專利名稱：含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化合物領(lǐng)域，具體的說涉及一種藥物化合物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
肝性腦病(Hepatic encephalopathy簡稱HE)主要由肝功能嚴(yán)重失調(diào)或障礙所致，以代謝紊亂為主要特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失調(diào)綜合癥(病理學(xué)，李玉林主編，人民衛(wèi)生出版社，2000年，p340-350)。輕微HE，也稱亞臨床肝性腦病，患者大部分并無意識障礙，工作和生活與常人無異，自我感覺基本良好，由于缺乏臨床癥狀，容易被人忽視，甚至自我亦不能覺察。但在學(xué)習(xí)，操作，理解，應(yīng)變等能力及睡眠，生活質(zhì)量方面都存在不足。如果從事駕駛、高空作業(yè)、建筑、潛水等工間一些精細(xì)的工作，極有可能帶來無法估計的后果(王明宇，中華肝臟病雜志，2004，12(5)，305-306)。
肝性腦病盡管其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，有氨中毒學(xué)說，氨、硫醇、短鏈脂肪酸協(xié)同毒性學(xué)說、假性神經(jīng)遞質(zhì)學(xué)說，氨基酸代謝失衡，神經(jīng)生物學(xué)學(xué)說，受體學(xué)說等(姚希賢等，內(nèi)科急危重癥雜志，1998，4(1)，28)，但肝功能的衰竭，氨及多種毒物存在與協(xié)同，在肝性腦病的發(fā)生，發(fā)展中占有重要地位。肝功能衰竭時，肝臟將氨合成尿素的能力減退，門體分流的存在，使腸道氨未經(jīng)肝解毒直接進(jìn)入體循環(huán)，使血氨增高，氨透過血腦屏障進(jìn)入腦組織，另外，肝功能衰竭時肝臟對芳香族氨基酸的清除發(fā)生障礙，芳香氨基酸如苯丙氨酸在大腦中經(jīng)脫羧酶及β-羥化酶作用形成苯乙醇胺，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上與正常神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素相似，但本身的激動作用很弱，取代突觸中正常的神經(jīng)遞質(zhì)，使神經(jīng)傳導(dǎo)發(fā)生障礙，從而引起大腦功能障礙。因此清除體內(nèi)多余的氨及苯乙胺類對肝性腦病患者具有重要意義(姚希賢等，內(nèi)科急危重癥雜志，1998，4(1)，28)。
高血氨癥一般是由于體內(nèi)尿素循環(huán)障礙，引起體內(nèi)氨基酸分解而產(chǎn)生的氨以及由腸吸收的氨，無法順利的合成尿素排出體外，導(dǎo)致游離的氨在體內(nèi)蓄積，形成高血氨癥。絕大多數(shù)是由肝功能損害引起，也有部分是由于遺傳方面的因素，造成尿素循環(huán)過程的某種酶的缺陷。過量的氨具有神經(jīng)毒性，臨床上表現(xiàn)為嚴(yán)重的腦功能障礙。尿素循環(huán)缺陷時的高血氨癥常需長期治療。如給予低蛋白飲食，嚴(yán)重的可以做透析，另外還可以用藥物建立代謝旁路，以排出體內(nèi)過多的氨。可用的藥物有(1)苯甲酸鈉，可與甘氨酸結(jié)合，形成馬尿酸，很快由尿排出。(2)苯乙酸鈉，可與谷酰胺結(jié)合為苯乙酰谷酰胺，很快由尿排出。(3)精氨酸，是尿素循環(huán)的底物，可促氮產(chǎn)物(氨)的排出。(4)氨甲酰谷氨酸，可提供N-乙酰谷氨酸，以活化尿素循環(huán)第一步所需的氨甲酰磷酸合成酶(CPS)(劉厚鈺等，胃腸病學(xué)，2003，8(1)，61-62)。但這些藥物或需要體內(nèi)酶的參與，或只作用于中間產(chǎn)物，并非直接作用于體內(nèi)的氨，因此療效不夠滿意。
對于高血氨癥及由高血氨癥引起的肝性腦病和亞臨床肝性腦病的治療方法目前還不夠理想，現(xiàn)有的臨床藥物為谷氨酸鈉；應(yīng)用稀醋酸、乳果糖等藥物的灌腸療法，也僅僅是使由腸道產(chǎn)生及吸收的氨減少，而對于體內(nèi)代謝生成的氨，則往往無能為力。手術(shù)及透析會給病人帶來很大痛苦。藥物治療往往僅能針對尿素循環(huán)過程中的一種酶或底物，因此療效有限。同時這些治療過程需要體內(nèi)酶的參與，而恰恰高血氨病人往往合并嚴(yán)重的肝功能損傷，因此影響治療效果。理想的藥物治療應(yīng)該為建立非酶促代謝旁路，使體內(nèi)過多的氨盡快排出體外。本研究室曾使用隱丹參酮，二氫丹參酮I用于抗高血氨及由高血氨癥引起的肝性腦病和亞臨床肝性腦病的治療，并已申請了專利(PCT/CN01/00861)，但是其作用效果還不是很令人滿意。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有高血氨癥及肝性腦病治療中存在的問題，提供一種含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物。
本發(fā)明的另一個目的在于提供上述含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物在制備治療高血氨癥及肝性腦病藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其結(jié)構(gòu)如(I)式所示 式(I)中，R1為C2-C6烷基、C1-C6的烷氧基、n＝1-2的-(CH2)nAr基、-F、-Cl、-Br或-I，
