專利名稱：黃嘌呤氧化酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及黃嘌呤氧化酶抑制劑。

背景技術(shù)：
高尿酸血癥會(huì)引起痛風(fēng)、腎功能不全，認(rèn)為其還是冠狀動(dòng)脈疾病的危險(xiǎn)因素，并指出其與高血壓為代表的生活習(xí)慣病的發(fā)病進(jìn)展密切相關(guān)。因此，高尿酸血癥的治療不僅是痛風(fēng)的治療，還關(guān)系到隨著高齡化而出現(xiàn)的各種生活習(xí)慣病的預(yù)防。
目前，在高尿酸血癥的治療中使用別嘌醇所代表的尿酸生成抑制劑和苯溴馬隆所代表的尿酸排泄促進(jìn)劑。然而，廣為人知的是別嘌醇具有皮疹、肝損傷、骨髓抑制等副作用，還指出雖然別嘌醇及其代謝產(chǎn)物(奧昔嘌醇)從腎排泄，但是若尿酸的排泄下降，則這些的排泄也延緩，血中濃度容易升高，出現(xiàn)副作用的可能性高。
另一方面，最近有報(bào)道稱苯溴馬隆也會(huì)引起肝損傷，從擴(kuò)大此領(lǐng)域中藥劑的選擇范圍方面考慮，希望開發(fā)新藥。
最近，作為不具有嘌呤骨架的黃嘌呤氧化酶抑制劑，有人報(bào)道了TMX-67(帝人WO 92/09279號(hào)公報(bào)(專利文獻(xiàn)1))、Y-700(三菱WellpharmaWO 98/18765號(hào)公報(bào)(專利文獻(xiàn)2))、KT651(壽日本特開平12-1431號(hào)公報(bào)(專利文獻(xiàn)3))、FYX-051(富士藥品WO 03/064410號(hào)公報(bào)(專利文獻(xiàn)4))等。

本發(fā)明人等對(duì)與上述藥物結(jié)構(gòu)不同的二環(huán)式稠合雜環(huán)進(jìn)行了研究，提出了專利申請(qǐng)(WO 03/042185號(hào)公報(bào)(專利文獻(xiàn)5))。
本發(fā)明人等進(jìn)一步進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)下述通式(I)表示的2-(4-苯氧基-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶衍生物具有優(yōu)異的黃嘌呤氧化酶抑制作用和降低尿酸的作用，從而完成了本發(fā)明。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供具有黃嘌呤氧化酶(XOD)抑制作用的下述通式(I)表示的化合物。
即，本發(fā)明涉及以下通式(I)表示的化合物或其鹽
式中， R1表示碳原子數(shù)為2～8的烯基或可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷氧基、碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基、甲?；?、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基、碳原子數(shù)為6～10的芳基或碳原子數(shù)為6～10的芳氧基的基團(tuán)或原子作為取代基的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基； R2表示氰基、硝基、甲酰基、羧基、氨基甲酰基或碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基； X表示氧原子、-N(R3)-或-S(O)n-；其中，R3表示氫原子或碳原子數(shù)為1～8的烷基；或者R3和R1結(jié)合形成嗎啉基、硫代嗎啉基或哌嗪基；或者R3表示與上述R1相同的基團(tuán)；n表示0～2的整數(shù)； 而Y表示氧原子、硫原子或NH。
本發(fā)明還涉及含有上述通式(I)表示的化合物或其鹽作為有效成分的黃嘌呤氧化酶抑制劑。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及含有上述通式(I)表示的化合物或其鹽作為有效成分的高尿酸血癥治療劑。
實(shí)施發(fā)明的最佳方式 以下，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
上述通式(I)中，作為R1的碳原子數(shù)為2～8的烯基，可以列舉出烯丙基等。
作為R3以及R1的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基可以具有的取代基-碳原子數(shù)為1～8的烷基，可以列舉出甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或戊基等。
作為R1的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基可以具有的取代基-碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基，可以列舉出具有1～3個(gè)氟原子、氯原子或溴原子等作為取代基的甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或戊基等。
作為R1的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基可以具有的取代基-碳原子數(shù)為1～8的烷氧基，可以列舉出甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基或戊氧基等。
作為R1的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基可以具有的取代基-碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷氧基，可以列舉出具有1～3個(gè)氟原子、氯原子或溴原子等作為取代基的甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基或戊氧基等。
作為R2以及R1的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基可以具有的取代基-碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基，可以列舉出甲氧基羰基、乙氧基羰基或丙氧基羰基等。
作為R1的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基可以具有的取代基-鹵原子，可以列舉出氟原子、氯原子或溴原子等。
作為R1以及R1的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基可以具有的取代基-碳原子數(shù)為6～10的芳基，可以列舉出苯基或萘基等，優(yōu)選為苯基。
作為R1的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基可以具有的取代基-碳原子數(shù)為6～10的芳氧基，可以列舉出苯氧基或萘氧基等，優(yōu)選為苯氧基。
作為R1的雜芳基，可以列舉出呋喃基、吡咯基、噻吩基、哌啶基、嘧啶基、吡喃基、吡啶基、噻唑基、咪唑基、吲哚基或喹啉基等，優(yōu)選為吡啶基。
而且，n優(yōu)選為0。
上述通式(I)表示的本發(fā)明化合物可以是藥理學(xué)上可接受的鹽，可以列舉如鈉、鉀或鋰等的堿金屬鹽等。
并且，作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選以下所示的化合物或其鹽。
(1)上述通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷氧基、碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基、甲酰基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基、碳原子數(shù)為6～10的芳基或碳原子數(shù)為6～10的芳氧基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基、萘基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、哌啶基、嘧啶基、吡喃基、吡啶基、噻唑基、咪唑基、吲哚基或喹啉基。
(2)上述通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷氧基、碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基、甲?；?、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基、碳原子數(shù)為6～10的芳基或碳原子數(shù)為6～10的芳氧基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基。
(3)上述通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基或氨基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基。
(4)上述通式(I)表示的化合物或上述(1)～(3)中任一項(xiàng)所記載的化合物或其鹽，其中R2為氰基或硝基。
