專(zhuān)利名稱(chēng)：一種芍藥提取物甲氨蝶呤組合物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及芍藥提取物甲氨蝶呤組合物、芍藥提取物甲 氨蝶呤組合物的制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎為一主要累及關(guān)節(jié)的全身性系統(tǒng)性風(fēng)濕病。在人群各種族中均有較 高的發(fā)病率和嚴(yán)重的致殘率，對(duì)人類(lèi)有極大的危害性。目前臨床上治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎藥物主要包括非留體抗炎藥和慢作用抗風(fēng)濕病藥 及生物制劑等，這些藥物在臨床治療中發(fā)揮了重要作用。但非留體抗炎藥物需長(zhǎng)期服用不 良反應(yīng)多，慢作用抗風(fēng)濕病藥需長(zhǎng)期使用可造成重要臟器和組織的嚴(yán)重不良反應(yīng)，生物制 劑經(jīng)常有引起惡性感染和誘發(fā)腫瘤的嚴(yán)重不良反應(yīng)出現(xiàn)。甲氨蝶呤(Methotrexate，簡(jiǎn)稱(chēng)MTX)，治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎具有療效顯著、嚴(yán)重的副 作用少、長(zhǎng)期應(yīng)用耐受性好等特點(diǎn)，目前已經(jīng)成為治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的首選藥。其作用機(jī)制 可能與抑制二氫葉酸還原酶有關(guān)，它使細(xì)胞內(nèi)葉酸缺乏，核蛋白合成減少，從而抑制細(xì)胞增 殖及復(fù)制。治療時(shí)一般每周7.5 15mg(不超過(guò)25mg)，可口服、肌注或靜脈滴注。不良反 應(yīng)主要有肝損害、骨髓抑制、胃腸道癥狀、皮疹，偶發(fā)肺纖維化。芍藥提取物主要成分為一組糖苷類(lèi)物質(zhì)，包括芍藥苷、羥基芍藥苷、芍藥花苷、芍 藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷等，其中芍藥苷含量最高，一般以芍藥苷含量作為芍藥提取物的指 標(biāo)性成分。芍藥提取物可用于治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎?！吨袊?guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用》2008年10月第2卷第20期公開(kāi)了白芍總苷聯(lián)合甲氨蝶呤 治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的療效情況，兩都聯(lián)合用藥比其單獨(dú)用藥具有療效好，不良反應(yīng)減少。但 其療效還是不盡人意，還存在一定程度的不良反應(yīng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種芍藥提取物甲氨蝶呤組合物及其制備方法與應(yīng)用。上述的目的通過(guò)以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種芍藥提取物甲氨蝶呤組合物，其組成包括芍藥提取物和甲氨蝶呤，所述芍藥 提取物與甲氨蝶呤的重量份比為芍藥提取物甲氨蝶呤=1 8000 1。所述芍藥提取物是指由芍藥或白芍或赤芍中提取獲得。芍藥或白芍或赤芍為毛 茛科植物芍藥Paeonia IactifloraPall及其任意一種變種植株或任何部位，如跟、根莖、 莖、葉、花穗、果實(shí)等，或市售白芍或赤芍飲片，同時(shí)包括未經(jīng)任何炮制處理的原藥材及飲 片和各種炮制品，如炒白芍、酒白芍、炒赤芍、酒赤芍等。芍藥提取物主要成分為一組糖苷 類(lèi)物質(zhì)，包括芍藥苷、羥基芍藥苷、芍藥花苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷等，其中芍藥苷含 量最高，一般以芍藥苷含量作為芍藥提取物的指標(biāo)性成分，芍藥提取物中芍藥苷的含量為 30% 100%。所述的甲氨蝶呤為4-氨基-10-甲基葉酸及結(jié)構(gòu)相似物的混合物，主要成分為L(zhǎng)-(+)-N-[4-[[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲氨基]苯甲?