎn)與PCa的相關(guān)性，提供了一種預(yù)測(cè)PCa易感性的方法和檢測(cè)試劑盒，該方法可用于PCa的預(yù)防、輔助診斷，還可以用于新藥研發(fā)。下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步敘述，以便公眾對(duì)發(fā)明內(nèi)容有更深入的了解，并非對(duì)本發(fā)明的限制，凡依照本發(fā)明公開內(nèi)容所做的任何本領(lǐng)域的等同替換，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。


圖1為GPRC6A基因結(jié)構(gòu)及外顯子多態(tài)性變異位點(diǎn)的示意2為GPRC6A基因外顯子r s2274911位點(diǎn)經(jīng)HRM分型溶解曲線3為GPRC6A基因外顯子rs2274911位點(diǎn)的測(cè)序圖
具體實(shí)施例方式用于下列實(shí)施例中表示試劑的英文縮寫如下10XPCR 緩沖液10mM Tris-HCI (pH=8. 3)，500mM 氯化鉀(KCI )，IOmM 氯化鎂(MgCI2),0. 01%(W/V)白明膠dNTP :脫氧核苷三磷酸EDTA 乙二胺四乙酸二鈉TE IOmM Tris-HCI (pH=7. 5)，ImM EDTA (pH=8. 0)實(shí)施例1 :血液樣本收集和基因組DNA的提取(I)PCa患者均經(jīng)組織病理學(xué)診斷，共選取來自北京和天津地區(qū)無血緣關(guān)系的PCa患者273例(年齡46 - 93歲，平均72. 3歲)，同地區(qū)的年齡匹配的對(duì)照606例(年齡58 - 94歲，平均70.4歲)，均為男性，無PCa家族史、DRE陰性并且PSA〈4ng/mL。所有受檢者均為漢族且簽署書面知情同意書，這項(xiàng)研究得到衛(wèi)生部北京醫(yī)院，衛(wèi)生部老年醫(yī)學(xué)研究所倫理審核委員會(huì)的認(rèn)可，符合世界醫(yī)學(xué)會(huì)赫爾辛基宣言人體醫(yī)學(xué)研究的倫理原則。(2)根據(jù)下列方法，制備人基因組DNA。①首先在已標(biāo)號(hào)的1.5mLEP管中加1000 y L紅細(xì)胞裂解液，后加入400 u LEDTA抗凝血(抗凝血加入前顛倒混勻3_5次)，顛倒混勻，室溫靜置10分鐘；②13000rpm離心30秒后，除去上清液；③在所得沉淀中加480 U I核酸裂解液，彈擊管壁，充分混勻后加入20ii L蛋白酶K (用裂核液稀釋20倍稀釋蛋白酶K)，顛倒混勻，65°C孵箱10分鐘，(期間不時(shí)上下混勻，確保無凝塊)；④取出后降至室溫，加300y L蛋白沉淀液，充分顛倒混勻，靜置10分鐘，13000rpm離心2分鐘；⑤將上清液移至新EP管中，加入670 u L預(yù)冷的異丙醇，充分顛倒混勻(10次以上)，可見線狀DNA逐漸形成小團(tuán)塊，13000rpm離心2分鐘；⑥棄上清液并確保沉淀留在EP中，加入670 u L 70%乙醇，上下顛倒混勻，13000rpm離心2分鐘；⑦棄上清，使管內(nèi)乙醇揮發(fā)干凈；⑧加入TE溶解液(400 u L)，充分溶解，然后對(duì)提取的基因組DNA進(jìn)行濃度和純度的分析，吸取部分DNA溶液作為工作液，濃度校正至20ng/ ii L，放置于4°C備用，剩余基因組DNA置-20°C冰箱保存。實(shí)施例2 SNP的識(shí)別鑒定本發(fā)明采用PCR-高分辨率溶解曲線(HRM)分析法和PCR測(cè)序技術(shù)同時(shí)對(duì)GPRC6A的外顯子基因區(qū)的rs2274911位點(diǎn)(其等位位點(diǎn)為T/C)的基因型進(jìn)行檢測(cè)。I) PCR-HRM弓丨物的確定從Genebank中查取rs2274911附近的DNA堿基序列(SEQ ID NO.1),引物設(shè)計(jì)在Oligo 6. 0和primer5. 0軟件下完成。目的片段定位在GPRC6A基因外顯子區(qū),全長72bp,確定了正義鏈Fl (+450bp—+467bp)與反義鏈Rl (+504bp—+521bp)，特異性引物序列如下Fl :5’ -ACTCTTGCCATGATACAC-3’ (SEQ ID NO. 2)Rl :5’ -ATACCCCAGTTTGACTCC-3’ (SEQ ID NO. 3)2 ) PCR-HRM反應(yīng)體系及條件通過PCR擴(kuò)增GPRC6A的外顯子基因區(qū)的rs2274911位點(diǎn)所在片段，PCR反應(yīng)體系為10XPCR 反應(yīng)緩沖液 I ii L，10mmol/L dNTP 0. 2 u L, Taq DNA 聚合酶 0. 2 y L，10pmol/L上游引物0. 11^，10 11101/1下游引物0.1uLjIOXLC Green PLUS飽和熒光染料0. 8 y L，寡核苷酸內(nèi)參0. 2 L (高、低溫寡核苷酸內(nèi)參上、下游引物各0. 05 L，3’端C3封閉，阻止延伸，見表I),基因組DNA I ii L，加去離子水至IOii L。PCR時(shí)于每一體系中加入20 ii I的石蠟油，防止液體揮發(fā)。PCR反應(yīng)條件`為95°C預(yù)變性5min，95°C變性lmin，54°C退火30s，72°C延伸6s，總共45個(gè)循環(huán)，72°C總延伸7min。在進(jìn)行高分辨熔解曲線分析之前，進(jìn)行變性和復(fù)性處理95°C 30s, 25°C 2min,94°C 30s,24°C 4min。表I高、低溫寡核苷酸內(nèi)參引物序列、退火溫度及產(chǎn)物片段長度
