專利名稱：雞肝散提取物總黃酮在制備抗炎藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是雞肝散提取物總黃酮在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
雞肝散為云南省哈尼族民間植物Elsholtzia blanda Benth.，據(jù)《中藥大辭典》載，具有清熱、消炎、止痛作用。民間用煎湯服用，用于治療感冒、痢疾、腸炎、牙痛、結(jié)膜炎、創(chuàng)傷出血等疾病，但迄今為止未見有關(guān)該藥物研究開發(fā)的信息。
本申請(qǐng)人于2002年9月13日申請(qǐng)了一種抗心血管疾病和抗眼科疾病的藥物，該申請(qǐng)是利用雞肝散提取物總黃酮制備抗心血管疾病的藥物和抗眼科疾病的藥物。此后申請(qǐng)人對(duì)該雞肝散提取物總黃酮進(jìn)行了更進(jìn)一步的研究，得出了本發(fā)明的成果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從雞肝散中提取的總黃酮提取物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的藥物對(duì)于腎盂腎炎，腎炎，肝炎，腸炎，結(jié)腸炎，胃炎，咽喉炎，關(guān)節(jié)炎等炎癥疾病具有較好的療效。經(jīng)動(dòng)物藥理試驗(yàn)表明能顯著降低毛細(xì)血管通透性，能明顯抑制二甲苯所致的耳廓腫脹，能明顯減輕角叉菜膠所致的大鼠足趾腫脹度，能明顯抑制大鼠巴油氣囊腫所致的肉芽組織增生，與陽性對(duì)照藥阿斯匹林的抗炎作用無明顯差異，具呈良好的量效關(guān)系。
本發(fā)明是從藥用植物雞肝散中提取總黃酮提取物，按總黃酮提取物∶輔料＝60～99∶40～1的比例制成藥劑。
以上所述的藥劑為藥劑學(xué)上所包含的劑型，具體可以是膠囊劑、顆粒劑、片劑和注射劑等。
本發(fā)明的藥物是對(duì)雞肝散植物進(jìn)一步的研究開發(fā)，提取出了雞肝散中的有效部位——總黃酮的新的用途，不僅發(fā)現(xiàn)了其對(duì)抗心血管疾病和眼科疾病有較好的治療作用，而且進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)了其消炎功效。
以下用本發(fā)明的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)來說明本發(fā)明所述的藥物療效。
本發(fā)明的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果一、受試目的觀察雞肝散總黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物急慢性炎癥反應(yīng)的影響。
二、受試藥物1、雞肝散總黃酮由昆明金殿制藥廠提供，批號(hào)950511，為棕色浸膏，含量相當(dāng)于生藥2g/ml，人臨床用藥劑量為20-120mg/kg.日，用蒸餾水稀釋至實(shí)驗(yàn)所需濃度供用。
2、阿斯匹林(ASA)由西北第二合成制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)9202045，為均色粉末，以0.5％羧甲基纖維素溶液稀釋至實(shí)驗(yàn)所需濃度供用。
三、受試動(dòng)物1、SD種大鼠，體重120-220g，雌雄皆用。條件合格證云衛(wèi)動(dòng)管號(hào)A04，質(zhì)量合格證號(hào)云衛(wèi)動(dòng)管號(hào)D04，由云南省白藥廠科研所提供。
2、昆明種小鼠，體重18-22g，雌雄皆用。條件合格證號(hào)云衛(wèi)動(dòng)管號(hào)A04，質(zhì)量合格證號(hào)云衛(wèi)動(dòng)管號(hào)B02，由云南省白藥廠科研所提供。
四、實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果(一)雞肝散總黃酮對(duì)毛細(xì)血管通透性的影響1、雞肝散總黃酮對(duì)小鼠毛細(xì)血管通透性的影響按文獻(xiàn)[1、2]的方法，取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，即雞肝散總黃酮高劑量(1080mg/kg)組、中劑量(540mg/kg)組、低劑量(270mg/kg)組、陽性對(duì)照藥ASA(200mg/kg)組、NS對(duì)照組，分別ig30min后ip0.7％醋酸0.2ml/只，并立即尾iv0.5％伊文氏蘭0.2ml/只，15min后急性處死動(dòng)物，腹腔注入NS 6ml/只，吸取4ml沖洗液離心，取上清液于720分光光度計(jì)590nm比色讀數(shù)，以O(shè)D值為蘭染指標(biāo)，結(jié)果見表1。
表1雞肝散總黃酮對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(x±sD)

