本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料加工領(lǐng)域，尤其涉及一種提高黃顙魚免疫力的低磷飼料及其制備方法。
背景技術(shù)：
：黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)其肉質(zhì)鮮美、少刺無鱗、營養(yǎng)豐富，廣受消費(fèi)者青睞，是我國重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖魚類。近年來，黃顙魚因其價(jià)格穩(wěn)定和效益可觀，目前在我國的養(yǎng)殖面積越來越大。據(jù)中國2016年漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒報(bào)道，黃顙魚的養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)到了355,725噸，較2014年的259,669噸，凈增60,056噸，增幅為16.88％，并且表現(xiàn)出持續(xù)增長的趨勢。但是，現(xiàn)在許多養(yǎng)殖戶為了增產(chǎn)，一般向黃顙魚投喂商品飼料，但是，現(xiàn)在商品飼料中磷的含量一般較高，而黃顙魚對飼料磷的利用效率低，飼料的大量的磷都將會(huì)排入養(yǎng)殖水體，當(dāng)養(yǎng)殖水體中磷含量過高時(shí)，很容易引起水體富營養(yǎng)化，導(dǎo)致環(huán)境的污染。另外，隨著黃顙魚精養(yǎng)模式的推廣、養(yǎng)殖密度的變大致使黃顙魚免疫力下降，從而造成車輪蟲、裂頭病、腹水病、氣泡病(魚苗階段)、細(xì)菌性敗血癥、爛身病等黃顙魚病非常嚴(yán)重。治療黃顙魚病一般采用化學(xué)藥物防治法與疫苗預(yù)防法，化學(xué)藥物防治法的缺點(diǎn)是藥物殘留嚴(yán)重、容易產(chǎn)生抗藥性；疫苗預(yù)防法雖然不易出現(xiàn)抗藥性但是其特異性強(qiáng)，只能針對某一種魚病，很難預(yù)防多種魚病，而且將疫苗免疫黃顙魚的操作繁瑣，因此，疫苗預(yù)防法存在較大局限性。針對黃顙魚免疫力低的問題，現(xiàn)許多水產(chǎn)養(yǎng)殖的研究者進(jìn)行了大量的研究，現(xiàn)許多科研者通過在飼料中添加中草藥來提高黃顙魚的免疫力，其中中草藥包括如中國發(fā)明專利(申請公布號CN104522399A申請公布日2015.04.22)中公開的茴香和陳皮，以及如中國發(fā)明專利(授權(quán)公告號CN101507465B授權(quán)公告日2012.01.11)中公開的的蘆薈凍干粉。茴香、陳皮以及蘆薈凍干粉是中草藥粉劑，這種中草藥粉劑既可以增強(qiáng)黃顙魚的免疫力還具有誘食作用，但是這種中草藥的作用緩慢，而且效力不強(qiáng)，對于提高黃顙魚的免疫力效果不明顯。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為解決以上問題，本發(fā)明提供一種提高黃顙魚免疫力的低磷飼料及其制備方法，該低磷飼料不僅能明顯提高黃顙魚的免疫力而且能提高黃顙魚對磷的利用率。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種提高黃顙魚免疫力的低磷飼料，按重量百分比包括如下組分：豆粕15～25％、菜粕20～30％、魚粉10～20％、棉粕5～15％、小麥粉5～15％、大豆油3～5％、無磷礦物鹽預(yù)混物2.05～2.5％、維生素預(yù)混物0.6～1.4％、DL-蛋氨酸0.2～0.4％、L-精氨酸0.3～0.6％、維生素C0.4～0.8％、氯化膽堿0.5％、三氧化二釔0.1％、大蒜素0.3～0.6％及沸石粉2.85～7.6％，所述提高魚體免疫力的低磷飼料還包括維生素D3，每千克飼料中維生素D3的添加量為300～6000IU。