一種紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基及發(fā)酵方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基及發(fā)酵方法，紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的一級(jí)種子培養(yǎng)基、二級(jí)種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基中均含有蔗糖和玉米漿。本發(fā)明通過(guò)采用玉米漿、尿素和蔗糖等中效碳氮源代替原遲效碳氮源，且玉米漿、尿素和蔗糖能夠溶解于水，從而降低發(fā)酵液粘度，提高溶氧，增強(qiáng)其利用速度，尤其是在發(fā)酵后期能夠被充分徹底利用，降低發(fā)酵結(jié)束時(shí)的固體物質(zhì)殘留，進(jìn)而大幅減少了菌渣量及廢水中BOD、COD的含量，達(dá)到了節(jié)能、降耗，源頭治污、清潔生產(chǎn)的良好效果。
【專利說(shuō)明】一種紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基及發(fā)酵方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物發(fā)酵【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及一種紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基及發(fā)酵方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紅霉素(erythromycin, Er)是一類大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,主要包括紅霉素A(ErA)、紅霉素B (ErB)和紅霉素C (ErC)，其中以紅霉素A的抗菌活力最強(qiáng)，B、C抗菌活力較低。現(xiàn)有技術(shù)中，以紅霉素鏈霉菌為發(fā)酵菌種發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的過(guò)程中，其種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基、補(bǔ)料培養(yǎng)基中都采用大量的黃豆餅粉、淀粉等遲效碳、氮源，使得培養(yǎng)基中固含量大于6%，難溶性碳源固含量大于3%，總固含量大于9%，這部分固體物料的存在增加了滅菌難度及原材料成本，增加了發(fā)酵液粘稠度，限制發(fā)酵過(guò)程供氧，而且在發(fā)酵過(guò)程中不能被菌體充分利用，導(dǎo)致發(fā)酵結(jié)束時(shí)發(fā)酵液中固含量大于12%，增加了原材料消耗及輔助設(shè)施、材料消耗，增加了發(fā)酵液下游處理的過(guò)濾、提純及廢水處理難度及成本。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的就在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種可使種子及發(fā)酵液粘度降低，固含量降低，并能被菌體充分利用，進(jìn)而優(yōu)化發(fā)酵過(guò)程，簡(jiǎn)化后處理過(guò)程，降低成本的紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基；
本發(fā)明的另一目的是提供一種利用上述培養(yǎng)基生產(chǎn)紅霉素的發(fā)酵方法。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的所采取的技術(shù)方案為:
一種紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生 產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基，包括一級(jí)種子培養(yǎng)基、二級(jí)種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征是:所述一級(jí)種子培養(yǎng)基、二級(jí)種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基中均含有蔗糖和玉米漿。
[0005]所述一級(jí)種子培養(yǎng)基組成為:蔗糖2~5%，玉米漿I~3%，硫酸銨0.1~0.5%，輕質(zhì)碳酸鈣0.5~0.9%，以重量百分比計(jì)。
[0006]所述二級(jí)種子培養(yǎng)基組成為:蔗糖0.8~1.4%，淀粉0.5~1.5%，尿素I~2.5%，玉米漿0.4~0.8%，硫酸銨0.1~0.4%，碳酸鈣0.5~0.9%，植物油0.2~0.5%，以重量百分比計(jì)。
