專利名稱：：楊梅素的醫(yī)藥新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥提取單一成分楊梅素，經(jīng)藥理實驗證明具有新的醫(yī)藥用途。具體的說是楊梅素對黃嘌呤氧化酶具有抑制作用，可減少尿酸生成，具有預(yù)防和治療痛風(fēng)疾病的作用。屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：痛風(fēng)是一種嘌呤代謝紊亂導(dǎo)致尿酸形成的常見病，已被聯(lián)合國列為21世紀(jì)20大頑癥之一。最新的流行病學(xué)研究表明，我國痛風(fēng)發(fā)病率逐年上升，已高于世界平均水平，傳統(tǒng)的抗痛風(fēng)藥物一促尿酸排泄藥(如丙磺舒、苯溴馬隆等)常伴隨有皮疹、發(fā)熱、腎臟損害等副作用。黃嘌呤氧化酶抑制劑可以減少自由基造成的應(yīng)激反應(yīng)或?qū)M織的傷害，也可以減少人體內(nèi)尿酸的形成。研究發(fā)現(xiàn)以黃嘌呤氧化酶為作用耙點的抑制劑有很好的抗痛風(fēng)作用，是治療痛風(fēng)的重要藥物并能減少一些致命的痛風(fēng)并發(fā)癥。黃嘌呤氧化酶抑制劑作為抗痛風(fēng)藥物，主要是上世紀(jì)60年代上市的別嘌呤醇，雖然一直沿用至今但是它有很多的副作用，應(yīng)用后病人可有發(fā)熱、過敏性皮疹、腹痛、腹瀉、白細(xì)胞及血小板減少，甚至有肝功能損傷等副作用(黃嘌呤氧化酶抑制劑的研究進(jìn)展，國外醫(yī)學(xué)藥學(xué)分冊，2006，33(5)，351-353)。因此，研究新的黃嘌呤氧化酶抑制劑有十分重要的意義。我們發(fā)現(xiàn)新的黃嘌呤氧化酶抑制劑一楊梅素是從中藥蛇葡萄中提取、分離、純化而得的單一成分(專利，一種楊梅素的制備方法及醫(yī)藥新用途)，楊梅素(myricetin)是一種黃酮類化合物，已經(jīng)報道的藥理作用有抑制血小板聚集、楊梅素對膠原、花生四烯酸及PAF誘導(dǎo)的兔血小板聚集有抑制作用，具有抗PAF作用，為一新的PAF受體拮抗劑。具抗血栓、抗心肌缺血、改善微循環(huán)、降血糖、抗氧化、保肝護(hù)肝、解輕乙醇中毒、抗腫瘤、抗炎、抗突變、預(yù)防齲齒等多種藥理活性，我們檢索到專利(楊梅素在制備尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)子URAT1抑制藥物中的應(yīng)用，孔令東等)是促進(jìn)尿酸排泄的，作用靶點是尿酸排泄過程中重吸收作用的轉(zhuǎn)運(yùn)子URAT1。到目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)抑制尿酸生成、以黃嘌呤氧化酶為作用靶點的抑制劑的報道。經(jīng)過藥理實驗證明楊梅素具有很強(qiáng)的黃嘌呤氧化酶抑制作用并抑制尿酸生成從而產(chǎn)生良好的抗痛風(fēng)效果，并且長期服用沒有毒副作用，具有良好的發(fā)展前景及經(jīng)濟(jì)效益。楊梅素(myricetin)的結(jié)構(gòu)OH
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的之一就是從天然植物中發(fā)現(xiàn)一種作用較強(qiáng)(楊梅素單一成分)的抑制尿酸生成的黃嘌呤氧化酶抑制劑。已經(jīng)報道了蛇葡萄莖葉的提取物(中草藥來源的黃嘌呤氧化酶抑制劑的研究進(jìn)展，中藥材，2006，29(12)，1386-1389)具有較強(qiáng)的抑制黃嘌呤氧化酶的作用，此提取物中主要成分是以二氫楊梅素為主的混合物，沒有明確有效單體成分，根據(jù)黃嘌呤氧化酶抑制劑的構(gòu)效關(guān)系黃烷酮、二氫黃酮和黃烷醇由于缺少C2-C3之間的雙鍵而不具有抑制黃嘌呤氧化酶的活性；所以二氫楊梅素沒有此活性，主要的活性成分為楊梅素，所以我們經(jīng)過新的提取方法將二氫楊梅素轉(zhuǎn)化為楊梅素，然后進(jìn)行了深入的活性研究。發(fā)明目的之二將單一成分楊梅素制備成為療效好、毒性小，能預(yù)防和治療抗痛風(fēng)的藥物，并且提供用于臨床的制劑。本發(fā)明提供了楊梅素的藥物制劑，其中包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、注射劑、滴丸等。其特優(yōu)選含有1%—99%的楊梅素和99%_1%的藥用賦形劑或其它可組方的藥物。優(yōu)選含有30%—80%的楊梅素和70%—20%的藥用賦形劑或其它可組方的藥物，最好選用含有60%—70%的楊梅素和40%—30%的賦形劑或其它可組方的藥物。