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      一種人胰腺癌細胞系及其應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:1184023閱讀:289來源:國知局
      專利名稱:一種人胰腺癌細胞系及其應(yīng)用的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明屬于細胞系領(lǐng)域,特別涉及一種人胰腺癌細胞系及其應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      胰腺癌是一種惡性程度很高的疾病,盡管相對發(fā)病率較低,一般為9 10/100000,但在西方國家中仍是腫瘤相關(guān)死亡率最高的疾病;在我國發(fā)病率也呈逐年上升趨勢。胰腺癌不易在早期發(fā)現(xiàn),目前尚未發(fā)現(xiàn)特異的臨床表現(xiàn)和腫瘤標(biāo)志物,影像學(xué)特征亦不典型;而且由于胰腺解剖學(xué)和生物學(xué)特征,易侵犯周圍臟器和發(fā)生轉(zhuǎn)移,大多數(shù)患者在確診時,已經(jīng)是疾病晚期,并轉(zhuǎn)移至肝、肺、脊柱、腎或腎上腺等器官,只能行探查或姑息性手術(shù),但遠期效果不理想,患者大多死于肝轉(zhuǎn)移和局部復(fù)發(fā);能進行手術(shù)切除根治者僅占 5% 30% ;術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移早、發(fā)生率高,單一放療或化療的治療效果不理想,預(yù)后極差。我國的外科統(tǒng)計資料顯示,5年生存率僅在5%左右。有關(guān)胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和耐藥的生物學(xué)機制目前尚不十分清楚。目前缺少用于胰腺癌發(fā)生機理及抗胰腺癌藥物開發(fā)的接近臨床腫瘤生物學(xué)特性的實驗材料。而運用臨床腫瘤組織直接建立細胞系的成功率較低,因此,通過運用臨床腫瘤標(biāo)本先建立動物模型,進而通過原代培養(yǎng)建立的人源腫瘤細胞更接近于腫瘤的臨床生物學(xué)特性,對藥物的耐藥性及敏感性將具有更好的預(yù)測性。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明要解決的技術(shù)問題就是針對現(xiàn)有的人胰腺癌細胞系存在的生物多樣性低, 與臨床上胰腺癌的生物學(xué)性狀相差較大的不足,提供一種新的人胰腺癌細胞系及其用途。本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種人胰腺癌細胞,其保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號為CCTCC NO :C201007。本發(fā)明還提供如上所述的人胰腺癌細胞的子代細胞。本發(fā)明還提供如上所述的人胰腺癌細胞的用途,用于在哺乳動物中產(chǎn)生胰腺癌。 所述的哺乳動物可以是各種哺乳動物,優(yōu)選裸小鼠。所述的裸小鼠優(yōu)選BALC/c裸小鼠。所述的胰腺癌優(yōu)選胰低分化或中分化腺癌。本發(fā)明還提供一種上述人胰腺癌細胞系的建立方法,包括以下步驟,1)獲得新鮮的臨床胰腺癌手術(shù)切除標(biāo)本,切成20 50mg的小塊,皮下穿刺接種哺乳動物;2)穿刺接種70 90天后,將荷瘤動物處死,取出腫瘤組織,進行癌細胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。其中,所述的哺乳動物、所述的胰腺癌都如上所述。所述的新鮮的臨床胰腺癌手術(shù)切除標(biāo)本較佳的用哺乳動物細胞培養(yǎng)液或生理鹽水漂洗后再進行接種。較佳的用新鮮的HBSS緩沖液(含500U/ml青霉素G、500 μ g/ml硫酸鏈霉素和1. 25 μ g/ml兩性霉素B)漂洗。
