專利名稱：：貫葉金絲桃素衍生物在制藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及兩種貫葉金絲桃素衍生物，即貫葉金絲桃素乙酯和貫葉金絲桃素-N，N二環(huán)己胺鹽在制藥中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：惡性腫瘤是常見的且嚴(yán)重威脅人類生命和生活質(zhì)量的主要疾病之一，2000年全球新發(fā)癌癥病例約為1000萬，死亡620萬，現(xiàn)患病例2240萬。20世紀(jì)后期近30年以來癌癥病發(fā)率一直呈上升趨勢，按目前趨勢世界衛(wèi)生組織(WHO)預(yù)測，至2020年隨著全球人口達(dá)80億，將有2000萬新發(fā)癌癥病例，其中死亡人數(shù)將達(dá)到1200萬，癌癥將成為新世紀(jì)人類的第一殺手。統(tǒng)計表明，我國常見人類生命健康的惡性腫瘤有肺癌、胃癌、食管癌、腸癌、肝癌、宮頸癌、乳腺癌、白血病、惡性淋巴瘤、鼻咽癌等十大腫瘤?；?、放療、手術(shù)治療是當(dāng)今治療腫瘤的主要手段，但毒副作用較大。能否找到既能殺傷腫瘤細(xì)胞，毒副作用又比較小的藥物及治療方法，在腫瘤治療中顯得尤其重要。目前惡性腫瘤的藥物治療以化學(xué)藥品為主，但化學(xué)藥品的開發(fā)費(fèi)用昂貴，毒副作用大，多有不同程度的致突變性。因此，人們把目光轉(zhuǎn)向天然抗腫瘤藥物的研發(fā)上，試圖從天然成分中尋找毒副作用小，作用獨(dú)特的抗腫瘤藥物。貫葉連翹(HypericumperforatumL.)是藤黃科金絲桃屬植物，又名貫葉金絲桃、趕山鞭、千層樓、圣·約翰草(St.John'swort)0由其提取物生產(chǎn)的制劑已在歐美諸國臨床上廣泛用于治療中、輕度抑郁癥。貫葉金絲桃素(hyperf0rin，HF)屬于間苯三酚類物質(zhì)，存在于貫葉連翹的花、果實、芽和葉中，其中花和嫩枝梢端提取物親脂性成分中含量最高。在植物中含量為(0.87.2%)(鄭清明等，不同產(chǎn)地貫葉連翹中貫葉金絲桃素含量分析比較·藥學(xué)實踐雜志·2002，0129-31)。最近的研究發(fā)現(xiàn)，貫葉金絲桃素除具有抗抑郁作用外，還具有抗腫瘤等藥理活性。貫葉金絲桃素能夠誘導(dǎo)，包括實體瘤和血液瘤例如慢性B淋巴細(xì)胞白血病，在內(nèi)的多種腫瘤細(xì)胞凋亡。并且呈劑量依賴性的抑制多種人原和鼠原的腫瘤細(xì)胞增殖，扣50在3-2(^皿之間。并且貫葉金絲桃素抑制多種腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲以及抑制腫瘤血管生長(CQuiney,etal.Hyperforin,anewleadcompoundagainsttheprogressionofcancerandleukemia？Leukemia.2006,20:1519_1525.)。貫葉金絲桃素已經(jīng)成為了目前國際上研究的熱點(diǎn)天然藥物之一。研究表明，貫葉金絲桃素抑制了Wistar大鼠自身的MT-450乳腺癌細(xì)胞的生長，這種作用和紫杉醇(paclitaxel)等效，但大鼠無任何急性中毒征象(HostanskaK,etal.HyperforinaconstituentofStJohn'swort(HypericumperforatumL.)extractinducesapoptosisbytriggeringactivationofcaspasesandwithhypericinsynergisticallyexertscytotoxicitytowardshumanmalignantcelllines.EurJPharmBiopharm.2003,56(1):121_32.)。有報道表明，貫葉金絲桃素能夠通過體外抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長來抑制血管生成。它能夠抑制MMP-2和尿激的分泌，加入貫葉金絲桃素后能顯著抑制慢性B淋巴細(xì)胞中MMP-9的分泌，抑制細(xì)胞外基質(zhì)的降解，而細(xì)胞外基質(zhì)的降解是腫瘤血管生成的一直重要表現(xiàn)(GiriecaLorusso,etal.Mechanisms3ofHyperforinasananti—angiogenicangiopreventionagent.EUROPEANJOURNALOFCANCER.2009,45:1474-1484)。由于貫葉金絲桃素具有顯著的抗腫瘤活性、體內(nèi)低毒性、副作用小、天然資源含量豐富的性質(zhì)，其具有作為新的抗腫瘤藥物的潛在開發(fā)價值。近年來關(guān)于貫葉金絲桃素提取制備工藝出現(xiàn)了很多深入的研究。Bombardelli等(BombardelliE,etal.Hyperforinderivatives,theusethereofandformulationscontainingthem.WO=9964388,1999-12-16.)將貫葉連翹花枝機(jī)械干燥并壓成立方體，240巴40°C用二氧化碳超臨界萃取，再用甲醇和正己烷反復(fù)萃取，得到的提取物中含有70%的HF，但此工藝成本較高。Bombardelli等(BombardelliE，etal.Hyperforinderivatives,theusethereofandformulationscontainingthem.WO03091193(Al),2003-11-06.)