專利名稱：：包含用于治療肥胖癥的菜薊與菜豆提取物的制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及包含菜薊(Q;"flmSo/j;/m^)提取物(優(yōu)選具有高含量的咖啡鞣酸)和菜豆(尸/i肪/附v"/gflA)提取物的制劑，其比例為1:0.25到1:1。該組合物用于降低肥胖，因?yàn)樗档湍懝檀?、甘油三酯、血糖和食欲?br>背景技術(shù)：
：肥胖癥是當(dāng)前的重要健康問(wèn)題之一，特別是在工業(yè)化國(guó)家中，它具有在心循環(huán)方面和骨骼方面的嚴(yán)重后果。碳水化合物是熱量的重要來(lái)源，并且促進(jìn)易患肥胖癥和II型糖尿病的個(gè)體中的脂肪合成。由于高血糖導(dǎo)致能量?jī)?chǔ)存增加，所以能降低生物可利用的葡萄糖的物質(zhì)的可用性非常重要。因?yàn)榈矸凼瞧咸烟堑闹饕獊?lái)源，所以對(duì)從植物原料中獲得的或者合成的特異性的a-葡萄糖苷酶和a-淀粉酶抑制劑進(jìn)行了研究。長(zhǎng)期以來(lái)，人們已經(jīng)知道某些種子和果肉(pulses)含有這樣的物質(zhì)，其在沒(méi)有完全煮熟前就食用，可能會(huì)產(chǎn)生不良作用。許多果肉含有蛋白酶抑制劑、淀粉酶抑制劑和通過(guò)降低食欲而阻止食用者繼續(xù)食用它們的物質(zhì)。這些物質(zhì)被稱為植物;^集素，在高劑量下能引起胰腺增生，但是在較低劑量下可以用于控制食欲。在高劑量下，這些植物凝集素避開(kāi)了腸的轉(zhuǎn)運(yùn)并結(jié)合腸上皮細(xì)胞，在此它們引起膽嚢收縮素的分泌，膽嚢收縮素是一種刺激胰腺分泌并繼而造成其擴(kuò)張的促激素。膽嚢收縮素也具有有利的作用，因?yàn)樗赏ㄟ^(guò)降低胃運(yùn)動(dòng)而減少食欲。從文獻(xiàn)中已知，菜薊的7JC提取物或含水的醇提取物具有降低血膽固醇、促進(jìn)膽汁分泌和抗消化不良的活性。這種降低血膽固醇的活性已被報(bào)道了多年，其與兩類物質(zhì)有關(guān)菜薊素，一種二咖啡?？鼘幩幔缓脱苌运牧u3黃酮的黃酮類化合物，其已被證實(shí)在體外抑制肝的膽固醇合成。部分活性與菜薊提取物特異性的促膽汁分泌的作用有關(guān)。菜薊的提取方法在wo2007/006391中進(jìn)行了描述。發(fā)明描述現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，將菜薊提取物和菜豆提取物組合，可獲得令人驚訝的減輕體重的效果，該效果與所施用的劑量成比例；在大鼠中的數(shù)據(jù)表明體重減輕的效果不是簡(jiǎn)單地與降低血糖水平有關(guān)，而且與食物消耗的明確降低有關(guān)。各種藥理學(xué)的實(shí)驗(yàn)證明即使不限制食物的攝入，這種食物攝取的降低也與簡(jiǎn)單的毒性效應(yīng)無(wú)關(guān)，而是與改變進(jìn)食欲望有關(guān)。朝鮮薊提取物(其通過(guò)改變腸與肝臟內(nèi)的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)來(lái)幫助加強(qiáng)脂肪和葡萄糖的清除)和降低淀粉代謝的物質(zhì)的組合，在維持體重和阻止體重增加中特別重要。發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明的可利用的提取物是商品化的朝鮮薊提取物、根據(jù)WO2007/006391的提取物、或是具有高含量的咖啡鞣酸和四羥黃酮糖苷的朝鮮薊提取物，所述的最后一種提取物是從未干燥的可食用的花頭(heads)中用Cl-C3醇或其與水的混合物進(jìn)行提取而得到的。從未干燥的可食用的菜薊花頭中進(jìn)行的提取優(yōu)選使用乙醇或乙醇/水混合物，尤其是使用7:3v/v比例的乙醇/7jC。