專利名稱：莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種中藥莪術(shù)醇的固體脂質(zhì)納米粒及其制備方法。
背景技術(shù)：
莪術(shù)醇(Curcmol)，又名姜黃環(huán)氧醇，為從莪術(shù)揮發(fā)油中提取出來的倍半萜類化合物，從70年代起，主要應用于宮頸癌的治療，并獲得了明顯的療效。近年來，藥學工作者對莪術(shù)醇進行了廣泛的藥理學研究，發(fā)現(xiàn)其對小鼠艾氏腹水癌有直接抑制和破壞作用。莪術(shù)醇除了用于治療腫瘤外，還具有抗菌和抗病毒等的功效。從外觀上看，莪術(shù)醇為無色針狀結(jié)晶。莪術(shù)醇易溶于乙醚、氯仿，溶于乙醇，微溶于石油醚，幾乎不溶于水，在水中的溶解度僅為0.3％。(鄧嶸等 莪術(shù)醇的研究進展《遼寧藥物與臨床》2001年第4卷第1期)。由于其難溶于水，限制了在臨床的廣泛使用。有報導將莪術(shù)醇用β環(huán)糊精包合以增加其溶解度(黃桂華等β環(huán)糊精對莪術(shù)醇的包合作用探討《西北藥學雜志》1997年10月第12卷第5期)，但目前并沒有莪術(shù)醇的制劑上市。
固體脂質(zhì)納米粒是一種新型藥物載體，通過將藥物包裹或內(nèi)嵌于類脂核中，制成粒徑約為50～1000nm的固體膠粒給藥系統(tǒng)。其具有靶向、控釋、提高藥物穩(wěn)定性、毒性小等優(yōu)點，是一種極有發(fā)展前景的新型給藥系統(tǒng)。由于其有一定的技術(shù)難度，一般在研究中容易出現(xiàn)載藥量小、突釋及包封率低等的不利因素，造成這些不良結(jié)果的影響因素主要是藥物性質(zhì)、脂質(zhì)材料的性質(zhì)、藥物和輔料的濃度及制備工藝等。由于不同的藥物具有不同的理化特性，因此不同藥物在制備成固體脂質(zhì)納米粒時適合的技術(shù)方案也不同。
莪術(shù)醇屬于天然藥物，熔點為147-142℃，具有半縮酮的氫化奧類化合物。現(xiàn)有技術(shù)中未見有莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的報道，也沒有理化特性與其相似或相近的藥物的固體脂質(zhì)納米粒的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了一種中藥莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒及其制備方法。將莪術(shù)醇包載于固體脂質(zhì)納米顆粒中，制備成納米級的莪術(shù)醇顆粒制劑，降低藥物顆粒的直徑，增加了顆粒的比表面積，從而大大提高了難溶性藥物莪術(shù)醇的生物利用度。通過控制納米粒徑實現(xiàn)納米粒的給藥系統(tǒng)的被動靶向性，增加莪術(shù)醇對病灶部位治療的選擇性，更好發(fā)揮療效。
在前期研究中，發(fā)明人曾嘗試各種脂質(zhì)材料的用量，發(fā)現(xiàn)當所用脂質(zhì)材料與藥物量相同，其他輔料不管怎么變化，結(jié)果制得的納米粒包封率很低，只有20％左右。若增大脂質(zhì)材料的量，如1份藥物中，按重量計算，投入150份以上的脂質(zhì)材料，發(fā)現(xiàn)即使增加高壓均質(zhì)的壓力后，所制得的納米粒粒徑也很大，能達到350nm左右；同時優(yōu)選處方的結(jié)果表明，如乳化劑的用量過少，不能形成穩(wěn)定的乳劑，如乳化劑用量過大，則制得的納米?；鞈乙号菽芏嘁灿悬c粘稠，此外還須考慮到乳化劑用量過高帶來的毒性問題。因此1份的藥物中，按重量計算，投入10～200份乳化劑；在選用磷脂量的過程中，發(fā)現(xiàn)用量太低，如1份的藥物中，按重量計算，只投入1份磷脂，結(jié)果制得的納米粒穩(wěn)定性很差，在室溫下靜置2h左右就有粒子團聚的現(xiàn)象出現(xiàn)，如磷脂用量過大，所制得的納米粒體系比較粘稠，同時也給工業(yè)化生產(chǎn)帶來了很高的成本。通過多種輔料、多種用量比的多次試驗，最后形成了適合莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的本發(fā)明方案。
本發(fā)明的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒通過下列方案實現(xiàn)本發(fā)明的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒，含有下列組分及重量比莪術(shù)醇1份磷脂 3～100份脂質(zhì)材料 5～100份表面活性劑10～200份賦形劑10～400份。
上述各組分優(yōu)選的重量比為莪術(shù)醇1份磷脂 10～70份脂質(zhì)材料 10～80份表面活性劑20～120份賦形劑30～300份。
