專利名稱:穩(wěn)定化的黑皮質(zhì)素配體的制作方法
穩(wěn)定化的黑皮質(zhì)素配體
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明提供具有耐降解的C-端延伸以最小化或消除心血管效應(yīng)的黑皮質(zhì)素配體,其用于治療各種病理學(xué)情況。
背景技術(shù):
以下討論引用作者的許多出版物和出版物年。本文中提供該出版物的討論來展現(xiàn)更完整背景,且不解釋為承認(rèn)該出版物是"現(xiàn)有技術(shù)"。黑皮質(zhì)素是結(jié)合于5種知道的黑皮質(zhì)素受體(MC1R MC5R)家族的一組小肽 (Cone,R.D. , 2006, Endocr. Rev. ,27(7) :736-749)。它們?cè)从诔R姷那绑w蛋白,促-阿片黑皮質(zhì)素(POMC),其在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元中,及垂體腺中表達(dá)(Voisey,J et al., 2003,Curr. Drug Targets, 4 (7) :586-597)。POMC的蛋白水解切割除了幾種其他生物學(xué)重要的肽之外,產(chǎn)生α-黑皮質(zhì)素、β-黑皮質(zhì)素及Y-黑皮質(zhì)素和腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)。在5種知道的黑皮質(zhì)素受體中,MC3R和MC4R被認(rèn)為主要在哺乳動(dòng)物腦中表達(dá), MC3R在下丘腦的弓狀核中最高度表達(dá),及MC4R在丘腦,下丘腦和海馬中表達(dá)。MClR是主要在其被發(fā)現(xiàn)的周邊表達(dá),例如,在黑色素瘤細(xì)胞和黑色素細(xì)胞和免疫細(xì)胞中。在神經(jīng)元系統(tǒng)中,MClR僅存在于中腦的導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)的神經(jīng)元中,其中其被認(rèn)為在控制疼痛中具有作用。MC2R是主要在腎上腺皮質(zhì)中表達(dá),其中其控制類固醇生成。MC5R主要見于外周組織諸如許多外分泌腺的分泌上皮,其中其影響分泌和營養(yǎng)控制。起初認(rèn)為黑皮質(zhì)素肽具有主要針對(duì)皮膚色素沉著控制的生理學(xué)功能。但是,在最近25年,許多額外的生物學(xué)活性歸因于黑皮質(zhì)素。是激動(dòng)劑(活化物)或拮抗劑(抑制劑)的黑皮質(zhì)素肽已顯示控制許多生理學(xué)過程,包括色素沉著,飼喂,總體代謝速度/能量穩(wěn)態(tài),內(nèi)分泌和外分泌腺分泌,發(fā)炎,通過腎的鈉排泄,疼痛感覺,成癮行為和性沖動(dòng)。因此,已合成黑皮質(zhì)素類似物用于潛在調(diào)節(jié)和治療許多條件,包括重量調(diào)節(jié)(例如,肥胖癥,厭食癥和惡病質(zhì)),激素分泌,及許多外分泌腺的分泌過少(例如,Sjogren 氏綜合征),免疫-關(guān)聯(lián)病情和性功能障礙(Cone,R. D.,2006,Endocr. Rev.,27 (7) 736-749 ;Cone, R. D. ,2005, Nat. Neurosci,8(5) :571-578 ;Bazzani, C. , et al. ,2002, Resuscitation,52 (1) 109-115 ;and Bertonlini, A. , et al. ,2009, Pharmacol. Res, 59(1) :13-47)。但是,在調(diào)控這些生理學(xué)效應(yīng)中,黑皮質(zhì)素類似物也顯示導(dǎo)致高血壓 (Gruber,et al.,1984,Hypertension,6 :468_474and Klein,et al.,1985,Life Sci. 36 769-77 。實(shí)驗(yàn)研究顯示,黑皮質(zhì)素類似物(配體)的施用增加動(dòng)脈壓力和心律,且可產(chǎn)生心律失常(Gruber and Callahan, 1989,Am. J. Physiol. 257 :R681_R694 ;及未公開的數(shù)據(jù))。通過黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)=(His-Phe-Arg-Trp) (SEQ ID NO :1)達(dá)到黑皮質(zhì)素肽的生理學(xué)調(diào)控效應(yīng);此藥效團(tuán)是黑皮質(zhì)素-調(diào)控的活性必需的最小集合的氨基酸(Holder, J. R. and C. Haskel-Luevano, 2004,Med. Res. Rev. ,24(3) :325-356)。一般而言,全部黑皮質(zhì)素肽共享相同的活性核心序列=His-Phe-Arg-Trp (SEQ ID NO 1),包括促黑素神經(jīng)肽和促腎上腺皮質(zhì)素。在天然存在的黑皮質(zhì)素肽中此核心序列周圍的氨基酸被認(rèn)為影響特定黑皮質(zhì)素受體的相對(duì)親和性。已合成增強(qiáng)了黑皮質(zhì)素受體的親和性的各種非-天然存在的黑皮質(zhì)素類似物。例如,Klemes et al. 1986,Biochem. Biophys. Res. Commun. , 137(2) :722-728 合成了黑皮質(zhì)素類似物(Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp)禾Π (Ac-Nle-Asp-His-Phe-Arg Trp) (SEQ ID NO :2)。這些修飾的類似物顯示增加的促黑素活性潛力。已鑒定幾種其他黑皮質(zhì)素類似物。 已合成的,具有增加的潛力的黑皮質(zhì)素類似物的進(jìn)一步例包括(Ac-Nle-環(huán)-Asp-His-Phe-Arg-Trp-Lys)禾口 (Ac-Nle-環(huán)一Asp-His-D—Phe—Arg-Trp-Lys) (al—Obeidi et al. , 1989, J. Med. Chem,32(12) :2555-2561) ; (Ac-Nle-環(huán)-Asp-His-D-Nal2 ' -Arg-Trp-Lys)禾Π (Ac -i^-Cys-Glu-His-D-Na12' -Arg-Trp-Gly-Cys-Pro-Pro-Lys-Asp)(Balse-Srinivasan et al.,2003,J. Med. Chem.,46 (17) :3728-3733) ; (Ac-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-D-Trp-Gly) (al-Obeidi et al.,1989,Pept. Res.,2(1) :140-146);及(His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pr o-Val) (SEQID NO :3),(Masman et al.,2008,Bioorg. Med. Chem.,16(8) :4347-58)。但是,由于它們的強(qiáng)心血管副作用(Greenfieldet al.,2009,N. Eng. J. Med. 360 44-52 ;Gupta,2007, Reuters Aug.30,2007 ;Mishra,2007,Reuters Sept. 10,2007 ; Nordheim et al. ,2006, Peptides 27 :438-443),至今合成的黑皮質(zhì)素類似物尚未導(dǎo)致用于治療許多黑皮質(zhì)素-相關(guān)的病情之任何的政府調(diào)控機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的治療性藥物。黑皮質(zhì)素類似物的臨床無法接受的心血管效應(yīng)由位于第1藥效團(tuán)之內(nèi)的第2藥效團(tuán)(Arg-Trp)