[0007]所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:淀粉0.8~2%，蔗糖0.8~1.5%，尿素1.0~1.8%玉米漿0.5~1.0%,硫酸銨0.15~0.4%,植物油0.2~0.6%,碳酸鈣0.5~1.0%,按重量體積比計(jì)。
[0008]一種紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的發(fā)酵方法，其特征在于其工藝步驟為:將紅霉素鏈霉菌斜面孢子接到已滅菌好的如權(quán)利要求1所述的一級(jí)種子培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度32~36°C，通氣量1:0.4~0.8v/v/min并攪拌的條件下培養(yǎng)45~60hr，然后按接種量5~15%接入到滅菌好的如權(quán)利要求2所述的二級(jí)種子培養(yǎng)液中，在培養(yǎng)溫度32~36°C，通氣量1:0.8~1.2v/v/min并攪拌的條件下培養(yǎng)20~30hr，最后按照接種量10~20%接入到滅菌好的如權(quán)利要求3所述的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度30~35°C，通氣量1:0.8~1.3v/v/min并攪拌條件下培養(yǎng)160~180hr得到含有紅霉素的發(fā)酵液。
[0009]所述發(fā)酵過(guò)程中，控制溶氧在20%~50%。
[0010]所述發(fā)酵過(guò)程中需要補(bǔ)充含氮、碳和前體物質(zhì)的混合料，所述混合料組成為:尿素
0.5~1.0%，玉米漿0.2~0.5%，葡萄糖20~40% ;混合料的補(bǔ)入量為發(fā)酵液體積的25~35%。
[0011]所述發(fā)酵過(guò)程中需要補(bǔ)充植物油，控制發(fā)酵液中殘油始終保持在0.05~0.2%。
[0012]所述發(fā)酵過(guò)程中需要補(bǔ)充正丙醇，控制發(fā)酵液丙醇含量始終保持在0.02~
0.05%。
[0013]所述一級(jí)種子培養(yǎng)基、二級(jí)種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基的滅菌條件為:滅菌溫度118±2°C，保壓20分鐘。
[0014]本發(fā)明通過(guò)對(duì)一二級(jí)種子及發(fā)酵培養(yǎng)基的配方優(yōu)化，補(bǔ)料的配方優(yōu)化及發(fā)酵控制的過(guò)程優(yōu)化，降低了發(fā)酵原材料成本，提高了原材料利用率，改善了發(fā)酵過(guò)程中的供氧。
[0015]本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下技術(shù)優(yōu)勢(shì):
1、現(xiàn)有技術(shù)中種子及發(fā)酵培養(yǎng)基配方包含淀粉、豆粉、葡萄糖、糊精、玉米漿、硫酸銨、氯化鈉、碳酸鈣、植物油、消沫劑等共10種，造成發(fā)酵液中固含量40~50%，本發(fā)明發(fā)酵培養(yǎng)基配方中包含淀粉、蔗糖、葡萄糖、尿素、玉米漿、硫酸銨、碳酸鈣、植物油共8種，且大部分為可溶物料，使得發(fā)酵液 中固含量?jī)H為10~15%。
[0016]2、采用本發(fā)明的培養(yǎng)基后發(fā)酵時(shí)間控制在160~180小時(shí)，發(fā)酵單位與現(xiàn)有技術(shù)持平，發(fā)酵原材料成本降低25%以上。
[0017]3、降低了滅菌溫度，縮短了滅菌時(shí)間，降低了 32%的高溫蒸汽的使用量。現(xiàn)有技術(shù)的培養(yǎng)基滅菌溫度122±2°C，保壓30分鐘，而本發(fā)明滅菌溫度118±2°C，保壓20分鐘，大幅度減少了蒸汽的使用量。
[0018]4、采用本發(fā)明的烯基礎(chǔ)料配方，大大降低了發(fā)酵液的粘稠度，發(fā)酵前期的黏度降到了最低，增強(qiáng)了培養(yǎng)液的溶氧效果，從而對(duì)空氣設(shè)備及電機(jī)輸出功率要求大大降低，空氣流量的降低及攪拌輸出功率的降低，使發(fā)酵過(guò)程的能源消耗下降17~20%。
[0019]5、本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，培養(yǎng)基中固含量減少了 90%以上，大幅度降低了發(fā)酵原料成本，發(fā)酵結(jié)束時(shí)發(fā)酵液固含量降低了 70%以上，放罐發(fā)酵液中的固含量的降低使過(guò)濾速度大幅增加，增加了 40~50%。
[0020]6、本發(fā)明發(fā)酵結(jié)束后廢渣量減少了 70%，COD值高于15000mg/L的廢水量減少了60%，達(dá)到了節(jié)能、降耗，源頭治污、清潔生產(chǎn)的良好效果。
