本申請要求美國臨時專利申請No.61979149的優(yōu)先權(quán)，該美國臨時專利申請日為2014年4月14日，題目為《用于治療COPD疾病的方法與組合物》，并將其申請內(nèi)容以引用方式全部包括于本申請。技術(shù)背景當(dāng)人在呼吸時，空氣進入肺部并流經(jīng)逐級變小的氣道，氣道周圍分布有平滑肌。當(dāng)這些平滑肌處于病理狀態(tài)時(例如腫脹、收縮等)，可能導(dǎo)致多種肺部疾病(例如哮喘)。哮喘影響全世界約三億人，當(dāng)前治療哮喘的方法包括免疫調(diào)節(jié)、抗炎、與舒緩氣道平滑肌。激素或其衍生物(例如糖皮質(zhì)激素、β腎上腺素激動劑)在這些治療方案中被廣泛應(yīng)用。但是，使用激素與其衍生物可能具有肝、腎及其它器官毒性的風(fēng)險。概述本發(fā)明的一個具體實施方案中，涉及一種用于治療如肺部疾病的方法。該方法包括向有需要的受試對象施用治療有效量的通式(I)的化合物。其中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、D環(huán)或E環(huán)獨自地為完全飽和或部分飽和環(huán)；R1選自H或糖殘基；C2、C11、C12和C19分別獨自被H或-OH取代；R2a及R2b選自H、-COOH或COOR4，或兩者共同形成-CO2-；R4為單糖殘基；R3a和R3b共同形成CH2＝，或分別獨自選自-CH3或-CH2-OH。及所述通式(I)化合物的立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的一個具體實施方案中，還涉及一種治療如肺部疾病的試劑盒。該試劑盒包括一定量的通式(I)化合物。其中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、D環(huán)或E環(huán)獨自地為完全飽和或部分飽和環(huán)；R1選自H或糖殘基；C2、C11、C12和C19分別獨自被H或-OH取代；R2a及R2b選自H、-COOH或COOR4，或兩者共同形成-CO2-；R4為單糖殘基；R3a和R3b共同形成CH2＝，或分別獨自選自-CH3或-CH2-OH。及所述通式(I)化合物的立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體或互變異構(gòu)體；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一些實施方案中，通式(I)化合物可以用于治療肺部疾病。在一些實施方案中，通式(I)化合物在藥學(xué)上可接受的載體中。在一些實施方案中，所涉及疾病包括肺部疾病，其中包括哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、支氣管炎、慢性或急性支氣管收縮、成人呼吸困難綜合征、急性肺損傷以及支氣管擴張中的至少一種。在特定的實施方案中，肺部疾病可以包括哮喘或COPD。在一些實施方案中，A環(huán)和B環(huán)獨自地為完全飽和環(huán)，R2a和R2b共同形成-CO2-。在一些實施方案中，糖殘基是單糖殘基或寡糖殘基。在一些實施方案中，所述糖殘基是單糖殘基或寡糖殘基。在一些實施方案中，單糖可以是阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖醛酸(glucusonicacid)或2-脫氧-葡萄糖醛酸(GlcA)、葡萄糖(Glc)或者鼠李糖(Rha)。在一些實施方案中，寡糖殘基可以是二糖殘基、三糖殘基或四糖殘基。在一些實施方案中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、E環(huán)為完全飽和環(huán)，D環(huán)為部分飽和環(huán)，C12和C19分別獨自被-OH取代，C15和C16分別獨自被2個H取代，R2a和R2b共同形成-CO2-，R3a和R3b為-CH3，R1為單糖殘基或寡糖殘基。在特定的實施方案中，R1為三糖殘基。例如，三糖殘基可以為-Ara-[(1-2)-Rha]-(1-3)-Glc。在一些實施方案中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、E環(huán)為完全飽和環(huán)，D環(huán)為部分飽和環(huán)，C12和C19分別獨自被-OH取代，C15和C16分別獨自被2個H取代，R2a和R2b共同形成-CO2-，R3a和R3b為-CH3，R1為單糖殘基或寡糖殘基。在特定的實施方案中，R1為四糖殘基。例如，四糖殘基可以為-Ara-[(1-2)-Rha]-(1-3)-Glc-(1-2)-Glc。在一些實施方案中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、E環(huán)為完全飽和環(huán)，D環(huán)為部分飽和環(huán)，C11和C19分別獨自被-OH取代，C11被H取代，R2a和R2b共同形成-CO2-，R3a和R3b為-CH3，R1為單糖殘基或寡糖殘基。在特定的實施方案中，R1為三糖殘基。例如，三糖殘基可以為-Ara-[(1-2)-Rha]-(1-3)-Glc。在一些實施方案中，A環(huán)、B環(huán)、E環(huán)為完全飽和環(huán)，C環(huán)、D環(huán)為部分飽和環(huán)，C19被-OH取代，C9被H取代，R2a和R2b共同形成-CO2-，R3a和R3b為-CH3，R1為單糖殘基或寡糖殘基。在特定的實施方案中，R1為三糖殘基。例如，三糖殘基可以為-Ara-[(1-2)-Rha]-(1-3)-Glc。在一些實施方案中，通式(I)化合物分離自苦丁茶的提取物(KE)。在一些實施方案中，受試對象為人。在一些實施方案中，該方法包括向受試對象肺部氣道給以治療有效量的通式(I)化合物。在一些實施方案中，該方法包括通過受試對象吸入通式(I)化合物的方式向受試對象肺部氣道給以治療有效量的通式(I)化合物。在一些實施方案中，所述試劑盒包括一種給藥裝置，例如一種噴霧裝置或一種加壓給藥裝置。本概述目的在于以簡單的形式介紹一系列相關(guān)概念，在后文詳細(xì)說明部分將進一步描述。本概述目的不在于定義要求保護主題的關(guān)鍵特征或必要特征，也不在于限定權(quán)利要求的范圍。附圖說明圖1表示苦丁茶提取物對氣道平滑肌的松弛作用。用不同的溶劑萃取后，將提取物分別溶于相同體積的乙醇中。用10μM乙酰甲膽堿(MCh)刺激支氣管平滑肌，累積加入提取物對其進行松弛。圖1A表示提取物來自正丁醇相，圖1B表示提取物來自乙酸乙酯相，圖1C表示提取物來自水相，圖1D定量表示舒張程度(n＝4)。圖2表示苦丁茶提取物的正丁醇可以減輕哮喘模型小鼠的氣道阻力。C57BL/6成年小鼠由OVA誘導(dǎo)后用乙酰甲膽堿處理。圖2A表示吸入正丁醇相和沙丁胺醇后氣道阻力變化的比例，圖2B表示吸入3分鐘后小鼠氣道阻力變化的比例(n＝8)。圖3A-C表示通過硅膠柱層析分離正丁醇相物質(zhì)得到的27個組分松弛氣道平滑肌的能力(Fr＝洗脫收集的組分)。圖4A-F表示苦丁茶中部分被確證的化合物結(jié)構(gòu)。圖5表示苦丁皂苷A和苦丁皂苷D舒張支氣管環(huán)有劑量依賴效應(yīng)。圖5A和圖5B表示當(dāng)氣道平滑肌受乙酰甲膽堿刺激后，苦丁皂苷D對氣道支氣管環(huán)收縮力的下降作用。圖5C和圖5D表示苦丁皂苷A對氣道支氣管環(huán)收縮力的下降作用。圖6表示在急性哮喘模型小鼠中，苦丁皂苷D可以降低氣道阻力。圖6A表示在吸入PBS、0.03μg苦丁皂苷D、0.3μg苦丁皂苷D、3μg苦丁皂苷D以及3μg沙丁胺醇5分鐘內(nèi)，氣道阻力的下降隨時間變化的曲線圖。圖6B表示吸入所述藥物后，3分鐘時氣道阻力下降相對百分比的統(tǒng)計分析(**P<0.01相對PBS)。圖7表示苦丁皂苷D導(dǎo)致胞漿內(nèi)鈣離子濃度的減少。原代培養(yǎng)的氣道平滑肌細(xì)胞經(jīng)100μM乙酰膽堿刺激后的8分鐘內(nèi)(上排圖片)，鈣離子信號濃度會上升并維持在一定的水平(箭頭所指為細(xì)胞中示例變化)。將乙酰膽堿(ACh)洗掉后，加入含有10μM苦丁皂苷D的新緩沖液，然后再用100μM乙酰膽堿刺激，鈣離子信號濃度會在16-18分鐘內(nèi)顯著下降。圖8表示苦丁皂苷A、經(jīng)鹽酸處理后的有機相與水相提取物對氣道平滑肌的舒張作用。經(jīng)鹽酸處理后，反應(yīng)體系經(jīng)氯仿萃取后可分為有機相和水相。然后，將5μL有機相和5μL水相以及5μL50mM的苦丁皂苷A(溶于DMSO)加入槽室中。檢測這些成分對于由10μM乙酰甲膽堿激發(fā)引起收縮的舒張效果。圖8A表示50μM苦丁皂苷A，圖8B表示有機相，圖8C表示水相。圖9表示L型鈣離子通道可能是苦丁皂苷A的作用靶點。在溶媒對照、50μM苦丁皂苷A或1μM硝苯地平處理下，利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄電壓依賴性鈣通道(VDCC)電流。圖9A表示原代培養(yǎng)的氣道平滑肌細(xì)胞在溶媒對照、50μM苦丁皂苷A、1μM硝苯地平處理后的電流記錄。圖9B表示在溶媒對照(圓型曲線)、50μM苦丁皂苷A(方型曲線)、1μM硝苯地平(三角曲線)處理后峰值電流的電流-電壓關(guān)系。詳細(xì)說明概述本發(fā)明的一個具體實施方案中公開了苦丁茶提取物和/或苦丁茶提取物衍生物在治療受試對象肺部疾病(例如哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)等)中的應(yīng)用。本發(fā)明公開的相關(guān)內(nèi)容表明，苦丁茶提取物和/或苦丁茶提取物衍生物可以松弛氣道平滑肌，緩解受試對象與肺部疾病相關(guān)的癥狀。例如，如所述實施方案所示，苦丁茶提取物(例如苦丁皂苷A、苦丁皂苷D等)可以松弛氣道平滑肌、減輕哮喘性氣道收縮。定義除非另外定義，本發(fā)明中所有的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的含義一致。雖然也可采用與本文所述相似或等同的任何方法和材料實施或測試，但本文描述了優(yōu)選的方法和材料。為了本發(fā)明保護的目的，下列術(shù)語定義如下。冠詞“一”在本文中是指語法上的一個或多于一個(如至少一個)的對象。舉例來說，“一個單元”意為一個或多于一個單元?！按蠹s”是指量、水平、值、數(shù)字、頻率、百分比、維度、大小、數(shù)量、重量或長度相對于基準(zhǔn)量、水平、值、數(shù)字、頻率、百分比、維度、大小、數(shù)量、重量或長度來說，有30、25、20、15、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1％的不同。在本專利說明中，除非文中另有要求，詞語“含有”、“包含”、“包括”應(yīng)被理解為指包括一個所述的步驟或組分、或一組步驟或組分，但不除外任何其它的步驟或組分、或一組步驟或組分。“由……組成”意為包括且限于其中所述范圍。因此，術(shù)語“由……組成”表明所列組分為必須的或必要的，而且不包括其它組分在內(nèi)。“基本上由……組成”意為包含所有其后所列組分，并且限于不干擾或有助于本發(fā)明所列組分中指定的活性或作用的其它元素。因此，術(shù)語“基本上由……組成”表明所列組分為必須的或必要的，但是其它組分是可選的，并且取決于它們是否影響所列元素的活性或作用。