進(jìn)一步地，按重量百分比包括如下組分：豆粕15～20％、菜粕25～30％、魚粉15～20％、棉粕5～12％、小麥粉12～14％、大豆油4～5％、無磷礦物鹽預(yù)混物2.05～2.45％、維生素預(yù)混物0.6～1.2％、DL-蛋氨酸0.3～0.35％、L-精氨酸0.25～0.5％、維生素C0.5～0.6％、氯化膽堿0.5％、三氧化二釔0.1％、大蒜素0.5％及沸石粉5.8～6.2％，所述提高魚體免疫力的低磷飼料還包括維生素D3，每千克飼料中維生素D3的添加量為1000～2000IU。采用這一比例的低磷飼料，而且優(yōu)選維生素D3的添加量為1000～2000IU，可顯著提高黃顙魚對磷的利用率以及明顯增強(qiáng)黃顙魚免疫力提高成活率。進(jìn)一步地，所述提高魚體免疫力的低磷飼料，按重量百分比包括如下組分：豆粕20％、菜粕25％、魚粉15％、棉粕12％、小麥粉12％、大豆油4％、無磷礦物鹽預(yù)混物2.45％、維生素預(yù)混物1.2％、DL-蛋氨酸0.35％、L-精氨酸0.5％、維生素C0.6％、氯化膽堿0.5％、三氧化二釔0.1％、大蒜素0.5％及沸石粉5.8％，每千克飼料中維生素D3的添加量為2000IU。維生素D3的最優(yōu)添加量為2000IU時(shí)，其成活率為94％，增重率為187％，魚體磷的含量為28.08％。進(jìn)一步地，所述無磷礦物鹽預(yù)混物包括NaCl、MgSO4·7H2O、Na2SO4、K2SO4、CaCl2·2H2O、FeSO4、乳酸鈣、ZnSO4·7H2O、MnSO4·4H2O、CuSO4·5H2O、CoSO4以及KI。進(jìn)一步地，所述維生素預(yù)混物包括維生素A、維生素E、維生素K3、尼克酸、維生素B6、維生素B1、核黃素、泛酸鈣、生物素、葉酸、維生素B12、抗壞血酸以及肌醇。一種提高黃顙魚免疫力的低磷飼料的制備方法，其特征在于：包括混勻、調(diào)質(zhì)以及制粒三個(gè)步驟，具體過程為：1)混勻：按比例稱取飼料各原料：豆粕15～25％、菜粕20～30％、魚粉10～20％、棉粕5～15％、小麥粉5～15％、大豆油3～5％、無磷礦物鹽預(yù)混物2.05～2.5％、維生素預(yù)混物0.6～1.4％、DL-蛋氨酸0.2～0.4％、L-精氨酸0.3～0.6％、維生素C0.4～0.8％、氯化膽堿0.5％、三氧化二釔0.1％、大蒜素0.3～0.6％及沸石粉2.85～7.6％，并且向飼料中添加維生素D3，每千克飼料中維生素D3的添加量為300～6000IU；將各組分初步粉碎，混勻，然后進(jìn)一步超微粉碎得到粉末狀混合物料；2)調(diào)質(zhì)：向混合物料中通入水蒸氣，調(diào)質(zhì)；3)制粒：將調(diào)質(zhì)完成的物料加入擠壓膨化制粒機(jī)進(jìn)行質(zhì)粒，干燥，冷卻后保存。通過將飼料原料超微粉碎，不僅能夠使各物料混合更加均勻，而且超細(xì)的物料更加有利于黃顙魚吸收。進(jìn)一步地，所述步驟2)中的調(diào)質(zhì)溫度為90～100℃，調(diào)質(zhì)時(shí)間為5～10分鐘。進(jìn)一步地，所述步驟3)中制粒溫度選用95～100℃，干燥溫度選用90～100℃。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：1，通過在飼料中添加維生素D3提高黃顙魚腸上皮和腎臟中的鈉磷協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)載體蛋白基因的表達(dá)，進(jìn)而提高了黃顙魚對磷吸收，同時(shí)降低磷排放，有助于減少養(yǎng)殖水體中磷含量，防止水體富營養(yǎng)化而造成環(huán)境的污染。