專利名稱：多功能抗癌納米載藥控釋囊泡及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種復(fù)合抗癌功能納米載藥控釋囊泡及其制備，屬醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
腫瘤是當(dāng)今嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病。目前的腫瘤治療中廣泛在臨床使用放療和常規(guī)化療，這兩種方式大多為非選擇性治療，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也大量殺死了人體正常細(xì)胞，給病患帶了了極大的痛苦和治療的不確定性。常規(guī)治療對(duì)于人體正常組織器官的毒副作用導(dǎo)致患者從生理到心里不能耐受降低了療效，因此，抗癌藥物逐漸轉(zhuǎn)向靶向選擇性研究和長(zhǎng)效緩釋劑。目前用于腫瘤靶向治療的藥物有脂質(zhì)體化療藥、分子靶向藥、藥物緩釋劑等通過多種途徑給予治療。納米藥物自體能夠提高腫瘤細(xì)胞附近的藥物濃度從而提高藥物的利用率和降低藥物的正常組織器官毒副性。以上優(yōu)點(diǎn)使得納米載藥技術(shù)成為腫瘤靶向藥物制劑研究的重點(diǎn)。 在常規(guī)化療之外，光動(dòng)力療法(Photodynamic Therapy, I3DT)以其創(chuàng)傷小、毒性低微、選擇性好、適用性好、可重復(fù)治療、可姑息治療同時(shí)治療后病人恢復(fù)迅速等優(yōu)點(diǎn)成為抗癌治療的新方法。其作用是特定波長(zhǎng)的激光照射使組織吸收的光敏劑受到激發(fā)，而激發(fā)態(tài)的光敏劑又把能量傳遞給周圍的氧，生成活性很強(qiáng)的單態(tài)氧，產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞受損乃至死亡。PET光熱治療是由于金納米粒子具有光熱活性，當(dāng)金納米粒子的光吸收作用而使局部體溫明顯上升發(fā)生在腫瘤細(xì)胞中時(shí),腫瘤細(xì)胞內(nèi)高強(qiáng)度的內(nèi)應(yīng)力會(huì)導(dǎo)致其凋亡。進(jìn)年來考慮病患的耐受性以及藥物治療的有效性，能夠?qū)⒍喾N治療方式囊括在內(nèi)的多功能復(fù)合納米粒子用于抗癌治療逐漸進(jìn)入人們的視線并深入研究已得到最佳的抗腫瘤治療效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有的缺陷，提供了一種多功能的納米載藥控釋
囊泡；
本發(fā)明的另一目的是提供上述納米載藥控釋囊泡的制備工藝。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來具體實(shí)現(xiàn):
一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡，在結(jié)構(gòu)上包括外殼、內(nèi)核和夾層，其中，
所述囊泡的外殼由試劑A的自聚集雙分子層構(gòu)成；
所述內(nèi)核為可調(diào)控吸光波長(zhǎng)范圍的光熱療試劑B，埋于多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的腔內(nèi)；
活性化療抗癌分子試劑C填充于外殼和內(nèi)核之間的夾縫中；
其中，試劑A為PDT光動(dòng)力療法抗癌材料，試劑B為PET光熱療抗癌材料，試劑C為化療抗癌材料。作為優(yōu)選方案，上述多功能抗癌納米載藥控釋囊泡中，試劑A為卟啉類化合物，試劑B為金納米棒，試劑C為阿霉素。進(jìn)一步的,所述多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的粒徑為80-100nm。一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，包含以下步驟，
步驟1:將卟啉分子在乙醇溶劑中溶解后備用，溶液濃度為0.3-5mM。步驟2:制備金種
向0.1-0.5M CTAB溶液中依次加入0.1-0.2M氯金酸、水，攪拌均勻后迅速加入10_20mMNaBH4溶液，冰浴，磁力攪拌混合均勻后30±2°C恒溫敞口放置2_5h得金種，待用，
其中，CTAB 溶液:氯金酸:水:NaBH4 溶液為 6-1OmL =100-400 μ L:l_2mL:550-600 μ L ； 步驟3:金棒制備
向0.1-0.5M CTAB溶液中依次加入0.1-0.2M氯金酸、8-12 mM AgNO3溶液、抗壞血酸、步驟2制得金種，攪拌2-3min，30±2°C恒溫12±3h得金納米棒，
