一種治療器官纖維化的藥物組合物及其制備方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種治療器官纖維化的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑：魚腥草干品24～36份或魚腥草生品75～105份，虎杖8～12份，紅景天20～28份，人參8～12份，黃芪20～28份，丹參16～24份，當(dāng)歸9～15份，三七3.5～6.5份，川牛膝8～12份，石斛15～21份，麥冬16～24份，甘草4.5～7.5份。本發(fā)明還提供了該類藥物組合物的制備方法和用途。本發(fā)明藥物組合物配方精當(dāng)，能有效治療肺纖維化，為臨床用藥提供了一種新的選擇。
【專利說明】一種治療器官纖維化的藥物組合物及其制備方法和用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種治療器官纖維化的藥物組合物及其制備方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002]肺纖維化(Pulmonary fibrosis/PF)疾病是多種原因引起肺部炎癥和肺泡持續(xù)性損傷及細(xì)胞外基質(zhì)的反復(fù)破壞、修復(fù)、重建和過度沉積從而導(dǎo)致正常的肺組織結(jié)構(gòu)改變和功能喪失的一類疾病譜，是多種原因引起慢性肺疾病的共同結(jié)局，是呼吸衰竭的主要病理基礎(chǔ)，其病因和發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其確切的發(fā)病機(jī)制雖然目前尚未徹底闡明，但多種細(xì)胞因子及其網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控是其發(fā)生發(fā)展病理機(jī)制的極重要因素。
[0003]肺纖維化屬于國際關(guān)注度極高的一類難治性重大病種，國內(nèi)外研究認(rèn)為:纖維化是慢性病久治不愈的根本原因，也是其致殘、致死的主因，有近50%的死亡與纖維化有關(guān)，而各種慢性肺病久治不愈的根本原因即在于其有纖維化病變。肺纖維化(PF)是器官纖維化中最具代表性、最典型最常發(fā)者，其病因復(fù)雜，除非典型肺炎可致PF外，很多肺系疾病均可導(dǎo)致PF，至少有150種以上病因與之相關(guān)。治療上，目前尚僅限于非特異性抗炎、免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素等方法，其共同特點是缺少特異性治療，且大量使用抗生素和激素，這本身就是導(dǎo)致纖維化和加重纖維化的重要原因。隨著其發(fā)病率、死亡率的不斷上升，PF研究已成為世界關(guān)注熱點，故尋求中醫(yī)藥等其他療法已成當(dāng)務(wù)之急。
[0004]過去認(rèn)為器官的纖維化一旦形成，就不能逆轉(zhuǎn)。然而，上世紀(jì)九十年代以來，大量實驗研究結(jié)果表明，包括肺纖維化在內(nèi)的器官纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的。各種器官纖維化之所以都可以經(jīng)過正確的治療和調(diào)理發(fā)生過程相似的逆轉(zhuǎn)，是因為在細(xì)胞水平和分子水平上各種纖維化形成的過程就非常相似，具有殊途同歸的特點。這些相似的發(fā)生過程提示，一種器官纖維化發(fā)生機(jī)制的研究結(jié)果，也適用于其他各種器官纖維化；對一種器官纖維化的有效治療方法，對阻止、減輕其他各種組織器官纖維化也是有益的(Border WA.Evidencethat TGF-β should be a therapeutic target in diabetic nephropathy.KidneyInt, 1998，54:1390-1391.)。有鑒于此，國內(nèi)外許多學(xué)者集中力量從一種器官纖維化的逆轉(zhuǎn)開始，逐漸擴(kuò)展到多種器官纖維化逆轉(zhuǎn)的研究，獲得了器官纖維化可以逆轉(zhuǎn)的大量證據(jù)，其中包括肺纖維化。
