專利名稱：丹皮組分、制劑及其制備方法與用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療心血管疾病的中藥提取物，具體地說涉及從丹皮中提取的有效組分，制劑及其制備方法與用途，該有效組分主要含有芍藥苷、沒食子酸兩種化合物。
背景技術：
冠心病和心絞痛是危害人類健康的“第一殺手”，近年來，隨著我國人口老年化以及人們工作、生活、飲食結構及環(huán)境等的變化，冠心病等心腦血管疾病的發(fā)生率也逐年增多，嚴重威脅著人民的身心健康。天然產物中許多活性物質具有抗心肌缺血、缺氧作用，其中一些已開發(fā)成治療冠心病和心絞痛的新藥，如治療冠心病的藥物地奧心血康，它是由從中藥中提取的8種甾體皂甙制成的純中藥制劑；心達康是以沙棘為原料提取加工而成的純天然藥物，其有效成分為沙棘總黃酮。因而從天然產物中尋找具有抗心肌缺血、缺氧生理活性的有效物質，是發(fā)現、開發(fā)新藥的有效途徑之一。我國藥用生物資源十分豐富，其生理活性物質是研究和發(fā)現新藥先導化學物，開發(fā)新藥的天然寶庫。目前，我國從天然產物中提取活性物質，用于開發(fā)成治療冠心病、安全性好、毒性低的新藥還很少，從天然產物中提取活性物質，開發(fā)成具有抗心肌缺血，用于治療冠心病和心絞痛的新藥，具有重要應用價值和廣闊發(fā)展前景。
丹皮又名牡丹皮，系雙子葉植物藥毛茛科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的根皮。分布河北、河南、山東、四川、陜西、甘肅等地。全國各地均有栽培，藥材主產安徽、四川、甘肅、陜西、湖北、湖南、山東、貴州等地，此外，云南、浙江亦產。其性微寒，味辛苦，涼，入心、肝、腎經，具有清熱，涼血，和血，消瘀的功效。丹皮炮制最早見于我國梁代陶宏景所撰《集注》中，認為“皆促破，去心?！薄侗静菥V目》等醫(yī)書中記載“丹皮木心不入藥，需去之?！毖芯勘砻鞯てずてし?Paeonol)、芍藥甙(Paeoniflorin)、羥基芍藥甙、苯甲酰芍藥甙(Benzoylpaeoniflorin)、苯甲酰羥基芍藥甙、芍藥苷元(Paeoniflorigenone)、6-羥基香豆素(6-hydroxycoumarin)和沒食子酸(Gallic Acid)，以及苯甲酸、植物甾醇、蔗糖、葡萄糖、阿拉伯糖等。揮發(fā)油中含有苯甲酸(Benzoic Acid)、十四烷烴(Tetradecane)、2-羥基-4-甲氧基-苯乙酮(2-hydroxy-4-methoxy acetophenone)、2，6-雙特丁基對苯醌(2，6-ditert-butyl-p-Benzoquinone)、鄰苯二甲酸二乙酯(Diethyl Phthalate)、十四酸異丙酯(Isopropyl Myristate)等化合物(陳悅嬌等，廣州食品工業(yè)科技，2002，18(4)36-37)。吳少華等人首次從丹皮中分離得到了以下五種化合物白樺脂酸(BetulinicAcid)、白樺脂醇(Betulin)，齊墩果酸(OleanolicAcid)、3β，23-dihydroxy-30-norolean-12，20(29)-dien-28-oic acid、3-O-methylpaeonisuffral(吳少華等，中草藥，2002，33(8)679-680)。
丹皮對實驗性心肌缺血有減輕損傷程度作用，并能夠降低心肌耗氧量，增加冠脈流量，認為丹皮有調節(jié)血行，疏通血脈之作用，因而對心肌缺血有保護作用(馬玉玲等，山西醫(yī)藥雜志，1984，13(4)212-214)。芍藥苷有抗血小板聚集作用，抗血栓形成的作用，對肝臟的保護作用和抗腫瘤作用。芍藥苷對心肌細胞Ica、L有阻斷作用(張廣欣等，中國藥理學通報，2003，19(8)863-866)。芍藥苷可增加神經細胞存活數量，降低死亡率，對抗KA所致的興奮性神經損傷(吳玉梅等，中國藥理學與毒理學雜志，2002，16(3)172-175)。芍藥苷對鈣超載所致PC12細胞損傷有顯著的保護作用(楊軍等，中國新藥雜志，2001，10(6)426-428)。芍藥苷增強血虛證小鼠骨髓造血干祖細胞的集落形成能力；芍藥苷可促進骨髓基質細胞分泌造血因子(G-CSF，GM-CSF，PDGF-a)等，抑制造血抑制因子(M-CIP)的分泌(高月，天津中醫(yī)藥，2003，20(6)47-51)。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種丹皮有效組分。
本發(fā)明的另一目的在于提供該丹皮有效組分的制備方法及其用途。
本發(fā)明還提供了包含丹皮有效組分的制劑。
本發(fā)明以如下技術方案予以實施本發(fā)明的丹皮有效組分中，主要含有芍藥苷和沒食子酸。其中，以重量百分比計，芍藥苷的含量為70～80％，沒食子酸的含量為10～20％。