；鵠谷氨酸(C2tlH22N8O5)15 按干燥品計(jì)算，含C2tlH22N8O5不得少于90. 0%。上述芍藥提取物甲氨蝶呤組合物的制備方法采用等量遞增法或等倍遞增法。等量 遞增法即先用少量芍藥提取物飽和用于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，取與甲氨蝶呤等 量的芍藥提取物共同研磨混合均勻，再加入與混合粉等量的芍藥提取物混勻……如此反復(fù) 加入混合，直至量大組分加完，混勻。依照上述芍藥提取物甲氨蝶呤組合物的制備方法，可將本發(fā)明組合物制成片劑 (包括普通片、分散片、緩釋片、控釋片、口腔崩解片、含片)或膠囊劑或栓劑或顆粒劑或與 其他藥物復(fù)方制劑。一種上述的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物作為藥物組合物的活性成分在治療類(lèi)風(fēng) 濕關(guān)節(jié)炎的應(yīng)用。這個(gè)技術(shù)方案有以下有益效果1.本發(fā)明的芍藥提取物與甲氨蝶呤組成藥物組合物，治療類(lèi)風(fēng)濕的效果不僅好于 甲氨蝶呤單用效果，而且好于甲氨蝶呤與白芍總苷聯(lián)合用藥的效果，同時(shí)可以大大減輕或 避免甲氨蝶呤引起的肝損害、嗜睡、食欲不振等不良反應(yīng)。2.本發(fā)明可以制成藥劑學(xué)上的各種制劑，如片劑、膠囊劑、顆粒劑等，并且可以和 其他活性成分組成多組分藥物組合物。服藥方便。


圖1，芍藥提取物甲氨蝶呤組合物對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎足爪腫脹度的影響(容積 測(cè)量)1、對(duì)照組，2、模型組，3、組合物組，4、強(qiáng)的松組圖2，芍藥提取物甲氨蝶呤組合物對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)指數(shù)的影響
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 取芍藥苷含量為50%芍藥提取物500g，甲氨蝶呤lg，先用少量芍藥提取物飽和用 于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，先取Ig芍藥提取物共同研磨混合均勻，再加入2g芍藥 提取物混勻，再加入4g芍藥提取物混勻，再加入8g芍藥提取物混勻，再加入16g芍藥提取 物混勻，再加入32g芍藥提取物混勻，再加入64g芍藥提取物混勻，再加入128g芍藥提取物 混勻，再加入剩余的245g芍藥提取物混勻，即得本發(fā)明的組合物。實(shí)施例2 取實(shí)施例1制備的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物100g，直接裝入0號(hào)空心硬膠囊制 得膠囊劑，每粒裝約0. 4g，即得本發(fā)明的組合物延伸制劑膠囊。實(shí)施例3 取實(shí)施例1制備的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物400g，用干法制粒制備成組合物顆 粒，過(guò)24目標(biāo)準(zhǔn)篩，直接裝入0號(hào)空心硬膠囊制得膠囊劑，每粒裝約0. 4g，即得本發(fā)明的組 合物延伸制劑膠囊。實(shí)施例4
取芍藥苷含量為80%芍藥提取物200g，甲氨蝶呤20g，先用少量芍藥提取物飽和 用于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，先取20g芍藥提取物共同研磨混合均勻，再加入40g 芍藥提取物混勻，再加入80g芍藥提取物混勻，再加入剩余的60g芍藥提取物混勻，即得本 發(fā)明組合物。實(shí)施例5 取實(shí)施例4制備的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物100g，加入淀粉lOOOg，倍他環(huán)糊精 IOOOg,混合均勻后，制成顆粒過(guò)50目標(biāo)準(zhǔn)篩整粒，加入壓片機(jī)壓制成片劑，每片重約0. 3g， 即得本發(fā)明組合物的延伸制劑片劑。