與NS組比較，**0.01＜P＜0.05；***P＜0.01結(jié)果表明雞肝散總黃酮三個(gè)劑量組及ASA對(duì)照組均能抑制醋酸所致的腹腔毛細(xì)血管滲出，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差別有顯著性及非常顯著性意義(P＜0.05；P＜0.01)。
2、雞肝散總黃酮對(duì)大鼠毛細(xì)血管通透性的影響按文獻(xiàn)[3]的方法，大鼠分為5組，即雞肝散總黃酮高劑量(1080mg/kg)組、中劑量(540mg/kg)組、低劑量(270mg/kg)組、ASA(200mg/kg)組、NS對(duì)照組，ig后1h于大鼠背部?jī)蓚?cè)分別id 0.05ml組胺，立即iv1％Evans蘭4ml/只，20分鐘后斷頭處死大鼠，剝皮測(cè)看色皮斑面積及丙酮-生理鹽水(7∶3)浸出液中蘭色深度(610nm)，結(jié)果見表2。
表2雞肝散總黃酮對(duì)組胺所致的毛細(xì)血管通透性的影響(x±sD)

與NS組比較，**P＜0.05；***P＜0.01結(jié)果表明雞肝散總黃酮高、中劑量組與NS組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果差異有顯著性意義，提示黃酮具有抑制大鼠毛細(xì)血管通透性作用。
(二)雞肝散總黃酮對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響[1、4、5]取大鼠100只，體重120-150g，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，即雞肝散總黃酮高劑量(1080mg/kg)組、中劑量(540mg/kg)組、低劑量(270mg/kg)組、ASA(200mg/kg)組、NS對(duì)照組，每組動(dòng)物20只。實(shí)驗(yàn)前ig5ml NS，用容積測(cè)量法分別測(cè)定每只大鼠左、右膝關(guān)節(jié)以下容積，分別按分組ig給藥，30分鐘后于右后足跖中部SC0.5％角叉菜膠0.05ml/只。分別測(cè)量致炎后0.5、1、2、3h左、右后足跖容積，以每鼠右后足跖容積減去左后足跖容積為腫脹度。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果見表3。
表3雞肝散總黃酮對(duì)角叉菜膠致大鼠足跖腫脹度的影響

與NS組比較，**P＜0.05；***P＜0.01結(jié)果表明雞肝散總黃酮高、中、低劑量組均能明顯減輕足跖腫脹度，作用持續(xù)時(shí)間與劑量呈依賴關(guān)系趨勢(shì)。
(三)雞肝散總黃酮對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響[1、4]取小鼠100只，雌雄各半，體重25-30g，按實(shí)驗(yàn)1分組，每組動(dòng)物20只，各組分別按劑量ig雞肝散總黃酮0.5h后，于每鼠左耳廓前后二面涂100％二甲苯，右耳做為對(duì)照，3.5h后將小鼠頸椎脫臼處死，于耳廓基線剪下二耳，用9mm直徑打孔器分別在同一部位取下圓形耳片，由光電分析天平稱重，以每鼠左耳片重量減去右耳片重量，其值為腫脹度，對(duì)此值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，結(jié)果見表4。
表4雞肝散總黃酮對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

與NS組比較，***P＜0.01結(jié)果表明，僅雞肝散總黃酮的高劑量組能顯著抑制以100％二甲苯致耳廓腫脹，與對(duì)照NS組比較差異有顯著性意義(P＜0.01＝。
(四)雞肝散總黃酮對(duì)大鼠巴豆油氣囊腫的影響[3、4]按Robet法取大鼠56只，隨機(jī)分為四組，即雞肝散總黃酮高劑量(1080mg/kg)組、低劑量(540mg/kg)組、ASA組、NS對(duì)照組，于背部皮下注射20ml空氣，然后注入1％巴豆油1ml，將大鼠背部朝下，轉(zhuǎn)動(dòng)大鼠，使巴豆油均勻分布。48h抽出空氣，造成巴豆油氣囊腫。致炎后大鼠按分組ig藥物，qd連續(xù)7d，第8d處死大鼠取囊內(nèi)肉芽腫，沖洗后稱濕重；放入80℃恒溫烤箱60min后再稱干重，結(jié)果見表5。
表5黃酮對(duì)大鼠巴豆油氣囊腫的影響(x±sD)

