褐苞薯蕷降血糖有效部位的制備方法及其用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種采用褐苞薯蕷為原料獲得降血糖有效部位的制備方法及有效部位的用途。制備方法的特征：采用乙醇提取，然后用氯仿、乙酸乙酯先后分離去除雜質(zhì)，回收、去除溶劑即得稠膏或干膏狀的有效部位；制備工藝條件：提取、分離過(guò)程的溫度為生產(chǎn)車間、實(shí)驗(yàn)室通常的溫度，壓力為常壓。褐苞薯蕷降血糖的有效部位，其本身及其制劑在預(yù)防糖尿病、治療糖尿病中的應(yīng)用。本發(fā)明利用的原料來(lái)源充足；有效部位的降血糖藥理功效確切；為藥食兩用中藥的提取物，安全性高；降血糖的效力明確地用ED50描述；制備工藝簡(jiǎn)便，要求設(shè)備條件低，技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)小，成本低，對(duì)環(huán)境污染小。是提高褐苞薯蕷的附加值、擴(kuò)大其使用范圍的有效途徑。
【專利說(shuō)明】褐苞薯蕷降血糖有效部位的制備方法及其用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及褐苞薯蕷降血糖有效部位的制備方法(提取與分離)及有效部位的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]糖尿病是威脅人類的主要疾病之一，我國(guó)有1.139億成年人患糖尿病，有4.934億糖尿病前期人群，我國(guó)是世界上糖尿病患者最多的國(guó)家[1，2]。
[0003]雖然目前擁有胰島素、磺酰脲、雙胍等多種療效確切的現(xiàn)代藥物，但它們的不良反應(yīng)不僅限制著自身的使用范圍，而且還帶來(lái)一定的風(fēng)險(xiǎn)[3]。因此從傳統(tǒng)中藥中尋找更安全、有效的降血糖藥物就成了當(dāng)前熱點(diǎn)。然而中藥的降血糖作用強(qiáng)度不及上述的現(xiàn)代藥物[4’5]，且多為復(fù)方，用量大、成本高、服用不便。為了克服這些缺點(diǎn)，通常采用提取有效成分或有效部位入藥的方法來(lái)解決。本發(fā)明就是在這樣的技術(shù)背景及指導(dǎo)思想下提出的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種褐苞薯蕷降血糖有效部位的制備方法。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種褐苞薯蕷降血糖的有效部位在預(yù)防、治療糖尿病中的應(yīng)用。
[0005]薯截科植物褐荀薯截⑶persimilis Prain et Burk)的干燥根莖稱“廣山藥”，是某些省、自治區(qū)傳統(tǒng)治療糖尿病(消渴)的藥物及傳統(tǒng)補(bǔ)益食品[6]，試驗(yàn)證明其有預(yù)防性與治療性降低小鼠血糖 升高的作用，具有對(duì)正常小鼠血糖值無(wú)明顯影響的特點(diǎn)[7]。故本發(fā)明以褐苞薯蕷干燥根莖為原料，用提取、分離的操作制備其降血糖的有效部位。由于目前褐苞薯蕷主要作食品使用，附加值低，本發(fā)明制備其降血糖的有效部位，進(jìn)一步提高其附加值、擴(kuò)大其使用范圍。
[0006]發(fā)明所用的原料為人工栽培的薯菌科植物褐荀薯菌(^ioscorea persimiIisPrain et Burk)的干燥根莖。
[0007]發(fā)明的技術(shù)方案
一種褐苞薯蕷降血糖有效部位的制備方法，其特征為:采用乙醇提取，然后用氯仿、乙酸乙酯先后分離去除雜質(zhì)，回收、去除溶劑即得稠膏或干膏狀的有效部位；制備工藝條件:提取、分離過(guò)程的溫度為生產(chǎn)車間、實(shí)驗(yàn)室通常的溫度，壓力為常壓。