在純化后，獲得的提取物由于其高含量的咖啡鞣酸和以四羥黃酮糖苷表示的黃酮類而不同于已知的提取物。該提取物也具有降血糖的活性。該提取物可以從多種菜薊品種，優(yōu)選刺狀變種(spinyvariety),甚至更優(yōu)選撒丁刺狀變種(Sardinianspinyvariety)中制備。優(yōu)選的菜薊提取物含有的咖啡鞣酸量為30-60%,優(yōu)選約45%，并且以四羥黃酮糖苷表示的黃酮類的含量為2-5%，優(yōu)選約2.5%。菜豆提取物可使用商品化的提取物；但是,優(yōu)選在PCT/EP2006/012012中所述的菜豆提取物。所述提取物是從菜豆(iV^^o/船w.)中用乙醇和水的混合物提取獲得的，其特征在于a-淀粉酶抑制劑含量為1200-1600USP/mg(HPLC滴度為7-14。/。w/w)和植物凝集素含量為12，000-30，000HAU/g。所述提取物可以通過(guò)以下方法獲得，該方法包括a)用pH值3-6.5的水性緩沖液提取菜豆，隨后從生物量中分離提取物，其可以用緩沖液進(jìn)一步提取，直到a-淀粉酶和植物凝集素抑制劑提取完為止；b)將合并的提取物過(guò)濾或離心，濃縮至對(duì)應(yīng)于離心后的最初提取物生物量的重量約10%的體積；c)將濃縮的7jc提物用稀乙醇進(jìn)行示差沉淀，至終濃度為60-70%v/v;d)分離沉淀物，從去礦質(zhì)水中用60%乙醇再沉淀或者用攔截10，000Da的膜進(jìn)行滲濾，并且將沉淀殘余物干燥。比例為1:0.25到1:1的兩種提取物的組合，包括每劑量為50-500mg、優(yōu)選200mg的菜薊提取物以及每劑量為50-200mg、優(yōu)選100mg的菜豆提取物，在飯前服用或在食用富含碳水化合物的食物時(shí)服用。本發(fā)明組合物的降血糖活性令人驚訝地優(yōu)于兩種成分各自單獨(dú)的降血糖活性。按照TormoMA等人，Br.J.Nutr.96，539，2006敘述的方法所得到的結(jié)果，顯示在下表中。表畫純化的菜薊提取物、菜豆提取物以及它們的組合對(duì)以每日1小時(shí)限制進(jìn)食的方式給予限制量的食物的Wistar大鼠血糖的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>每組動(dòng)物數(shù)8*p<0.05**p<0.01，相對(duì)于對(duì)照本發(fā)明的組合物適合于摻入藥物制劑中，所述制劑如片劑、糖錠劑、軟和硬明膠膠嚢和纖維素膠嚢。該提取物優(yōu)選在富含多不飽和的o3/0)6酸類的油中配制，例如月見(jiàn)草(Oewo^em6/e"m》(夜來(lái)香)油。已經(jīng)在人類中以每天50-1000mg的劑量證實(shí)了與在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中所觀察到的相同結(jié)果。下面的實(shí)施例用來(lái)對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)的說(shuō)明。實(shí)施例1-制備菜薊刺狀變種(Q;"amsco/j;附附vr.Spinosus)的提取物將2kg在收獲時(shí)被切碎和冷凍的菜薊撒丁刺狀變種(Q;"flmsco/j;w附vr.SardinianSpinosus)的花頭裝載于帶有加熱夾套的滲濾器中，用4760ml的95。EtOH覆蓋，以得到約70%的醇含量(假定該植物中含水量為85%)。在70"C下保持接觸3小時(shí)，隨后卸載樣品。在連續(xù)的提取中，用70%v/v的EtOH在70'C下覆蓋植物進(jìn)行萃取，最少的接觸時(shí)間為3小時(shí)。共進(jìn)行5次萃取，使用約15L的溶劑。合并滲濾液并在35t:下真空濃縮，得到約15%的干燥殘余物。在環(huán)境溫度下使之冷卻，分離不溶的部分，將澄清的水溶液裝載于填有530mlXAD-7HP樹(shù)脂的柱子中。