專(zhuān)利名稱(chēng)：一種穩(wěn)定的重組人源化抗體的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明公開(kāi)了一種穩(wěn)定的藥物組合物。
背景技術(shù)：
人源化的抗HER2抗體是一種重組DNA衍生的人源化單克隆抗體，選擇性地作用于人表皮生長(zhǎng)因子受體_2(HER2)的細(xì)胞外部位。此抗體屬I(mǎi)gGl型，含人的框架區(qū)及能與 HER2結(jié)合的鼠抗-pl85HER2抗體的互補(bǔ)決定區(qū)，在體外及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中均顯示可抑制HER2過(guò)度表達(dá)的腫瘤細(xì)胞的增殖。另外，此抗體是抗體依賴(lài)的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒反應(yīng)(ADCC)的潛在介質(zhì)，在體外研究中，此抗體介導(dǎo)的ADCC被證明在HER2過(guò)度表達(dá)的癌細(xì)胞中比HER2非過(guò)度表達(dá)的癌細(xì)胞中更優(yōu)先產(chǎn)生。目前已被美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市，作為單藥治療HER2過(guò)度表達(dá)的轉(zhuǎn)移性乳腺癌。應(yīng)用于臨床的人源化的抗HER2抗體的制劑為凍干制劑，其賦形劑為L(zhǎng)-鹽酸組氨酸，L-組氨酸，α，α-雙羧海藻糖，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯20，此制劑不僅不很穩(wěn)定，不宜長(zhǎng)時(shí)間放置，而且其使用的α，α-雙羧海藻糖價(jià)格昂貴，增加了患者的用藥成本。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的申請(qǐng)人進(jìn)行了大量實(shí)驗(yàn)，得到了一種穩(wěn)定、價(jià)廉的重組人源化抗體的藥物組合物。具體地本發(fā)明公開(kāi)了一種穩(wěn)定的重組人源化抗體的藥物組合物，由抗HER2人源化抗體、 保護(hù)劑、緩沖劑、表面活性劑和等滲調(diào)節(jié)劑組成。本發(fā)明公開(kāi)的上述重組人源化抗體的藥物組合物的制劑為凍干制劑。本發(fā)明公開(kāi)的上述重組人源化抗體的藥物組合物，其中各組分的含量為抗HER2 人源化抗體10 40mg/ml，保護(hù)劑10 100mg/ml，緩沖劑3 10mmol/l，表面活性劑 0. 05 0. 2mg/ml，等滲調(diào)節(jié)劑2 9mg/ml。本發(fā)明公開(kāi)的上述的重組人源化抗體的藥物組合物，其中保護(hù)劑是非還原性糖、
谷氨酸單鈉、組氨酸、三元醇之一或其組合。本發(fā)明公開(kāi)的上述的重組人源化抗體的藥物組合物，其中非還原性糖為蔗糖或海藻糖。本發(fā)明公開(kāi)的上述的重組人源化抗體的藥物組合物，其中緩沖劑為組氨酸或琥珀酸緩沖液。本發(fā)明公開(kāi)的上述的重組人源化抗體的藥物組合物，其中緩沖劑為組氨酸緩沖液。本發(fā)明公開(kāi)的上述的重組人源化抗體的藥物組合物，其中表面活性劑為吐溫-20 或吐溫-80。本發(fā)明公開(kāi)的上述的重組人源化抗體的藥物組合物，其中等滲調(diào)節(jié)劑為氯化鈉。
本發(fā)明公開(kāi)的上述的重組人源化抗體的藥物組合物，其中抗HER2人源化抗體的含量為20mg/ml，保護(hù)劑的含量為38mg/ml，緩沖劑的含量為4. 44mmol/l，表面活性劑的含量為0. 09mg/ml，等滲調(diào)節(jié)劑的含量為4mg/ml。本發(fā)明公開(kāi)的上述藥物組合物的制劑，優(yōu)選凍干制劑，這些凍干制劑按照《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版，二部附錄XIX C原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則進(jìn)行了穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明公開(kāi)的藥物組合物的制劑在4°C保存三年以上或30°C 保存1年以上生物活性保持在95%以上，對(duì)本發(fā)明公開(kāi)的藥物組合物的凍干制劑用0. 9% 或1. 的苯甲醇進(jìn)行了重建，重建后的制劑在2 8°C保存3個(gè)月，生物活性保持在93% 以上，達(dá)到了本發(fā)明的目的。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例、實(shí)驗(yàn)例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，下述實(shí)施例、實(shí)驗(yàn)例不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制?？笻ER2 人源化抗體其制備參照 Carter P，Presta L，Gorman CM, Ridgway JB, Henner D,ffong WL,Rowland AM,Kotts C,Carver ME,Shepard HM. Proc Natl Acad Sci U S A. 1992May 15 ；89 (10) 4285-9. Humanization of an anti-pl85HER2antibody for human cancer therapy。本發(fā)明所述的抗HER2人源化抗體不僅僅限于這一種，本領(lǐng)域的技術(shù)人員利用通用的基因工程技術(shù)得到的抗HER2人源化抗體也在本發(fā)明所述的抗HER2人源化抗體之列。除非特別說(shuō)明，其它原輔料均為市售藥用輔料級(jí)別。實(shí)施例重組抗HER2人源化抗體的藥物組合物的制劑制備實(shí)施例1配方組分用量抗HER2人源化抗體 20mg/ml蔗糖38mg/mlL-組氨酸0. 32mg/mlL-組氨酸鹽酸鹽一水合物 0. 5mg/ml吐溫-200. 09mg/ml氯化鈉4mg/ml制備過(guò)程重組抗HER2人源化單克隆抗體純化最后一步采用分子排阻層析，流動(dòng)相為L(zhǎng)-組氨酸0. 32mg/mlL-組氨酸鹽酸鹽一水合物 0. 5mg/ml氯化鈉4mg/ml經(jīng)過(guò)該步驟純化獲得重組抗HER2人源化單克隆抗體的原液，原液中重組抗HER2 人源化單克隆抗體的濃度應(yīng)大于20mg/ml。制劑的配制根據(jù)原液的體積計(jì)算所需的蔗糖及吐溫-20的用量(終濃度分別為38mg/ml及0. 09mg/ml)，并加入原液中。調(diào)整溶液中所有組分的濃度，使各組分含量