R2為H、-OH或-OCOR，其中R為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)nAr基，R3為H、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)nAr基，R4為H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；或R1為H或CH3，R2為H、-OH或-OCOR，其中R為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)n Ar基，R3為C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)n Ar基，R4為H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。
上述含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，式(I)中R1為-F、-Cl、-Br或-I；R2為H、-OH或-OCOR，其中R為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)n Ar基；R3為H、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)nAr基；R4為H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。
上述含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其中R1為-Cl或-Br；R2為H、-OH或C1-C6酯基；R3為H、C1-C3的烷基、烯丙基、苯基或取代苯基；R4為H或C1-C3烷基。
上述含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其中R1為-Cl或-Br；R2為H、-OH、乙酯或苯酯；R3為H、甲基、烯丙基或苯基；R4為H或甲基。
上述含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其優(yōu)選化合物為3-甲基-3-羥基-9-氯-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮、3-甲基-3-羥基-9-溴-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮、3-烯丙基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮、3-烯丙基-3-羥基-9-溴-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮、3-甲基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮。
本發(fā)明還提供了式(I)所示的鄰萘醌類化合物的制備方法，主要是通過下面反應(yīng)式1-4進(jìn)行反應(yīng)式1R1為鹵素及H取代的該類化合物的制備 反應(yīng)式1敘述了式(I)中R1為鹵素及H取代的該類化合物的制備。式中的R3，R4的定義同式(I)。起始原料化合物[1]可以參考文獻(xiàn)Suh Young-Ger，et al.chem..commun.，2000，1203-1204和Pearson，D.E.，et al.，J.Org.Chem.，1967，32(7)，2358-2360制備。
反應(yīng)式2 式[6]的化合物很容易與酰氯或酸酐反應(yīng)，高收率的得到化合物[7]。
反應(yīng)式3 以不同的2，5-雙取代萘醌為原料(參考古練權(quán)等，有機(jī)化學(xué)，1991，11，481-487；)，參考文獻(xiàn)的方法(Ruth L.Nunes，Lothar W.Bieber，Richar L.Longo，J.Nat.Prod.，1999，62，1643-1645)制得具有不同2，5-雙取代的化合物[8]，再通過Pd-C/H2催化氫化得到[9]，再經(jīng)二氧化硒氧化得到化合物[10]，式中的R1，R3，R4的定義同式(I)。
反應(yīng)式4
與反應(yīng)式1不同的是，化合物[2]進(jìn)行硝化反應(yīng)時，將反應(yīng)時間延長至1小時，硝化的產(chǎn)物為[11]而不是[3]，同時也將導(dǎo)致最終產(chǎn)物的不同。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)化合物與專利藥物隱丹參酮在降血氨的作用機(jī)理方面是相似的，主要是通過建立非酶促代謝旁路清除體內(nèi)的血氨及苯乙胺。但在作用效果方面，本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)化合物在同樣劑量下，其作用速度及作用效果要好于專利藥物隱丹參酮。
與現(xiàn)有的臨床藥物谷氨酸鈉相比，本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，不管是在高血氨動物模型，還是在急性肝硬化大鼠高血氨模型，其對比實驗均顯示，作用效果要好于谷氨酸鈉，使用劑量更小。另外本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物在清除血氨及苯乙胺時，不需要體內(nèi)酶的參與，因此其清除血氨及苯乙胺的效果與肝功能正常與否無關(guān)。而谷氨酸鈉在降低血氨時需要酶的參與，高血氨病人往往伴有一定程度的肝功能損傷，這就大大降低了谷氨酸鈉的使用效果及應(yīng)用范圍。本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物正好可以彌補這一缺點。