帛。(Klein et al. , 1985, Life Sci. ,36 :769-775 ;Gruberand Callahan, 1989, Am. J. Physiol.,257 :R681_694)。此第2藥效團(tuán)被認(rèn)為與RFamide受體家族的亞組相互作用,導(dǎo)致中樞交感神經(jīng)激動(dòng)的升高及心血管效應(yīng)的起始。在或接近許多合成黑皮質(zhì)素配體的C-端的Arg-芳族二 -肽序列的一般化的基序是RFamide類的藥效團(tuán)的更包括性的描述(Gruber and Callahan, Am. J. Physiol. , 1989, 257 :R681-694 ;Klein et al.,1985, Life Sci. 36 :769-775 ;Clements et al.,2001, Biochem.Biophys. Res. Commun. , 284 1189-1193)。盡管長期相信黑皮質(zhì)素心血管效應(yīng)不可從非-高血壓,及潛在地治療性,生理學(xué)效應(yīng)分離,Gruber 和 Callahan 顯示這不正確(Gruber 和 Callahan 1989,Am. J. Physiol., 257 :R681-694)。黑皮質(zhì)素類似物的肽C-端延伸可最小化急性心血管活性,而保存黑皮質(zhì)素效應(yīng)。有效地,額外的C-端氨基酸通過在肽的分子結(jié)構(gòu)之內(nèi)更深運(yùn)動(dòng)暫時(shí)“隱藏”心血管/RFamide-樣藥效團(tuán)(Arg-Trp)。此不影響黑皮質(zhì)素活性地急性地抑制心血管效應(yīng)。雖然如此,在體外測定中已顯示了最小化的心血管活性的黑皮質(zhì)素類似物上的許多C-端延伸已顯示體內(nèi)降解。具有C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物可起初僅賦予期望效果, 但一旦降解發(fā)生,(Arg-Trp)RFamide藥效團(tuán)暴露,賦予關(guān)聯(lián)的心血管效應(yīng)。發(fā)明概述由于黑皮質(zhì)素藥物會(huì)潛在地用于處理慢性病情,它們不必需在延長的施用期間產(chǎn)生潛在地危險(xiǎn)的副作用。由此,慢性施用期間的黑皮質(zhì)素配體心血管效應(yīng)的阻遏對(duì)于臨床安全的黑皮質(zhì)素藥物重要。此需要自其治療性黑皮質(zhì)素效應(yīng)的黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)的RFamide 心血管作用的延長的體內(nèi)分離。此會(huì)允許黑皮質(zhì)素類似物用作用于各種病理學(xué)情況的治療,伴隨心血管病理學(xué)的最小風(fēng)險(xiǎn)。在本發(fā)明的第1方面,提供非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體及包含偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物,有效產(chǎn)生自RFamide心血管活性的黑皮質(zhì)素的慢性分離。在本發(fā)明的第2方面,提供非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體及包含偶聯(lián)于耐降解的 C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物,其選自至少1種氨基酸,至少1種修飾的氨基酸,肽模擬物,及其組合。在本發(fā)明的第3方面,提供非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體及包含偶聯(lián)于耐降解的 C-端延伸和耐降解的N-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物。發(fā)明詳述提供組合物,其包含非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸, 以抑制RFamide/心血管藥效團(tuán)的暴露和效應(yīng),及任選地偶聯(lián)于N-端延伸,以防止黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)的N C-端(S卩,從左至右)酶促降解。耐降解的C-端延伸是至少1種氨基酸,至少1種修飾的氨基酸,肽模擬物(非-氨基酸小分子),或其組合。耐降解的C-端延伸選擇為當(dāng)急性地或慢性地施用于人或哺乳動(dòng)物時(shí)抵抗在生理?xiàng)l件下降解,由此允許黑皮質(zhì)素類似物維持至少一種黑皮質(zhì)素生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)而呈現(xiàn)最小化的或消除的心血管效應(yīng)的C-端延伸。術(shù)語黑皮質(zhì)素類似物至少指黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)。黑皮質(zhì)素類似物是在生理?xiàng)l件下結(jié)合黑皮質(zhì)素受體的分子。黑皮質(zhì)素類似物包括非-天然存在的黑皮質(zhì)素多肽及黑皮質(zhì)素全長蛋白或多肽的截短的和/或修飾的形式。例如,在由Ml個(gè)氨基酸組成的"亞-肽"的蛋白水解切割之前的全長POMC蛋白。POMC的組織-特異性蛋白水解切割產(chǎn)生跨13個(gè)氨基酸 76 個(gè)氨基酸的尺寸的肽(Bicknell 和 Lawry, 2000, Encyclopediaof Stress, vol. 3,257-265, Academic Press) 0本文討論的增加了黑皮質(zhì)素受體活性的合成的,非-天然存在的黑皮質(zhì)素類似物是約7 12個(gè)氨基酸的尺寸。黑皮質(zhì)素類似物呈現(xiàn)與黑皮質(zhì)素受體的結(jié)合官能性。結(jié)合是活化(激動(dòng)劑)或抑制性(拮抗劑)的。除了肽之外,黑皮質(zhì)素類似物包括黑皮質(zhì)素的小分子類似物或其部分,其包括有機(jī)或無機(jī)化合物,或肽和小分子-即,肽模擬物的組合。黑皮質(zhì)素類似物可與黑皮質(zhì)素蛋白結(jié)構(gòu)上類似和/或在它們結(jié)合黑皮質(zhì)素受體的能力上功能性地類似。而且,黑皮質(zhì)素類似物通常含有藥效團(tuán)=His-Phe-Arg-Trp (SEQ ID NO 1)或其修飾的形式,或其結(jié)構(gòu)或功能肽模擬物。肽模擬物是模擬肽(氨基酸鏈)或1個(gè)氨基酸殘基的非-氨基酸分子。