專利名稱：銀杏葉提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然植物藥用成份的提取技術(shù)，具體地說(shuō)是一種銀杏葉提取物的制備方法。
銀杏是世界上最古老的樹(shù)種之一，被譽(yù)為“活化石”，銀杏葉是一種重要的藥用、保健食品原料，它的提取物(GBE，Egb，Extract of Ginkgo，biloba)具有相當(dāng)強(qiáng)的抗氧化作用，能清除生物體內(nèi)過(guò)剩的自由基，陽(yáng)止體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化，提高機(jī)體免疫力，延緩衰老等功能，近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外特別是德國(guó)、日本、美國(guó)、法國(guó)等國(guó)家對(duì)銀杏葉中的化學(xué)成份，分離方法進(jìn)行了大量的研究，取得了較大進(jìn)展，具有代表性的是用溶劑萃取的方法制備銀杏葉提取物，如德國(guó)Sehwabe，F(xiàn)laschman藥廠，主要為銀杏葉干粗粉，60％丙酮抽提，壓濾以CCl4脫脂，丙酮水層用硫酸氨飽和，用甲乙酮提取，提取液減壓濃縮后配成一定濃度的乙醇溶液，加適量Pb(OH)2過(guò)濾，濾液濃縮后再以硫酸氨飽和，甲乙酮提取，提取液干燥濃縮后以乙醇精制再濃縮干燥得銀杏(GBE)提取物(見(jiàn)德國(guó)專利ED2117429.1767098)。此種方法，使用的有機(jī)、無(wú)機(jī)化學(xué)介質(zhì)多，工藝復(fù)雜，成本高，且易造成殘留影響產(chǎn)品的質(zhì)量。目前國(guó)內(nèi)的銀杏葉提取物的生產(chǎn)技術(shù)，主要是采用水或醇類溶劑提取，再經(jīng)大孔樹(shù)脂吸附的方式，(中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?4114835.1)，但其提取得率低，所得提取物含量也不高。
本發(fā)明的目的在于提供一種高提取得率和高提取物有效成分含量的銀杏葉提取物的制備方法。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案它主要包括以下步驟(a)銀杏葉用40％-95％乙醇或40％-100％甲醇或40％-100％丙酮提??；(b)取提取液濃縮回收乙醇或甲醇或丙酮；(c)濃縮液稀釋冷卻沉降；(d)上清液進(jìn)苯乙烯型大孔吸附樹(shù)脂柱吸附；(e)用醇類或丙酮溶液洗脫；(f)洗脫液減壓濃縮干燥。
在上述方法中步驟(c)所述的濃縮液稀釋劑可以是水或純化水；在上述方法中所述的冷卻溫度可以在20℃以下，-1℃以上；在上述方法中步驟(a)中所述的是用浸漬提取，在一定溫度下進(jìn)行，溫度區(qū)間可以取常溫至80℃；在上述方法中步驟(c)也可以為濃縮液稀釋后粗分離，再稀釋，冷卻自然沉降；在上述方法中步驟(e)還可以采用一次洗脫方式，洗脫劑濃度可以是30％-95％；在上述方法中步驟(e)可以采用梯度洗脫方式，而洗脫劑的濃度第一次可以是0％-30％；第二次可以是40％-95％；在上述方法中步驟(f)洗脫液減壓濃縮溫度為小于75℃。
本發(fā)明的一種銀杏葉提取物的制備方法所用的介質(zhì)沒(méi)有或基本沒(méi)有有害物質(zhì)殘留，工藝控制容易，提取得率高，產(chǎn)品有效物含量高，特別是白果內(nèi)酯含量高，達(dá)3.5％以上，品質(zhì)穩(wěn)定。
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，但本發(fā)明也不僅限于實(shí)施例的內(nèi)容。
實(shí)施例一取銀杏葉100kg，用40％乙醇12、10、10倍量(是指原料重量與溶劑體積比，續(xù)實(shí)施例與此相同)。80℃浸漬攪拌提取三次，每次2小時(shí)，放出提取液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的水稀釋，藥液經(jīng)粗分離后再加入5倍量的純化水在0℃或者-1℃下靜置沉降。取上清液過(guò)苯乙烯型AB-8大孔吸附樹(shù)脂，用2倍樹(shù)脂體積的水洗，用20％的乙醇洗脫后，樹(shù)脂再用70％的乙醇洗脫，收集得洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液減壓濃縮，然后減壓干燥，控制溫度≤75℃，得含銀杏黃酮醇苷26.5％，銀杏萜內(nèi)酯8.5％，其中白果內(nèi)酯高達(dá)4.2％的銀杏葉提取物2.4kg。
實(shí)施例二取銀杏葉200kg粉碎成粗粉，用75％乙醇10、6、5倍量，70℃浸提三次，每次3小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入8倍量的純化水稀釋，藥液經(jīng)粗分離后再加純化水定容至1600L，于溫度20℃靜置沉降。取上清液過(guò)DM-130型大孔吸附樹(shù)脂柱(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用30％的乙醇洗脫后，用95％的乙醇洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液小于75℃溫度減壓濃縮，然后噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥28％，銀杏萜內(nèi)酯≥9％其中白果內(nèi)酯高達(dá)4.5％的銀杏葉提取物4.2kg。
實(shí)施例三取銀杏葉200kg粉碎成小于1cm2的碎片，用40％丙酮15、14、13倍量，65℃浸提三次，每次3小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入8倍量的純化水稀釋，在20℃下靜置。取上清液過(guò)AB-8型大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用75％的丙酮洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液減壓濃縮，然后噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥8％的銀杏葉提取物4.6kg。
實(shí)施例四取銀杏葉200kg，用40％甲醇16、15、14倍，70℃浸提三次，每次3小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入8倍量的自來(lái)水稀釋，在17℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)DM-130，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用75％的甲醇洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，然后噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物5.5kg。