同時，大量的毒理實驗表明本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物在正常劑量下作為藥物使用是安全的。
具體實施例方式
實施例13-甲基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮的制備化合物9-氯萘并[1，8-b，c]吡喃-3(2H)-酮7g溶于200ml無水乙醚中，將預(yù)先制備的格氏試劑MeMgI(100-150mmol)的無水乙醚溶液70ml置滴液漏斗中，水浴下1.5-2小時加完，室溫攪拌30分鐘，將反應(yīng)液倒入250ml冰水溶液中，氯仿提取，水洗，無水硫酸鈉干燥，濃縮得棕紅色粘稠液體6.4g。將該產(chǎn)物6.4g，溶于醋酐80-100ml，迅速加入三水硝酸銅8.5g，室溫攪拌15分鐘，加入冰水中終止反應(yīng)，用乙醚提取，碳酸鈉水溶液洗滌，再水洗，無水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層分離純化，氯仿洗脫，得4.2g產(chǎn)物9-氯-7-硝基-3-甲基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-3-醇，為桔紅色粘稠液體。
化合物9-氯-7-硝基-3-甲基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-3-醇0.5g，溶于20ml乙醇中，加入甲酸銨(1.1g，17.8mmol)，10％Pd-C 0.1-0.2g，室溫攪拌反應(yīng)15-20分鐘，過濾，濃縮濾液，加入丙酮50ml，攪拌全溶后，加入預(yù)先配好的Fremy’s溶液(1.86g溶于250ml0.06M的NaH2PO4)，30min后，氯仿提取，水洗，無水硫酸鈉干燥，濃縮所得粗品用硅膠柱層分離純化，石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1洗脫，得桔黃色固體3-甲基-3-羥基-9-氯-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮0.30g。
在實施例1中，以下列不同的鹵代烷取代碘甲烷制備格氏試劑1、溴丙烷2、溴己烷3、溴苯4、溴芐5、對溴氟苯6、對甲基溴苯采用與實施例1相同的的方法，可以合成相對應(yīng)的化合物1、3-丙基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮2、3-己基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮3、3-苯基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮4、3-芐基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮5、3-(4-氟基苯基)-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮6、3-(4-甲基苯基)-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮以不同6-取代-9-氯萘并[1，8-b，c]吡喃-3(2H)-酮為原料，采用與實施例1相同的方法還可以得到1、3，6-二甲基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮2、3-甲基-6-丙基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮3、3-甲基-6-己基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮
4、3-甲基-6-甲氧基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮5、3-甲基-6-丙氧基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮6、3-甲基-6-己氧基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮以烯丙基氯取代碘甲烷制備格氏試劑，在還原一步采用Na2S2O4為還原劑采用與實施例1相同的方法制得3-烯丙基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮實施例23-甲基-3-羥基-9-溴-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮的制備采用9-溴萘并[1，8-b，c]吡喃-3(2H)-酮為原料，采用與實施例1相同的方法，只是在還原一步采用Na2S2O4為還原劑，可以得到3-甲基-9-溴萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮。