藥效團(tuán)是達(dá)到生理學(xué)效應(yīng)必需的氨基酸殘基的最小集合;或是結(jié)合和活化受體需要的氨基酸殘基的(對(duì)于受體)結(jié)構(gòu)模擬物的小分子。His-Phe-Arg-Trp (SEQ ID NO 1)和它們的類似物是用于調(diào)控的生理學(xué)效應(yīng)的黑皮質(zhì)素的藥效團(tuán)。因此,非-天然存在的黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)類似物可為設(shè)計(jì)為模擬黑皮質(zhì)素藥效團(tuán)核心序列肽的外觀或功能(包括受體活性的活化或滅活)的小肽或有機(jī)分子。心血管效應(yīng)包括高血壓的醫(yī)學(xué)定義,即高血壓的醫(yī)學(xué)定義(至少120/80mm Hg以上,及尤其如果140/90mm Hg(心臟收縮/心臟舒張)以上),對(duì)血管系統(tǒng),腎和心臟,及其他關(guān)聯(lián)的效應(yīng)的病理學(xué)效應(yīng)。相反,低血壓是當(dāng)血壓下落到醫(yī)學(xué)上接受的標(biāo)準(zhǔn)以下時(shí)。心律失常暗示在動(dòng)脈壓力的脈動(dòng)壓力波的正常對(duì)稱呈現(xiàn)中的改變。此可為增加的每分鐘心跳
6(心動(dòng)過速)或降低的每分鐘心跳(心動(dòng)過緩)。其也可暗示在心電圖的正常波圖案中的改變。實(shí)質(zhì)性降解指稱可相比無C-端延伸的黑皮質(zhì)素配體或黑皮質(zhì)素類似物,本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的黑皮質(zhì)素類似物的C-端延伸,N-端延伸,或其他區(qū)通過生理學(xué)酶和其他因素,以該方式或RFamide藥效團(tuán)通過RFamide受體或其他生理學(xué)系統(tǒng)再次能起始心血管效應(yīng)的程度的降解。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選的方面,具有抵抗實(shí)質(zhì)性降解的C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物是相比缺乏C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物,無大于50%,優(yōu)選無大于25%,及更優(yōu)選小于10%的施用的配體可重建心血管效應(yīng)的黑皮質(zhì)素類似物。藥物組合物包括本發(fā)明的配體,或其藥學(xué)可接受的鹽,及藥學(xué)可接受的載體。載體可為液體制劑,例如,緩沖的,等滲性水溶液。藥學(xué)可接受的載體也可包括賦形劑,諸如稀釋劑,載體等,及添加劑,諸如穩(wěn)定化劑,防腐劑,溶解劑,緩沖劑等。藥學(xué)可接受的鹽指稱自藥學(xué)可接受的非-毒性堿或酸,包括無機(jī)和有機(jī)酸和堿制備的鹽。源于無機(jī)堿的鹽包括鋁,銨,鈣,銅,鐵,亞鐵,鋰,鎂,錳,二價(jià)錳,鉀,鈉,鋅鹽和類似鹽。特別優(yōu)選的是銨,鈣,鋰,鎂,鉀和鈉鹽。源于藥學(xué)可接受的有機(jī),非-毒性堿的鹽包括伯,仲和叔胺,取代的胺,包括天然存在的取代的胺,環(huán)狀胺和堿性離子交換樹脂,諸如精氨酸,甜菜堿,咖啡因,膽堿,N, N' - 二芐乙烯二胺,二乙基胺,2- 二乙基氨基乙醇,2- 二甲基氨基乙醇,乙醇胺,乙二胺,N-乙基-嗎啉,N-乙基哌啶,葡萄糖胺,葡萄糖胺,組氨酸,海巴明,異丙基胺,賴氨酸,甲基葡萄糖胺,嗎啉,哌嗪,哌啶,聚胺樹脂,普魯卡因,嘌呤,可可堿, 三乙基胺,三甲胺,三丙基胺,緩血酸胺和類似堿性離子交換樹脂的鹽。當(dāng)本發(fā)明的化合物是堿性時(shí),鹽可從藥學(xué)可接受的非-毒性酸,包括無機(jī)和有機(jī)酸制備。該酸包括乙酸,苯磺酸,苯甲酸,樟腦磺酸,檸檬酸,乙磺酸,甲酸,富馬酸,葡萄糖酸,谷氨酸,氫溴酸,鹽酸,羥乙磺酸,乳酸,馬來酸,蘋果酸,扁桃酸,甲基磺酸,丙二酸,粘酸,硝酸,雙羥萘酸,泛酸,磷酸,丙酸,琥珀酸,硫酸,酒石酸,P"甲苯磺酸,三氟乙酸和類似酸。特別優(yōu)選的是檸檬酸,富馬酸,氫溴酸,鹽酸,馬來酸,磷酸,硫酸和酒石酸。需知,如本文所用,式I和式II的化合物意指也包括這些化合物的藥學(xué)可接受的鹽,諸如鹽酸鹽,等?;衔锪兄械目s寫具有它們的常規(guī)含義。由此,“Nle"是正亮氨酸;“Nal" 是正丙氨酸;‘‘D-Nal"是D-正丙氨酸;‘‘Asp"是天冬氨酸;‘‘His"是組氨酸;“D-Phe"是D-苯丙氨酸;“Arg"是精氨酸;“Trp"是色氨酸;“Lys"是賴氨酸;“Gly"是甘氨酸;“Pro"是脯氨酸;“Tyr"是酪氨酸;“Ser"是絲氨酸;“Cys” 是半胱氨酸;"Val"是纈氨酸;"D/L-Thr"是D-蘇氨酸或L-蘇氨酸;"D/L-Pro"是 D-脯氨酸或L-脯氨酸。此外,“Ac"是N-乙酰和"環(huán)"指稱環(huán)狀結(jié)構(gòu),其在文獻(xiàn)中也顯示為"c"或指稱為"內(nèi)酰胺"。額外的縮寫定義如下Nal(2' ) = D_2 ‘-奈基丙氨酸;tBu =叔-丁基; Hyp(Bzl)=芐基-L-羥基-脯氨酸;Mamb = 3-氨基甲基-苯甲酸;戊二酸接頭= CO- (CH2) 3-C0 ;Pen = L-青霉胺;Aib = 2-氨基異丁酸;Tie = 1,2,3,4-四氫異喹啉 _3_ 羧酸;Aba = 4-氨基-1,2. 4,5-四-氫-2-苯并氮草-3-酮;Pip =哌啶_2_羧酸;Nip =哌啶-3-羧酸;Tic =四氫喹啉-3-羧酸;Bip =聯(lián)苯胺;Phg = α -苯基-甘氨酸;Sar =肌氨酸;Azt = 3'-疊氮基-3'-脫氧胸苷;Oic =八氫吲哚-2-羧酸。
黑皮質(zhì)素類似物在一實(shí)施方式中,非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體如式I所示,及包含偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸和任選的N-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物Y1-Y2-Y3-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-X1-X2-X3 ( ζ I)其中Y1-Y2-Y3代表任選的穩(wěn)定化N-端殘基或氨基酸殘基模擬物;R1 R7代表黑皮質(zhì)素類似物的殘基;及X1-X2-X3代表耐降解的C-端殘基或氨基酸殘基模擬物??傊?,R1 R7 (R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7)可為許多知道的黑皮質(zhì)素類似物之一,其中各 7個(gè)殘基是獨(dú)立地氨基酸或肽模擬物。一些黑皮質(zhì)素類似物具有小于7個(gè)殘基。在另一實(shí)施方式中,R1 R7,共同,代表α黑皮質(zhì)素類似物。在另一實(shí)施方式中,R1 R7,共同,代表結(jié)合作為激動(dòng)劑或拮抗劑的MC3-MC5受體的黑皮質(zhì)素類似物。在一實(shí)施方式中,黑皮質(zhì)素配體由以上式I所示,且殘基R1 R7,共同,代表黑皮質(zhì)素類似物,其中R1缺失或選自半胱氨酸,正亮氨酸,乙?;恼涟彼幔阴;陌腚装彼?,D-苯丙氨酸,甲基化的D-苯丙氨酸,琥珀酸,ο-酞酸,酪氨酸,天冬氨酸,戊二酸,CO-順式-CH = CH-C0, η-戊?;唉?