一種膠凍樣芽孢桿菌菌株及其在海藻生物肥料中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種膠凍樣芽孢桿菌菌株，其分類命名為膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus?mucilaginosus），已在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏編號(hào)為CGMCC?No.7549。本發(fā)明還涉及膠凍樣芽孢桿菌在制備海藻生物肥料中的應(yīng)用。本發(fā)明所述膠凍樣芽孢桿菌菌株具有較強(qiáng)的海藻降解能力，利用該菌株制備的海藻微生物肥料含有豐富的膠凍樣芽孢桿菌繁殖代謝產(chǎn)生的莢膜多糖（或胞外多糖）和由海藻成分經(jīng)生物發(fā)酵降解轉(zhuǎn)化的海藻酸、海藻寡糖、赤霉素（GA）、吲哚乙酸（IAA）等植物生長調(diào)節(jié)活性物質(zhì)，有效活菌數(shù)≥2.0×109CFU/ml，便于被作物直接吸收,肥效快，并且能有效地促進(jìn)植物高產(chǎn)、早熟，改善作物的品質(zhì)，是一種優(yōu)質(zhì)的有機(jī)食品專用肥料。
【專利說明】一種膠凍樣芽孢桿菌菌株及其在海藻生物肥料中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說，涉及一種膠凍樣芽孢桿菌菌株及其在海藻生物肥料中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]膠凍樣芽孢桿菌為大莢膜芽孢桿菌，革蘭氏染色陰性，莢膜多糖豐富，芽孢為橢圓形，能分解由硅鋁酸鹽和硅酸鹽組成的巖石礦物，因此也稱為硅酸鹽細(xì)菌。利用膠凍樣芽孢桿菌生產(chǎn)的微生物肥料，可對(duì)植物進(jìn)行葉面噴施和根部施肥，可促進(jìn)植株對(duì)土壤中磷鉀的吸收，減少植物病害的發(fā)生，提高產(chǎn)量，改善果實(shí)品質(zhì)，是目前廣泛應(yīng)用的微生物肥料中的一種重要功能菌。
[0003]海藻(Alga)是生長在海中的藻類，是植物界的隱花植物。它們一般被認(rèn)為是簡單的植物，主要特征為:無維管束組織，沒有真正根、莖、葉的分化現(xiàn)象；不開花，無果實(shí)和種子；生殖器官無特化的保護(hù)組織，常直接由單一細(xì)胞產(chǎn)生孢子或配子；以及無胚胎的形成。由于藻類的結(jié)構(gòu)簡單，所以有的植物學(xué)家將它跟菌類同歸于低等植物的“葉狀體植物群”。
[0004]海藻屬低等植物，種類繁多。根據(jù)海藻中所含色素的不同，可將其分為綠藻(如石莼)、褐藻(如海帶、馬尾藻、海藻、巨藻等)、藍(lán)藻(如束毛藻)、黃藻(如海球藻)、金藻(如鈣板藻)等。
[0005]褐藻是藻類植物中較高級(jí)的一個(gè)類群。褐藻的形狀和大小各異，從呈異絲體的附生藻(水云屬(Ectocarpus))到復(fù)雜、巨大的長I~100公尺的大型褐藻(海帶屬(Laminaria)、巨藻屬(Macrocystis)等)。巖藻是褐藻的一個(gè)類型，浮生(馬尾藻屬(Sargassum))或附生于巖石海岸,主要包括墨角藻屬(Fucus)、海藻屬(Ascophyllum)。
[0006]海藻肥料是以海洋植物海藻作為主要原料，經(jīng)科學(xué)加工制成的生物肥料，主要成分是從海藻中提取的有利于植物生長發(fā)育的天然生物活性物質(zhì)和海藻從海洋中吸收并富集在體內(nèi)的礦質(zhì)營養(yǎng)元素，包括海藻多糖、酚類多聚化合物、甘露醇、甜菜堿、植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)(細(xì)胞分裂素、赤霉素、生長素及脫落酸等)和氮、磷、鉀、鐵、硼、鑰、碘等微量元素。因此，海藻肥料具有營養(yǎng)豐富、活性強(qiáng)、易被吸收、可改良土壤、安全無公害等特點(diǎn)。由于具有上述一系列的優(yōu)點(diǎn)，海藻肥料正逐漸成為人們競相研發(fā)的熱點(diǎn)。
[0007]但是，在現(xiàn)有的海藻肥料生產(chǎn)技術(shù)中，其中的消化劑大多以碳酸氫鈉、氫氧化鈉以及無機(jī)酸為主，如中國發(fā)明專利CN98101040、CN03138729等，這些技術(shù)的缺點(diǎn)是，提取過程中過多地使用無機(jī)鹽、堿或酸，不但不能全面提取海藻中的營養(yǎng)成分，而且會(huì)對(duì)植物造成鹽害。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中傳統(tǒng)化學(xué)肥料和普通微生物肥料的不足，本發(fā)明的目的是提供一種膠凍樣芽孢桿菌菌株，利用篩選到的一種膠凍樣芽孢桿菌菌株制備高效的海藻生物肥料，該海藻生物肥料不僅可避免化學(xué)工藝對(duì)海藻活性成分的破壞，還可以更多地有效提取海藻中的活性成分，使產(chǎn)品的使用效果更好，應(yīng)用領(lǐng)域更廣。
[0009]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案之一，是提供一種膠凍樣芽孢桿菌JK-2菌株,所述菌株的分類命名為膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus),已于2013年05月04日在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏編號(hào)為CGMCCN0.7549，保藏單位地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編 100101。
[0010]優(yōu)選地，所述膠凍樣芽孢桿菌菌株的單個(gè)菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面濕潤光滑，有光澤，無色透明；芽孢位于孢囊中部，孢囊不膨大；菌體為桿狀(1.0-1.5cmX3.0-5.0um)，兩端鈍圓，菌體外有肥厚莢膜，革蘭氏反應(yīng)陰性。