如本文所用，術(shù)語“烷基”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)，是指飽和脂肪族烷基，包括1-20個碳原子的直鏈或支鏈烷基(數(shù)字范圍，如此處的1-20，意為基團，此處該烷基可以含1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子等，最多含有20個碳原子)。含有1-4個碳原子的烷基是指低級烷基。當(dāng)提到低級烷基缺少取代基時，是指無取代的低級烷基。更優(yōu)選地，烷基是指含有1-10個碳原子的中等烷基，如甲基、乙基、丙基、2-異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基及類似烷基。最優(yōu)選地，是指含有1-4個碳原子的低級烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基及類似烷基。烷基可以被取代也可不被取代。當(dāng)被取代時，取代基個數(shù)為1個或多個，優(yōu)選1-3個，更優(yōu)選1個或2個，取代基團獨立地選自包括鹵素、羥基、無取代的低級烷氧基、被1個或多個取代基取代的芳基，芳基取代優(yōu)選1個、2個或3個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、可選地被1個或多個取代基取代的芳氧基，芳氧基取代基個數(shù)優(yōu)選1個、2個或3個，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、環(huán)中有1-3個氮原子的六元雜環(huán)，環(huán)中的碳原子可選地為1個或多個基團取代，優(yōu)選1個、2個或3個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、環(huán)中有1-3個選自氮、氧、硫的雜原子的五元雜環(huán)，環(huán)中的碳或氮原子可選地被1個或多個基團取代，取代基個數(shù)優(yōu)選1個、2個或3個，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、環(huán)中有1-3個選自氮、氧、硫的雜原子的五元或六元雜環(huán)，環(huán)中的碳或氮原子(如果有)可選地被1個或多個基團取代，優(yōu)選1個、2個或3個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、巰基、(無取代的低級烷基)硫、可選地被1個或多個基團取代的芳硫，取代基個數(shù)優(yōu)選1個、2個或3個，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、氰基、?；?、硫代?；?、O-氨基甲酰、N-氨基甲酰、O-硫代氨基甲酰、N-硫代氨基甲酰、C-酰胺基、N-酰胺基、硝基、N-磺酰胺、S-磺酰胺、RS(O)-、RS(O)2-、-C(O)OR、RC(O)O-以及-NR13R14，其中R13和R14獨立地選自氫、無取代的低級烷基、三鹵甲基、環(huán)烷基、雜環(huán)及可選地被1個或多個取代基取代的芳基，取代基個數(shù)優(yōu)選1個、2個或3個，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基。優(yōu)選1個或2個取代的烷基，取代基團獨立地選自羥基、環(huán)中有1-3個選自氮、氧、硫的雜原子的五元或六元雜環(huán)，環(huán)中的碳或氮原子(如果有)可選地被1個或多個基團取代，優(yōu)選1個、2個或3個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、環(huán)中有1-3個選自氮、氧、硫的雜原子的五元雜環(huán)，環(huán)中的碳或氮原子可選地被1個或多個基團取代，優(yōu)選1個、2個或3個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、環(huán)中有1-3個氮原子的六元雜環(huán)，環(huán)中的碳原子可選地被1個或多個基團取代，優(yōu)選1個、2個或3個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、或-NR13R14，其中R13和R14獨立地選自氫和烷基。更優(yōu)選1個或2個取代的烷基，取代基團獨立地選自羥基、二甲胺基、乙胺基、二乙胺基、二丙胺基、吡咯酮基、哌啶基、嗎啉基、哌嗪基、4-低級烷基哌嗪基、苯基、咪唑基、吡啶基、二嗪基、嘧啶堿基、噁唑基、三嗪基以及類似基團。如本文所用，術(shù)語“芳香基”、“芳”、“芳基”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)，是指含有6-14個碳原子的芳香環(huán)基團(例如六元單環(huán)、十元雙環(huán)或十四元三環(huán)體系)，示例性的芳基包括苯基、萘基、聯(lián)苯基、茚基及蒽基。如本文所用，術(shù)語“鹵素”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)，是指氟取代(“氟”，其可以被描述為-F)、氯取代(“氯”，其可以被描述為-Cl)、溴取代(“溴”，其可以被描述為-Br)或碘取代(“碘”，其可以被描述為-I)。如本文所用，術(shù)語“環(huán)烷基”是指三到八元全碳單環(huán)、全碳五元并六元或六元并六元雙環(huán)或多并環(huán)(“并”環(huán)體系是指體系中每兩個環(huán)共用相鄰的一對碳原子)，其中一個或多個環(huán)可能含有一個或多個雙鍵，但任一環(huán)都不具有完整的耦合pi電子體系。舉例(但不限于此)來說，環(huán)烷基是指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己二烯基、金剛烷基、環(huán)庚基、環(huán)庚三烯基以及類似基團。環(huán)烷基可被取代也可不被取代。當(dāng)被取代時，取代基團數(shù)為1個或多個，優(yōu)選1個或2個，取代基團獨立地選自無取代的低級烷基、三鹵烷基、鹵素、羥基、無取代的低級烷氧基、可選地被1個或多個取代基取代的芳基，芳基取代優(yōu)選1個或2個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、可選地被1個或多個取代基取代的芳氧基，芳氧基取代優(yōu)選1個或2個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、環(huán)中有1-3個氮原子的六元雜環(huán)，環(huán)中的碳原子可選地被1個或多個基團取代，優(yōu)選1個或2個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、環(huán)中有1-3個選自氮、氧、硫的雜原子的五元雜環(huán)，環(huán)中的碳或氮原子可選地被1個或多個基團取代，優(yōu)選1個或2個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、環(huán)中有1-3個選自氮、氧、硫的雜原子的五元或六元雜環(huán)，環(huán)中的碳或氮原子(如果有)可選地被1個或多個基團取代，優(yōu)選1個、2個或3個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、巰基、(無取代的低級烷基)硫、可選地被1個或多個基團取代的芳硫，優(yōu)選1個或2個基團取代，取代基團獨立地選自鹵素、羥基、無取代的低級烷基或無取代的低級烷氧基、氰基、?；⒘虼；?、O-氨基甲酰、N-氨基甲酰、O-硫代氨基甲酰、N-硫代氨基甲酰、C-酰胺基、N-酰胺基、硝基、N-磺酰胺、S-磺酰胺、RS(O)-、RS(O)2-、-C(O)OR、RC(O)-以及如上定義的-NR13R14。如本文所用，術(shù)語“烯基”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)，是指一類含有至少兩個碳原子且有至少一個碳-碳雙鍵的低級烷基團。代表性的例子包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基，1-、2-或3-丁烯基，以及類似的結(jié)構(gòu)。如本文所用，術(shù)語“炔基”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)，是指一類含有至少兩個碳原子且有至少一個碳-碳三鍵的低級烷基團。代表性的例子包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基，1-、2-或3-丁炔基，以及類似的結(jié)構(gòu)。如本文所用，術(shù)語“芳基”是指含有1-12個碳原子且至少1個環(huán)具有共軛pi電子體系的全碳單環(huán)或并環(huán)(如環(huán)之間共用相鄰的一對碳原子)。芳基的例子包括但不限于苯基、萘基和蒽基。芳基可被取代也可不被取代。當(dāng)被取代時，取代基個數(shù)為1個或多個，優(yōu)選1個、2個或3個，更優(yōu)選1個或2個。取代基獨立地選自包括無取代低級烷基、三鹵烷基、鹵素、羥基、無取代的低級烷氧基、巰基、(無取代的低級烷基)硫、氰基、?；⒘虼；?、O-氨基甲酰、N-氨基甲酰、O-硫代氨基甲酰、N-硫代氨基甲酰、C-酰胺基、N-酰胺基、硝基、N-磺酰胺、S-磺酰胺、RS(O)-、RS(O)2-、-C(O)OR、RC(O)-以及如上定義的-NR13R14在內(nèi)的取代基。優(yōu)選地，芳基可選地被1個或2個取代基取代，取代基獨立地選自鹵素、無取代的低級烷基、三鹵烷基、羥基、巰基、氰基、N-氨基、單或二烷基胺基、羧基或N-磺酰胺基。如本文所用，術(shù)語“雜芳基”是指一個單環(huán)，或者5-12個環(huán)原子組成的并環(huán)(例如環(huán)之間共用相鄰的一對碳原子)。環(huán)原子包含1個、2個或3個選自N、O或S的雜原子，其余的環(huán)原子為C。另外，該類環(huán)系具有完整的共軛pi電子體系。無取代的雜芳基包括但不限于吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、吡唑、吡啶、嘧啶、喹啉、異喹啉、嘌呤和咔唑。雜芳基可以被取代也可不被取代。當(dāng)被取代時，取代基個數(shù)為1個或多個，優(yōu)選1個、2個或3個，更優(yōu)選1個或2個。取代基獨立地選自包括無取代低級烷基、三鹵烷基、鹵素、羥基、無取代的低級烷氧基、巰基、(無取代的低級烷基)硫、氰基、?；?、硫代?；?、O-氨基甲酰、N-氨基甲酰、O-硫代氨基甲酰、N-硫代氨基甲酰、C-酰胺基、N-酰胺基、硝基、N-磺酰胺基、S-磺酰胺基、RS(O)-、RS(O)2-、-C(O)OR、RC(O)-、以及如上定義的-NR13R14在內(nèi)的組合。優(yōu)選地，雜芳基可選地被1個或2個取代基取代，取代基獨立地選自鹵素、無取代的低級烷基、三鹵烷基、羥基、巰基、氰基、N-氨基、單或二烷基胺基、羧基或N-磺酰胺。如本文所用，術(shù)語“雜環(huán)”是指含有5-9個環(huán)原子的單環(huán)或并環(huán)，其中1個或2個環(huán)原子為選自氮、氧或S(O)n(n為0到2的整數(shù))的雜原子，其余的為碳原子。這些環(huán)也可有1個或多個雙鍵，但是，這些環(huán)不具有完整的耦合pi電子體系。舉例(但不限于此)來說，無取代的雜環(huán)為吡咯酮基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、巰基嗎啉基、高哌嗪基以及類似結(jié)構(gòu)。