己?;?;R2缺失或選自脯氨酸,天冬氨酸,谷氨酸,甘氨酸,半胱氨酸,正亮氨酸,精氨酸, 琥珀酸,戊二酸,CO-順式-CH = CH-C0, η-戊?;唉?己?;籖3選自組氨酸,在第1或3位甲基化的組氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸, D-Nal (2 ‘ ),L-Nal(2'),琥珀酸,tButGly,Hyp φζ ),Mamb,Oic,正亮氨酸,Aba,β _ 丙氨酸和Tie ;R4選自組氨酸,D-苯丙氨酸,L-苯丙氨酸,D-Nal (2' ),pCl-D-Phe和(o-Phe) Phe ;R5選自精氨酸,高精氨酸,鳥氨酸,丙氨酸,脯氨酸,Pip, Nip, Tic, Phg, Sar和 Azt ;R6 選自D-色氨酸,L-色氨酸,D-Nal (2 ‘ ),L_Nal(2' ),Tic 和 Bip ;R7缺失或選自甘氨酸,谷氨酸,半胱氨酸,賴氨酸和2,3-二氨基-丙酸;其中如果R3 是 Aba,則 R4 選自=D-Phe, D-Nal (2')和 pCl-D-Phe ;以及其中如果R2是η-戊?;颚?己?;?,則R1,Y1,Y2和Y3缺失。在另一實(shí)施方式中,本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體如式II所示Y1-Y2-Y3-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8-R9-X1-X2-X3 (式 11)??傊?,R1 R9 (R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8-R9)可為許多知道的黑皮質(zhì)素類似物之一, 其中各9個(gè)殘基是氨基酸或肽模擬物。一些黑皮質(zhì)素類似物具有小于9個(gè)殘基。在另一實(shí)施方式中,R1 R9,共同,代表Y黑皮質(zhì)素類似物。在另一實(shí)施方式中,R1 R9,共同,代表結(jié)合作為拮抗劑的MC3受體的黑皮質(zhì)素類似物。在一實(shí)施方式中,黑皮質(zhì)素配體如以上式II所示,及殘基R1 R9,共同,代表黑皮質(zhì)素類似物,其中R1是酪氨酸;R2是纈氨酸;R3選自甲硫氨酸,正亮氨酸,半胱氨酸和L-青霉胺;
R4選自甘氨酸,D-半胱氨酸,L-半胱氨酸,天冬氨酸,及正亮氨酸;R5選自組氨酸,正亮氨酸,脯氨酸和Aib ;R6 選自苯丙氨酸,D-Nal (2‘)和 L_Nal(2');R7是精氨酸;R8選自色氨酸和D-Nal (2');以及R9缺失或選自天冬氨酸,半胱氨酸,青霉胺和賴氨酸。在另一實(shí)施方式中,提供如式I或式II所示的黑皮質(zhì)素配體,其中至少1個(gè)D-苯丙氨酸殘基,或全部D-苯丙氨酸殘基被鹵化(例如,氟或氯),以賦予與其對(duì)應(yīng)MC受體的改善的黑皮質(zhì)素蛋白-配體相互作用(Ippolito,J. A and D. W. Christianson,1992,Int. J. Biol.Macromol,14(4) :193-197)C-端延伸向式I的R1 R7黑皮質(zhì)素類似物,或向式II的R1 R9 (R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8-R9) 黑皮質(zhì)素類似物,提供C-端延伸,以便賦予C-端延伸的降解-抗性,以防止RFamide序列
的暴露。在一實(shí)施方式中,C-端延伸由式I的X1-X2-X3表示,其中X1選自半胱氨酸,D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪_2_酮環(huán);X2缺失或選自D_蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪_2_酮環(huán);以及X3缺失或選自D_蘇氨酸,L-蘇氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán)。在另一實(shí)施方式中,C-端延伸由式II的X1-X2-X3表示,其中X1選自半胱氨酸,D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪_2_酮環(huán);X2缺失或選自D_蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪_2_酮環(huán);以及X3缺失或選自D_蘇氨酸,L-蘇氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán)。在一實(shí)施方式中,C-端延伸具有慢性地抑制由羧基肽酶的降解的構(gòu)象。慢性地抑制降解的 C-端延伸的例包括 D-Pro-D-Pro, D-Thr-D-Pro, D-Thr-D-Pro-D-Thr 的二 -及三月太,如描述于 Tugyi et al. , 2005, Proc. Nat. Acad. Sci. (USA), 102 (2) :413_418。在另一實(shí)施方式中,脯氨酸模擬物(哌嗪-2-酮環(huán))取代D-Pro。在一種方法中, 脯氨酸模擬物如 Teixido, M.,et al.,2007,Brain Res. Bull. ,73(1-3) :103-107 所述合成。哌嗪-2-酮環(huán)也討論于 Bhatt,U. andjust, G.,2000,Helvetica Chimica Acta, 83 722-727。對(duì)于脯氨酸用哌嗪-2-酮環(huán)的取代而言,在2個(gè)相鄰α-氨基的氮分子之間的乙烯橋合并。此產(chǎn)生含有2個(gè)氮和4個(gè)碳原子的6-元環(huán),是類似于2個(gè)相鄰氨基酸殘基官能團(tuán)之間的脯氨酸環(huán)(盡管6-元)的結(jié)構(gòu)。根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo),黑皮質(zhì)素類似物的C-端延伸在配體自人或動(dòng)物身體內(nèi)的血流清除之前耐受實(shí)質(zhì)性降解。在一實(shí)施方式中,C-端延伸足夠穩(wěn)定,使得當(dāng)施用于人或動(dòng)物時(shí),黑皮質(zhì)素配體不導(dǎo)致心血管效應(yīng),或最小化了心血管效應(yīng)。由于肽,氨基酸和小分子的穩(wěn)定性廣泛改變,本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體在細(xì)胞外生理學(xué)環(huán)境中具有可變的長度C-端延伸。C-端延伸足夠穩(wěn)定(例如,長度,立體結(jié)構(gòu))使得在其自血流清除之前身體內(nèi)的任何降解不會(huì)再暴露心血管藥效團(tuán),以達(dá)到其效應(yīng)。
9
