專利名稱：：取代-四氫異喹啉-3-羧酸化合物、其制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及異喹啉類化合物，尤其涉及2位或3位取代的四氫異喹啉-3-羧酸化合物、其制備方法及為抗血栓藥物的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：血管栓塞性疾病對心腦血管疾病的高死亡率負(fù)最重要的責(zé)任。血栓形成是血管栓塞性疾病發(fā)病的最重要的病因。目前臨床使用的治療急性血栓栓塞性疾病的鏈激酶、尿激酶和重組組織型纖溶酶原激活劑等藥物普遍存在全身出血傾向和免疫原性反應(yīng)，尋找安全有效的溶血栓藥物是新藥研究的熱點(diǎn)之Arg-Gly-Asp-Ser-0H、Arg-Gly-Asp-Val-0H及Arg-Gly-Asp-Phe-0H是纖維蛋白原與血小板表面GP1Ib/IIIa受體結(jié)合的關(guān)鍵序列，具有抗血栓活性。血小板聚集與Ca離子濃度有關(guān)。胞漿內(nèi)Ca離子濃度升高，血小板激活并聚集。胞漿內(nèi)Ca離子濃度降低，血小板抑制。四氫異喹啉類化合物大都具有鈣拮抗和抑制血小板聚集活性。此外，四氫異喹啉分子中的苯環(huán)紫外發(fā)色團(tuán)，方便藥物代謝研究。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的之一是提供下述具有優(yōu)秀抗血栓活性的通式I或通式II的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，在通式I或通式II中，AA選自Ser、Val或Phe殘基。本發(fā)明將Arg-Gly-Asp-Ser-OH、Arg-Gly-Asp-Val-0H或Arg-Gly-Asp-Phe-0H的N-端和側(cè)鏈保護(hù)或者C-端和側(cè)鏈保護(hù)后分別通過2位氮或3位羧基與3-S-四氫異喹啉-3-羧酸偶聯(lián)，得到的通式I或通式II的化合物均具有優(yōu)秀的抗血栓活性、GP1Ib/IIIa受體定向性和紫外可檢測性。本發(fā)明目的之二是提供一種通式I和通式II化合物的制備方法。一種制備通式I化合物的方法，包括1、按照常規(guī)方法分別制備Arg-Gly-Asp-Ser-OH、Arg-Gly-Asp-Val-OH或Arg-Gly-Asp-Phe-OH三種短肽，將三種短肽的O端和側(cè)鏈用保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)；2、按照常規(guī)方法制備3S-四氫異喹啉-3-羧酸，將3S-四氫異喹啉-3-羧酸芐基化得到3S-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯或3S-2-Boc-四氫異喹啉-3-羧酸；3、按照常規(guī)方法將C-端和側(cè)鏈用保護(hù)基保護(hù)的Arg-Gly-Asp-Ser-0H、Arg-Gly-Asp-Val-OH或Arg-Gly-Asp-Phe-OH分別連接到3S-2-Boc-四氫異喹啉-3-羧酸的2-位氮上、脫去所有保護(hù)基，得到通式I化合物。一種制備通式II化合物的方法，包括1、按照常規(guī)方法分別制備Arg-Gly-Asp-Ser-OH、Arg-Gly-Asp-Val-OH及Arg-Gly-Asp-Phe-OH三種短肽，將三種短肽的N-端和側(cè)鏈分別用保護(hù)基保護(hù)；2、按照常規(guī)方法制備3S-四氫異喹啉-3-羧酸，將3S-四氫異喹啉-3-羧酸芐基化得到3S-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯或3S-2-Boc-四氫異喹啉-3-羧酸；3、按照常規(guī)方法將N-端和側(cè)鏈用保護(hù)基保護(hù)的Arg-Gly-Asp-Ser-0H、Arg-Gly-Asp-Val-OH或Arg-Gly-Asp-Phe-OH分別連接到3S-2-Boc-四氫異喹啉-3-羧酸的3-羧基上、脫去所有保護(hù)基，得到通式II化合物。作為參考，所述的3S-四氫異喹啉-3-羧酸可按照以下方法制備得到將L-苯丙氨酸與甲醛縮合制備得到3S-四氫異喹啉-3-羧酸。本發(fā)明采用大鼠頸動(dòng)靜脈旁路插管血栓模型上評價(jià)了通式I和通式II化合物的抗血栓活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明通式I或通式n化合物均具有優(yōu)秀的抗血栓活性，臨床上可作為抗血栓劑應(yīng)用。圖l、通式I化合物的制備路線；其中AA選自Ser、Val或Phe殘基。圖2、通式II化合物的制備路線；其中AA選自Ser、Val或Phe殘基。具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。應(yīng)當(dāng)指出，這些實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的例證，不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。實(shí)施例1Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-0Bzl的制備1)制備Boc-Ser(Bzl)-OBzl738mg(2.5mmo1)Boc-Ser(Bzl)-0H溶于10ml無水乙醇，加入407mg(1.25腿o1)Cs2C03，室溫反應(yīng)15分鐘，TLC顯示原料點(diǎn)消失。減壓濃縮除去溶劑，得對應(yīng)的銫鹽。將得到的銫鹽先溶于2ml無水DMF，再往里加0.3ml(2.5mmo1)溴節(jié)。反應(yīng)混合物于50-55。C攪拌16h，TLC(展開劑CHC13:Me0H=20:1)顯示Boc-Ser(Bzl)-0H的銫鹽消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液3/C減壓濃縮，得到874mg(90.7。/0標(biāo)題化合物，為無色油狀物。ESI-MS(m/e)386[M+H]+。2)制備HCl'Ser(Bz1)-0Bzl將963mg(2.5腿ol)Boc-Ser(Bzl)-0Bzl與10ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH=20:1)顯示Boc-Ser(Bzl)-0Bzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。3)制備Boc-Asp(0Bzl)-Ser(Bzl)-OBzl將808mg(2.5腸1)Boc-Asp(OBzl)-OH溶于10ml無水THF，冰浴下往—里力口10ml含338mg(2.5畫1)H0Bt和619mg(3隨1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將740mg(2.3腿o1)HCl'Ser(Bzl)-OBzl和232mg(2.3睡1)N-甲基嗎啉先與6ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:Me0H=20:1)顯示Boc-Asp(0Bzl)-OH消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37。C減壓濃縮，得1.29g(95%)標(biāo)題化合物，為無色油狀物，ESI-MS(m/e)[M+H]591.7。4)制備HC1'Asp(0Bzl)-Ser(Bzl)-0Bzl將1.477g(2.5mmo1)Boc-Asp(0Bzl)-Ser(Bzl)-0Bzl與10ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:Me0H=20:1)顯示Boc-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料伊磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下歩反應(yīng)。5)制備Boc-Gly-Asp(0Bzl)-Ser(Bzl)-OBzl將438mg(2.5翻1)Boc-Gly-0H溶于6ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5mmo1)H0Bt和619mg(3,1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.212g(2.3畫1)HCrAsp(OBzl)-Ser(Bzl)-0Bzl和232mg(2.3mmol)N-甲基嗎啉先與6ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:Me0H=10:1)顯示HCl'Asp(0Bz1)-Ser(Bzl)-0Bzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37°C減壓濃縮，得1.461g(98.1%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp5355°C[a]D=-23.7(c=0.11，CHC13)ESI-MS(m/z)649[M+H]+。6)制備HCl.Gly-Asp(0Bz1)-Ser(Bzl)-0Bzl將L619g(2.5腿o1)Boc-Gly-Asp(0Bz1)-Ser(Bzl)-0Bzl與15ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示Boc-Gly-Asp(0Bz1)-Ser(Bzl)-0Bzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。