優(yōu)選的，本發(fā)明的丹皮有效組分中，以重量百分比計，芍藥苷的含量為72～78％，沒食子酸的含量為12～18％。
最佳的，本發(fā)明的丹皮有效組分中，以重量百分比計，芍藥苷的含量為74～76％，沒食子酸的含量為14～16％。
本發(fā)明的丹皮有效組分的制備方法，包括下列步驟將丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱提取得提取液，將提取液濃縮成浸膏，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱為半制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫。
優(yōu)選的，本發(fā)明的丹皮有效組分制備方法，包括下列步驟將丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇(1∶0.8～1.2)，加熱回流0.8～1.2小時，提取1～3次，合并濾液得提取液，將提取液濃縮成浸膏，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯(47～53∶1)作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇(8～13∶1)作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱為半制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫，流速為2.8～3.2ml/min，柱溫為室溫。
最佳的，本發(fā)明的丹皮有效組分制備方法，包括下列步驟將丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇(1∶1)，加熱回流1小時，提取2次，合并濾液得提取液；將提取液濃縮成浸膏，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯(50∶1)作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇(10∶1)作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱為半制備柱(Lichrospher C18；10.0mm×250mm，5μm)，流動相為水(A)和乙腈(B)，梯度洗脫程序如下0分鐘時，流動相A為80％的水溶液、流動相B為20％的乙腈溶液；40分鐘時，流動相A為20％的水溶液、流動相B為80％的乙腈溶液；50分鐘時，流動相A為5％的水溶液、流動相B為95％的乙腈溶液；流速為3ml/min，柱溫為室溫；樣品用100％乙醇溶解，經制備液相色譜分離，在時間段7.6～9.7min收集溶液，溶液經濃縮干燥后得到有效組分。
本發(fā)明的丹皮有效組分可以作為活性成分，加入藥劑學上接受的輔料，按照藥劑學上記載的制劑的制備方法制成制劑。
本發(fā)明的丹皮有效組分還可以作為活性成分之一，加入藥劑學上接受的輔料，按照藥劑學上記載的制劑的制備方法制成制劑。
所述的制劑包括注射液、滴注液、粉針劑、顆粒劑、片劑、沖劑、散劑、口服液、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口含劑、顆粒劑、丸劑、膏劑、丹劑、噴霧劑、滴丸劑、崩解劑、口崩片、微丸等。
本發(fā)明的丹皮有效組分及其制劑可在制備治療、預防心血管疾病藥物中進行應用。
本發(fā)明的有益效果為1.本發(fā)明的提取分離工藝中使用了正相硅膠柱，能有效地除去糖、蛋白質、氨基酸等雜質，提高有效成分的含量，同時采用了制備色譜，能快速準確的得到有效成分。
2.本發(fā)明提供的丹皮有效組分化學成分簡單明確，在藥理研究上更易于闡明其作用機制，在生產中更易于藥物的質量控制。


圖1為本發(fā)明丹皮有效組分的HPLC分析圖。
具體實施例方式
下面將結合實施例進一步詳細說明本發(fā)明的實質內容和有益效果，該實施例僅用于說明本發(fā)明而非對本發(fā)明的限制。
實施例一丹皮有效組分的制備將200g丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱提取得提取液，將提取液濃縮成浸膏16.8g，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品3.9g；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱為半制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫。樣品用100％乙醇溶解，經制備液相色譜分離，在時間段7.6～9.7min收集溶液，濃縮干燥后得到有效組分0.34g。
