專利名稱：：含有巰基吡咯烷甲酰肼的培南衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及含有巰基吡咯垸甲酰肼的培南衍生物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、及其酯或鹽的水合物，這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物組合物，以及這些化合物在用于制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的用途。2
背景技術(shù)：
：碳青霉烯類抗生素是七十年代發(fā)展起來的一類P-內(nèi)酰胺類抗生素。因其抗菌譜廣，抗菌活性強，并對P-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定，而備受關(guān)注。其結(jié)構(gòu)特點是，青霉烷母核1位的硫被碳取代，2位具有雙鍵，復(fù)合了青霉素的五元環(huán)和頭孢菌素的共軛雙鍵活化P-內(nèi)酰胺環(huán)的作用；6位羥乙基側(cè)鏈為反式構(gòu)象。目前已經(jīng)上市的該類藥品有亞胺培南、美羅培南、多尼培南、比阿培南、厄他培南等。由于抗生素的濫用導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性的不斷增加，以及由于消化道吸收的局限性，目前上市的碳青霉烯類在臨床上只能作為注射劑給藥，臨床利用度不高，并且除厄他培南外半衰期都較短，已經(jīng)不能滿足臨床需要。因此，急需研究開發(fā)具有較好的抗菌活性，并且具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性和DHP-I穩(wěn)定性的長效碳青霉烯類抗生素。3
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的技術(shù)方案如下本發(fā)明提供了通式(1)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、及其酯或鹽的水合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>(1)其中，Ri代表氫原子或羧基保護基；112代表氫原子或氨基保護基；R3、114分別獨立的代表氫原子或低級垸基；RS代表被低級烷基取代或未被取代的酰胺基，或被低級烷基取代或未被取代的氨基；RS代表氫原子或低級烷基；X代表O，S，NH或CH2。優(yōu)選的化合物為其中，R3、W分別獨立的代表氫原子，甲基，乙基或丙基;W代表氫原子，甲基或乙基；X代表O，S或NH。進一步優(yōu)選的化合物為其中，R1、R2、R3、W分別獨立的代表氫原子；RS代表酰胺基，氨基，N-甲基-氨基或N，N'-二甲基-氨基；W代表氫原子或甲基；X代表O，S或NH。本發(fā)明的部分化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本發(fā)明所述"低級烷基"為Cw直鏈或支鏈的垸基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基等。本發(fā)明所述的"羧基保護基"指常規(guī)用于取代羧酸酸性質(zhì)子的保護基團。此基團的實例包括甲氧基甲基、甲硫甲基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、甲氧乙基甲基、芐氧甲基、苯甲酰甲基、烯丙基、對溴苯甲酰甲基、a-甲基苯甲酰甲基、對甲氧基苯甲酰甲基、二酰基甲基、N-鄰苯二甲酰亞氨基甲基、甲基、乙基、二苯基甲基、2,2,2-三氯乙基、2-鹵代乙基、co-氯代烷基、2-(三甲基甲硅垸基)乙基、2-甲硫基乙基、2-(對硝基苯硫基)乙基、2-(對甲苯硫基)乙基、l-甲基-l-苯乙基、叔丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、二(鄰硝基苯基)甲基、9-芴基甲基、2-(9,10-二氧代)芴基甲基、5-二苯硫基、芐基、2,4,6-三甲基芐基、對溴芐基、鄰硝基芐基、對硝基芐基、對甲氧基芐基、胡椒基、4-吡啶甲基、三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅垸基、叔丁基二甲基甲硅烷基、異丙基二甲基甲硅烷基、苯基二甲基甲硅垸基、S-叔丁基、S-苯基、S-2-吡啶基、N-羥基哌啶基、N-羥基琥珀酰亞氨基、N-羥基鄰苯二甲酰亞氨基、N-羥基苯并三(^基、0-?；?、2,4-二硝基苯硫基、2-烷基-l,3-噁唑啉、4-烷基-5-氧代-l，3-噁唑烷、5-垸基-4-氧代-1,3-二噁垸、三乙基錫垸、三正丁基錫垸；N,N'-二異丙基酰肼等。