專利名稱：紅豆杉多糖免疫佐劑及含有該佐劑的流感疫苗的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種紅豆杉多糖免疫佐劑，還涉及含有紅豆杉多糖免疫佐劑的流感疫苗，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
曼迪亞紅豆杉(Taxus madia)屬于紅豆杉中的一個天然雜交品種，其母本為東北紅豆杉(T. cuspidata)，父本為歐洲紅豆杉(T. bauata)，在美國、加拿大生長已有近100年的歷史。我國20世紀(jì)90年代中期從加拿大引種，并通過人工繁殖后，在四川、廣西、山東和云南等地栽培。人工栽培的曼迪亞紅豆杉為常綠灌木，生物量十分巨大，且生長時間短，生長速度快，主根不太明顯，但側(cè)根卻很發(fā)達(dá)，且枝葉茂盛，萌發(fā)力強，能耐-25°C的低溫。曼迪亞紅豆杉通過人工栽培、選育，目前已有10多個品系，曼迪亞紅豆杉的年生長40 50cm， 最高可達(dá)60 70cm，5年生樹枝葉剪下后可產(chǎn)“紫杉醇”原料1. 5kg以上，剪過的樹木次年又可萌生新枝葉，且新枝葉的生物量還大于頭年老枝葉的生物量。故曼迪亞紅豆杉是經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)可用作提取“紫杉醇”的紅豆杉品種之一，目前主要作為提取“紫杉醇”的原料使用。專利申請?zhí)枮?00610053803，發(fā)明名稱為“紅豆杉多糖在制藥中的應(yīng)用”的中國專利申請，涉及紅豆杉多糖在制備治療肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、前列腺癌等癌癥的藥物中的應(yīng)用，同時涉及紅豆杉多糖在制備抗腫瘤復(fù)方藥物中的應(yīng)用，涉及紅豆杉多糖在制備增強機體的耐受力的藥物中的應(yīng)用。紅豆杉多糖具有優(yōu)異的提高機體免疫功能的活性和抑制腫瘤生長和腫瘤轉(zhuǎn)移的作用，并能增強機體的耐受力。以紅豆杉多糖為活性成份的藥物，在臨床試驗中具有緩解和穩(wěn)定晚期肺、胃、大腸、乳腺、前列腺癌的療效，具有保護(hù)人體的T細(xì)胞功能，使癌癥患者免疫功能保持在較正常的狀態(tài)。但沒有涉及紅豆杉多糖在佐劑領(lǐng)域的應(yīng)用。研究表明紅豆杉多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用，從紅豆杉中分離純化出的紅豆杉多糖。 腹腔內(nèi)注射能顯著增加小鼠脾重，促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能及小鼠血清溶血素的形成，對環(huán)磷酰胺所致小鼠免疫器官的萎縮，白細(xì)胞的減少，腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的降低，以及小鼠血清溶血素的形成減少等，具有明顯對抗作用。同時具有明顯的提高荷瘤小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)的作用，以MTT法檢測的荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和對NK細(xì)胞活性的影響，也顯示出具有提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和促進(jìn)NK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞的作用。