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      桑葉有效成分提取物及制備方法

      文檔序號:909102閱讀:2243來源:國知局
      專利名稱:桑葉有效成分提取物及制備方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域,具體涉及一種桑葉有效成份提取物及制備方法。
      背景技術(shù)
      桑葉最早見于東漢的《神農(nóng)本草經(jīng)》,在《本草圖經(jīng)》中謂之“神仙葉”,具有滋陰補(bǔ)血,疏風(fēng)散熱,益肝通氣,降壓利尿之功效。現(xiàn)代藥學(xué)研究指出,桑葉含有多種功能性成份。其中含有約0.1%的野尻霉素(DNJ),在小腸中能與α-糖苷酶結(jié)合,從而抑制了麥芽糖、蔗糖等二糖分解為葡萄糖,抑制血糖值的升高。桑葉中還含有功能因子γ-氨基丁酸,不僅能作為神經(jīng)傳遞物質(zhì),改善腦功能并且具有降血壓的作用,精神安定作用和改善肝、腎功能等方面的作用。
      現(xiàn)有的桑葉提取方法有醇提和水提兩種方法。醇提法中,桑葉提取物由于桑葉中含有大量的葉綠素等脂溶性成份,使提取物含有黑綠色的色澤,還需用易燃、易爆、毒性較大的低極性有機(jī)溶劑經(jīng)一步去除葉綠素等脂溶性雜質(zhì),不利于工業(yè)化生產(chǎn)。單純用水提取桑葉中上述兩種成份,由于桑葉中含有大量的桑葉多糖,及樹脂樹膠等桑葉水提液十分粘稠,難以過濾和濃縮,制造工序十分惡劣,而且浸膏干涸后,γ-氨基丁酸和野尻霉素含量低,γ氨基丁酸0.09%,野尻霉素0.13%(專利號CN1394623A),沒有達(dá)到濃縮桑葉中γ-氨基丁酸和野尻霉素的目的。作為含有功效成份的食品、保健食品和用于治療目的藥物的原料成分是有缺陷的。按照CN1394623A所述工藝所提取的桑葉提取物,即使采用中藥制劑常用的水提醇沉提取工藝,桑葉提取物中的γ-氨基丁酸和野尻霉素的含量有所提高,但作為食品、保健品和藥物原料仍有距離,而且提取物的顏色深。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于采用更為合理的提取和分離雜質(zhì)的方法,獲得一種活性成份含量較高的桑葉提取物。
      本發(fā)明公開的桑葉提取物是通過在桑葉水提后獲得的水提液中加入助沉淀劑進(jìn)行絮凝沉淀,再經(jīng)醇沉后獲得,其中含野尻霉素1.0-3.0%,γ-氨基丁酸0.8-1.5%。
      本發(fā)明所述的助沉淀劑為硫酸鋁鉀、硫酸鋁。
      本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題是公開上述桑葉提取物的制備方法和質(zhì)量檢測方法。
      本發(fā)明公開的桑葉提取物的制備方法包括下述步驟1.水提物制備桑葉中粗粉中加入10-20倍的水,加熱提取,過濾,得水提取液;2.絮凝沉淀取上述水提取液,過40目篩,加入助沉淀劑溶解后使pH為3-4,攪拌,靜置20-30min,絮凝物析出沉淀,過濾,真空濃縮成浸膏,比重為1.20;3.醇沉浸膏中加入2-3倍體積乙醇,使乙醇濃度為50%(v/v)攪拌均勻后靜置,待上液澄清后取上清液,真空濃縮到含固形物10%,噴霧干燥,得黃色桑葉提取物粉末。
      本發(fā)明采用HPLC對桑葉提取物建立了質(zhì)量檢測的方法1.實(shí)驗(yàn)條件采用C18十二甲基硅烷基反相色譜柱(5u,4.6×250mm),流動相條件為0.05M磷酸氫二納溶液-甲醇,在0到20分鐘內(nèi)使乙腈的比例由20%升至80%,檢測波長為264nm,流速為1.5ml/min,柱溫為35℃。
      2.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密稱定適量標(biāo)準(zhǔn)品野尻霉素和γ-氨基丁酸,分別用水溶解并定容使?jié)舛燃s為0.1mg/mL。精密吸取溶液2.0ml,并分別精密加入以下溶液2.0ml碳酸氫鈉溶液(0.2M)和4.0ml(sigma)9-flourenylmethyl chloroformate丙酮溶液(0.005M)。將該混合溶液在30℃條件下振搖30分鐘后,用乙酸乙酯-環(huán)己烷(20-80)混合液充分提取,棄上層清液。
      提取物樣品溶液的制備精密稱定適量提取物樣品,用水溶解并定容使?jié)舛燃s為0.1mg/mL。精密吸取該溶液2.0ml,并分別精密加入以下溶液2.0ml碳酸氫鈉溶液(0.2M)和4.0ml(sigma)9-flourenylmethyl chloroformate丙酮溶液(0.005M)。將該混合溶液在30℃條件下振搖30分鐘后,用乙酸乙酯-環(huán)己烷(20-80)混合液充分提取,棄上層清液。