最優(yōu)選的重量比為莪術(shù)醇1份磷脂 30～50份脂質(zhì)材料 40～50份表面活性劑60～80份賦形劑80～200份。
上述配方中磷脂優(yōu)選大豆卵磷脂、大豆腦磷脂、大豆肌醇磷脂、二月桂酰磷脂酰膽堿、二亞酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿或二豆蔻酰磷脂酰膽堿；脂質(zhì)材料優(yōu)選硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三油酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、微晶石蠟或鯨酯臘；表面活性劑優(yōu)選泊洛沙姆188、聚氧乙烯氫化蓖麻油、吐溫60、賣澤51和吐溫-80中的一種或幾種，賦形劑優(yōu)選甘露醇、葡萄糖、乳糖、葡聚糖、海藻糖中一種或幾種。
更為優(yōu)選的是磷脂為大豆卵磷脂；脂質(zhì)材料為硬脂酸；表面活性劑為泊洛沙姆188；賦形劑為甘露醇。
本發(fā)明莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的制備方法，包括以下步驟將莪術(shù)醇、磷脂、脂質(zhì)材料溶于適量的有機溶劑構(gòu)成有機相；將表面活性劑溶于適量的水中構(gòu)成水相；有機相和水相分別加熱至相同溫度，在攪拌條件下將有機相注入水相中，形成透明體系；將此透明體系減壓除去有機溶劑，濃縮后混于0～2℃的水相中攪拌降溫，再經(jīng)高壓均質(zhì)機處理，得固體脂質(zhì)納米?；鞈乙海缓髮⒌玫降募{米?；鞈乙褐屑尤胭x形劑溶解后過濾，濾液噴霧干燥或經(jīng)冷凍干燥后即得。
上述制備方法中，較優(yōu)選的條件是有機溶液為丙酮、乙醇或異丙醇；有機相和水相體積比為1∶3～1∶4。
本發(fā)明中的賦形劑也稱保護劑，在凍干中是凍干保護劑。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，冷凍干燥后測得的包封率比在混懸液時測得的包封率略微提高，且產(chǎn)品的穩(wěn)定性也提高。因此，本發(fā)明優(yōu)選的制備方法是在干燥步驟選用冷凍干燥方法，這樣制備的產(chǎn)品質(zhì)量更穩(wěn)定。
以往固體脂質(zhì)納米粒的制備方法就是在高于脂質(zhì)材料熔點的溫度下，將有機相通過高速攪拌等途徑分散到同溫度的水相中，攪拌至形成透明體系，再減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑濃縮后迅速降溫，形成固體脂質(zhì)納米?；鞈乙海@樣制得的固體脂質(zhì)納米粒粒徑大小很不均一，而且穩(wěn)定性也很差，在室溫下放置容易開始出現(xiàn)粒子團聚和沉淀現(xiàn)象。
本發(fā)明采用乳化-溶劑揮發(fā)結(jié)合易于工業(yè)化生產(chǎn)的高壓均質(zhì)以及真空冷凍干燥的方法制備莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒凍干粉，通過處方和工藝條件控制納米粒的粒徑和包封率，得到質(zhì)量穩(wěn)定的制劑。本發(fā)明所制備的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒粒徑在100～220nm，包封率大于70％。本發(fā)明所制得的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒凍干粉在室溫下貯存6個月后，用水再分散后測得的粒徑稍微增大，在180～260nm處，包封率基本不變。說明本發(fā)明制得的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒凍干粉穩(wěn)定性較好。
對本發(fā)明的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的粒徑和包封率等指標的評價實驗如下1、拍攝莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的透射電鏡(TEM)照片將本發(fā)明莪術(shù)醇納米?；鞈乙阂哉麴s水適當稀釋，滴加在覆蓋碳膜的銅網(wǎng)上，用2.0％磷鎢酸鈉負染液染色，用JEM-2010透射電子顯微鏡拍攝透射電鏡照片，結(jié)果見圖1，從圖1可以看出本發(fā)明莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒為大小均一、圓整度較好的球形粒子。
2、測定莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的粒徑大小及其分布將本發(fā)明莪術(shù)醇納米?；鞈乙阂哉麴s水適當稀釋，用Zetasizer 3000HS激光粒度分析儀測定納米粒的粒徑大小及其分布范圍。結(jié)果見圖2，圖2表明本發(fā)明制得的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒大部分粒徑在150nm左右，多分散性系數(shù)為0.42，粒徑分布范圍較窄。