實施例二 丹皮有效組分的制備將500g丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇(1∶0.8～1.2)，加熱回流0.8～1.2小時，提取1～3次，合并濾液得提取液，將提取液濃縮成浸膏42g，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯(47～53∶1)作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇(8～13∶1)作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品11.8g；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱為半制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫，流速為2.8～3.2ml/min，柱溫為室溫。樣品用100％乙醇溶解，經制備液相色譜分離，在時間段7.6～9.7min收集溶液，濃縮干燥后得到有效組分0.91g。
實施例三 丹皮有效組分的制備取丹皮藥材250g，將其粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇(1∶1)，加熱回流1小時，提取2次，濾液合并得提取液。將提取液濃縮成浸膏得22g，將浸膏和硅膠拌樣，用正相硅膠柱進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯(50∶1)作為流動相，得洗脫液I，然后改換氯仿和甲醇(10∶1)作為流動相，得洗脫液II，濃縮干燥后得6.2g樣品。用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品。制備色譜的分離條件色譜柱為漢邦半制備柱(Lichrospher C18；10.0mm×250mm，5μm)，流動相為水(A)和乙腈(B)，洗脫梯度見表2，流速為3ml/min，柱溫為室溫。樣品用100％乙醇溶解，經制備液相色譜分離，在時間段7.6～9.7min收集溶液，濃縮干燥后得到有效組分0.49g。
實施例四 丹皮有效組分的分析(1)丹皮提取物中芍藥苷、沒食子酸的含量測定(高效液相色譜法)色譜條件色譜柱Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6mm×150mm，5μm)；采用梯度洗脫，流動相A相為0.2％冰醋酸水溶液，流動相B相為含0.2％冰醋酸的乙腈溶液；梯度洗脫程序如下0分鐘時，流動相A為90％的0.2％冰醋酸水溶液、流動相B為10％的0.2％冰醋酸的乙腈溶液；10分鐘時，流動相A為50％的0.2％冰醋酸水溶液、流動相B為50％的0.2％冰醋酸的乙腈溶液；30分鐘時，流動相A為5％的0.2％冰醋酸水溶液、流動相B為95％的0.2％冰醋酸的乙腈溶液；流速0.5mL·min-1；檢測波長全波長；柱溫30℃；ELSD條件漂移管溫度100℃；氮氣流速1.4L/min供試品溶液的制備稱取本品，用甲醇溶液溶解在容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定方法精密吸取供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。
(2)上述丹皮提取物HPLC-ELSD指紋圖譜測定方法參見(1)上述丹皮提取物中的芍藥苷、沒食子酸含量測定(高效液相色譜法)。記錄色譜時間為30分鐘。
分析結果丹皮有效組分的HPLC-ELSD分析譜圖見圖1，圖1中的1、2分別為芍藥苷、沒食子酸。
本發(fā)明中，芍藥苷的結構式為 本發(fā)明中，沒食子酰芍藥苷的結構式為
實施例五 滴丸的制備取實施例三的丹皮有效組分0.5g與10.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸滴灌中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸400粒。
實施例六 凍干粉針劑的制備取實施例三的丹皮有效組分0.5g、葡萄糖4.5g、硫代硫酸鈉0.9g和蒸餾水1ml，上述組分混合均勻后，冷凍干燥，分裝500支，即得。