      分別取以上兩標(biāo)準(zhǔn)品溶液和樣品溶液20цl進(jìn)樣。記錄峰面積,以外標(biāo)法計(jì)算樣品百分含量。
      結(jié)果見圖3,圖1、圖2分別為標(biāo)準(zhǔn)品γ-氨基丁酸和野尻霉素的HPLC測試圖譜。
      本發(fā)明利用桑葉中的γ-氨基丁酸和野尻霉素不為明礬絮凝的特點(diǎn),在桑葉水提液中添加硫酸鋁鉀,使桑葉水提液的pH為3-4,使明礬與蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、桑葉多糖等物質(zhì)形成絮狀沉淀,從而除去雜質(zhì)和顯色成份,使固形物中γ-氨基丁酸和野尻霉素的含量大大上升。水提溶液的顏色從深褐色變成黃棕色。值得注意的是,活性炭并不能使桑葉水提液脫色。
      采用本發(fā)明方法獲得的桑葉提取物與未采用硫酸鋁鉀進(jìn)行雜質(zhì)沉淀方法獲得的提取物進(jìn)行比較,見表1

      結(jié)果顯示,本發(fā)明方法獲得的桑葉提取物純度大大提高,有效成分含量明顯增加。
      本發(fā)明所要解決的再一技術(shù)問題在于公開上述桑葉提取物在制備降低血糖、控制血壓、改善腸道功能的食品、保健品及藥品中的應(yīng)用。
      野尻霉素是α-糖苷酶強(qiáng)有力的抑制劑,能抑制食用的淀粉和蔗糖代謝為葡萄糖,野尻霉素能與小腸中的麥芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶等α-糖苷酶結(jié)合,且結(jié)合親和性大于麥芽糖、蔗糖和乳糖與上述酶的結(jié)合,使雙糖不能進(jìn)一步分解,從而明顯抑制了食后血糖急劇升高的現(xiàn)象,野尻霉素的這一效應(yīng)呈明顯的劑量依存性。而γ-氨基丁酸可抑制血壓,改善肝腎功能,故可添加到糕點(diǎn)、口香糖、巧克力、糖果、飲料及調(diào)味品中,及保健品和藥品中無異味。減少攝入食物的卡路里,降低血糖,控制血壓,改善胃腸道功能。


      圖1γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品HPLC圖譜圖2野尻霉素標(biāo)準(zhǔn)品HPLC圖譜圖3本發(fā)明桑葉提取物HPLC圖譜具體實(shí)施方式
      實(shí)施例1 桑葉提取物的制備10kg桑葉粗粉含γ-氨基丁酸0.12%,野尻霉素0.11%,加入200L自來水,攪拌加熱到80℃,一小時后40目篩過篩。桑葉再加入100L自來水,同上處理,合并得濾液(1),濾液(1)中加入明礬使pH為3-4。攪拌5min,靜置20-30min,絮凝物析出沉淀。過濾,真空濃縮成浸膏,比重為1.20。浸膏中加入2-3倍體積50%乙醇,使乙醇濃度為50%(v/v),攪拌均勻后靜置。待上液澄清后取上清液,真空濃縮到含固形物10%,噴霧干燥,得黃色桑葉提取物粉末,收率為生藥量的7.5%,γ-氨基丁酸和野尻霉素按測定方法測定,含量分別為1.0%和1.35%。γ-氨基丁酸和野尻霉素的提取率為68.13%和92.05%。
      實(shí)施例2 泡騰片的制備泡騰片配方維生素C4.5g乳糖 120g碳酸氫鈉 290g無水檸檬酸 380g果粉 50g阿斯巴甜 88g香精(粉末) 5g亮氨酸 20gβ-胡蘿卜素2.5g桑葉提取物 110g合計(jì) 1000g制備方法乳糖和碳酸氫鈉混合過篩,加入桑葉提取物、粘合劑,制成堿性顆粒。干燥后與無水檸檬酸、果糖、阿斯巴甜等各種輔料混勻,壓片。
      實(shí)施例3餅干配方砂糖175g白脫150g雞蛋150g面粉520g香料適量桑葉提取物 5g合計(jì)1000g制備方法先將白脫軟化,然后加入砂糖、雞蛋充分乳化,再加面粉、香料、桑葉提取物和勻成面團(tuán)即成胚料。將胚料分成大塊,用各種各樣的小模子扣或用各種擠嘴擠成小餅干,擺入烤盤內(nèi),進(jìn)烤箱200℃-220℃烤熟即可。
      實(shí)施例4巧克力配方可可粉 450g砂糖 420g可可脂 110g大豆磷脂 適量香料 適量桑葉提取物 10g合計(jì) 1000g制備方法桑葉提取物拌入可可粉和糖粉中,拌勻后加入熔化的可可脂中,保溫條件下攪拌加入香料,灌入印模即得。
      實(shí)施例5果汁配方轉(zhuǎn)化糖 77g砂糖 65g果汁 40g酸味劑 10g香料 1g維生素C0.2g桑葉提取物 0.5g水添加至 1000ml制備方法
      將砂糖用50ml開水溶化,晾涼后與果汁、酸味劑、維生素C、香料、桑葉提取物、轉(zhuǎn)化糖混合,再加入涼開水到1000ml,攪拌均勻,分裝即得。