采用9-溴萘并[1，8-b，c]吡喃-3(2H)-酮為原料與不同的格氏試劑反應(yīng)，采用與實施例1和2相同的方法還可以得到1、3-丙基-3-羥基-9-溴-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮2、3-己基-3-羥基-9-溴-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮3、3-烯丙基-3-羥基-9-溴-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮實施例33-甲基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮的制備
以化合物9-氯萘并[1，8-b，c]吡喃-3(2H)-酮為原料，采用與實施例1相類似的方法，只是9-氯-3-甲基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-3-醇與醋酐、三水硝酸銅硝化一步的反應(yīng)時間延長至1小時，得到9-氯-7-硝基-3-甲基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-3-醇乙酸酯，其它操作同實施例1，最后得到得桔紅色固體3-甲基-9-氯-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮。
同法還可以得到3-丙基-9-氯-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮3-芐基-9-氯-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮實施例43-甲基-9-氯-3-乙酰氧基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮的制備由實施例1所得的化合物3-甲基-3-羥基-9-氯-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮0.5g，溶于THF20ml，加入乙酰氯0.3g及三乙胺0.5ml，室溫攪拌2-3小時，濃縮，加入大量水?dāng)嚢?5分鐘，氯仿提取，5％稀鹽酸洗滌，再水洗，柱層分離純化得到黃色固體3-甲基-9-氯-3-乙酰氧基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮0.42g分別以下列的?；瘎┤〈阴Ｂ?、丁酰氯2、環(huán)己酰氯3、苯甲酰氯4、苯乙酰氯5、丙烯酰氯
6、3-甲基-2-丁烯酰氯按實施例4同樣的制備方法可以得到1、3-甲基-9-氯-3-丁酰氧基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮2、3-甲基-9-氯-3-環(huán)己甲酰氧基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮3、3-甲基-9-氯-3-苯甲酰氧基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮4、3-甲基-9-氯-3-苯乙酰氧基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮5、3-甲基-9-氯-3-丙烯酰氧基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮6、3-甲基-9-氯-3-(3-甲基-2-丁烯酰氧基)-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮實施例53-苯基-3-羥基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮的制備將實施例1中還原一步的反應(yīng)時間延長至1-2小時，其他操作同實施例1，可以得到3-苯基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮。采用以下不同的鹵代物為原料1、溴芐2、對溴氟苯3、對甲基溴苯可以得到1、3-芐基-3-羥基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮，2、3-(4-氟基苯基)-3-羥基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮，3、3-(4-甲基苯基)-3-羥基-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮實施例6
3-甲基-9-乙基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮的制備以2-乙基萘醌為原料，參考文獻(xiàn)的方法Ruth L.Nunes，Lothar W.Bieber，Richar L.Longo，J.Nat.Prod.，1999，62，1643-1645制得9-乙基-3-甲基苯并[de]吡喃-7-醇4g溶于乙醇100ml中，加入10％Pd-C 1g，50℃下通氫氣氫化24小時，過濾，濾液濃縮，得產(chǎn)品9-乙基-3-甲基-2，3-二氫苯并[de]比喃-7-醇3.2g，將該產(chǎn)物溶于氯仿70ml，加入二氧化硒7.2g，室溫攪拌反應(yīng)6小時，抽濾，濃縮，所得粗品以硅膠柱層析分離純化，氯仿洗脫，得0.8g紫黑色固體3-甲基-9-乙基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮。