實(shí)施例五取銀杏葉500kg粉碎成粗粉，用85％乙醇8、6、5倍，55℃攪拌浸提三次，每次3小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入12倍量的純化水稀釋，在7℃下靜置。取上清液過(guò)濾后再過(guò)D101型大孔吸附樹(shù)脂柱(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用75％的乙醇洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再用95％的乙醇再生后重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，然后噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物13.5kg。
實(shí)施例六取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用95％乙醇5、3、2倍，60℃浸提三次，每次3小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入10倍量的純化水稀釋，在10℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)DM-130，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用75％的乙醇洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再用95％的乙醇再生后重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，然后在≤75℃減壓干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥10％的銀杏葉提取物26kg。
實(shí)施例七取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用85％甲醇8、6、5倍，常溫?cái)嚢杞崛?，每?小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入10倍量的純化水稀釋，在10℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)D-101A，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用40％的甲醇洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，然后在≤75℃減壓干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物23kg。
實(shí)施例八取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用100％甲醇8、6、5倍，50℃浸提三次，每次3小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的自來(lái)水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的自來(lái)水?dāng)噭蚝螅?℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)HPD-600，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用95％的乙醇洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，然后在≤75℃減壓干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物29kg。
實(shí)施例九取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用70％丙酮7、6、5倍，80℃浸提三次，每次2小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的純化水?dāng)噭蚝螅?℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)D-140，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用95％的丙酮洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，然后在≤75℃減壓干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物27kg。
實(shí)施例十取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用85％丙酮12、9、9倍，常溫?cái)嚢杞崛?，每?小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的純化水?dāng)噭蚝?，?0℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)ADS-17，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用40％的丙酮洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物25kg。
實(shí)施例十一取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用95％丙酮10、8、6倍，常溫?cái)嚢杞崛?，每?小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的純化水?dāng)噭蚝?，?℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)ADS-16，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用75％的丙酮洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物26kg。
實(shí)施例十二取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用100％丙酮8、6、6倍，60℃浸提三次，每次2小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的純化水?dāng)噭蚝螅?℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)LSA-20，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用70％的甲醇洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物27kg。
