專利名稱：一種藍萼香茶菜總二萜的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種藍萼香茶菜總二萜的制備方法。
背景技術(shù)：
藍粵香茶菜 Rabdosia japonica (Burm. f. )Hara var. glau-cocalyxi (Maxin) Hara為唇形科香茶菜屬植物，又名山蘇子，廣布于我國北方，長期以來，我國民間作為毛葉香茶菜用，具有健胃、清熱解毒、活血、抗菌消炎和抗癌活性。藍萼香茶菜還具有與劑量相關(guān)的心肌保護作用。其化學(xué)成分主要為二萜和三萜類化合物。沈曉丹等從藍萼香茶菜中分離得到藍萼甲素、藍萼乙素、藍萼丙素、齊墩果酸、熊果酸、海棠果醛、木栓酮等化合物。其中藍萼甲素、藍萼乙素、藍萼丙素、藍萼丁素、藍萼戊素、藍萼己素屬于貝殼杉烷型二萜類化合物，張濱等通過藥理研究發(fā)現(xiàn)藍萼甲素具有顯著抑制ADP，AA, PAF等誘導(dǎo)的兔血小板聚集。 中國專利申請?zhí)?00910044882. 0采用MTT法，用AM9、L0V0、6T_CEM、HL-60細胞株對藍萼甲素、藍萼乙素、藍萼丙素、藍萼丁素、藍萼戊素、藍萼己素進行了細胞毒活性實驗，發(fā)現(xiàn)它們均具有顯著的細胞毒活性，可用于制備抗癌藥物。中國專利申請?zhí)?00910044883. 6采用乙肝表面抗原(HBsAg)診斷試劑盒和乙肝核心抗原(HBeAg)診斷試劑盒對上述藍萼香茶菜二萜類化合物進行了抗乙肝表面抗原和乙肝核心抗原試驗，發(fā)現(xiàn)它們均具有顯著的抗乙肝病毒活性，可用于制備乙肝病毒的藥物?，F(xiàn)有技術(shù)中，從藥材藍萼香茶菜中提取二萜類化合物的方法多采用有機溶劑萃取、硅膠柱層析的方法分離純化，該方法存在分離周期長、成本高等缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所述藍萼香茶菜總二萜是從藍萼香茶菜葉中提取分離的二萜類化合物的混合物。本發(fā)明的目的是提供一種藍萼香茶菜總二萜的制備方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的
一種藍萼香茶菜總二萜的制備方法，其特征在于將藍萼香茶菜葉粉碎成粗粉，以乙醇或甲醇為提取溶媒進行提取，將合并的提取液冷卻后過濾，濾液加活性炭攪拌、過濾，脫色液濃縮至相對密度為1. 05-1. 12，再通過3000-10000道爾頓的中空纖維超濾膜，操作壓力為0. 1-0. 3MPa，透過液經(jīng)預(yù)處理好的大孔吸附樹脂吸附，先用水洗脫，再以30-70%乙醇水溶液洗脫，洗脫用量為3-6BV，洗脫流速為0. 5-2BV/h，得到的洗脫液濃縮干燥即得藍萼香茶菜總二蔽。所述提取溶媒乙醇或甲醇的體積百分比為60-95%，提取方法為回流提取、索氏提取、浸漬提取、滲漉提取、微波提取的一種或幾種結(jié)合。所述活性炭為藥用活性炭，加入量為藥材量的0. 5-2%，脫色溫度為50-60°C。本發(fā)明方法具有操作簡單、能耗低、產(chǎn)品質(zhì)量高等優(yōu)點，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式實施例1
將藍萼香茶菜葉粉碎成粗粉，稱取Ikg置于提取罐中，加入6倍量的70%甲醇進行加熱回流提取2小時，提取2次，合并兩次提取液放冷，過濾，濾液加1%的藥用活性炭加熱攪拌， 過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為1. 08，再通過截留分子量為6000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓力為0. 2MPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得藍萼香茶菜總二萜，總二萜類的含量為76%，經(jīng)HPLC檢測，藍萼甲素、藍萼乙素、藍萼丙素、 藍萼丁素、藍萼戊素、藍萼己素的含量之和為46%。實施例2:
將藍萼香茶菜葉粉碎成粗粉，稱取Ikg置于提取罐中，加入10倍量的80%乙醇進行微波提取1小時，提取3次，合并三次提取液放冷，過濾，濾液加1. 5%的藥用活性炭加熱攪拌， 過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為1. 12，再通過截留分子量為10000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓力為0. IMPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得藍萼香茶菜總二萜，總二萜類的含量為72%，經(jīng)HPLC檢測，藍萼甲素、藍萼乙素、藍萼丙素、藍萼丁素、藍萼戊素、藍萼己素的含量之和為43%。實施例3:
將藍萼香茶菜葉粉碎成粗粉，稱取2kg置于提取罐中，加入7倍量的60%乙醇進行滲漉提取，至滲漉液色變淡，收集提取液放冷，過濾，濾液加2、的藥用活性炭加熱攪拌，過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為1.05，再通過截留分子量為3000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓力為0. 3MPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱， 飽和吸附后，依次用水、30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得藍萼香茶菜總二萜，總二萜類的含量為61%，經(jīng)HPLC檢測，藍萼甲素、藍萼乙素、藍萼丙素、藍萼丁素、藍萼戊素、藍萼己素的含量之和為40%。實施例4:
將藍萼香茶菜葉粉碎成粗粉，稱取5kg置于提取罐中，加入8倍量的95%甲醇進行索氏提取3小時，提取3次，合并三次提取液放冷，過濾，濾液加0. 5%的藥用活性炭加熱攪拌，過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為1. 10，再通過截留分子量為4000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓力為0. 25MPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、45%乙醇洗脫，收集45%乙醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得藍萼香茶菜總二萜，總二萜類的含量為65%，經(jīng)HPLC檢測，藍萼甲素、藍萼乙素、藍萼丙素、 藍萼丁素、藍萼戊素、藍萼己素的含量之和為48%。實施例5:
將藍萼香茶菜葉粉碎成粗粉，稱取5kg置于提取罐中，加入10倍量的75%甲醇進行浸漬提取12小時，過濾，濾渣再用8倍量的75%甲醇進行浸漬提取8小時，合并兩次提取液放冷，過濾，濾液加1%的藥用活性炭加熱攪拌，過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為1. 09， 再通過截留分子量為8000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓力為0. 15MPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得藍萼香茶菜總二萜，總二萜類的含量為 73%，經(jīng)HPLC檢測，藍萼甲素、藍萼乙素、藍萼丙素、藍萼丁素、藍萼戊素、藍萼己素的含量之和為44%。
權(quán)利要求
1.一種藍萼香茶菜總二萜的制備方法，其特征在于將藍萼香茶菜葉粉碎成粗粉，以乙醇或甲醇為提取溶媒進行提取，將合并的提取液冷卻后過濾，濾液加活性炭攪拌、過濾， 脫色液濃縮至相對密度為1.05-1. 12，再通過3000-10000道爾頓的中空纖維超濾膜，操作壓力為0. 1-0. 3MPa，透過液經(jīng)預(yù)處理好的大孔吸附樹脂吸附，先用水洗脫，再以30-70%乙醇水溶液洗脫，洗脫用量為3-6BV，洗脫流速為0. 5-2BV/h，得到的洗脫液濃縮干燥即得藍萼香茶菜總二萜。
2.如權(quán)利要求1所述的一種藍萼香茶菜總二萜的制備方法，其特征在于所述提取溶媒乙醇或甲醇的體積百分比為60-95%，提取方法為回流提取、索氏提取、浸漬提取、滲漉提取、 微波提取的一種或幾種結(jié)合。
3.如權(quán)利要求1所述的一種藍萼香茶菜總二萜的制備方法，其特征在于所述活性炭為藥用活性炭，加入量為藥材量的0. 5-2%，脫色溫度為50-60°C。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藍萼香茶菜總二萜的制備方法，方法是采用溶劑提取和大孔樹脂富集結(jié)合的方法從藍萼香茶菜中提取制備總二萜類。其制備方法為將藍萼香茶菜葉粉碎成粗粉，加入溶媒提取，將合并的提取液冷卻后過濾，濾液加活性炭脫色，脫色液通過3000-10000道爾頓的超濾膜，透過液經(jīng)預(yù)處理好的大孔吸附樹脂吸附，乙醇水溶液洗脫，得到的洗脫液濃縮干燥即得藍萼香茶菜總二萜。本發(fā)明方法具有操作簡單、能耗低、產(chǎn)品質(zhì)量高等優(yōu)點，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61P31/20GK102327317SQ20111026398
公開日2012年1月25日 申請日期2011年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月8日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司