本發(fā)明所述"氨基保護基"指常規(guī)用于取代氨基酸性質(zhì)子的保護基團，此類基團的實例包括甲基、乙基、環(huán)丙甲基、l-甲基-l-環(huán)丙甲基、二異丙甲基、9-茍甲基、9-(2-硫代)芴甲基、2-呋卩南甲基、2，2,2-三氯甲基、2-鹵代甲基、2-碘乙基、2-三甲基甲硅烷基乙基、2-甲硫基乙基、2-甲磺?；一?、2-(對甲苯磺?；?乙基、2-磷鎗基乙基、1,l-二甲基-3-(N，N-二甲基甲酰氨基)丙基、1，l-二苯基-3-(N，N-二乙氨基)丙基、l-甲基-l-(金剛垸基)乙基、l-甲基-l-苯乙基、l-甲基-l-(3,5-二甲氧苯基)乙基、l-甲基-l-(4-聯(lián)苯基)乙基、l-甲基-l-(對苯偶氮基苯基)乙基、1，1-二甲基-2，2，2-三氯乙基、1,1-二甲基-2-氰乙基、異丁基、叔丁基、叔戊基、環(huán)丁基、1-甲基環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、1-甲基環(huán)己基、l-金剛烷基、異冰片基、乙烯基、烯丙基、肉桂基、苯基、2，4，6-三叔丁基苯基、間硝基苯基、S-苯基、8-喹啉基、N'-羥基哌啶基、4-(1，4-二甲基哌啶基)、4,5-二苯基-3-噁唑啉-2-酮、芐基、2,4，6-三甲基芐基，對甲氧基芐基、對甲氧基芐氧基羰基、3,5-二甲氧基芐基、對癸氧基芐基、對硝基芐基、對硝基芐氧基羰基、鄰硝基節(jié)基、3,4-二甲氧基-6-硝基芐基、對溴芐基、氯芐基、2,4-二氯芐基、對氰基芐基、鄰(N，N-二甲基甲酰氨基)芐基、間-氯-對-酰氧基芐基、對(二羥基硼垸基)芐基、對(苯偶氮基)芐基、對(對甲氧基苯偶氮基)芐基、5-苯并異噁唑基甲基、9-蒽基甲基、二苯甲基、苯基(鄰硝基苯基)甲基、二(2-吡啶基)甲基、l-甲基-l-(4-吡啶基)乙基、異煙堿基、S-芐基、N'-哌定基羰基、N，-對甲苯磺酰基氨基羰基及N，-苯氨基硫代羰基的氨基甲酸酯；甲?；?、乙?；?、乙酰基-吡啶鎗、(N，-二硫代芐氧羰基氨基)乙?；?-苯基丙?；?-(對羥苯基)丙?；?-(鄰硝基苯基)丙?；?-甲基-2-(鄰硝基苯氧萄丙?；?-甲基-2-(鄰苯偶氮基苯氧基)丙?；?-氯代丁?；?、異丁酰基、鄰硝基肉桂酰基、吡啶甲?；?、N'-乙酰甲硫氨?；?、N'-苯甲酰基-苯基烷基、苯甲?；?、對苯基苯甲?；?、對甲氧基苯甲酰基、鄰硝基苯甲酰基、鄰(苯甲酰氧基甲基)苯甲?；蛯?P-苯甲?；孽０?；鄰苯二甲?；?、2,3-二苯基馬來酰基和二硫代琥珀?；沫h(huán)亞酰胺；叔丁氧基羰基、烯丙氧基羰基、苯甲酰甲基、3-乙酰氧基丙基、4-硝基-l-環(huán)己基-2-氧代-3-吡咯烷-3-基、季銨鹽、甲氧基甲基、2-氯乙氧基甲基、芐氧基甲基、新戊?；谆?、[l-(烷氧羰基氨基)]-2,2,2，三氟乙基、[l-三氟甲基-l-(對氯苯氧基甲氧基)2,2,2,-三氟]乙基、2-四氫吡喃基、2,4-二硝基苯基、芐基、3,4-二甲氧基芐基、鄰硝基芐基、二(對甲氧苯基)甲基、三苯甲基、(對甲氧苯基)二苯基甲基、二苯基-4-吡啶基甲基、2-吡啶甲基-N'-氧化物、5-二苯丙環(huán)庚垸基、N，，N，-二甲氨基亞甲基、N，-異亞丙基、亞芐基、對甲氧基亞芐基、對硝基亞芐基、亞水楊基、5-氯亞水楊基、二苯亞甲基、(5-氯-2-羥苯基)苯基亞甲基、(酰基乙烯基)、5,6-二甲基-3-氧代-l-環(huán)己烯基、硼垸、[苯基(五羰基鉻或鎢)]羰基、銅或鋅螯合物、硝基、亞硝基、氧化物、二苯基膦基、二甲硫基氧膦基、二苯硫基氧膦基、二乙基磷酰基、二芐基磷?；?、二苯基磷?；?、磷酰基、三甲基甲硅烷基、苯硫基、鄰硝基苯硫基、2，4-二硝基苯硫基、2_硝基_4_甲氧基苯硫基、三苯甲硫基、苯磺?；?、對甲氧基苯磺酰基、2,4,6-三甲基苯磺?；⒓谆酋；⒈郊谆酋；?、對甲苯甲磺?；?、三氟甲基磺酰基、苯甲酰甲基磺酰基、重氮基等。更進一步優(yōu)選的化合物如下(4R，5S,6S)-3-[(2S,4S)-2-甲酰[(2-氨基-2-氧代乙?；?肼基]-吡咯垸-4-基]硫基-6-[(lR)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧4-氮雜雙環(huán)[3,2，0]庚-2-烯-2-羧酸，簡稱化合物l，結(jié)構(gòu)式如下(4R,5S,6S)-3-[(2S，4S)-2-甲酰[(4-甲基-硫脲-l-基)氨基]-吡咯烷-4-基]硫基-6-[(lR)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3，2,0]庚-2-烯-2-羧酸，簡稱化合物2，結(jié)構(gòu)式如下(411,58,68)-3-[(28,48)-2-甲酰(胍-1-基)氨基-吡咯垸-4-基]硫基-6-[(111)-1-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3，2,0諫-2-烯-2-羧酸，簡稱化合物3，結(jié)構(gòu)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>本發(fā)明還提供了上述化合物的制備方法，反應(yīng)方程式如下0<