另外，紅豆杉多糖還具有促進(jìn)細(xì)胞生長、抗腫瘤、抗輻射、抗氧化、抗衰老等作用，對核酸內(nèi)切酶活性和DNA 修復(fù)合成也有增強作用，是一重要的天然生物活性物質(zhì)。佐劑應(yīng)用于疫苗中，能夠增強抗原的免疫原性，提高疫苗的效果，使疫苗在價格上具有明顯優(yōu)勢。尤其在流感疫苗中使用佐劑，不僅可增強免疫原性，還可以降低抗原用量， 特別在應(yīng)對流感大流行時，佐劑的使用可有效降低抗原用量，擴(kuò)大接種人群數(shù)量，降低疫苗生產(chǎn)企業(yè)因產(chǎn)量不足而帶來的巨大壓力。目前應(yīng)用較為廣泛的佐劑主要有鋁佐劑(氧化鋁、氫氧化鋁、磷酸鋁)、MF59 (是一種包含1%的鯊烯，0. 5%的Tween80和0. 5%的三油酸聚山梨脂的水包油乳液)、LTK63和新型佐劑。目前上市流感疫苗使用的佐劑主要是鋁佐劑和MF59。但事實上鋁佐劑對蛋白亞單位疫苗誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生的能力較弱，不能有效地誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，在某些情況下還會產(chǎn)生與過敏反應(yīng)有關(guān)的IgE，其副作用難以避免；MF59作為佐劑使用時，在增加免疫原性的同時也增強了反應(yīng)原性，如接種部位紅、腫、熱、痛等癥狀增加。此外，由于存在安全性及副作用等問題，LTK63和其它新型佐劑如殼聚糖、ISCOMs等，要作為流感疫苗的佐劑，目前還只限于研究階段。因此，隨著各種新發(fā)流感在全世界的爆發(fā)和對人感染性的增強，，加快了新型流感疫苗的研究，尋求更高安全性和免疫原性的佐劑仍然是流感疫苗發(fā)展的一個需要。佐劑發(fā)揮作用是由于能增強抗原的免疫原性，提高疫苗效果。因此佐劑一般可在多種疫苗中使用，如目前的鋁佐劑。因而佐劑的研究不僅對流感，而且對其它感染性疾病的防治也有很高的價值。流行性感冒(簡稱流感)是指由流感病毒引起，具有高度傳染性的急性呼吸道傳染病。流感發(fā)病快，傳染性強，發(fā)病率高，主要通過空氣飛沫傳播。流感的流行沒有明顯的季節(jié)性，只是冬末春初發(fā)病率稍高一點，而且?guī)缀趺磕甓紩l(fā)生，要么在局部爆發(fā)，要么大規(guī)模流行，甚至造成世界規(guī)模的大流行，嚴(yán)重危害了人類的健康和生命，給社會造成沉重的負(fù)擔(dān)。到目前為止，接種流感疫苗被認(rèn)為是預(yù)防流感發(fā)生與傳播的最佳途徑。由于流感病毒變異很快，通常每年的流行類型都有所不同，生產(chǎn)企業(yè)一般都在世界衛(wèi)生組織(WHO)指導(dǎo)下選擇流感病毒毒株進(jìn)行疫苗生產(chǎn)，每年接種最新的流感疫苗才能達(dá)到預(yù)防的效果。一旦流感病毒變異造成大規(guī)模流行或者是世界性流行，疫苗需求量必將猛增，但目前由于受流感疫苗生產(chǎn)工藝的限制，短時間內(nèi)是難于提供大規(guī)模流行所需的足量疫苗的，因此，應(yīng)用免疫佐劑，減少疫苗用量并提高免疫效果，是應(yīng)對大規(guī)模流行期間疫苗量不足的途徑之一。經(jīng)系統(tǒng)查閱文獻(xiàn)和專利，目前未發(fā)現(xiàn)關(guān)于紅豆杉多糖具有免疫佐劑作用的報道。

發(fā)明內(nèi)容