[0021]綜上所述，本發(fā)明通過(guò)采用玉米漿、尿素和蔗糖等介于遲效碳氮源和速效碳氮源之間的中效碳氮源代替原遲效碳氮源，且玉米漿、尿素和蔗糖能夠溶解于水，從而降低發(fā)酵液粘度，提高溶氧，增強(qiáng)其利用速度，尤其是在發(fā)酵后期能夠被充分利用，降低發(fā)酵結(jié)束時(shí)的固體物質(zhì)殘留，進(jìn)而大幅減少了菌渣量及廢水中BOD、COD的含量，達(dá)到了節(jié)能、降耗，源頭治污、清潔生產(chǎn)的良好效果。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下述實(shí)施例中斜面孢子是按常規(guī)方法將紅霉素鏈霉菌接到滅菌好的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)7~9天，得到紅霉素斜面孢子。
[0023]實(shí)施例1
I 一級(jí)種子培養(yǎng):將斜面孢子接種于滅菌好的一級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度33~35°C，通氣量1:0.4~0.6v/v/min,攪拌,培養(yǎng)45~60hr得一級(jí)種子液。
[0024]一級(jí)種子培養(yǎng)基組成:蔗糖2%，玉米漿1%，硫酸銨0.15%，碳酸鈣0.5% ；在118±2°C，保壓20分鐘。
[0025]2 二級(jí)種子培養(yǎng):將一級(jí)種子液按接種量15%接種于滅菌好的二級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度33~35°C，通氣量1: 1.0~1.2v/v/min,攪拌，培養(yǎng)24~26hr得二級(jí)種子液。
[0026]二級(jí)種子培養(yǎng)基組成:蔗糖1.4%，淀粉1.5%，尿素2.0%，玉米漿0.8%，硫酸銨0.4%，碳酸鈣0.8%，植物油0.5% ;在118±2°C，保壓20分鐘。
[0027] 3發(fā)酵培養(yǎng):將二級(jí)種子液按12%接種量接種于滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度30~33°C，通氣量1:0.8~1.0v/v/min,攪拌，發(fā)酵過(guò)程溶氧20%以上，培養(yǎng)15hr開始補(bǔ)入混合料、植物油、正丙醇，經(jīng)160~170hr培養(yǎng)得含有紅霉素的發(fā)酵液。
[0028]發(fā)酵培養(yǎng)基組成:淀粉1.0%，蔗糖0.8%，尿素1.0%玉米漿1.0%，硫酸銨0.4%，植物油0.2%，碳酸鈣0.5% ;在118±2°C，保壓20分鐘。
[0029]混合料組成:尿素0.5%，玉米漿0.5%，葡萄糖40%，在118 ± 2 °C，保壓20分鐘。發(fā)酵過(guò)程中需要補(bǔ)入發(fā)酵液體積的25~30%，流加補(bǔ)入。
[0030]正丙醇濃度30%，其補(bǔ)入量以始終控制發(fā)酵液中丙醇含量0.02~0.05%為宜。
[0031]植物油的補(bǔ)入量以控制發(fā)酵液中殘油0.05~0.2%為宜。
[0032]4放罐參數(shù):總糖0.5%，氨基氮8，沉降度8%，效價(jià)8250u/ml。
[0033]實(shí)施例2
I 一級(jí)種子培養(yǎng):將斜面孢子接種于滅菌好的一級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度34~360C，通氣量1:0.7~0.8v/v/min,攪拌，培養(yǎng)45~60hr得一級(jí)種子液。
[0034]一級(jí)種子培養(yǎng)基組成:蔗糖5.0%，玉米漿3.0%，硫酸銨0.5%，輕質(zhì)碳酸鈣0.7% ;在118±2°C，保壓20分鐘。
[0035]2 二級(jí)種子培養(yǎng):將一級(jí)種子液按接種量10%接種于滅菌好的二級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度32~34°C，通氣量1:0.8~1.0v/v/min,攪拌，培養(yǎng)20~24hr得二級(jí)種子液。
[0036]二級(jí)種子培養(yǎng)基組成:蔗糖0.8%，淀粉0.8%，尿素1.0%，玉米漿0.4%，硫酸銨0.1%，碳酸鈣0.5%，植物油0.2% ;在118±2°C，保壓20分鐘。
[0037]3發(fā)酵培養(yǎng):將二級(jí)種子液按20%接種量接種于滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)溫度33~35°C，通氣量1:1.0~1.lv/v/min，攪拌，發(fā)酵過(guò)程溶氧30%以上，培養(yǎng)20hr開始補(bǔ)入混合料、植物油、正丙醇，經(jīng)160~170hr培養(yǎng)得含有紅霉素的發(fā)酵液。
[0038]發(fā)酵培養(yǎng)基組成:淀粉2.0%，蔗糖1.5%，尿素1.8%玉米漿0.5%，硫酸銨0.15%，植物油0.6%，碳酸鈣1.0% ;在118±2°C，保壓20分鐘。