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>原料l原料2二異丙基乙胺H3C"^t、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>原料3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(III)反應(yīng)步驟步驟1化合物(I)的制備在干燥的反應(yīng)瓶中加入原料1，無水四氫呋喃,在氮氣保護下，于室溫加入1,1-羰基二咪唑(即CDI)反應(yīng)，低溫加入原料2的四氫呋喃溶液，繼續(xù)反應(yīng)，然后滴加鹽酸，以乙酸乙酯提取，有機相依次用水、飽和氯化鈉溶液洗滌，減壓濃縮，殘余物加入鹽酸，攪拌，以稀堿溶液調(diào)節(jié)至堿性，析出固體，固體重結(jié)晶，得化合物(I)。步驟2化合物(II)的制備于干燥反應(yīng)瓶中，加入原料3的乙腈溶液，冷卻，加入二異丙基乙胺和化合物(I)的乙腈溶液，低溫攪拌，反應(yīng)完畢后，加乙酸乙酯稀釋，依次用水、飽和鹽水洗，有機層干燥、濃縮，得化合物(II)。步驟3化合物(m)的制備將化合物(n)溶入二氯甲烷中，加入苯甲醚和硝基甲垸，低溫滴加三氯化鋁的硝基甲烷溶液，攪拌，加入水，析出固體，過濾，將濾餅溶于THF和水的混合液中，加入鈀-炭，室溫氫壓下攪拌反應(yīng)，濾除鈀炭，濾液中加入THF，分層，收集水層，再向THF中加入氯化鎂水溶液，靜置，分出水層，重復(fù)操作。水相合并，慢慢滴入甲醇，攪拌，過濾，濾餅重結(jié)晶，得化合物(III)。以上反應(yīng)方程式中的R3、R4、R5、R6、X代表的基團如前文所述，化合物(III)上的羧基可以被羧基保護基保護，氮原子上的氫原子可以被氨基保護基保護。本發(fā)明上述任一化合物藥學(xué)上可接受的鹽為有機酸鹽、無機酸鹽、有機堿鹽或無機堿鹽，其中有機酸包括乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、馬來酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸、富馬酸；無機酸包括鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸；有機堿包括葡甲胺、氨基葡萄糖；無機堿包括鈉、鉀、鋇、鈣、鎂、鋅、鋰的堿性化合物。本發(fā)明要求保護的化合物易于水解的酯是其羧基以易于水解的酯基形式存在的化合物。這些酯可以是常規(guī)的，例如低級鏈烷酰氧烷基酯，乙酸基甲基酯、新戊酰氧甲基酯、1-乙酸基乙基酯、l-新戊酰氧乙基酯；低級烷氧羰基氧垸基酯，甲氧羰基氧甲基酯、1-乙氧羰基氧乙基酯、l-異丙氧羰基氧乙基酯；內(nèi)酯基酯，苯并呋喃酮基酯、硫代苯并呋喃酮基酯；低級烷氧基甲基酯，甲氧基甲基酯；低級鏈烷?；被谆?，乙酰氨基甲基酯。也可以使用其他的酯例如芐基酯和氰基甲基酯。這些酯的其他實例如下(2,2-二甲基-1-氧丙氧萄甲基酯；(lRS)-l-乙酰氧基乙酯；2-[(2-甲基丙氧基)羰基]-2-戊烯基酯；l-[[(l-甲基乙氧基)羰基]氧]乙基酯；l-(乙酸萄乙基酯；(5-甲基-2-氧代-l,3-間二氧雜環(huán)戊烯-4-基)甲基酯；l-[[(環(huán)己氧基)羰基]氧]乙基酯；3，3-二甲基-2-氧代丁基酯。對于本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員來說顯而易見的是，本發(fā)明化合物的易于水解的酯可以在該化合物的游離羧基處形成。本發(fā)明所述異構(gòu)體是指其所有差向立體異構(gòu)，非對映異構(gòu)及互變異構(gòu)形式。當(dāng)一個鍵用一個楔表示時，這表明在三維上該鍵將從紙面出來，而當(dāng)一個鍵是陰影時，這表明在三維上該鍵將返入紙面中。式(1)化合物具有許多立體中心，如在4-位、5-位上、6-位上等。通式(1)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體可以是水合物形式。水合作用可以在制備過程中完成或者可以利用原始無水產(chǎn)物的吸濕性逐漸進行。本發(fā)明進一步要求保護包括上面所述的任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、或其酯或鹽的水合物與其它藥用活性成分的藥物組合物，如西司他丁及其鈉鹽、倍他米隆等。本發(fā)明進一步要求保護包括上面所述的任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、或其酯或鹽的水合物與一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物，為臨床上或藥學(xué)上可接受的任一劑型，優(yōu)選為口服制劑或注射劑。其中含有生理有效量的通式(1)所示的化合物0.05g5g，可以為0.05g、O.lg、0.125g、0.2g、0.25g、0.3g、0.4g、0.5g、0.6g、0.75g、lg、1.25g、1.5g、1.75g、2g、2.5g、3g、4g、5g等。