7)制備Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl將798mg(2.5誦o1)Boc-Arg(N02)-OH溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5畫1)HOBt和619mg(3翻1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.343g(2,3腿o1)HCl'Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl和232mg(2.3mmo1)N-甲基嗎啉先與6ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示HCl.Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37'C減壓濃縮，得1.854g(95%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp7475°C[cl]d=-26.2(c二0.13，CHC1:,)ESI-MS(m/z)872[M+Na]+。實(shí)施例2Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl的制備1)制備HC1'Val-OBzl將5.855g(50,1)H-Val-OH、55ml苯甲醇和11.5g多聚磷酸的懸浮液于90-95°C攪拌8h，使變澄清。將反應(yīng)混合液倒入300ml(5%)硫酸液中，用乙醚萃取5次，分出水層。乙醚層用2%鹽酸洗滌3次，合并的水相用NaHC03固體調(diào)節(jié)pH9。水相用乙醚萃取3次(100mlX3)，合并的乙醚層用無水MgS04干燥。過濾，往濾液里通HC1氣體約20分鐘。混濁的乙醚層過慮，濾集到3.034g(25%)標(biāo)題化合物。ESI-MS(m/e)208[M+H]+。2)制備Boc-Asp(0Bz1)-Val-OBzl將808mg(2.5腿o1)Boc-Asp(OBzl)-OH溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5,1)HOBt和619mg(3.O翻l)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將558mg(2.3rnmo1)HC1.Val-。Bzl和232mg(2.3畫1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=20:l)顯示HCl'Val-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37°C減壓濃縮，得1.29g(96%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z)513[M+H]+。2)制備HCl'Asp(0Bzl)-Va1-0Bzl將1.278g(2,5腿o1)Boc-Asp(0Bz1)-Val-OBzl與10ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:Me0H=20:1)顯示Boc-Asp(OBzl)-Va卜OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。3)制備Boc-Gly-Asp(OBzl)-Val-0Bzl將438mg(2.5隨1)Boc-Gly-0H溶于6ml無水THF，冰浴下往里力口10ml338mg(2.5mmo1)H0Bt和619mg(3.Ommol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.03g(2.3咖o1)HC1.Asp(0Bz1)-Val-OBzl和232mg(2.3匪o1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHCL:MeOH二10:1)顯示HC1'Asp(0Bz1)-Val-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37"C減壓濃縮，得1.242g(95%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp66.168.rC，[a]D=-43.8(c=0.12，CHC13);ESI-MS(m/z)592[M+Na]+。3)制備HC1'Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl將1.421g(2.5mrno1)Boc-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl與10ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:Me0H=10:1)顯示Boc-Gly-Asp(0Bz1)-Val-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料l產(chǎn)磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。4)制備Boc-Arg(N0》-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl將798mg(2,5,1)Boc-Arg(N02)_0H溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5匪o1)H0Bt和619mg(3.0,1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.162g(2,3腦1)HCl.Gly-Asp(0Bz1)-Val-OBzl和232mg(2。3匪o1)N-甲基嗎啉先與lOnil無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHCl3:MeOH=10:1)顯示HC1'Gly-Asp(0Bz1)-Val-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37'C減壓濃縮，得1.523g(86%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp107109°C，[a]D=-38(c二0.13，CHC13);ESI-MS(m/z)794[M+H+Na]+。實(shí)施例3Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl的制備1)制備HCl.Phe-OBzl將10.85g(66腿o1)Phe-OH、74.6ml苯甲醇和14.93g多聚磷酸的懸浮液于90-95"C攪拌8h，使變澄清。將反應(yīng)混合液倒入600ml(5%)硫酸液中，用乙醚萃取5次，分出水層。乙醚層用2%鹽酸洗滌3次，合并的水相用NaHC03固體調(diào)節(jié)pH9。水相用乙醚萃取3次(100mlX3)，合并的乙醚層用無水Na2S04干燥。過濾，往濾液里通HC1氣體約20分鐘?；鞚岬囊颐褜舆^濾，濾集到5.641g(30%)標(biāo)題化合物。ESI-MS(m/e)256[M+H]+。2)制備Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl將808mg(2.5,1)Boc-Asp(OBzl)-OH溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5匪o1)HOBt和619mg(3腿o1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將668mg(2.3醒o1)HC1'Phe-OBzl和232mg(2.3腸1)N-甲基嗎啉先與6ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=20:1)顯示HC1'Phe-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37"C減壓濃縮，得1.264g(98.1%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp798(TC，[a]D=-24.2(c二0.12，CHC1:',);ESI-MS(m/z)561[M+H]+。3)制備HCl'Asp(0Bz1)-Phe-0Bzl將L398g(2.5腿o1)Boc-Asp(0Bz1)-Phe-OBzl與15ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH=20:1)顯示Boc-Asp(0Bz1)-Phe-0Bzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。4)制備Boc-Gly-Asp(0Bz1)-Phe-0Bzl將438mg(2.5mmo1)Boc-Gly-0H溶于5ml無水THF，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5腿o1)H0Bt和619mg(3mmo1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.141g(2.3,1)HC1'Asp(0Bz1)-Phe-0Bzl和232mg(2.3mmol)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:Me0H二10:1)顯示HC1'Asp(0Bzl)-Phe-0Bzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37"C減壓濃縮，得1.29g(91X)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp7071°C，[a]D=-22.5(c=0.12，CHC13);ESI-MS(m/z)640[M+Na]+。