實施例七 凍干粉針劑的制備取降香油1.5g，加入到13ml飽和的羥丙基β-環(huán)糊精中，攪拌溶解，濾過，濾液低溫干燥得降香油和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。除上述降香油合羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末外，再取實施例三的丹皮提取物0.5g、甘露醇5.5g、依地酸鈣鈉0.9g和蒸餾水2ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝300支，即得。
實施例 八丹皮有效組分的藥理實驗1藥理模型乳鼠心肌細胞缺血缺氧模型原代心肌細胞培養(yǎng)出生1～3天SD乳鼠處死后，取心臟，經PBS液清洗后減成1mm3左右的碎塊。用0.125％胰蛋白酶(Sigma，USA)+0.05％膠原酶II(Gibco，USA)于37度消化3～4次。差速貼壁法分離成纖維細胞1.5小時后，細胞懸液轉移至48孔板中(每孔約4×105細胞)。經DMEM(Gibco，USA)加10％胎牛血清(Falcon，USA)培養(yǎng)3-6天的細胞供藥效篩選。篩選前1天替換為無血清培養(yǎng)液。培養(yǎng)3～6天的心肌細胞，PBS洗滌后加入含藥培養(yǎng)液。置于95％N2和5％CO2培養(yǎng)箱中缺氧6小時。然后在CO2培養(yǎng)箱中復氧3小時。取細胞上清液測定LDH含量。
給藥方案提取得到的丹皮有效組分用無糖Hanks液配成10-4g/mL供試液，脂溶性成分可加入少量DMSO助溶(DMSO終濃度控制在0.2％以下)。各組分在培養(yǎng)液中的終濃度控制在10-5g/mL。
乳酸脫氫酶含量測定細胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶含量能夠表示細胞損傷程度。漏入上清液中的乳酸脫氫酶含量越高，表明細胞損傷也顯著。乳酸脫氫酶測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所。測定方法為取30微升細胞上清液，加入50微升基質緩沖液及10微升乳酸脫氫酶輔酶，37度振蕩15分鐘，再加入50微升2，4-二硝基苯肼，37度振蕩15分鐘。平行空白。取反應液50微升加入200微升0.4mol/L氫氧化鈉溶液，靜置3～4分鐘后，用酶標儀于450nm測定光度值。
藥效結果所有數據用均值±方差表示。采用單邊方差分析和T檢驗進行統計學分析。與模型組相比，P＜0.05認為顯著有效。藥效結果見表1。根據心肌細胞乳酸脫氫酶(LDH)檢測結果，丹皮有效組分對降低LDH釋放有非常顯著效果。
表1

2藥理模型臍靜脈內皮細胞缺氧復氧模型原代臍靜脈內皮細胞培養(yǎng)取健康新生兒臍帶，用30～50mlHanks液洗凈靜脈血管內的殘留血跡。視臍帶長度加入相應量的0.1％膠原酶I，轉入培養(yǎng)箱消化15～20分鐘。隨后將臍帶內消化液小心收集到燒杯中，并用Hanks液將燒杯潤洗兩次，一并收集到燒杯中分裝于離心管，900rpm離心10分鐘。吸去上清液，用M199培養(yǎng)液(含10％胎牛血清，100U/ml雙抗，0.15mg/ml Heparin，10uM VC)充分溶解沉淀。將所得細胞懸液分裝于5cm2培養(yǎng)瓶，置于培養(yǎng)箱內培養(yǎng)。第二天換成采用含30ug/ml ECGS的M199培養(yǎng)液，之后每三天換一次培養(yǎng)液直至細胞鋪滿底面。所用細胞均為原代內皮細胞。造模前將培養(yǎng)瓶內細胞接種至96孔板并培養(yǎng)一天，所用細胞量為3.5～4萬/孔。造模時，吸棄舊的M199培養(yǎng)液，加入含藥無酚紅M199培養(yǎng)液，每孔總量為100ul。置于95％N2和5％CO2培養(yǎng)箱中缺氧12小時，然后在CO2培養(yǎng)箱中復氧2小時。取細胞上清液測定LDH含量和NO含量。
給藥方案提取得到的丹皮有效組分用無糖Hanks液配成10-4g/mL供試液，脂溶性成分可加入少量DMSO助溶(DMSO終濃度控制在0.2％以下)。各組分在無酚紅M199培養(yǎng)液中的終濃度控制在10-5g/mL。
乳酸脫氫酶含量測定細胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶含量能夠表示細胞損傷程度。漏入上清液中的乳酸脫氫酶含量越高，表明細胞損傷也顯著。乳酸脫氫酶測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所。測定方法為取30微升細胞上清液，加入50微升基質緩沖液及10微升乳酸脫氫酶輔酶，37度振蕩15分鐘，再加入50微升2，4-二硝基苯肼，37度振蕩15分鐘。平行空白。取反應液50微升加入200微升0.4mol/L氫氧化鈉溶液，靜置3～4分鐘后，用酶標儀于450nm測定光度值。