N-端延伸在本發(fā)明的一實(shí)施方式中,N-端延伸偶聯(lián)于黑皮質(zhì)素類似物。N-端延伸如式I中的Y1-Y2-Y3表示,其中Y1缺失或選自D_蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸和L-脯氨酸;Y2缺失或選自D_蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪_2_酮環(huán);以及Y3缺失或選自半胱氨酸,D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán)。在另一實(shí)施方式中,N-端延伸如式II中的Y1-Y2-Y3表示,其中Y1缺失或選自D_蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸和L-脯氨酸;Y2缺失或選自D_蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪_2_酮環(huán);以及Y3缺失或選自半胱氨酸,D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán)。式I的黑皮質(zhì)素配體的環(huán)化環(huán)化的黑皮質(zhì)素類似物顯示了改善的功效和穩(wěn)定性(Balse-Srinivasan et al. , 2003, J. Med. Chem. , 46 (17) :3728-3733 andBednarek et al. ,2001, Biochem. Biophys. Res. Commun. ,286(3) :641-645 ;Kavarana, et al. , 2002, J. Med. Chem. ,45(12) 沈44-2650)。在一實(shí)施方式中,將如式I所示的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體環(huán)化。以下顯示如何可將如式I所示的黑皮質(zhì)素配體環(huán)化的例的非限制性列表當(dāng)R1或R2是半胱氨酸和R7或X1是半胱氨酸時(shí),R1或R2和R7或X1之間的二硫鍵如描述于 Balse-Srinivasan et al. , 2003, J. Med. Chem. , 46 (23) :4965_4973。當(dāng) X1 是半胱氨酸時(shí),X2不缺失,但選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸和哌嗪-2-酮環(huán)。當(dāng)R1是正亮氨酸和R7是谷氨酸時(shí),R1和R7之間的內(nèi)酰胺橋如描述于Mayorov et al.,2006, J. Med. Chem. ,49 :1946-1952, andBednarek et al. ,2001, Biochem Biophys. Res.Commun. ,286(3) :641_645。當(dāng)R2是谷氨酸或天冬氨酸和R7是賴氨酸時(shí),R2和R7之間的側(cè)鏈內(nèi)酰胺橋如描述于 Bednarek et al. ,2001Biochem Biophys. Res. Commun. ,286(3) :641_645。當(dāng)R1是琥珀酸或ο-酞酸和R7是賴氨酸時(shí),R1和R7之間的內(nèi)酰胺閉合如描述于 Bednarek et al. ,2001, Biochem Biophys. Res. Commun. ,286(3) :641-645 禾口 Kavarana,et al.,2002,J. Med. Chem.,45 (12) :2644_2650。當(dāng)R2或R3是琥珀酸和R7是2,3_ 二氨基-丙酸時(shí),R2或R3和R7之間的內(nèi)酰胺閉合如描述于 Bednarek et al.,2001,Biochem Biophys. Res. Commun. , 286 (3) :641_645。通過目的線性肽的N和/或C末端之間的共價(jià)鍵形成來形成“主鏈”環(huán)化的肽。此一例描述于經(jīng)由烷基和酰胺組成的橋的2個(gè)酰胺氮的鍵合,如描述于Hess et al. ,2007, J. Med. Chem. ,50 :6201-6211。氨基酸-異構(gòu)體和非-標(biāo)準(zhǔn)氨基酸在一實(shí)施方式中,用于本發(fā)明的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體的本文提供的氨基酸殘基,可為D-或L-氨基酸或可用它們的非-標(biāo)準(zhǔn)物,異構(gòu)對(duì)應(yīng)物取代。例如,α氨基酸可用β氨基酸取代,及L氨基酸可用D氨基酸取代。本文公開的氨基酸不指定為D-或 L-異構(gòu)體,可為任何異構(gòu)體。式II的黑皮質(zhì)素配體的環(huán)化在另一實(shí)施方式中,將如式II所示的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體環(huán)化。當(dāng)R4 是天冬氨酸和R9是賴氨酸時(shí),可將如式II所示黑皮質(zhì)素類似物通過R4和R9之間的內(nèi)酰胺側(cè)鏈環(huán)化,如描述于(Bednarek etal. ,2001, Biochem Biophys. Res. Commun.,286 (3) 641-645 和 Mayorov et al.,2006,J. Med. Chem.,49 1946-1952)。用于MC受體結(jié)合的黑皮質(zhì)素配體在一實(shí)施方式中,本發(fā)明的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體是α黑色素細(xì)胞-刺激激素(MSH)基團(tuán)的MC4受體激動(dòng)劑,MC4受體拮抗劑,MC3受體激動(dòng)劑,MC3受體拮抗劑,和/或 MC5激動(dòng)劑。在另一實(shí)施方式中,本發(fā)明的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體是Y黑色素細(xì)胞-刺激激素基團(tuán)的MC3拮抗劑。在另一實(shí)施方式中,本發(fā)明的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體是Y黑色素細(xì)胞-刺激激素基團(tuán)的MC3激動(dòng)劑。肽的合成和延伸一般而言,公開的黑皮質(zhì)素配體通過例如固相合成來合成,及根據(jù)本領(lǐng)域知道的方法純化。將利用各種樹脂和試劑的許多熟知的方法用于制備本發(fā)明的化合物。有機(jī)分子根據(jù)本領(lǐng)域知道的方法類似地合成。本發(fā)明的配體可為任何藥學(xué)可接受的鹽形式。本發(fā)明的配體的酸加成鹽在適合的溶劑中自分子和過量的酸,諸如鹽酸,氫溴酸,硫酸,磷酸,乙酸,三氟乙酸,馬來酸,琥珀酸或甲基磺制備。其中配體包括酸性部分,適合的藥學(xué)可接受的鹽可包括堿金屬鹽,諸如鈉或鉀鹽,或堿土金屬鹽,諸如鈣或鎂鹽。在一實(shí)施方式中,肽通過固相方法通過使用游離C-端肽的P-芐氧基-苯甲醇樹脂用手動(dòng)合成制備。全部氨基酸作為9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)-衍生物偶聯(lián),如描述于 Fields et al. , 1992, Synthetic Peptides :A User' s Guide, W. H. Freeman and Company, New York,77-183 ;及 Fields and Noble,1990, Int. J. Peptide Protein Res., 35 :161-214 ;Fieldset al. , 1991, Peptide Res. 4 :95-101。簡言之,叔-丁基在 N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中應(yīng)用為用于1-羥基苯并三唑/N,N' 二異丙基碳二亞胺原位活性酯方法的保護(hù)基。