專利名稱：：抗蠕蟲咪唑-噻唑衍生物的制作方法抗蠕蟲咪唑-漆唑衍生物本發(fā)明涉及新的抗蠕蟲四咪唑衍生物及其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽、包含所迷新化合物的組合物、所述化合物和組合物的制備方法及其作為藥物的用途，特別是用于治療、控制和預(yù)防溫血動物的體內(nèi)和體外寄生蟲感染。四咪唑和左旋咪唑(levamisole)是眾所周知的抗蠕蟲藥，具有下列結(jié)構(gòu)(四咪唑為外消旋dl-形式，左旋咪唑為純的對映異構(gòu)體l-形式)。左旋咪唑是一種最常用的抗蠕蟲藥，被廣泛用于控制農(nóng)場動物(特別是羊和牛)的線蟲類寄生蟲。然而，線蟲對抗蠕蟲藥的耐藥性增強(qiáng)已成為農(nóng)場動物的一個主要問題，特別是捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(//aewowc/MSco"〖o(jì)m^)。而且，已經(jīng)發(fā)J見對廣;乏4吏用的左;J走n米p生、甲苯達(dá)唑(mebendazole)和伊維菌素(ivermectin)等抗蠕蟲藥耐藥性增強(qiáng)的多重耐藥品系。因此，需要尋找新的具有抗蠕蟲活性、對抗左旋咪唑抗性和多藥耐藥性線蟲的抗蠕蟲藥。其它已公開的四咪唑類抗蠕蟲藥，參見例如US-4,014,892，實例有呋喃-2-N-[3-(2,3,5,6-四氫-咪唑并[2,l-b]噻唑-6-基)-苯基]-曱酰胺(化合物(163》和(四氬呋喃-2-基甲基)-[3-(2,3,5,6-四氫-咪唑并[2,l-b]噻唑-6-基)-苯基]-胺(化合物(110))。后一化合物還在GB-1,365，515中被披露為化合物(81)。本發(fā)明涉及新的式(I)化合物、所述式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽和它們的立體化學(xué)異構(gòu)體形式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(I)正如藥理學(xué)實施例C.l中所證明，本發(fā)明化合物要比本領(lǐng)域已知化合物呋喃-2-N-[3-(2,3,5,6-四氬-咪唑并[2,l-b]噻唑-6-基)-苯基]國曱酰胺(說明書中的化合物(A))和(四氫呋喃-2-基曱基)-[3-(2,3,5，6-四氫誦咪唑并[2，l-b]噻唑-6-基)-苯基]-胺(說明書中的化合物(B))對搶轉(zhuǎn)血矛線蟲(7faewo"c/2zuco"tom/s)的多重耐藥品系(左旋咪唾、曱苯達(dá)峻、伊維菌素和氯生太爾(closantel)抗性)具有預(yù)料不到的更好的抗蠕蟲活性。上文所述的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽包括能夠形成式(I)化合物的有治療活性的無毒酸加成鹽形式。這些藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可以用合適酸處理相應(yīng)》咸而方便獲得。合適的酸包括例如無才幾酸，例如氫卣酸(如鹽酸或氫溴酸)、石克酸、硝酸、磷酸等酸；或有才幾酸，例如乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、4寧一象酸、曱磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對曱苯磺酸、環(huán)己烷氨基磺酸、水楊酸、對氨基水楊酸、樸姆酸等酸。反之，所述鹽形式可以用合適的石威處理而轉(zhuǎn)化為游離^s咸形式。上文使用的術(shù)語"立體化學(xué)異構(gòu)體形式"定義為式(I)化合物可能具有的所有可能的異構(gòu)體形式。除非另有說明，否則式(I)化合物的化學(xué)命名代表所有可能的立體化學(xué)異構(gòu)體形式的混合物，所述混合物包含基本分子結(jié)構(gòu)的所有非對映異構(gòu)體和對映異構(gòu)體。更具體地說，立體異構(gòu)中心可有R構(gòu)型或S構(gòu)型。