[0005]雖然肺纖維化具有治療可逆性，但目前尚缺乏滿意的西醫(yī)藥防治手段，這可能與肺纖維化發(fā)病的多因素、病變的多靶點、病理進(jìn)程的多樣性等相關(guān)。作為一種典型的復(fù)雜性疾病，以單靶點為主的西醫(yī)化學(xué)藥物經(jīng)常顯得無能為力，中醫(yī)藥等傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在器官纖維化的治療方面擁有很大的潛力和優(yōu)勢，基于療效確切的中醫(yī)藥開發(fā)抗器官纖維化的藥物，特別是開發(fā)抗肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化的藥物，前景日益廣闊。
[0006]中醫(yī)認(rèn)為肺纖維化屬于典型的“本虛標(biāo)實”病證，其病機(jī)為“病已久一本已虛”、“虛、阻相夾”，可歸屬中醫(yī)絡(luò)病范疇(李戎.論艾灸肺俞膏肓俞治療肺纖維化的中醫(yī)理論基礎(chǔ)與施治依據(jù).遼寧中醫(yī)雜志，2004，31 (4):291-293.)。楊珂等報道了一種扶正化瘀方，主要成分為絞股藍(lán)、丹參、冬蟲夏草，用于抗大鼠肺纖維化，效果明顯；常繼亭報道了一種抗纖湯，主要成分為太子參、黃芪、沙參、麥冬、丹參、當(dāng)歸、蛤蚧等10味中藥組成，臨床上用于治療特發(fā)性肺纖維化，療效顯著。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種治療器官纖維化的藥物組合物及其制備方法和用途。
[0008]本發(fā)明提供了一種治療器官纖維化的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑:
[0009]魚腥草干品24~36份或魚腥草生品75~105份，虎杖8~12份，紅景天20~28份，人參8~12份，黃芪20~28份，丹參16~24份，當(dāng)歸9~15份，三七3.5~6.5份，川牛膝8~12份,石斛15~21份,麥冬16~24份，甘草4.5~7.5份。
[0010]進(jìn)一步地，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑:
[0011]魚腥草干品30份或魚腥草生品90份，虎杖10份，紅景天24份，人參10份，黃芪24份，丹參20份，當(dāng)歸12份，三七5份，川牛膝10份，石斛18份，麥冬20份，甘草6份。
[0012]其中，所述黃芪為炙黃芪；所述甘草為炙甘草。
[0013]其中，所述藥物組合物是由所述重量配比的原料藥的水或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加上藥學(xué)上常用的輔料或者輔助性成分制備而成的制劑。
[0014]進(jìn)一步地，所述制劑為經(jīng)胃腸道吸收制劑。
[0015]所述制劑包括口服給藥途徑所用制劑，如膠囊劑、顆粒劑、散劑、片劑、口服液、丸劑等劑型。
[0016]本發(fā)明還提供了上述藥物組合物的制備方法，它包括如下步驟:
[0017](1)按所述重量配比稱取原料藥；
[0018](2)加水或有機(jī)溶劑提取，合并提取液，濃縮后，加上藥學(xué)上可用的輔料或輔助性成分制備成常規(guī)制劑。
[0019]本發(fā)明進(jìn)一步提供了上述藥物組合物在制備治療器官纖維化的藥物中的用途。
[0020]進(jìn)一步地，所述藥物是治療肺纖維化的藥物。
[0021]更進(jìn)一步地，所述藥物是提高肺組織內(nèi)IFN-Y含量的藥物。
[0022]更進(jìn)一步地，所述藥物是治療氣血俱虛、熱毒盛而陰已傷證型的肺纖維化的藥物。
[0023]目前已公認(rèn)“整體觀念”、“辨證施治”、“復(fù)方使用”、“復(fù)方配伍用藥如用兵”是中醫(yī)最科學(xué)最有效的幾大優(yōu)勢，其中“復(fù)方配伍用藥如用兵”是非?？茖W(xué)的中醫(yī)藥原創(chuàng)理論。中醫(yī)組方中各藥如行兵布陣那樣環(huán)環(huán)相扣的嚴(yán)密配伍，是其優(yōu)于西醫(yī)化學(xué)藥配方的有效手段。中醫(yī)方劑理論認(rèn)為，每一方劑，不僅需要根據(jù)病因病機(jī)選擇合適的藥物妥善配伍，同時也應(yīng)符合組方的基本結(jié)構(gòu)，即“君、臣、佐、使”的組方配伍理論，所謂“君、臣、佐、使”的組方配伍，就是其建立在對疾病病機(jī)的全方位判斷基礎(chǔ)上的科學(xué)配比。中醫(yī)用方通過多環(huán)節(jié)、多靶點整合調(diào)節(jié)的生物學(xué)機(jī)制，對肺纖維化這樣具有發(fā)病多因素、病變多靶點、病理進(jìn)程多樣性(“三多”)等復(fù)雜特點、治療困難的疾病或其癥狀進(jìn)行調(diào)控，可以取得比西醫(yī)化學(xué)藥更好、更持久的治療效果，且避免了西醫(yī)化學(xué)藥的毒副作用，而這種療效是建立在上述中醫(yī)傳統(tǒng)原創(chuàng)理論的正確指導(dǎo)之上的，本發(fā)明組方正遵循了這一原則。