      所述的接種的方式可以是皮下穿刺接種,原位接種或者腎囊膜內(nèi)接種。對于胰腺癌較佳的是進行皮下穿刺接種。所述的原代培養(yǎng)方法可以是常規(guī)的哺乳動物細胞的原代培養(yǎng)方法。較佳的包括以下步驟將腫瘤組織剪切成小塊,置入培養(yǎng)瓶中,于37°C孵箱5% CO2條件下培養(yǎng);次日,將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)平放,向瓶內(nèi)加入DMEM/F12培養(yǎng)液(含5%胎牛血清,10 μ g/ml重組人胰島素,6. 7ng/ml亞硒酸鈉,5. 5 μ g/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白,2 μ g/ml乙醇胺,100U/ml青霉素G、100y g/ ml硫酸鏈霉素和0. 25 μ g/ml兩性霉素B),靜置培養(yǎng);所述的傳代培養(yǎng)方法可以是常規(guī)哺乳動物細胞的傳代培養(yǎng)方法。較佳的包括以下步驟吸棄舊培養(yǎng)液,向瓶中加入新鮮的0.05%胰蛋白酶溶液,待細胞脫落后,加入新鮮的DMEM/F12培養(yǎng)液,仔細吹打,使之脫離瓶壁形成細胞懸液;少量在瓶壁上變圓但沒有脫落的細胞,用無菌細胞刮刀輕輕掛擦培養(yǎng)瓶表面,收集全部細胞,離心,分別接種于新的培養(yǎng)瓶;當(dāng)細胞傳代到第五代以后,將培養(yǎng)液更換為RPMI 1640培養(yǎng)液(含10%胎牛血清, 10 μ g/ml重組人胰島素,100U/ml青霉素G、100 μ g/ml硫酸鏈霉素和0. 25 μ g/ml兩性霉素 B)。本發(fā)明還提供一種篩選治療胰腺癌的候選藥物的方法,包括以下步驟將測試化合物施用于動物模型,施用后導(dǎo)致胰腺癌癥狀改善或治愈的測試化合物就是治療胰腺癌的候選化合物,其中所述的動物模型具有如上所述的人胰腺癌細胞所導(dǎo)致的胰腺癌腫瘤。具體的,本發(fā)明的篩選治療胰腺癌的候選藥物的方法包括以下步驟(1)將所述的胰腺癌細胞或其子代細胞制備成細胞懸液,接種于哺乳動物皮下,進行飼養(yǎng),獲得人胰腺癌動物模型;(2)將測試化合物施用于動物模型,施用后導(dǎo)致胰腺癌癥狀改善或治愈的測試化合物就是治療胰腺癌的候選化合物。其中,所述的動物模型優(yōu)選裸小鼠。所述的裸鼠優(yōu)選BALB/C裸小鼠。較佳的可采用細胞懸液注射來建立動物模型。在施用步驟中,將測試化合物通過尾靜脈注射、口服、腹腔注射或于腫瘤局部用藥等方式施用于胰腺癌荷瘤動物。較佳的使用對照實驗,一種優(yōu)選的方式是同時還使用不含測試化合物的溶劑施用于胰腺癌荷瘤動物作為對照。本發(fā)明中,上述優(yōu)選條件在符合本領(lǐng)域常識的基礎(chǔ)上可任意組合,即得本發(fā)明各較佳實例。本發(fā)明所用的原料或試劑除特別說明之外,均市售可得。相比于現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明的有益效果如下本發(fā)明的人胰腺癌細胞性狀穩(wěn)定,可穩(wěn)定多次傳代。為胰腺癌研究提供新的更接近于臨床腫瘤生物學(xué)特性的實驗材料。具有高度成瘤性,可以成功制備胰腺癌動物模型,所制的得動物模型可以用于基礎(chǔ)研究及藥物篩選。通過與裸小鼠體內(nèi)傳代親本腫瘤相比較,可用來分析體外、體內(nèi)藥物敏感性及耐藥性的相關(guān)性,進而可以建立體外、體內(nèi)兩個相關(guān)聯(lián)的抗胰腺癌藥物篩選平臺。也可用于研究胰腺癌轉(zhuǎn)移的發(fā)病機理、胰腺癌的耐藥機理,進而可以尋找胰腺癌轉(zhuǎn)移和耐藥的特征生物標(biāo)志物。是人胰腺癌基礎(chǔ)研究和臨床前期應(yīng)用的理想細胞系。生物材料的保藏本發(fā)明的人胰腺癌細胞,于2010年3月31日保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心 (CCTCC)(地址中國.武漢.武漢大學(xué)),培養(yǎng)物名稱為人源胰腺癌細胞PAXC-003,保藏編號為 CCTCC NO :C201007。