以下列不同2-取代萘醌為原料1、2-丙基-1，4-萘醌2、2-環(huán)己基-1，4-萘醌3、2-芐基-1，4-萘醌4、2-叔丁基-1，4-萘醌5、2-甲氧基-1，4-萘醌6、2-丙氧基-1，4-萘醌7、2-己氧基-1，4-萘醌采用與實施例6相同的的方法，可以合成相對應(yīng)的化合物1、3-甲基-9-丙基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮2、3-甲基-9-環(huán)己基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮3、3-甲基-9-芐基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮4、3-甲基-9-叔丁基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮
5、3-甲基-9-甲氧基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮6、3-甲基-9-丙氧基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮7、3-甲基-9-己氧基-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮實施例7鄰萘醌類化合物在體外與氨的反應(yīng)分別取由實施例1-實施例6所制備的化合物各0.5mmol置試管中，加入2ml乙醇，振搖全溶后，加入1mmol氨水，室溫振搖30分鐘，硅膠薄層檢測，原料醌均消失。表明以上化合物在體外能與氨迅速反應(yīng)，快速降低氨的濃度。
鄰萘醌類化合物在體外與苯乙胺的反應(yīng)分別取由實施例1-實施例6所制備的化合物各0.5mmol置試管中，加入2ml乙醇，振搖全溶后，加入1mmol苯乙胺，室溫振搖30分鐘，硅膠薄層檢測，原料醌均消失。表明以上化合物在體外能與苯乙胺迅速反應(yīng)，快速降低苯乙胺的濃度。
隱丹參酮在體外與氨的作用取隱丹參酮各0.5mmol置試管中，加入2ml乙醇，振搖全溶后，加入1mmol氨水，室溫振搖30分鐘，硅膠薄層檢測，原料變化不明顯，只有少量產(chǎn)物生成，室溫攪拌12小時，原料基本消失。表明以上化合物在體外能與氨反應(yīng)，但速度緩慢。
隱丹參酮在體外與苯乙胺的作用取隱丹參酮0.5mmol置試管中，加入2ml乙醇，振搖全溶后，加入1mmol苯乙胺，室溫振搖30分鐘，硅膠薄層檢測，原料變化不明顯，只有少量產(chǎn)物生成，室溫攪拌6小時，原料基本消失。表明以上化合物在體外能與氨反應(yīng)，但速度緩慢。
上述化學(xué)反應(yīng)試驗證實，本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物在常溫下能迅速地與氨、甲胺、乙胺及苯乙胺等脂肪伯胺反應(yīng)，幾分鐘內(nèi)即反應(yīng)完畢，其反應(yīng)速度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于丹參酮類化合物，提示這類化合物對預(yù)防和治療由慢性肝炎和肝硬化引起的高血氨癥，包括由高血氨癥引起的肝性腦病和亞臨床肝性腦病具有獨特的治療作用。
實施例8鄰萘醌化合物的降血氨活性動物實驗(注射)實驗用動物為健康雄性SD系大鼠90只，體重為250-300g。隨機(jī)分成9組，如表1所示。除正常對照組外，分別由腹腔注射表中所示劑量的生理鹽水或藥物(含少量表面活性劑)，給藥45min后，除正常對照組外，其余各組腹腔注射5.5mmol/kg的醋酸銨，連續(xù)四天。第四天在注射醋酸銨溶液后30min，各組大鼠立即摘眼取血，用EDTA-Na抗凝，應(yīng)用常規(guī)方法測定血氨濃度。結(jié)果見表1。本實施例及以下的實施例中的谷氨酸鈉的劑量是參照該藥物的臨床實際劑量而確定的。本實施例及以下的實施例中的血氨濃度測定方法采用酶-UV法，使用儀器為HITACHI-7071自動分析儀，使用的試劑盒為AMMONIA。
表1


按同樣實驗條件，第四天在注射醋酸銨溶液后90min，各組大鼠立即摘眼取血，測定血氨濃度。所得結(jié)果見表2。
表2


實施例9鄰萘醌化合物的降血氨活性動物實驗(口服)按實施例8實驗條件，不同的是谷氨酸鈉注射劑改為口服谷氨酸片，其它各種藥物均改為口服給藥，劑量如表3所示。第四天在注射醋酸銨溶液后30min，各組大鼠立即摘眼取血，應(yīng)用常規(guī)方法測定血氨濃度。結(jié)果見表3。
表3


按同樣實驗條件，第四天在注射醋酸銨溶液后90min，各組大鼠立即摘眼取血，測定血氨濃度。所得結(jié)果見表4。
表4

實施例10鄰萘醌類化合物對急性肝硬化大鼠高血氨致昏迷及死亡的影響(注射)
實驗用動物為健康雄性SD系大鼠90只，體重為250-300g。隨機(jī)分成9組，如表5所示。除正常對照組外，分別由腹腔注射表5中所示劑量的生理鹽水或藥物(含少量表面活性劑)，給藥45min后，腹腔注射含0.1％四氯化碳花生油溶液(劑量為10mg/kg)，連續(xù)四天。第四天在注射給藥和注射四氯化碳花生油溶液45min后，各組大鼠(包括正常對照組)腹腔注射8.5mmol/kg醋酸銨溶液，記錄各組大鼠從注射醋酸銨開始至大鼠進(jìn)入昏迷狀態(tài)的時間(潛伏時間)，從昏迷狀態(tài)至蘇醒的時間(昏迷時間)及死亡率。其結(jié)果見表5所示表5