組分用量
抗HER2人源化抗體20mg/ml
蔗糖38mg/ml
L-組氨酸0.32mg/ml
L-組氨酸鹽酸鹽一水合物0.5mg/ml
吐溫-200.09mg/ml
氯化鈉4mg/ml
獲得半成品，將半成品無(wú)菌分裝入西林瓶中獲得成P ΡΠ O
實(shí)施例2
配方
組分用量
抗HER2人源化抗體10mg/ml
蔗糖lOmg/ml
L-組氨酸0. 16mg/ml
L-組氨酸鹽酸鹽一水合物0. 25mg/ml
吐溫-200. 05mg/ml
制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例3
配方
組分含量
抗HER2人源化抗體20mg/ml，
蔗糖50mg/ml
L-組氨酸0. 32mg/ml
L-組氨酸一水合物0. 5mg/ml
吐溫-800. 09mg/ml
氯化鈉4mg/ml
制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)驗(yàn)例4
抗HER2人源化抗體40mg/ml，
海藻糖lOOmg/ml
L-組氨酸0. 48mg/ml
L-組氨酸一水合物0. 75mg/ml
吐溫-800. 2mg/ml
氯化鈉9mg/ml
制備方法同實(shí)施例1
實(shí)驗(yàn)例穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
實(shí)施例1-4所得到的樣品各三批進(jìn)行穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示，其中 N01-4為實(shí)施例1-4得到的各三批樣品進(jìn)行穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)后結(jié)果的平均值。體外生物活性檢測(cè)方法參照Synergistic Interactions between Tamoxifen and Trastuzumab(Herceptin). Athanassios Argiris, Chun-Xia Wang, Steve G. Whalen and Michael P. DiGiovanna, Clin Cancer Res. 2004Feb 15 ； 10 (4) :1409_20，進(jìn)行。表1 體外生物活性結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種重組人源化抗體的藥物組合物，由抗HER2人源化抗體、保護(hù)劑、緩沖劑、表面活性劑和等滲調(diào)節(jié)劑組成。
2.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物的制劑為凍干制劑。
3.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中各組分的含量為抗HER2人源化抗體10 40mg/ ml，保護(hù)劑10 100mg/ml，緩沖劑3 10mmol/l，表面活性劑0. 05 0. 2mg/ml，等滲調(diào)節(jié)齊[J 2 9mg/ml。
4.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中保護(hù)劑是非還原性糖、谷氨酸單鈉、組氨酸、三元醇之一或其組合。
5.權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其中非還原性糖為蔗糖或海藻糖。
6.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中緩沖劑為組氨酸或琥珀酸緩沖液。
7.權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中緩沖劑為組氨酸緩沖液。
8.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中表面活性劑為吐溫-20或吐溫-80。
9.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中等滲調(diào)節(jié)劑為氯化鈉。
10.權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其中各組分的含量為抗HER2人源化抗體20mg/ml， 保護(hù)劑38mg/ml，緩沖劑4. 44mmol/l，表面活性劑0. 09mg/ml，等滲調(diào)節(jié)劑4mg/ml。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種穩(wěn)定的重組人源化抗體的藥物組合物，由抗HER2人源化抗體、保護(hù)劑、緩沖劑、表面活性劑和等滲調(diào)節(jié)劑組成。本發(fā)明公開(kāi)的藥物組合物具有穩(wěn)定、價(jià)廉的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K39/395GK102309754SQ201010220560
公開(kāi)日2012年1月11日 申請(qǐng)日期2010年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月7日
發(fā)明者李彩輝, 胡輝, 鄒萍 申請(qǐng)人:上海中信國(guó)健藥業(yè)股份有限公司