      以下結(jié)合

      本發(fā)明的特征和有益效果。圖1. PAXC-003細胞的形態(tài)學(xué)觀察(100 X)。圖2. PAXC-003細胞的染色體分析。A. PAXC-003細胞;B.裸小鼠染色體(參照)。圖3. PAXC-003細胞免疫組化染色(DAB法)Α·細胞角蛋白Cytokeratin (200Χ); B. CA19-9(200X) ; C.癌胚抗原 CEA QOO X)。圖4. PAXC-003細胞倍增時間曲線。圖5. Acumen高內(nèi)涵細胞篩選儀分析PAXC-003細胞周期。圖6. PAXC-003細胞的成瘤性。A. PAXC-003細胞在裸小鼠體內(nèi)生長曲線(腫瘤體積);B.終點時腫瘤重量。圖7.腫瘤的病理組織切片。A.臨床上取得的腫瘤標(biāo)本(100X) ;B.裸小鼠體內(nèi)親本腫瘤(100X) ;C. PAXC-003細胞在裸小鼠體內(nèi)成瘤(100X)。
      具體實施例方式下面用實施例來進一步說明本發(fā)明,但本發(fā)明并不受其限制。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法,通常按照常規(guī)條件,或按照制造廠商所建議的條件。實施例1PAXC-003細胞的制備裸小鼠5只裸小鼠,雌性,體重16.0 士 l.Og,鼠齡5周,飼養(yǎng)于SPF環(huán)境。裸小鼠由上海斯萊克實驗動物技術(shù)有限公司提供。從上海市長海醫(yī)院獲得新鮮的臨床胰腺癌切除標(biāo)本(男,62歲,原發(fā)性胰腺癌,病理診斷結(jié)果為(胰鉤突)中分化腺癌),立即浸入預(yù)冷的無菌HBSS緩沖液中(含500U/ml 青霉素G、500y g/ml硫酸鏈霉素和1. 25 μ g/ml兩性霉素B)。在生物安全柜中,用新鮮的該無菌HBSS緩沖液沖洗標(biāo)本,切成20 50mg的小塊,穿刺接種裸小鼠腋背部皮下。動物接種后,健康狀態(tài)良好,行為正常。接種40天后,通過觸摸發(fā)現(xiàn)在接種部位皮下有腫瘤小結(jié)節(jié),小結(jié)節(jié)于接種50天后開始生長明顯,至接種后70天時,腫瘤體積超過300mm3。原代培養(yǎng)皮下穿刺接種人胰腺癌70 90天后,將荷瘤裸小鼠用過量二氧化碳氣體麻醉處死,無菌解剖,取出腫瘤組織,進行原代培養(yǎng),方法如下用HBSS緩沖液(含500U/ ml青霉素G、500 μ g/ml硫酸鏈霉素和1. 25 μ g/ml兩性霉素B)漂洗腫瘤組織快3次,去除結(jié)締組織和壞死組織;用無菌手術(shù)刀片將腫瘤組織剪切成約Imm3小塊;將剪切好的組織塊用接種針?biāo)腿肱囵B(yǎng)瓶,并均勻擺置,間隔0. 5cm,蓋好瓶蓋;輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使瓶底向上, 于37°C孵箱5% CO2條件下培養(yǎng);次日,將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)平放,向瓶內(nèi)加入IOml DMEM/F12 培養(yǎng)液(含5%胎牛血清,10 μ g/ml重組人胰島素,6. 7ng/ml亞硒酸鈉,5. 5 μ g/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白,2 μ g/ml乙醇胺,100U/ml青霉素G、100 μ g/ml硫酸鏈霉素和0. 25 μ g/ml兩性霉素B), 靜置培養(yǎng);原代培養(yǎng)每3天換液一次,去除已漂浮的組織塊和殘留的血細胞。傳代培養(yǎng)當(dāng)由組織塊中長出的細胞布滿培養(yǎng)瓶底部后,進行細胞傳代,具體步驟如下吸棄舊培養(yǎng)液,向瓶中加入Iml新鮮的0. 05%胰蛋白酶溶液,輕輕潤洗貼壁細胞層,吸棄,再加入Iml新鮮的0. 05%胰蛋白酶溶液,于37°C孵箱中孵育,觀察到細胞質(zhì)回縮、 細胞間隙增大,待細胞脫落后,加入3ml新鮮的DMEM/F12培養(yǎng)液,仔細吹打,使之脫離瓶壁形成細胞懸液;少量在瓶壁上變圓但沒有脫落的細胞,用無菌細胞刮刀輕輕掛擦培養(yǎng)瓶表面,收集全部細胞,離心,計數(shù),分別接種于新的培養(yǎng)瓶。當(dāng)細胞傳代到第5代以后,將培養(yǎng)液逐步更換為RPMI 1640培養(yǎng)液(含10%胎牛血清,10 μ g/ml重組人胰島素,100U/ml青霉素G、100y g/ml硫酸鏈霉素),細胞生長良好,形態(tài)較為均一。傳代至50代以上。