[0039]混合料組成:尿素1.0%，玉米漿0.2%，葡萄糖20%，混合滅菌。全程補(bǔ)入發(fā)酵液體積的30~35%,流加補(bǔ)入。
[0040]正丙醇濃度20%，控制發(fā)酵液中丙醇含量0.02~0.03%。[0041]植物油控制發(fā)酵液中殘油0.05~0.15%。
[0042]4放罐參數(shù):總糖0.8%，氨基氮6，沉降度12%，效價(jià)8320u/ml。
[0043]實(shí)施例3
I 一級(jí)種子培養(yǎng):將斜面孢子接種于滅菌好的一級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度32~34°C，通氣量1:0.6~0.7v/v/min,攪拌,培養(yǎng)45~60hr得一級(jí)種子液。
[0044]一級(jí)種子培養(yǎng)基組成:鹿糖3.3%，玉米漿2%，硫酸銨0.1%，輕質(zhì)碳酸鈣0.9% ;在118±2°C，保壓20分鐘。
[0045] 2 二級(jí)種子培養(yǎng):將一級(jí)種子液按接種量5%接種于滅菌好的二級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度34~36°C，通氣量1:1.0~1.lv/v/min，攪拌，培養(yǎng)26~30hr得二級(jí)種子液。
[0046]二級(jí)種子培養(yǎng)基組成:蔗糖1.2%，淀粉1%，尿素2.5%，玉米0.5%，硫酸銨0.25%，碳酸鈣0.9%，植物油0.3% ;在118±2°C，保壓20分鐘。
[0047]3發(fā)酵培養(yǎng):將二級(jí)種子液按15%接種量接種于滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)溫度33~35°C，通氣量1: 1.0~1.2v/v/min,攪拌，發(fā)酵過(guò)程溶氧30%~50%，培養(yǎng)20hr開始補(bǔ)入混合料、植物油、正丙醇，經(jīng)160~170hr培養(yǎng)得含有紅霉素的發(fā)酵液。
[0048]發(fā)酵培養(yǎng)基組成:淀粉0.8%，蔗糖1.2%，尿素1.2%玉米漿0.8%，硫酸銨0.3%，植物油0.5%，碳酸鈣0.6% ;在118±2°C，保壓20分鐘。
[0049]混合料組成:尿素0.7%，玉米漿0.35%，葡萄糖30%，混合滅菌。全程補(bǔ)入發(fā)酵液體積的25~30%，流加補(bǔ)入。
[0050]正丙醇濃度40%，控制發(fā)酵液中丙醇含量0.02~0.03%。
[0051]植物油控制發(fā)酵液中殘油0.05~0.15%。
[0052]4放罐參數(shù):總糖0.6%，氨基氮10，沉降度10%，效價(jià)8580u/ml。
[0053]對(duì)比實(shí)施例1一級(jí)種子培養(yǎng):將斜面孢子接種于滅菌好的一級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度35~36°C，通氣量1: 1.2~1.5v/v/min，攪拌，培養(yǎng)50~60hr得一級(jí)種子液。
[0054]一級(jí)種子培養(yǎng)基組成:淀粉2%，葡萄糖2.0%，糊精1.0%，黃豆餅粉2.0%，酵母粉
1.0%，硫酸銨0.4%，玉米漿0.4%，氯化鈉0.4%，碳酸鈣1.0%，豆油0.2% ;在122~124。。，保壓30分鐘。
[0055]2 二級(jí)種子培養(yǎng):將一級(jí)種子液按接種量15%接種于滅菌好的二級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度34~35°C，通氣量1: 1.2~1.5v/v/min,攪拌，培養(yǎng)26~28hr得二級(jí)種子液。
[0056]二級(jí)種子培養(yǎng)基組成:淀粉3.0%，葡萄糖2.0%，糊精1.0%，黃豆餅粉3.0%，酵母粉
0.5%，硫酸銨0.2%，玉米漿0.5%，氯化鈉0.2%，碳酸鈣0.8%，豆油0.2% ;在122~124°C，保壓30分鐘。
[0057]3發(fā)酵培養(yǎng):將二級(jí)種子液按20%接種量接種于滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)溫度32~34°C，通氣量1:1.1~1.4v/v/min，攪拌，發(fā)酵過(guò)程溶氧30%以上，培養(yǎng)20hr開始補(bǔ)入混合料、植物油、正丙醇，經(jīng)160~170hr培養(yǎng)得含有紅霉素的發(fā)酵液。
[0058]發(fā)酵培養(yǎng)基組成:淀粉2.0%，葡萄糖3.0%，糊精1.0%，黃豆餅粉3.5%，酵母粉
0.5%，硫酸銨0.2%，玉米漿0.4%，氯化鈉0.3%，碳酸鈣0.7%，豆油0.2% ;在122~124。。，保壓30分鐘。
[0059]混合料組成:黃豆餅粉3.0%，酵母粉3.0%，玉米漿1.5%，葡萄糖40%，在122~124°C，保壓30分鐘。發(fā)酵過(guò)程中需要補(bǔ)入發(fā)酵液體積的30~40%，流加補(bǔ)入。