除此之外，添加維生素D3能顯著提高血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和降低血清丙二醛(MDA)活性，進(jìn)而增強(qiáng)黃顙魚免疫力，提高了黃顙魚的成活率，需要特別注意的是：維生素D3的添加量需要嚴(yán)格控制，當(dāng)維生素D3的添加量在300IU以下，對魚體的影響作用太小，當(dāng)維生素D3的添加量在6000IU以上，不僅不會(huì)促進(jìn)魚體生長，增加魚體內(nèi)磷的含量，反而會(huì)降低魚體生長，減少魚體內(nèi)磷的含量，這是因?yàn)楦邉┝烤S生素D3促進(jìn)了鈣的吸收，降低了磷的吸收，打破了魚體體內(nèi)鈣磷的動(dòng)態(tài)平衡，所以對生長產(chǎn)生抑制，同時(shí)降低了魚體內(nèi)磷的含量。2，通過在飼料中添加無磷礦物鹽預(yù)混物，其無磷礦物鹽預(yù)混物中包括各種的金屬礦物元素，這種金屬礦物元素可以促進(jìn)魚的成長以及參與魚體內(nèi)各種代謝反應(yīng)，比如，其中Ca能促進(jìn)魚的骨骼成長，Zn、Mn、K、Cu、Na參與魚體內(nèi)蛋白質(zhì)，脂類，碳水化合物代謝。3，通過在飼料中添加維生素預(yù)混物，其中的維生素可以滿足魚體對維生素的營養(yǎng)需求，促進(jìn)生長，而且還能一定程度上提高魚體的免疫力，提高成活率。4，將本發(fā)明中的飼料養(yǎng)殖黃顙魚，與對照組相比，其增重率，成活率，魚體磷的含量均有較大的提高，對于養(yǎng)殖黃顙魚的養(yǎng)殖戶來說，具有重要的意義。具體實(shí)施方式為更好地理解本發(fā)明，以下將結(jié)合具體實(shí)例對發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說明。實(shí)施例1提高黃顙魚免疫力的低磷飼料的制備方法，包括以下步驟：1)按比例稱取飼料各原料：原料的具體配方如表1所示；將各組分初步粉碎，混勻，然后進(jìn)一步超微粉碎得到粉末狀混合物料；2)調(diào)質(zhì)：向混合物料中通入水蒸氣，調(diào)質(zhì)；調(diào)質(zhì)溫度為96℃，調(diào)質(zhì)時(shí)間為5分鐘。3)制粒：將調(diào)質(zhì)完成的物料加入擠壓膨化制粒機(jī)進(jìn)行質(zhì)粒，干燥，冷卻后保存，制粒溫度選用96℃，干燥溫度選用94℃。其中，無磷礦物鹽預(yù)混物包括NaCl、MgSO4·7H2O、Na2SO4、K2SO4、CaCl2·2H2O、FeSO4、乳酸鈣、ZnSO4·7H2O、MnSO4·4H2O、CuSO4·5H2O、CoSO4以及KI。每千克飼料中含有NaCl275mg,MgSO4·7H2O4125mg,Na2SO46270mg,K2SO45638mg,CaCl2·2H2O3218mg,FeSO4688mg,乳酸鈣963mg,ZnSO4·7H2O97mg,MnSO4·4H2O45mg,CuSO4·5H2O8.53mg,CoSO40.28mg,KI0.83mg；其中，維生素預(yù)混物包括維生素A、維生素E、維生素K3、尼克酸、維生素B6、維生素B1、核黃素、泛酸鈣、生物素、葉酸、維生素B12、抗壞血酸以及肌醇。每千克飼料中含有維生素A5500IU，維生素E50IU，維生素K310mg，尼克酸100mg，維生素B620mg，維生素B120mg，核黃素20mg，泛酸鈣50mg，生物素0.1mg，葉酸5mg，維生素B1220mg，抗壞血酸100mg，肌醇100mg。表1實(shí)施例2各組飼料對黃顙魚免疫力以及磷儲(chǔ)積率的影響1，分組：參照實(shí)施例1的分組：2，飼養(yǎng)方法：實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)黃顙魚的環(huán)境：試驗(yàn)在華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖基地循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行，選擇大小均一、體格健壯的黃顙魚幼魚(12±1.23g)，每缸40尾，每組3缸。對照組投喂本發(fā)明中的低磷環(huán)保飼料，另5個(gè)實(shí)驗(yàn)組(A、B、C、D、E組)缸內(nèi)的黃顙魚投喂本發(fā)明中的強(qiáng)免疫低磷飼料。