5)制備HCl.Gly-Asp(0Bz1)-Phe-OBzl將1.541g(2.5畫1)Boc-Gly-Asp(OBzl)-Phe-0Bzl與15ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:Me0H=10:1)顯示Boc-Gly-Asp(0Bz1)-Phe-0Bzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。6)制備Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl將798mg(2.5腿o1)BocArg(N02)-OH溶于10ml無水THF,冰浴下往里加10ml含338mg(2.5腿o1)H0Bt和619mg(3.O腿ol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.272g(2.3隨1)HCl'Gly—Asp(0Bz1)—Phe—0Bzl和232mg(2.3腿o1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLX(展開劑CHCl3:MeOH=10:1)顯示HCl'Gly-Asp(0Bz1)-Phe-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液3/C減壓濃縮，得1.712g(91%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp7779°C，[ct]D=-22.6(c=0.12，CHC13);ESI-MS(m/z)841[M+Na]+。實(shí)施例43S-1,2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸的制備將10.00g(60.6腿o1)Phe-0H、24mlHCH0、90ml濃HC1加入反應(yīng)瓶中，90"C油浴加熱反應(yīng)6.5h。TLC(展開劑CHC13:MeOH=2:l+3d冰醋酸)顯示Phe-OH消失。反應(yīng)液冷卻后過濾，用丙酮沖洗固體三次。得到白色固體8.64g。加入176.3ml80%EtOH，90"C加熱回流，約8—10h后，待反應(yīng)液全部變澄清，停止加熱回流，冷卻。配制KOH水溶液(2.97沐0H溶于2.16mlH20中)后加入攪拌下的EtOH叫中，立即析出大量白色晶體，減壓過濾，用80XEtOH沖洗產(chǎn)品，得到5.7g(53.14%)標(biāo)題化合物，為白色晶體。Mp252253°C，[a]D=-98.5(c=CHCl3);ESI-MS(m/z)178[M+H]+。實(shí)施例53S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯的制備將3.00g(16.9mmol)3S_1，2，3,4-四氫異喹啉-3-羧酸、19.26ml苯甲醇和3.85g多聚磷酸的懸浮液于90-95"C攪拌12h，使變澄清。將反應(yīng)混合液倒入90ml仏0中，用乙醚萃取5次，分出水層。乙醚層用2%鹽酸洗滌3次，合并的水相用NaHC03固體調(diào)節(jié)pH9。水相用乙醚萃取3次(100mlX3)，合并的乙醚層用無水Na2S04干燥。過濾，往濾液里通HC1氣體約10分鐘?；鞚岬囊颐褜舆^濾，濾集到3.6g(70%)標(biāo)題化合物。Mpl46148。C，[a]D=-132.2(c=0.11，CHC1》；ESI-MS(m/e)268[M+H]、實(shí)施例63S-2-叔丁氧羰基-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸的制備先將5.0g(28.25腿o1)3S-1，2，3，4_四氫異喹啉-3-羧酸與400ml飽和碳酸氫鈉溶液混合，抽氣攪拌溶解，未能全部溶解。再用約60mlTHF溶解8.0g(36.66mmo1)(Boc)20，加入到上述反應(yīng)體系中，抽氣攪拌。片刻后溶解，變?yōu)槌吻迦芤骸７磻?yīng)約三天，TLC(CHC13:MeOH=20:l+3d冰醋酸)顯示3S-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸消失，停反應(yīng)。反應(yīng)混合物減壓濃縮至THF全部去除，殘余溶液用硫酸氫鉀固體調(diào)節(jié)PH值為56，再用乙酸乙酯萃取該溶液三次，合并乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37"C減壓濃縮，得5.869g(75%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpll9120。C，[a]D=-7.7(c=0,12，CHC13);ESI-MS(m/z)278[M+H]+。實(shí)施例7Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)-OBzl的制備1)制備Boc-Ser(Bzl)-0Bzl738mg(2.5咖o1)Boc-Ser(Bzl)-0H溶于10ml無水乙醇，加入407mg(1.25mmol)Cs2C03，室溫反應(yīng)15分鐘，TLC顯示原料點(diǎn)消失。減壓濃縮除去溶劑，得對應(yīng)的銫鹽。將得到的銫鹽先溶于2ml無水DMF，再往里加0.3ml(2.5腿o1)溴節(jié)。反應(yīng)混合物于50-55"C攪拌16h，TLX(展開劑CHC13:Me0H=20:1)顯示Boc-Ser(Bzl)-0H的銫鹽消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液3/C減壓濃縮，得到874mg(90.7%)標(biāo)題化合物，為無色油狀物。ESI-MS(m/e)386[M+H]+。2)制備HCl'Ser(Bz1)-0Bzl將963mg(2.5mmol)Boc-Ser(Bzl)-0Bzl與10ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:Me0H=20:1)顯示Boc-Ser(Bz1)-0Bzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料伊磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。3)制備Boc-Asp(0cHex)-Ser(Bzl)-OBzl將789mg(2.5匪o1)Boc-Asp(0cHex)-0H溶于10ml無水四氫呋喃(THF)，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5,1)H0Bt和619mg(3腿o1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將740mg(2.3腿o1)HC1'Ser(Bzl)-OBzl和232mg(2.3腿o1)N-甲基嗎啉先與6ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH二20:1)顯示Boc-Asp(OcHex)-OH消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液3/C減壓濃縮，得1.27g(95%)標(biāo)題化合物，為無色油狀物，ESI-MS(m/e)584[M+H]+。4)制備HCl'Asp(OcHex)-Ser(Bzl)-OBzl將1.457g(2.5腿o1)Boc-Asp(0cHex)-Ser(Bzl)-OBzl與10ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHCl3:MeOH二20:1)顯示Boc-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下歩反應(yīng)。5)制備Boc-Gly-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)-OBzl將438mg(2.5,1)Boc-Gly-OH溶于6ml無水THF，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5mrno1)HOBt和619mg(3,1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.194g(2.3國1)HC1.Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl和232mg(2.3腿o1)N-甲基嗎啉先與6ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示HCl'Asp(0cHex)-Ser(Bz1)-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37"C減壓濃縮，得1.443g(98.1%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z)641[M+H"。6)制備HCl.Gly-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)-OBzl將1.599g(2.5腿o1)Boc-Gly-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)-OBzl與15ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示Boc-Gly-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下歩反應(yīng)。