洗滌柱子，先用530ml的水洗滌(除去洗脫液)，隨后用1325ml的90%的EtOH洗滌。將含水的乙醇洗脫液濃縮，在50X:下真空干燥24小時(shí)。得到18.59g純化的提取物。HPLC滴度咖啡鞣酸49.13%、黃酮類2.68%。實(shí)施例2-將菜薊和菜豆提取物配制成用于軟明膠膠嚢的油狀混懸液?jiǎn)挝唤M合物菜薊提取物100mg菜豆提取物100mg單硬脂酸甘油酯30mg大豆卵磷脂10mg月見(jiàn)草油，適量以達(dá)到700mg制備方法-加熱月見(jiàn)草油至約70。C，并在攪拌下將單硬脂酸甘油酯在油中熔化。-將大豆卵磷脂加入所得的溶液中。-將菜薊和菜豆的提取物分散在所得溶液中，確保其均勻分布。-在保持?jǐn)嚢璧耐瑫r(shí)，逐漸使所得的溶液冷卻。實(shí)施例3-將菜薊和菜豆提取物配制在硬明膠膠嚢中單位組合物菜薊提取物150mg菜豆提取物50mg微晶纖維素200mg乳糖95mg二氧化珪5mg制備方法-將提取物、微晶纖維素、乳糖和二氧化硅混合。-把得到的混合物分裝到硬明膠膠嚢中。實(shí)施例4-將菜薊和菜豆提取物配制在緩釋顆粒劑中單位組合物菜薊提取物100mg菜豆提取物50mg微晶纖維素100mg聚維酮10mg羧甲基纖維素鈉8mg甲基丙烯酸共聚物50mg檸檬酸三乙酯3.2mg滑石粉8mg西甲珪油0.3mg制備方法-用聚維酮的水溶液將提取物、微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉制粒。-將所得的顆粒千燥和標(biāo)定。-用曱基丙烯酸共聚物、檸檬酸三乙酯、滑石粉和西甲硅油的水性混懸液對(duì)顆粒進(jìn)^f于包衣。實(shí)施例5-將菜薊和菜豆提取物配制在速釋顆粒劑中單位組合物菜薊提取物100mg菜豆提取物50mg樣￡晶纖維素100mg聚維酮10mg羧曱基纖維素鈉8mg制備方法-用聚維酮的水溶液將提取物、微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉制粒。-將所得的顆粒干燥和標(biāo)定。實(shí)施例6-具有不同釋放特性的菜薊和菜豆提取物的顆?；旌衔镏苽浞椒?將50%的實(shí)施例4所述的顆粒與50%的實(shí)施例5所述的顆粒相混合。-將所得的混合物分裝到硬明膠膠嚢中。8權(quán)利要求1.包含比例為1∶0.25到1∶1的菜薊提取物和菜豆提取物的組合物。2.如權(quán)利要求l所述的組合物，其中菜薊提取物具有的咖啡鞣酸含量為30-60%，四羥黃酮糖苷含量為2-5%。3.如權(quán)利要求1或2所述的組合物，其中菜豆提取物的特征在于a-淀粉酶抑制劑含量為1200-1600USP/mg(HPLC滴度為7-14。/。w/w)和植物凝集素含量為12，000-30，000HAU/g。4.如權(quán)利要求l-3中任一項(xiàng)所述的組合物，其還含有月見(jiàn)草油。5.如權(quán)利要求1-4中所述的制劑在制備具有降血糖和抗肥胖作用的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明涉及具有高含量的咖啡鞣酸的菜薊提取物和包含所述菜薊提取物與菜豆提取物的組合物。所述組合物用于降低肥胖，這是由于其通過(guò)使細(xì)胞對(duì)胰島素敏感而降低膽固醇、甘油三酯和血糖。該組合在飯前服用時(shí)降低食欲，從而導(dǎo)致體重減輕。所述提取物優(yōu)選在月見(jiàn)草油、魚(yú)油或富含不飽和的ω-3脂肪酸的油中配制。文檔編號(hào)A61K36/28GK101641111SQ200880007206公開(kāi)日2010年2月3日申請(qǐng)日期2008年3月6日優(yōu)先權(quán)日2007年3月7日發(fā)明者A·焦里,C·蓬佐內(nèi),E·邦巴爾代利,G·豐塔納,M·龍基,P·莫拉佐尼申請(qǐng)人:因德納有限公司