(5)上述通式(I)表示的化合物或上述(1)～(3)中任一項(xiàng)所記載的化合物或其鹽，其中R2為氰基。
(6)上述通式(I)表示的化合物或上述(1)～(5)中任一項(xiàng)所記載的化合物或其鹽，其中X為氧原子、NH或硫原子。
(7)上述通式(I)表示的化合物或上述(1)～(5)中任一項(xiàng)所記載的化合物或其鹽，其中X為氧原子或硫原子。
(8)上述通式(I)表示的化合物或上述(1)～(7)中任一項(xiàng)所記載的化合物或其鹽，其中Y為硫原子或NH。
(9)上述通式(I)表示的化合物或上述(1)～(7)中任一項(xiàng)所記載的化合物或其鹽，其中Y為硫原子。
(10)上述通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基； R2為氰基或硝基； X為氧原子或硫原子； Y為硫原子或NH。
(11)上述通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基； R2為氰基或硝基； X為氧原子或硫原子； Y為硫原子。
(12)上述通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基； R2為氰基或硝基； X為氧原子； Y為硫原子。
以下，表示上述通式(I)表示的本發(fā)明化合物的合成方法。
(合成方法1) Y＝S的情況
(式中，Z表示氯原子等鹵原子；而R1、R2和X同上) 通式(c)表示的本發(fā)明化合物，可以通過(guò)使通式(a)表示的化合物與通式(b)表示的2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶衍生物反應(yīng)而得到。
其中，X＝O時(shí)，可以在氫化鈉等堿的存在下，在DMSO等溶劑中在室溫～60℃下進(jìn)行反應(yīng)。
X＝S時(shí)，可以在碳酸鉀等堿的存在下，在乙醇等溶劑中加熱回流來(lái)進(jìn)行反應(yīng)。
另一方面，X＝NH時(shí)，可以在氧化銅和碳酸鉀等堿的存在下，通過(guò)加熱回流來(lái)進(jìn)行反應(yīng)。
其中，作為原料的通式(b)表示的2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶衍生物，例如可以通過(guò)以下方法等得到。
原料的合成方法
(合成方法2) Y＝O的情況
(式中，R1、R2和X同上) 通式(f)表示的本發(fā)明化合物，可以通過(guò)使通式(d)表示的苯甲酸酐和通式(e)表示的5-氨基-4-羥基嘧啶衍生物進(jìn)行加熱反應(yīng)而得到。
其中，作為原料的通式(d)表示的苯甲酸酐，例如可以通過(guò)以下方法等得到。
原料的合成方法(X＝O) (式中R1同上)
(合成方法3) Y＝NH的情況
(式中，R1、R2和X同上) 通式(h)表示的本發(fā)明化合物，可以在乙酸的存在下，使通式(g)表示的嘧啶衍生物進(jìn)行加熱反應(yīng)而得到。
其中，作為原料的通式(g)表示的苯甲酸酐，例如可以通過(guò)以下方法等得到。
原料的合成方法(X＝O)
(式中，R1同上) 上述通式(I)表示的本發(fā)明化合物，除了使用上述合成方法1～3、后述的實(shí)施例以及專利文獻(xiàn)5以外，還可以使用公知方法等進(jìn)行制備。
如此操作得到的本發(fā)明化合物如表1～10所示。

(R1、R2、X和Y為表1～10中記載的基團(tuán)) [表1] [表2] [表3] [表4] [表5] [表6] [表7] [表8] [表9] [表10] 以下，闡述本發(fā)明的藥理效果。
本發(fā)明化合物具有黃嘌呤氧化酶抑制作用(體外試驗(yàn))，這如實(shí)施例26所記載，通過(guò)測(cè)定抑制黃嘌呤氧化酶氧化黃嘌呤的抑制活性而得到確認(rèn)。由表11、12可知本發(fā)明化合物顯示出優(yōu)異的黃嘌呤氧化酶抑制作用。
另外，在體內(nèi)試驗(yàn)中，使用小鼠進(jìn)行經(jīng)口給藥后，測(cè)定血漿中的尿酸值，由此試驗(yàn)也確認(rèn)本發(fā)明化合物具有黃嘌呤氧化酶抑制作用(參照實(shí)施例27和表11、12)。
因此，期待將本發(fā)明的通式(I)表示的化合物作為高尿酸血癥、痛風(fēng)的預(yù)防或治療劑。
本發(fā)明化合物對(duì)于人可以通過(guò)一般的經(jīng)口給藥或非經(jīng)口給藥等適當(dāng)?shù)慕o藥方法進(jìn)行給藥。
為了制成制劑，可以利用制劑技術(shù)領(lǐng)域中的常規(guī)方法制成片劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑、懸浮劑、注射劑、栓劑等劑型。
配制這些劑型時(shí)，可以使用通常的賦形劑、崩解劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、色素、稀釋劑等。其中，作為賦形劑，可以列舉出乳糖、D-甘露醇、結(jié)晶纖維素、葡萄糖等；作為崩解劑，可以列舉出淀粉、羧甲基纖維素鈣(CMC-Ca)等；作為潤(rùn)滑劑，可以列舉出硬脂酸鎂、滑石粉等；作為粘合劑，可以列舉出羥丙基纖維素(HPC)、明膠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等。
通常對(duì)于成人的給藥量，按照有效成分的本發(fā)明化合物計(jì)，注射給藥時(shí)每天約0.1mg～100mg；經(jīng)口給藥時(shí)每天1mg～2000mg，可以根據(jù)年齡、癥狀等增減。
以下列舉實(shí)施例，來(lái)更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受限于此。
實(shí)施例 實(shí)施例1 (1)4-氯-N-(4-氯-5-嘧啶基)-3-氰基苯甲酰胺 將7.01g(38.6mmol)4-氯-3-氰基苯甲酸懸浮在70mL苯中，加入3.6mL(49.6mmol)亞硫酰氯，加熱回流4小時(shí)。將此反應(yīng)液在減壓下濃縮，向得到的酰基氯中加入5.00g(38.6mmol)5-氨基-4-氯嘧啶、70mL二氯甲烷和3.6mL(44.5mmol)吡啶，在室溫下攪拌7小時(shí)。向反應(yīng)液中加入50mL氯仿和50mL水，過(guò)濾收集晶體。所得晶體用20mL氯仿和20mL水洗滌后風(fēng)干，得到7.35g(收率65％)為白色晶體的標(biāo)題化合物。另外，由母液和洗滌液的混合溶液二次結(jié)晶得到0.62g(收率8％)為淡茶色晶體的標(biāo)題化合物。(總收率73％)。
mp189-190℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝7.74(1H，d，J＝8Hz)，8.07(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.13(1H，s)，8.23(1H，d，J＝2Hz)，8.83(1H，s)，9.79(1H，s). (2)2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶 將通過(guò)上述方法得到的7.98g(27.2mmol)4-氯-N-(4-氯-5-嘧啶基)-3-氰基苯甲酰胺、8.25g(204mmol)拉韋松試劑(Lawesson′s reagent)和150mL甲苯的懸浮液加熱回流8小時(shí)后，冷卻至室溫，過(guò)濾收集析出的晶體。用氯仿(75mL×2)洗滌后風(fēng)干，得到7.25g(收率98％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp278-280℃(分解). 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝7.99(1H，d，J＝9Hz)，8.47(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.70(1H，d，J＝2Hz)，9.20(1H，s)，9.54(1H，s). (3)2-[4-(4-氟苯氧基)-3-氰基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 向150mg(3.44mmol)55％的氫化鈉和7mL干燥DMSO的懸浮液中加入383mg(3.42mmol)4-氟苯酚，在50℃下加熱攪拌30分鐘。向此反應(yīng)液中加入776mg(2.85mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌4小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入35mL水，過(guò)濾收集析出的晶體，用20mL水洗滌后風(fēng)干。所得晶體用硅膠柱層析(氯仿)進(jìn)行純化，用15mL乙醚洗滌后干燥，得到701mg(收率71％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp175-177℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝6.94(1H，d，J＝9Hz)，7.1-7.2(4H，m)，8.18(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.44(1H，d，J＝2Hz)，9.13(1H，s)，9.35(1H，s). IR(KBr)cm-12233，1606，1564，1419，1300，1119，1011，916，893，847，829，777，760，758，723，702，700，650，648，597，526，496，490. FAB-MS(m/e)349(M+1). 實(shí)施例2 2-(3-氰基-4-苯氧基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶 向23mg(0.53mmol)55％的氫化鈉和1mL干燥DMSO的懸浮液中加入45mg(0.48mmol)苯酚，在室溫下攪拌30分鐘。向此反應(yīng)液中加入120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在60℃下攪拌4小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入5mL水，過(guò)濾收集析出的晶體。用5mL水、1mL乙醇和2mL乙醚依次洗滌后，減壓下在室溫下干燥，得到100mg(收率69％)為淡茶色晶體的標(biāo)題化合物。