雜環(huán)可被取代也可不被取代。當(dāng)被取代時，取代基個數(shù)為1個或多個，優(yōu)選1個、2個或3個，更優(yōu)選1個或2個，取代基團獨立地選自無取代的低級烷基、三鹵烷基、鹵素、羥基、無取代的低級烷氧基、巰基、(無取代的低級烷基)硫、氰基、?；?、硫代酰基、O-氨基甲酰、N-氨基甲酰、O-硫代氨基甲酰、N-硫代氨基甲酰、C-酰胺基、N-酰胺基、硝基、N-磺酰胺基、S-磺酰胺基、RS(O)-、RS(O)2-、-C(O)OR、RC(O)-以及如上定義的-NR13R1。優(yōu)選地，雜環(huán)可選地被1個或2個基團取代，取代基團選自鹵素、無取代的低級烷基、三鹵烷基、羥基、巰基、氰基、N-氨基、單或二烷基胺基、羧基或N-亞磺酰氨基。如本文所用，術(shù)語“羥基”是指-OH基團。如本文所用，術(shù)語“烷氧基”是指-O-(無取代烷基)和-O-(無取代環(huán)烷基)。代表性例子包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基、環(huán)戊氧基、環(huán)己氧基以及類似結(jié)構(gòu)。如本文所用，術(shù)語“芳氧基”是指-O-芳基和-O-雜芳基，如本文定義。代表性例子包括但不限于苯氧基、吡啶氧基、呋喃氧基、噻吩氧基、嘧啶氧基、吡嗪氧基以及類似結(jié)構(gòu)和其衍生物。術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)的”或者“雜環(huán)基”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)，是指全飽和(如“雜環(huán)烷基”)的、非芳香部分飽和的(如“雜環(huán)烯基”)或雜環(huán)芳香族(如“雜芳環(huán)”)的環(huán)結(jié)構(gòu)，典型地有3到大約20個碳原子，更典型地有3到大約14個碳原子。例如，雜環(huán)基團可以為四到大約七元的單環(huán)體系、七到大約十一元的雙環(huán)體系或十到大約十五元的三環(huán)體系，其中在至少含有一個碳原子的環(huán)中至少有一個雜原子。雜環(huán)基團中每個含有雜原子的環(huán)可以含有1、2、3或4個選自氮原子、氧原子和/或硫原子的雜原子，其中氮和硫雜原子可選地被氧化，氮雜原子還可以可選地被季銨鹽化。雜環(huán)基可以被連在環(huán)或環(huán)體系的任意雜原子或碳原子上。雜環(huán)可以為單環(huán)，一般有3-7個環(huán)原子，典型地有3-6個環(huán)原子，更典型地有5-6個環(huán)原子。示例性的單雜環(huán)基包括呋喃基、噻吩基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑、噁二唑基(包括1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基以及1,3,4-噁二唑基)、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁噻唑基、噁三唑基(包括1,2,3,4-噁三唑基和1,2,3,5-噁三唑基)、吡啶基、噠嗪基(又稱為1,2-二嗪基)、嘧啶基(又稱為1,3-二嗪基)、吡嗪基(又稱為1,4-二嗪基)、三嗪基(包括1,3,5-三嗪基、1,2,4-三嗪基和1,2,3-三嗪基)、噁噻嗪基(包括1,2,5-噁噻嗪基和1,2,6-噁噻嗪基)、氧雜卓基、硫雜卓基、二氫呋喃基、四氫呋喃基、二氫噻吩基、四氫噻吩基、異吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、異咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、二硫雜環(huán)戊二烯基、氧硫雜環(huán)戊二烯基、氧硫雜環(huán)戊烷基、噁唑烷基、異噁唑烷基、噻唑啉基、異噻唑啉基、噻唑烷基、異噻唑烷基、二惡唑基(包括1,2,3-二惡唑基、1,2,4-二惡唑基、1,3,2-二惡唑基和1,3,4-二惡唑基)、吡喃基(包括1,2-吡喃基和1,4-吡喃基)、二氫吡喃基、四氫吡喃基、哌啶基、哌嗪基、噁嗪基(包括1,2,3-噁嗪基、1,3,2-噁嗪基、1,3,6-噁嗪基、1,2,6-噁嗪基和1,4-噁嗪基)、異噁嗪基(包括o-異噁嗪基和p-異噁嗪基)、噁二嗪基(包括1,4,2-噁二嗪基和1,3,5,2-噁二嗪基)、嗎啉基、吖庚因基和二氮雜卓基。示例性的單雜環(huán)基包括吡咯烷基、吡咯基、吡唑基、氧雜環(huán)丁烷基、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑基、噁唑烷基、異噁唑烷基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、異噻唑基、異噻唑烷基、呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮雜卓基、氮雜卓基、4-哌啶酮基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、二嗪基、四氫吡喃基、嗎啉基、硫嗎啉基、1-氧化硫嗎啉基、1,1-二氧化硫嗎啉基、1，3-二氧雜環(huán)戊烷基和四氫-1，1-二氧代噻吩基、三唑基、三嗪基及類似結(jié)構(gòu)。雜環(huán)還可以為2-5(更典型地為2或3)個環(huán)并在一起，例如吲嗪基、吡喃并吡咯基、嘌呤基、咪唑并吡嗪基、咪唑并噠嗪基、吡啶并吡啶基(包括吡啶[3,4-b]吡啶基、吡啶[3,2-b]吡啶基、吡啶[4,3-b]吡啶基和萘啶基)、蝶啶基、噠嗪并四嗪基、吡嗪并四嗪基、嘧啶并四嗪基、6,7-二氫-5H-[1]氮茚基、吡唑并嘧啶基、吡唑并吡嗪基、吡唑并噠嗪基或4H-喹嗪基。在一些實施方案中，多環(huán)雜環(huán)為吲哚嗪基、吡喃并吡咯基、嘌呤基、吡啶并吡啶基、6,7-二氫-5H-[1]氮茚基以及4H-喹嗪基。示例性的雙環(huán)雜環(huán)基包括吲哚基、苯并噻唑基、苯并惡唑基、亞甲二氧基苯、苯并噻吩基、奎寧環(huán)基、喹啉基、四氫異喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、吲嗪基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、苯并吡喃基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基(例如呋喃[2,3-c]吡啶基、呋喃[3,2-b]吡啶基或呋喃[2,3-b]吡啶基)、二氫異吲哚基、二氫喹唑啉基(例如3,4-二氫-4-氧代-喹唑啉基)、四氫喹啉基以及類似結(jié)構(gòu)。示例性的三環(huán)雜環(huán)基包括咔唑基、苯并吲哚基、菲咯啉基、吖啶基、菲啶基、噸基(又稱氧雜蒽基)以及類似結(jié)構(gòu)。其它并雜環(huán)基的例子包括苯并雜環(huán)基，如苯并呋喃基(也稱“香豆酮基”)、異苯并呋喃基、苯并惡唑基、苯并異噁唑基、氨茴基、苯并噻吩基、異苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并噻二唑基、苯并惡二唑基、吲哚基、異吲唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、苯并吡啶基(包括喹啉基和異喹啉基)、酞嗪基、喹喔啉基、苯并二嗪基(包括噌啉基和喹唑啉基)、苯并咪唑并噻唑基、咔唑基、吖啶基、異吲哚基、假吲哚基、苯并二氧雜環(huán)戊烯基、苯并二氫吡喃基、異苯并二氫吡喃基、硫色滿基、異硫色滿基、苯并吡喃基、異苯并吡喃基、苯并噻喃基、異苯并噻喃基、苯并二氧六環(huán)基、四氫異喹啉基、苯并惡嗪基(包括1,3,2-苯并惡嗪基、1,4,2-苯并惡嗪基、2,3,1-苯并惡嗪基和3,1,4-苯并惡嗪基)、苯并異惡嗪基(包括1,2-苯并異惡嗪基和1,4-苯并異惡嗪基)、苯并噁二嗪基和氧雜蒽基。在一些實施方案中，苯并雜環(huán)基為苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并惡唑基、苯并異惡唑基、氨茴基、苯并噻吩基、異苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噁二唑基、吲哚基、異吲唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、苯并吡啶基、酞嗪基、喹喔啉基、苯并二嗪基、咔唑基、吖啶基、異吲哚基、假吲哚基、苯并二氧雜環(huán)戊烯基、苯并二氫吡喃基、異苯并二氫吡喃基、硫色滿基、苯并二氧六環(huán)基、四氫異喹啉基、苯并惡嗪基、苯并異惡嗪基和氧雜蒽基。如本文所用，術(shù)語“雜芳基”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)，是指通常含有5-14個環(huán)原子的芳香雜環(huán)。雜芳基可以為單環(huán)或多(通常2個或3個)并環(huán)。類似的基團包括：五元環(huán)如呋喃基、噻吩基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁噻唑基和噁三唑基；六元環(huán)如吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、二嗪基、三嗪基和噁噻嗪基；七元環(huán)如氧雜卓和硫雜卓；6/5元并環(huán)體系如苯并呋喃、異苯并呋喃、苯并惡唑基、苯并異惡唑基、氨茴基、苯并噻吩基、異苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并噻二唑基、吲哚嗪基、吡喃并吡咯基、苯并惡二唑基、吲哚基、異吲唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、嘌呤基、咪唑并吡嗪基和咪唑并噠嗪基；6/6元并環(huán)體系如喹啉基、異喹啉基、吡啶并吡啶基、酞嗪基、喹喔啉基、苯并二嗪基、蝶啶基、噠嗪并四嗪基、吡嗪并四嗪基、吡啶并四嗪基、苯并咪唑并噻唑基、咔唑基和吖啶基。在一些實施方案中，五元環(huán)包括呋喃基、噻吩基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、吡唑基和咪唑基；六元環(huán)包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、二嗪基和三嗪基；6/5元并環(huán)體系包括苯并惡唑基、苯并異惡唑基、氨茴基、苯并噻吩基、異苯并噻吩基和嘌呤基；6/6元并環(huán)體系包括喹啉基、異喹啉基和苯并二嗪基。示例性的雜芳基包括吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、二嗪基、三唑基、三嗪基及類似結(jié)構(gòu)。如本文所用，術(shù)語“氫”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)是指一個氫取代基，也可以指-H。如本文所用，術(shù)語“羥基”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)是指–OH。如本文所用，術(shù)語“硝基”(單獨或與其它術(shù)語組合使用)是指-NO2。如本文所用，術(shù)語“糖”，是指含有1個或多個單糖殘基的化合物。單糖是指多羥基醛(例如D-葡萄糖)或多羥基酮(例如D-果糖)。