      在本發(fā)明中,來源于腫瘤組織的原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)細胞呈上皮樣,細胞形態(tài)較為均一,無接觸抑制,初期生長速度較為緩慢;隨著傳代次數(shù)的增加,生長速度逐步加快; 將該細胞系命名為PA)(C-003,提交保藏,保藏編號為CCTCC C201007。
      實施例2PAXC-003細胞的生物學(xué)特性及應(yīng)用本發(fā)明采用含有胎牛血清和胰島素的RPMI 1640培養(yǎng)液培養(yǎng)PAXC-003細胞,使其能體外長期生長和穩(wěn)定傳代。當(dāng)細胞傳至20代以上,細胞性狀逐漸穩(wěn)定,進行相關(guān)的生物學(xué)、遺傳學(xué)和組織來源鑒定,直至第50代都具有相同的穩(wěn)定的性狀。經(jīng)實驗觀察與驗證, 體外生長的PAXC-003細胞具有典型的上皮樣形態(tài),失去接觸生長抑制,呈惡性生長。遺傳學(xué)研究證實該細胞為異倍體,染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)畸變嚴(yán)重,符合惡性腫瘤的遺傳學(xué)特征。該 PAXC-003細胞能在裸小鼠體內(nèi)形成腫瘤,具有致瘤性。該PAXC-003細胞和其來源的臨床胰腺癌腫瘤標(biāo)本、裸小鼠體內(nèi)傳代親本腫瘤形成對應(yīng)關(guān)系,可以為研究體外、體內(nèi)和臨床抗癌藥物敏感性及耐藥性的相關(guān)性,以及胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和生物標(biāo)志物提供新的試驗材料。具體如下a.形態(tài)學(xué)觀察將培養(yǎng)PAXC-003細胞的培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下,在明視野下進行拍照。結(jié)果見圖1,可見,PAXC-003細胞失去了接觸抑制,呈惡性生長,具有重疊生長的特點,貼壁生長部分呈扁平狀,以不規(guī)則鋪路石樣為主,符合上皮樣細胞的特點。b.染色體的鑒定將培養(yǎng)的PAXC-003細胞置于4 °C 12小時后,加入秋水仙素,使其終濃度為 0. 4 μ g/ml,再于37°C孵箱中繼續(xù)培養(yǎng)10小時。采集分裂中期的細胞,用固定液進行固定, 然后將細胞懸液滴于預(yù)冷的載物片上,用Giemas染色液染色,于顯微鏡下計數(shù)染色體數(shù)。 結(jié)果見圖2,可見,PAXC-003細胞連續(xù)傳代后,染色體仍保持人源性腫瘤細胞染色體的特征,表現(xiàn)為多倍體,染色體眾數(shù)(M)集中在40 46之間,占59. 4%,存在多數(shù)中央及亞中央著絲粒染色體(圖2A);而裸小鼠的染色體數(shù)2n = 40,且均為頂端著絲粒(圖2Β),據(jù)此可與人類染色體相區(qū)別??梢娫揚AXC-003細胞為異倍體,染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)畸變嚴(yán)重,符合惡性腫瘤的遺傳學(xué)特征。c.組織來源鑒定將PAXC-003細胞接種在蓋玻片上培養(yǎng),待細胞伸展后,用4%甲醛固定,進行免疫組化染色(DAB顯色法)。結(jié)果顯示,細胞角蛋白(Cytokeratin,圖2A)和CA19_9(圖2B) 為強陽性,癌胚抗原(CEA,圖2C)為弱陽性,結(jié)合病理診斷,該細胞為胰腺癌細胞。d.細胞動力學(xué)將PAXC-003細胞以2000/孔的密度接種在96孔板中,進行培養(yǎng),分別在12小時, 24小時,36小時,48小時,72小時和96小時固定細胞,并進行PI染色,用高內(nèi)涵細胞篩選儀Acumen測量每孔細胞數(shù)。細胞動力學(xué)研究結(jié)果顯示,PAXC-003細胞的群體倍增時間為 33. 79小時(圖4)。