其中，CTAB溶液:氯金酸=AgNO3溶液:抗壞血酸:金種為8-10mL =400-550 μ L:30—80u L:40—80u L:8—15u L0步驟4:取步驟3制備所得金棒，純水離心洗滌兩次，待用。步驟5:將0.1-0.5mg阿霉素加入步驟4所得溶液，震蕩混合均勻。

步驟6:將步驟5所得溶液和步驟I所得溶液按照1-2:1-5的體積比混合，放置陳化lOmin，超濾離心分離。所述步驟I中所用卟啉分子為四苯基卟啉、四-對(duì)羥基苯基卟啉、四(4-羧基苯基)卟啉、四(N-甲基吡啶基)葉啉、四(對(duì)甲氧基苯基)葉啉其中的一種，優(yōu)選四-對(duì)羥基苯基卟啉。所述步驟I所得溶液濃度最好為0.8mM。所述步驟2中，CTAB溶液溶度為0.5M，氯金酸的濃度為0.1M，NaBH4溶液溶度為IOmM,且，CTAB 溶液:氯金酸:水=NaBH4 溶液為 7.5mL:250 μ L:1.65mL:600 μ L。所述步驟3中，CTAB溶液溶度為0.5M，氯金酸的濃度為0.1M，AgNO3溶液溶度為10mM，抗壞血酸溶度為0.2M，且，CTAB溶液:氯金酸=AgNO3溶液:抗壞血酸:金種為IOmL:500 μ L:50 μ L:55 μ L:12 μ L。所述步驟5中所加阿霉素的量?jī)?yōu)選0.2mg0所述步驟6中的體積比優(yōu)選為1:3。優(yōu)選的，所述步驟2中，磁力攪拌混合均勻后30°C恒溫敞口放置2h ;所述步驟3中，30°C恒溫12h。本發(fā)明的有益效果:
由圖1和圖2可以看出，內(nèi)層白色為具有PET光熱療效果的金納米棒，外層為具有I3DT光動(dòng)力治療效果的卟啉類化合物形成的囊泡壁，中間為化療用抗癌藥物。利用囊泡壁構(gòu)成分子對(duì)細(xì)胞環(huán)境PH值的敏感性做到定向聚集在癌細(xì)胞附近，同時(shí)控制化療藥物從囊泡壁向外擴(kuò)散速率做到藥物的緩釋和定點(diǎn)釋放。在光線照射下，囊泡壁構(gòu)成分子吸收光波產(chǎn)生活性單態(tài)氧達(dá)到PDT光動(dòng)力治療效果，結(jié)構(gòu)內(nèi)核金納米棒利用其可以調(diào)控的最大吸收光波范圍做到吸收不同區(qū)域波長(zhǎng)光線照射加速藥物釋放和升高癌細(xì)胞環(huán)境溫度從而殺死癌細(xì)胞，達(dá)到PET光熱療效果。本發(fā)明首次將載藥緩釋、PDT光動(dòng)力療法和PET光熱療法在納米囊泡中有效復(fù)合，實(shí)現(xiàn)多種功能，克服了現(xiàn)有技術(shù)中功能單一的缺陷，從而增強(qiáng)抗癌治療中病患的耐受性和抗腫瘤治療中的靶向性、有效性和持久性。且本發(fā)明多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝簡(jiǎn)單，易操作。


附圖用來提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說明書的一部分，與本發(fā)明的實(shí)施例一起用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。在附圖中:
圖1是多功能復(fù)合納米囊泡的SEM圖片；
圖2為多功能復(fù)合納米囊泡的TEM圖片。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。實(shí)施例中所涉及的原料市面上均有售。實(shí)施例1
一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，包含以下步驟:
步驟1:將四-對(duì)羥基苯基卟啉在乙醇中溶解后備用，溶液濃度為0.8mmol / L。步驟2 -M 7.5mL 0.5M的CTAB溶液，依次加入250 μ L 0.1M氯金酸、1.65mL水，攪拌均勻后迅速加入600 μ L IOmM NaBH4溶液，冰浴，磁力攪拌3min后30°C恒溫敞口放置2h得金種，待用。步驟3:取IOmL 0.5M的CTAB溶液，依次加入500 μ L 0.1M氯金酸、50 μ L IOmMAgNO3溶液、55 μ L 0.2Μ抗壞血酸、12 μ L步驟2制得金種，攪拌2_3min，30°C恒溫12h得金棒。步驟4:取步驟3制備所得金棒，純水離心洗滌兩次，待用。步驟5:將0.2mg的阿霉素加入步驟4所得溶液，震蕩混合均勻。步驟:6:將步驟5所得溶液和步驟I所得溶液按照1:3體積比混合，放置陳化lOmin，超濾離心分離。實(shí)施例2
一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，包含以下步驟:
步驟1:將四苯基卟啉在乙醇中溶解后備用，溶液濃度為lmmol / L。步驟2:取7.5mL 0.5M CTAB溶液，依次加入250 μ L 0.1M氯金酸，1.65mL水，攪拌均勻后迅速加入600 μ L 12mM NaBH4溶液，冰浴，磁力攪拌3min后30°C恒溫敞口放置2h得金種，待用。步驟3:金棒制備，取IOmL 0.5M CTAB溶液，依次加入500 μ L 0.1M氯金酸，70 μ LIOmM AgNO3溶液，55 μ L 0.2Μ抗壞血酸，12 μ L步驟2制得金種，加入金種后攪拌2_3min，30°C恒溫12h得金棒。`步驟4:取步驟3制備所得金棒，純水離心洗滌兩次，待用。
步驟5:將0.2mg的阿霉素加入步驟4所得溶液，震蕩混合均勻。步驟:6:將步驟5所得溶液和步驟I所得溶液按照1:3體積比混合，放置陳化lOmin，超濾離心分離。實(shí)施例3
一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，包含以下步驟:
步驟1:將四(4-羧基苯基)卟啉在乙醇中溶解后備用，溶液濃度為0.3mmol / L。步驟2 -M 6mL 0.1M CTAB溶液，依次加入100 μ L 0.1M氯金酸，ImL水，攪拌均勻后迅速加入550μ L IOmM NaBH4溶液，冰浴，磁力攪拌3min后30°C恒溫敞口放置5h得金種，待用。步驟3 -M IOmL 0.1M CTAB 溶液，依次加入 400 μ L 0.1M 氯金酸，30 μ L 8mM AgNO3溶液，40 μ L 0.1M抗壞血酸，8 μ L步驟2制得金種，加入金種后攪拌2_3min，30°C恒溫9h得金棒。步驟4:取步驟3制備所得金棒，純水離心洗滌兩次，待用。步驟5:將0.1mg的阿霉素加入步驟4所得溶液，震蕩混合均勻。步驟:6:將步驟5所得溶液和步驟I所得溶液按照1:5體積比混合，放置陳化lOmin，超濾離心分離。實(shí)施例4 一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，包含以下步驟:
步驟1:將四(N-甲基吡啶基)卟啉在乙醇中溶解后備用，溶液濃度為5mmol / L。步驟2 -M IOmL 0.5M CTAB溶液，依次加入400 μ L 0.2M氯金酸，2mL水，攪拌均勻后迅速加入600 μ L 20mMNaBH4溶液，冰浴，磁力攪拌3min后30°C恒溫敞口放置3h得金種，待用。步驟3:取 IOmL 0.5M CTAB 溶液，依次加入 550 μ L 0.2Μ 氯金酸，80 μ L 12mMAgNO3溶液，80 μ L 0.3Μ抗壞血酸，15 μ L步驟2制得金種，加入金種后攪拌2_3min，30°Cfl溫9h得金棒。步驟4:取步驟3制備所得金棒，純水離心洗滌兩次，待用。步驟5:將0.1mg的阿霉素加入步驟4所得溶液，震蕩混合均勻。步驟:6:將步驟5所得溶液和步驟I所得溶液按照2:1體積比混合，放置陳化lOmin，超濾離心分離。實(shí)施例5
一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，包含以下步驟:
步驟1:將四(對(duì)甲氧基苯基)卟啉在乙醇中溶解后備用，溶液濃度為5mmol / L。步驟2 -M 7.5mL 0.2M CTAB溶液，依次加入200 μ L 0.2Μ氯金酸，2mL水，攪拌均勻后迅速加入550 μ L 15mM NaBH4溶液，冰浴，磁力攪拌3min后30°C恒溫敞口放置2h得金種，待用。步驟3:取 IOmL 0.2M CTAB 溶液，依次加入 500 μ L 0.2Μ 氯金酸，60 μ L IOmMAgNO3溶液，60 μ L 0.2Μ抗壞血酸，10 μ L步驟2制得金種，加入金種后攪拌2_3min，30°Cfl溫9h得金棒。步驟4:取步驟3制備所得金棒，純水離心洗滌兩次，待用。
步驟5:將0.5mg的阿霉素加入步驟4所得溶液，震蕩混合均勻。步驟:6:將步驟5所得溶液和步驟I所得溶液按照1:1體積比混合，放置陳化lOmin，超濾離心分離。
以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任 何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡，其特征在于:在結(jié)構(gòu)上包括外殼、內(nèi)核和夾層，其中， 所述囊泡的外殼由試劑A的自聚集雙分子層構(gòu)成； 所述內(nèi)核為可調(diào)控吸光波長(zhǎng)范圍的光熱療試劑B，埋于多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的腔內(nèi)； 活性化療抗癌分子試劑C填充于外殼和內(nèi)核之間的夾縫中； 其中，試劑A為PDT光動(dòng)力療法抗癌材料，試劑B為PET光熱療抗癌材料，試劑C為化療抗癌材料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多功能抗癌納米載藥控釋囊泡，其特征在于:試劑A為卟啉類化合物，試劑B為金納米棒，試劑C為阿霉素。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的多功能抗癌納米載藥控釋囊泡，其特征在于:所述多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的粒徑為80-100nm。
