專利名稱：：豬干擾素新劑型的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于生物藥物的制備
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種豬干擾素新劑型的制備方法。
背景技術(shù)：
：目前，豬干擾素都是以注射的途徑給藥有較好的治療效果，多者每天需要注射1一2次，給養(yǎng)殖業(yè)主的使用帶來(lái)很多不便，因此將其制成飲水、口服制劑便成為人們追求的目標(biāo)。如果在此方面有所突破，將會(huì)產(chǎn)生巨大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。但直接將這些生物藥物飲水、口服，由于胃腸道內(nèi)酶的降解消化及腸道的吸收屏障，使其利用度很低，治療效果較差。因此，提供一種豬干擾素新劑型的制備方法，有效預(yù)防和防治各種豬病毒性疾病，是該
技術(shù)領(lǐng)域：
科研人員急需開(kāi)發(fā)的新課題之一。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是為克服已有技術(shù)的不足之處，提供一種制備簡(jiǎn)單、應(yīng)用方便、效果顯著的豬干擾素新劑型的制備方法。一種豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于包括如下步驟(1)將一定量的豬干擾素溶解在水相緩沖溶液中，該溶液(A)的pH值為2.5—7.0，豬干擾素的含量為0.5_5.0毫克/毫升；(2)將上述含豬干擾素的酸性溶液(A)加入到親水親油平衡值(HLB)為9《HLB《15的液態(tài)的非離子型表面活性劑溶液中，或雙親性油酯中，或他們的混合液中；所述溶液(A)與這些表面活性劑，或雙親性油酯，或他們的混合液的比例為l:4至1:40;該兩種溶液在溫度5—30。C下進(jìn)行攪拌，使其均勻的混合在一起，成為一種透明的溶液(B);(3)將溶液(B)加入至親水親油平衡值為0《HLB《9的液態(tài)的油相中，或親油性乳化劑中，或油相與親油性乳化劑的混合液中，溶液(B)與其的比例為l:l至l:9，使這兩種溶液在溫度5—3(TC下攪拌混合，最終成為一種透明的油相制劑(C)，在4—l(TC下保存；(4)為了保持溶液的穩(wěn)定，加入一定量的穩(wěn)定劑；穩(wěn)定劑直接加入到所述制備步驟(1)溶液中，或者所述的步驟(3)中的溶液中。所述步驟(2)中的表面活性劑，或雙親性油酯，或他們的混合液采用以下一種或兩種以上混合十甘油單辛酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、吐溫80。所述的攪拌速度為100—1800轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為O.4—4小時(shí)。所述步驟(3)中的親油性溶液或乳化劑為甘油油酸酯、聚甘油-3-油酸酯、聚乙二醇-6-甘油單油酸酯。所述步驟(3)中的攪拌溫度為5—3(TC，攪拌速度為100_1800轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為0.4—4.O小時(shí)。所述穩(wěn)定劑選自海藻糖、牛血清白蛋白、豬血清白蛋白和聚乙二醇的一種或一種以上。所述穩(wěn)定劑的加入量為最終溶液的O.1%—10%。所述豬干擾素為重組豬基因工程干擾素IFN-a、IFN-e和豬天然白細(xì)胞干擾素。本發(fā)明方法的有益效果是具有制備工藝簡(jiǎn)單，容易實(shí)現(xiàn)，應(yīng)用方便，所需成本低等特點(diǎn)，該方法采用毒性小，口服安全的分散劑及油相等材料，使豬干擾素均勻的分散溶解到油相中，最終成為一種透明的豬干擾素油相制劑。采用該方法制成的油相制劑體外實(shí)驗(yàn)表明，它在不同的pH(2-11)溶液中，都能發(fā)生乳化作用，并且豬干擾素基本上仍然包裹在油中而不進(jìn)入水相。因此在飲水、口服時(shí)，能比較好的抵抗胃腸道酶的降解作用，且容易吸收，更好的發(fā)揮抗病毒藥效。具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)依據(jù)本發(fā)明提供的具體實(shí)施方式詳述如下實(shí)施例l一種豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于具體實(shí)施步驟如下(1)在8mlpH為4.5的溶液中加入32.0mg豬基因工程干擾素IFN-a，使其溶解(A溶液)；(2)取聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯40.0ml，將A溶液加入攪拌混合成48ml。