[0011]本發(fā)明所采用的技術(shù)方案之二，是提供上述膠凍樣芽孢桿菌在制備海藻生物肥料中的應(yīng)用。
[0012]優(yōu)選地，所述海藻生物肥料是海藻生物葉面肥。
[0013]優(yōu)選地，所述海藻生物葉面肥中膠凍樣芽孢桿菌的有效活菌數(shù)≥2.0X IO9CFU/ml，有機(jī)質(zhì)≥35%。
[0014]本發(fā)明的有益效果:
[0015]本發(fā)明所述膠凍樣芽孢桿菌菌株具有較強(qiáng)的海藻降解能力，利用該菌株制備的海藻微生物肥料含有豐富的膠凍樣芽孢桿菌繁殖代謝產(chǎn)生的莢膜多糖(或胞外多糖)和由海藻成分經(jīng)生物發(fā)酵降解轉(zhuǎn)化的海藻酸、海藻寡糖、赤霉素(GA)、吲哚乙酸(IAA)等植物生長調(diào)節(jié)活性物質(zhì)，有效活菌數(shù)> 2.0X 109CFU/ml，便于被作物直接吸收，肥效快，并且能有效地促進(jìn)植物高產(chǎn)、早熟，改善作物的品質(zhì)，是一種優(yōu)質(zhì)的有機(jī)食品專用肥料。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0017](一)膠凍樣芽抱桿菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC N0.7549 的獲得方法:
[0018]從青島地區(qū)某大棚蔬菜土壤中取回土樣，按膠凍樣芽孢桿菌的篩選培養(yǎng)基和條件，篩選膠凍樣芽孢桿菌，并分離純化，最終獲得純菌株。
[0019]篩選培養(yǎng)基為娃酸鹽培養(yǎng)基:
[0020]蔗糖5g，
[0021]Na2HPO4 2g,
[0022]MgSO4.7H20 0.5g,
[0023]FeCl3 0.005g,
[0024]CaCO3 0.lg,
[0025]招土礦0.5g,
[0026]瓊脂10 ~20g，
[0027]水1000ml，
[0028]pH7.0 ~7.5
[0029]置于28°C下，培養(yǎng)3-4天；
[0030]通過顯微鏡觀察判斷是否為純菌株；
[0031 ]采用平板劃線法獲得純種。[0032](二)膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus) CGMCC N0.7549 的培養(yǎng)方法:[0033]培養(yǎng)溫度為:28-32°C
[0034]培養(yǎng)基組成為:
[0035]蔗糖:IOg
[0036]磷酸二氫鉀:0.5g
[0037]硫酸鎂:0.2g
[0038]氯化鈉:0.2g
[0039]碳酸鈣:1.0g
[0040]酵母粉:0.4g
[0041]瓊脂:15_20g
[0042]培養(yǎng)基配制方法:先將各成分溶入水中煮沸，加入瓊脂，使之溶解，分裝在三角瓶中，121°C，20min滅菌，倒平板，待凝固冷卻后接種。
[0043]將接種后的平板，置于28°C下，培養(yǎng)3-4天。
[0044](三)膠凍樣芽抱桿菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC N0.7549 的具體特征:
[0045]細(xì)菌形態(tài)特征:菌體為桿狀(1.0-1.5cmX3.0-5.0um),兩端鈍圓，革蘭氏反應(yīng)陰性。
[0046]芽孢形態(tài)特征:在硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基上易形成芽孢，芽孢位于孢囊中部，孢囊不膨大。菌體外有肥厚莢膜。
[0047]菌落形態(tài)特征:單個(gè)菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面濕潤光滑，有光澤，無色透明。
[0048]生理生化特性:見表1
[0049]表1
[0050]
【權(quán)利要求】
1.一種膠凍樣芽孢桿菌菌株，其特征在于，其分類命名為膠凍樣芽孢桿菌(Bacillusmucilaginosus),已于2013年05月04日在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏編號(hào)為CGMCC N0.7549。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠凍樣芽孢桿菌菌株，其特征在于，所述菌株的單個(gè)菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面濕潤光滑，有光澤，無色透明；芽孢位于孢囊中部，孢囊不膨大；菌體為桿狀(1.0-1.5cmX3.0-5.0um)，兩端鈍圓，菌體外有肥厚莢膜，革蘭氏反應(yīng)陰性。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠凍樣芽孢桿菌在制備海藻生物肥料中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的膠凍樣芽孢桿菌在制備海藻生物肥料中的應(yīng)用，其特征在于，所述的海藻生物肥料是海藻生物葉面肥。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠凍樣芽孢桿菌在制備海藻生物葉面肥中的應(yīng)用，其特征在于，所述海藻生物葉面肥中膠凍樣芽孢桿菌的有效活菌數(shù)≥2.0X 109CFU/ml。
【文檔編號(hào)】C12R1/07GK103710281SQ201310561440
【公開日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2013年11月12日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月12日
【發(fā)明者】李園園, 趙宏濤, 公春艷, 王鵬, 鞠培殿 申請(qǐng)人:青島明月藍(lán)海生物科技有限公司