mp154-156℃. 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝7.08(1H，d，J＝9Hz)，7.2-7.4(3H，m)，7.5-7.6(2H，m)，8.42(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.69(1H，d，J＝2Hz)，9.18(1H，s)，9.52(1H，s). IR(KBr)cm-13037，2227，1605，1587，1560，1525，1504，1470，1369，1365，1257，1238，1190，1171. FAB-MS(m/e)331(M+1). 實(shí)施例3 2-[3-氰基-4-(3-吡啶氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將24mg(0.60mmol)60％的氫化鈉懸浮在1mL干燥二甲基亞砜中，加入57mg(0.60mmol)3-羥基吡啶，在室溫下攪拌1小時(shí)。向其中加入82mg(0.30mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在室溫下攪拌87小時(shí)。在冰冷下向此反應(yīng)混合物中加入4mL水，攪拌15分鐘。過(guò)濾收集析出的晶體，并用水洗滌，得到褐色晶體。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)進(jìn)行純化，得到59mg(收率60％)為微黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp210-212℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝6.99(1H，d，J＝9Hz)，7.45(1H，dd，J＝5Hz，8Hz)，7.53(1H，ddd，J＝1Hz，3Hz，8Hz)，8.22(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.47(1H，d，J＝2Hz)，8.56(1H，d，J＝3Hz)，8.60(1H，dd，J＝1Hz，5Hz)，9.14(1H，s)，9.36(1H，s). IR(KBr)cm-12229，1610，1568，1502，1475，1427，1396，1373，1265，1259，1203，1107. FAB-MS(m/e)332(M+1). 實(shí)施例4 (1)3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯甲酸 向545mg(3.00mmol)4-氯-3-氰基苯甲酸和504mg(4.50mmol)4-氟苯酚的6mL干燥DMSO溶液中加入300mg(7.50mmol)60％的氫化鈉，在室溫下攪拌15分鐘，并繼續(xù)在70℃下攪拌9小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫后，加入30mL水，用6N的鹽酸將混合物的pH調(diào)整至約6，用乙酸乙酯提取2次。合并提取液，用水和飽和食鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓下餾去溶劑。向所得殘余物中加入6mL乙酸乙酯，加熱回流5分鐘，并在室溫下攪拌1小時(shí)。過(guò)濾收集晶體，用乙酸乙酯洗滌、風(fēng)干，得到170mg(收率22％)為淡褐色晶體的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(CDCl3/CD3OD＝8/1，400MHz)δ＝6.82(1H，d，J＝9Hz)，7.1-7.3(4H，m)，8.14(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.37(1H，d，J＝2Hz). (2)N-(4-氨基-5-嘧啶基)-3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯甲酰胺 向通過(guò)上述方法得到的143mg(0.56mmol)3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯甲酸中加入2mL亞硫酰氯，加熱回流一夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫后，在減壓下濃縮，向殘留物中加入5mL苯進(jìn)行減壓濃縮，重復(fù)此操作3次。將所得?；热芙庠?mL吡啶中，在冰冷下用15分鐘滴加到612mg(5.56mmol)4，5-二氨基嘧啶的6mL吡啶懸浮液中。在5℃下攪拌6小時(shí)、在室溫下攪拌15小時(shí)后，向反應(yīng)混合物中加入90mL水，用乙酸乙酯提取2次。合并提取液，用水、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水依次洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥。減壓下餾去溶劑，向殘留物中加入4mL乙醚，在室溫下攪拌15分鐘。過(guò)濾收集所得的晶體，用乙醚洗滌、風(fēng)干，得到80mg(收率41％)為淡褐色晶體的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝6.90(2H，brs)，6.99(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.5(4H，m)，8.14(1H，s)，8.18(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.28(1H，s)，8.54(1H，d，J＝2Hz)，9.80(1H，s). FAB-MS(m/e)350(M+1). (3)8-[3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯基]-9H-嘌呤 向通過(guò)上述方法得到的76mg(0.22mmol)N-(4-氨基-5-嘧啶基)-3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯甲酰胺中加入2mL乙酸，加熱回流24小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫后，減壓下濃縮干固。向殘留物中加入2mL乙酸乙酯，加熱回流5分鐘，在室溫下攪拌15分鐘。過(guò)濾收集所得晶體，用乙酸乙酯洗滌、風(fēng)干，得到65mg(收率90％)為淺紅色晶體的標(biāo)題化合物。
mp250℃以上. 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝7.10(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(4H，m)，8.49(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.68(1H，d，J＝2Hz)，8.91(1H，s)，9.12(1H，s). IR(KBr)cm-12867，2231，1626，1589，1506，1485，1435，1387，1344，1281，1238，1219，1188，1124，1118，1020，966，924，864，843，816，793，785，731，712，613，584，553，532，499. FAB-MS(m/e)332(M+1). 實(shí)施例5 2-[3-氰基-4-(2-氟苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 向120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶的2mL干燥DMSO懸浮液中加入123mg(1.10mmol)2-氟苯酚，接著加入48mg(1.10mmol)55％的氫化鈉，在50℃下加熱攪拌5小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)混合物中加入8mL水，過(guò)濾收集析出的晶體，用水洗滌。