[0008]褐苞薯蕷降血糖的有效部位，其本身及其制劑在預(yù)防糖尿病、治療糖尿病中的應(yīng)用。
[0009]本發(fā)明的第一個(gè)目的，可通過(guò)一種制備方法經(jīng)提取、分離等操作獲得褐苞薯蕷的降血糖有效部位來(lái)達(dá)到。該方法的特征:屬有機(jī)溶媒法的范疇；工藝條件:提取分離的溫度為生產(chǎn)車間、實(shí)驗(yàn)室通常的溫度，壓力為常壓；乙醇為提取溶媒，氯仿、乙酸乙酯為分離去除雜質(zhì)的溶媒。
[0010]本發(fā)明的第二個(gè)目的，可通過(guò)一種藥理學(xué)試驗(yàn)方案達(dá)到。該方案是用一種降血糖的藥理學(xué)試驗(yàn)，證實(shí)、定量描述制備的有效部位的降血糖功效與效力，在此基礎(chǔ)上確定其功效、用途、用量、用法等。其特征為:
以四氧嘧啶高血糖小鼠為模型；以降血糖是否有效為實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，凡血糖值下降到正常水平(6.72~7.38mmol/L=121~133mg%M)者，或血糖雖未降至正常值水平，但下降率>30%者均視為有效；反之為無(wú)效(本發(fā)明采用的“小鼠降血糖療效判斷標(biāo)準(zhǔn)”)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中死亡的小鼠(操作不當(dāng)造成的死亡者例外)均作為無(wú)效例計(jì)數(shù)納入統(tǒng)計(jì)。
[0011]小鼠血糖下降率(％)=(給藥前血糖值-給藥后血糖值)/給藥前血糖值x%
測(cè)定制備的有效部位的降血糖的半數(shù)有效量ED5tl,以降血糖的半數(shù)有效量ED5tl值定量地描述制備的有效部位降血糖的效力。
[0012]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)或積極效果:
[1]本發(fā)明所用的原料藥材來(lái)源豐富，價(jià)廉。褐苞薯蕷廣泛分布于廣西、廣東、湖南、福建、江西等，在廣西廣泛栽培，產(chǎn)量居全國(guó)山藥類的第一位，價(jià)格大約為正品山藥(薯蕷D.0pposita Thunb.)的一半。本發(fā)明是提高褐苞薯蕷產(chǎn)品附加值、擴(kuò)大使用范圍的有效途徑。
[0013](2)本發(fā)明的降血糖有效部位制備方法可行性高。所用的提取、分離等操作均簡(jiǎn)單，技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)?。灰笤O(shè)備條件低；在提取、分離有效部位的過(guò)程中，所用的一切有機(jī)溶劑(乙醇、氯仿、乙酸乙酯等)均可回收反復(fù)使用，成本低，對(duì)環(huán)境污染小。
[0014](3)本發(fā)明的降血糖有效部位制備方法的提得率較高(1.78%W/W)。
[0015][4]本發(fā)明的降血糖有效部位的降血糖的效力大。能使四氧嘧啶高血糖小鼠的血糖值降至正?；蛳陆德什坏陀?0%(見(jiàn)上文“本發(fā)明采用的‘小鼠降血糖療效判斷標(biāo)準(zhǔn)’，，)，具有臨床應(yīng)用價(jià)值。例如(申請(qǐng)專利號(hào):200610085512.8)《淮山藥多糖制備方法及其用途》的血糖下降率最高僅為22.08%。
[0016][5]本發(fā)明的降血糖有效部位的半數(shù)有效量ED5tl明確，為指導(dǎo)臨床用量提供堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。目前很少有文獻(xiàn)及專利報(bào)道中藥或中藥制劑降血糖的半數(shù)有效量ed5(i。