式(I)化合物具有2個手性碳原子，如下列結(jié)構(gòu)中的星號*所示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>共產(chǎn)生4種不同的立體異構(gòu)體。顯然，式(I)化合物的所有4種單獨的立體化學(xué)異構(gòu)體形式及其每種可能的混合物都屬于本發(fā)明范疇。本領(lǐng)域技術(shù)人員可很容易地使用公知的方法(例如X射線衍射法)確定式(I)化合物及其制備中使用的中間體的絕對立體化學(xué)構(gòu)型。此外，一些式(I)化合物及其制備中使用的一些中間體可能出現(xiàn)多晶現(xiàn)象。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明包括可用于治療上文所述疾病的任何多晶型物。一組具體的化合物是式(I-a)化合物，被定義為在2,3,5,6-四氫-咪唑并[2,l-b]噻唑部分的6位具有(S)構(gòu)型的式(I)化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>一種優(yōu)選的化合物是(2R)-四氬-呋喃-2-N-(6S)-[3-(2，3，5,6-四氬-咪唑并[2，1-1)]噻唑-6-基)-苯基]-曱酰胺。式(I)化合物一般通過以下方法制備將式(V)中間體溶于HC1酸化的二螺烷溶液中，再與式(IV)中間體在合適的惰性反應(yīng)溶劑例如乙腈中反應(yīng)。式(IV)中間體可按下述方法制備。使市售起始化合物2-溴-1-(3-硝基苯基)-乙酮酸與4,5-二氫噻唑胺反應(yīng)，然后將所得中間體(I)用適當(dāng)?shù)倪€原劑例如硼氫化鈉在合適的溶劑例如乙醇中還原，得到中間中間體(V)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>中間體(TV)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>體(II)。然后，中間體(II)用亞硫酰氯在惰性反應(yīng)溶劑例如二氯乙烷中處理，從而生成中間體(III)的2,3,5,6-四氬-咪唑并[2,l-b]p羞唑基環(huán)。首先將中間體(III)轉(zhuǎn)化為其HC1加成鹽，然后用本領(lǐng)域已知的還原劑如鐵粉和NH4C1水溶液或SnCl2水溶液將其硝基還原為氨基，從而得到中間體(IV)。NH，NX、'S還原中間體O)O,N.1)S0C122)NaIIC03/H20中間體(II)中間體(m)Fe/NH4C1.HClH20/CH3OHH,N中間體(m-Hci-鹽)中間體(iv)中間體(v)通過四氫-2-呋喃曱酸與草酰氯反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為酰氯類似物而制得。分別以(R)-或(S)-四氫-2-呋喃甲酸為原料，也可將中間體(V)制備成其立體異構(gòu)體純的(R)-或(S)-對映異構(gòu)體。Q、，0ClCIOH0CI中間體CV)可4吏用本領(lǐng)域已知的分離4支術(shù)，例如采用手性固定相的液相色譜法，將式(ni)中間體分離成其(+)-或(-)-立體異構(gòu)體。/NYS\手性分離02N中間體(ni)G^中間體(ni-a)中間體(in-b)用上述方法制備的式(I)化合物可以對映異構(gòu)體的外消旋混合物形式合成，外消旋混合物可根據(jù)本領(lǐng)域已知的拆分方法彼此分離。那些以外消旋形式獲得的式(I)化合物可與合適的手性酸反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的非對映異構(gòu)鹽形式。所述非對映異構(gòu)鹽形式隨后通過例如選擇結(jié)晶法或分步結(jié)晶法分離，然后用堿釋放出各對映異構(gòu)體。對映異構(gòu)體形式的式(I)化合物的另一種分離方法包括使用手性固定相的立體化學(xué)異構(gòu)體形式衍生，前提條件是反應(yīng)存在立體專一性。如果需要特定立體異構(gòu)體，優(yōu)選所述化合物通過立體專一制備法合成。這些方法更適合使用對映異構(gòu)體純的原料。