為解決目前免疫佐劑單一，副作用難以避免，疫苗生產(chǎn)供應(yīng)量有限，難以滿足感染性疾病暴發(fā)時急需提供大量疫苗的要求，以及疫苗起效時間慢等諸多問題，本發(fā)明提供一種能有效提高疫苗免疫效果，降低疫苗用量的紅豆杉多糖免疫佐劑。本發(fā)明的另一個目的在于提供一種含有紅豆杉多糖免疫佐劑的流感疫苗。本發(fā)明提供的紅豆杉多糖免疫佐劑由下列質(zhì)量比的組分組成 紅豆杉多糖0. 001 100%
載體0 99. 999%O所述載體由下列質(zhì)量比的組分組成 乳化劑20 70% 助乳化劑 20 70% 油相 1 50% 水相 1 30%。所述乳化劑為常規(guī)的TweenSO或聚氧乙烯蓖麻油中的一種，或者為質(zhì)量混合比為3 2 2 3的常規(guī)TweenSO與SpanSO的混合物，或者為質(zhì)量混合比為1 1的常規(guī)聚氧乙烯蓖麻油與SpanSO的混合物。所述助乳化劑為常規(guī)的1，2_丙二醇或聚乙二醇400中的一種。所述油相為常規(guī)的肉豆蔻酸異丙酯或油酸乙酯或注射用大豆油中的一種。所述水相為注射用水或者含有藥物或疫苗成分的注射用水溶液。本發(fā)明提供的紅豆杉多糖免疫佐劑，優(yōu)選下列質(zhì)量比 紅豆杉多糖0. 1 100%
載體0 99. 9%O本發(fā)明提供的一種含有紅豆杉多糖免疫佐劑的流感疫苗的組成是紅豆杉多糖免疫佐劑與流感疫苗血凝素的質(zhì)量比為5(Γ183500，其中，所述紅豆杉多糖免疫佐劑由下列質(zhì)量比的組分組成
紅豆杉多糖0. 001 100%
載體0 99. 999%O所述紅豆杉多糖免疫佐劑與流感疫苗血凝素的質(zhì)量比優(yōu)選76 183500。所述紅豆杉多糖為市購產(chǎn)品，或者為常規(guī)方法提取的產(chǎn)品。本發(fā)明提供的紅豆杉多糖免疫佐劑與傳統(tǒng)氫氧化鋁佐劑相比，具有以下優(yōu)點
1)紅豆杉多糖是從紅豆杉枝條中提取的一種天然物質(zhì)，紅豆杉多糖作為免疫佐劑使用，取得了應(yīng)用性的實驗結(jié)果，其安全性高、副作用小。將含有紅豆杉多糖佐劑的流感疫苗肌肉注射小鼠，4小時內(nèi)觀察小鼠活動性無明顯減弱，未見全身不良反應(yīng)；而用含氫氧化鋁佐劑的流感疫苗肌肉注射小鼠，可觀察到小鼠活動性明顯減弱，注射局部腫脹明顯。2)用紅豆杉多糖為佐劑的流感疫苗，不僅制備方法簡便，而且疫苗質(zhì)量容易控制； 而以氫氧化鋁為佐劑制備流感疫苗，制備和存儲過程中，影響因素較多，對于疫苗的質(zhì)量較難控制。3)用紅豆杉多糖作為流感疫苗佐劑，可更好的提高疫苗免疫原性，大大降低疫苗抗原用量。例如通過以紅豆杉多糖為佐劑的流感疫苗和以氫氧化鋁為佐劑的流感疫苗免疫小鼠發(fā)現(xiàn)，以紅豆杉多糖為佐劑使用的疫苗抗原用量只是以氫氧化鋁為佐劑的疫苗抗原用量的一半或者更少，但免疫保護(hù)效果卻是一樣的。


圖1為不同接種組在56天內(nèi)的血凝抑制抗體效價變化； 圖2為不同接種組在加免后2周的血凝抑制抗體效價；
圖3為不同接種組在接種后7天內(nèi)的體重增長情況； 圖4為不同接種組在加免后2周的血凝抑制抗體效價。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明，但并不以此來限定本發(fā)明。本發(fā)明實施例中未特別指明的組分均為市購產(chǎn)品，所用設(shè)備或儀器均是常規(guī)的。 實施例1
