專利名稱：羅漢果植株黃酮類成分的提取純化工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及藥用植物黃酮類成分的提取純化技術領域，具體涉及羅漢果植株黃酮 類成分的提取純化工藝。
背景技術：
羅漢果是葫蘆科羅漢果屬植物(Siraiiiagrosvenorii (Swingle) C. Jeffrey ex Lu et Ζ. Y. ^iang)的果實，為傳統(tǒng)中藥。該中藥資源也是廣西特有的經(jīng)濟植物，營養(yǎng) 價值高，廣泛用于醫(yī)藥、飲料和調味品中。該植物在廣西民間的藥用歷史已有300多年， 收載于2010版《中國藥典》，為傳統(tǒng)中藥，具有清熱潤肺、潤腸通便的功效，現(xiàn)代藥理研究表 明，羅漢果提取物具有降血糖、抗氧化等生物活性，國家衛(wèi)生部將其列入第一批“既是食品 又是藥品的品種名單”中。羅漢果植株高大，枝葉繁密，過去對羅漢果的利用主要是其果實，果農(nóng)采摘果實后 通常將果葉和藤廢棄，造成了一定的浪費。本發(fā)明從廢棄的羅漢果植株中提取黃酮類成分， 為羅漢果植株資源的開發(fā)利用及其黃酮類活性成分的提取純化提供了一套可行的工藝。桂北民間有將葉子曬干后用以治慢性咽炎、慢性支氣管炎等疾病的傳統(tǒng)。近年 來有人對羅漢果葉的化學成分進行研究，發(fā)現(xiàn)羅漢果葉中含有氨基酸、茶多酚、及黃酮化 合物，其黃酮化合物的甙元是槲皮素和山奈酚，這與羅漢果果實中黃酮甙元一致。通過體 外實驗發(fā)現(xiàn)，羅漢果葉黃酮成分具有很強的抗氧化活性，優(yōu)于人工合成的抗氧化劑ΒΗΤ，是 一種很好的天然抗氧化劑。另有人觀察小鼠連續(xù)七天服用羅漢果葉黃酮后的毒副反應， 結果所有動物健存，未見任何毒副反應，體重正常增長率為25. 1%，經(jīng)計算其最大給藥量為 60. 85g/kg，表明羅漢果葉黃酮毒性很小。本發(fā)明采用乙醇作為提取溶媒，提取液通過大孔吸附樹脂純化，得到的提取物黃 酮類成分含量較高，該提取純化技術國內外未見相關資料報道。其提取純化工藝流程簡單， 有效物質含量較高，降低了生產(chǎn)成本，節(jié)約了能源，降低了環(huán)境污染，符合中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化 的要求。本發(fā)明采用正交設計試驗和單因素相結合的方法，對羅漢果植株中的黃酮類成分 的醇提取工藝及大孔樹脂純化工藝進行了全面系統(tǒng)的研究，獲得了可靠的技術參數(shù)，進行 了中試驗證，可應用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，其提取純化工藝具有較強的實用價值。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種效率高、無污染且能工業(yè)化生產(chǎn)的羅漢果植株黃酮類 成分的提取純化工藝。本發(fā)明的提取純化工藝包括如下步驟
(1)將羅漢果植株切碎，用6 10倍體積量的濃度為40 80%的乙醇回流提取，提取 1 3次，每次1 3小時，合并乙醇提取液。(2)濃縮乙醇提取液，使藥液量濃縮至藥材質量的2 5倍，靜置過濾后，得到濾
3液。(3)將濾液用lmol/L HCl調節(jié)pH至4，并以上樣液濃度為0. 1 0. 6 g/mL,每小 時3 5倍柱床體積的流速通過大孔吸附樹脂柱，先用2 4倍樹脂量的水洗脫除去雜質， 再用4 8倍柱床體積的濃度為30 65%的乙醇以每小時1 3倍柱床體積的流速進行 洗脫，用氨水調節(jié)藥液PH至5 6，得到洗脫液，然后干燥成粉末狀。(4)將提取物粉末加入濃度為95%乙醇溶解，溶解次數(shù)為3 5次，再過濾，濃縮并 干燥，得到羅漢果植株黃酮提取物。本發(fā)明具有以下優(yōu)點