實(shí)施例6:取實(shí)施例4制備的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物100g，加入可溶性淀粉lOOOg，蔗糖 lOOOg，混合均勻，制成顆粒過(guò)24目標(biāo)準(zhǔn)篩整粒，每袋裝lg，即得本發(fā)明組合物的延伸制劑顆粒。實(shí)施例7 取芍藥苷含量為90%芍藥提取物7000g，甲氨蝶呤lg，先用少量芍藥提取物飽和 用于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，先取Ig芍藥提取物共同研磨混合均勻，再加入2g芍 藥提取物混勻，再加入4g芍藥提取物混勻，再加入8g芍藥提取物混勻，再加入16g芍藥提 取物混勻，再加入32g芍藥提取物混勻，再加入64g芍藥提取物混勻，再加入128g芍藥提取 物混勻，再加入256g芍藥提取物混勻，再加入512g芍藥提取物混勻，再加入1024g芍藥提 取物混勻，再加入2048g芍藥提取物混勻，再加入剩余的2905g芍藥提取物混勻，即得本發(fā) 明組合物。實(shí)施例8 取芍藥苷含量為35%芍藥提取物3500g，甲氨蝶呤lg，先用少量芍藥提取物飽和 用于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，先取Ig芍藥提取物共同研磨混合均勻，再加入2g芍 藥提取物混勻，再加入4g芍藥提取物混勻，再加入8g芍藥提取物混勻，再加入16g芍藥提 取物混勻，再加入32g芍藥提取物混勻，再加入64g芍藥提取物混勻，再加入128g芍藥提取 物混勻，再加入256g芍藥提取物混勻，再加入512g芍藥提取物混勻，再加入1024g芍藥提 取物混勻，再加入剩余的1453g芍藥提取物混勻，即得本發(fā)明組合物。本發(fā)明芍藥提取物甲氨蝶呤組合物對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的藥效試驗(yàn)。以下試驗(yàn)中所用的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物為實(shí)施例1制備的組合物。1、目的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的藥效。2、動(dòng)物SD大鼠體重180+20g，雄性3.方法3. 1實(shí)驗(yàn)分組SD大鼠，隨機(jī)分為4組，即正常組、模型組、芍藥提取物甲氨蝶呤組 合物組和陽(yáng)性對(duì)照藥強(qiáng)的組。每組12只。3. 2AA模型誘導(dǎo)大鼠足爪皮內(nèi)注射福氏佐劑(CFA)O. Iml,同時(shí)設(shè)生理鹽水對(duì)照 組。炎癥出現(xiàn)后用藥，用藥10天。CFA的配制方法將IOmg卡介苗加入Iml石蠟油中，充 分混勻后置4°C冰箱中過(guò)夜，注射前再進(jìn)行充分混勻。3. 3給藥時(shí)間及用藥方法誘導(dǎo)后，每天觀(guān)察足爪腫脹，足爪評(píng)分，足爪出現(xiàn)紅腫， 開(kāi)始用藥。灌胃給藥，每天一次，用藥12天。d28，處死大鼠，觀(guān)察藥效指標(biāo)。
3. 4檢測(cè)指標(biāo)(1)足爪腫脹度的測(cè)定用足爪容積測(cè)量?jī)x于致炎前，致炎后dl2、dl6、d20、d24、 d28定期檢測(cè)大鼠足爪腫脹度。(2)全身病變體重變化，前肢、耳和尾部病變的發(fā)生率和嚴(yán)重度。(3)關(guān)節(jié)指數(shù)按0-4五級(jí)評(píng)分，0 =無(wú)紅腫；1 =小趾關(guān)節(jié)稍腫；2 =趾關(guān)節(jié)和足 跖腫脹；3 =踝關(guān)節(jié)以下的足爪腫脹；4 =包括踝關(guān)節(jié)在內(nèi)的全部足爪腫脹。4、結(jié)果4. 1對(duì)足爪腫脹度的影響1)大鼠足爪皮內(nèi)注射CFA(10g/L)0. 1ml，用足爪容積測(cè)量?jī)x于致炎后dl2、dl6、 d20、d24、d28定期檢測(cè)大鼠足爪腫脹度。結(jié)果顯示足爪腫脹度定期檢測(cè)值模型組均較正 常對(duì)照組明顯增加(P <0.05)，見(jiàn)圖1。2)陽(yáng)性對(duì)照藥強(qiáng)的松10mg/kg灌胃給藥(ig)后第3天(d3)、(！7、dll測(cè)量足爪容 積，與模型組比較，足爪腫脹度均明顯減輕(P < 0. 05-0. 01)，見(jiàn)圖1。3)芍藥提取物甲氨蝶呤組合物100mg/kg灌胃給藥(ig)后d3、d7、dll測(cè)量 足爪容積，與模型組比較，可見(jiàn)芍藥提取物甲氨蝶呤組合物組足爪腫脹度均明顯減輕(P