紅豆杉多糖的乙醇提取取干燥曼迪亞紅豆杉枝葉500g，粉碎成粉，置于容器內(nèi)，用4倍體積即2000 ml且濃度為95%的乙醇，按常規(guī)進(jìn)行加熱回流提取，其中，每次加熱溫度為50°C，回流時間為60分鐘，提取次數(shù)為2次，過濾后，對濾液進(jìn)行減壓回收乙醇后，余下濾液經(jīng)濃縮干燥后，得乙醇浸膏50克，該浸膏的紫杉醇含量為0. 2%，多糖含量達(dá)60%以上，用200目的硅膠G拌料，裝入內(nèi)徑15厘米，高150厘米的玻璃層析柱，以甲醇和氯仿(兩者的體積比為1:1)為流動相進(jìn)行常規(guī)洗脫，紅豆杉多糖在玻璃柱層析分離過程中可顯見棕紅色，視其顏色的變化準(zhǔn)確獲取分離段溶液，濃縮回收該溶劑，獲得35克多糖含量高于90%的曼迪亞紅豆杉多糖。實施例2 紅豆杉多糖的水提取
取干燥曼迪亞紅豆杉枝葉500g，粉碎成粉，置于容器內(nèi)，用8倍體積即4000 ml的蒸餾水按常規(guī)進(jìn)行加熱煎煮提取，其中，每次煎煮時間為4小時，提取次數(shù)為3次，過濾，合并濾液后，對濾液進(jìn)行濃縮干燥，得水提浸膏30克，用實施例3的層析柱，并按照相同方法和相同分離條件進(jìn)行洗脫，紅豆杉多糖在玻璃柱層析分離過程中可顯見棕紅色，視其顏色的變化準(zhǔn)確獲取分離段溶液，濃縮回收該溶劑，得到25克多糖含量高于90%的曼迪亞紅豆杉多糖。實施例3
曼迪亞紅豆杉多糖的檢測分別取實施例1和實施例2獲得的曼迪亞紅豆杉多糖， 按照《中華人民共和國藥典》(2010年版二部)中國醫(yī)藥科技出版社1008頁的方法，采用高效液相色譜儀進(jìn)行檢測，其指標(biāo)符合多糖要求。實施例4 納米乳劑載體的制備
1)按下列質(zhì)量比備料0.475g注射用水，Ig肉豆蔻酸異丙酯(IPM)，1g 1，2_丙二醇，Ig Tween80 ；
2)向混合攪拌瓶內(nèi)加入1gTween80,lg 1，2-丙二醇，在轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分鐘，室溫條件下，持續(xù)攪拌8分鐘，混勻后加入Ig肉豆蔻酸異丙酯，混合均勻得混合物；
3)在上述2)的混合物中滴入0.475g注射用水，同時在轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分鐘，室溫下， 攪拌混合物至液體為透明，得到納米乳劑；
4)對3)制得的納米乳劑進(jìn)行如下檢測1.經(jīng)馬爾文粒徑檢測儀檢測，粒徑范圍為 19. 205 24. 896nm,合格；2.經(jīng)3000rpm, 15min離心分離，納米乳劑體系不分層，合格； 3.經(jīng)4°C放置50天，納米乳劑體系無變化，合格。實施例5
含有紅豆杉多糖免疫佐劑的流感疫苗的制備及動物免疫
1)稱取實施例1的曼迪亞紅豆杉多糖3.5mg，溶于 οομ 無水乙醇中，制成曼迪亞紅豆杉多糖溶液，備用；
2)將上述1)制備的溶液與375μ1的Η3Ν2流感病毒裂解疫苗(血凝素含量為43.67μδ/ ml)混合，得475μ1含曼迪亞紅豆杉多糖的流感疫苗；
3)取實施例4的全部納米乳劑，在攪拌狀態(tài)下緩慢滴入2)的含曼迪亞紅豆杉多糖的流感疫苗475μ1，同時維持轉(zhuǎn)速在100轉(zhuǎn)/分鐘，攪拌至溶液為微黃色透明，得到以曼迪亞紅豆杉多糖、納米乳劑為佐劑的流感病毒疫苗，其中曼迪亞紅豆杉多糖的質(zhì)量比為0. 117%，載體質(zhì)量比為99. 883% ；曼迪亞紅豆杉多糖納米乳劑免疫佐劑與流感疫苗血凝素的質(zhì)量比為:183409ο用實施例5制備的曼迪亞紅豆杉多糖納米乳劑流感病毒疫苗肌肉注射標(biāo)準(zhǔn)體重昆明種雌性小鼠，每只小鼠注射200μ1，其中200μ1注射疫苗中流感疫苗血凝素含量為 0. 94Pg，紅豆杉多糖0. ang，第1天接種一針，第21天補種一針；于首次免疫后第一周開始， 每隔7天采尾血，分離血清，測定血凝抑制效價，同時設(shè)立注射等量的生理鹽水空白對照組、等血凝素含量的Al (OH) 3佐劑流感疫苗的佐劑對照組、等血凝素含量的單獨流感疫苗對照組。56天內(nèi)得到的血凝抑制抗體效價檢測結(jié)果見圖1。實施例6