[0017](6)本發(fā)明的降血糖有效部位的藥用安全性高。褐苞薯蕷既是藥品又是食品，其提取物的安全性高，既具有現(xiàn)代化中藥的特點(diǎn)，又符合當(dāng)前人們崇尚“回歸自然”、“藥食同源”的身心要求。
[0018]m本發(fā)明的降血糖有效部位的服用量小、價(jià)廉。每天只需0.6g_3g，為一只普通膠囊的裝藥量。折算生藥量?jī)H32-160g。
[0019](B)本發(fā)明的降血糖有效部位的服用方法簡(jiǎn)便。每天僅口服一次，人們易接受?！揪唧w實(shí)施方式】
[0020]本發(fā)明“一種褐苞薯蕷降血糖有效部位的制備方法”是:取干燥褐苞薯蕷根莖的粗粉，按溶媒法用乙醇提取，提取液經(jīng)減壓回收乙醇至稠膏狀，再將稠膏置水浴蒸干為半固體狀浸膏，加入等量的食用淀粉混勻成顆粒狀干浸膏；用氯仿按超聲提取法，對(duì)干浸膏進(jìn)行反復(fù)多次提取，至提取液幾乎無(wú)色，把可溶性雜質(zhì)轉(zhuǎn)溶于氯仿，達(dá)到與干浸膏分離除去的目的，氯仿經(jīng)回收再次使用；收集干浸膏的殘?jiān)?，用水浴蒸干至無(wú)氯仿氣味，再用乙酸乙酯同理同法提取，進(jìn)一步分離除去雜質(zhì)；然后用乙醇同法提取殘?jiān)?，把有效部位轉(zhuǎn)溶于乙醇，棄去殘?jiān)?，收集、合并乙醇提液，?jīng)減壓回收、水浴蒸干乙醇，即得干膏狀的降血糖有效部位。
[0021]本發(fā)明提供“一種褐苞薯蕷的有效部位在預(yù)防、治療糖尿病中的應(yīng)用”，提出一種藥理學(xué)試驗(yàn)方案加以證實(shí)、定量描述褐苞薯蕷的有效部位的降血糖功效與效力。
[0022]其中“證實(shí)褐苞薯蕷的有效部位具有降血糖功效與效力的藥理學(xué)方法”為:把高血糖模型小鼠隨機(jī)分為若干組(各組間的血糖值均數(shù)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P > 0.05);設(shè)立模型組(陰性對(duì)照組，僅給予等量的生理鹽水，ig)、陽(yáng)性對(duì)照組(給予降糖靈，ig)、至少3個(gè)給藥組(給予不同劑量的褐苞薯蕷的有效部位，ig);連續(xù)給藥若干天；根據(jù)小鼠血糖值下降率，按“小鼠降血糖療效判斷標(biāo)準(zhǔn)”判斷其療效，計(jì)數(shù)各組中降血糖有效的小鼠個(gè)數(shù)，算出有效率并同模型組比較，如果某一給藥組的有效率高于模型組，而且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P< 0.05，則證實(shí)褐苞薯蕷的有效部位具有降血糖的藥理學(xué)功效，否則未能證實(shí)。
[0023]此外，“定量描述褐苞薯蕷降血糖有效部位療效的藥理學(xué)方法”為:設(shè)置5個(gè)給藥組，給予不同劑量的褐苞薯蕷降血糖有效部位，連續(xù)給藥若干天，按“小鼠降血糖療效判斷標(biāo)準(zhǔn)”判斷、計(jì)數(shù)有效的小鼠數(shù)，據(jù)此計(jì)算出其降血糖的半數(shù)有效量ed5Q。
[0024]實(shí)施例1