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)前列腺癌易感性的核苷酸序列，其特征在于為序列表SEQ ID No.1所示核苷酸序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)前列腺癌易感性的核苷酸序列，其特征在于所述核苷酸序列為GPRC6A基因第二外顯子上包含單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的核苷酸片段。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)前列腺癌易感性的核苷酸序列，其特征在于所述單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的基因型為TT時(shí)，前列腺癌易感性最高；基因型為TC或CC時(shí)，前列腺癌易感性較低。
4.一組檢測(cè)前列腺癌易感性的引物，其特征在于能擴(kuò)增得到權(quán)利要求1所述的檢測(cè)前列腺癌易感性的核苷酸序列。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一組檢測(cè)前列腺癌易感性的引物，其特征在于所述引物的核苷酸序列分別為序列表SEQ ID No. 2和序列表SEQ ID No. 3所示。
6.一種前列腺癌易感性基因的檢測(cè)方法，其特征在于包括如下步驟 (1)抽提樣品的基因組DNA，擴(kuò)增GPRC6A基因第二外顯子包含單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的核苷酸片段； (2)檢測(cè)步驟(I)產(chǎn)物中單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的基因型，基因型為TT時(shí)，前列腺癌易感性最高；基因型為TC或CC時(shí)，前列腺癌易感性較低。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的前列腺癌易感性基因的檢測(cè)方法，其特征在于所述步驟(I)中的核苷酸片段為序列表SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，rs2274911位點(diǎn)位于該核苷酸序列的+501位。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的前列腺癌易感性基因的檢測(cè)方法，其特征在于所述擴(kuò)增GPRC6A基因第二外顯子的包含單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911的核苷酸片段，使用的一組引物的核苷酸序列分別為序列表SEQ ID No. 2和SEQ ID No. 3所示。
9.一種檢測(cè)前列腺癌易感基因的試劑盒，其特征在于由以下試劑組成 IOu L 10 X PCR 緩沖液； 2u L IOmM dNTP 混合液；2u L Taq DNA 聚合酶，2unit/ U L ； IuL Fl引物，為SEQ ID No. 2所示的核苷酸序列，濃度為lOpmol/y L ; IuL Rl引物，為SEQ ID No. 3所示的核苷酸序列，濃度為lOpmol/u L ； 8u L lOXLC-green PLUS 飽和熒光染料； 2 u L寡核苷酸內(nèi)參引物各0. 5 ii L，濃度為lOpmol/ u L，其中低溫內(nèi)參引物F為SEQ IDNO. 4所示的核苷酸序列，低溫內(nèi)參引物R為SEQ ID NO. 5所示的核苷酸序列，高溫內(nèi)參引物F為SEQ ID NO. 6所示的序列，高溫內(nèi)參引物R為SEQ ID NO. 7所示的核苷酸序列；64 ii L純水。
10.GPRC6A基因第二外顯子單苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2274911在制備診斷或治療前列腺癌的試劑或藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種預(yù)測(cè)前列腺癌易感性的檢測(cè)試劑和方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過提取宿主細(xì)胞的基因組DNA，測(cè)定受試者的GPRC6A基因第二外顯子上rs2274911位點(diǎn)的基因型，預(yù)測(cè)受試者對(duì)前列腺癌的易感性；GPRC6A基因外顯子上rs2274911的基因型為TT時(shí)，受試者的易感性最高；rs2274911的基因型為TC或CC時(shí)，受試者的易感性較低。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是首次闡述了rs2274911基因多態(tài)性位點(diǎn)與前列腺癌的相關(guān)性，提供了一種預(yù)測(cè)前列腺癌易感性的方法，該方法可用于前列腺癌的早期預(yù)防診斷、輔助診斷，還可以用于新藥研發(fā)。
文檔編號(hào)C12N15/12GK103060329SQ20121039866
公開日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2012年10月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月19日
發(fā)明者楊澤, 趙承孝, 劉銘, 王建業(yè), 史曉紅, 魏東, 朱小泉, 楊帆, 張耀光, 梁思穎, 王飛, 唐雷, 孫亮 申請(qǐng)人:衛(wèi)生部北京醫(yī)院