[0060]正丙醇濃度40%，其補(bǔ)入量以始終控制發(fā)酵液中丙醇含量0.03~0.06%為宜。
[0061]植物油的補(bǔ)入量以控制發(fā)酵液中殘油0.06~0.08%為宜。
[0062]4放罐參 數(shù):總糖3.0%,氨基氮30，沉降度35%，效價(jià)8180u/ml。
【權(quán)利要求】
1.一種紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基，包括一級(jí)種子培養(yǎng)基、二級(jí)種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征是:所述一級(jí)種子培養(yǎng)基、二級(jí)種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基中均含有蔗糖和玉米漿。
2.按照權(quán)利要求1所述的紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基，其特征在于所述一級(jí)種子培養(yǎng)基組成為:蔗糖2~5%，玉米漿I~3%，硫酸銨0.1~0.5%，輕質(zhì)碳酸鈣0.5~0.9%，以重量百分比計(jì)。
3.按照權(quán)利要求1所述的紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基，其特征在于所述二級(jí)種子培養(yǎng)基組成為:蔗糖0.8~1.4%，淀粉0.5~1.5%，尿素I~2.5%，玉米漿0.4~0.8%，硫酸銨0.1~0.4%，碳酸鈣0.5~0.9%，植物油0.2~0.5%，以重量百分比計(jì)。
4.按照權(quán)利要求1所述的紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的培養(yǎng)基，其特征在于所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:淀粉0.8~2%，蔗糖0.8~1.5%，尿素1.0~1.8%玉米漿0.5~1.0%，硫酸銨0.15~0.4%，植物油0.2~0.6%，碳酸鈣0.5~1.0%，按重量體積比計(jì)。
5.一種紅霉素鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)紅霉素的發(fā)酵方法，其特征在于其工藝步驟為:將紅霉素鏈霉菌斜面孢子接到已滅菌好的如權(quán)利要求1所述的一級(jí)種子培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度32~36°C，通氣量1:0.4~0.8v/v/min并攪拌的條件下培養(yǎng)45~60hr，然后按接種量5~15%接入到滅菌好的如權(quán)利要求2所述的二級(jí)種子培養(yǎng)液中，在培養(yǎng)溫度32~36°C，通氣量1:0.8~1.2v/v/min并攪拌的條件下培養(yǎng)20~30hr，最后按照接種量10~20%接入到滅菌好的如權(quán)利要求3所述的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度30~35°C，通氣量1:0.8~1.3v/v/min并攪拌條件下培養(yǎng)160~180hr得到含有紅霉素的發(fā)酵液。
6.按照權(quán)利要求5所述的發(fā)酵方法，其特征在于所述發(fā)酵過(guò)程中，控制溶氧在20%~50%。
7.按照權(quán)利要求5所述的發(fā)酵方法，其特征在于所述發(fā)酵過(guò)程中需要補(bǔ)充含氮、碳和前體物質(zhì)的混合料，所述混合料組成為:尿素0.5~1.0%,玉米衆(zhòng)0.2~0.5%,葡萄糖20~40% ;混合料的補(bǔ)入量為發(fā)酵液體積的25~35%。
8.按照權(quán)利要求5所述的發(fā)酵方法，其特征在于所述發(fā)酵過(guò)程中需要補(bǔ)充植物油，控制發(fā)酵液中殘油始終保持在0.05~0.2%。
9.按照權(quán)利要求5所述的發(fā)酵方法，其特征在于所述發(fā)酵過(guò)程中需要補(bǔ)充正丙醇，控制發(fā)酵液丙醇含量始終保持在0.02~0.05%。
10.按照權(quán)利要求5所述的發(fā)酵方法，其特征在于所述一級(jí)種子培養(yǎng)基、二級(jí)種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基的滅菌條件為:滅菌溫度118±2°C，保壓20分鐘。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK103484407SQ201310442297
【公開日】2014年1月1日 申請(qǐng)日期:2013年9月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月26日
【發(fā)明者】郭海燕, 孫瑞君, 胡曉玲 申請(qǐng)人:寧夏啟元藥業(yè)有限公司