用甲醇提取貫葉連翹花枝，正己烷萃取，正己烷層用堿醇溶液萃取至沒有HF，堿醇層中和后用弱堿性離子交換樹脂過濾，其可選擇性保留HF，再用含磷酸的甲醇洗脫，甲醇洗脫液加水稀釋后用正己烷萃取，濃縮干燥后得到HF的含量為90%。此法工序復(fù)雜，不適宜大規(guī)模生產(chǎn)。楊得坡等(楊得坡等，植物中貫葉金絲桃素類成分的提取純化方法。C07C50/36，2004-11-24.)用加入復(fù)合穩(wěn)定劑的醇或酮攪拌浸提藥材，提取液濃縮并加水稀釋，用石油醚萃取，石油醚層用堿醇溶液堿化后靜置分層，堿醇層酸化后用石油醚萃取，所得提取物HF含量不低于65%。此法更適宜工業(yè)化生產(chǎn)。但貫葉金絲桃素遇光、氧、熱極易發(fā)生化學(xué)氧化降解(PoutaraudA，etal.ImprovedprocedureforthequalitycontrolofHypericumperforatumL.PhytochemAnal2001,12(6)=355-62.)0從而使其藥理活性大大降低。因此，還需要對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾與改造，使其能在常態(tài)下保持穩(wěn)定的化學(xué)特性，并保留或增強(qiáng)原有的活性。近年來，關(guān)于貫葉金絲桃素衍生物的研究逐漸成為熱點(diǎn)。ZanoliP.等人報M(ZanoliP.，etal.Pharmacologicalactivityofhyperforinacetateinrats.BehavPharmacol.2002，13(8):645_651.)貫葉金絲桃素乙酯，化學(xué)性質(zhì)十分穩(wěn)定，且具有良好的抗抑郁效果。ChatterjeeSS等人(ChatterjeeSS，etal.Stablehyperfonnsalts，methodforproducingsameandtheiruseintreatmentofalzheimer’sdisease.PCTWO99/41220，1999-8-19.)合成了貫葉金絲桃素-N，N二環(huán)己胺鹽用于治療阿爾茨海默癥。MelanieRothley等人報道了(MelanieRothley,etal.Hyperforinandaristoforininhibitlymphaticendothelialcellproliferationinvitroandsuppresstumor-inducedlymphangiogenesisinvivo.Int.J.Cancer.2009,125:34-42.)貫葉金絲桃素穩(wěn)定衍生物aristoforin在體外能夠抑制淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并且體內(nèi)抑制由于腫瘤引起的血管生成。目前在抗腫瘤方面，還未見有關(guān)于貫葉金絲桃素乙酯和貫葉金絲桃素-N，N二環(huán)己胺鹽的報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供了兩種貫葉金絲桃素衍生物，即貫葉金絲桃素乙酯和貫葉金絲桃素-N，N二環(huán)己胺鹽在制藥中的新用途。實現(xiàn)上述的目的技術(shù)方案如下具有結(jié)構(gòu)I1的貫葉金絲桃素乙酯和/或具有結(jié)構(gòu)I2的貫葉金絲桃素-N，N二環(huán)己權(quán)利要求具有結(jié)構(gòu)I1的貫葉金絲桃素乙酯和/或具有結(jié)構(gòu)I2的貫葉金絲桃素N，N二環(huán)己胺鹽在制備治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用。FSA00000245415500011.tif2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述腫瘤為白血病。3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述腫瘤為對多種抗腫瘤藥物耐藥的白血病。4.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述腫瘤為肝癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌或惡性黑色素瘤。5.一治療腫瘤的藥物，其特征在于，其活性成份為權(quán)利要求1所述的貫葉金絲桃素乙酯和/或貫葉金絲桃素-N，N二環(huán)己胺鹽。全文摘要本發(fā)明公開了具有結(jié)構(gòu)I1的貫葉金絲桃素乙酯和/或具有結(jié)構(gòu)I2的貫葉金絲桃素-N，N二環(huán)己胺鹽在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過藥理藥效學(xué)實驗證明，貫葉金絲桃素乙酯和貫葉金絲桃素-N，N二環(huán)己胺鹽對體外培養(yǎng)的人腫瘤細(xì)胞具有特異性的抑制增值、誘導(dǎo)凋亡、影響細(xì)胞周期等作用，為臨床腫瘤治療提供了新的藥物選擇。文檔編號A61K31/13GK101933917SQ20101026421公開日2011年1月5日申請日期2010年8月25日優(yōu)先權(quán)日2010年8月25日發(fā)明者劉勁蕓,劉忠,孫鳳,楊得坡,王一飛,王冬梅申請人:中山大學(xué)