(1)本發(fā)明使用乙醇作為提取溶媒安全無毒，價格低廉可回收利用，對環(huán)境無污染。(2)采用本發(fā)明利用廢棄的羅漢果植株中提取黃酮成分，充分利用了資源，保護了 環(huán)境。(3)本發(fā)明采用大孔吸附樹脂技術提取純化有效部位群，具有工藝簡單，成本較 低，樹脂可反復使用，適合工業(yè)生產(chǎn)，符合中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化的要求。(4)采用本發(fā)明從羅漢果植株中提取黃酮，總黃酮含量大于50%，提取效率高。本發(fā)明中所述的乙醇濃度是指100 mL體積乙醇水溶液中含乙醇體積分數(shù)。
具體實施例方式通過下述實施例將有助于理解本發(fā)明，但并不能限制本發(fā)明的內容。實施例1。取12 kg羅漢果植株切碎，加濃度為40%的乙醇回流提取，提取3次，第一次為2 小時，第二、第三次各為1小時，乙醇的用量分別為藥材質量的10倍量、8倍量、6倍量，合并 提取液。再將提取液濃縮至2倍藥材質量，抽濾得上樣藥液。用1 mol/L HCl調節(jié)藥液pH 至4，并以上樣液濃度為0.4 g/mL，加樣流速為3 Bv/h進行吸附(樹脂床徑高比為1 8)，吸 附完畢后，用3倍樹脂體積的蒸餾水以4 Bv/h的流速洗脫，然后以5倍樹脂柱體積的濃度 為30%的乙醇，以2 Bv/h的流速進行洗脫，收集洗脫液，用氨水調節(jié)藥液pH至5 6。將 洗脫液濃縮并回收乙醇，濃縮液經(jīng)干燥得到羅漢果植株黃酮類成分提取物粗產(chǎn)品。然后將 提取物粉末用濃度為95%的乙醇溶解4次，乙醇用量分別為30倍、20倍、10倍、10倍(黃酮 類成分提取物粗產(chǎn)品粉末量)，過濾，濃縮并回收乙醇，濃縮液經(jīng)干燥，得到羅漢果植株黃酮 類成分提取物精制產(chǎn)品。經(jīng)高壓液相分析，羅漢果植株黃酮類成分含量為54. 90%。實施例2。取5 kg羅漢果植株切碎，加8倍藥材質量的濃度為60%的乙醇回流提取，提取1 次，提取時間為2小時。再將提取液濃縮至3倍藥材質量，靜置過濾后，得到濾液。用1 mol/ L HCl調節(jié)濾液pH至3 5，并以上樣液濃度為0. lg/mL，流速為4 Bv/h通過大孔吸附樹脂 柱，先用4倍樹脂體積的蒸餾水以4 Bv/h的流速洗脫，再用4倍柱床體積的濃度為50%的 乙醇以1 Bv/h的流速進行洗脫，用氨水調節(jié)藥液pH至5 6，得到乙醇洗脫液。將洗脫液 濃縮并回收乙醇，濃縮液經(jīng)干燥得到羅漢果植株黃酮類成分提取物粗產(chǎn)品。然后將提取物 粉末用濃度為85%的乙醇溶解5次，乙醇用量分別為30倍、20倍、20倍、10倍、10倍(黃酮 類成分提取物粗產(chǎn)品粉末量)，過濾，濃縮并回收乙醇，濃縮液經(jīng)干燥，得到羅漢果植株黃酮 類成分提取物精制產(chǎn)品。經(jīng)高壓液相分析，羅漢果植株黃酮類成分含量為51.49%。
實施例3。取10 kg羅漢果植株切碎，加濃度為80%乙醇回流提取，提取兩次，第一次為2小 時，第二次為1小時，乙醇的用量分別為藥材質量的10倍量、6倍量，合并提取液。再將提取 液濃縮至5倍藥材質量，靜置過濾后，得到濾液。用lmol/L HCl調節(jié)濾液pH至4，并以上樣 液濃度為0. 5g/mL，流速為5 Bv/h通過大孔吸附樹脂柱，然后用2倍樹脂體積的蒸餾水以4 Bv/h的流速洗脫，最后用8倍柱床體積的濃度為40%的乙醇以;3Bv/h的流速進行洗脫，用氨 水調節(jié)藥液PH至5 6，得到洗脫液。將洗脫液濃縮并回收乙醇，濃縮液經(jīng)干燥得到羅漢果 植株黃酮類成分提取物粗產(chǎn)品。