4.一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，其特征在于:包含以下步驟， 步驟1:將卟啉分子在乙醇溶劑中溶解后備用，溶液濃度為0.3-5mM ； 步驟2:制備金種 向0.1-0.5M CTAB溶液中依次加入0.1-0.2M氯金酸、水，攪拌均勻后迅速加入10_20mMNaBH4溶液，冰浴，磁力攪拌混合均勻后30±2°C恒溫敞口放置2_5h得金種，待用， 其中，CTAB 溶液:氯金酸:水=NaBH4 溶液為 6-1OmL =100-400 μ L:l_2mL:550-600 μ L ； 步驟3:金棒制備 向0.1-0.5M CTAB溶液中依次加入0.1-0.2M氯金酸、8-12 mM AgNO3溶液、0.1-0.3M抗壞血酸、步驟2制得金種,攪拌2-3min, 30±2°C恒溫12±3h得金納米棒， 其中，CTAB溶液:氯金酸=AgNO3溶液:抗壞血酸:金種為8-10mL =400-550 μ L:30—80u L:40—80u L:8—15u L ； 步驟4:取步驟3制備所得金棒，純水離心洗滌兩次，待用； 步驟5:將0.1-0.5mg的阿霉素加入步驟4所得溶液，震蕩混合均勻； 步驟6:將步驟5所得溶液和步驟I所得溶液按照1-2:1-5的體積比混合，放置陳化lOmin，超濾離心分離。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，其特征在于:所述步驟I中所用卟啉分子優(yōu)選為四-對(duì)羥基苯基卟啉。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，其特征在于:所述步驟I所得溶液濃度為0.8mM。
7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，其特征在于:所述步驟2中，CTAB溶液溶度為0.5M，氯金酸溶度為0.1M，NaBH4溶液溶度為10mM，且，CTAB溶液:氯金酸:水:NaBH4 溶液為 7.5mL:250 μ L:1.65mL:600 μ L。
8.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，其特征在于:所述步驟3中，CTAB溶液溶度為0.5M，氯金酸溶度為0.1M，AgNO3溶液溶度為10mM，抗壞血酸溶度為0.2M，且，CTAB溶 液:氯金酸=AgNO3溶液:抗壞血酸:金種為IOmL:500 μ L:50 μ L:55 μ L:12 μ L0
9.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，其特征在于:所述步驟5中加入阿霉素為0.2mg，所述步驟6中的體積比為1:3。
10.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝，其特征在于:所述步驟2中，磁力攪拌混合均勻后30°C恒溫敞口放置2h ;所述步驟3中，30°C恒溫12h。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種多功能抗癌納米載藥控釋囊泡，在結(jié)構(gòu)上包括外殼、內(nèi)核和夾層，所述囊泡的外殼由試劑A的自聚集雙分子層構(gòu)成；所述內(nèi)核為可調(diào)控吸光波長(zhǎng)范圍的光熱療試劑B，埋于多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的腔內(nèi)；活性化療抗癌分子試劑C填充于外殼和內(nèi)核之間的夾縫中，其中，試劑A為PDT光動(dòng)力療法抗癌材料，試劑B為PET光熱療抗癌材料，試劑C為化療抗癌材料。本發(fā)明首次將載藥緩釋、PDT光動(dòng)力療法和PET光熱療法在納米囊泡中有效復(fù)合，實(shí)現(xiàn)多種功能，克服了現(xiàn)有技術(shù)中功能單一的缺陷，從而增強(qiáng)抗癌治療中病患的耐受性和抗腫瘤治療中的有效性和持久性。且本發(fā)明多功能抗癌納米載藥控釋囊泡的制備工藝簡(jiǎn)單，易操作。
文檔編號(hào)A61P35/00GK103182083SQ20131006558
公開日2013年7月3日 申請(qǐng)日期2013年3月1日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月1日
發(fā)明者盧小泉, 楊建明, 王志華, 唐智勇 申請(qǐng)人:西北師范大學(xué)