<0. 05-0. 01)，見(jiàn)圖 1。4. 2對(duì)全身病變體重變化，前肢、耳和尾部病變的發(fā)生率和嚴(yán)重度1)分別于注射佐劑致炎后dl6(給藥前)、致炎后d20(給藥d3)、致炎后d24(給 藥d7)和致炎后d28(給藥dll)稱(chēng)體重，計(jì)算體重增量。增量(g)=給藥后體重-給藥前 體重。結(jié)果顯示，模型組與對(duì)照組比較，體重明顯下降；與模型組相同，芍藥提取物甲氨蝶呤 組合物組體重也明顯下降，但沒(méi)有明顯的規(guī)律。2)觀(guān)察記錄前肢、耳和尾部病變的發(fā)生率和嚴(yán)重度，除對(duì)照組，模型組和各受試藥 物組在致炎后隨時(shí)間而發(fā)生后肢被注射部位不同程度的腫脹，部分發(fā)生潰瘍或潰爛，前肢 和耳發(fā)生輕度腫脹、部分大鼠尾巴發(fā)生結(jié)節(jié)，其發(fā)生率和嚴(yán)重度在給藥前基本是一致的。在 開(kāi)始給藥后，芍藥提取物甲氨蝶呤組合物組全身病變的沒(méi)有發(fā)生進(jìn)一步的惡化，開(kāi)始減輕。4. 3對(duì)關(guān)節(jié)指數(shù)的影響1)大鼠足爪皮內(nèi)注射CFA(10g/L)0. 1ml，按0-4五級(jí)評(píng)分，于給藥后d3、d7、dll 定期評(píng)估關(guān)節(jié)指數(shù)。結(jié)果顯示關(guān)節(jié)指數(shù)評(píng)估積分模型組均較正常對(duì)照組明顯增加(P
<0.01)，見(jiàn)圖 2。2)陽(yáng)性對(duì)照藥強(qiáng)的松10mg/kg灌胃給藥(ig)后d3、d7、dll評(píng)估關(guān)節(jié)指數(shù)，與模 型組比較，關(guān)節(jié)指數(shù)評(píng)估積分均明顯減少(P < 0. 05-0. 01)，見(jiàn)圖2。3)芍藥提取物甲氨蝶呤組合物100mg/kg灌胃給藥(ig)后d3、d7、dll評(píng)估關(guān)節(jié) 指數(shù)，與模型組比較，可見(jiàn)芍藥提取物甲氨蝶呤組合物組呈劑量依賴(lài)減少關(guān)節(jié)指數(shù)積分(P
<0. 05-0. 01)，見(jiàn)圖 2。本發(fā)明芍藥提取物甲氨蝶呤組合物志愿者藥物試驗(yàn)。試驗(yàn)藥物為實(shí)施例5制備的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物片劑，以及同法制備的甲 氨蝶呤片劑和芍藥提取物片劑。選取了 70位患類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎志愿者進(jìn)行臨床觀(guān)察，70位類(lèi) 風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎完全出于自愿，均簽訂了知情同意書(shū)，都符合美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎修 訂分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)(1987)和活動(dòng)性類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎標(biāo)準(zhǔn)，近期未接受糖皮質(zhì)激素或抗類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎藥物治療，無(wú)心、肝、腎等重要臟器疾病。隨機(jī)分為兩組，每組組35例。試驗(yàn)組(芍藥提 取物甲氨蝶呤組合物片劑組)每人每天一次，每次兩片芍藥提取物甲氨蝶呤組合物片；對(duì) 照組(甲氨蝶呤片與芍藥提取物片聯(lián)合用藥組)每人每天一次，每次2片甲氨蝶呤片、2片 芍藥提取物；連續(xù)服用12周。觀(guān)察指標(biāo)晨僵時(shí)間；雙手握力；關(guān)節(jié)壓痛數(shù)；關(guān)節(jié)腫脹數(shù)；血沉(ESR，魏氏法)及 C-反應(yīng)蛋白(CRP，火箭電泳法)；肝功能檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)；血液白細(xì)胞檢測(cè)；觀(guān)察不 良反應(yīng)等。