專(zhuān)利名稱(chēng)：一種中藥組合物中橙皮苷的含量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到一種中藥組合物中橙皮苷的含量測(cè)定方法，特別地，涉及一種中藥組合物中橙皮苷含量的高效液相色譜法外標(biāo)法測(cè)定的方法。
背景技術(shù)：
由于中藥組合物成份復(fù)雜，因此，不同中藥組合物難以采用相同的方法測(cè)定，不同的中藥組合物需要根據(jù)其組合物特點(diǎn)建立其特有的檢測(cè)方法，且需要嚴(yán)格的方法學(xué)研究，才可以用于控制該中藥組合物的含量測(cè)定。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種中藥組合物中橙皮苷的含量測(cè)定方法，該中藥組合物由 如下重量份的原料藥制成酸棗仁300-500、桑椹300-500、菊花100-160、茯苓50-80、山楂100-160、百合50-80、陳皮50-80、荷葉50-80、靈芝100-160，該方法采用高效液相色譜法外標(biāo)法測(cè)定，測(cè)定條件如下
色譜條件色譜柱Waters Symmetryshield RP18色譜柱；檢測(cè)波長(zhǎng)283nm ;流動(dòng)相為乙腈-O. 1%磷酸溶液，室溫體積比為10-20:90-80，流速為l.Oml/min ；
供試品溶液的制備方法取所述中藥組合物制劑或制劑內(nèi)容物I. 5g，精密稱(chēng)定，精密加入25ml甲醇，稱(chēng)定重量，超聲處理20分鐘，放冷，稱(chēng)重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液10ml，蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，上聚酰胺柱，先加水IOml洗脫，棄去，再用50ml 30%甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%的甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至25ml的容量瓶中，加50%的甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過(guò)，即得；
對(duì)照品溶液的制備方法精密稱(chēng)取橙皮苷對(duì)照品適量，加50%甲醇制成每Iml含27 μ g的溶液，搖勻，即得；
分別精密吸取對(duì)照品溶液15 μ I與供試品溶液20 μ 1，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得。本發(fā)明中藥組合物中橙皮苷的含量測(cè)定方法中所使用的色譜柱規(guī)格優(yōu)選為4. 6 X 150mm、填料粒徑優(yōu)選為5 μ m,流動(dòng)相優(yōu)選為乙腈-O. 1%磷酸溶液，室溫體積比優(yōu)選為18:82，理論板數(shù)以橙皮苷峰計(jì)不低于2000 ;供試品溶液的制備方法中所述聚酰胺柱填料粒徑優(yōu)選為100-200目，內(nèi)徑優(yōu)選為I. Ocm，填料重量?jī)?yōu)選為I. 5g，所述微孔濾膜規(guī)格優(yōu)選為 O. 45 μ m。本發(fā)明提供的中藥組合物中的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其目的是作為該中藥組合物的質(zhì)量控制方法，為更好實(shí)現(xiàn)發(fā)明目的，本發(fā)明中的中藥組合物進(jìn)一步優(yōu)選為如下重量份的原料藥制成
酸棗仁375、桑椹375、菊花125、茯苓62. 5、山楂125、百合62. 5、陳皮62. 5、荷葉62. 5、靈芝125。該中藥組合物還優(yōu)選為由如下重量份的原料藥制成酸棗仁300、桑椹500、菊花100、茯苓80、山楂100、百合80、陳皮50、荷葉80、靈芝100。該中藥組合物還優(yōu)選為由如下重量份的原料藥制成
酸棗仁500、桑椹300、菊花160、茯苓50、山楂160、百合50、陳皮80、荷葉50、靈芝160。該中藥組合物還優(yōu)選為由如下重量份的原料藥制成
酸棗仁375、桑椹500、菊花125、茯苓80、山楂125、百合80、陳皮62. 5、荷葉80、靈芝
125。該中藥組合物還優(yōu)選為由如下重量份的原料藥制成酸棗仁300、桑椹375、菊花100、茯苓62. 5、山楂100、百合62. 5、陳皮50、荷葉62. 5、靈芝 100。該中藥組合物還優(yōu)選為由如下重量份的原料藥制成
酸棗仁400、桑椹400、菊花130、茯苓65、山楂130、百合65、陳皮65、荷葉65、靈芝130。本發(fā)明的橙皮苷含量測(cè)定方法適用于上述中藥組合物制成的各種制劑劑型，進(jìn)一步優(yōu)選為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液、散劑或丸劑。本發(fā)明方法測(cè)定橙皮苷的含量從多個(gè)方面評(píng)價(jià)該方法的可行性，評(píng)價(jià)方法如下
I、儀器與試藥
儀器=Agilent 1100高效液相色譜儀；METTLER TOLEDO AT201分析天平；試藥本發(fā)明顆粒劑(石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)030201，030202，030203 ;按照實(shí)施例2的制備方法制備);橙皮苷對(duì)照品(批號(hào)110721-200211);乙腈(Fisher，色譜純)；其他試劑均為分析純。2、檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇對(duì)橙皮苷對(duì)照品進(jìn)行光譜檢測(cè)，光譜圖上可見(jiàn)，在283nm、328nm處均有最大吸收，但在283nm處吸收較大，所以選擇283nm為本樣品的檢測(cè)波長(zhǎng)。3、專(zhuān)屬性實(shí)驗(yàn)按處方比例取陳皮以外的其它原料藥材，依照制備工藝制得陰性樣品，按供試品溶液制備法操作，即得陰性對(duì)照液，吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性樣品溶液，進(jìn)樣，測(cè)定，結(jié)果陰性樣品不干擾橙皮苷的測(cè)定?？瞻自囼?yàn)見(jiàn)圖I。4、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)精密吸取不同濃度的對(duì)照品溶液，注入高效液相色譜儀，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)(Y)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。得回歸方程Y=1. 69832177Χ-1. 7400625，r=l. 00000，表明橙皮苷進(jìn)樣量在136. 32-2453. 76ng范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。