      e.細胞周期檢測將PAXC-003細胞以2000/孔的密度接種在96孔板中,培養(yǎng)M小時后,固定細胞, 并進行PI染色,用高內(nèi)涵細胞篩選儀Acumen測量每孔細胞數(shù)和每個細胞的總DNA含量 (每個細胞的總DNA含量和該細胞的總PI熒光強度呈正比);并根據(jù)不同細胞周期時,細胞總DNA含量的變化,計算各個細胞周期的細胞總數(shù)。結(jié)果顯示,PAX-003CL細胞G1期為 45. 92%, S期為19.01%,(VM期為24. 52%,8N期為9. 54%。根據(jù)細胞增殖指數(shù)公式PI =(G2/M+S) + (Go/Gi+S+G^M+eN) X100%,計算結(jié)果:PAXC_003 細胞PI = 48. 66% (圖 5)。f.細胞的成瘤性體外大規(guī)模培養(yǎng)和收集PAXC-003細胞,皮下接種BALB/C裸小鼠(每只動物接種5. OX IO6個細胞,細胞懸液和Matrigel以1 1混合,共接種5只動物),每周三次調(diào)查動物體重和腫瘤大小。接種約10天后,腫瘤開始形成并生長。繪制腫瘤生長曲線,其中腫瘤體積=(長X寬X寬)+2(見圖6A)。在第沈天結(jié)束實驗處死動物,腫瘤重量為 1. 15g士0. IOg (見圖6B)??梢娫揚AXC-003細胞能在裸小鼠體內(nèi)形成腫瘤,具有致瘤性。g.腫瘤的病理學(xué)鑒定將實施例1的從上海市長海醫(yī)院獲得新鮮的臨床胰腺癌切除標(biāo)本、穿刺接種于裸小鼠背部皮下90天后皮下長出的腫瘤、和上述f步驟中PAXC-003細胞在裸小鼠皮下接種 10天后形成的腫瘤,進行石蠟包埋切片和H&E染色,結(jié)果見圖7。它們的病理診斷結(jié)果見下表1。可見臨床標(biāo)本、裸小鼠體內(nèi)傳代親本腫瘤和PAXC-003細胞在裸小鼠體內(nèi)所成腫瘤的結(jié)構(gòu)類似,形成對應(yīng)關(guān)系。表1.各腫瘤標(biāo)本的病理診斷結(jié)果
      標(biāo)本名稱病理診斷結(jié)果臨床手術(shù)標(biāo)本胰鉤突中分化腺癌(圖m裸小鼠體內(nèi)傳代親本腫瘤胰中分化腺癌(圖7B)PAXC-003細胞在裸小鼠體內(nèi)所成腫瘤胰中分化腺癌(圖7C) 應(yīng)理解,在閱讀了本發(fā)明的上述內(nèi)容之后,本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改,這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
      權(quán)利要求
      1.一種人胰腺癌細胞,其特征在于,其保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號為 CCTCC C201007。
      2.如權(quán)利要求1所述的人胰腺癌細胞的子代細胞。
      3.如權(quán)利要求1或2所述的人胰腺癌細胞的用途,其特征在于,用于在哺乳動物中產(chǎn)生胰腺癌。
      4.如權(quán)利要求3所述的人胰腺癌細胞的用途,其特征在于,所述的哺乳動物是裸小鼠。
      5.一種如權(quán)利要求1或2所述的人胰腺癌細胞的建立方法,其特征在于,包括以下步驟,1)獲得新鮮的臨床胰腺癌手術(shù)切除標(biāo)本,切成20 50mg的小塊,皮下穿刺接種哺乳動物;2)穿刺接種70 90天后,將荷瘤動物處死,取出腫瘤組織,進行癌細胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。