風(fēng)干后，將所得晶體用硅膠柱層析(乙酸乙酯/正己烷)純化，得到122mg(收率80％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp195-196℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝6.90(1H，d，J＝9Hz)，7.2-7.4(4H，m)，8.18(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.44(1H，d，J＝2Hz)，9.13(1H，s)，9.35(1H，s).IR(KBr)cm-12235，1608，1571，1527，1500，1477，1454，1400，1373，1279，1240，1207，1184，1151，1112，1028，995，950，902，875，829，793，777，756，725，708，685，652，648，631，600，494. FAB-MS(m/e)349(M+1). 實(shí)施例6 2-[3-氰基-4-(3-氟苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 向120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶的2mL干燥DMSO懸浮液中加入123mg(1.10mmol)3-氟苯酚，接著加入48mg(110mmol)55％的氫化鈉，在50℃下加熱攪拌4小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)混合物中加入8mL水，過(guò)濾收集析出的晶體，用水洗滌。風(fēng)干后，將所得晶體用硅膠柱層析(乙酸乙酯/正己烷)純化，得到119mg(收率78％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp189-190℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝6.8-7.1(4H，m)，7.4-7.5(1H，m)，8.21(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.45(1H，d，J＝2Hz)，9.14(1H，s)，9.36(1H，s). IR(KBr)cm-12231，1601，1572，1527，1502，1473，1468，1398，1375，1265，1207，1159，1128，1070，995，958，910，862，840，835，787，759，744，721，692，650. FAB-MS(m/e)349(M+1). 實(shí)施例7 2-[3-氰基-4-(4-氟苯硫基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將21mg(0.48mmol)55％的氫化鈉懸浮在1mL DMSO中，加入0.05mL(0.47mmol)4-氟苯硫酚，在室溫下攪拌10分鐘。向其中加入120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶，在室溫下攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)溶液中加入5mL水，過(guò)濾收集析出的晶體，用水(5mL×2)1mL乙醇和5mL乙醚依次洗滌后，減壓下在室溫下干燥1小時(shí)，得到126mg(收率79％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp193-195℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝7.02(1H，d，J＝9Hz)，7.1-7.3(2H，m)，7.5-7.7(2H，m)，8.05(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.38(1H，d，J＝2Hz)，9.13(1H，s)，9.35(1H，s). IR(KBr，cm-1)2224，1587，1591，1568，1520，1491，1460，1387，1383，1373，1286，1232，1057，827. FAB-MS(m/e)365(M+1). 實(shí)施例8 (1)2-[3-氰基-4-(2-甲氧基甲氧基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將48mg(1.10mmol)55％的氫化鈉懸浮在1.5mL DMSO中，加入208mg(純度81.6％，1.10mmol)上述2-甲氧基甲氧基苯酚，在50℃下攪拌30分鐘。向其中加入150mg(0.55mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌17小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入7mL水，過(guò)濾收集析出的晶體，用水(5mL×2)洗滌。將所得晶體風(fēng)干，用10mL乙醚洗滌后，減壓下在室溫下干燥，得到146mg(收率68％)為淡褐色晶體的標(biāo)題化合物。
mp149-151℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝3.39(3H，s)，5.13(2H，s)，7.2-7.3(3H，m)，8.13(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.42(1H，d，J＝2Hz)，9.12(1H，s)，9.33(1H，s). (2)2-[3-氰基-4-(2-羥基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將144mg(0.37mmol)上述2-[3-氰基-4-(2-甲氧基甲氧基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶溶解在6mL THF中，加入0.6mL(1.80mmol)3mol/L的鹽酸水溶液，加熱回流4小時(shí)。減壓下餾去溶劑，殘余物用硅膠柱層析(乙酸乙酯/正己烷、甲醇/氯仿)進(jìn)行純化，得到42mg(收率33％)為淡桃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp255-256℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝6.87(1H，d，J＝9Hz)，6.94(1H，dt，J＝1Hz，7Hz)，7.07(1H，dd，J＝1Hz，8Hz)，7.1-7.3(2H，m)，8.37(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.63(1H，d，J＝2Hz)，9.50(1H，s)，9.97(1H，s). IR(KBr，cm-1)3034，2235，1610，1578，1527，1495，1475，1400，1377，1281，1213，1111. FAB-MS(m/e)347(M+1). 實(shí)施例9 2-[4-(4-氯苯氧基)-3-氰基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將36mg(0.90mmol)60％的氫化鈉懸浮在2mL干燥二甲基亞砜中，加入116mg(0.90mmol)4-氯苯酚，在室溫下攪拌1小時(shí)。向其中加入82mg(0.30mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在室溫下攪拌48小時(shí)。在冰冷下向此反應(yīng)混合物中加入8mL水，攪拌10分鐘。過(guò)濾收集析出的晶體，并用水洗滌，得到褐色晶體。用硅膠柱層析(氯仿)進(jìn)行純化，得到90mg(收率83％)為白色晶體的標(biāo)題化合物。
mp179-180℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)6.97(1H，d，J＝9Hz)，7.12(2H，d，J＝9Hz)，7.45(2H，d，J＝9Hz)，8.19(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.44(1H，d，J＝2Hz)，9.14(1H，s)，9.35(1H，s). IR(KBr)cm-12229，1608，1568，1566，1504，1485，1477，1398，1379，1271，1198，1086. FAB-MS(m/e)365(M+1). 實(shí)施例10 2-[3-氰基-4-(2-氟苯硫基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 向23mg(0.53mmol)55％的氫化鈉和1mL干燥DMSO的懸浮液中加入68mg(0.53mmol)2-氟苯硫酚，在50℃下攪拌30分鐘。向此反應(yīng)液中加入120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌5小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入5mL水，過(guò)濾收集析出的晶體。用5mL水、1mL乙醇和3mL乙醚依次洗滌后，減壓下在室溫下干燥，得到123mg(收率77％)為淡橙色晶體的標(biāo)題化合物。