分別通過DMF中的20%哌啶,或DMF中的2%哌啶和2%二氮雜二環(huán)[5. 4. 0] 十一碳-7-烯除去Fmoc基。通過茚三酮測試和/或靛紅測定監(jiān)控偶聯(lián)及脫保護(hù)的成功。合成完成之后,將肽用含有5%水的三氟乙酸自樹脂切割。通過RP-HPLC在Supelcosil C18 柱上通過使用梯度洗脫用下列洗脫液進(jìn)行粗產(chǎn)物純化A,水中的0. 三氟乙酸;及B,乙腈/水(80 20, vol/vol)中的0.1%三氟乙酸。用5%洗脫液B等度洗脫5min之后,經(jīng) 25分鐘于室溫及用4mL/min的流速產(chǎn)生O 25%B或5 30%B的線性梯度。以λ = 214nm 進(jìn)行 UV 檢測。通過分析 RP-HPLC 在 Synergi (4. 6mm X 25cm,MAX-RP 8θΑ,4 μ m)柱上進(jìn)行肽純度研究。以下參考文獻(xiàn)公開合成本發(fā)明中具體化的殘基和連接的方法。對(duì)于哌嗪-2-酮 if-BBhatt, U and Just, G,2000, Helvetica ChimicaActa, 83 :722-727 ;Mohamed, N.,et al.,1998,Tetrahedron Lett. ,39 :8213-8216 ;Teixido,M.,et al. ,2007,Brain Res. Bull.,73 (1-3) : 103-107。對(duì)于 Nal (2')-見 Kavarana,MJ et al.,2000,J. Med. Chem., 45 :2644-22650 ;and Holder, J. R.,et al.,2002,J.Med. Chem. ,45 :5736_5744。對(duì)于 Aba-D-Phe, Aba-pCL-D-Phe 和 Aba-D-Nal (2 ‘)的二肽模擬物-見 Ballet, S.,et al., Bioorganic&Med. Chem. Lett.,2007,17 :2492_2498。對(duì)于 OIC,BIP 和 PIP-見 Bednarek, Μ. Α.,et al.,2007,J. Med Chem, 50 :2520_2526。對(duì)于戊二酸接頭-見 Mayorov,Α. V. et al. ,,2008, J. Med. Chem. 51 :187_195。對(duì)于 Hyp (Bzl),t_ 丁基甘氨酸和 MAMB-見 Grieco, P.,et al. ,2007, Peptides 28:1191—1196。對(duì)于 Azt,Pip, Nip, Tic, Oic-見 Bednarek, Μ. Α. ,2007, Chem. Biol. DrugDesign,69 :350-355。對(duì)于內(nèi)酰胺環(huán)化-見 Mayorov,Α. V,. et al. ,2006,J. Med. Chem. 49 :1946_1952。對(duì)于 Pen 和 Aib-見 Balse-Srinivasan. P. ,et al.,2003 J. Med. Chem, 46 :4965-4973。對(duì)于 η-戊?;?η-己?;?見 Cheung A. W. -H., et al.,2003,Bio-organic&Med. Chem. Lett. , 13 1307-1311。ORN (鳥氨酸)禾口 homoArg-見 Holder, J. R. et al.,2003,Peptides, 24 :73_82。對(duì)于 Phg-見 Holder, J. R. et al.,2002, J. Med. Chem.,45,3073-3081。對(duì)于 2,3 二氨基丙酸-見 2004,Vig, B. S.,et al.,J. Med. Chem. ,47(2) :446-455。使用本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體檢定心血管效應(yīng)有許多直接和間接檢定本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的降解和心血管效應(yīng)的本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)知道,顯而易見或可利用的可能的方法。使用本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體檢定急性和慢性心血管測試,以便測定是否本文所述的C-端延伸可保護(hù)RF-藥效團(tuán)免于暴露。以此方式,間接,但以治療可應(yīng)用的方式測量 C-端降解抗性。此外,用急性和慢性心血管測量,將黑皮質(zhì)素配體導(dǎo)入/施用到人或哺乳動(dòng)物后,及直到黑皮質(zhì)素配體自人或哺乳動(dòng)物身體血流清除,則知道心血管效應(yīng)。急性心血管記錄允許經(jīng)數(shù)小時(shí)時(shí)期的這些藥物作用的連續(xù)分析,允許配體施用后效應(yīng)的密集觀察。 急性心血管測試的心血管參數(shù)包括直接動(dòng)脈壓力組分(心臟收縮,心臟舒張,平均動(dòng)脈壓力,及心律)和EKG。經(jīng)Millar固體狀態(tài)壓力變換器在股動(dòng)脈中測量動(dòng)脈壓力組分。此允許任何動(dòng)脈壓力/心律異常的更精確的評(píng)估。自Millar變換器的信號(hào)在跨音速動(dòng)脈壓力模塊中放大,然后發(fā)送到計(jì)算機(jī)運(yùn)行EMKA軟件(EMKA Technologies, Inc. ,Falls Church, VA)。一般逐秒測量動(dòng)脈壓力組分信號(hào),盡管毫秒或逐搏分析是替代性的測量。后來的分析可回顧地進(jìn)行,經(jīng)實(shí)驗(yàn)回放。起初,待分析的動(dòng)脈壓力組分包括峰MAP (平均動(dòng)脈壓力)和 HR(心律)應(yīng)答,及各相應(yīng)曲線下面積。因?yàn)楸┞读?RF藥效團(tuán)的黑皮質(zhì)素類似物產(chǎn)生延長及可變壓力和心動(dòng)加速作用,計(jì)算各曲線下面積(AUC)(見,例如,D' Angelo et al. ,2005, Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , 288 (4) :Η18^_Η18;35),如是描述各心血管參數(shù)曲線的方程的第1和第2導(dǎo)數(shù)。對(duì)于慢性心血管測試,遙測系統(tǒng)允許經(jīng)長時(shí)間(數(shù)天或周)監(jiān)控多動(dòng)物。各動(dòng)物僅記錄數(shù)秒(例如,5 IOs)/分鐘,以最大化電池生命及允許監(jiān)控多動(dòng)物。但是,現(xiàn)在較新模型允許無線再充電移植的發(fā)射機(jī)。以下描述了用于慢性心血管測試的一種遙測模型。遙測系統(tǒng)可用于用直接輸入到運(yùn)行EMKA eCgAut0-Cardi02+的計(jì)算機(jī)同時(shí)和連續(xù)監(jiān)控。在此方法中,使用無菌過程將遙測發(fā)射機(jī)手術(shù)移植到大鼠腹腔。手術(shù)期間,將發(fā)射機(jī)的導(dǎo)管插入腹部主動(dòng)脈及用組織粘合劑緊固。將遙測單元ECG電極皮下縫合到右上胸肌肉和左上部腹部壁肌肉。