于治療前及治療期間每隔4周重復(fù)檢查并記錄。療效標(biāo)準(zhǔn)主要以晨僵、握力、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)、腫脹數(shù)、ESR、CRP指標(biāo)作為評(píng)價(jià)指標(biāo)， 以下降(握力為增加)50%作為有效計(jì)。評(píng)定級(jí)別晨僵時(shí)間< 15min ；握力改善；無(wú)關(guān)節(jié) 壓痛；無(wú)關(guān)節(jié)腫脹；ESR < 20mm/h或30mm/h (女性)。上述5項(xiàng)中至少具備4項(xiàng)者為臨床緩 解；5項(xiàng)中至少3項(xiàng)達(dá)到上述有效者為顯效；5項(xiàng)中至少2項(xiàng)達(dá)到上述有效者為有效；5項(xiàng)中 不足2項(xiàng)達(dá)到“有效”者為無(wú)效。分別于治療前和治療后4、8、12周觀(guān)察并記錄檢測(cè)結(jié)果，其結(jié)果如下表表1患者療效比較 從以上患者療效比較可以看出，芍藥提取物甲氨蝶呤組合物治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的 效果要好于芍藥提取物與甲氨喋呤聯(lián)合用藥效果。經(jīng)過(guò)12周治療后，不良反應(yīng)觀(guān)察情況如下表2不良反應(yīng)情況觀(guān)察表 從不良反應(yīng)對(duì)比可以看出，芍藥提取物甲氨蝶呤組合物治出現(xiàn)不良反應(yīng)的人數(shù)比 芍藥提取物與甲氨喋呤聯(lián)合用藥要少，組合物未出現(xiàn)白細(xì)胞減少與谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高等較為 嚴(yán)重的不良反應(yīng)。
權(quán)利要求
一種芍藥提取物甲氨蝶呤組合物，其特征是由芍藥提取物與甲氨蝶呤按重量份比為芍藥提取物∶甲氨蝶呤＝1～8000∶1的比例制成的組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是所述芍藥提取物是指由芍藥或白芍或赤芍 中提取獲得，其中指標(biāo)性成分芍藥苷的含量為30% 100%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是甲氨蝶呤為4-氨基-10-甲基葉酸及結(jié)構(gòu) 相似物的混合物，主要成分為L(zhǎng)-(+)-N-[4-[[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲氨基]苯 甲?；鵠谷氨酸(C2QH22N805)，按干燥品計(jì)算，含C2QH22N805不得少于90. 0%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是該組合物可制成片劑或膠囊劑或栓劑或顆 粒劑或與其他藥物復(fù)方制劑。
5.一種制備權(quán)利要求1所述的芍藥提取物甲氨蝶呤組合物的制備方法，其特征是采用 等量遞增法或等倍遞增法混合方法，即先用少量芍藥提取物飽和用于混合的器械，倒出，加 入甲氨蝶呤，取與甲氨蝶呤等量的芍藥提取物共同研磨混合均勻，再加入與混合粉等量的 芍藥提取物混勻，如此反復(fù)加入混合，直至量大組分加完，混勻。
6.一種芍藥提取物甲氨蝶呤組合物在治療類(lèi)風(fēng)濕中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供一種芍藥提取物甲氨蝶呤組合物及其制備方法與應(yīng)用，由芍藥提取物與甲氨蝶呤配制而成，其治療類(lèi)風(fēng)濕的效果不僅好于甲氨蝶呤單用效果，而且好于甲氨蝶呤與白芍總苷聯(lián)合用藥的效果，同時(shí)可以大大減輕或避免甲氨蝶呤引起的肝損害、嗜睡、食欲不振等不良反應(yīng)。
文檔編號(hào)A61K36/71GK101926860SQ20101016794
公開(kāi)日2010年12月29日 申請(qǐng)日期2010年5月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月7日
發(fā)明者周海濱, 張新明, 楊海玲, 江海龍 申請(qǐng)人:寧波立華制藥有限公司