5、精密度試驗(yàn)吸取對(duì)照品溶液，在上述色譜條件下連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積，結(jié)果對(duì)照品峰面積的RSD為O. 14%，說(shuō)明儀器性能良好。6、穩(wěn)定性試驗(yàn)吸取供試品溶液，于O，2，6，12，24h進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，結(jié)果供試品峰面積的RSD為O. 37%，說(shuō)明24h內(nèi)供試品溶液穩(wěn)定。7、重復(fù)性試驗(yàn)取同一批樣品，分別取高中低三個(gè)樣品量，每個(gè)樣品量3份，按供試品的制備方法制備，測(cè)定，結(jié)果樣品的含量(mg/g)平均值為O. 9224，RSD為O. 62%，說(shuō)明方法精密度良好。8、回收率試驗(yàn)采用加樣回收試驗(yàn)，取同一批樣品9份，分三組，分別加入高、中、低3種量的橙皮苷對(duì)照品溶液，按供試品的制備方法處理后，依法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表I。結(jié)果橙皮苷的平均回收率為96. 69%，RSD為I. 10% (n=9)，說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度良好。表I回收率試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種中藥組合物中橙皮苷的含量測(cè)定方法，該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成酸棗仁300-500、桑椹300-500、菊花100-160、茯苓50-80、山楂100-160、百合50-80、陳皮50-80、荷葉50-80、靈芝100-160，其特征在于，該方法采用高效液相色譜法外標(biāo)法測(cè)定，測(cè)定條件如下 色譜條件色譜柱Waters Symmetryshield RP18色譜柱；檢測(cè)波長(zhǎng)283nm ;流動(dòng)相為乙腈-0. 1%磷酸溶液，室溫體積比為10-20:90-80，流速為l.Oml/min ； 供試品溶液的制備方法取所述中藥組合物制劑或制劑內(nèi)容物I. 5g，精密稱(chēng)定，精密加入25ml甲醇，稱(chēng)定重量，超聲處理20分鐘，放冷，稱(chēng)重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液10ml，蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，上聚酰胺柱，先加水IOml洗脫，棄去，再用50ml 30%甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%的甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至25ml的容量瓶中，加50%的甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過(guò)，即得； 對(duì)照品溶液的制備方法精密稱(chēng)取橙皮苷對(duì)照品適量，加50%甲醇制成每Iml含27 ii g的溶液，搖勻，即得； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液15 Ul與供試品溶液20 iil，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得。
2.如權(quán)利要求I所述的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其特征在于，色譜條件為色譜柱為規(guī)格為4. 6 X 150mm、填料粒徑為5 u m,流動(dòng)相為乙腈-0. 1%磷酸溶液，室溫體積比為18:82，理論板數(shù)以橙皮苷峰計(jì)不低于2000 ;供試品溶液的制備方法中所述聚酰胺柱填料粒徑為100-200目，填料重量I. 5g，內(nèi)徑為I. Ocm，所述微孔濾膜規(guī)格為0. 45 u m。
3.如權(quán)利要求I或2所述的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁375、桑椹375、菊花125、茯苓62. 5、山楂125、百合62. 5、陳皮62. 5、荷葉62. 5、靈芝125。
4.如權(quán)利要求I或2所述的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁300、桑椹500、菊花100、茯苓80、山楂100、百合80、陳皮50、荷葉80、靈芝100。
5.如權(quán)利要求I或2所述的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁500、桑椹300、菊花160、茯苓50、山楂160、百合50、陳皮80、荷葉50、靈芝160。
6.如權(quán)利要求I或2所述的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁375、桑椹500、菊花125、茯苓80、山楂125、百合80、陳皮62. 5、荷葉80、靈芝125。
7.如權(quán)利要求I或2所述的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 酸棗仁300、桑椹375、菊花100、茯苓62. 5、山楂100、百合62. 5、陳皮50、荷葉62. 5、靈芝 100。
8.如權(quán)利要求I或2所述的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其特征在于該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成酸棗仁400、桑椹400、菊花130、茯苓65、山楂130、百合65、陳皮65、荷葉65、靈芝130。
9.如權(quán)利要求I或2所述的橙皮苷的含量測(cè)定方法，其特征在于所述中藥組合物制劑劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液、散劑或丸劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種中藥組合物中橙皮苷含量測(cè)定的方法，本發(fā)明中藥組合物由酸棗仁、陳皮、茯苓、桑椹、菊花等9味中藥組成，本發(fā)明方法采用高效液相色譜法測(cè)定其中橙皮苷的含量，符合藥物制劑質(zhì)量控制的要求，可有效控制該中藥組合物中橙皮苷的含量。
文檔編號(hào)A61K36/8967GK102670951SQ20111006222
公開(kāi)日2012年9月19日 申請(qǐng)日期2011年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月16日
發(fā)明者張永峰, 李正杰, 楊麗榮, 楊雷, 柏艷柳, 許紅輝 申請(qǐng)人:河北以嶺醫(yī)藥研究院有限公司