在室溫27° C-32° C、常壓的條件下實(shí)施。取干燥褐苞薯蕷根莖的粗粉5300g，用5300ml食用乙醇浸潤(rùn)后裝入滲漉筒中，按常規(guī)滲漉法提取，收集滲漉液的總量53000ml (為材料重量的10倍ml/g)。合并滲漉液，減壓回收乙醇至稠膏狀，然后置水浴蒸干為半固體狀的浸膏(185.5g);加入等量的食用淀粉(185.5g)與半固體狀的浸膏混勻成顆粒狀干浸膏；將干浸膏分為4等分，分別置于4只250ml具塞三角燒瓶中，各加入150ml氯仿，超聲提取15min,用中速濾紙抽濾，棄去濾液，收集殘?jiān)?，殘?jiān)儆寐确掳瓷贤ㄌ崛?，反?fù)操作3次，此時(shí)提取液已幾乎無(wú)色，棄去濾液，收集殘?jiān)D(zhuǎn)入蒸發(fā)皿，水浴蒸干至無(wú)氯仿氣味；按上同法用乙酸乙酯提取殘 渣，反復(fù)操作3次，此時(shí)提取液已幾乎無(wú)色，棄去濾液，收集殘?jiān)?，轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿，水浴蒸干至無(wú)乙酸乙酯氣味；用食用乙醇按上同法提取殘?jiān)?，反?fù)操作3次，此時(shí)提取液已幾乎無(wú)色，棄去殘?jiān)?，收集濾液，減壓回收乙醇至稠膏狀，繼續(xù)水浴蒸干至無(wú)乙醇味，即得到褐苞薯蕷降血糖的有效部位。有效部位為棕褐色微具流動(dòng)性的稠浸膏，微具焦糖氣；重量94.5g，折合生藥量56g/g，提得率1.78% (w/w)0
[0025]實(shí)施例2
證實(shí)實(shí)施例1制備的有效部位具有降血糖的藥理學(xué)功效。昆明雜交種小鼠(體重22~32g)，一次iv四氧嘧啶70mg/kg，正常喂養(yǎng)72h后用眼球后靜脈叢取血法取血，(取血前禁食12h)，測(cè)定血糖值。選取血糖含量≥10mmol/L(180mg/dL)的動(dòng)物為“高血糖模型小鼠”，供降血糖實(shí)驗(yàn)用。造模成功率為71%。
[0026]按血糖值及性別把高血糖模型小鼠隨機(jī)分為5組，經(jīng)方差分析表明各組間的小鼠血糖值均數(shù)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05)。設(shè)立2個(gè)模型組，僅給予等量的生理鹽水(ig)以及低劑量給藥組(ig實(shí)施例1制備的有效部位200mg/kg)、中劑量給藥組(ig實(shí)施例1制備的有效部位800mg/kg)、高劑量給藥組(ig實(shí)施例1制備的有效部位3g/kg)。由于3次預(yù)試驗(yàn)均未能證實(shí)降糖靈有降血糖的藥效，且原因不明，故不設(shè)降糖靈陽(yáng)性對(duì)照組。
[0027]連續(xù)給藥7天，每日一次，末次給藥前禁食12h，藥后2h用眼球后靜脈叢取血法取血，測(cè)定小鼠的血糖值。根據(jù)血糖值下降率，按“小鼠降血糖療效判斷標(biāo)準(zhǔn)”計(jì)數(shù)各組中降血糖有效的小鼠個(gè)數(shù)，算出有效率，同模型組進(jìn)行比較，經(jīng)行X列表資料的X2檢驗(yàn)，。結(jié)
【權(quán)利要求】
1.一種褐苞薯蕷降血糖有效部位的制備方法，其特征為:采用乙醇提取，然后用氯仿、乙酸乙酯先后分離去除雜質(zhì)，回收、去除溶劑即得稠膏或干膏狀的有效部位；制備工藝條件:提取、分離過(guò)程的溫度為生產(chǎn)車間、實(shí)驗(yàn)室通常的溫度，壓力為常壓。
2.褐苞薯蕷 降血糖的有效部位，其本身及其制劑在預(yù)防糖尿病、治療糖尿病中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P3/10GK103520425SQ201310489899
【公開(kāi)日】2014年1月22日 申請(qǐng)日期:2013年10月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月18日
【發(fā)明者】何報(bào)作, 覃俊佳, 周芳 申請(qǐng)人:廣西中醫(yī)藥大學(xué)