然后將提取物粉末用濃度為90%的乙醇溶解3次，乙醇用 量分別為30倍、20倍、10倍(黃酮類成分提取物粗產(chǎn)品粉末量)，過濾，回收乙醇，濃縮，濃縮 液經(jīng)干燥，得到羅漢果植株黃酮類成分提取物精制產(chǎn)品。經(jīng)高壓液相分析，羅漢果植株黃酮 類成分含量為51. 61 %。實施例4。取15 kg羅漢果植株切碎，加濃度為70%的乙醇回流提取，提取三次，第一次為2小 時，第二、第三次各為1小時，乙醇的用量分別為藥材質量的10倍量、8倍量、6倍量，合并提 取液。再把提取液體積濃縮至2. 5倍藥材質量，抽濾得上樣藥液。用lmol/L HCl調節(jié)藥液 PH至4，并以上樣液濃度為0.6g/mL，加樣流速為4 Bv/h進行吸附(樹脂床徑高比為1 :8)， 吸附完畢后，用3倍樹脂體積的蒸餾水以4Bv/h的流速沖洗，然后以5倍樹脂柱體積的濃度 為65%的乙醇，以2Bv/h的流速進行洗脫，收集洗脫液，用氨水調節(jié)洗脫液pH至5 6。將 洗脫液濃縮并回收乙醇，濃縮液經(jīng)干燥得到羅漢果植株黃酮類成分提取物粗產(chǎn)品。然后將 提取物粉末用濃度為70%的乙醇溶解4次，每次乙醇用量為20倍(黃酮類成分提取物粗產(chǎn) 品粉末量)，過濾，濃縮并回收乙醇，濃縮液經(jīng)干燥，得到羅漢果植株黃酮類成分提取物精制 產(chǎn)品。經(jīng)高壓液相分析，羅漢果植株黃酮類成分含量為54. 52%。
權利要求
1.一種羅漢果植株黃酮類成分提取工藝，其特征在于包括以下步驟干燥、切碎、乙醇 回流提取、過濾并濃縮、柱吸附、水洗脫、乙醇洗脫、濃縮并干燥、乙醇溶解和過濾后濃縮干O
2.如權利要求1所述的一種羅漢果植株黃酮類成分提取工藝，其特征在于所述的乙 醇回流提取所用乙醇量為藥材質量的6 10倍，所用乙醇體積百分比濃度為40 80%，提 取次數(shù)為1 3次，每次提取時間為1 3小時。
3.如權利要求1所述的一種羅漢果植株黃酮類成分提取工藝，其特征在于所述的柱 吸附是指上樣液濃度為0. 1 0. 6 g/mL，流速為每小時3 5倍柱床體積通過大孔吸附樹 脂柱吸附。
4.如權利要求1所述的一種羅漢果植株黃酮類成分提取工藝，其特征在于所述的水 洗脫是指用2 4倍柱床體積的純化水洗脫大孔樹脂除去雜質。
5.如權利要求1所述的一種羅漢果植株黃酮類成分提取工藝，其特征在于所述的乙 醇洗脫是指用4 8倍柱床體積的體積百分比濃度為30 65%的乙醇，以每小時1 3倍 柱床體積的流速進行洗脫。
6.如權利要求1所述的一種羅漢果植株黃酮類成分提取工藝，其特征在于所述的乙 醇溶解是指用體積百分比濃度為70 95%乙醇溶解，溶解次數(shù)為3 5次。
7.如權利要求1所述的一種羅漢果植株黃酮類成分提取工藝，其特征在于所述的羅 漢果植株包括羅漢果的葉、藤和根。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥用植物黃酮類成分的提取純化技術領域，具體涉及羅漢果植株黃酮類成分的提取純化工藝。本發(fā)明采用乙醇作為提取溶媒，提取液通過大孔吸附樹脂純化。其特征在于包括以下步驟干燥、切碎、乙醇回流提取、過濾并濃縮、柱吸附、水洗脫、乙醇洗脫、濃縮并干燥、乙醇溶解和過濾后濃縮干燥。本發(fā)明的提取純化工藝流程簡單，有效物質含量較高，可降低生產(chǎn)成本，節(jié)約能源，控制環(huán)境污染。
文檔編號A61K127/00GK102138958SQ201110085319
公開日2011年8月3日 申請日期2011年4月6日 優(yōu)先權日2011年4月6日
發(fā)明者余波, 劉焱文, 盧覺曉, 吳和珍, 周莉, 左杰, 黃赤夫 申請人:湖北匯特生物醫(yī)藥技術有限公司