單糖可以根據(jù)其所含的碳原子個數(shù)分類：有3個碳的單糖為丙糖，有4個碳的為丁糖，有5個碳的為戊糖，有6個碳的為己糖，有7個碳的為庚糖。例如，六碳多羥基醛如D-葡萄糖是己醛糖，六碳多羥基酮如D-果糖是己酮醣。單糖具有不同的對映異構(gòu)體，例如α或β異構(gòu)體、D或L異構(gòu)體。在一些實施方案中，單糖可以包括無取代的糖例如葡萄糖或半乳糖，修飾的糖，其中1個或多個羥基被氫或取代的碳原子修飾或取代(如唾液酸)?！肮烟恰笔侵腹矁r連接的單糖單元的短鏈(如2-9個單糖)。例如，寡糖包括二糖(含兩個單糖)、三糖(含三個單糖)、四糖(含四個單糖)。“多醣”是指共價連接的單糖單元的長鏈(如10單糖以上)。寡糖和多醣可以包含多種單糖組合的直鏈或支鏈。在特定的實施方案中，直鏈或支鏈?zhǔn)怯善咸烟?Glc)、阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖醛酸(GlcA)、鼠李糖(Rha)的多種組合。糖分子部分可以包括非糖基團，例如，模擬單糖殘基結(jié)構(gòu)的抗獨特型抗體或環(huán)己烷衍生物。舉例來說，模擬單糖殘基結(jié)構(gòu)但只含有少量或不含有單糖殘基的化合物可以使用計算機三維建模程序確定，例如Hricouini等的模型(Biochem.31:10018-10023(1992))。如本文所用，單糖殘基可以包括單糖殘基或模擬單糖殘基的非糖基團。二糖殘基可以包括二糖殘基或模擬二糖殘基的非糖基團。寡糖殘基可以包括寡糖殘基或模擬寡糖殘基的非糖基團。如本文所用，術(shù)語“取代”，是指一個化合物具有取代基，該取代基至少包含一個帶有一個或多個氫原子的碳原子、氮原子、氧原子或硫原子。如果一個取代基被描述為被“取代”，是指一個非氫取代基占據(jù)了一個碳、氮、氧、或硫上的一個氫的位置。舉例來說，一個取代的烷基取代基是指其中至少有一個非氫取代基占據(jù)了烷基上一個氫的位置。進一步說明，單氟烷基是指被一個氟取代的烷基，二氟烷基是指被兩個氟取代的烷基。應(yīng)該指出的是，如果有一個以上取代，那么每個非氫取代基可以相同或不同(除非另有說明)。如果一個取代基被描述為“可選地取代”，那么取代基團可以(1)被取代，或(2)不被取代。當(dāng)一組取代基中的取代基被描述為可選擇地取代時，該組取代基中的每個取代基上可發(fā)生取代的任一原子都可以(1)被取代或(2)不被取代。這一特點指明該組取代基中一些取代基是不可被取代的?？砂l(fā)生取代的原子包括如至少連有一個氫的碳、至少連有一個氫的氧、至少連有一個氫的硫或至少連一個氫的氮。另一方面，單獨的氫、鹵素、氧代以及氰基不屬于可取代的范疇?！胺€(wěn)定的化合物”和“穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)”表示這樣的化合物足夠穩(wěn)定，經(jīng)受得住從反應(yīng)混合物分離到有用的純度以及配制成有效治療劑?！八帉W(xué)上可接受的載體、稀釋劑、賦形劑”包括但不限于任何的已被美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)可用于人或家養(yǎng)動物的佐劑、載體、賦形劑、助流劑、甜味劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、增味劑、表面活性劑、潤濕劑、分散劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、等滲劑、溶劑或乳化劑。在一些實施方案中，一種藥學(xué)上可接受的載體可以包括一種或多種非活性藥用組分。藥學(xué)上可接受的載體系統(tǒng)中的非活性藥用組分可以包括穩(wěn)定劑、防腐劑、添加劑、佐劑、噴霧劑、壓縮空氣或其它適宜的氣體，或其它適宜的與藥效化合物(如一種活性成分，原料藥)合用的非活性藥用成分。藥學(xué)上可接受的載體(如吸入載體)可以包括藥學(xué)上適宜的為本領(lǐng)域人員所知的用于多種吸入劑型的非活性成分，如氣霧劑噴射劑(如氫氟烷噴射劑)、表面活性劑、添加劑、懸浮劑、溶劑、穩(wěn)定劑和類似成分。酒精是一個作為載體的好例子，根據(jù)劑型，它可被視為活性成分或非活性成分。如本文所用，吸入劑型包括但不限于一種噴霧劑。該噴霧劑作為一種通過加壓包裝、含有原料藥(API)的藥物產(chǎn)品，可通過激發(fā)一種用于嗅覺上皮局部給藥的閥門系統(tǒng)釋放。吸入劑型還可通過口(舌和舌下噴霧)或肺部(吸入噴霧)給藥。泡沫噴霧作為一種劑型包含一種或多種原料藥(API)、表面活性劑、水或非水性溶液、以及推進液。如果推進液在內(nèi)相溶液(如水包油乳劑)中，噴出的是穩(wěn)定泡沫；如果推進液在外相溶液(如油包水乳劑)中，噴出的是噴霧或很快破裂的泡沫。作為一種加壓劑型定量噴霧劑需借助定量閥使用，定量閥可以使每次噴發(fā)出均一量的噴霧。粉末噴霧劑作為一種通過加壓包裝、含有原料藥(API)的產(chǎn)品，可通過激發(fā)一種恰當(dāng)?shù)拈y門系統(tǒng)釋放粉末。氣霧噴霧器是一種噴霧產(chǎn)品，該類產(chǎn)品使用一種壓縮氣體作為推進液，以提供使產(chǎn)品以濕霧噴出所需的動力，該類產(chǎn)品可用于溶于水性溶液的藥用制劑。“藥學(xué)上可接受的鹽”包括酸式鹽和堿式鹽?！八帉W(xué)上可接受的酸式鹽”是指可保持游離堿的生物活性和性質(zhì)的鹽，該類鹽不會出現(xiàn)不理想的生物活性或其它方面的變化。該類鹽可由無機酸構(gòu)成，例如但不限于鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及類似的酸。該類鹽還可由有機酸構(gòu)成，例如但不限于乙酸、二氯乙酸、己二酸、褐藻酸、抗壞血酸、天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、樟腦酸、樟腦磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、檸檬酸、環(huán)拉酸、十二烷基磺酸、1,2-乙二磺酸、乙烷磺酸、羥乙基磺酸、蟻酸、延胡索酸(fiimaricacid)、半乳糖二酸、龍膽酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、2-氧代戊二酸、甘油磷酸、羥基乙酸、馬尿酸、異丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、順丁烯二酸、蘋果酸、丙二酸、苦杏仁酸、甲烷磺酸、粘酸、萘-1,5-二磺酸、2-萘磺酸、1-萘酚-2-甲酸、煙酸、油酸、乳清酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、丙酸、焦谷氨酸、丙酮酸、水楊酸、4-氨基水楊酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、酒石酸、硫氰酸、對甲苯磺酸、三氟乙酸、十一烯酸及類似酸?！八帉W(xué)上可接受的堿式鹽”是指可保持游離酸的生物活性和性質(zhì)的鹽，該類鹽不會出現(xiàn)不理想的生物活性或其它方面的變化。這些鹽通過向游離酸中加入無機堿或有機堿制成。通過無機堿得到的鹽包括但不限于鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、銅鹽、錳鹽、鋁鹽及類似鹽。優(yōu)選的無機鹽為銨鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽以及鎂鹽。通過有機堿得到的鹽包括但不限于一級、二級、三級銨鹽，取代的胺包括天然取代的胺、環(huán)胺以及堿性離子交換樹脂，例如氨氣、異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙醇胺、丹醇、2-二甲氨基乙醇、2-二乙氨基乙醇、二環(huán)己胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、哈胺、膽堿、甜菜堿、苯乙芐胺、N,N'-雙芐基乙撐二胺、乙二胺、葡萄糖胺、甲葡糖胺、可可堿、三乙醇胺、緩血酸胺、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚酰胺樹脂以及類似結(jié)構(gòu)。優(yōu)選的有機堿為異丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二環(huán)己胺、膽堿和咖啡因。通常結(jié)晶會產(chǎn)生所公開化合物的溶劑化產(chǎn)物。當(dāng)在本文中使用時，術(shù)語“溶劑化物”是指一種包含了一種或多種本專利公開的化合物分子與一種或多種溶劑分子的聚合物。溶劑可能是水，此時溶劑化物可能是水合物?？蛇x地，溶劑還可能是有機溶劑。因此，本專利公開的化合物可以作為水合物存在，包括單水合物、二水合物、半水合物、倍半水合物、三水合物、四水合物及類似結(jié)構(gòu)，還可作為相應(yīng)的溶劑化產(chǎn)物存在。本發(fā)明公開的化合物可以是真正的溶劑化物，而在其它情況下，本發(fā)明公開的化合物也可以是僅保有一部分水，或者是保有水與一些溶劑的混合物?！八幬锝M合物”是指本發(fā)明公開的化合物與本領(lǐng)域內(nèi)普遍接受的給藥媒介的組合物，所述給藥媒介將活性化合物遞送給哺乳動物，例如人。該媒介包括所有藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑?！盎旧稀笔侵笌缀跞炕蛲耆?5％、96％、97％、98％、99％或更高地一些給定的數(shù)量。如本文所用，“醫(yī)治”和“治療”是指對受試對象施用或應(yīng)用一種治療試劑，或在受試對象上施行一種步驟或模式，其目的為獲得一種疾病或健康相關(guān)狀況的治療收益，包括：(1)預(yù)防哺乳動物得病或出現(xiàn)癥狀，特別是指該哺乳動物易出現(xiàn)癥狀，但還未被診斷為患病時；(2)抑制疾病或癥狀，即阻止其發(fā)展；(3)緩解疾病或癥狀，即引起疾病或癥狀消退；或(4)緩解由疾病引發(fā)的癥狀，即止痛而不處理導(dǎo)致疼痛的疾病。例如，治療患有哮喘或COPD的受試對象，包括降低與哮喘、COPD相關(guān)的一種或多種癥狀的頻率和/或嚴(yán)重程度(例如呼吸困難、哮鳴、咳嗽、胸悶、鼻塞等)。如本文所用，術(shù)語“預(yù)防”、“抑制”、“減少”或任何這些術(shù)語的變體，包括任意程度的降低或完全抑制以實現(xiàn)預(yù)期的結(jié)果。例如，與正常相比，活性或癥狀程度可以降低5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多，或者此處可導(dǎo)出的任一范圍。如本文所用，術(shù)語“疾病”和“癥狀”可以互換使用，或在某種特定的癥狀中含義不同，所述癥狀可能還沒有已知病因(病因還未被發(fā)現(xiàn))，因此其還未被認(rèn)為是一種疾病而只是被認(rèn)為是一種不理想的狀態(tài)或癥狀，其中或多或少的特定的癥狀已被臨床醫(yī)生確認(rèn)。舉例來說，本發(fā)明公開的疾病和/或癥狀中可以包括哮喘、慢性或急性支氣管收縮、慢性支氣管炎、小氣道阻塞和肺氣腫、阻塞性或炎癥型氣道疾病(如慢性嗜酸細(xì)胞性肺炎、COPD等)、支氣管炎、急性肺損傷、支氣管擴張等。如本文所用，術(shù)語“施用”和“給藥”用來描述將本發(fā)明公開的組合物施用或給于受試對象、靶點(如細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)的一部分等)、或使組合物直接與靶點并存的過程。