本發(fā)明任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、或其酯或鹽的水合物，可以口服或腸胃外給藥等方式施用于需要這種治療的患者。用于腸胃外給藥時，可制成注射劑。注射劑系指藥物制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳液或混懸液及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無菌制劑，注射劑可分為注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。注射液系指藥物制成的供注射入體內(nèi)用的無菌溶液型注射液、乳液型注射液或混懸型注射液，可用于肌內(nèi)注射、靜脈注射、靜脈滴注等；其規(guī)格有l(wèi)ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、lOOml、200ml、250ml、500ml等，其中供靜脈滴注用的大體積(一般不小于100ml)注射液也稱靜脈輸液。注射用無菌粉末系指藥物制成的供臨用前用適宜的無菌溶液配制成澄清溶液或均勻混懸液的無菌粉末或無菌塊狀物，可用適宜的注射用溶劑配制后注射，也可用靜脈輸液配制后靜脈滴注；無菌粉末用溶媒結(jié)晶法、噴霧干燥法或冷凍干燥法等制得。注射用濃溶液系指藥物制成的供臨用前稀釋供靜脈滴注用的無菌濃溶液。制成注射劑時，可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，可選用水性溶劑或非水性溶劑。最常用的水性溶劑為注射用水，也可用0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液；常用的非水性溶劑為植物油，主要為供注射用大豆油，其他還有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射劑時，可以不加入附加劑，也可根據(jù)藥物的性質(zhì)加入適宜的附加劑，如滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑、增溶劑、填充劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、助懸劑等。常用的滲透壓調(diào)節(jié)劑包括氯化鈉、葡萄糖、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、山梨醇等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖；常用的pH值調(diào)節(jié)劑包括醋酸-醋酸鈉、乳酸、枸櫞酸-枸櫞酸鈉、碳酸氫鈉-碳酸鈉等；常用的增溶劑包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充劑包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等；常用抑菌劑為苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射劑常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。用于口服時，可制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可制成口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑，以口服普通片為主，另有含片、舌下片、口腔貼片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡騰片、緩釋片、控釋片與腸溶片等。膠囊劑系指藥物或加有輔料充填于空心膠囊或密封于軟質(zhì)囊材中的固體制劑，依據(jù)其溶解與釋放特性，可分為硬膠囊(通稱為膠囊)、軟膠囊(膠丸)、緩釋膠囊、控釋膠囊和腸溶膠囊等。丸劑系指藥物與適宜的輔料均勻混合，以適當(dāng)方法制成的球狀或類球狀固體制劑，包括滴丸、糖丸、小丸等。顆粒劑系指藥物與適宜的輔料制成具有一定粒度的干燥顆粒狀制劑，可分為可溶顆粒(通稱為顆粒)、混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒和控釋顆粒等?？诜芤簞┫抵杆幬锶芙庥谶m宜溶劑中制成供口服的澄清液體制劑?？诜鞈覄┫抵鸽y溶性固體藥物，分散在液體介質(zhì)中，制成供口服的混懸液體制劑，也包括干混懸劑或濃混懸液。糖漿劑系指含有藥物的濃蔗糖水溶液。制成口服制劑時，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等。