      6.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述的哺乳動物是裸小鼠。
      7.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述的新鮮的臨床胰腺癌手術(shù)切除標(biāo)本用新鮮的HBSS緩沖液(含500U/ml青霉素G、500 μ g/ml硫酸鏈霉素和1. 25 μ g/ml兩性霉素 B)漂洗后,再進行皮下穿刺接種。
      8.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述的原代培養(yǎng)方法包括以下步驟將腫瘤組織剪切成小塊,置入培養(yǎng)瓶中,于37°C孵箱5% CO2條件下培養(yǎng);次日,將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)平放,向瓶內(nèi)加入DMEM/F12培養(yǎng)液(含5%胎牛血清,10 μ g/ml重組人胰島素,6. 7ng/ml亞硒酸鈉,5. 5 μ g/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白,2 μ g/ml乙醇胺,100U/ml青霉素G、100 μ g/ml硫酸鏈霉素和 0. 25 μ g/ml兩性霉素B),靜置培養(yǎng);所述的傳代培養(yǎng)方法包括以下步驟吸棄舊培養(yǎng)液,向瓶中加入新鮮的0. 05%胰蛋白酶溶液,待細胞脫落后,加入新鮮的DMEM/F12培養(yǎng)液,仔細吹打,使之脫離瓶壁形成細胞懸液;少量在瓶壁上變圓但沒有脫落的細胞,用無菌細胞刮刀輕輕掛擦培養(yǎng)瓶表面,收集全部細胞,離心,分別接種于新的培養(yǎng)瓶;當(dāng)細胞傳代到第五代以后,將培養(yǎng)液更換為RPMI 1640培養(yǎng)液(含10%胎牛血清,10 μ g/ml重組人胰島素,100U/ml青霉素G、100 μ g/ml硫酸鏈霉素和0. 25 μ g/ml兩性霉素B)。
      9.一種篩選治療胰腺癌的候選藥物的方法,其特征在于,包括以下步驟將測試化合物施用于動物模型,施用后導(dǎo)致胰腺癌癥狀改善或治愈的測試化合物就是治療胰腺癌的候選化合物,其中所述的動物模型具有權(quán)利要求1 4任一項所述的人胰腺癌細胞所導(dǎo)致的胰腺癌腫瘤。
      10.如權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,所述的動物模型是裸小鼠。
      全文摘要
      本發(fā)明提供了一種人胰腺癌細胞及其制備方法和應(yīng)用。該人胰腺癌細胞保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號為CCTCC C201007。該人胰腺癌細胞可用于在哺乳動物中產(chǎn)生人胰腺癌,制備人胰腺癌模型,可進一步用于篩選治療人胰腺癌的候選藥物。本發(fā)明的人胰腺癌細胞系性狀穩(wěn)定,可穩(wěn)定多次傳代。體外傳代自第20代至第50代性狀保持穩(wěn)定。本發(fā)明的人胰腺癌細胞系具有臨床上人胰腺癌的生物學(xué)性狀,為胰腺癌研究提供新的更接近于臨床腫瘤生物學(xué)生性的實驗材料。通過與裸小鼠體內(nèi)傳代親本腫瘤相比較,可用來分析體外、體內(nèi)藥物敏感性及耐藥性的相關(guān)性,進而可以建立體外、體內(nèi)兩個相關(guān)聯(lián)的抗胰腺癌藥物篩選平臺。
      文檔編號A61K49/00GK102250840SQ20101017858
      公開日2011年11月23日 申請日期2010年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月18日
      發(fā)明者朱明華, 歐陽可棟, 秦宵然, 胡剛, 謝付波, 聞丹憶 申請人:上海睿智化學(xué)研究有限公司, 上海長海醫(yī)院
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