[0024]本發(fā)明藥物組合物中，重用魚腥草為君藥，急清其肺熱解其熱毒，虎杖亦善清熱解毒，其與紅景天均有殺滅或抑制病菌、消緩炎癥的功效，故將二味用為臣藥，以輔君藥清解之勞。川牛膝、紅景天、丹參、當(dāng)歸、三七用為左路之佐藥，從一個側(cè)面輔佐君臣增效。人參、黃芪補(bǔ)氣固本；三七富含人參皂苷，具有補(bǔ)氣養(yǎng)血作用；紅景天也是增強(qiáng)人體免疫功能的妙品；當(dāng)歸養(yǎng)血；丹參補(bǔ)血活血；石斛、麥冬滋養(yǎng)肺陰。以上補(bǔ)氣、養(yǎng)血、滋陰的八味藥，共同扶助正氣，顧養(yǎng)本真，以防君臣急清亟解可能傷正之弊，所以一起遣作右路之佐藥，從另一側(cè)面襄助君臣收工。甘草亦有清熱解毒之效，更擅調(diào)和諸藥，因而以之為使藥。
[0025]以上君臣佐使各組藥味職司分明，相輔相成，充分發(fā)揮了中醫(yī)學(xué)所獨有的復(fù)方配伍用藥如排軍布陣般的思辨性科學(xué)研究方法論精髓，對于可以提高纖維化器官內(nèi)IFN-Y含量，對器官纖維化特別是肺纖維化有著良好的治療效果，為臨床用藥提供了一種新的選擇。
【具體實施方式】
[0026]實施例1本發(fā)明藥物組合物的制備
[0027]取魚腥草干品30克，虎杖10克，紅景天24克，人參10克，黃芪24克，丹參20克，當(dāng)歸12克，三七5克，川牛膝10克，石斛18，麥冬20克，甘草6克。各藥味按量稱取，摻以足量的凈水，武火煎沸后改文火再煎煮10分鐘至15分鐘，收集水煎液，再加水煎煮2次，合并各次水煎液，即得湯劑。
[0028]實施例2本發(fā)明藥物組合物的制備
[0029]取魚腥草生品90克，虎杖10克，紅景天24克，人參10克，炙黃芪24克，丹參20克，當(dāng)歸12克，三七5克，川牛膝10克，石斛18，麥冬20克，炙甘草6克。先以70%v/v乙醇提取2次后，合并醇提液，藥渣再以水煎煮2次，合并水煎液。分別將醇提液、水煎液濃縮后，混合，再加入適當(dāng)糊精、可溶性淀粉，制粒，即得顆粒劑。
[0030]實施例3本發(fā)明藥物組合物的制備
[0031]取魚腥草干品24克，虎杖8克，紅景天20克，人參8克，黃芪炙20克，丹參16克，當(dāng)歸9克，三七粉3.5克，川牛膝8克，石斛15，麥冬16克，甘草4.5克。先以70%v/v乙醇提取2次后，合并醇提液，藥渣再以水煎煮2次，合并水煎液。分別將醇提液、水煎液濃縮后，混合，再加入適量糊精、可溶性淀粉，制粒，壓片，即得片劑。
[0032]實施例4本發(fā)明藥物組合物的制備
[0033]取魚腥草36克，虎杖12克，紅景天28克，人參12克，黃芪炙28克，丹參24克，當(dāng)歸15克，三七6.5克，川牛膝12克，石斛21，麥冬24克，甘草6.5克。各藥味按量稱取，摻以足量的凈水，武火煎沸后改文火再煎煮10分鐘至15分鐘，收集水煎液，再加水煎煮2次，合并濾液，濃縮，加入適量微晶纖維素，混勻后，裝膠囊，即得膠囊劑。
[0034]實施例5本發(fā)明藥物組合物的制備
[0035]取實施例1制備的湯劑，靜置，取上清液，濃縮后，干燥，粉碎，備用；取適量聚乙二醇4000，熔融后，將上述藥粉加入熔融基質(zhì)中，75-85°C下保溫；采用各型滴丸機(jī)，滴口內(nèi)/外徑及滴速適度，將其滴入二甲基硅油中，收集滴丸，即得滴丸劑。
[0036]以下通過試驗例具體說明本發(fā)明的有益效果。
[0037]試驗例1本發(fā)明藥物對大鼠實驗性肺纖維化的治療作用
[0038]1、材料與方法
[0039]1.1 材料[0040]1.1.1 動物
[0041 ] 實驗用健康SD大鼠60只，雌雄各半，體重180 土 20g，實驗前單籠馴養(yǎng)I周，飼養(yǎng)溫度和濕度分別為25°C和70%左右。
[0042]1.1.2主要藥品