結(jié)果表明雞肝散總黃酮二個(gè)劑量組均可明顯抑制大鼠肉芽組織增生，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果差異有非常顯著性意義。
五、結(jié)論雞肝散總黃酮在與人臨床推薦日用等效劑量(3g/50kg/D)或一次用藥等效劑量時(shí)對(duì)小鼠、大鼠的急慢性炎癥模型有顯著的抗炎作用，與陽性對(duì)照藥阿斯匹林的抗炎作用無明顯差異，且其抗炎作用呈量效關(guān)系趨勢(shì)。
六、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法完全隨機(jī)設(shè)計(jì)方差分析(統(tǒng)計(jì)軟件醫(yī)用統(tǒng)計(jì))。
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圖1為本發(fā)明從雞肝散植物中提取總黃酮提取物的工藝流程圖。
圖2為本發(fā)明的膠囊劑制備工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1取植物雞肝散500千克，洗凈后，按圖1所示的工藝流程提取總黃酮，該提取方法運(yùn)用了藥劑學(xué)上常用的技術(shù)。
實(shí)施例2用實(shí)施1所得的總黃酮提取物與輔料羥丙基纖維素，按總黃酮提取物∶輔料＝99∶1的比例，按圖2所示的工藝流程制得本發(fā)明藥物的膠囊劑，該制備工藝采用了藥劑學(xué)上常用的技術(shù)。
實(shí)施例3用實(shí)施1所得的總黃酮提取物與輔料羥丙基纖維素，按總黃酮提取物∶輔料＝65∶35的比例，按圖2所示的工藝流程制得本發(fā)明藥物的膠囊劑，該制備工藝采用了藥劑學(xué)上常用的技術(shù)。
上述實(shí)施例制備的藥物用于治療腎盂腎炎，腎炎，肝炎，腸炎，結(jié)腸炎，胃炎，咽喉炎，關(guān)節(jié)炎等炎癥疾病。
工藝流程說明圖1所示的工藝流程中為以下幾種提取方式方案一取雞肝散凈藥材，加水適量，蒸餾，收集揮發(fā)油備用。
方案二取雞肝散凈藥材，用適量工業(yè)乙醇或甲醇潤(rùn)濕后，裝滲漉筒，加入溶媒進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收濃縮，減壓干燥得干膏，粉碎后與輔料混合，制粒，裝膠囊，泡罩包裝，外包裝即得。
方案三取雞肝散凈藥材，加水適量，煎煮，濾過，濃縮后用醇沉淀，取上清液，回收濃縮，減壓干燥得干膏，粉碎后與輔料混合，制粒，裝膠囊，泡罩包裝，外包裝即得。
方案四取雞肝散凈藥材，加工業(yè)乙醇或甲醇適量，回流提取，回收濃縮后用水沉淀，取上清液，回收濃縮，減壓干燥得干膏，粉碎后與輔料混合，制粒，裝膠囊，泡罩包裝，外包裝即得。
上述四種方案可以同時(shí)進(jìn)行，也可單獨(dú)進(jìn)行。
權(quán)利要求
1.雞肝散提取物總黃酮在制備抗炎藥物中的應(yīng)用，該藥物用于消除炎癥疾病—腎盂腎炎，腎炎，肝炎，腸炎，結(jié)腸炎，胃炎，咽喉炎，關(guān)節(jié)炎等炎癥疾病。
全文摘要
本發(fā)明是雞肝散提取物總黃酮在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。該藥物用于消除炎癥疾病一腎盂腎炎，腎炎，肝炎，腸炎，結(jié)腸炎，胃炎，咽喉炎，關(guān)節(jié)炎等炎癥疾病。經(jīng)動(dòng)物藥理試驗(yàn)表明能顯著降低毛細(xì)血管通透性，能明顯抑制二甲苯所致的耳廓腫脹，能明顯減輕角叉菜膠所致的大鼠足趾腫脹度，能明顯抑制大鼠巴油氣囊腫所致的肉芽組織增生，與陽性對(duì)照藥阿斯匹林的抗炎作用無明顯差異，具呈良好的量效關(guān)系。
文檔編號(hào)A61P19/00GK1785238SQ200510011048
公開日2006年6月14日 申請(qǐng)日期2005年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月30日
發(fā)明者張根懷, 雷澤模, 段志紅, 張永勝, 楊文云, 袁瑋 申請(qǐng)人:昆明金殿制藥有限公司