mp178-180℃. 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝7.21(1H，d，J＝8Hz)，7.3-7.6(2H，m)，7.6-7.8(2H，m)，8.34(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.65(1H，d，J＝2Hz)，9.19(1H，s)，9.53(1H，s). IR(KBr)cm-12225，1589，1571，1525，1473，1450，1383，1261，1221，1055，827，795，764，723，681，651，598，476，474. FAB-MS(m/e)365(M+1). 實(shí)施例11 2-(3-氰基-4-苯硫基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶 向23mg(0.53mmol)55％的氫化鈉和1mL干燥DMSO的懸浮液中加入58mg(0.53mmol)苯硫酚，在50℃下攪拌30分鐘。向此反應(yīng)液中加入120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌5小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入4mL水，過(guò)濾收集析出的晶體。用5mL水、1mL乙醇和3mL乙醚依次洗滌后，減壓下在室溫下干燥，得到120mg(收率79％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp173-176℃. 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝7.19(1H，d，J＝9Hz)，7.5-7.7(5H，m)，8.32(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.62(1H，d，J＝2Hz)，9.19(1H，s)，9.52(1H，s). IR(KBr)cm-13051，2224，1597，1568，1524，1460，1385，1304，1284，1252，1238，1205，1055，1024，995，906，831，812，744，685，650，598，488，472. FAB-MS(m/e)347(M+1). 實(shí)施例12 2-(4-烯丙氧基-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶 將26mg(0.60mmol)55％的氫化鈉懸浮在1mL DMSO中，加入0.04mL(0.59mmol)烯丙醇，在50℃下攪拌30分鐘。向其中加入120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌27小時(shí)。向反應(yīng)溶液中加入5mL水，過(guò)濾收集析出的晶體，用5mL水、1mL乙醇和2mL乙醚依次洗滌后風(fēng)干，得到70mg(收率54％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp202.6-207.6℃. 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝4.79(2H，dt，J＝1Hz，5Hz)，5.41(1H，dd，J＝1Hz，10Hz)，5.53(1H，dd，J＝1Hz，17Hz)，6.0-6.2(1H，m)，7.13(1H，d，J＝9Hz)，8.25(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.36(1H，d，J＝2Hz)，9.12(1H，s)，9.33(1H，s). IR(KBr，cm-1)2999，2227，1610，1574，1527，1512，1481，1458，1450，1406，1373，1290，1288，1261，1234，1205，1122，989，926. FAB-MS(m/e)295(M+1). 實(shí)施例13 2-(3-氰基-4-嗎啉-4-基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶 將120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶和1mL嗎啉的懸浮液在60℃下攪拌17小時(shí)、在80℃下攪拌5小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入4mL水，過(guò)濾收集析出的晶體。用5mL水、1mL乙醇和3mL乙醚依次洗滌。所得晶體用硅膠柱層析(己烷/乙酸乙酯＝1/2)進(jìn)行純化，得到62mg(收率41％)為桃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp232-234℃(分解點(diǎn)). 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝3.40(4H，bt)，3.80(4H，bt)，7.34(1H，d，J＝9Hz)，8.32(1H，dd，J＝2Hz，，9Hz)，8.43(1H，d，J＝2Hz)，9.14(1H，s)，9.46(1H，s). IR(KBr)cm-12218，1605，1566，1522，1479，1448，1400，1375，1302，1234，1120，1113，1049，926，895，825，760，723，665，646，625，596，515.FAB-MS(m/e)324(M+1) 實(shí)施例14 2-[3-氰基-4-(4-甲基-1-哌嗪基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將120mg(0.44mmol)2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶和0.49mL 1-甲基哌嗪的混合物在80℃下加熱攪拌10小時(shí)。冷卻至室溫后，反應(yīng)混合物用硅膠柱層析(氯仿/甲醇＝25/1)進(jìn)行純化，得到69mg(收率47％)為淡橙色晶體的標(biāo)題化合物。
mp163-165℃(分解). 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝2.39(3H，s)，2.6-2.7(4H，m)，3.4-3.5(4H，m)，7.09(1H，d，J＝9Hz)，8.16(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.30(1H，d，J＝2Hz)，9.09(1H，s)，9.30(1H，s). IR(KBr)cm-12214，1610，1570，1525，1473，1448，1404，1373，1294，1250，1201，1144，1110，1051，1005，943，926，924，812，787，758，723，681，667，646，627. FAB-MS(m/e)337(M+1). 實(shí)施例15 2-[4-(3-氯苯氧基)-3-氰基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將48mg(1.20mmol)60％的氫化鈉懸浮在3mL干燥二甲基亞砜中，加入154mg(1.20mmol)3-氯苯酚，在室溫下攪拌1小時(shí)。向其中加入82mg(0.30mmol)2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌20小時(shí)。在冰冷下向此反應(yīng)混合物中加入15mL水。過(guò)濾收集析出的晶體，用3mL水洗滌4次、用3mL乙醇洗滌3次，然后用3mL己烷洗滌3次，得到80mg(收率73％)為淡褐色晶體的標(biāo)題化合物。
mp171-173℃. 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)7.19(1H，d，J＝9Hz)，7.30(1H，d，J＝8Hz)，7.44(1H，d，J＝8Hz)，7.50(1H，s)，7.57(1H，dd，J＝8Hz，8Hz)，8.44(1H，d，J＝9Hz)，8.71(1H，s)，9.19(1H，s)，9.53(1H，s). IR(KBr)cm-12233，1608，1574，1527，1502，1473，1398，1377，1269，1196，1111，916. FAB-MS(m/e)365(M+1). 實(shí)施例16 2-[3-氰基-4-(硫代嗎啉-4-基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 向120mg(0.44mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶中加入1mL(9.94mmol)硫代嗎啉，在60℃下攪拌46小時(shí)。向反應(yīng)溶液中加入5mL水和5mL氯仿，過(guò)濾不溶物，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥。減壓下餾去溶劑，殘余物用硅膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯)進(jìn)行純化，得到17mg(收率11％)為橙色晶體的標(biāo)題化合物。