7)制備Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(0cHex)-Ser(Bzl)-0Bzl將1.071g(2.5隱o1)Boc-Arg(Tos)-0H溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5腿o1)H0Bt和619mg(3咖o1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.325g(2.3腿o1)HCl.Gly—Asp(0cHex)—Ser(Bzl)—0Bzl和232mg(2.3mmo1)N-甲基嗎啉先與6ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:Me0H=10:1)顯示HCl'Gly-Asp(0cHex)-Ser(Bzl)-0Bzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37'C減壓濃縮，得2.144g(98.1%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp8788°C，[a]d二-11.01(c=0.1，CHC1:》;ESI-MS(m/z)951[M+H]+。實(shí)施例8Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(0cHex)-Val-0Bzl的制備1)制備HC1'Val-0Bzl將5.855g(50腿o1)H-Val-0H、55ml苯甲醇禾口11.5g多聚磷酸的懸浮液于90-95'C攪拌8h，使變澄清。將反應(yīng)混合液倒入300ml(5%)硫酸液中，用乙醚萃取5次，分出水層。乙醚層用2%鹽酸洗滌3次，合并的水相用NaHC03固體調(diào)節(jié)pH9。水相用乙醚萃取3次(100mlX3)，合并的乙醚層用無水MgS04干燥。過濾，往濾液里通HC1氣體約20分鐘?；鞚岬囊颐褜舆^慮，濾集到3.034g(25%)標(biāo)題化合物。ESI-MS(m/e)208[M+H]+。2)制備Boc-Asp(OcHex)-Val-OBzl將789mg(2.5mmo1)Boc-Asp(OcHex)-0H溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5醒o1)HOBt和619mg(3.Ommol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將558mg(2.3腿o1)HCl.Val-OBzl和232mg(2.3腿o1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHCl3:MeOH=20:1)顯示HC1.Val—OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37'C減壓濃縮，得1.llg(96%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z)505[M+H]+。3)制備HCl'Asp(0cHex)-Val-0Bzl將1.261g(2.5畫1)Boc-Asp(0cHex)-Val-0Bzl與10ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHCl3:Me0H=20:1)顯示Boc-Asp(0cHex)-Val-0Bzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。4)制備Boc-Gly-Asp(0cHex)-Val-0Bzl將438mg(2.5腿o1)Boc-Gly-0H溶于6ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5腿o1)H0Bt和619mg(3.Ommol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.014g(2.3,1)HC1'Asp(0Bz1)-Val-OBzl禾口232mg(2.3畫1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHCl3:MeOH=10:1)顯示HC1'Asp(0Bz1)-Val-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液3/C減壓濃縮，得1.242g(95%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z)584[M+Na]+。5)制備HC1'Gly-Asp(OcHex)-Val-OBzl將1.404g(2.5國1)Boc-Gly-Asp(0cHex)-Val-OBzl與10ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHCl"Me0H=10:1)顯示Boc-Gly-Asp(OcHex)-Va:L-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料l產(chǎn)磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。6)制備Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Val-OBzl將1.071g(2.5腿o1)Boc-Arg(Tos)-OH溶于10ml無水THF，冰浴下往里力口10ml含338mg(2.5匪o1)HOBt和619mg(3.Ommol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.145g(2.3誦o1)HCl'Gly-Asp(OcHex)-Val-OBzl和232mg(2.3腿o1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示HCl'Gly-Asp(OcHex)-Val-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液3fC減壓濃縮，得1.725g(86%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp7879°C，[a]D=-16.1(c二0.12，CHC13);ESI-MS(m/z)896[M+H+Na]+。實(shí)施例9Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Phe-OBzl的制備1)制備HCl.Phe-OBzl將10.85g(66mmol)Phe-OH、74.6ml苯甲醇和14.93g多聚磷酸的懸浮液于90-95°C攪拌8h，使變澄清。將反應(yīng)混合液倒入600ml(5%)硫酸液中，用乙醚萃取5次，分出水層。乙醚層用2%鹽酸洗滌3次，合并的水相用NaHC03固體調(diào)節(jié)pH9。水相用乙醚萃取3次(100mlX3)，合并的乙醚層用無水Na2S04干燥。過濾，往濾液里通HC1氣體約20分鐘?；鞚岬囊颐褜舆^濾，濾集到5.641g(30%)標(biāo)題化合物。ESI-MS(m/e)256[M+H]+。2)制備Boc-Asp(OcHex)-Phe-OBzl將789mg(2.5腿o1)Boc-Asp(OcHex)-0H溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5讓o1)HOBt和619mg(3腿o1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將668mg(2.3讓o1)HC1.Phe-OBzl和232mg(2.3,1)N-甲基嗎啉先與6ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=20:1)顯示HCl'Phe-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37"C減壓濃縮，得1.242g(98.1%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z)553[M+H]+。3)制備HCl.Asp(0cHex)-Phe-0Bzl將1.381g(2.5腿o1)Boc-Asp(0cHex)-Phe-OBzl與15ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHCl3:Me0H=20:1)顯示Boc-Asp(0cHex)-Phe-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。4)制備Boc-Gly-Asp(0cHex)-Phe-0Bzl將438mg(2.5腿o1)Boc-Gly-OH溶于5ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5腿o1)H0Bt和619mg(3mmol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.124g(2.3畫1)HC1'Asp(0cHex)—Phe—OBzl和232mg(2.3mmol)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示HC1'Asp(OcHex)-Phe-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37"C減壓濃縮，得1.275g(91%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z)632[M+Na]+。