肉與肉制品中豬源成分的檢測方法、牛源成分的檢測方法及羊源成分的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于檢測肉與肉制品中豬源成分的試劑盒,包括:如SEQ ID No.1所示的上游引物和如SEQ ID No.2所示的下游引物。本發(fā)明還提供了一種肉與肉制品中豬源成分的檢測方法。本發(fā)明提供了一種用于檢測牛源成分的試劑盒,包括:如SEQ ID No.3所示的上游引物和如SEQ ID No.4所示的下游引物。本發(fā)明還提供了一種牛源成分的檢測方法。本發(fā)明提供了一種用于檢測羊源成分的試劑盒,包括:如SEQ ID No.5所示的上游引物和如SEQ ID No.6所示的下游引物。本發(fā)明還提供了一種羊源成分的檢測方法。本發(fā)明具有較高的特異性,能夠保證檢測方法的靈敏度和準確性。
【專利說明】肉與肉制品中豬源成分的檢測方法、牛源成分的檢測方法 及羊源成分的檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于食品檢測【技術領域】,尤其涉及一種肉與肉制品中豬源成分的檢測方 法、牛源成分的檢測方法及羊源成分的檢測方法。
【背景技術】
[0002] 隨著市場經(jīng)濟的不斷深入發(fā)展,部分不法商販為了謀求不正當利益,在肉或肉制 品中摻雜其他價格便宜的肉種,在肉及肉制品市場出現(xiàn)了一種以次充好、以假亂真的現(xiàn)象。 肉或肉制品中摻有標稱以外的其他價格便宜的動物源性成分,有的甚至全部為標稱以外的 其他價格便宜的動物源性成分,這極大地損害了消費者的利益,擾亂了流通市場秩序和健 康發(fā)展,同時也對民族宗教信仰造成一定的潛在沖突。
[0003] 傳統(tǒng)一般采用感官方法對肉或肉制品的色澤、氣味、組織形狀等參數(shù)進行判斷,但 是其可靠性較差,尤其是添加了色素和芳香劑等添加劑或者經(jīng)過其它加工處理的肉及肉制 品而言,感官方法判斷準確性更低。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 有鑒于此,本發(fā)明的目的在于提供一種肉與肉制品中豬源成分的檢測方法、牛源 成分的檢測方法及羊源成分的檢測方法,本發(fā)明提供的檢測方法結果準確、可靠。
[0005] 本發(fā)明提供了一種用于檢測肉與肉制品中豬源成分的試劑盒,包括:如SEQ ID No. 1所示的上游引物和如SEQ ID No. 2所示的下游引物。
[0006] 本發(fā)明以Genbank上已經(jīng)登錄公布的所有豬的Cytb基因序列為基礎,運用生物軟 件DnaStar進行序列比對分析,找出來自不同國家、地區(qū)、品種豬、的Cytb基因種內(nèi)保守序 列區(qū)域,用于設計上下游擴增引物,將所設計出的各物種PCR擴增引物進行再次比對,排除 種間交叉性,保證擴增的特異性。同時,找出豬的Cytb基因序列中共有的同源序列,設計哺 乳動物檢測引物,用以對各檢測體系進行監(jiān)控。最后,將獲得的各物種上下游擴增引物序列 提交Gembank,進行Blast確認,以確保所設計的引物序列對目前已經(jīng)公布的DNA序列沒有 非特異性檢測擴增,并選定上游引物和下游引物。本發(fā)明選用特定的上游引物和下游引物 用于檢測肉與肉制品中的豬源成分,其具有良好的特異性,從而能夠?qū)崿F(xiàn)對豬源成分的檢 測。
[0007] 以如SEQ ID No. 1所示的上游引物和如SEQ ID No. 2所示的下游引物進行PCR擴 增,其擴增位點及擴增片段大小如表1所示:
[0008] 表1豬源成分的擴增位點及擴增片段大小
[0009]
【權利要求】
1. 一種用于檢測肉與肉制品中豬源成分的試劑盒,其特征在于,包括:如SEQ ID No. 1 所示的上游引物和如SEQ ID No. 2所示的下游引物。
2. -種肉與肉制品中豬源成分的檢測方法,包括以下步驟: 提取肉樣品或肉制品樣品的DNA ; 以所述DNA為模板進行PCR擴增,所述PCR擴增反應體系中的上游引物如SEQ ID No. 1 所示,下游引物如SEQ ID No. 2所示; 對所述PCR擴增產(chǎn)物進行電泳,鑒定所述擴增產(chǎn)物。
3. 根據(jù)權利要求2所述的檢測方法,其特征在于,還包括: 對所述擴增產(chǎn)物進行酶切。
4. 一種用于檢測肉與肉制品中牛源成分的試劑盒,其特征在于,包括:如SEQ ID No. 3 所示的上游引物和如SEQ ID No. 4所示的下游引物。
5. -種肉與肉制品中牛源成分的檢測方法,包括以下步驟: 提取肉樣品或肉制品樣品的DNA ; 以所述DNA為模板進行PCR擴增,所述PCR擴增反應體系中的上游引物如SEQ ID No. 3 所示,下游引物如SEQ ID No. 4所示; 對所述PCR擴增產(chǎn)物進行電泳,鑒定所述擴增產(chǎn)物。
6. 根據(jù)權利要求5所述的檢測方法,其特征在于,還包括: 對所述擴增產(chǎn)物進行酶切。
7. -種用于檢測肉與肉制品中羊源成分的試劑盒,其特征在于,包括:如SEQ ID No. 5 所示的上游引物和如SEQ ID No. 6所示的下游引物。
8. -種肉與肉制品中羊源成分的檢測方法,包括以下步驟: 提取肉樣品或肉制品樣品的DNA ; 以所述DNA為模板進行PCR擴增,所述PCR擴增反應體系中的上游引物如SEQ ID No. 5 所示,下游引物如SEQ ID No. 6所示; 對所述PCR擴增產(chǎn)物進行電泳,鑒定所述擴增產(chǎn)物。
9. 根據(jù)權利要求8所述的檢測方法,其特征在于,還包括: 對所述擴增產(chǎn)物進行酶切。
【文檔編號】C12Q1/68GK104263836SQ201410532343
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年10月10日 優(yōu)先權日:2014年10月10日
【發(fā)明者】侯曉林, 王蕾, 鄭志明, 陸彥, 孫英健, 姚華, 張永紅 申請人:北京農(nóng)學院