實施例11鄰萘醌類化合物對急性肝硬化大鼠高血氨致昏迷及死亡的影響(口服)按實施例14實驗條件，不同的是谷氨酸鈉注射改為口服谷氨酸片劑(劑量200mg/kg)，鄰萘醌類藥物也由注射改為口服，劑量如表6所示。第四天在注射給藥和注射四氯化碳花生油溶液45min后，各組大鼠(包括正常對照組)腹腔注射8.5mmol/kg醋酸銨溶液，記錄各組大鼠從注射醋酸銨開始至大鼠進(jìn)入昏迷狀態(tài)的時間(潛伏時間)，從昏迷狀態(tài)至蘇醒的時間(昏迷時間)及死亡率。其結(jié)果見表6所示表6


實施例12鄰萘醌類化合物毒理實驗小鼠急性毒性試驗實驗用動物為健康雄性小鼠。采用灌胃方法試驗。給藥量至1.0g/kg時仍未發(fā)現(xiàn)供試小鼠有中毒癥狀和死亡。實驗表明，該類鄰萘醌類似物L(fēng)D50＞1g/kg。
小鼠30天毒性試驗實驗用動物為健康雄性小鼠。采用灌胃方法試驗。給藥量為200mg/kg day，連續(xù)30天。實驗表明，受試大鼠無死亡，生長發(fā)育、造血功能、生化指標(biāo)等，均無明顯的異常變化或毒性反應(yīng)；重要臟器的解剖檢查和組織鏡檢未發(fā)現(xiàn)病理變化。
權(quán)利要求
1.一種含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其結(jié)構(gòu)如(I)式所示 式(I)中，R1為C2-C6烷基、C1-C6的烷氧基、n＝1-2的-(CH2)nAr基、-F、-Cl、-Br或-I，R2為H、-OH或-OCOR，其中R為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)n Ar基，R3為H、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)nAr基，R4為H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；或R1為H或CH3，R2為H、-OH或-OCOR，其中R為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)n Ar基，R3為C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)n Ar基，R4為H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其特征在于式(I)中R1為-F、-Cl、-Br或-I；R2為H、-OH或-OCOR，其中R為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)n Ar基；R3為H、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基或n＝1-2的-(CH2)nAr基；R4為H、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其特征在于其中R1為-Cl或-Br；R2為H、-OH或C1-C6酯基；R3為H、C1-C3的烷基、烯丙基、苯基或取代苯基；R4為H或C1-C3烷基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其特征在于其中R1為-Cl或-Br；R2為H、-OH、乙酯或苯酯；R3為H、甲基、烯丙基或苯基；R4為H或甲基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，其特征在于所述化合物為3-甲基-3-羥基-9-氯-2，3-二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮、3-甲基-3-羥基-9-溴-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮、3-烯丙基-3-羥基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮、3-烯丙基-3-羥基-9-溴-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮、3-甲基-9-氯-2，3二氫萘并[1，8-b，c]吡喃-7，8-二酮。
6.權(quán)利要求1或2或3或4或5所述的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物在制備用于預(yù)防和治療高血氨癥及肝性腦病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物及其應(yīng)用。本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物，是天然產(chǎn)物Masonone F經(jīng)結(jié)構(gòu)改造優(yōu)化而來的。本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)化合物主要是通過建立非酶促代謝旁路清除體內(nèi)的血氨及苯乙胺，可用于制備預(yù)防和治療高血氨癥及肝性腦病的藥物，在同樣劑量下，其作用速度及作用效果要好于專利藥物隱丹參酮與現(xiàn)有的臨床藥物谷氨酸鈉。大量的毒理實驗表明本發(fā)明的含鄰萘醌結(jié)構(gòu)的化合物在正常劑量下作為藥物使用是安全的。
文檔編號A61K31/352GK1660833SQ200410077778
公開日2005年8月31日 申請日期2004年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月30日
發(fā)明者古練權(quán), 黃世亮, 黃志紓, 陳新滋, 李月明, 卜憲章 申請人:中山大學(xué)