這些單元同時(shí)提供ECG和動(dòng)脈壓力信號(hào)。動(dòng)物一般允許7 10天的手術(shù)恢復(fù),使用動(dòng)脈壓力和HR的晝夜節(jié)律的返回作為目的度量。對(duì)于急性實(shí)驗(yàn),將股IV 線隧通到上背部,取出及存儲(chǔ)在鋼鈕組件之內(nèi),縫合到動(dòng)物的背部。發(fā)射機(jī)會(huì)使用鉛II構(gòu)型產(chǎn)生動(dòng)脈壓力信號(hào)(經(jīng)插導(dǎo)管的腹部主動(dòng)脈)和ECG信號(hào)。對(duì)此,將鉛移植在胸的右上部象限的肌肉組織下,及左上部腹部區(qū)的肌肉組織之內(nèi)。這些過程良好描述于文獻(xiàn)(Stieber 等人,2006,Mol. Pharmacol.,69 (4) 1328-37),以及制造商的流程。對(duì)于黑皮質(zhì)素配體慢性施用到大鼠模型,使用用于IV輸注的Alza微型泵及持續(xù)的釋放顆粒(Strader, A. D.,et al.,2007,J. Pharmacol. Exp. Ther. ,322(3) :1153-1161 ; and Innovative Research of America,SarasotEi,F(xiàn)L) 。 H明的女臺(tái)效每天劑量是lmg/kg/天持續(xù)14天,及滴定達(dá)10mg/kg/天。作為在微型泵中藥物降解的對(duì)照,運(yùn)行并行溫育的(37°C )對(duì)照及通過高效液相層析(HPLC)評(píng)定任何肽破斷。施用方法包括注射,口腔,鼻和粘膜施用。如果通過注射施用,注射可為靜脈內(nèi),皮下,肌內(nèi),腹膜內(nèi)或其他本領(lǐng)域知道的手段。本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體可通過任何本領(lǐng)域知道的手段配制,包括但不限制于作為片劑,膠囊,小膠囊,懸浮液,粉劑,凍干制劑,栓劑,目鏡滴,皮膚貼劑,口腔可溶性制劑,噴霧劑,氣霧劑等的制劑,及可與緩沖劑,結(jié)合劑,賦形劑, 穩(wěn)定劑,抗氧化劑和本領(lǐng)域知道的其他劑混合及配制。鼻施用包括本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的任何形式的鼻內(nèi)施用。本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體可在水溶液,諸如包括鹽水,檸檬酸鹽或其他常見的賦形劑或防腐劑的溶液中。黑皮質(zhì)素配體也可為干,粉或凍干制劑。當(dāng)用本發(fā)明的不同黑皮質(zhì)素配體施用時(shí),減少的心血管效應(yīng)(血壓和心律失常) 在人或動(dòng)物中相對(duì)。當(dāng)比較本發(fā)明的具有C-端延伸的黑皮質(zhì)素配體對(duì)比其無C-端延伸的對(duì)應(yīng)物之間時(shí),其相對(duì)減少。包含本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的藥物組合物和/或試劑盒用于調(diào)控及治療跨重量調(diào)節(jié)(例如,肥胖癥,厭食癥和惡病質(zhì)),激素分泌,外分泌腺分泌過多,免疫-關(guān)聯(lián)病情和性功能障礙的許多病情。應(yīng)用跨激素,神經(jīng)元,酶促和其他細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)機(jī)理的本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)還影響身體情況諸如重量調(diào)節(jié)(例如,肥胖癥,厭食癥和惡病質(zhì)),激素分泌 (例如,干眼和/或干口綜合征),以及免疫-關(guān)聯(lián)病情和性功能障礙。許多這些生理學(xué)機(jī)理的功能障礙導(dǎo)致疾病。在本申請(qǐng)中,生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)可區(qū)分及不同于心血管效應(yīng)。在一實(shí)施方式中,本發(fā)明的黑皮質(zhì)素配體的生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)致使使用激動(dòng)劑黑皮質(zhì)素類似物(al-0beidi et al. ,J. Med Chem,1989,32 (12),2555-2561)。在另一實(shí)施方式中,生理學(xué)調(diào)控效應(yīng)致使使用拮抗劑黑皮質(zhì)素類似物(Hruby et al. , 1995, J.Med. Chem., 38 :3454-3461 Jayawickreme et al.,1994,J.Biol. Chem.,269 :29846-29854)??傊?,提供非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,包括偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸(及任選地,N-端延伸),以產(chǎn)生具有減小的或消除的心血管活性而保留期望的黑皮質(zhì)素調(diào)控活性的穩(wěn)定的黑皮質(zhì)素配體的黑皮質(zhì)素類似物。將本申請(qǐng)引用的全部參考文獻(xiàn),特別是針對(duì)合成方法的全部參考文獻(xiàn)如在本文明確地引用地整體并入本文。
權(quán)利要求
1.非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其包含偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸的黑皮質(zhì)素類似物。
2.權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中耐降解的C-端延伸選自至少1 種氨基酸,至少1種修飾的氨基酸,肽模擬物,及其組合。
3.權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中耐降解的C-端延伸選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮-環(huán)。
4.權(quán)利要求3的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其還包含N-端延伸。
5.權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其如式I所示 Y1-Y2-Y3-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-X1-X2-X3 (式 I)其中各R1 R7獨(dú)立地是氨基酸或肽模擬物;Y1缺失或選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸和L-脯氨酸;Y2缺失或選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán);Y3缺失或選自半胱氨酸,D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán);X1選自半胱氨酸,D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸和L-脯氨酸和哌嗪-2-酮環(huán); X2缺失或選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán);以及 X3缺失或選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸和哌嗪-2-酮環(huán)。