實(shí)施例十三取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用95％甲醇10、8、6倍，常溫?cái)嚢杞崛危看?小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入10倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，在10℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)HPD-600，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用40％的丙酮洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物24kg。
實(shí)施例十四取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用95％工業(yè)乙醇8、8、7倍，50℃浸提三次，每次3小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的純化水?dāng)噭蚝?，?℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)ADS-17，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用95％的甲醇洗脫，收集洗脫液。樹(shù)脂再生后可重復(fù)使用。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，≤75℃減壓濃縮干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物28kg。
實(shí)施例十五取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用90％工業(yè)乙醇12、12、10倍，80℃浸提三次，每次2小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的純化水?dāng)噭蚝?，?℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)HPD-450，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用75％的乙醇洗脫，收集洗脫液。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物25kg。
實(shí)施例十六取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用95％藥用乙醇8、6、4倍，常溫?cái)嚢杞崛?，每?小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的純化水?dāng)噭蚝?，?℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)DA101D，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用75％的乙醇洗脫，收集洗脫液。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥6％的銀杏葉提取物32kg。
實(shí)施例十七取銀杏葉1000kg粉碎成粗粉，用食用乙醇6、5、4倍，65℃浸提三次，每次2小時(shí)，放出浸提液，合并濃縮至小體積，加入5倍量的純化水稀釋，經(jīng)粗分離后，再加5倍量的純化水?dāng)噭蚝螅?0℃下靜置。取上清液過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(苯乙烯型吸附樹(shù)脂)D-101，用2倍樹(shù)脂體積的純化水洗，用80％的乙醇洗脫，收集洗脫液。洗脫液在≤75℃減壓濃縮，噴霧干燥，得含黃酮醇苷≥24％，銀杏萜內(nèi)酯≥8％的銀杏葉提取物29kg。
權(quán)利要求
1.一種銀杏葉提取物的制備方法，它主要包括下列步驟(a)銀杏葉用40％-95％乙醇或40％-100％甲醇或40％-100％丙酮提取；(b)取提取液濃縮回收乙醇或甲醇或丙酮；(c)濃縮液稀釋冷卻沉降；(d)上清液進(jìn)苯乙烯型大孔吸附樹(shù)脂柱吸附；(e)用醇類或丙酮溶液洗脫；(f)洗脫液減壓濃縮干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于步驟(c)所述的濃縮液稀釋劑為水或純化水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于步驟(c)所述的冷卻溫度為20℃以下。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于所述的洗脫劑為甲醇或乙醇或丙酮等。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于步驟(a)是浸漬提取，溫度區(qū)間為常溫至80℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于步驟(c)為濃縮液稀釋后粗分離，再稀釋，冷卻自然沉降。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于步驟(e)為一次洗脫方式，洗脫劑濃度為30％-95％。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于步驟(e)為梯度洗脫方式，洗脫劑第一次洗脫濃度為0％-30％，洗脫劑第二次洗脫濃度為40％-95％。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于步驟(f)洗脫液濃縮溫度為小于75℃。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是一種銀杏葉提取物的制備方法。其步驟包括銀杏葉用含水乙醇或甲醇或丙酮多次提取，取提取液濃縮回收溶劑，濃縮液用水或純化水稀釋，在20℃以下冷卻沉降，取上清液進(jìn)大孔樹(shù)脂柱吸附，用醇類溶液洗脫，洗脫液在小于75℃濃縮干燥即可。本制備方法所用的介質(zhì)沒(méi)有或基本沒(méi)有有害物質(zhì)殘留，工藝控制容易，提取得率高，產(chǎn)品有效成分含量高，品質(zhì)穩(wěn)定。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1515581SQ0311482
公開(kāi)日2004年7月28日 申請(qǐng)日期2003年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月8日
發(fā)明者王若谷, 邵勝榮, 范秀林, 鮑建偉, 鄭珺, 雷凱琴 申請(qǐng)人:浙江康恩貝制藥股份有限公司