mp170-175℃(分解). 1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝2.8-3.0(4H，m)，3.6-3.7(4H，m)，7.11(1H，d，J＝9Hz)，8.18(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.32(1H，d，J＝2Hz)，9.10(1H，s)，9.31(1H，s). IR(KBr，cm-1)2850，2220，1606，1566，1524，1520，1477，1452，1400，1373，1290，1232，1192. FAB-MS(m/e)339(M+1). 實(shí)施例17 2-[4-(2-氯苯氧基)-3-氰基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將48mg(1.20mmol)60％的氫化鈉懸浮在3mL干燥二甲基亞砜中，加入154mg(1.20mmol)2-氯苯酚，在室溫下攪拌1小時(shí)。向其中加入82mg(0.30mmol)2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌42小時(shí)。在冰冷下向此反應(yīng)混合物中加入12mL水。過(guò)濾收集析出的晶體，用3mL水洗滌4次、用3mL乙醇洗滌2次，然后用3mL己烷洗滌2次，得到54mg(收率50％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp209-211℃. 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)6.96(1H，d，J＝9Hz)，7.4-7.6(3H，m)，7.74(1H，d，J＝9Hz)，8.41(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.72(1H，d，J＝2Hz)，9.19(1H，s)，9.52(1H，S). IR(KBr)cm-12235，1608，1568，1527，1502，1477，1398，1379，1238，1207，1109，1061. FAB-MS(m/e)365(M+1). 實(shí)施例18 (1)N-(4-羥基-5-嘧啶基)-4-氯-3-氰基苯甲酰胺 將1.00g(6.78mmol)4-氯-3-氰基苯甲酸酐和4.68g(13.6mmol)5-氨基-4-羥基嘧啶在氮?dú)夥罩性?60℃下加熱攪拌1.5小時(shí)。冷卻至室溫后，加入100mL氯仿，過(guò)濾收集晶體。所得晶體用20mL氯仿洗滌后風(fēng)干，得到1.29g(收率69％)為茶色晶體的標(biāo)題化合物。
mp255-260℃(分解). 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝5.5-6.5(1H，br)，δ＝7.89(1H，d，J＝8Hz)，8.1-8.3(1H，m)，8.3-8.4(1H，m)，8.50(1H，s)，8.64(1H，s)，9.96(1H，s). FAB-MS(m/e)275(M+1). (2)2-(4-氯-3-氰基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶 將100mg(0.36mmol)上述N-(4-羥基-5-嘧啶基)-4-氯-3-氰基苯甲酰胺的1mL磷酰氯溶液加熱回流3小時(shí)后，冷卻至室溫，減壓下餾去磷酰氯。向殘余物中加入2mL冰冷的水，攪拌30分鐘，過(guò)濾收集析出的晶體。用2mL乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，得到33mg(收率35％)為茶色晶體的標(biāo)題化合物。另外，減壓下自母液和洗滌液的混合溶液中餾去溶劑，殘余物用硅膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯)進(jìn)行純化，得到15mg(收率16％)為白色晶體的標(biāo)題化合物。(總收率51％) 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝8.04(1H，d，J＝8Hz)，8.53(1H，d，J＝8Hz)，8.79(1H，s)，9.11(1H，s)，9.40(1H，s). (3)2-[3-氰基-4(4-氟苯氧基)苯基]唑并[5，4-d]嘧啶 向20.4mg(0.47mmol)55％的氫化鈉和1.5mL干燥DMSO的懸浮液中加入52.4mg(0.47mmol)4-氟苯酚，在室溫下攪拌30分鐘。向此反應(yīng)液中加入40mg(0.16mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌16小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入5mL水，過(guò)濾收集析出的晶體。用20mL水洗滌。風(fēng)干后，所得晶體用硅膠柱層析(氯仿)進(jìn)行純化，得到20mg(收率39％)為白色無(wú)定形的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝7.07(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(4H，m)，8.45(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.70(1H，d，J＝2Hz)，9.07(1H，s)，9.33(1H，s). IR(KBr)cm-12235，1621，1504，1479，1389，1269，1228，1186，1055，1012，914，906，847，814，793，733，698，613，503. FAB-MS(m/e)333(M+1). 實(shí)施例19 2-[3-氰基-4-(3-氟苯硫基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 向48mg(1.10mmol)55％的氫化鈉和3mL干燥DMSO的懸浮液中加入141mg(1.10mmol)3-氟苯硫酚，在室溫下攪拌30分鐘。向此反應(yīng)液中加入100mg(0.37mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌3小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入5mL水，過(guò)濾收集析出的晶體。所得晶體用硅膠柱層析(氯仿)進(jìn)行純化，得到101mg(收率76％)為白色晶體的標(biāo)題化合物。
mp189-190℃. 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝7.3-7.6(5H，m)，8.35(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.64(1H，d，J＝2Hz)，9.19(1H，s)，9.52(1H，s). IR(KBr)cm-12225，1597，1473，1460，1387，1213，1207，1057，1001，876，829，789，760，690，474. FAB-MS(m/e)365(M+1). 實(shí)施例20 (1)N-(2-羥苯基)乙酰胺 向1.0g(9.16mmol)2-氨基苯酚的50mL干燥吡啶溶液中加入1.16mL(9.16mmol)三甲基氯硅烷，在室溫下攪拌1小時(shí)。在冰冷下向反應(yīng)混合物中加入0.65mL(9.16mmol)乙酰氯，在室溫下攪拌16小時(shí)。加入10mL氨水溶液，在室溫下攪拌20分鐘后，減壓下脫去氨氣。用乙酸乙酯提取后，用無(wú)水硫酸鈉干燥，餾去溶劑。用乙酸乙酯進(jìn)行結(jié)晶化，用正己烷∶乙酸乙酯(1∶1)和正己烷依次洗滌后風(fēng)干，得到976mg(收率70％)為淡褐色晶體的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝2.27(3H，s)，6.8-7.2(4H，m)，7.26(1H，s)，7.48(1H，br s)，8.65(1H，s). (2)2-[4-(2-氨基苯氧基)-3-氰基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將48mg(1.10mmol)55％的氫化鈉懸浮在3mL干燥DMSO中，加入通過(guò)上述方法得到的166mg(1.10mmol)N-(2-羥苯基)乙酰胺，在室溫下攪拌20分鐘。向其中加入100mg(0.37mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌16小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入5mL水，用氯仿提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，餾去溶劑，殘余物用硅膠柱層析(氯仿)進(jìn)行純化，得到14mg(收率11％)為黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp256-259℃(分解). 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝6.73(1H，d，J＝9Hz)，6.86(1H，t，J＝7Hz)，6.96(1H，d，J＝9Hz)，7.12(1H，t，J＝7Hz)，7.21(1H，d，J＝7Hz)，8.13(1H，d，J＝9Hz)，8.31(1H，m)，8.50(1H，s)，9.09(1H，s)，9.38(1H，s)，9.75(1H，s). IR(KBr)cm-12345，1460，1117，735. FAB-MS(m/e)346(M+1). 