藥效結果所有數據用均值±方差表示。采用單邊方差分析和T檢驗進行統計學分析。與模型組相比，P＜0.05認為顯著有效。藥效結果見表2。根據內皮細胞乳酸脫氫酶檢測結果，丹皮有效組分對降低LDH釋放有非常顯著效果。
表2

權利要求
1.一種丹皮有效組分，其特征在于，以重量百分比計，芍藥苷的含量為70～80％，沒食子酸的含量為10～20％。
2.如權利要求1所述的丹皮有效組分，以重量百分比計，其中芍藥苷的含量為72～78％，沒食子酸的含量為12～18％。
3.如權利要求1所述的丹皮有效組分，以重量百分比計，其中芍藥苷的含量為74～76％，沒食子酸的含量為14～16％。
4.權利要求1-3任一權利要求所述丹皮有效組分的制備方法，包括下列步驟將丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱提取得提取液，將提取液濃縮成浸膏，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱為半制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫。
5.如權利要求書4所述的丹皮有效組分的制備方法，包括下列步驟將丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱回流0.8～1.2小時，提取1～3次，合并濾液得提取液，將提取液濃縮成浸膏，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱為半制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫，流速為2.8～3.2ml/min，柱溫為室溫。
6.如權利要求5所述的丹皮有效組分的制備方法，其中所述的乙酸乙酯和乙醇的體積比為1∶0.8～1.2，石油醚和乙酸乙酯的體積比為47～53∶1，氯仿和甲醇的體積比為8～13∶1。
7.如權利要求書4所述的丹皮有效組分的制備方法，包括下列步驟將丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱回流1小時，提取2次，合并濾液得提取液；將提取液濃縮成浸膏，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱為半制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫程序如下0分鐘時，流動相A為80％的水溶液、流動相B為20％的乙腈溶液；40分鐘時，流動相A為20％的水溶液、流動相B為80％的乙腈溶液；50分鐘時，流動相A為5％的水溶液、流動相B為95％的乙腈溶液；流速為3ml/min，柱溫為室溫；樣品用100％乙醇溶解，經制備液相色譜分離，在時間段7.6～9.7min收集溶液，溶液經濃縮干燥后得到有效組分。
8.如權利要求7所述的丹皮有效組分的制備方法，其中所述的乙酸乙酯和乙醇的體積比為1∶1，石油醚和乙酸乙酯的體積比為50∶1，氯仿和甲醇的體積比為10∶1。
9.含有權利要求1-3任一權利要求所述的單皮有效組分的藥用制劑，其特征是，按照藥劑學允許的制備方法制成藥劑學接受的任一藥用制劑。
10.權利要求1-3任一權利要求所述的丹皮有效組分在制備治療和預防心血管疾病藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種丹皮有效組分，制劑及其制備方法與用途。該有效組分中主要含有芍藥苷和沒食子酸，其中，按照重量百分比計，芍藥苷的含量為70～80％，沒食子酸的含量為10～20％。本發(fā)明的丹皮有效組分的制備方法包括下列步驟將丹皮藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱提取得提取液，將提取液濃縮成浸膏，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯作為流動相，然后改換氯仿和甲醇作為流動相，得洗脫液，將洗脫液濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離，即得。本發(fā)明提供的丹皮有效組分化學成分簡單明確，在藥理研究上更易于闡明其作用機制，在生產中更易于藥物的質量控制。
文檔編號A61P9/10GK1981819SQ200510122349
公開日2007年6月20日 申請日期2005年12月14日 優(yōu)先權日2005年12月14日
發(fā)明者程翼宇, 賀慶, 王毅, 王學偉, 李云飛, 葛志偉, 胡興江 申請人:天津天士力現代中藥研究開發(fā)有限公司