藥物中的其它配伍用的藥物，指的是以有效劑量的楊梅素為一定的藥物原料，再配伍其它己允許合用的中藥或化學(xué)藥品。其中藥用賦形劑包括填充劑、崩解劑等。所述的填充劑選自淀粉、乳糖、微晶纖維素、糊精等；所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)聚維酮；可選加黏合劑、潤濕劑和潤滑劑。楊梅素及其藥物制劑具有預(yù)防和治療痛風(fēng)等疾病的作用，其藥理作用，通過以下藥效學(xué)試驗例得到證實。1、急性毒性實驗研究選用小白鼠20只，1820g，雌雄各半。將楊梅素配制成50%濃度，口服灌胃給藥，劑量為每次2.0ml/20g，每日1次，此灌胃量為小白鼠能夠接受的最大濃度下的最大體積，連續(xù)觀察7d。結(jié)果表明，小白鼠飲食、飲水及活動等均正常，未見毒副反應(yīng)，亦無一只小白鼠死亡，重復(fù)實驗l次.獲相同結(jié)果。急毒實驗藥量相當(dāng)于臨床用量的2000倍，初步證實了該藥安全無毒。2、長期毒性實驗研究選用健康大白鼠80只，出生6周，雌雄各半，平均分為4組，每組20只。其中3組口服灌胃給予楊梅素，劑量分別為2、1、0.5g/kg，每天1次，連續(xù)3個月，另一組按上述大劑量給予相當(dāng)?shù)恼麴s水作對照，每天觀察其活動情況和行為變化等，每周稱重l次；3個月后，每組留4只大鼠(停藥1周后，再作以下鹼查)，其余全處死，取血送鹼白細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白測定和肝腎功能檢査，解剖觀察其各臟器肉眼及組織學(xué)變化。實驗結(jié)果表明，楊梅素對大白鼠活動和行為無明顯影響；對大白鼠體重、周圍血象及肝腎功能也均無明顯影響。病理組織學(xué)檢査結(jié)果表明無病理學(xué)改變。所以長時間服用未見明顯毒副應(yīng)，進(jìn)一步證實了該藥的安全無毒。3、楊梅素對小鼠血尿酸的影響取60只雄性小鼠，隨機(jī)分為6組(正常對照組，模型組，楊梅素高、中、低劑量組，別嘌醇組)，每組10只。每日均按O.lmL*10g灌胃。6d后，除正常對照組外，其他5組小鼠分別腹腔注射10%黃嘌呤0.lmL10g，30min后取血測血尿酸值。表l楊梅素對小鼠血尿酸的影響(均『10，X±S)動物數(shù)(只)劑量(mg/kg)血尿酸(pmol/L)經(jīng)方差分析兩兩比較，模型組與空白組比較aP〈0.01;楊梅素組、別嘌醇組與模型組比較楊梅素組高、中劑量、別嘌醇組+P〈0.05。模型組血尿酸含量顯著高于正常對照組，差異有顯著意義(p〈o.oD，用藥組與模型組比較血尿酸含量差異非常顯著，均低于模型組(P〈0.01或P〈0.05);與正常對照組比較也顯著降低，且有顯著差異。進(jìn)一步說明楊梅素降低血尿酸含量的機(jī)制與別嘌呤醇一樣，是減少尿酸生成。減輕其對組織的損害，從而有效控制痛風(fēng)發(fā)作。4、楊梅素對小鼠角叉菜膠性足腫脹的影響取小鼠50只，按體重分為5組，按表4所示劑量每日灌胃給藥一次，共給藥7天，末次給藥后30min，于小鼠右后足掌腱膜下注入1%角叉菜膠0.03ml/只，于致炎后6h后將小鼠頸椎脫臼處死，剪下雙側(cè)后足，分別稱重，求左、右足重量之差，即為腫脹度。結(jié)果表明:楊梅素能夠明顯抑制角叉菜膠引起的小鼠足腫脹，且高、中劑量組有顯著差異。見表2。10264±6910464士55a400187±28*200218±42*100250±4545166±38*oooooo照醇對素素素呤常型梅梅梅嘌正模楊楊楊別表2楊梅素對小鼠角叉菜膠性足腫脹的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與對照組比較*P〈0.05;***P〈0.001。5、楊梅素對二甲苯所致小鼠耳廓水腫的影響取小鼠50只，按體重分為5組，按表5所示劑量每日灌胃給藥一次，共給藥7天，末次給藥后2h，將二甲苯0.05ml滴于小鼠右耳，左耳為正常對照。4h后將小鼠頸椎脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9mm的打孔器分別在左、右耳同一部位打下圓耳片，稱重，求左、右耳片重量之差，即為腫脹度。結(jié)果表明楊梅素能夠明顯抑制二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹，且具有顯著差異。見表3。表3楊梅素對二甲苯所致小鼠耳廓水腫的影響'<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與對照組比較*P<0.05;**P<0.01;***P<0.00L6、對大鼠棉球肉芽腫的影響取大鼠50只，在乙醚淺麻醉無菌條件下，將滅菌棉球(10mg)植入各鼠腋窩皮下兩側(cè)，手術(shù)后次日，隨機(jī)分為五組，每組10只。