實(shí)施例21 2-[3-氰基-4-(3-吡啶氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶鹽酸鹽 將20mg(0.06mmol)上述2-[3-氰基-4-(3-吡啶氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶溶解在氯仿(4mL)-甲醇(2mL)中，加入數(shù)滴氯化氫-甲醇。在30℃以下減壓下餾去溶劑，減壓下自氯仿中濃縮殘余物，得到22mg(收率100％)為微黃色晶體的標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)204-206℃ 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)；7.20(1H，d，J＝9Hz)，7.6-7.7(1H，m)，7.8-7.9(1H，m)，8.44(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.6-8.7(2H，m)，8.72(1H，d，J＝2Hz)，9.63(1H，s)，9.74(1H，s). IR(KBr)cm-12239，1608，1560，1552，1498，1473，1396，1375，1279，1252，1105. FAB-MS(m/e)332(M+1). 實(shí)施例22 (1)2-[3-氰基-4-(4-叔丁氧基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 向58mg(1.32mmol)55％的氫化鈉和3mL干燥DMSO的懸浮液中加入219mg(1.32mmol)4-叔丁氧基苯酚，在50℃下攪拌30分鐘。向此反應(yīng)液中加入300mg(1.10mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌24小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入15mL水，過(guò)濾收集析出的晶體。用5mL水、2mL乙醇和5mL乙醚依次洗滌后，減壓下在室溫干燥，得到342mg(收率77％)為淡褐色晶體的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝1.33(9H，s)，7.06(1H，d，J＝9Hz)，7.11(2H，d，J＝9Hz)，7.23(2H，d，J＝9Hz)，8.41(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.66(1H，d，J＝2Hz)，9.18(1H，s)，9.51(1H，s). (2)2-[3-氰基-4-(4-羥基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 向340mg(0.84mmol)上述2-[3-氰基-4-(4-叔丁氧基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶中加入3mL三氟乙酸，在室溫下攪拌2小時(shí)。減壓下餾去溶劑，向殘余物中加入5mL乙醇，在室溫下攪拌2小時(shí)后，過(guò)濾收集晶體。用5mL乙醇和5mL乙醚依次洗滌后，減壓下在室溫干燥，得到261mg(收率89％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
mp250℃以上 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝6.88(2H，d，J＝9Hz)，6.97(1H，d，J＝9Hz)，7.11(2H，d，J＝9Hz)，8.37(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.62(1H，d，J＝2Hz)，9.16(1H，s)，9.48(1H，s)，9.62(1H，s). IR(KBr)cm-12235，1606，1572，1502，1477，1400，1381，1279，1257，1236，1194，1105，993，847，835，796，758，729，687，648，619，598，532，494，463. FAB-MS(m/e)347(M+1). 實(shí)施例23 (1)2-[3-氰基-4-(2-芐氧基羰基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將53mg(2.20mmol)55％的氫化鈉懸浮在5.0mL DMSO中，加入503mg(2.20mmol)2-羥基苯甲酸芐酯，在室溫下攪拌30分鐘。向其中加入200mg(0.73mmol)上述2-(4-氯-3-氰基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶，在50℃下攪拌40小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)液中加入10mL水，過(guò)濾收集析出的膠狀物，用水(5mL×2)洗滌。將其溶解在乙酸乙酯中并回收后，減壓下餾去溶劑。加入5mL乙醇，加熱回流20分鐘后，放冷至室溫。過(guò)濾收集析出的晶體，用2mL乙醇洗滌。將所得晶體風(fēng)干后，減壓下在室溫下干燥，得到254mg(收率74％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ＝5.19(2.H，s)，6.62(1H，d，J＝9Hz)，7.1-7.3(6H，m)，7.45(1H，td，J＝8Hz，1Hz)，7.68(1H，td，J＝4Hz，J＝8Hz)，8.01(1H，dd，J＝9Hz，2Hz)，8.1-8.2(2H，m)，9.14(1H，s)，9.35(1H，s). (2)2-[3-氰基-4-(2-羥基羰基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶 將100mg(0.22mmol)上述2-[3-氰基-4-(2-芐氧基羰基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶溶解在3mL THF中，加入0.5mL 2M的氫氧化鈉水溶液，在室溫下攪拌18小時(shí)后，用1N的鹽酸水溶液中和。減壓下餾去溶劑后，溶解在氯仿中，用水洗滌3次。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，減壓下餾去溶劑，殘余物用硅膠柱層析(氯仿/甲醇)純化后，用1mL乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，得到11mg(收率14％)為淡黃色晶體的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝6.84(1H，d，J＝8Hz)，7.4-7.6(2H，m)，7.78(1H，dd，J＝7Hz，7Hz)，8.01(1H，d，J＝1Hz)，8.34(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.66(1H，d，J＝2Hz)，9.17(1H，S)，9.50(1H，s). FAB-MS(m/e)375(M+1). 實(shí)施例24 2-[3-氰基-4-(2-羥基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽 將28mg(0.08mmol)2-[3-氰基-4-(2-羥基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶(實(shí)施例8)溶解在氯仿(5.6mL)-甲醇(5.6mL)的混合溶劑中，再將6mg(0.09mmol)85％的氫氧化鉀溶解在0.6mL甲醇中并加入到上述溶液中。將此黃色溶液在減壓下進(jìn)行濃縮，向殘余物中加入3mL乙醇，并在減壓下濃縮。將殘余物在1mL己烷中粉碎并過(guò)濾收集，用3mL己烷洗滌，得到28mg(收率91％)為灰色粉末的標(biāo)題化合物。
mp不明確 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝6.84(1H，d，J＝9Hz)，6.3-7.2(4H，m)，8.30(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.53(1H，d，J＝2Hz)，9.14(1H，s)，9.46(1H，s). IR(KBr，cm-1)2231，1610，1576，1508，1479，1458，1400，1375，1294，1265，1228，1176，1113，1095，833，748. 實(shí)施例25 2-[3-氰基-4-(4-羥基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽 將200mg(0.58mmol)2-[3-氰基-4-(4-羥基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶(實(shí)施例22)懸浮在4mL乙醇中，加入1.27mL 0.5mol/L的氫氧化鉀/乙醇溶液，在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓下餾去溶劑，將殘余物懸浮在1mL乙醇中，之后加入1mL己烷。過(guò)濾收集晶體，用1.5mL乙醇/己烷＝1/2混合溶劑、2mL己烷依次洗滌后，減壓下在室溫下干燥，得到189mg(收率95.2％)為橙色晶體的標(biāo)題化合物。