式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體形式具有良好的抗蠕蟲活性。因此，本發(fā)明的式(I)化合物可用作治療、控制和預(yù)防溫血動物的體內(nèi)和體外寄生蟲感染的藥物。體內(nèi)和體夕卜寄生蟲包括線形動物門(A^w"^e/肌'"^e力例如裂口線蟲屬(^4wWo對omwm)、鉤口線蟲屬04wcy/astowa)、血管圓線蟲屬(Z"g!os^w2gy/1^)、異尖線蟲屬(^4m'sa/a's)、蛔蟲屬(^UcorZs)、布魯線蟲屬(Bn/g/")、仰口線蟲屬(^moWowi^)、毛細(xì)線蟲屬(Cap〃/an'a)、夏氏線蟲屬(C7w6eW/")、古柏線蟲屬(Coo/en力)、直口線蟲屬(Cj^/2oytomww)、杯環(huán)線蟲屬(Cy/coc少c/w力、網(wǎng)尾線蟲屬(肺蠕蟲)(D/c(yocaw/ws(lungworm))、只又參f纟《蟲屬(Z)/peto/o"ewa)、惡、絲蟲屬(犬惡、絲蟲)(Dz'ro力/ar/a(heartworm))、龍纟戔蟲屬(Dr"cw"cw/w力、油月旨纟戔蟲屬(五/aeop/7ora)、蓋格線蟲屬(G(3扭ha)、G/oftocep/wtowraraW偷、血矛線蟲屬(i^emo"c/m力、異刺線蟲屬(ff"erah's)、豬圓形線蟲屬(/^os^ra/tgy/w》、后圓線蟲屬(肺蟲需蟲)(A/etos7^o"gy/ws(lungworm》、^夢勒線蟲屬(肺蠕蟲(^fwe〃eniw(lungworm))、美洲板口線蟲(A&cator"mer/c朋w51)、細(xì)頸線蟲屬(7Vew"to(i/ms)、新蟲回蟲屬(iVeocwca^s1)、結(jié)節(jié)線蟲屬(<9"op/2agoytomww)、盤尾線蟲屬((9"c/ocen:a)、奧斯脫線蟲屬((9iteW"gza)、尖尾線蟲屬(0;qywn》、副蟲回蟲屬(尸arawc"r/5)、原、圓纟戔蟲屬(肺蠕蟲)(尸wto^ra"gy/ws(lungworm))、腹腔絲蟲屬(Setoha)、冠絲蟲屬(&e//2""o力/""/")、類圓線蟲屬(&w"^/o/^fe力、圓線蟲屬(S化owgW"力、比翼線蟲屬(辦wgawzw)、背帶線蟲屬(re/a6toracrgZa)、弓蟲回蟲屬(7b;cascan力、弓首線蟲屬(7b;cocara)、毛形線蟲屬(7>^/2/朋//<3)、毛圓線蟲屬(TWc/zo對ra"gy/ws)、鞭蟲屬(7Wc/mn's)、狹頭鉤蟲([/"c^3na對e"oc—cr/")和班氏吳策線蟲(腸c/^"m'"tocro/")。本文使用的溫血動物包括人和非人動物例如農(nóng)場動物(例如綿羊、牛、豬、山羊或馬)、馴養(yǎng)動物(例如狗、貓或豚鼠)以及關(guān)養(yǎng)的野生動物和鳥類(例如家禽)。鑒于式(I)化合物的效用，由此可見，本發(fā)明還提供治療、控制和預(yù)防溫血動物的體內(nèi)和體外寄生蟲感染的方法。這種方法包括給予有需要的溫血動物治療有效量的式(I)化合物。本文使用的術(shù)語"治療有效量的式(I)化合物"是指由醫(yī)生或獸醫(yī)所確定的式(I)化合物在溫血動物中引發(fā)生物反應(yīng)或藥物反應(yīng)(包括減輕所治療病癥的癥狀)的量。治療有效量可通過常規(guī)最優(yōu)化技術(shù)確定并且根據(jù)所治療的具體病癥、溫血動物的狀況、給藥途徑、制劑、醫(yī)師的診斷以及對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的其它因素來確定。治療有效量可通過多劑量來實現(xiàn)。本發(fā)明還提供藥物組合物，其包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的式(I)化合物。用于溫血動物(包括人)的式(I)化合物可單獨給予，但通常以與藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可接受的稀釋劑或載體的混合物給予，稀釋劑或載體根據(jù)計劃給藥途徑及標(biāo)準(zhǔn)藥物學(xué)實踐選取。