含有紅豆杉多糖免疫佐劑的流感疫苗的制備
1)稱取實施例2的曼迪亞紅豆杉多糖7.6mg，溶于200μ1無水乙醇中，得曼迪亞紅豆杉多糖溶液，備用；
2)將1)溶液與3.2ml市購的H3N2流感病毒裂解疫苗(血凝素含量43. 67Pg/ml)，得 3. 4ml含曼迪亞紅豆杉多糖的流感疫苗；
3)取1.Ig聚氧乙烯蓖麻油、1.6g Span80,6g 1，2-丙二醇，3g肉豆蔻酸異丙酯放于攪拌瓶中，轉(zhuǎn)速維持在200轉(zhuǎn)/分鐘，室溫攪拌10分鐘，至充分混勻，得納米乳劑；
4)在上述3)的納米乳劑中緩慢滴入2)的含曼迪亞紅豆杉多糖的流感疫苗3.4ml,同時維持轉(zhuǎn)速在200轉(zhuǎn)/分鐘，攪拌至溶液為淡黃棕色半透明，得到以曼迪亞紅豆杉多糖、納米乳劑載體為佐劑的流感病毒疫苗，其中曼迪亞紅豆杉多糖的質(zhì)量比為0. 065%，載體質(zhì)量比為99. 935% ；曼迪亞紅豆杉多糖與流感疫苗血凝素的質(zhì)量比為83779。實施例7
動物實驗用樣品的制備及免疫
1)制備下列不同的佐劑或溶液
a)取實施例1的曼迪亞紅豆杉多糖0. 2 mg，溶于20μ1無水乙醇，然后與120μ1生理鹽水混合，得140ul曼迪亞紅豆杉多糖溶液，備用；
b)取濃度為15. 98 mg/ml的氫氧化鋁12. 5 μ ，其中含AL(OH)3 0. 2mg，加入生理鹽水至體積為140 μ ，備用；
c)140 μ 生理鹽水，備用；
d)200 μ 生理鹽水，備用；
2)制備下列不同的疫苗
取血凝素含量為43. 67 μδ/πι1的市購Η3Ν2流感病毒裂解疫苗60μ1，分別與上述a、b、 c不同溶液混合，分別得到含有曼迪亞紅豆杉多糖免疫佐劑的流感疫苗樣品Α、含有AL(OH)3 佐劑的流感疫苗樣品B、單獨的流感疫苗樣品C。d組不加疫苗，為生理鹽水空白對照樣品 D。所配置的上述A、B、C、D四個樣品均制備五份，體積均為200 μ ，備用；其中含有曼迪亞紅豆杉多糖的流感疫苗樣品A中曼迪亞紅豆杉多糖的質(zhì)量比為100%，載體質(zhì)量比為0 % ； 曼迪亞紅豆杉多糖免疫佐劑與流感疫苗血凝素的質(zhì)量比為76。3)免疫接種及檢測
用上述2)所配的Α、B、C、D四個不同的樣品分別免疫標(biāo)準(zhǔn)體重雌性昆明小鼠，每組5 只，每只肌肉注射200ul，第1天接種一針，第21天補種一針。于首次免疫后7天、14天、21天、觀天、35天、42天、56天取尾血，分離血清測定血凝抑制效價，結(jié)果見附圖2。于第一天接種前和接種后第8天對各組小鼠進(jìn)行體重測量，對7天內(nèi)各組平均增長的體重進(jìn)行計算，所測結(jié)果顯示紅豆杉多糖佐劑組較之鋁佐劑組及單獨疫苗組小鼠體重增長受影響最低，并與空白對照組相比，小鼠體重增長幅度反而較大，可能是由于螺旋紅豆杉多糖本身具有一定的補益作用，具體結(jié)果見附圖3。實施例8
動物實驗用樣品的制備及免疫
A、取實施例2的曼迪亞紅豆杉多糖0. 3 mg，溶于40μ1無水乙醇，再與130μ1生理鹽水混合，然后加入市購的Η3Ν2流感裂解疫苗30μ1至終體積為200 μ ，Η3Ν2流感裂解疫苗的血凝素含量為1.3lPg，得含有曼迪亞紅豆杉多糖的流感病毒疫苗，備用；其中曼迪亞紅豆杉多糖的質(zhì)量比為100%，載體質(zhì)量比為0 %;曼迪亞紅豆杉多糖佐劑與流感疫苗血凝素的質(zhì)量比為:2290B、取Η3Ν2流感裂解疫苗60 μ ，其中含血凝素2. 62μδ,與140 μ 生理鹽水混合至終體積為200 μ ，作為單獨疫苗對照組，備用；