在一些實施方案中，“施用”和“給藥”包括以受試對象吸入的方式使得本發(fā)明公開的組合物給于受試對象、靶點(如細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)的一部分等)或使組合物直接與靶點并存的過程。在一些實施方案中，本發(fā)明公開的組合物可通過口服、靜脈、腹腔、皮下、肌內(nèi)、鞘內(nèi)、皮內(nèi)、經(jīng)鼻、腸道、陰道、栓劑方式給藥。例如，靶點可以為氣道平滑肌纖維或受試對象氣道的一部分。術(shù)語“施用”和“給藥”可以互換使用。如本文所用，術(shù)語“接觸”和“暴露”，當(dāng)對靶點(如細(xì)胞、組織、器官等)使用時，是用來描述本發(fā)明公開的組合物施用或給于靶點(如細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)的一部分等)、或使化合物直接與靶點并存的過程。術(shù)語“施用”和“給藥”可以與“接觸”和“暴露”互換使用。如本文所用，術(shù)語“患者”、“受試對象”和“個體”在本文可互換使用，意為一種哺乳動物受試對象準(zhǔn)備接受治療和/或獲得的一種生物樣本形式。哺乳動物包括人和家養(yǎng)動物，如貓、狗、豬、牛、羊、山羊、馬、兔子及類似動物。如本文所用，術(shù)語“有效”意足夠?qū)崿F(xiàn)所理想的、期望的、預(yù)計的結(jié)果。例如，“有效量”可以是足夠產(chǎn)生治療收益的化合物的量。如本文所用，術(shù)語“治療有效”和“治療有益”是指受試對象針對一種癥狀接受治療時，任何提高或增進情況變好的情況。這包括但不限于，降低疾病癥狀的發(fā)作、頻率、持續(xù)期或信號的嚴(yán)重程度。如本文所用，術(shù)語“治療有效量”意為有效產(chǎn)生理想治療效果的化合物的量。根據(jù)化合物、癥狀及其嚴(yán)重程度、被治療哺乳動物的年齡，達到“治療有效”的本發(fā)明公開化合物的量也會隨之變化，但可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)其知識結(jié)合本發(fā)明公開內(nèi)容慣常地確定用量。如本文所用，“本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的方法”可以通過多種參考書或數(shù)據(jù)庫確認(rèn)。合適的參考書和論文，詳細(xì)說明合成的反應(yīng)物在本發(fā)明的化合物的制備中是有用的，或者對描述該制備方法提供參考，舉例來說，“SyntheicOrganicChemistry”,JohnWiley&Sons,Inc.,NewYork；S.R.Sandleretal.,“OrganicFunctionalGroupPreparations”,2ndEd.,AcademicPress,NewYork,1983；H.O.House,“ModemSyntheticReactions”,2ndEd.,W.A.Benjamin,Inc.MenloPark,Calif.1972；T.L.Gilchrist.“HeterocyclicChemistry”,2ndEd.,JohnWiley&Sons,NewYork,1992；1.March,“AdvancedOrganicChemistry:Reactions,MechanismsandStructure”,4thEd.,WileyInterscience,NewYork,1992.特定的反應(yīng)物及類似物可通過“美國化學(xué)會化學(xué)文摘社”制定的化學(xué)物質(zhì)目錄確定。該目錄在大多公眾和大學(xué)圖書館都可查到，同樣也可通過網(wǎng)上數(shù)據(jù)庫查詢(可聯(lián)系“美國化學(xué)會，華盛頓，D.C.，www.acs.org”獲取更多信息)。已知但不能買到的化學(xué)物質(zhì)可以由尋常的化學(xué)合成實驗室制備，其中有很多標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)供貨商提供合成服務(wù)(例如，上面列出的那些)。如本文所用，術(shù)語“診斷的”、“診斷”和“被診斷”意為確定病理學(xué)癥狀是否存在或其性質(zhì)。如本文所用，術(shù)語“安全有效量”是指足夠產(chǎn)生理想的治療效果而又沒有不適當(dāng)?shù)牟涣挤磻?yīng)(如毒性、刺激或過敏反應(yīng))的所用組分的量，如這里描述的，其中存在合理的收益/風(fēng)險比。在特定的情況下，“安全有效量”和“治療有效量”會根據(jù)這些因素而有所不同：病人的身體狀況、被治療哺乳動物或動物的種類、治療時間、同時治療(如果有的話)的性質(zhì)、所用的特定處方、以及化合物或其衍生物的結(jié)構(gòu)。本發(fā)明公開的多個化合物有一個五環(huán)中心核(如核心骨架)，分別如下命名為A、B、C、D、E：如上所示，中心核碳原子被編號。為了方便，中心核1號位碳原子表述為C1，其它與此類似。本發(fā)明公開的化合物，除非另有說明，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、D環(huán)、E環(huán)獨立地為飽和環(huán)、部分飽和環(huán)或完全非飽和環(huán)。也就是說，為了使A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、D環(huán)、E環(huán)成為非飽和環(huán)，1-22位任何碳原子上相連的氫可以被去除。本發(fā)明公開的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可以包括一個或多個非對稱中心，因此會存在對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體以及其它可以被定義的立體異構(gòu)體形式，根據(jù)立體化學(xué)可分為(R)-或(S)-、用于氨基酸的(D)-或(L)-。本發(fā)明意為包括所有這些可能的異構(gòu)體，以及外消旋形式和光學(xué)純形式。光學(xué)活性的(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-異構(gòu)體可以通過手性合成子或手性試劑制備，或用通常的技術(shù)如使用手性柱的高效液相來分離制備。當(dāng)本發(fā)明所述的化合物含有烯族雙鍵或其它幾何不對稱中心時，除非另有說明，則其意為該化合物包括E和Z幾何異構(gòu)體。同樣地，所有的互變異構(gòu)體也包括在內(nèi)。本發(fā)明公開的化合物的命名方法修改自IUPAC命名系統(tǒng)。使用ChemDoodle(版本6.0.0)軟件，其中多種化合物被命名為上文提到的核心骨架的衍生物。另外，如果取代基位于茚環(huán)平面下方，那么取代基構(gòu)型在化合物命名中被表述為“α”，取代基位于茚環(huán)平面上方，則為“β”。舉例來說，如結(jié)構(gòu)式(Ia)的化合物(已標(biāo)出碳原子編號)：其中，A環(huán)、B環(huán)、D環(huán)、E環(huán)獨自地為完全飽和環(huán)；C環(huán)為部分飽和環(huán)；C2、C3、C5、C9、C10、C11、C12、C18和C20分別獨自被氫取代；C1、C7、C8、C11、C15、C16、C19、C21和C22被2個氫取代；R1和R2a分別獨自為氫；C2被-OH取代，R2b為-COOH，R3a和R3b一起形成亞甲基，如結(jié)構(gòu)式(Ib)的化合物：此處的化合物被命名為(1S,2R,5S,8S,9R,14R,15R,17R)-10,11-Dihydroxy-1,2,6a,6b,12a-pentamethyl-9-methylene-2,3,4,4a,5,6,6a,6b,7,8,8a,10,11,12,12a,12b,13,14b-octadecahydro-1H-picene-4a-carboxylicacid。該化合物的通用名為冬青苦丁醇B(IlekudinolB)，其ChemSpider數(shù)據(jù)庫編號為8822838?！傲Ⅲw異構(gòu)體”是指由相同的原子按照相同的化學(xué)鍵連接而成，但擁有不同的三維結(jié)構(gòu)的化合物，這些化合物不可互相替代。本發(fā)明公開的化合物考慮不同的立體異構(gòu)體及其混合物，包括“對映異構(gòu)體”，其是指互為鏡像的兩個立體異構(gòu)體。互變異構(gòu)體是指一種化合物的多種形式，其區(qū)別在于一個或多個雙鍵的位移以及伴隨的氫原子位移。本發(fā)明包括所有所述化合物的互變異構(gòu)體。用于疾病治療的方法與組合物本發(fā)明公開的具體實施方案中涉及一種治療如肺部疾病的方法。該方法包括向有需要的受試對象施用治療有效量的通式(I)的化合物：其中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、D環(huán)或E環(huán)獨自為完全飽和或部分飽和環(huán)；R1選自H或糖殘基；C2、C11、C12和C19分別獨自被H或-OH取代；R2a及R2b選自H、-COOH或COOR4，或兩者共同形成-CO2-；R4為單糖殘基；R3a和R3b共同形成CH2＝，或分別獨自選自-CH3或-CH2-OH。及所述通式(I)化合物的立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體或互變異構(gòu)體；或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的具體實施方案中，還涉及一種治療如肺部疾病的試劑盒。該試劑盒包括一定量的通式(I)化合物。其中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、D環(huán)或E環(huán)獨自地為完全飽和或部分飽和環(huán)；R1選自H或糖殘基；C2、C11、C12和C19分別獨自被H或-OH取代；R2a及R2b選自H、-COOH或COOR4，或兩者共同形成-CO2-；R4為單糖殘基；R3a和R3b共同形成CH2＝，或分別獨自選自-CH3或-CH2-OH。及所述通式(I)化合物的立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體或互變異構(gòu)體；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一些實施方案中，通式(I)化合物可以用于治療肺部疾病。在一些實施方案中，通式(I)化合物在一種藥學(xué)上可接受的載體中。在一些實施方案中，所述疾病為肺部疾病，包括哮喘、COPD、支氣管炎、慢性或急性支氣管收縮、成人呼吸困難綜合征、急性肺損傷、以及支氣管擴張中的至少一種。在一些實施方案中，肺部疾病可以包括哮喘或COPD。COPD包括肺部氣流受限的情況。COPD隨時間發(fā)展惡化，會導(dǎo)致患有慢性阻塞性肺病病人的小氣道發(fā)生變化。這些變化導(dǎo)致呼氣時氣道變窄，使得患者呼吸困難。氧氣和二氧化碳在肺泡進行交換，在一些患者中，氧氣與二氧化碳在其中交換的肺泡受損，逐漸導(dǎo)致機體缺氧。COPD同一類與呼吸有關(guān)的癥狀相關(guān)，例如呼吸不暢、慢性咳嗽、吐痰或咳黏液(痰)、呼氣(吸氣)能力隨時間變差。COPD有三種類型：肺氣腫、慢性支氣管炎和阻塞性細(xì)支氣管炎。肺氣腫的主要特征是肺泡受損，肺部最小氣道(細(xì)支氣管)末端的肺泡囊呈葡萄串樣。