[0043]本發(fā)明藥物:由實施例1制備，水煎后水浴濃縮至一定濃度，再用蒸餾水配成1.5g生藥/ml的藥液；
[0044]潑尼松:南通制藥廠生產(chǎn)，批號951101，用時研成粉末，以蒸餾水溶解配成50%的混懸液；
[0045]博萊霉素A5 (BLM A5):天津河北制藥廠，批號950902，8mg/支，用時以無菌生理鹽水稀釋成4mg/ml的溶液；
[0046]氯化鈉注射液:張家港市制藥廠，生產(chǎn)批號為01032204，100ml/瓶；
[0047]乙醚:天津市博迪化工有限公司，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號GB/T12951-2002。
[0048]1.1.3主要儀器
[0049]試劑盒:免疫組化、原位雜交成套試劑盒購自博士德生物工程有限公司；1/10000電子分析天平:德國BP61 ；
[0050]BX50光學(xué)顯微鏡:日本OLYMPUS公司；
[0051]Leica圖像分析系統(tǒng)；德國LEICA`公司。
[0052]1.2動物分組及造模
[0053]將前述實驗用SD大鼠隨機(jī)分為4組:空白組、模型組、本發(fā)明藥物治療組(以下簡稱“本方組”)、潑尼松(激素)對照組，每組15只。造模采用國際上通用的博萊霉素(BLMA5)制作大鼠肺纖維化模型。具體方法為，除空白組外，其余3組室溫調(diào)高5°C，即達(dá)到30°C，飲水中兌入適量“造火生熱”的制附片、干姜煎液，并減少喂飼物水分，以造成其“火熱并氣血虛”體征。然后，氣管內(nèi)注入博萊霉素制作大鼠肺纖維化模型:在乙醚麻醉下，將大鼠固定于手術(shù)板上，消毒后切開頸部皮膚，逐層分離，充分暴露氣管，用Iml注射器抽取定量的博萊霉素稀釋液(5mg/kg)，一次性注入其氣管內(nèi)，立即旋轉(zhuǎn)大鼠，使藥物充分均勻散布于雙肺，消毒，縫合，幾分鐘后大鼠醒來即可自由覓食。造模后，模型組、本方組、潑尼松對照組的室溫、喂食均恢復(fù)與空白組相同。上述造模方法所得模型，即為氣血俱虛、熱毒盛而陰已傷證型的肺纖維化模型。
[0054]1.3試驗方法
[0055]造模后第7天開始治療，本發(fā)明藥物中劑量組按人劑量的10倍，即5g生藥/kg給大鼠灌胃；空白組和模型組按等容量生理鹽水灌胃作為對照；潑尼松組第7天開始胃內(nèi)灌入潑尼松5mg/kg體重；連續(xù)治療30天。各組動物在實驗過程中均有不同程度的死亡。治療結(jié)束后，處死動物，快速開胸取肺組織標(biāo)本，都取左中肺，標(biāo)本立即放入_70°C低溫冰箱保存。每組隨機(jī)取8個標(biāo)本，備用以作檢測。
[0056]1.3.1 一般情況觀察
[0057]觀察大鼠食欲、神態(tài)、反應(yīng)能力、體毛、肌肉及呼吸的情況，并每10天稱體重I次。
[0058]1.3.2檢測肺系數(shù)
[0059]肺系數(shù)=肺重量(g)/身體重量(kg)
[0060]1.3.3病理組織形態(tài)光鏡觀察[0061]肺組織常規(guī)固定、包埋、HE染色。根據(jù)Szapiel等的方法確定肺泡炎和肺纖維化的程度。利用HE染色的病理切片將肺泡炎分為四級:無肺泡炎㈠；輕度肺泡炎⑴:肺泡隔因細(xì)胞浸潤增寬，病變范圍局限在全肺的20%以下；中度肺泡炎(++):病變范圍占全肺的20%~50%;重度肺泡炎(+++):呈彌漫性分布，病變范圍大于50%。將肺間質(zhì)纖維化分為四級:無纖維化(_);輕度纖維化(+):受累范圍小于20%;中度纖維化(++):受累范圍占全肺的20%~50%，肺泡結(jié)構(gòu)紊亂；重度肺纖維化(+++):受累范圍大于50%，肺泡融合，肺實質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂。
[0062]1.3.4免疫組化檢測
[0063]肺組織常規(guī)固定、包埋、切片、脫蠟，常規(guī)方法作免疫組化檢測肺組織IFN- Y蛋白的表達(dá)量。在400X視野下選取5個視野先進(jìn)行陽性細(xì)胞計數(shù)，然后以計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)選取10個視野進(jìn)行染色結(jié)果的平均灰度分析。平均灰度可相對定量反映免疫組化陽性強(qiáng)弱的變化，平均灰度與免疫組化陽性染色程度呈負(fù)相關(guān)，即平均灰度值大則陽性表達(dá)弱。