C、取濃度為15.98 mg/ml的氫氧化鋁佐劑12. 5 μ ，其中含OJmg AL(OH)3，與含血凝素2. 62μδ的流感疫苗60 μ 混合，然后加入生理鹽水至終體積200 μ ，作為AL (OH) 3佐劑疫苗對照組，備用
D、生理鹽水200μ ，為空白對照組，備用； F、免疫接種及抗體檢測
將上述配好的A、B、C、D四個樣品分別免疫標(biāo)準(zhǔn)體重昆明雌性小鼠，肌肉注射，每只200 μ ，每組5只，第1天接種一針，第21天補種一針，于第2次免疫后2周進(jìn)行尾部采血，分離血清，檢測血凝抑制抗體效價，結(jié)果見附圖4。
權(quán)利要求
1.一種紅豆杉多糖免疫佐劑，其特征在于由下列質(zhì)量比的組分組成紅豆杉多糖0. 001 100%載體0 99. 999%O
2.如權(quán)利要求1所述的紅豆杉多糖免疫佐劑，其特征在于所述載體由下列質(zhì)量比的組分組成乳化劑20 70%助乳化劑20 70%油相1 50%水相1 30%。
3.如權(quán)利要求2所述的紅豆杉多糖免疫佐劑，其特征在于所述乳化劑為常規(guī)的 TweenSO或聚氧乙烯蓖麻油中的一種，或者為質(zhì)量混合比為3 2 2 3的常規(guī)TweenSO 與SpanSO的混合物，或者為質(zhì)量混合比為1 1的常規(guī)聚氧乙烯蓖麻油與SpanSO的混合物。
4.如權(quán)利要求2所述的紅豆杉多糖免疫佐劑，其特征在于所述助乳化劑為常規(guī)的1， 2-丙二醇或聚乙二醇400中的一種。
5.如權(quán)利要求2所述的紅豆杉多糖免疫佐劑，其特征在于所述油相為常規(guī)的肉豆蔻酸異丙酯或油酸乙酯或注射用大豆油中的一種。
6.如權(quán)利要求2所述的紅豆杉多糖免疫佐劑，其特征在于所述水相為注射用水或者含有藥物或疫苗成分的注射用水溶液。
7.一種含有如權(quán)利要求1所述紅豆杉多糖免疫佐劑的流感疫苗，其特征在于紅豆杉多糖免疫佐劑與流感疫苗血凝素的質(zhì)量比為5(Γ183500，其中，所述紅豆杉多糖免疫佐劑由下列質(zhì)量比的組分組成紅豆杉多糖0. 001 100%載體0 99. 999%O
全文摘要
本發(fā)明提供一種紅豆杉多糖免疫佐劑及含有該佐劑的流感疫苗，其中紅豆杉多糖免疫佐劑由下列質(zhì)量比的組分組成紅豆杉多糖0.001～100%，載體0～99.999%。紅豆杉多糖免疫佐劑與流感疫苗血凝素的質(zhì)量比為50~183500。紅豆杉多糖是從紅豆杉枝條中提取的一種天然物質(zhì)，紅豆杉多糖作為免疫佐劑使用，取得了應(yīng)用性的實驗結(jié)果，其安全性高、副作用小。含有紅豆杉多糖佐劑的流感疫苗，不僅制備方法簡便，而且疫苗質(zhì)量容易控制，能更好的提高疫苗免疫原性，大大降低疫苗抗原用量，實驗證明，以紅豆杉多糖為佐劑使用的疫苗抗原用量只是以氫氧化鋁為佐劑的疫苗抗原用量的一半或者更少，但免疫保護(hù)效果卻是一樣的。
文檔編號A61K39/39GK102160893SQ20111004618
公開日2011年8月24日 申請日期2011年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月25日
發(fā)明者劉洪卿, 孫笠雯, 李慧, 李映波, 高天榮 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所