慢性支氣管炎的癥狀為咳嗽，在一定時間間隔內(nèi)痰液增多。阻塞性細(xì)支氣管炎涉及小氣道炎癥。COPD也可以被稱為慢性阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺疾病、慢性支氣管炎、肺氣腫、慢性支氣管炎。吸煙以及其它一些原因可以導(dǎo)致COPD。例如，缺乏α-1抗胰蛋白酶，或者暴露于某種氣體、煙霧或者粉塵中會導(dǎo)致COPD。一種用于檢查COPD的方法是一種被稱為肺活量測定法的肺功能測試，其中包括向一種測量肺容量的小型儀器中盡力呼氣。在一些情況下，用聽診器聽肺音、肺部成像、血液測試也可以用來確診COPD。哮喘包括一種使得患有哮喘病人難以正常呼吸的肺部狀況。例如，受過敏原或其它環(huán)境因素激發(fā)，患者的氣道會發(fā)生變化。這種變化表現(xiàn)為過度反應(yīng)(也稱為高反應(yīng)性)和炎癥反應(yīng)這兩種特定的反應(yīng)。氣道中的這些反應(yīng)引起咳嗽、哮鳴、呼吸短促(呼吸困難)或其它哮喘癥狀。哮喘具有一些COPD的癥狀(例如慢性咳嗽、哮鳴、呼吸短促等)，并且患者可能同時患有哮喘和COPD。例如，約有40％的已知COPD患者同時患有哮喘。哮喘包括多種類型，如特應(yīng)性哮喘、非特應(yīng)性哮喘、過敏性哮喘、Ig-E介導(dǎo)的特應(yīng)性支氣管哮喘、支氣管哮喘、特發(fā)性哮喘、真氣喘、病理生理紊亂導(dǎo)致的內(nèi)源性哮喘、環(huán)境因素導(dǎo)致的外源性哮喘、不明原因?qū)е碌奶匕l(fā)性哮喘、非特應(yīng)性哮喘、支氣管哮喘、肺氣腫性哮喘、運動誘發(fā)的哮喘、過敏原誘發(fā)的哮喘、冷空氣誘發(fā)的哮喘、職業(yè)性哮喘、由細(xì)菌、真菌、原生動物或病毒感染導(dǎo)致的感染性哮喘、早期哮喘、喘鳴嬰兒綜合征、細(xì)支氣管炎等。在特定的實施方案中，哮喘可以包括過敏性哮喘。支氣管炎包括不同種類、不同病因、不同機制的支氣管炎。例如，支氣管炎可以包括急性支氣管炎、急性喉氣管炎、花生仁吸入性支氣管炎、卡他性支氣管炎、格魯布性支氣管炎(croupusbronchitis)、干性支氣管炎、傳染性哮喘性支氣管炎、增生性支氣管炎、葡萄球菌或鏈球菌性支氣管炎、肺泡性支氣管炎等。支氣管擴張包括不同種類、不同病因、不同機制的支氣管擴張癥。例如，支氣管擴張包括圓柱狀支氣管擴張、囊狀支氣管擴張、梭形支氣管擴張、細(xì)支氣管擴張、囊性支氣管擴張、干性支氣管擴張、濾泡性支氣管擴張等。支氣管擴張也涉及患者接受與COPD有關(guān)的平滑肌松弛治療。支氣管收縮包括肺部氣道收縮的癥狀，其中氣道收縮是由于引起咳嗽、哮鳴和呼吸短促的氣道平滑肌緊張導(dǎo)致的。慢性支氣管收縮可由慢性阻塞性肺病引發(fā)，急性支氣管收縮可由阻塞性肺病的急性誘因引發(fā)，例如運動、粉塵、藥物介導(dǎo)的支氣管收縮。急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是一種引發(fā)肺部軟組織炎癥而阻礙氣體交換的肺部綜合癥。該疾病可以導(dǎo)致炎癥介質(zhì)的全身性釋放，導(dǎo)致炎癥、低氧血癥以及頻發(fā)的多器官功能衰竭。在一些實施方案中，所述疾病可以包括高血壓、胃腸蠕動或其它平滑肌相關(guān)疾病。在一些實施方案中，A環(huán)和B環(huán)獨自地為完全飽和環(huán)，R2a和R2b共同形成-CO2-。在一些實施方案中，糖殘基是單糖殘基或寡糖殘基。在一些實施方案中，所述糖殘基是單糖殘基或寡糖殘基。在一些實施方案中，單糖可以是阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖醛酸(glucusonicacid)或2-脫氧-葡萄糖醛酸(GlcA)、葡萄糖(Glc)或者鼠李糖(Rha)。在一些實施方案中，寡糖殘基可以是二糖殘基、三糖殘基或四糖殘基。在一些實施方案中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、E環(huán)為完全飽和環(huán)，D環(huán)為部分飽和環(huán)，C12和C19分別獨自被-OH取代，C15和C16分別獨自被2個H取代，R2a和R2b共同形成-CO2-，R3a和R3b為-CH3，R1為單糖殘基或寡糖殘基。在特定的實施方案中，R1為三糖殘基。例如，三糖殘基可以為-Ara-[(1-2)-Rha]-(1-3)-Glc。在一些實施方案中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、E環(huán)為完全飽和環(huán)，D環(huán)為部分飽和環(huán)，C12和C19分別獨自被-OH取代，C15和C16分別獨自被2個H取代，R2a和R2b共同形成-CO2-，R3a和R3b為-CH3，R1為單糖殘基或寡糖殘基。在特定的實施方案中，R1為四糖殘基。例如，四糖殘基可以為-Ara-[(1-2)-Rha]-(1-3)-Glc-(1-2)-Glc。在一些實施方案中，A環(huán)、B環(huán)、C環(huán)、E環(huán)為完全飽和環(huán)，D環(huán)為部分飽和環(huán)，C11和C19分別獨自被-OH取代，C11被H取代，R2a和R2b共同形成-CO2-，R3a和R3b為-CH3，R1為單糖殘基或寡糖殘基。在特定的實施方案中，R1為三糖殘基。例如，三糖殘基可以為-Ara-[(1-2)-Rha]-(1-3)-Glc。在一些實施方案中，A環(huán)、B環(huán)、E環(huán)為完全飽和環(huán)，C環(huán)、D環(huán)為部分飽和環(huán)，C19被-OH取代，C9被H取代，R2a和R2b共同形成-CO2-，R3a和R3b為-CH3，R1為單糖殘基或寡糖殘基。在特定的實施方案中，R1為三糖殘基。例如，三糖殘基可以為-Ara-[(1-2)-Rha]-(1-3)-Glc。在一些實施方案中，通式(I)化合物分離自苦丁茶的提取物(KE)。在一些實施方案中，苦丁茶提取物(KE)包括使用本發(fā)明公開的方法和/或本領(lǐng)域常規(guī)的方法從苦丁茶中提取的一種或多種溶液和/或化合物?？喽〔杩梢园ㄈ鏘lexKudingcha、xlatifolia、Ilexkaushue、Ilexpentagona、Ilexcornuta、Ilexparaguariensis、ligustrumrobustum等，所述苦丁茶可由多地采集。在一些實施方案中，所述受試對象為人。在其他一些實施方案中，所述受試對象可以為家養(yǎng)動物，例如貓、狗、豬、牛、綿羊、山羊、馬、兔及類似的動物。在一些實施方案中，該方法包括向受試對象肺部氣道給以治療有效量的通式(I)化合物。在一些實施方案中，該方法包括通過受試對象吸入通式(I)化合物的方式向受試對象肺部氣道給以治療有效量的通式(I)化合物。在一些實施方案中，所述試劑盒可以包括一種給藥裝置，例如一種噴霧裝置或一種加壓給藥裝置?？喽〔韬涂喽〔杼崛∥锟喽〔杩捎啥喾N植物制備。例如，植物可以包括LigustrumpurpurascensY.C.Yang、LigustrumpriceiHayata、Ligustrumjaponicumvar.pubescensKoidz.、LigustrumdelavayanumHariot.、LigustrumhenryiHemsl.、LigustrumlucidumAit.、IlexkudingchaC.J.Tseng、IlexlatifoliaThunb、IlexcornutaLindl.、IlexpentagonaS.K.Chen、IlexkaushueS.Y.Hu、Ligustrumsinensevar.myrianthum(Diels)Hofk.、Ligustrumrobustum(Roxb.)BI.、Cratoxylumformosumsubsp.Pruniflorum(Kurz)Gogelin、Ehretiathyrsiflora(Sieb.Et.Zucc.)Nakai.、ClerodendrumfortunatumLinn.、Mahonia(Fort)Carrie.、IteailicifoliaOliver等等。在這些植物中，目前作為苦丁茶使用最廣泛的是冬青屬(Ilex)植物，IlexkudingchaC.J.Tseng、IlexpentagonaS.K.Chen、IlexhuoshanensisY.H.He以及女貞屬(Ligustrum)(例如Ligustrumrobustum(Roxb.)BI.、LigustrumhenryiHemsl、LigustrumpriceiHayata)。苦丁茶在不同的系統(tǒng)中表現(xiàn)出多種藥理活性。例如，在血管系統(tǒng)中，苦丁茶粗提物可以改善心腦血液循環(huán)，這可能是由于其中的總皂苷可以舒張血管張力。在血液系統(tǒng)中，苦丁茶提取物可以抑制血小板聚集，降低血脂，調(diào)控血糖水平等。苦丁茶對高脂血癥也有療效，并可以影響機體代謝。當(dāng)其作為茶飲用時，苦丁茶可以通過抑制脂肪細(xì)胞的生成降低體重。例如，該機制可能是通過冬青屬苦丁茶對ACAT(人?；o酶A：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶)的抑制作用。在免疫系統(tǒng)中，苦丁茶提取物和皂苷具有調(diào)控巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞功能的活性，由此抑制不同的炎癥反應(yīng)。當(dāng)苦丁茶作為茶飲用時，其可對血管和皮膚炎癥產(chǎn)生作用。在呼吸系統(tǒng)中，大葉冬青(Ilexlatifoliathunb)提取物可以抑制由外部鈣離子引起的氣道平滑肌收縮，但其中的潛在的機制及活性成分尚未明確。女貞子(L.LucidumAit)提取物可有效祛痰抑咳，但還沒有將其用于治療包括哮喘及COPD在內(nèi)的呼吸系統(tǒng)疾病的臨床報道。在一些實施方案中，苦丁茶不同種類的組分得到了確認(rèn)，例如苯丙素類、黃酮類、萜類、精油類等。苯丙素類化合物包括紫莖女貞苷(liguprupuroside)A和紫莖女貞苷(liguprupuroside)B等。黃酮類化合物包括槲皮素、金絲桃苷、木犀草素-7-葡糖苷等。萜類化合物包括單萜和三萜。此外，分離自苦丁茶的幾個三萜化合物的結(jié)構(gòu)也得到了確認(rèn)，例如闊葉糖苷B、C、N、O、暹羅樹脂酸、24-羥基齊墩果酸、苦丁皂苷A～T、苦丁茶冬青苷A～S、毛冬青皂苷XLVIII、齊墩果酸、β-香樹精、齊墩果-12-烯、苦丁茶苷元(kudingchaenin)I。精油組分主要從嫩葉中提取。疾病和平滑肌收縮哮喘是一類以間發(fā)性持續(xù)呼吸阻塞為特點的慢性肺部疾病?；颊甙l(fā)病率高，且有死亡的風(fēng)險。哮喘影響全世界約三億人，該病造成了嚴(yán)重的社會損失和經(jīng)濟損失。哮喘發(fā)作時的主要癥狀包括呼吸短促、胸悶、咳嗽。當(dāng)接觸過敏原、冷空氣、運動等刺激時，即可誘發(fā)哮喘的這些癥狀。哮喘的主要病理改變包括慢性炎癥、粘膜增生、可逆性呼吸道阻塞和氣道高反應(yīng)性(AHR)，其中氣道平滑肌高反應(yīng)性收縮被認(rèn)為是導(dǎo)致氣道收縮的原因之一。氣道高反應(yīng)性(AHR)是指多種理化刺激導(dǎo)致氣道過度緊縮，而該理化刺激對于健康人幾乎沒有影響，此時呼吸道對刺激物的劑量-反應(yīng)曲線明顯向左上移動。氣道對刺激物的敏感性提高通常是由于氣道平滑肌組織的炎癥反應(yīng)所致。根據(jù)哮喘收縮的發(fā)病機制，目前人們已研發(fā)出多種治療策略，其中包括抑制過敏反應(yīng)、抑制氣道重構(gòu)和舒張氣道平滑肌。