5)制備HCl.Gly-Asp(OcHex)-Phe-OBzl將1.524g(2.5畫1)Boc-Gly-Asp(OcHex)-Phe-OBzl與15ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH二10:1)顯示Boc-Gly-Asp(OcHex)-Phe-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。6)制備Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Phe-OBzl將1.071g(2.5腸1)BocArg(Tos)-OH溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5匪o1)H0Bt和619mg(3.O腿ol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.256g(2.3匪o1)HC1'Gly-Asp(OcHex)-Phe-OBzl和232mg(2.3mmol)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC1:,:MeOH=10:1)顯示HCl'Gly-Asp(0cHex)-Phe-0Bzl消失。'反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37'C減壓濃縮，得1.925g(91%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp8889。C，[a]D=-10.8(c=0.14，CHC13);ESI-MS(m/z)943[M+Na]+。實(shí)施例103S-2-(H-Arg-Gly-Asp-Ser)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸(Ia)的制備1)制備Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(0cHex)-Ser(Bzl)-OH:先將2.376g(2.5mrao1)Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(0cHex)-Ser(Bz1)-0Bzl溶于10ml水和乙醇的混合液，再加入300mgPd/C(5%)，減壓排出反應(yīng)瓶中的空氣，通入氫氣置換，反復(fù)置換5次后通氫氣室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHCl:i:MeOH=10:1+3滴冰醋酸)顯示Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(0cHex)-Ser(Bzl)-OBzl消失。停止反應(yīng)，濾除Pd/C，濾液減壓濃縮，得2.108g(98X)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp108109，[a]'〕=-1.9(c=0.14，CHC13);ESI—MS(m/z)861[M+H]+。2)制備3S—2—[Boc-Arg(Tos)—Gly-Asp(0cHex)-Ser(Bz1)]—1，2，3，4--四氫異喹啉-3-羧酸芐酯將2.151g(2.5mmo1)Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)-OH溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5mmol)H0Bt和619mg(3.0mmol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將698mg(2.3匪o1)HC1.IQ-OBzl和232mg(2.3圓1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示HC1.3S_1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至千，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37°C減壓濃縮，得2.347g(92X)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl03104。C，[a]D=-11.7(c=0.14，CHC13);ESI-MS(m/z)1110[M+H]+。3)制備3S-2-(H-Arg-Gly-Asp-Ser)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸將2.773g(2.5腿o1)3S-2-[Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)]-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羧酸芐酯與30mlCF3C00H:CF3S03H二4:l的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑正丁醇冰醋酸水=1:1:1)顯示3S-2-[Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Ser(Bzl)]-1，2，3，4-四氫異喹啉-3_羧酸芐酯消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入大量無水乙醚沉降，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次，再用水泵將其抽干，殘余物用S印hadexG-10柱純化，得1.036g(70%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl48149。C;[a]。二-2.3(c二O.14，CHC13);ESI-MS(m/z)593[M+H]+。實(shí)施例113S-2-(H-Arg-Gly-Asp-Val)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸(lb)的制備1)制備Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Val-OH先將2.180g(2.5mmol)Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Val-OBz丄溶于10ml水和乙醇的混合液，再加入300mgPd/C(5%)，減壓排出反應(yīng)瓶中的空氣，通入氫氣置換，反復(fù)置換5次后，通氫氣室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1+3滴冰醋酸)顯示Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(0cHex)-Va卜OBzl消失。停止反應(yīng)，濾除Pd/C，濾液減壓濃縮除去溶劑，得1.916g(98%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpll9120°C，[a]D=-7.7(c=0.15，CH30H);ESI-MS(m/z)783[M+H]+。2)制備3S-2-[Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Val]-1，2，3,4-四氫異喹啉-3-羧酸節(jié)酯將L955g(2.5腿o1)Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Val-0H溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5mrno1)H0Bt和619mg(3.0,1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將698mg(2.3腿o1)HC1'3S-1，2，3,4-四氫異喹啉-3-羧酸節(jié)酯和232mg(2.3mrno1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHCl:,:MeOH=10:1)顯示HCl'3S-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37'C減壓濃縮，得2.181g(92%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl05106。C，[a]D=-17.3(c二0.14，CHC13);ESI-MS(m/z)1032[M+H]+。3)制備3S-2-(H-Arg-Gly-Asp-Val)-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸將2.577g(2.5腿o1)3S-2-[Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Val]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉-3-羧酸芐酯與30mlCF3C02H:CF3S03H=4:1的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLX(展開劑正丁醇冰醋酸水=1:1:1)顯示3S-2-[Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Val]-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入大量無水乙醚沉降，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次，再用水泵將其抽干，殘余物用S印hadexG-10柱純化，得1.057g(70%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp151.4152.2°C，[a]D=-0.1(c=0.14，CH30H);ESI—MS(m/z)605[M+H]+。