例如，它們可以下列形式口服(包括舌下)給予片劑(包含淀粉或乳糖等賦形劑)、單獨的或者與賦形劑混合的膠嚢劑或卵狀小體劑(ovules)、或者為酏劑、溶液劑或混懸劑(包含矯味劑或著色劑)?？蓪⑹?I)化合物摻入膠嚢劑、片劑或大丸劑，在口服給予后的某一特定時間段內(nèi)，通過所迷膠嚢劑、片劑或大丸劑的延遲溶出而靶向結(jié)腸或十二指腸。式(I)化合物可以進(jìn)行胃腸道外注射，例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下注射。對于腸胃外給藥，最好使用無菌水溶液劑或混懸劑，其中可包含其它物質(zhì)例如足夠的鹽或葡萄糖以使溶液與血液等滲。式(I)化合物可以下列形式局部給予無菌乳膏劑、凝膠劑、澆潑劑或噴滴劑(pour-onorspot-onformulations)、混懸劑、洗劑、軟膏劑、撒布粉、噴霧劑、摻入藥物的敷料或透皮貼劑。例如，式(I)化合物可摻合為聚乙二醇或液體石蠟的水性或油性乳膏劑，或者它們可摻合為白色軟石蠟基質(zhì)的軟膏劑，或者為含纖維素或聚丙烯酸酯衍生物或其它粘度改進(jìn)劑的水凝膠，或者為干燥粉劑或液體噴霧劑或含丁烷/丙烷、HFA或CFC推進(jìn)劑的氣霧劑，或者為摻入藥物的敷料或薄紗敷料，含白色軟石蠟或聚乙二醇浸滲紗布的敷料或含水凝膠、水膠體、藻酸鹽或薄膜的敷料。式(I)化合物還可作為滴眼液眼內(nèi)給藥，其中含有合適的緩沖劑、粘度改進(jìn)劑(例如纖維素衍生物)、防腐劑(例如苯扎氯銨(BZK》和張力(tenicity)調(diào)節(jié)劑(例如氯化鈉)。這樣的配方技術(shù)為本領(lǐng)域眾所周知的。所有這樣的制劑還可包含適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑和防腐劑。根據(jù)常規(guī)獸醫(yī)實踐，獸醫(yī)用化合物可作為合適的可接受制劑給予，并且獸醫(yī)可以決定對具體動物最適合的給藥方案和給藥途徑。對于局部施藥，可使用浸泡劑、噴霧劑、散劑、粉劑、澆潑劑、噴滴劑、乳油、噴射液、洗發(fā)劑、頸圏、附屬物或馬具(haraess)。這樣的制劑可用常規(guī)方法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)獸醫(yī)學(xué)和藥學(xué)實踐制備。因此，膠嚢劑、大丸劑或片劑可如下制備將活性成分與合適的微細(xì)稀釋劑或載體混合，外加崩解劑和/或粘合劑例如淀粉、乳糖、滑石粉或硬脂酸鎂。獸用頓服藥制劑可將活性成分與分散劑或潤濕劑一起分散于水溶液制備，注射制劑可制備為無菌溶液劑或乳劑。澆潑劑或噴滴劑可將活性成分溶于可接受的液體載體溶媒中制備，溶媒例如丁基二甘醇(butyldigol)、液體石蠟或非揮發(fā)性酯(添加或沒有添加揮發(fā)性成分例如異丙醇)。或者，澆潑劑、噴滴劑或噴霧劑可膠嚢化制備以便在動物表面留下活性劑殘留物。這些制劑根據(jù)活性化合物重量、所治療宿主動物的種類、感染的嚴(yán)重程度和類型、宿主的類型和體重而變化。包含式(I)化合物的制劑可連續(xù)給藥，特別是用已知方法進(jìn)行預(yù)防時。作為另一種選擇，組合物可與動物飼料一起給予，為此，與常規(guī)動物飼料混合制備濃縮飼料添加劑或預(yù)混合料。根據(jù)常規(guī)藥物實踐，人用式(I)化合物作為藥學(xué)上可接受的制劑給予。式(I)化合物可與其它抗蠕蟲藥或抗寄生蟲藥聯(lián)合^f吏用以拓寬作用譜或防止產(chǎn)生耐藥性。其它抗蠕蟲藥為例如阿維菌素類和米爾倍霉素類，例如阿巴克丁、cydectin、多拉克丁、依立諾克丁、伊維菌素、米爾倍霉素、米爾倍霉素D、米爾倍霉素肟、莫昔克丁、司拉克丁等；苯并咪唑類，例如阿苯達(dá)唑、坎苯達(dá)唑、芬苯達(dá)唑、氟苯達(dá)峻、曱苯達(dá)哇、奧芬達(dá)峻、巾自苯達(dá)峻、奧苯達(dá)唑和環(huán)苯達(dá)峻；丙苯并咪唑類，例如非班太爾、苯硫脲酯和奈托比胺；水楊酰苯胺類，例如氯生太爾和氯硝柳胺；咪唑并p塞唑類，例如布他米唑和左S走。米唑；四氫嘧啶類，例如莫侖太爾、p塞嘧啶和雙羥萘酸p塞嘧咬；六氫p比。