6.權(quán)利要求5的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中R1缺失或選自半胱氨酸,正亮氨酸,乙?;恼涟彼?,乙酰化的半胱氨酸,D-苯丙氨酸,乙?;腄-苯丙氨酸,琥珀酸,ο-酞酸,酪氨酸,天冬氨酸,戊二酸,CO-順式-CH = CH-C0, η-戊?;?,及η-己?;?;R2缺失或選自脯氨酸,天冬氨酸,谷氨酸,甘氨酸,半胱氨酸,正亮氨酸,精氨酸,琥珀酸,戊二酸,CO-順式-CH = CH-C0, η-戊?;唉?己?;籖3選自組氨酸,在第1或3位甲基化的組氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,D-Nal (2‘), L-Nal (2 ‘),琥珀酸,丨8肚617,辦?(俶1),1&111113,0化,正亮氨酸,八匕3,β-丙氨酸,及Tic; R4選自組氨酸,D-苯丙氨酸,L-苯丙氨酸,D-Nal (2' ),pCl-D-Phe和(O-Phe)Phe ; R5選自精氨酸,高精氨酸,鳥氨酸,丙氨酸,脯氨酸,Pip, Nip, Tic, Phg, Sar和Azt ; R6 選自D-色氨酸,L-色氨酸,D-Nal (2 ‘ ), L-Nal(2' ),Tic 和 Bip ; R7缺失或選自甘氨酸,谷氨酸,半胱氨酸,賴氨酸和2,3- 二氨基-丙酸; 其中如果 R3 是 Aba,則 R4 選自=D-Phe, D-Nal (2 ‘)和 pCl-D-Phe ;以及其中如果R2是η-戊?;颚?己酰基,則R1jY1, Y2和Y3缺失。
7.權(quán)利要求6的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中黑皮質(zhì)素配體被環(huán)化。
8.權(quán)利要求7的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中黑皮質(zhì)素配體通過選自下列的部分被環(huán)化當(dāng)R1或R2是半胱氨酸,且R7或X1是半胱氨酸時(shí),R1或R2和R7或X1之間的二硫鍵; 當(dāng)R1是正亮氨酸,且R7是谷氨酸時(shí),R1和R7之間的內(nèi)酰胺橋; 當(dāng)R2是谷氨酸或天冬氨酸,且R7是賴氨酸時(shí),R2和R7之間的側(cè)鏈內(nèi)酰胺橋; 當(dāng)R1是琥珀酸或ο-酞酸,且R7是賴氨酸時(shí),R1和R7之間的內(nèi)酰胺閉合;以及當(dāng)R2或R3是琥珀酸,且R7是2,3- 二氨基-丙酸時(shí),R2或R3和R7之間的內(nèi)酰胺閉合。
9.權(quán)利要求8的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中當(dāng)X1是半胱氨酸時(shí),X2不缺失。
10.權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其如式II所示 Y1-Y2-Y3-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8-R9-X1-X2-X3(式 II)其中各R1 R9獨(dú)立地是氨基酸或肽模擬物;Y1缺失或選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸和L-脯氨酸;Y2缺失或選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán);Y3缺失或選自半胱氨酸,D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸和哌嗪-2-酮環(huán);X1選自半胱氨酸,D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán); X2缺失或選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,D-脯氨酸,L-脯氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán);以及 X3缺失或選自D-蘇氨酸,L-蘇氨酸,及哌嗪-2-酮環(huán)。
11.權(quán)利要求10的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中 R1是酪氨酸;R2是纈氨酸;R3選自甲硫氨酸,正亮氨酸,半胱氨酸和L-青霉胺;R4選自甘氨酸,D-半胱氨酸,L-半胱氨酸,天冬氨酸,及正亮氨酸;R5選自組氨酸,正亮氨酸,脯氨酸和Aib ;R6 選自苯丙氨酸,D-Nal (2 ‘)和 L-Nal (2 ‘);R7是精氨酸;R8選自色氨酸和D-Nal (2 ‘);以及R9缺失或選自天冬氨酸,半胱氨酸,青霉胺和賴氨酸。
12.權(quán)利要求11的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中黑皮質(zhì)素配體被環(huán)化。
13.權(quán)利要求12的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中當(dāng)R4是天冬氨酸和R9是賴氨酸時(shí),黑皮質(zhì)素配體通過R4和R9之間的內(nèi)酰胺側(cè)鏈被環(huán)化。
14.權(quán)利要求6的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中黑皮質(zhì)素類似物是MC4受體激動(dòng)劑,MC4受體拮抗劑,MC3受體激動(dòng)劑,MC3受體拮抗劑,和/或MC5激動(dòng)劑。
15.權(quán)利要求11的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中黑皮質(zhì)素類似物是MC3拮抗劑。
16.權(quán)利要求6的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體,其中當(dāng)R4是D-苯丙氨酸時(shí),D-苯丙氨酸在對(duì)位被鹵化。
17.藥物組合物,其包含權(quán)利要求1的非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體和藥學(xué)鹽。
全文摘要
本發(fā)明公開了用于非-天然存在的黑皮質(zhì)素配體的組合物和方法,包括偶聯(lián)于耐降解的C-端延伸(及任選地,N-端延伸)的黑皮質(zhì)素類似物,以產(chǎn)生具有減小的或消除的心血管活性而保留期望的黑皮質(zhì)素調(diào)控活性的穩(wěn)定的黑皮質(zhì)素配體。
文檔編號(hào)A61K38/10GK102574894SQ201080038469
公開日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月31日
發(fā)明者K·A·格魯伯 申請(qǐng)人:張力控制股份有限公司