3、測定莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的包封率采用超速冷凍離心的方法分離莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒和游離藥物，測定其包封率。吸取1ml固體脂質(zhì)納米?；鞈乙褐萌?.5ml離心管中，4℃條件下以20000轉(zhuǎn)/分鐘超速離心30min，取上清液0.5ml用無水乙醇稀釋數(shù)50倍后加香草醛硫酸溶液(取香草醛0.2g，加乙醇1ml，使溶解，再加冷的硫酸溶液(1→2)100ml，搖勻，即得)顯色。在20～25℃放置1h后在520nm處測定其吸收值；另吸取1ml固體脂質(zhì)納米?；鞈乙杭訜o水乙醇溶解，取0.5ml用無水乙醇稀釋數(shù)50倍后加香草醛硫酸溶液顯色。在20～25℃放置1h后在520nm處測定其吸收值。根據(jù)包封率計算公式計算包封率EN(％)＝(C0-C)/C0×100％其中EN代表包封率；C和C0分別代表上清液中未被包裹的游離藥物含量和納米粒混懸液中的總藥量。
莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的包封率測定結(jié)果為70％～85％。
莪術(shù)醇在水中的溶解度很小，本發(fā)明將莪術(shù)醇制成具有適宜粒徑的固體脂質(zhì)納米粒，不僅提高藥物在載體材料的分散程度，改善藥物的溶出，提高生物利用度，而且可以改變藥物的體內(nèi)過程，增加其對病灶組織的靶向性，提高藥物的治療指數(shù)，減少用藥劑量和毒副作用。本發(fā)明固體脂質(zhì)納米粒凍干粉對藥物具有保護作用，可以較好地解決脂質(zhì)體，微乳等制劑中藥物易泄漏的問題。本發(fā)明的莪術(shù)醇納米粒凍干粉制劑，將難溶性藥物莪術(shù)醇通過上述的方法包載于固體脂質(zhì)納米粒中，使莪術(shù)醇的藥效能在納米水平上發(fā)揮。
本發(fā)明制得的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒，可以直接灌裝在膠囊或西林瓶中，用于口服或注射，也可再加入其它藥劑輔料混和灌裝后通過口服途徑應用于臨床，也可以與適當?shù)妮o料制成粉針劑，在臨用前用適當?shù)娜苊綄⑤g(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒凍干粉再分散，通過靜脈注射途徑應用于臨床。莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒凍干粉每單位劑量主藥含量一般為0.03-1mg。
通過下列實施例更具體地說明本發(fā)明。但這些實施例不應理解為對本發(fā)明任何方面的限制。


圖1、莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的透射電鏡(TEM)照片圖2、莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的粒徑及其分布，橫坐標表示莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的粒徑大小，縱坐標表示某一粒徑納米粒的百分含量。
具體實施例方式
實施例1將10mg莪術(shù)醇和50mg硬脂酸溶于8ml丙酮，30mg大豆卵磷脂以2ml乙醇溶解，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將100mg Poloxamer 188溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。有機相和水相分別加熱至75℃，在1500轉(zhuǎn)/分鐘的攪拌條件下將有機相用6號針頭緩慢注入水相中，形成半透明體系；將此半透明體系用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸發(fā)除去有機溶劑并濃縮至2/5體積。濃縮后的體系快速混于0℃的水相中攪拌降溫2小時，再經(jīng)高壓均質(zhì)機在工作壓力為800Bar，冰浴條件下處理3個循環(huán)，得固體脂質(zhì)納米?；鞈乙骸⒌玫降募{米?；鞈乙褐屑尤胭x形劑甘露醇100mg溶解后，用0.45μm的微孔濾膜過濾除去大粒子，濾液在-40℃條件下經(jīng)冷凍干燥48小時后得凍干粉。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為104.3nm，包封率為70.11％。