      實(shí)施例6 調(diào)味料配方胡椒粉 600g鹽 200g味精 100g桑葉提取物 100g合計(jì) 1000g制備方法桑葉與鹽、味精混合均勻后再與胡椒粉混合均勻,即得。
      實(shí)施例7 中藥配方本發(fā)明中的桑葉提取物可添加到以桑葉為原料的中藥單味或復(fù)方制劑中,制成現(xiàn)代中藥制劑。
      傳統(tǒng)中藥“桑麻丸”為迎風(fēng)流淚類非處方藥。用于肝腎不足,頭昏眼花,視物不清,迎風(fēng)流淚。
      桑葉提取物(γ-氨基丁酸、野尻霉素) 50%芝麻提取物(芝麻素、黑芝麻色素)50%每丸1g,每日3丸。
      制備方法桑葉提取物與芝麻素,黑芝麻色素混勻,過80目篩。填充膠囊,即得。
      權(quán)利要求
      1.一種桑葉提取物,其特征在于該提取物是通過在桑葉水提后獲得的水提液中加入助沉淀劑進(jìn)行絮凝沉淀,再經(jīng)醇沉后獲得,其中含野尻霉素1.0-3.0%,γ-氨基丁酸0.8-1.5%。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉提取物,其特征在于其中所述的助沉淀劑為硫酸鋁鉀、硫酸鋁。
      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉提取物的制備方法,其特征在于所述的桑葉提取物的制備下述步驟1)水提物制備桑葉中粗粉中加入10-20倍的水,加熱提取,過濾,得水提取液;2)絮凝沉淀取上述水提取液,過40目篩,加入助沉淀劑使pH為3-4,攪拌,靜置20-30min,絮凝物析出沉淀,過濾,真空濃縮成浸膏,比重為1.20;3)醇沉浸膏中加入2-3倍體積乙醇,使乙醇濃度為50%(v/v)攪拌均勻后靜置,待上液澄清后取上清液,真空濃縮到含固形物10%,噴霧干燥,得黃色桑葉提取物粉末,用HPLC測定活性成分含量。
      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉提取物的制備方法,其特征在于其中所述的HPLC測定活性成分的方法包括1)實(shí)驗(yàn)條件采用C18十二甲基硅烷基反相色譜柱5ц,4.6×250mm,流動相條件為0.05M磷酸氫二納溶液-甲醇,在0到20分鐘內(nèi)使乙腈的比例由20%升至80%,檢測波長為264nm,流速為1.5ml/min,柱溫為35℃;2)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密稱定適量標(biāo)準(zhǔn)品野尻霉素和γ-氨基丁酸,分別用水溶解并定容使?jié)舛燃s為0.1mg/mL;精密吸取溶液2.0ml,并分別精密加入以下溶液2.0ml碳酸氫鈉溶液0.2M和4.0ml(sigma)9-flourenylmethyl chloroformate丙酮溶液0.005M;將該混合溶液在30℃條件下振搖30分鐘后,用乙酸乙酯-環(huán)己烷(20-80)混合液充分提取,棄上層清液;提取物樣品溶液的制備精密稱定適量提取物樣品,用水溶解并定容使?jié)舛燃s為0.1mg/mL;精密吸取該溶液2.0ml,并分別精密加入以下溶液2.0ml碳酸氫鈉溶液0.2M和4.0ml(sigma)9-flourenylmethyl chloroformate丙酮溶液0.005M;將該混合溶液在30℃條件下振搖30分鐘后,用乙酸乙酯-環(huán)己烷=20-80混合液充分提取,棄上層清液;分別取以上兩標(biāo)準(zhǔn)品溶液和樣品溶液20цl進(jìn)樣,記錄峰面積,以外標(biāo)法計(jì)算樣品百分含量。
      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉提取物在制備降低血糖、控制血壓、改善腸道功能的食品、保健品及藥品中的應(yīng)用。
      全文摘要
      本發(fā)明涉及一種桑葉有效成分提取物及制備方法。該桑葉提取物是通過在桑葉水提后獲得的水提液中加入助沉淀劑進(jìn)行絮凝沉淀,再經(jīng)醇沉后獲得,其中含野尻霉素1.0-3.0%,γ-氨基丁酸0.8-1.5%。本發(fā)明桑葉提取物較現(xiàn)有的方法純度大大提高,有效成分含量明顯增加,可用于制備降低血糖、控制血壓、改善腸道功能的食品、保健品及藥品。
      文檔編號A61K31/695GK1579445SQ03142068
      公開日2005年2月16日 申請日期2003年8月5日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月5日
      發(fā)明者仇波, 栗潁, 陸韻, 王建中 申請人:上海華源生命科學(xué)研究開發(fā)有限公司
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