攪拌速度500轉(zhuǎn)/分；時(shí)間3.0小時(shí)；溫度20°C(B溶液)；(3)取聚甘油-3-油酸酯152ml，將B溶液加入攪拌混合成200ml，攪拌速度500轉(zhuǎn)/分，時(shí)間3.0小時(shí)，溫度20°C(C溶液)；(4)在C溶液加入500mg海藻糖和500mg豬血清白蛋白；并混合均勻，存放于冰箱中冷藏。實(shí)施例2一種豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于具體實(shí)施步驟如下(1)在10mlpH二3.5的溶液中加入豬天然白細(xì)胞干擾素16.0mg，使其溶解(溶液A);(2)取吐溫8014ml，十甘油單辛酸酯26ml，混合均勻，然后將溶液A加入混合，攪拌均勻；攪拌速度1000轉(zhuǎn)/分；時(shí)間.2.5小時(shí)；溫度18°C(溶液B);(3)取甘油油酸酯150ml，將上述B溶液加入混合成200ml;攪拌速度1000轉(zhuǎn)/分；時(shí)間2.5小時(shí)；溫度18°C(C溶液)；(4)在C溶液中加入IOOmg海藻糖和200mg牛血清蛋白，混合均勻，存放于冰箱中冷藏。實(shí)施例3一種豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于具體實(shí)施步驟如下(1)在10mlpH二4的溶液中加入50.Omg豬基因工程干擾素IFN-e，200mg聚乙二醇5000，使其溶解(A溶液)；(2)取聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯80ml;將A溶液加入，混合成90ml;攪拌速度1500轉(zhuǎn)/分；時(shí)間2小時(shí)；溫度25°c(b溶液)；(3)取聚甘油3油酸酯55ml和聚乙二醇-6-甘油單油酸脂55ml，混合成110ml溶液，然后將B溶液與該混合液在下列條件下混合，攪拌速度1500轉(zhuǎn)/分；時(shí)間2小時(shí)；溫度25°C(C溶液)，存放于冰箱中冷藏，在4一10。C下保存。應(yīng)用實(shí)例l豬干擾素新劑型對(duì)豬傳染性胃腸炎的治療作用在人工致病病毒模型中治療試驗(yàn)將20頭10-20日齡的豬用人工感染豬傳染性胃腸炎病毒的方法使雛豬發(fā)生豬傳染性胃腸炎，同時(shí)隨機(jī)分成為2組，每組10頭。A組為"豬干擾素新劑型"治療組，豬干擾素新劑型是采用實(shí)施例l方法制備；B組為對(duì)照組，用生理鹽水治療。對(duì)2組豬同時(shí)用豬傳染性胃腸炎病毒染毒，每頭豬用豬傳染性胃腸炎病毒強(qiáng)毒肌肉注射0.5ml，待出現(xiàn)臨床癥狀后，給A組以飲水方式給予"豬干擾素新劑型"1.0ml/頭，每天一次，連用2-3天，B組豬注射生理鹽水1.0ml/頭，每天一次，連用2-3天，然后觀察豬的發(fā)病死亡及病理變化，并詳細(xì)記錄。人工致病治療效果染毒24h后，試驗(yàn)豬開(kāi)始出現(xiàn)臨床癥狀精神不振，呆立不動(dòng)、排稀便，飲食減少或廢絕。用藥后，A組豬從第2d病情開(kāi)始好轉(zhuǎn)，第3d有死亡豬出現(xiàn)，4d后存活的豬基本康復(fù)，B組豬在出現(xiàn)癥狀第2天后病情惡化，開(kāi)始出現(xiàn)死亡，未死亡豬第6d后自愈。豬干擾素新劑型治療組與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01)，說(shuō)明飲水方式給予"豬干擾素新劑型"對(duì)豬傳染性胃腸炎有一定的治療作用。表l兩組治療結(jié)果比較(例，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>應(yīng)用實(shí)例2豬干擾素新劑型對(duì)豬流行性腹瀉的治療作用臨床治療試驗(yàn)選典型豬流行性腹瀉發(fā)病豬，將27頭豬隨機(jī)分成3組，A組以拌料口服方式給予豬干擾素新劑型0.2ml/頭，豬干擾素新劑型是采用實(shí)施例2方法制備；B組注射黃芪多糖5mg/頭。C組口服生理鹽水。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表2"豬干擾素新劑型"治療豬流行<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>由表2可見(jiàn)，"豬干擾素新劑型"試驗(yàn)組有效率為88.9%，口服生理鹽水組的有效率為11.1%?？