實施例2將10mg莪術(shù)醇、900mg單硬脂酸甘油酯溶于8ml丙酮，800mg二棕櫚酰磷脂酰膽堿溶于2ml乙醇，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將2000mg Poloxamer 188溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。制備工藝同實施例1，不同的是將高壓均質(zhì)工作壓力改為1000Bar，半透明體系濃縮至原來的1/2體積，混懸液加入賦形劑海藻糖的量為2g，用噴霧干燥法干燥。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為216.2nm，包封率為72.56％。
實施例3將10mg莪術(shù)醇、100mg三油酸甘油酯溶于8ml丙酮，100mg大豆卵磷脂溶于2ml乙醇，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將200mg Poloxamer 188溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。制備工藝同實施例1，不同的是將高壓均質(zhì)工作壓力改為1000Bar，混懸液加入賦形劑葡萄糖的量為300mg。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為123.4nm，包封率為73.64％。
實施例4將10mg莪術(shù)醇、800mg硬脂酸溶于8ml丙酮，600mg二棕櫚酰磷脂酰膽堿溶于2ml乙醇，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將1200mg Poloxamer 188溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。制備工藝同實施例1，不同的是將高壓均質(zhì)工作壓力改為1200Bar，半透明體系濃縮至原來的1/2體積，混懸液加入賦形劑甘露醇的量為2.2g。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為172.4nm，包封率為80.76％。
實施例5將10mg莪術(shù)醇、400mg單硬脂酸甘油酯溶于8ml丙酮，300mg大豆卵磷脂溶于2ml乙醇，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將600mg Poloxamer 188溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。制備工藝同實施例1，不同的是將高壓均質(zhì)工作壓力改為1000Bar，半透明體系濃縮至原來的1/2體積，混懸液加入賦形劑甘露醇的量為1g。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為141.4nm，包封率為81.64％。
實施例6將10mg莪術(shù)醇、500mg硬脂酸溶于8ml丙酮，500mg大豆卵磷脂溶于2ml乙醇，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將800mg聚氧乙烯氫化蓖麻油溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。制備工藝同實施例1，不同的是將高壓均質(zhì)工作壓力改為1200Bar，半透明體系濃縮至原來的1/2體積，混懸液加入賦形劑甘露醇的量為1.5g。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為166.7nm，包封率為83.45％。
實施例7將10mg莪術(shù)醇、420mg硬脂酸溶于8ml丙酮，450mg大豆卵磷脂溶于2ml乙醇，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將800mg Poloxamer 188溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。制備工藝同實施例1，不同的是將高壓均質(zhì)工作壓力改為1200Bar，半透明體系濃縮至原來的1/2體積，混懸液加入賦形劑葡聚糖的量為1g。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為156.3nm，包封率為82.15％。
實施例8將10mg莪術(shù)醇、440mg硬脂酸溶于8ml丙酮，350mg大豆卵磷脂溶于2ml乙醇，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將650mg Poloxamer 188溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。制備工藝同例1，不同的是將高壓均質(zhì)工作壓力改為1200Bar，半透明體系濃縮至原來的1/2體積，混懸液加入賦形劑甘露醇的量為1.5g。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為152.2nm，包封率為82.36％。