實(shí)施例123S-2-(H-Arg-Gly-Asp-Phe)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸(Ic)的制備1)制備Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Phe-OH先將2.300g(2.5,1)Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Phe-OBzl溶于10ml水和乙醇的混合液，再加入300mgPd/C(5%)，減壓排出反應(yīng)瓶中的空氣，通入氫氣置換，反復(fù)置換5次后，通氫氣室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開齊ljCHC13:MeOH=10:1+3滴冰醋酸)顯示Boc—Arg(Tos)—Gly-Asp(OcHex)-Phe-OBzl消失。停止反應(yīng)，濾除Pd/C，濾液減壓濃縮除去溶劑，得2.033g(98X)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp119120°C，[a]D=-7.l(c=0.14，CH30H);ESI-MS(m/z)831[M+H]+。2)制備3S-2-[Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(0cHex)-Phe]-l，2，3，4-四氫異喹啉-3_羧酸節(jié)酯將2.075g(2,5腿o1)Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Phe-OH溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5腿o1)H0Bt禾卩619mg(3.0腸1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將698mg(2.3翻1)HC1'3S-1，2,3，4-四氫異喹啉-3-羧酸節(jié)酯和232mg(2.3mmo1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示HCl'3S-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37'C減壓濃縮，得2.283g(92%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl05107。C，[a]D=—14.4(c=0.14，CHC13);ESI-MS(m/z)1080[M+H]+。3)制備3S-2-(H-Arg-Gly-Asp-Phe)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸將2.697g(2.5腿ol)3S-2-[Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Phe]-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯與30mlCF3C02H:CF3S03H=4:1的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑正丁醇冰醋酸水=1:1:1)顯示3S-2-[Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-Phe]-1,2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入大量無水乙醚沉降，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次，再用水泵將其抽干，殘余物用S印hadexG-10柱純化，得1.141g(70%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl32133。C，[a0(c=0.14，CH30H);ESI-MS(m/z)653[M+H]+。實(shí)施例133S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg-Gly-Asp-Ser-OH(IIa)的制備1)制備HC1.Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl將2.122g(2.5mmol)Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl與20ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH二10:1)顯示Boc-Arg(NO》-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。2)制備3S-2-叔丁氧羰基-l,2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N02)_Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl將0.693g(2.5mrno1)3S-2-叔丁氧羰基-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5,1)HOBt和619mg(3.0mmol)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.806g(2.3腿o1)HCl'Arg(N02)-Gly-Asp(0Bz1)-Ser(Bzl)-OBzl和232mg(2.3mmol)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHCl3:MeOH二10:1)顯示HCl.Arg(NO》-Gly-Asp(0Bz1)-Ser(Bzl)-OBzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37'C減壓濃縮得2.086g(90%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mp9697。C，[a]D=-13.1(c=0.14，CHC13);ESI-MS(m/z)1008[M+H]+。3)制備3S-2-H-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl鹽酸鹽將2.519g(2.5mrno1)3S-2-叔丁氧羰基-1，2，3，4-四氫異喹啉_3-甲?；?Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl與35ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示3S-2-叔丁氧羰基-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；鵢Arg(N02)-Gly-Asp(0Bzl)-Ser(Bzl)-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。4)制備3S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-?；?Arg-Gly-Asp-Ser-OH先將2.360g(2.5畫1)3S-2-H-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰基-Arg(N02)-Gly-Asp(0Bzl)-Ser(Bzl)-0Bzl鹽酸鹽溶于10ml水和乙醇的混合液，再加入300mgPd/C(5%)，減壓排出反應(yīng)瓶中的空氣，通入氫氣置換，反復(fù)置換5次后，通氫氣室溫?cái)嚢?4小時(shí)，TLC(展開劑正丁醇冰醋酸水=1:1:1)顯示3S-2-H-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N02)-Gly-Asp(0Bz1)-Ser(Bzl)-OBzl鹽酸鹽消失。停止反應(yīng)，濾除Pd/C，濾液減壓濃縮除去溶劑。殘余物用C18柱純化，得0.740g(50%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl67168。C，[a]D=-32.7(c=0.14,CH:,OH);ESI-MS(m/z)593[M+H]+。實(shí)施例143S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰基-Arg-Gly-Asp-Val-0H(lib)的制備1)制備HCl-Arg(N02)-Gly-Asp(0Bzl)-Val-OBzl將1.767g(2.5畫1)Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl與20ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:Me0H=10:1)顯示Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下歩反應(yīng)。