常用填充劑包括淀粉、糖粉、磷酸鈣、硫酸鈣二水物、糊精、微晶纖維素、乳糖、預(yù)膠化淀粉、甘露醇等；常用粘合劑包括羧甲基纖維素鈉、PVP-K30、羥丙基纖維素、淀粉漿、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙甲纖維素、膠化淀粉等；常用崩解劑包括干淀粉、交聯(lián)聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等；常用潤滑劑包括硬脂酸鎂、滑石粉、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠等。通常碳青霉烯類對溫血動物來說是無毒的，而這個通則也適用于本發(fā)明化合物。將本發(fā)明優(yōu)選化合物以能預(yù)防細(xì)菌感染所需要的過量劑量對小鼠給藥，未觀察到由本發(fā)明化合物所引起的明顯的中毒病兆或副作用。本發(fā)明還提供了本發(fā)明含有巰基吡咯烷甲酰肼的培南衍生物在制備用于治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的用途。本發(fā)明培南衍生物對革蘭氏陽性和陰性菌、需氧和厭氧菌以及醫(yī)院臨床病原菌均有較好的抗菌活性，可用于治療和/或預(yù)防由病原微生物引起的各種疾病，如呼吸道感染和泌尿道感染。本發(fā)明含有巰基吡咯垸甲酰肼的培南衍生物與最接近的現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(1)本發(fā)明化合物具有優(yōu)良的抗菌活性并且顯示低毒性，能被安全的用于治療和/或預(yù)防各種哺乳動物(包括人類)由敏感菌所引起的各種疾??；(2)本發(fā)明化合物抗菌譜廣，對革蘭氏陽性和陰性菌、需氧和厭氧菌以及醫(yī)院臨床病原菌均有較好的抗菌活性；(3)本發(fā)明化合物對P-內(nèi)酰胺酶和DHP-I具有高度穩(wěn)定性，可用于p-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生菌，并且不需要與其它藥物合用；(4)本發(fā)明化合物制備工藝簡單，藥品純度高、收率高、質(zhì)量穩(wěn)定，易于進行大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。以下通過體外抗菌實驗進一步闡述本發(fā)明含有巰基吡咯垸甲酰肼的培南衍生物的有益效果，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明的培南類抗菌素僅具有下列有益效果。實驗例本發(fā)明化合物的體外抗菌活性供試菌種以下均為臨床分離菌株，購于公眾機構(gòu)。革蘭陽性菌甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)20株、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)15株、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌(MSSE)17株、耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)10株、青霉素敏感肺炎鏈球菌(PSSP)20株、青霉素耐藥肺炎鏈球菌(PRSP)18株、化膿鏈球菌23株、糞腸球菌10株；革蘭陰性菌流感嗜血桿菌12株、大腸埃希菌22株、肺炎克雷伯氏桿菌18株、奇異變形桿菌15株、陰溝腸桿菌12株、銅綠假單胞菌15株；革蘭陰性厭氧菌脆弱擬桿菌8株。供試品本發(fā)明優(yōu)選化合物l-3，自制，其化學(xué)名稱和結(jié)構(gòu)式如前文所述；亞胺培南、美羅培南市購。實驗方法瓊脂稀釋法，參考《藥理試驗方法學(xué)》P1659-1660，人民衛(wèi)生出版社，主編徐叔云等，版次1982年8月第1版2002年1月第3版第5次印刷。實驗結(jié)果和結(jié)論表1本發(fā)明化合物對臨床分離革蘭陽性菌的抗菌活性<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由表1實驗結(jié)果可見，與亞胺培南和美羅培南相比，本發(fā)明化合物1-3對臨床分離的供試革蘭陽性菌均有很好的抗菌活性。_表2本發(fā)明化合物對臨床分離革蘭陰性菌的抗菌活性<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由表2實驗結(jié)果可見，與亞胺培南和美羅培南相比，本發(fā)明化合物1-3對臨床分離的供試革蘭陰性菌，包括革蘭陰性厭氧菌具有很好的抗菌活性。上述實驗結(jié)果表明，本發(fā)明化合物對革蘭陽性菌、陰性菌及其耐藥菌和厭氧菌均具有強效抗菌作用，同最接近的現(xiàn)有技術(shù)相比，抗菌活性相當(dāng)或更好，且抗菌譜廣，具有很好的臨床應(yīng)用潛力。具體實施例方式以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實施例中各劑型的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。