實施例9將10mg莪術(shù)醇、470mg硬脂酸溶于8ml丙酮，420mg大豆卵磷脂溶于2ml乙醇，兩部分混合，構(gòu)成有機相。將720mg Poloxamer 188溶于40ml蒸餾水中，構(gòu)成水相。制備工藝同實施例1，不同的是將高壓均質(zhì)工作壓力改為1000Bar，半透明體系濃縮至原來的1/2體積，混懸液加入賦形劑甘露醇的量為1g。
檢測莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為158.4nm，包封率為83.09％。
權(quán)利要求
1.一種莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒，其特征是含有下列組分及重量比莪術(shù)醇1份磷脂 3～100份脂質(zhì)材料 5～100份表面活性劑10～200份賦形劑10～400份。
2.權(quán)利要求1的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒，其中各組分的重量比莪術(shù)醇1份磷脂 10～70份脂質(zhì)材料 10～80份表面活性劑20～120份賦形劑30～300份。
3.權(quán)利要求1的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒，其中各組分的重量比莪術(shù)醇1份磷脂 30～50份脂質(zhì)材料 40～50份表面活性劑60～80份賦形劑80～200份。
4.權(quán)利要求1、2或3的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒，其中磷脂選自大豆卵磷脂、大豆腦磷脂、大豆肌醇磷脂、二月桂酰磷脂酰膽堿、二亞酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿或二豆蔻酰磷脂酰膽堿；其中脂質(zhì)材料選自硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三油酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、微晶石蠟或鯨酯臘；其中表面活性劑選自泊洛沙姆188、聚氧乙烯氫化蓖麻油、吐溫60、賣澤51和吐溫-80中的一種或幾種，賦形劑選自甘露醇、葡萄糖、乳糖、葡聚糖、海藻糖中的一種或幾種。
5.權(quán)利要求1、2或3的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒，其中磷脂是大豆卵磷脂；脂質(zhì)材料是硬脂酸；表面活性劑是泊洛沙姆188，賦形劑是甘露醇。
6.權(quán)利要求1至5中任一項的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒的制備方法，包括以下步驟將莪術(shù)醇、磷脂、脂質(zhì)材料溶于有機溶劑構(gòu)成有機相；將表面活性劑溶于水中構(gòu)成水相；有機相和水相分別加熱至相同溫度，在攪拌條件下將有機相注入水相中，形成透明體系；將此透明體系減壓除去有機溶劑，濃縮后混于0～2℃的水相中攪拌降溫，再經(jīng)高壓均質(zhì)機處理，得固體脂質(zhì)納米粒混懸液，加賦形劑溶解、過濾，濾液噴霧干燥或冷凍干燥后即得。
7.權(quán)利要求6的制備方法，其中有機溶液為丙酮、乙醇或異丙醇；有機相和水相體積比為1∶3～1∶4。
8.權(quán)利要求6的制備方法，其中干燥是冷凍干燥。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，公開了一種莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒及其制備方法。它含有莪術(shù)醇1份、磷脂3－10份、脂質(zhì)材料5－100份、表面活性劑10－200及賦形劑10－400份。本發(fā)明的莪術(shù)醇固體脂質(zhì)納米粒不僅可以提高藥物在載體材料中的分散程度，改善藥物的溶出，提高生物利用度，而且可以改變藥物的體內(nèi)過程，增加對病灶組織的靶向性，提高藥物的治療指數(shù)，減少用藥劑量和毒副作用。
文檔編號A61K9/127GK1765356SQ200510094630
公開日2006年5月3日 申請日期2005年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月30日
發(fā)明者李學明, 徐元龍, 陳國廣 申請人:南京工業(yè)大學