2)制備3S-2-叔丁氧羰基-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N02)-Gly_Asp(0Bz1)-Val-0Bzl將0.693g(2.5mmo1)3S-2-叔丁氧羰基-l，2，3,4-四氫異喹啉-3-羧酸溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml含338mg(2.5翻1)H0Bt和619mg(3.0腿o1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.626g(2.3國1)HCl'Arg(N02)_Gly-Asp(0Bz1)-Val-0Bzl和232mg(2.3mmo1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:Me0H=10:1)顯示HCl'Arg(N0》-Gly-Asp(0Bzl)-Val-0Bzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液3/C減壓濃縮得1.924g(90。％)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl01103°C，[a]D=-20.3(c=0.14，CHC1》；ESI-MS(m/z)930[M+H]+。3)制備3S-2-H-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰基-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl鹽酸鹽將2.323g(2.5腿o1)3S-2-叔丁氧羰基-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl與35ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示3S-2-叔丁氧羰基-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰基-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。4)制備3S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰基-Arg-Gly-Asp-Val-0H先將2.165g(2.5翻1)3S-2-H-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N02)-Gly-Asp(0Bz1)-Val-OBzl鹽酸鹽溶于10ml水和乙醇的混合液，再加入300mgPd/C(5%)，減壓排出反應(yīng)瓶中的空氣，通入氫氣置換，反復(fù)置換5次后，通氫氣室溫?cái)嚢?4小時(shí)，TLC(展開劑正丁醇冰醋酸水=1:1:1)顯示3S-2-H-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(NO》-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl鹽酸鹽消失。停止反應(yīng)，濾除Pd/C，濾液減壓濃縮除去溶劑。殘余物用C18柱純化，得0.754g(50%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl51152。C，[a]D=-45.5(c=0.14，C);ESI-MS(m/z)604[M+H]+。實(shí)施例153S-1，2,3，4-四氫異喹啉-3-?；?Arg-Gly-Asp-Phe-OH(lie)的制備1)制備HCl'Arg(NO》-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl將1.887g(2.5mmol)Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl與20ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示Boc-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。2)制備3S-2-叔丁氧羰基-l,2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰基-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl將0.693g(2.5rnmo1)3S-2-叔丁氧羰基-1，2，3，4_四氫異喹啉-3-羧酸溶于10ml無水THF，冰浴下往里加10ml338mg(2.5誦o1)HOBt和619mg(3.0mrno1)DCC的無水THF溶液。反應(yīng)混合物冰浴攪拌20分鐘，得對應(yīng)的活潑酯溶液，待用。將1.736g(2.3mmo1)HCl.Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe--OBzl和232mg(2.3mmo1)N-甲基嗎啉先與10ml無水THF混溶，然后與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應(yīng)混合物室溫反應(yīng)24小時(shí)。TLC(展開劑CHC13:MeOH=10:1)顯示HCl'Arg(N0》-Gly-Asp(0Bz1)-Phe-0Bzl消失。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥、過濾、濾液37°C減壓濃縮得2.023g(90%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl11113°C，[a]D=-23.5(c=0.14，CHC13);ESI-MS(m/z)978[M+H]+。3)制備3S-2-H-l，2，3，4-四氫異喹啉_3-甲?；?Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl鹽酸鹽將2.443g(2.5mmo1)3S-2-叔丁氧羰基-l，2，3，4_四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl與35ml氯化氫-乙酸乙酯液(4N)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，TLC(展開劑CHC13:Me0H=10:1)顯示3S-2-叔丁氧羰基-l,2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N0》-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl消失。用水泵將反應(yīng)液抽干，加入無水乙醚，再次用水泵將反應(yīng)液抽干，重復(fù)5次。殘留物用無水乙醚泡洗，塑料鏟磨洗，將無水乙醚傾出，反復(fù)5次。得到的標(biāo)題化合物直接用于下步反應(yīng)。4)制備3S-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg-Gly-Asp-Phe-OH先將2.285g(2.5畫1)3S-2-H-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰基-Arg(N02)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl鹽酸鹽溶于10ml水和乙醇的混合液，再加入300mgPd/C(5%)，減壓排出反應(yīng)瓶中的空氣，通入氫氣置換，反復(fù)置換5次后，通氫氣室溫?cái)嚢?4小時(shí)，TLC(展開劑正丁醇冰醋酸水=1:1:1)顯示3S-2-H-1，2，3,4-四氫異喹啉-3-甲?；?Arg(N02)_Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl鹽酸鹽消失。停止反應(yīng)，濾除Pd/C，濾液減壓濃縮除去溶劑。殘余物用C18柱純化，得0.814g(50%)標(biāo)題化合物，為無色固體。Mpl49150。C，[a]D=—31.0(c=0.14，CH:,OH);ESI-MS(m/z)652[M+H]+。試驗(yàn)例1本發(fā)明通式I和通式II化合物體外抗血小板聚集活性測定1)原理(比濁法)富血小板血漿(PRP)具有一定濁度，其濁度高低與所含血小板數(shù)密切相關(guān)。當(dāng)PRP中加入聚集劑后，在攪拌的條件下，部分血小板聚集呈顆粒狀；未聚集的血小板數(shù)目減少，PRP的濁度下降。血小板的聚集程度越高，濁度下降越明顯。所以，可以用PRP的濁度變化來表示血小板的聚集性能。2)試劑二磷酸腺苷(ADP，10—5M)，血小板活化因子(PAF，10—7M)，花生四烯酸(AA，0.25%，用1MNa2C0:,配制)，凝血酶(TE，1U/ml)，枸櫞酸鈉溶液(3.8%，24.71g枸櫞酸鈉/500ml生理鹽水)，硅油(1%,硅油/乙醚)，新鮮豬全血(加1/10容積3.8%的枸櫞酸鈉溶液抗凝)，乙醚。6)測定a.新鮮豬全血1000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，獲得PRP(富血小板血漿)，使用微量加樣槍將上層PRP吸出存入硅垸化過的5ml小塑料管中，并保存在保溫桶里。b.新鮮豬全血3000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘獲得PPP(貧血小板血漿)。d.玻璃小管加入500ylPPP，放入儀器上標(biāo)記有PPP的槽中。c.玻璃小管放入磁子，加入500ulPRP，放入儀器上標(biāo)記有PRP的槽中。d.生理鹽水對照組待基線穩(wěn)定走出1分鐘左右，往含PRP的測定管中使用微量注視針一次性加入5ul生理鹽水，待曲線平穩(wěn)后使用微量注視針一次性加入5ul配好的誘導(dǎo)劑溶液，使血小板發(fā)生了聚集。