實施例1GS,4S)-4-巰基-2-甲酰ff2-氨基-2-氧代乙?；?肼基l-l-f叔丁氧羰基)妣咯烷的制備在干燥的反應(yīng)瓶中加入(2S,4S)-4-乙酰硫基-2-羧基-l-(叔丁氧羰基)吡咯烷8.7g(30mmo1)，無水四氫呋喃100ml，在氮氣保護下，于室溫加入1，l-羰基二咪唑6.5g(40mmo1)，反應(yīng)0.5h，在0'C以下加入4.1g(40mmol)2-氨基-2-氧代乙?；碌乃臍溥秽芤?00ml，繼續(xù)反應(yīng)0.5h，然后滴加lmol/L鹽酸40ml，以乙酸乙酯(50mlX2)提取，有機相依次用水、飽和氯化鈉溶液洗滌，減壓濃縮，殘余物加入3mol/L的鹽酸100ml，攪拌2h，以稀堿溶液調(diào)節(jié)至堿性，析出固體，固體重結(jié)晶，得固體6.1g，收率61.2%。實施例2OS,4S)-4-巰基-2-甲酰ff4-甲基-硫脲-l-基)氨基卜:U叔丁氧羰基)吡咯烷的制備具體制備方法參考實施例l。投(2S,4S)-4-乙酰硫基-2-羧基-l-(叔丁氧羰基)吡咯烷8.7g(30mmo1)，4-甲基氨基硫脲4.2g(40mmo1)。得產(chǎn)物6.3g，收率63.2%。實施例3f2S,4S)-4-巰基-2-甲酰f胍-l-基)氨基-l-淑丁氧羰基)吡咯烷的制備具體制備方法參考實施例1。投(2S,4S)-4-乙酰硫基-2-羧基-l-(叔丁氧羰基)吡咯烷8.7g(30mmo1)，氨基胍3.0g(40mmo1)。得產(chǎn)物5.9g，收率65.1%。實施例4"R,5S,6S)-3-(2S,4S)-2-甲酰K2-氨基-2-氧代乙酰基)肼基卜l-f叔丁氧羰基)吡咯烷-4-基l硫基-6-flR)-l-羥乙基l-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)3,2,01庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐酯的制備于干燥反應(yīng)瓶中，加入(4R，5S,6S)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(lR)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐酯11.9g(20mmo1)的乙腈溶液120ml，冷至-l(TC以下，加入二異丙基乙胺5ml和(2S,4S)-4-巰基-2-甲酰[(2-氨基-2-氧代乙?；?肼基]-l-(叔丁氧羰基)口比咯垸7g(21mmo1)的乙腈溶液80ml，(TC攪拌15h，反應(yīng)完畢后，加乙酸乙酯300ml稀釋，依次用水、飽和鹽水洗，有機層干燥、濃縮，得固體9.6g，收率71.1%。實施例5(4R,5S,6S)-3-(2S，4S)-2-甲酰f4-甲基-硫脲-l-基)氨基l-:U叔丁氧羰基)吡咯烷-4-基硫基-6-(1議、-1-籽乙基卜4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)3,2,0凍-2-烯-2-羧酸對硝基芐酯的制備具體制備方法參考實施例4。投(411,53，63)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(111)-1-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3,2,0]庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐酯11.9g(20mmo1)，(28,48)-4-巰基-2-甲酰[(4-甲基-硫脲-l-基)氨基]-l-(叔丁氧羰基)吡咯烷7.0g(21mmo1)。得產(chǎn)物9.5g，收率69.7%。實施例6(4R,5S,6S)-3-(2S,4S)-2-甲酰(胍-l-基)氨基-l-(叔丁氧羰基)吡咯烷-4-基l硫基-6-〖(110-1-羥乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)〖3,2,01庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐酯的制備具體制備方法參考實施例4。投(411,53，68)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(111)-1-羥乙萄-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐酯11.9g(20mmo1)，(23,48)-4-巰基-2-甲酰(胍-1-基)氨基-l-(叔丁氧羰基)吡咯烷6.4g(21mmo1)。得產(chǎn)物9.2g，收率70.9%。實施例7(4R,5S,6S)-3-『(2S,4S)-2-甲酰K2-氨基-2-氧代乙?；?