按表2所示劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)7日，末次給藥后lh，將大鼠斷頭處死，剝離并取出棉球肉芽組織，稱重、并減去棉球重量，置生理鹽水中漂洗干凈，8(TC烤箱中烤干，稱重。結(jié)果見表4。表4楊梅素對大鼠棉球肉芽腫的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與對照組比較*P<0.05;林P〈0.01結(jié)果表明，楊梅素各給藥劑量組可明顯抑制肉芽組織的增生，使肉芽棉球重量減輕。與對照組比較，差異顯著。從以上的毒性及藥效學(xué)實驗可知，楊梅素具有治療和預(yù)防痛風(fēng)的作用，并且治療效果顯著，長期服用沒有副作用。楊梅素植物來源豐富，價格便宜，未見毒副作用，制備簡單(楊梅素的制備方法、藥物制劑及其醫(yī)藥新用途、并且可以制成口服制劑，服用方便。具體實施例方式結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述，但本發(fā)明不受實施例的任何限制。實施例1(膠囊劑)處方楊梅素150g淀粉30g羧甲基淀粉鈉20g3%羥兵甲基纖維素水溶液適量楊梅素原料、淀粉、羧甲基淀粉鈉，混合均勻，用3%羥丙甲基纖維素水溶液制粒，干燥，整粒，裝入1號膠囊，制成1000粒，即得。每粒含楊梅素150mg。每次2粒。每日2次。實施例2(片劑)處方楊梅素150g乳糖30g羧甲基淀粉鈉20g3%羥丙甲基纖維素水溶液適量滑石粉2.5g楊梅素原料、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉，混合均勻，用3%羥丙甲基纖維素水溶液制粒，干燥，整粒，加入滑石粉混勻，壓片，制成1000片，即得。每片含楊梅素150mg。每次2片。每日2次。實施例3(顆粒劑)處方楊梅素150g糖粉350g楊梅素原料、糖粉，混合均勻，用適量乙醇制粒，干燥、整粒、分裝，制成250袋，即得。每次1袋。每日2次實施例4(滴丸劑)處方楊梅素15g聚乙二醇600025g聚乙二醇400010g稱取25g聚乙二醇6000，10g聚乙二醇4000在水浴上熔化，加入楊梅素原料15g，攪拌均勻，傾入保溫管中，調(diào)節(jié)恒溫裝置，使藥液在80—90'C下滴入冷卻過的液體石蠟(12—14°C)中，滴完后，將藥丸傾入濾紙上吸干石蠟油，制成1000粒，即得。權(quán)利要求1.一種黃嘌呤氧化酶抑制劑—楊梅素在預(yù)防和治療痛風(fēng)疾病藥物中的應(yīng)用。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用其特征在于含有有效治療劑量的楊梅素和一種或多種藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑，或可與楊梅素組方的其它藥物制成的制劑。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物制劑，其特征在于優(yōu)選含有1%一99°/。的楊梅素和99%—1%的藥用賦形劑或其它可組方的藥物。優(yōu)選含有30°/。一80%的楊梅素和70%—20%的藥用賦形劑或其它可組方的藥物，最好選用含有60%—70%的楊梅素和40%—30%的賦形劑或其它可組方的藥物。4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物制劑，其特征在于所說的藥物是口服制劑的劑型。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物制劑，其特征在于所說的口服制劑選自于片劑、丸劑、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑當(dāng)中的任何一種。6、權(quán)利要求2所述的藥用賦形劑包括填充劑、崩解劑等，填充劑選自淀粉、乳糖、微晶纖維素、糊精、磷酸鈣等；崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)聚維酮；也可選加黏合劑、潤濕劑和潤滑劑。全文摘要本發(fā)明公開了楊梅素用于黃嘌呤氧化酶為作用靶點的抑制劑，可作為預(yù)防和治療抗痛風(fēng)的藥物，制備的藥物可以是楊梅素單一成分，也可以是含楊梅素的組合物；可制備片劑、膠囊劑，顆粒劑以及注射劑與混懸劑。文檔編號A61K31/352GK101278931SQ20081005074公開日2008年10月8日申請日期2008年5月27日優(yōu)先權(quán)日2008年5月27日發(fā)明者南敏倫,赫玉芳,趙全成申請人:吉林天藥現(xiàn)代中藥科技有限公司