COPD是一種肺部氣流受限的情況。COPD隨時間發(fā)展惡化，會導(dǎo)致患有慢性阻塞性肺病的病人的小氣道發(fā)生變化。這些變化導(dǎo)致呼氣時氣道變窄，使得患者呼吸困難。在一些患者中，氧氣與二氧化碳在其中交換的肺泡受損，逐漸導(dǎo)致機體缺氧。COPD與一類與呼吸有關(guān)的癥狀相關(guān)，例如呼吸不暢、慢性咳嗽、吐痰或咳黏液(痰)、呼氣(吸氣)能力隨時間變差。慢性阻塞性肺病有三種類型：肺氣腫、慢性支氣管炎和阻塞性細(xì)支氣管炎。肺氣腫的主要特征為肺泡受損，肺部最小氣道(細(xì)支氣管)末端的氣囊呈葡萄串樣。慢性支氣管炎的癥狀為咳嗽，在一定時間間隔內(nèi)痰液增多。阻塞性細(xì)支氣管炎包括小氣道炎癥。COPD也可以被稱為慢性阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺疾病、慢性支氣管炎、肺氣腫、慢性支氣管炎。吸煙以及其它一些原因可以導(dǎo)致COPD。例如，缺乏α-1抗胰蛋白酶，或者暴露于某種氣體、煙霧或者粉塵中會導(dǎo)致COPD。一種用于檢查COPD的方法是一種被稱為肺活量測定法的肺功能測試，其中包括向一種測量肺容量的小型儀器中盡力呼氣。在一些情況下，用聽診器聽肺音、肺部成像、血液測試也可以用來確診COPD。平滑肌收縮是由以分子馬達肌球蛋白和與鈣離子調(diào)控、細(xì)胞黏附有關(guān)的膜性能為關(guān)鍵的信號網(wǎng)路調(diào)控的。細(xì)胞膜去極化激活電壓門控Ca2+通道，引起Ca2+內(nèi)流，并且通過Ca2+/鈣調(diào)素依賴的肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)催化肌球蛋白輕鏈(RLC)磷酸化進行調(diào)控，最終在肌動蛋白微絲上啟動肌球蛋白橫橋運動。平滑肌細(xì)胞表面的G蛋白偶聯(lián)受體受激動劑激發(fā)后，還可召集其它調(diào)控因子，通過鈣敏機制調(diào)節(jié)收縮。平滑肌收縮可能是通過鈣依賴機制介導(dǎo)的。用MLCK基因敲除小鼠證實MLCK對平滑肌收縮是必須的，這突出了鈣依賴機制對于平滑肌收縮的重要性。重要的是，當(dāng)MLCK缺失后，哮喘小鼠的氣道狹窄癥狀消失。以上描述的各種實施方案可以經(jīng)組合得到新的實施方案。若需要采用不同的專利、專利申請及文獻中的概念來提供更進一步的實施方案時，可對實施方案的部分方面進行修改。根據(jù)上文的詳細(xì)說明，實施方案可以發(fā)生各種變化。一般地，在下文的權(quán)利要求中，在本說明書中公開的具體實施例中所使用的術(shù)語不應(yīng)該被解釋為限制權(quán)利要求，而是應(yīng)被解釋為包括所有可能的實施例的等價物的全部范圍來規(guī)定權(quán)利要求范圍。因此，權(quán)利要求不受本發(fā)明公開內(nèi)容的限制。實施例實施例1苦丁茶提取物舒張氣道平滑肌將1000g大葉冬青(Ilexlatifoliathunb)的干葉子過夜或更長時間浸泡于90-100％的乙醇中，干燥去掉乙醇。將所得產(chǎn)物溶于蒸餾水，依次用乙酸乙酯和正丁醇分步萃取。將溶劑蒸干后，分別得到乙酸乙酯相物質(zhì)、正丁醇相物質(zhì)和水相物質(zhì)。將不同相的提取物溶于乙醇，以分析其對氣道平滑肌的舒張活性?？喽〔枞~子購買自安徽惠隆中藥飲片有限公司，由南京中醫(yī)藥大學(xué)潘揚教授鑒定。將小鼠整個呼吸道迅速取出，浸泡于Krebs-Henseleit緩沖液(118.1mM氯化鈉，4.7mM氯化鉀，1.2mM硫酸鎂，2.5mM氯化鈣，1.0mM磷酸二氫鈉，25mM碳酸氫鈉，11.1mM葡萄糖，pH7.4)中。2毫米長的支氣管環(huán)是利用解剖顯微鏡從肺部支氣管中分離得到的。在體式鏡下將肺部支氣管分離出來(約2毫米)。然后將兩跟直徑為40微米的鋼絲穿過支氣管環(huán)，并分別固定在肌張力儀(DanishMyoTechnology，Aarhus，丹麥)槽中的兩個支持端。其中一個支持端是連在力傳感器上用以測量等長張力的變化，另一個支持端是連在控制環(huán)圓周的測微計上。處理過程都在槽中進行，組織浸于5mL的Krebs-Henseleit溶液中，并保持37℃，所通氣體為5％二氧化碳和95％氧氣平組成的混合氣體。將初始支氣管環(huán)初始張力設(shè)定為0mN并平衡20分鐘，然后將其拉伸保持張力為5mN并再平衡20分鐘。利用數(shù)據(jù)采集和分析程序(DanishMyoTechnology，奧爾胡斯，丹麥)記錄支氣管環(huán)產(chǎn)生的等長張力?？喽〔杼崛∥飳τ跉獾榔交〉牧己檬鎻埿Ч暗投撅L(fēng)險表明其有良好的發(fā)展前景。為了確認(rèn)苦丁茶提取物的活性成分，利用乙酸乙酯和正丁醇依次萃取的方法將提取物分成了乙酸乙酯相、正丁醇相和水相三部分。當(dāng)用乙酰甲膽堿(MCh)刺激氣道平滑肌使其達到相對穩(wěn)定的收縮狀態(tài)時，向其中分別累積加入這三種組分以衡量各自對平滑肌的舒張效果。隨著劑量的不斷累積，這三種組分都可以使支氣管環(huán)舒張，并且表現(xiàn)出劑量依賴性，但在舒張效果上表現(xiàn)出較大的差異性(圖1A，B，C)。出人意料地，正丁醇相提取物加入0.1μL時就可以開始舒張支氣管環(huán)，1μL正丁醇相提取物幾乎可以完全舒張支氣管環(huán)(圖1A，D)。另一方面，1μL乙酸乙酯相提取物只能使支氣管環(huán)舒張90％。而5μL水相提取物幾乎沒有舒張活性(圖1D)。這些結(jié)果表明正丁醇相提取物對于氣道平滑肌的舒張活性要好于另外兩種苦丁茶提取物。這些結(jié)果顯示苦丁茶提取物可以有效舒張氣道平滑肌。實施例2苦丁茶提取物抑制哮喘時的氣道收縮哮喘時氣道收縮可能是由高反應(yīng)性的平滑肌和組織重構(gòu)引起的。為了檢測苦丁茶提取物的舒張效果，建立了動物哮喘模型來評估正丁醇相苦丁茶提取物的效果。小鼠哮喘模型按照已報道過的方法進行構(gòu)建。選取6-8周大小的雌性C57BL/6小鼠，分別在第0天和第14天腹腔注射0.2mL由100μg的卵清蛋白與4mg氫氧化鋁佐劑(ThermoFisherScientific)組成的混合液。然后，分別在第24、25、26天，用濃度為1.5％-2％的卵清蛋白對這些小鼠進行1小時的霧化激發(fā)。最后一次激發(fā)試驗24小時之后，通過檢測這些小鼠的氣道阻力進行藥效分析。氣道阻力是通過之前文獻報道的侵入性方法測定的。以240mg/kg劑量的三溴乙醇(Avertin)麻醉小鼠后，用18號金屬針頭對小鼠進行氣管插管。儀器(FlexiVent；SCIREQInc，蒙特利爾，加拿大)設(shè)定為：呼吸頻率每分鐘150次，潮氣量10ml/kg，呼氣末正壓2.5cm水柱。用乙酰甲膽堿激發(fā)前，用PBS進行霧化之后對小鼠做一次深呼吸檢測，從而得到一個穩(wěn)定的氣道阻力值(Rrs，cmH2O·s/mL)，以PBS霧化后的氣道阻力值為基線值。然后，以超聲霧化的方式，依次給予小鼠濃度遞增的乙酰甲膽堿(2.0mg/mL、4.0mg/mL、8.0mg/mL、16mg/mL、32mg/mL、64mg/mL)，直至激發(fā)支氣管的高反應(yīng)性，這時的氣道阻力高于基線值的4-5倍。最后一次激發(fā)三分鐘以后，待測藥物通過相同的超聲霧化給藥。整個試驗過程中，每30s測量一次Rrs值。以PBS作為實驗的陰性對照，因為此處所有待測藥物的溶劑為PBS；以3μg的沙丁胺醇(Sigma)為陽性對照，沙丁胺醇是目前應(yīng)用最廣泛的有效的能令支氣管擴張的β受體激動劑。用乙酰甲膽堿刺激后，小鼠氣管會呈現(xiàn)持續(xù)性的收縮。給予30μg正丁醇相苦丁茶提取物治療后，氣管阻力可以在1分鐘內(nèi)顯著下降，隨后呈現(xiàn)持續(xù)下降的趨勢。作為陽性對照的沙丁胺醇(3μg)在相同條件下也可以明顯降低氣道阻力(圖2A和B)。以上結(jié)果證明正丁醇相苦丁茶提取物能有效降低哮喘時的氣道阻力。實施例3正丁醇相活性組分的確認(rèn)用于柱層析的硅膠(100-200目，青島海洋化工廠)，用于薄層層析的硅膠(H級，青島海洋化工廠)。利用F級薄層層析(TLC)硅膠板(青島海洋化工廠)分析組分的同一性。通過10％硫酸乙醇溶液對其噴霧顯色(105℃加熱5分鐘)，含有化合物的區(qū)域顯紫紅色斑點。依次用乙酸乙酯(5×100mL)和正丁醇(5×100mL)萃取100mL苦丁茶提取物。正丁醇相混合后濃縮并真空干燥。將固體粉碎成粉末(總計27.41g)，然后將其中12g用柱層析(CC)分離(所用硅膠為540g100-200目硅膠與180gH級硅膠混合制成)，用三氯甲烷：甲醇梯度洗脫液洗脫(100:0,3.5L)，(98:2,3L)，(95:5,5.5L)，(90:10,33.5L)，(85:15,20L)，(80:20,24.5L)。最后，將洗脫液同一性后得到27個洗脫組分(Fr.1-Fr.27)。由于正丁醇相仍是粗提物，因此有必要確定其中對于氣道平滑肌舒張有強烈活性的單一化合物。正丁醇相通過柱層析被分成了27個組分。對于每個組分通過實驗來評估其對體外支氣管環(huán)的舒張能力。前17個組分即使加入50μL也幾乎沒有表現(xiàn)出舒張活性。引人關(guān)注地，第18個組分(Fr.18)表現(xiàn)出強烈地支氣管環(huán)舒張活性。加入20μLFr.18后，幾乎可以完全舒張氣道平滑肌。Fr.19到Fr.25也有較強的舒張活性，但弱于Fr.18。組分26、組分27表現(xiàn)出較弱的舒張活性(圖3)。通過對所有組分的篩選，我們推測活性化合物可能在Fr.18到Fr.25中被富集。這些結(jié)果表明，F(xiàn)r.18比其它組分具有更好的舒張活性，并且舒張支氣管環(huán)具有劑量依賴性。實施例4苦丁茶活性化合物的結(jié)構(gòu)確定及功能分析為了確認(rèn)活性化合物，利用HPLC對組分18的物質(zhì)進行分離純化，然后用NMR及其它方法對所得化合物結(jié)構(gòu)進行分析。在實施例中，提取物來自大葉冬青(IlexlatifoliaThunb)和苦丁茶冬青(IlexkudingchaC.J.Tseng)。通過以甲醇-H2O作為流動相的制備型HPLC對柱純化的提取物進一步純化。收集每一個吸收峰并對其進行譜圖分析。核磁共振(NMR)譜，包括1HNMR、13CNMR、1H-1HCOSY、DEPT、HMBC及HSQC，所用氘代試劑為d5-吡啶，采用500MHz核磁設(shè)備。制備型高效液相(HPLC)系統(tǒng)包括Waters2545binarygradientmodule、Waters2489UV/Visibledetector、Waters2767samplemanager以及XBridgeTMprepC185μMOBDTMColumn(19×150mm，detectedat260nm)。通過HPLC純化后，從提取物中得到了一系列化合物。NMR譜結(jié)果表明這些化合物為三萜皂苷類化合物，包括苦丁皂苷(Kudinosides)和苦丁茶冬青苷(Ilekudinosides)。表1列出了NMR譜圖數(shù)據(jù)的例子和兩個活性化合物苦丁皂苷A和苦丁皂苷D的分子結(jié)構(gòu)。活性化合物的結(jié)構(gòu)總結(jié)在圖4中。苦丁皂苷可以顯著舒張支氣管環(huán)，并且具有劑量依賴性。在這些三萜皂苷中，苦丁皂苷D和苦丁皂苷A表現(xiàn)出較高的活性。我們檢測了苦丁皂苷對舒張氣道平滑肌的劑量效應(yīng)。用乙酰膽堿使平滑肌的張力達到相對穩(wěn)定的收縮狀態(tài)后，向體系中加入累積濃度(0.1μM、0.3μM、1μM、3μM、10μM、30μM)的苦丁皂苷?？喽≡碥誅和苦丁皂苷A都可以顯著舒張支氣管環(huán)，并且具有劑量依賴性(圖5)。