肼基l-吡咯烷-4-基1硫基-6-^11^)-1-羥乙基卜4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)13,2,01庚-2-烯-2-羧酸的制備將(4R,5S，6S)-3-[(2S,4S)-2-甲酰[(2-氨基-2-氧代乙?；?肼基]-l-(叔丁氧羰基)卩比咯烷-4-基]硫基-6-[(lR)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)[3,2,0]庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐酯6.8g(lOmmol)溶入50ml二氯甲烷中，加入苯甲醚10ml和硝基甲烷20ml，于-5(TC下滴加lmol/L三氯化鋁的硝基甲烷溶液100ml，-40°0攪拌211，加入水200ml，析出固體，過濾，將濾餅溶于400mlTHF和水30ml的混合液中，加入10%鈀-炭2g，室溫5MPa氫壓下攪拌反應(yīng)2h，濾除鈀炭，濾液中加入THF150ml，分層，收集水層，再向THF中加入5。/。氯化鎂水溶液20ml，靜置，分出水層，重復(fù)操作1次，水相合并，0'C慢慢滴入甲醇30ml，-l(TC攪拌lh，過濾，濾餅重結(jié)晶，得目標(biāo)產(chǎn)物1.9g,收率42.6°/。。分子式C17H23N507S分子量441.46元素分析實測值C，46.12%;H，5.43%;N，15.67%;S，7.12%理論值C，46.25%;H，5.25%;N，15.86%;S,7.26%實施例8(4R,5S,6S)-3-『f2S，4S)-2-甲酰f(4-甲基-硫脲-l-基)氨基l-吡咯烷-4-基l硫基-6-^1!0-1-羥乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)13,2,01庚-2-烯-2-羧酸的制備具體制備方法參考實施例7。投(4R，5S，6S)-3-[(2S，4S)-2-甲酰[(4-甲基-硫脲-1-基)氨萄-l-(叔丁氧羰基)吡咯烷斗萄硫基-6-[(IR)-l-羥乙基M-甲基-"7-氧-l-氮雜雙環(huán)[H0]庚冬烯-2-羧酸對硝基芐酯6.8§(lOmmol)。得目標(biāo)產(chǎn)物1.8g，收率40.2%。分子式C17H25N505S2分子量443.54元素分析實測值C，45.92%;H,5.79%;N，15.65%;S，14.32%理論值C，46.03%;H,5.68%;N，15.79%;S,14.46%實施例9f4R,5S，6S)-3-OS,4S)-2-甲酰(胍-l-基、氨基-吡咯烷-4-基l硫基-6-f(lR)-l-羥乙基l-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)B,2,01庚-2-烯-2-羧酸的制備具體制備方法參考實施例7。投(4R,5S，6S)-3-[(2S,4S)-2-甲酰(胍-l-基)氨基-l-(叔丁氧羰基)吡咯烷-4-萄硫基-6-[(lR)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐酯6.5g(lOmmol)。得目標(biāo)產(chǎn)物1.9g，收率45.3%。分子式C16H24N605S分子量412.46元素分析實測值C，46.44%;H,5.98%;N，20.22%;S，7.65%理論值C,46.59%;H，5.86%;N,20.38%;S，7.77%1、處方:處方h處方2:處方3:處方4:化合物1-3或其衍生物中的任意-一種250g(以化合物計)共制備1000支化合物1-3或其衍生物中的任意-一種500g(以化合物計)共制備1000支化合物1-3或其衍生物中的任意-一種1000g(以化合物計)共制備1000支化合物1-3或其衍生物中的任意-一種2000g(以化合物計)共制備1000支2、制備工藝(1)將制備所用的抗生素玻璃瓶、膠塞等進行無菌處理；(2)按處方稱取原料(折算后投料)，將無菌粉末置于分裝機中分裝，隨時檢測裝量;(3)加塞，壓蓋，成品全檢，包裝入庫。實施例ll本發(fā)明化合物片劑的制備1、處方處方l:化合物1-3或其衍生物中的任意一種預(yù)膠化淀粉低取代羥丙基纖維素微晶纖維素2%HPMC水溶液微粉硅膠硬脂酸鎂羧甲淀粉鈉250g(以化合物計)50g40g40g4.0g4.0g2.0g處方2:共制備化合物1-3或其衍生物中的任意一種預(yù)膠化淀粉低取代羥丙基纖維素微晶纖維素2%HPMC水溶液微粉硅膠硬脂酸鎂羧甲淀粉鈉1000片125g(以化合物計)50g40g40g適量4.0g4.0g2.0g共制備1000片2、制備工藝(1)將原料粉碎過IOO目篩，其余輔料分別過IOO目篩，備用；(2)按照處方量稱取原料和輔料；(3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用；(4)將化合物l-3或其衍生物中的任意一種、預(yù)膠化淀粉、低取代羥丙基纖維素、微晶纖維素混合均勻，加入2n/。HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；(5)過20目篩制顆粒；(6)顆粒在60"C的條件下烘干；(7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂、微粉硅膠和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻；(8)取樣，半成品化驗；(9)按照化驗確定的片重壓片；(10)成品全檢，包裝入庫。1權(quán)利要求1.通式(1)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、及其酯或鹽的水合物其中，R1代表氫原子或羧基保護基；R2代表氫原子或氨基保護基；R3、R4分別獨立的代表氫原子或低級烷基；R5代表被低級烷基取代或未被取代的酰胺基，或被低級烷基取代或未被取代的氨基；R6代表氫原子或低級烷基；X代表O，S，NH或CH2。2、如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、及其酯或鹽的水合物其中，R3、W分別獨立的代表氫原子，甲基，乙基或丙基；W代表氫原子，甲基或乙基；X代表O,S或NH。3、如權(quán)利要求2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、及其酯或鹽的水合物其中，R1、R2、R3、114分別獨立的代表氫原子；RS代表酰胺基，氨基，N-甲基-氨基或N，N'-二甲基-氨基；W代表氫原子或甲基；X代表O，S或NH。4、如權(quán)利要求3所述的化合物，選自(4R，5S，6S)-3-[(2S,4S)-2-甲酰[(2-氨基-2-氧代乙酰基)肼基]-吡咯垸-4-基]硫基-6-[(lR)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3,2，0]庚-2-烯-2-羧酸，(4R，5S,6S)-3-[(2S，4S)-2-甲酰[(4-甲基-硫脲-l-基)氨基]-吡咯烷-4-基]硫基-6-[(lR)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3,2,0]庚-2-烯-2-羧酸，或(411,58,68)-3-[(28,48)-2-甲酰(胍-1-基)氨基-吡咯烷-4-基]硫基-6-[(111)-1-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸，及其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、其酯或鹽的水合物。5、權(quán)利要求14任一項所述的化合物，其藥學(xué)上可接受的鹽為有機酸鹽、無機酸鹽、有機堿鹽或無機堿鹽。6、權(quán)利要求14任一項所述的化合物，其易水解的酯為可在生物體內(nèi)水解成相應(yīng)羧酸的酯，包括低級鏈烷酰氧烷基酯，低級垸氧羰基氧烷基酯，內(nèi)酯基酯，低級烷氧基甲基酯，低級鏈烷?；被谆?，芐基酯，氰基甲基酯。7、包括權(quán)利要求14任一項所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、或其酯或鹽的水合物與一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物。8、如權(quán)利要求7所述的藥物組合物為藥學(xué)上可接受的任一劑型。9、如權(quán)利要求7所述的藥物組合物含有權(quán)利要求14任一項所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、或其酯或鹽的水合物0.05g5g作為必需的活性成分。10、權(quán)利要求14任一項所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物、或其酯或鹽的水合物在用于制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
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，具體涉及通式(1)所示的含有巰基吡咯烷甲酰肼的培南衍生物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體、其水合物，及其酯或鹽的水合物其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、X如說明書中所定義；本發(fā)明還涉及這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物組合物，以及這些化合物在制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的應(yīng)用。文檔編號A61P31/04GK101367809SQ20081012934公開日2009年2月18日申請日期2008年6月28日優(yōu)先權(quán)日2007年6月28日發(fā)明者黃振華申請人:山東軒竹醫(yī)藥科技有限公司