[0064]1.3.5原位雜交檢測
[0065]肺組織常規(guī)固定、包埋、切片、脫蠟，按照試劑盒說明書進(jìn)行原位雜交檢測肺組織IFN-Y的mRNA表達(dá)。在400 X視野下選取5個視野先進(jìn)行陽性細(xì)胞計數(shù)，然后以計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)選取10個視野進(jìn)行染色結(jié)果的平均灰度分析。平均灰度與免疫組化陽性染色程度呈負(fù)相關(guān)，即平均灰度值大則陽性表達(dá)弱。
[0066]1.3.6統(tǒng)計方法
[0067]結(jié)果以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(X 土 S )表示，采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行單因素方差分析，Q檢驗。等級資料結(jié)果采用Ridit分析。
[0068]2、結(jié)果
[0069]2.1肉眼觀察
[0070]結(jié)果如表1所示:
[0071 ] 表1各組大鼠一般情況的比較
[0072]
【權(quán)利要求】
1.一種治療器官纖維化的藥物組合物，其特征在于:它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑:
魚腥草干品24~36份或魚腥草生品75~105份，虎杖8~12份，紅景天20~28份，人參8~12份，黃芪20~28份，丹參16~24份，當(dāng)歸9~15份，三七3.5~6.5份，川牛膝8~12份，石斛15~21份，麥冬16~24份，甘草4.5~7.5份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于:它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑: 魚腥草干品30份或魚腥草生品90份，虎杖10份，紅景天24份，人參10份，黃芪24份，丹參20份，當(dāng)歸12份，三七5份，川牛膝10份，石斛18份，麥冬20份，甘草6份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于:所述黃芪為炙黃芪；所述甘草為炙甘草。
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任意一項所述的藥物組合物，其特征在于:所述藥物組合物是由所述重量配比的原料藥的水或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加上藥學(xué)上常用的輔料或者輔助性成分制備而成的制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于:所述制劑為經(jīng)胃腸道吸收制劑。
6.權(quán)利要求1~5任意一項所述藥物組合物的制備方法，其特征在于:它包括如下步驟: (1)按所述重量配比稱取原料藥； (2)加水或有機(jī)溶劑提取，合并提取液，濃縮后，加上藥學(xué)上可用的輔料或輔助性成分制備成常規(guī)制劑。
7.權(quán)利要求1~5任意一項所述藥物組合物在制備治療器官纖維化的藥物中的用途。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述用途，其特征在于:所述藥物是治療肺纖維化的藥物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述用途，其特征在于:所述藥物是提高肺組織內(nèi)IFN-Y含量的藥物。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于:所述藥物是治療氣血俱虛、熱毒盛而陰已傷證型的肺纖維化的藥物。
【文檔編號】A61P11/00GK103816392SQ201410091475
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2014年3月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月13日
【發(fā)明者】李戎, 楊明, 常全穎, 李富紅, 王戎兒 申請人:成都中醫(yī)藥大學(xué)