秦并異會啉類，例如p比唾酮；以及刺糖多孑包菌(Sacc/wra/o(ys/oras//"o加)發(fā)酵產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類，例如多殺菌素(spinosyn)A、多殺菌素D或多殺菌素。治療蠕蟲病時，技術(shù)人員根據(jù)下文給出的測試結(jié)果，很容易確定式(I)化合物的治療有效量。治療有效劑量通常為約0.1mg/kg至約20mg/kg(體重)，更優(yōu)選約lmg/kg至約10mg/kg(所治療溫血動物的體重)。全天可于適當(dāng)間隔給予治療有效劑量的兩種以上亞劑量形式。精確的給藥劑量和給藥頻率取決于所使用的具體式(I)化合物、所治療的具體病癥、所治療病癥的嚴(yán)重程度、具體溫血動物的年齡、體重和一般身體狀況以及其它藥物(包括上面提及的另外的抗蠕蟲藥或抗寄生蟲藥)，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)公知方法讓溫血動物服藥。此生或獸醫(yī)的評價，降低或增加所述有效日劑量。因此上文提及的有效曰劑量范圍僅供參考。實驗部分A.中間體的合成實施例A.l中間體(l)的制備0J^^中間體(l)在氮氣氛下，將(+)-(R)-四氫-2-呋喃甲酸(6.65ml)的二氯曱烷(250ml)溶液在室溫下攪拌，然后加入草酰二氯(12.1ml)和無水二甲基曱酰胺(3滴)。攪拌反應(yīng)混合物2.5小時，蒸發(fā)溶劑后與曱苯共蒸發(fā)兩次，得到(2R)-四氫-2-呋喃碳酰氯(中間體1)。按照類似的方法，用市售的原料四氫-2-呋喃曱酸制備外消旋四氫-2-呋喃碳酰氯，用市售的原料(-)-(S)-四氫-2-呋喃曱酸制備(2S)-四氫-2-呋喃碳酰氯。實施例A.2a)中間體(2)的制備中間體(2)在配備機(jī)械攪拌器、溫度計和液滴收集漏斗的4頸燒瓶中，將4,5-二氫噻唑胺(1.95mol)和2-丙酮(1000ml)的懸浮液進(jìn)行攪拌。然后，滴加2-溴-l-(3-硝基苯基)乙酮(1.93mol)的2-丙酮(2500ml)溶液，同時用水浴冷卻使溫度保持在2(TC以下。將反應(yīng)混合物攪拌過夜。濾出所得的沉淀物，用2-丙酮洗滌并干燥，得到640g中間體(2)。b)中間體(3)的制備中間體(3)將中間體(2)(1.8Smol)的乙醇(3000ml)懸浮液用水浴冷卻。分批加入硼氫化鈉(2.78mo1)，將反應(yīng)混合物升至室溫過^艾。加入々包和NaHCO3溶液(1000ml)和水(500ml),幹滅后加入二氯甲烷。攪拌所得混合物1小時，？K層用二氯曱烷(4x1000ml)萃取。將有機(jī)層合并、干燥、濾出，蒸發(fā)溶劑，得到469g中間體(3)。c)中間體(4)的制備中間體(4)02N將中間體(3)(0.34mol)的1，2-二氯乙烷(3000ml)懸浮液在室溫下攪拌，在6小時內(nèi)滴加亞硫酰氯(0.68mol)的1,2-二氯乙烷(150ml)溶液。攪拌反應(yīng)混合物過夜后，小心加入NaHCO3(1500ml)。將反應(yīng)混合物升至40。C，攪拌6小時，然后除去水層。有機(jī)層用飽和NaHC03溶液(4x1000ml)洗滌、干燥、濾出，蒸發(fā)溶劑。將所得殘余物溶于CH2Cl2/CH3OH(95/5;2000ml)后再與硅膠(250g)—起攪拌。濾出硅膠。濾液經(jīng)硅膠(1000g)再次過濾，蒸發(fā)溶劑，得到253g中間體(4)。d)中間體(5)的制備,K^nJ中間體(5)中間體(4)通過手性柱色譜法(ChiralcelASIOOOA20拜)(洗脫液乙醇/庚烷30/70)分離為其對映異構(gòu)體。收集包含(S)-對映異構(gòu)體的所需部分，蒸發(fā)溶劑，得到(63)-(3-硝基-苯基)-2,3,5,6-四氫-咪唑并噻唑(中間體5)。還收集包含(R)-對映異構(gòu)體的部分，蒸發(fā)溶劑后，得到(6R)-(3-硝基-苯基)-2,3,S,6-四氫-咪唑并[2,l-b]噻唑(中間體6)。實施例A.3中間體(7)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>中間體(7)a)將中間體(5)(0.15mol)的乙酸乙酯溶液在室溫下攪拌。