mp＞250℃(分解). 1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝6.44(2H，d，J＝8Hz)，6.78(2H，d，J＝8Hz)，7.00(1H，d，J＝9Hz)，8.36(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.57(1H，d，J＝2Hz)，9.15(1H，s)，9.48(1H，S). IR(KBr，cm-1)3396，3032，2235，1606，1491，1462，1400，1373，1263，1186，1111，1109，847. 實(shí)施例26 藥理實(shí)驗(yàn)1(體外測(cè)定方法) (試驗(yàn)方法) 1.試驗(yàn)化合物的配制 將試驗(yàn)化合物溶解在二甲基亞砜中，之后用50mM磷酸緩沖液(pH7.5)稀釋，配制規(guī)定濃度的溶液。
2.測(cè)定方法 向1mL用50mM磷酸緩沖液(pH7.5)配制的250μM的黃嘌呤(SIGMA)溶液中添加125μL配制成各種濃度的試驗(yàn)化合物，在30℃下預(yù)溫育5分鐘。之后，加入125μL用50mM磷酸緩沖液(pH7.5)稀釋至70mU/mL的牛乳黃嘌呤氧化酶(Cow milk Xanthine Oxidase)(Roche)，在30℃下反應(yīng)10分鐘后，加入200μL 1N的鹽酸，停止反應(yīng)。之后，使用分光光度計(jì)(Shimadzu UV-160A)，測(cè)定在OD 290nm的吸光度，算出抑制率。使用所得抑制率求出IC50。
應(yīng)說(shuō)明的是，抑制率由下式算出。
抑制率(％)＝[1-(B-C)/(A-C)]×100 A對(duì)照的吸光度 B加入試驗(yàn)物質(zhì)時(shí)的吸光度 C空白的吸光度 (試驗(yàn)結(jié)果) 試驗(yàn)結(jié)果如下述表11、12所示。
由表11、12可知本發(fā)明化合物在體外藥理試驗(yàn)中具有優(yōu)異的黃嘌呤氧化酶抑制作用。
實(shí)施例27 藥理實(shí)驗(yàn)2(體內(nèi)測(cè)定方法) (試驗(yàn)方法) 對(duì)ICR系雄性小鼠(7周齡)，將用1％甲基纖維素懸浮的試驗(yàn)化合物按0.3mg/kg或3mg/kg在非絕食狀態(tài)下進(jìn)行單次強(qiáng)制經(jīng)口給藥。給藥后1小時(shí)，在乙醚麻醉下從后大靜脈采血，按照常規(guī)方法分離血漿，使用自動(dòng)分析裝置7060E，利用酶法測(cè)定血漿中的尿酸值，求出試驗(yàn)化合物給藥組相對(duì)于正常組的血漿中尿酸值抑制率。
根據(jù)得到的血漿中尿酸值抑制率，算出相同用量下相對(duì)于使用TMX-67(0.3mg/kg)同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)而得到的活性的相對(duì)活性比(％)。
(試驗(yàn)結(jié)果) 試驗(yàn)結(jié)果如下述表11、12所示。
由表11、12可知本發(fā)明化合物在體內(nèi)藥理試驗(yàn)中具有優(yōu)異的黃嘌呤氧化酶抑制作用。
[表11] 表中的實(shí)施例編號(hào)與上述實(shí)施例的號(hào)碼一致。
[表12] 表中的實(shí)施例編號(hào)與上述實(shí)施例的號(hào)碼一致。
權(quán)利要求
1.下述通式(I)表示的化合物或其鹽
式中，
R1表示碳原子數(shù)為2～8的烯基或可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷氧基、碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基、甲?；?、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基、碳原子數(shù)為6～10的芳基或碳原子數(shù)為6～10的芳氧基的基團(tuán)或原子作為取代基的碳原子數(shù)為6～10的芳基或雜芳基；
R2表示氰基、硝基、甲?；?、羧基、氨基甲酰基或碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基；
X表示氧原子、-N(R3)-或-S(O)n-；其中，R3表示氫原子或碳原子數(shù)為1～8的烷基；或者R3和R1結(jié)合形成嗎啉基、硫代嗎啉基或哌嗪基；或者R3表示與上述R1相同的基團(tuán)；n表示0～2的整數(shù)；
而Y表示氧原子、硫原子或NH。
2.權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷氧基、碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基、甲?；Ⅳ然?、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基、碳原子數(shù)為6～10的芳基或碳原子數(shù)為6～10的芳氧基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基、萘基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、哌啶基、嘧啶基、吡喃基、吡啶基、噻唑基、咪唑基、吲哚基或喹啉基。
3.權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷氧基、碳原子數(shù)為2～8的烷氧基羰基、甲?；?、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基、碳原子數(shù)為6～10的芳基或碳原子數(shù)為6～10的芳氧基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基。
4.權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基或氨基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基。
5.權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R2為氰基或硝基。
6.權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R2為氰基。
7.權(quán)利要求1～6中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X為氧原子、NH或硫原子。
8.權(quán)利要求1～6中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X為氧原子或硫原子。
9.權(quán)利要求1～8中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中Y為硫原子或NH。
10.權(quán)利要求1～8中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中Y為硫原子。
11.權(quán)利要求1的通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基；R2為氰基或硝基；X為氧原子或硫原子；Y為硫原子或NH。
12.權(quán)利要求1的通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基；R2為氰基或硝基；X為氧原子或硫原子；Y為硫原子。
13.權(quán)利要求1的通式(I)表示的化合物或其鹽，其中R1為可以具有選自碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基、氨基的基團(tuán)或原子作為取代基的苯基或吡啶基；R2為氰基或硝基；X為氧原子；Y為硫原子。
14.黃嘌呤氧化酶抑制劑，其含有權(quán)利要求1～13中任一項(xiàng)的化合物或其鹽作為有效成分。
15.高尿酸血癥治療劑，其含有權(quán)利要求1～13中任一項(xiàng)的化合物或其鹽作為有效成分。
全文摘要
本發(fā)明使用下述通式(I)表示的化合物作為黃嘌呤氧化酶抑制劑。式中，R1表示可以具有碳原子數(shù)為1～8的烷基、碳原子數(shù)為1～8的鹵代烷基、碳原子數(shù)為1～8的烷氧基、羧基、鹵原子、羥基、硝基、氰基或氨基等作為取代基的苯基或吡啶基等；R2表示氰基或硝基等；X表示氧原子或硫原子等；而Y表示硫原子或NH等。
文檔編號(hào)A61P43/00GK101248074SQ20068003106
公開日2008年8月20日 申請(qǐng)日期2006年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月1日
發(fā)明者西野武士, 吉田慎一, 天童溫, 山川富雄, 小林正, 筱原従子 申請(qǐng)人:日本化學(xué)醫(yī)藥株式會(huì)社