當(dāng)曲線上升到一定程度后出現(xiàn)平臺(tái)期，血小板的聚集達(dá)到最大值。待曲線穩(wěn)定后，記錄血小板在六分鐘之內(nèi)的最大聚集率(儀器自動(dòng)計(jì)算)。反復(fù)測定多次，求得在誘導(dǎo)劑作用下血小板聚集率的平均值。e.給藥組待基線穩(wěn)定走出1分鐘左右，往含PRP的測定管中使用微量注視針一次性分別加入5u1配好的本發(fā)明實(shí)施例10-15制備的Ia、Ib、Ic、IIa、IIb或IIc生理鹽水溶液，待曲線平穩(wěn)后使用微量注視針一次性加入5ul配好的誘導(dǎo)劑溶液，曲線陡然升高血小板發(fā)生了聚集。當(dāng)曲線上升到一定程度后出現(xiàn)平臺(tái)期，血小板的聚集達(dá)到最大值。待曲線穩(wěn)定后，記錄血小板在六分鐘之內(nèi)的最大聚集率(儀器自動(dòng)計(jì)算)。反復(fù)測定多次，求得加入藥物后，ADP作用下血小板聚集率的平均值。f.按照"抑制率=(生理鹽水組聚集率一給藥組聚集率)/生理鹽水組聚集率"計(jì)算抑制率。結(jié)果見表1-4。表1Ia-c和IIa-c對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集的影響化合物不同濃度下的血小板聚集率(％)NS57.33±1.15濃度(M)Ixl0-5Mlxl(y6MIxl0-7MIxl0-8MAspirin38.38±l,78b42.50±2.06a45.30±1.78a11.33±1.15e30.67±2.08e45.67±4.16alb14.67±2.08e34.00±1.00e43.33±1.53aIc12.67±2.08e31.67士3.2r50.00±4.00IIa28.67±2.31c35.67±0.58e43.67=t4.51alib31.33±2.52e45.00±6.56a53.00±3.61lie11.67±0.58e29.33±4.16e51.00±4.58n=3,a)與NS相比p<0.05;b)與NS比pO.OOl;c)與NS及Aspirin比pO,001.表2Ia-c和Ila-c對PAF誘導(dǎo)的血小板聚集的影響化合物不同濃度下的血小板聚集率(％)NS49.00±2.65濃度(M)lxl0-5MIxi0-6MlxlCT7Mlxl0-8MAspirin48.56±1.2149.03士2.1751.26±1.05la12.67±1.53b23.33±4.93b44.67±2.08alb11.33±1.53b26.33±1.53b44.33±6.43aIc23.33±3.21b32.67±2.52b41.33士1.533IIa8.33±1.53b20.33±2.08b40.00±3.61alib15.00±4.58b28.33±1.53b49.33±2.08lie13.33±2.08b22.67±1.53b32.67±5.03bn=3:,a)與NS相比p〈0.05;b)與NS及Aspirin比pO.OOl.表3Ia-c和Ila-c對TE誘導(dǎo)的血小板聚集的影響化合物不同濃度下的血小板聚集率(％)NS54.00±6.56濃度(M)lxl0-5Mlxl(T6M1x10-7MAspirin27.38±1.64b36.19±1.28b47.15±1.52ala22.00±2.65c38.67±1.15b47.67±2.08alb12.00±2.00e21.00±1.00c34.67±1.53bIc32.67±2.08b42.67±2.08a53.67±1.53IIa15.67土2.3r27.33±1.53b31.33±1.53blib28.33±1.53b45.67±4.04a56.67±4.16lie5.67±2.08e10.00±2.00c20.00±4.58cn=3,a)與NS相比p<0.05;b)丄jNS比pO.OOl;c)與NS及Aspinn比pO.OOl.表4Ia-c和Ila-c對AA誘導(dǎo)的血小板聚集的影響化合物不同濃度下的血小板聚集率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>n=3，a)與NS相比p<0.05;b)與NS比pO.001;c)與NS及Aspirin比pO.001.試驗(yàn)例2本發(fā)明化合物抗血栓活性測定1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD雄性大鼠，體重200-260g(購自北京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部，許可證號(hào)為醫(yī)動(dòng)字第01-3056)。2)實(shí)驗(yàn)材料聚乙烯管(外徑1.6腿及1.3mm兩種)、肝素(50IU/ml)、氨基甲酸乙酯(烏拉坦)。3)測定方法與結(jié)果雄性SD大鼠(體重200g至260g)腹腔注射戊巴比妥鈉溶液進(jìn)行麻醉，分離出右頸總動(dòng)脈和左頸外靜脈，在聚乙烯管的中段放入事先稱重的6cm長的絲線，以肝素生理鹽水(50IU/kg)充滿聚乙烯管，將一端插入左頸外靜脈，用注射器將生理鹽水(3ml/kg)，阿司匹林的生理鹽水溶液(20mg/kg)，本發(fā)明實(shí)施例10-15制備的Ia、Ib、Ic、IIa、IIb或lie(0,5umol/kg)的生理鹽水溶液從另一端緩慢注入聚乙烯管中，此時(shí)管中原有的肝素已被推入左頸外靜脈中，管內(nèi)大部分為被測化合物溶液，然后將注射藥物端插入右頸總動(dòng)脈。血液從右頸總動(dòng)脈經(jīng)聚乙烯管流向左頸外靜脈，15min后中斷血流，取出絲線稱重，總重量減去絲線重量即為血栓濕重，統(tǒng)計(jì)各組的血栓濕重的均值和標(biāo)準(zhǔn)差并作t檢驗(yàn)，結(jié)果如表5。表5經(jīng)本發(fā)明的化合物治療大鼠的血栓g顯重組別血栓濕重(X士SDmg)NS25.75±2.21Aspirin7.44±1.59ala11.90±1.39alb14.25±2.07aIc14.49±2.24aIIa15.81±l44alib10.14±1.10alie13.23±2.95an=10;a)與NS比較pO.OOl;權(quán)利要求1.通式I的化合物通式I其中，AA選自Ser、Val或Phe殘基。2.通式II的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>通式II其中，AA選自Ser、Val或Phe殘基。3.權(quán)利要求1所述通式I化合物的制備方法，包括(1)按照常規(guī)方法分別制備Arg-Gly-Asp-Ser-0H、Arg-Gly-Asp-Val-0H及Arg-Gly-Asp-Phe-OH三種短肽，將三種短肽的N-端和側(cè)鏈分別用保護(hù)基保護(hù)；(2)按照常規(guī)方法制備3S-四氫異喹啉-3-羧酸，將3S-四氫異喹啉-3-羧酸芐基化得到3S-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯或3S-2-Boc-四氫異喹啉-3-羧酸；(3)按照常規(guī)方法將N-端和側(cè)鏈用保護(hù)基保護(hù)的Arg-Gly-Asp-Ser-0H、Arg-Gly-Asp-Val-0H或Arg-Gly-Asp-Phe-OH分別連接到3S-2-Boc-四氫異喹啉-3-羧酸的2-位氮上、脫去所有保護(hù)基，得到通式I化合物。4.權(quán)利要求2所述通式II化合物的制備方法，該方法包括(1)按照常規(guī)方法分別制備Arg-Gly-Asp-Ser-OH、Arg-Gly-Asp-Val-0H及Arg-Gly-Asp-Phe-OH三種短肽，將三種短肽的O端和側(cè)鏈分別用保護(hù)基保護(hù)；(2)按照常規(guī)方法制備3S-四氫異喹啉-3-羧酸，將3S-四氫異喹啉-3-羧酸芐基化得到3S-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯或3S-2-Boc-四氫異喹啉-3-羧酸；(3)按照常規(guī)方法將C-端和側(cè)鏈用保護(hù)基保護(hù)的Arg-Gly-Asp-Ser-0H、Arg-Gly-Asp-Val-OH或Arg-Gly-Asp-Phe-OH分別連接到3S-2-Boc-四氫異喹啉-3-羧酸的3-位羧基上、脫去所有保護(hù)基，得到通式II化合物。5.按照權(quán)利要求3或4的制備方法，其特征在于所述的3S-四氫異喹啉_3-羧酸由L-苯丙氨酸與甲醛縮合制備得到。6.—種治療抗血栓的藥物組合物，由有效量的權(quán)利要求1所述的通式I化合物和藥學(xué)上可接受的載體或輔料組成。7.—種治療抗血栓的藥物組合物，由有效量的權(quán)利要求2所述的通式II化合物和藥學(xué)上可接受的載體或輔料組成。8.權(quán)利要求1所述的通式I化合物在制備抗血栓藥物中的用途。9.權(quán)利要求2所述的通式II化合物在制備抗血栓藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明公開了具有抗血栓活性的通式I和通式II化合物，其制備方法以及它們作為抗血栓劑的應(yīng)用。本發(fā)明采用大鼠頸動(dòng)靜脈旁路插管血栓模型上評價(jià)了通式I和通式II化合物的抗血栓活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明通式I或通式II化合物均具有優(yōu)秀的抗血栓活性，臨床上可作為抗血栓劑應(yīng)用。文檔編號(hào)A61K38/08GK101318994SQ200710100029公開日2008年12月10日申請日期2007年6月4日優(yōu)先權(quán)日2007年6月4日發(fā)明者崔國輝,彭師奇,婧翟,明趙申請人:北京大學(xué)