滴加1M鹽酸(0.199mol)的乙醚(190ml)溶液。濾出所得的沉淀物后于低壓干燥，得到39.4g中間體(5)的鹽酸鹽。b)將水(105ml)和曱醇(35ml)依次加入到中間體(5)的鹽酸鹽(0.0122mol)、鐵粉(0.061mol)和氯化銨(0.061mol)的混合物中。撹拌反應(yīng)混合物后升至70。C持續(xù)30分鐘，然后冷卻至室溫。加入0.1NHC1(14ml),所得混合物經(jīng)硅藻土過濾。用0.01NHCl(175ml)和二氯曱烷(175ml)依次洗滌硅藻土。邊攪拌邊向所得濾液中加入飽和NaHC03溶液(175ml)和NaHCO3(10g)。分離有機(jī)層，水層用二氯甲烷(4x175ml)萃取。將有機(jī)層合并、干燥、濾出，蒸發(fā)溶劑，得到2.61g中間體(7)。用類似方法制備3-(2,3,5,6-四氫-咪唑并[2，l-b]噻唑-6-基)-苯胺(中間體(8)),只是原料為中間體(4)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>中間體(8)實施例A.4中間體(9)的制備中間體(9)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>于-60。C,將二曱亞砜(36.5ml，0.514mol)的二氯曱烷(700ml)溶液滴加到2M草酰氯(26.9ml，0.308mol)的二氯曱烷溶液中。攪拌混合物30分鐘，然后滴加四氫糠醇(25ml，0.257mol)的二氯曱烷(100ml)溶液。攪拌混合物20分鐘，然后緩慢加入三乙胺(181ml，1.29mol)。將反應(yīng)混合物升至室溫后攪拌30分鐘。濾出反應(yīng)混合物，殘余物用二氯曱烷(250ml)洗滌。合并的二氯曱烷層用水(150ml)洗滌，干燥后于25。C小心蒸發(fā)。向殘余物中加入乙醚，濾出沉淀物后用乙醚洗滌。小心蒸發(fā)合并的有機(jī)層。產(chǎn)物通過減壓蒸餾法(75。C,20mbar)純化，得到12.6g中間體(9)。B.最終化合物的制備實施例B.l化合物(l)的制備化合物(1)將4M鹽酸的二噁烷(16.43ml)溶液滴加到中間體(7)(0.066mol)的無水乙腈(500ml)溶液中。所得混合物用水浴冷卻。滴加中間體(l)(0.069mol)的乙腈(100ml)混合物，將反應(yīng)混合物升至室溫過夜。蒸發(fā)乙腈。加入飽和NaHC03溶液(500ml),所得混合物用二氯曱烷(3x500ml)萃取。將有機(jī)層合并、干燥、濾出，蒸發(fā)溶劑。殘余物用硅膠快速柱色譜法純化(洗脫液CH2C12/CH30H95/5)。收集產(chǎn)物部分，蒸發(fā)溶劑，得到12.23g化合物(l)(mp.42-57。C)(比旋光度OR—3.77。(589證，c=0.4636w/v%，曱醇，20°C)。使用上述方法，還可制備出化合物(2)、(3)和(4),分別用中間體(8)和外消旋四氫-2-呋喃碳酰氯、或中間體(7)和外消旋四氬-2^夫喃碳酰氯、或中間體(7)和(2S)-四氫-2-呋喃碳酰氯的組合作為原料。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>化合物(4)實施例B.2化合物(A)的制備化合物(A)將中間體(7)(470mg)溶于無水乙腈(40ml)中。滴加4MHC1的二嚼烷(0.538ml)溶液。用水浴冷卻混合物后滴加2-呋喃碳酰氯(0.213ml)的乙腈(20ml)溶液。將反應(yīng)混合物加熱至4CTC過夜。將飽和NaHC03水溶液(l50ml)加入到反應(yīng)混合物中。反應(yīng)混合物用二氯曱烷(l50ml)萃取三次，將合并的有機(jī)層干燥、過濾，蒸發(fā)除去溶劑。分離出殘余物后用制備型薄層色鐠法純化(使用二氯曱烷/曱醇(95:5)的混合物作為洗脫液)，得到210mg化合物(A)(mpWC)。上述化合物(A)就是US-4,014，892中的化合物(163)。