梢?jiàn)，以拌料口服方式給予豬干擾素新劑型對(duì)豬流行性腹瀉有很好的治療效果。實(shí)驗(yàn)證明，說(shuō)明拌料口服給予豬干擾素新劑型可控制豬流行性腹瀉病情。豬干擾素新劑型主要對(duì)治療豬病毒性疾病的預(yù)防和治療具有顯著的優(yōu)勢(shì)。研究證實(shí)豬干擾素新劑型對(duì)人工感染豬傳染性胃腸炎病毒的豬模型和豬流行性腹瀉發(fā)病豬亦有顯著治療作用?？梢?jiàn)，以飲水、口服方式給予豬干擾素新劑型是治療豬病毒性疾病的有效藥物。上述參照實(shí)施例對(duì)該豬干擾素新劑型的制備方法進(jìn)行的詳細(xì)描述，是說(shuō)明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個(gè)實(shí)施例，因此在不脫離本發(fā)明總體構(gòu)思下的變化和修改，應(yīng)屬本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。.權(quán)利要求1.一種豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于包括如下步驟(1)將一定量的豬干擾素溶解在水相緩沖溶液中，該溶液(A)的pH值為2.5-7.0，豬干擾素的含量為0.5-5.0毫克/毫升；(2)將上述含豬干擾素的酸性溶液(A)加入到親水親油平衡值(HLB)為9≤HLB≤15的液態(tài)的非離子型表面活性劑溶液中，或雙親性油酯中，或他們的混合液中；所述溶液(A)與這些表面活性劑，或雙親性油酯，或他們的混合液的比例為1∶4至1∶40；該兩種溶液在溫度5-30℃下進(jìn)行攪拌，使其均勻的混合在一起，成為一種透明的溶液(B)；(3)將溶液(B)加入至親水親油平衡值為0≤HLB≤9的液態(tài)的油相中，或親油性乳化劑中，或油相與親油性乳化劑的混合液中，溶液(B)與其的比例為1∶1至1∶9，使這兩種溶液在溫度5-30℃下攪拌混合，最終成為一種透明的油相制劑(C)，在4-10℃下保存；(4)為了保持溶液的穩(wěn)定，加入一定量的穩(wěn)定劑；穩(wěn)定劑直接加入到所述制備步驟(1)溶液中，或者所述的步驟(3)中的溶液中。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中的表面活性劑，或雙親性油酯，或他們的混合液采用以下一種或兩種以上混合聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、吐溫80、十甘油單辛酸酯。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中的親油性溶液或乳化劑為甘油油酸酯、聚甘油-3-油酸酯、聚乙二醇-6-甘油單油酸酯。4、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于所述穩(wěn)定劑選自海藻糖、牛血清白蛋白、豬血清白蛋白和聚乙二醇的一種或一種以上。5、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于所述穩(wěn)定劑的加入量為最終溶液的O.1%—10%。6、根據(jù)權(quán)利要求l所述的豬干擾素新劑型的制備方法，其特征在于所述豬干擾素為重組豬基因工程干擾素IFN-a、IFN-e和豬天然白細(xì)胞干擾素。全文摘要本發(fā)明涉及一種豬干擾素新劑型的制備方法，步驟如下(1)將豬干擾素溶解在水相緩沖溶液中，該溶液(A)的pH值為2.5-7.0，豬干擾素的含量為0.5-5.0毫克/毫升；(2)將上述含豬干擾素的酸性溶液(A)加入到親水親油平衡值為9≤HLB≤15的液態(tài)的非離子型表面活性劑溶液中，或雙親性油酯中，或他們的混合液中混合成為溶液(B)；(3)將溶液(B)加入至親水親油平衡值為0≤HLB≤9的液態(tài)的油相中，或親油性乳化劑中，或油相與親油性乳化劑的混合液中，溶液(B)與其的比例為1∶1至1∶9，使這兩種溶液在溫度5-30℃下攪拌混合，成為油相制劑(C)；(4)加入穩(wěn)定劑。其制備簡(jiǎn)單，應(yīng)用簡(jiǎn)便，易吸收，更好的發(fā)揮治療豬病毒性疾病的效果。文檔編號(hào)A61P31/00GK101297962SQ20081005336公開(kāi)日2008年11月5日申請(qǐng)日期2008年5月30日優(yōu)先權(quán)日2008年5月30日發(fā)明者古長(zhǎng)慶申請(qǐng)人:天津生機(jī)集團(tuán)股份有限公司