每天于8:30和15:30投喂兩次，飽食投喂，養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)8周，每天投喂前換去1/3的水。試驗(yàn)期間溫度為25.3±0.5℃，溶氧為6.59±0.15mg/L，pH為8.23±0.11，NH4+-N為0.12±0.05mg/L，NO3--N為5.3±0.15mg/L，NO2--N為0.012±0.015mg/L，水循環(huán)速度約為3.5L/min。3，數(shù)據(jù)采集，結(jié)果如表2所示：3.1，增重率：計(jì)算方式：增重率％(WG％)＝100×(終末體重-初始體重)/初始體重)3.2，成活率計(jì)算方式：成活率％(Survivalrate％)＝100％×存活的魚數(shù)/總的魚數(shù)3.3，魚體磷的含量表2對照組ABCDE增重率％152153.1158.7187168.4156.3成活率％626485949083魚體磷的含量g/Kg21.521.6826.3528.0822.2422.14，研究維生素D3對黃顙魚的Slc34a2a1和Slc34a2a2基因的表達(dá)影響試驗(yàn)：其中Slc34a2a1和Slc34a2a2為小腸上皮細(xì)胞中鈉磷轉(zhuǎn)運(yùn)載體蛋白基因，鈉磷轉(zhuǎn)運(yùn)載體蛋白基因調(diào)控黃顙魚小腸對磷的吸收。方法：在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后采集各組黃顙魚的腸，去除脂肪后，用生理鹽水漂洗后放入液氮速凍，后保存于-80℃待用。提取腸中總RNA并反轉(zhuǎn)錄，然后用熒光定量PCR將兩組腸樣品進(jìn)行Slc34a2a1和Slc34a2相對定量表達(dá)分析。與對照組相比，A組中的Slc34a2a1的表達(dá)量為對照組的1.2倍，B組中的Slc34a2的表達(dá)量為對照組的2.1倍，C組中Slc34a2的表達(dá)量為對照組的2.9倍。結(jié)合表2中魚體磷的含量，與對照組相比，A～E組的這種飼料有助于提高黃顙魚腸Slc34a2a1和Slc34a2基因的表達(dá)，進(jìn)而提高了黃顙魚對磷的吸收與利用。5，研究VD3對黃顙魚的免疫力影響試驗(yàn)：方法：在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后采集各組黃顙魚的血清，測定各組血清超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)的活性以及肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、肝臟脂質(zhì)過氧化物(LPO)及肝臟丙二醛(MDA)以及肝臟過氧化氫酶(CAT)的含量。結(jié)果如表3所示，表3血清SOD活性在C組達(dá)到最高水平；各實(shí)驗(yàn)組血清MDA活性顯著低于對照組，且個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間無顯著差異，血清MDA活性在C組達(dá)到最低水平。實(shí)驗(yàn)組肝臟SOD活性顯著高于對照組，且在各實(shí)驗(yàn)組無顯著差異；肝臟LPO水平以對照組較高，其它組無顯著差異；肝臟CAT活性在對照組較高；飼料中添加VD3對肝臟MDA活性影響不顯著。以上表明，添加300～6000IU/kg的維生素D3能提高肝臟SOD和血清SOD的活性，并且降低血清丙二醛(MDA)的活性，降低肝臟脂質(zhì)過氧化化物(LPO)水平，進(jìn)而有助于提高黃顙魚的抗氧化能力，即增強(qiáng)黃顙魚的免疫力，進(jìn)而提高黃顙魚的成活率。以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。當(dāng)前第1頁1 2 3