實施例B.3化合物(B)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>化合物(B)中間體(7)溶液(SS0mg)在無水乙腈(30ml)中攪拌后加入NaHC03(181mg)。加入中間體(9)的無水乙腈(15ml)溶液，15分鐘后加入固體NaBH(OAc)3(547mg)。2小時后TLC顯示反應(yīng)完成。加入飽和NaHC03水溶液，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的乙酸乙酯層干燥并蒸發(fā)。所得殘余物用硅膠快速柱色i普法純化(用二氯甲烷和曱醇的混合物，比例和洗脫時間IO分鐘，3%甲醇；20分鐘，3%曱醇至5%曱醇；20分鐘5%甲醇，流速30ml/分鐘)，得到237mg化合物(B)。上述化合物(B)就是US-4,014,892中的化合物(163)和GB-1,365,515中的化合物(81)。C.藥理學(xué)實施例C丄抗蠕蟲藥對沙鼠體內(nèi)捻轉(zhuǎn)血矛線蟲模型的功效研究評價本發(fā)明化合物的抗蠕蟲功效采用未服藥的沙鼠(長爪沙鼠(A^n'o"^柳gw'cw/Ww力)體內(nèi)模型，用大約300條脫鞘感染性捻轉(zhuǎn)血矛線蟲幼蟲(耐多藥品系)接種三次，在用捻轉(zhuǎn)血矛線蟲幼蟲初次感染后11天口服試驗化合物進(jìn)行治療，在第14天進(jìn)行尸體解剖，對所回收的捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蠕蟲計數(shù)。另外，采用相同的模型評價本領(lǐng)域已知化合物(A)和(B)的抗蠕蟲功效。動物使用28-35日齡、體重30-35g的雌性CRW沙鼠(CharlesRiver,Sulzfeld,Germany)。將三只沙鼠隨機(jī)分配至獨立的鋪有木材刨花的半透明聚砜通風(fēng)籠(48x37.5x21cm)。隨意喂給市售的嚙齒動物銅料和水。適應(yīng)環(huán)境四天后，對沙鼠進(jìn)4于人工感染。寄生蟲使用捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的PolyRes品系(左旋咪唑、甲苯達(dá)唑、伊維菌素和氯生太爾抗性)。這種品系保持在人工感染的供體雄性羔羊。將含有捻轉(zhuǎn)血矛線蟲卵的各糞便收集于糞便袋中。弄碎糞粒，將其與木炭混合，弄濕后放入孵化器中于28。C、95%相對濕度胚胎化。七天后將混合物放入Baermann漏斗，12小時后收集第三階段革鞘幼蟲。將這些幼蟲用水清洗干凈后用2%的福爾馬林溶液消毒。這樣的幼蟲可立即用于人工感染或者貯存于約8。C水箱，最長貯存期為6個月。感染幼蟲(齡期不足6個月)10分鐘內(nèi)經(jīng)3.3vol。/。的市售次氯酸鈉溶液清洗脫鞘，經(jīng)Buchner漏斗過濾，用水清洗，在Baermann漏斗中濃縮，2小時后收集。以這種方式制備的脫鞘幼蟲可用于隨后的沙鼠感染或以延長周期的供應(yīng)品放置(l小時內(nèi)經(jīng)液氮氣體冷卻，然后于-196。C貯存于液氮中)。感染所有沙鼠都經(jīng)口接種，每劑大約300條感染性脫鞘捻轉(zhuǎn)血矛線蟲幼蟲，連續(xù)3天。接種使用配備18G劑量鈍針的lml注射器。治療沙鼠初次感染后11天，用懸浮于或溶于0.4mlDMSO的試驗化合物進(jìn)行治療，用配備18G劑量鈍針的lml注射器將試驗劑量的化合物按(容積)0.1ml/50g(體重)給予。每個實驗的對照動物都不進(jìn)行處理。將鹽酸左旋咪唑、曱苯達(dá)唑、伊維菌素和氯生太爾用于不同劑量滴定實驗以-使該;漠型生效。尸體解剖所有沙鼠禁食20小時后進(jìn)行尸體解剖，在初次感染后14天吸入032處死沙鼠。為了回收蠕蟲，摘除它們的胃，然后縱向剖開，放入裝有20ml消化液(10g胃蛋白酶+30ml濃鹽酸)的燒杯中于37°C孵育3小時。消化后，胃內(nèi)物質(zhì)通過濾茶網(wǎng)，將濾液收集入篩(32pm)，用自來水回收蠕蟲。將燒杯貯存于冰箱用于隨后計數(shù)。檢查和功效百分率將各燒杯中的內(nèi)含物混合在一起，分成6等分后倒入6孔板，在倒置顯微鏡下對蠕蟲計數(shù)。確定每種試驗化合物的功效百分率，結(jié)果總結(jié)見下表l。表l:沙鼠口服試驗化合物后清除PolyRes品系捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的功效數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>Dosempk:試驗化合物的劑量mg/kg(體重)動物數(shù)試-險動物的數(shù)目Med.W.b.:中值蠕蟲負(fù)荷功效百分率=({(對照組回收的蠕蟲平均數(shù)-(處理組回收的蠕蟲平均數(shù)))/(對照組回收的蠕蟲平均#史)}x100從表1可見，化合物(1)和(4)都比本領(lǐng)域已知的化合物(A)和(B)的抗蠕蟲功效要好得多。權(quán)利要求1.一種式(I)化合物、所述式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽和它們的立體化學(xué)異構(gòu)體形式2.權(quán)利要求1的化合物，其中2,3,5,6-四氫-咪唑并[2,l-b]噻唑部分的6位具有(S)-構(gòu)型3.權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物是(2R)-四氫呋喃-2-N-(6S)-[3-(2,3,5,6-四氬-咪唑并[2,l-b]p塞唑-6-基)-苯基]-曱酰胺及其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。4.權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物是(2S)-四氫呋喃-2-N-(6S)-[3-(2,3,5，6-四氫-咪唑并[2,l-b]噻唑-6-基)-苯基]-甲酰胺及其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。5.—種藥物組合物，其包含藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的權(quán)利要求1-4中任一項的化合物。6.—種制備權(quán)利要求4的藥物組合物的方法，其中將治療有效量的權(quán)利要求1-4中任一項的化合物與藥學(xué)上可接受的載體均勻混合。7.用作藥物的^又利要求1-4中任一項的化合物。8.權(quán)利要求1-4中任一項的化合物在制備用于治療、控制和預(yù)防體內(nèi)和體外寄生蟲感染的藥物中的用途。9.一種組合物，其包含作為笫一活性成分的權(quán)利要求1-4中任一項的化合物和作為笫二活性成分的另一種抗蠕蟲藥或抗寄生蟲藥。10.—種制備式(I)化合物的方法，其中使式(V)中間體與式(IV)中間體在合適的惰性反應(yīng)溶劑中反應(yīng)，或者必要的話，將式(I)化合物轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，或者反過來，將式(I)化合物的酸加成鹽用堿轉(zhuǎn)化為游離堿形式；并且必要的話，制備其立體化學(xué)異構(gòu)體形式。中間體(V)中間體(IV)全文摘要本發(fā)明涉及新的抗蠕蟲化合物四氫-呋喃-2-N-[3-(2，3，5，6-四氫-咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)-苯基]-甲酰胺及其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽和立體化學(xué)異構(gòu)體形式，以及包含所述新化合物的藥物組合物、所述化合物和組合物的制備方法及其作為藥物的用途，特別是用于治療、控制和預(yù)防溫血動物的體內(nèi)和體外寄生蟲感染。文檔編號A61P33/10GK101107255SQ200680003121公開日2008年1月16日申請日期2006年1月26日優(yōu)先權(quán)日2005年1月28日發(fā)明者J·希爾斯,K·M·J·A·夫拉明克,O·F·J·范帕里斯,P·A·J·詹森,P·J·H·V·奧特韋爾,P·J·勒維申請人:詹森藥業(yè)有限公司