當(dāng)苦丁皂苷D的濃度達到10μM時，降低了約50％的張力。引人關(guān)注地，當(dāng)以30μM苦丁皂苷D處理時，可以降低超過80％以上的張力(圖5B)。相似地，30μM苦丁皂苷A同樣可以降低了80％的張力。值得一提的是，苦丁皂苷的舒張活性是完全可逆的，因為把苦丁皂苷洗去之后，乙酰甲膽堿可以再次引起平滑肌的收縮。分離自大葉冬青(IlexlatifoliaThunb)和苦丁茶冬青(IlexkudingchaC.J.Tseng)的多種三萜類物質(zhì)已被確認(rèn)，而且結(jié)構(gòu)和生物活性間的關(guān)系得到了初步表征。如圖4所示，包括五環(huán)三萜類化合物的基本結(jié)構(gòu)在內(nèi)，以及側(cè)鏈修飾(如內(nèi)酯部分)可能影響其生物活性。例如，苦丁皂苷H沒有表現(xiàn)出有效的支氣管環(huán)舒張活性。表1苦丁皂苷A(1)、C(2)、D(3)和F(4)在吡啶-d5中的13CNMR譜數(shù)據(jù)(125MHz)由于糖基和糖苷配基(苷元)部分可以經(jīng)酸水解破壞，苦丁皂苷用2MHCl處理以去掉糖殘基。1.9mg苦丁皂苷A于20μL2MHCl中95℃加熱6小時，然后用ddH2O稀釋，再用CH3Cl萃取。有機相和水相蒸干后溶于20μLDMSO中。將獲得的組分進行舒張活性測試。糖苷配基(苷元)部分具有疏水性，分布在有機相中。糖基部分具有親水性，溶解在水相中。如圖8所示，HCl處理后的苦丁皂苷的舒張活性顯著降低，無論是有機相成分還是水相成分都沒有表現(xiàn)出氣道平滑肌(由乙酰甲膽堿激發(fā))舒張活性。這些結(jié)果說明糖基對于苦丁皂苷的舒張活性具有重要作用。在大葉冬青(IlexlatifoliaThunb)和苦丁茶冬青(IlexkudingchaC.J.Tseng)中，三萜皂苷的主要糖苷配基(苷元)含有C30骨架，是一個五環(huán)結(jié)構(gòu)，如圖4所示。這些三萜皂苷糖苷配基(苷元)屬于烏蘇果烷型五環(huán)三萜皂苷，因為它們在C19和C20位都有甲基取代。一些苦丁皂苷的基本糖苷配基(苷元)骨架對其舒張活性有重要作用。此外，苦丁皂苷H未能舒張氣道平滑肌的結(jié)果表明內(nèi)酯部分對于苦丁皂苷的舒張活性也有重要作用。例如，五環(huán)三萜皂苷屬于一類三萜皂苷，具有多種藥理活性。作為一類五環(huán)三萜皂苷，苦丁皂苷具有相對較少的藥理活性，而且具有內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)。為了研究內(nèi)酯結(jié)構(gòu)與苦丁皂苷活性之間的關(guān)系，選擇45種大量文獻報道的五環(huán)三萜皂苷進行活性測試。這些五環(huán)三萜皂苷包括甘草次酸、甘草酸、18β-甘草次酸、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B1、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷D、竹節(jié)香附素A、商陸皂苷元、商陸皂苷A、貝萼皂苷元、α-乳香脂酸、人參皂苷Ro、遼東楤木皂苷X、川續(xù)斷皂苷(Dipascoside)B、木通皂苷D、刺囊酸(Echinocysiticacid)、常春藤皂苷B、刺五加苷B、長梗冬青苷、大豆皂苷Ba、大豆皂苷Bb、積雪草酸、積雪草皂苷、灰氈毛忍冬皂苷B、地膚子皂苷Ic、去甲澤拉木醛、山楂酸、雷公藤內(nèi)酯甲、科羅索酸、鐵冬青酸、白頭翁皂苷B4、甘草酸單銨鹽、細(xì)葉遠志皂苷(Tnuifolin)、遠志酸、瓜子金皂苷F、羥基積雪草酸、羥基積雪草苷、表木栓醇、七葉皂苷鈉、常春藤皂苷元、α-常春藤皂苷、常春藤苷C、常春藤苷D。這些五環(huán)三萜皂苷來自不同的植物且具有C30糖苷配基(苷元)骨架；它們的修飾包括羥基化和糖基化是不同的。這些物質(zhì)沒有分子內(nèi)酯化修飾。例如，有些物質(zhì)是皂苷，有些是皂苷元。將這些物質(zhì)配成500mM的DMSO溶液，進行支氣管環(huán)等長試驗。結(jié)果顯示，45個化合物中有5個化合物在最終濃度500μM時表現(xiàn)出50％的等長張力舒張作用(乙酰甲膽堿激發(fā))。這5個化合物為甘草次酸、柴胡皂苷C、大豆皂苷Bb、竹節(jié)香附素A及商陸皂苷元。在5個化合物中，有2個化合物可以舒張超過80％張力。這兩個化合物為甘草次酸和柴胡皂苷C，對于氣道平滑肌的舒張具有劑量依賴性。但是，它們的IC50值(甘草次酸：84.3μM；柴胡皂苷C：>150μM)高于苦丁皂苷A和苦丁皂苷D。這些結(jié)果表明，內(nèi)酯結(jié)構(gòu)對于苦丁皂苷的舒張活性具有重要作用。內(nèi)酯為相應(yīng)的羥基羧酸分子內(nèi)酯化作用形成的環(huán)酯。與直鏈酯類似，內(nèi)酯可在如氫氧化鈉堿溶液中水解?？喽≡碥盏膬?nèi)酯部分為具有20,28β-內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的δ-內(nèi)酯環(huán)。為了斷開苦丁皂苷的內(nèi)酯部分，5mg苦丁皂苷A溶于108μL0.9％的NaCl溶液中，隨后用氫氧化鈉調(diào)pH至9，然后在37℃震蕩6小時反應(yīng)。由于內(nèi)酯的水解-縮合反應(yīng)是可逆的，生成的物質(zhì)與天然的苦丁皂苷A相比舒張活性明顯降低。這些結(jié)果證明內(nèi)酯部分對于苦丁皂苷的舒張活性具有重要作用。對與苦丁茶相關(guān)的植物的舒張活性進行研究。如表2所示，表明舒張活性程度的范圍，從低(+)到高(+++++)；“+/-”表示該植物只有相對較弱的舒張活性，“—”表示該植物沒有舒張活性。表2苦丁茶相關(guān)植物的舒張活性實施例5苦丁皂苷對動物哮喘時收縮的舒張作用小鼠急性哮喘模型按照已有報道的方法進行構(gòu)建。選取6-8周大小的雌性C57BL/6小鼠，分別在第0天和第14天腹腔注射0.2mL由100μg卵清蛋白和4mg氫氧化鋁佐劑(ThermoFisherScientific)組成的混合液。然后，分別在第24、25、26天，用濃度為1.5％-2％的卵清蛋白對這些小鼠進行1小時的霧化激發(fā)。最后一次激發(fā)試驗24小時之后，通過檢測這些小鼠的氣道阻力來進行藥效分析。氣道阻力是通過之前文獻報道的侵入性方法測定的。以240mg/kg劑量的三溴乙醇(Avertin)麻醉小鼠后，用18號金屬針頭對小鼠進行氣管插管。儀器(FlexiVent；SCIREQInc,蒙特利爾,加拿大)設(shè)定為：呼吸頻率每分鐘150次，潮氣量10ml/kg，呼氣末正壓2.5cm水柱。用乙酰甲膽堿激發(fā)前，用PBS進行霧化之后對小鼠做一次深呼吸檢測，，從而得到一個穩(wěn)定的氣道阻力值(Rrs，cmH2O·s/mL)，以PBS霧化后的氣道阻力值為基線值。然后，以超聲霧化的方式，依次給予小鼠濃度遞增的乙酰甲膽堿(2.0mg/mL、4.0mg/mL、8.0mg/mL、16mg/mL、32mg/mL、64mg/mL)，直至激發(fā)支氣管的高反應(yīng)性，這時的氣道阻力高于基線值的4-5倍。最后一次激發(fā)三分鐘以后，待測藥物通過相同的超聲霧化給藥。整個試驗過程中，每30s測量一次Rrs值。以PBS作為實驗的陰性對照，因為此處所有待測藥物的溶劑為PBS；以3μg的沙丁胺醇(Sigma)為陽性對照，沙丁胺醇是目前應(yīng)用最廣泛的有效的能令支氣管擴張的β受體激動劑。在PBS對照組，在支氣管收縮狀態(tài)時吸入PBS后，氣道阻力在1-2分鐘內(nèi)可降低約30％，吸入后氣道阻力降低，然后進入一個穩(wěn)定狀態(tài)。支氣管擴張劑的使用可以導(dǎo)致穩(wěn)定狀態(tài)再向下移動，這表明氣道阻力的降低。吸入苦丁皂苷D后，氣道阻力呈現(xiàn)出劑量依賴性地下降。如圖6所示，0.03μg苦丁皂苷D引起輕微的舒張，而0.3μg或3μg苦丁皂苷D可顯著降低氣道阻力。吸入1分鐘后，0.03μg、0.3μg和3μg苦丁皂苷D分別將氣道阻力降至69.65±5.87％、67.79±6.77％、45.81±6.87％，3μg沙丁胺醇組降至55.59±13.07％。令人驚喜地是，吸入3分鐘后，0.3μg和3μg苦丁皂苷D比3μg沙丁胺醇表現(xiàn)出更好的降低氣道阻力作用。圖6B顯示的是苦丁皂苷D的劑量效應(yīng)圖。這些結(jié)果表明，苦丁皂苷D是一個強支氣管擴張劑，甚至強于沙丁胺醇。為了檢測哮喘動物接受治療后的免疫學(xué)改變，對動物肺部進行組織學(xué)分析。溶媒對照組和苦丁皂苷D組均表現(xiàn)出相似的組織學(xué)變化，包括出血、炎癥性的中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤等。這些結(jié)果表明苦丁皂苷D的抑制作用并不是因為哮喘模型建立失敗所造成的。對苦丁皂苷C的療效進行檢測發(fā)現(xiàn)，苦丁皂苷C對于氣道平滑肌具有較強的舒張作用。它也表現(xiàn)出顯著的抑制氣道收縮的作用，IC50值為150μg?？喽≡碥誋在體外幾乎沒有舒張作用，在體內(nèi)也幾乎沒有抑制氣道收縮的活性。這些結(jié)果說明，其它在體外具有舒張活性的苦丁皂苷類物質(zhì)在體內(nèi)可能也有抑制氣道收縮的活性，反之亦然。實施例6苦丁皂苷通過調(diào)節(jié)鈣離子內(nèi)流舒張氣道平滑肌鈣離子成像(1-3)：通過激光共聚焦顯微鏡(FV-1000，奧林巴斯)檢測在488nm激發(fā)下的Fluo-4熒光強度來測定Ca2+信號。原代培養(yǎng)的氣道平滑肌細(xì)胞，用D-Hanks溶液漂洗三遍后，加入含2.5μMFluo-4AM和0.02％普盧蘭尼克酸(F127)的D-Hanks溶液，室溫下孵育30分鐘。然后，再用D-Hanks溶液清洗3遍，加入H-T緩沖液，于37℃孵育40分鐘。通過激光共聚焦顯微鏡(FV-1000，奧林巴斯)檢測在488nm激發(fā)下的Fluo-4熒發(fā)光強度來測定Ca2+信號。為了評估苦丁皂苷介導(dǎo)的氣道平滑肌舒張是否通過降低鈣離子濃度實現(xiàn)，制作了具有膜通透性的平滑肌組織。從C57BL/6J小鼠剝離新鮮支氣管環(huán)，將之置于H-T緩沖液中10分鐘，再置入無Ca2+的H-T緩沖液中處理5分鐘，隨后用緩沖液A(30mmol/LTES，0.5mmol/L二硫蘇糖醇，50mmol/L氯化鉀，5mmol/LK2EGTA，150mmol/L蔗糖，pH7.4)浸泡5分鐘，再用含有α溶血素(16000units/mL；Sigma)的緩沖液A在室溫下透膜處理40分鐘。為了耗盡鈣庫，用含10mmol/L的鈣離子載體(sigma)的緩沖液A處理組織10分鐘。再用pCa9.0的溶液(20mmol/LTES，4mmol/LK2EGTA，5.83mmol/LMgCl2，7.56mmol/L丙酸鉀，3.9mmol/LNa2ATP，0.5mmol/L二硫赤鮮醇，16.2mmol/L磷酸肌酸，15U/mL肌酸激酶，pH6.9)清洗組織，之后，加入pCa4.5的溶液(20mmol/LTES，4mmol/LCaEGTA，5.66mmol/LMgCl2，7.53mmol/L丙酸鉀，3.9mmol/LNa2ATP，0.5mmol/L二硫赤鮮醇，16.2mmol/L磷酸肌酸，15U/mL肌酸激酶，pH6.9)引發(fā)Ca2+介導(dǎo)的持續(xù)收縮。清洗后，再用pCa5.0的溶液處理組織，再加入苦丁皂苷D對其舒張。在靜止?fàn)顟B(tài)下，平滑肌細(xì)胞只有少量但穩(wěn)定的鈣離子信號。而當(dāng)加入乙酰膽堿后，鈣離子信號迅速增高，之后再降低到基礎(chǔ)水平。在此過程中也可以觀察到平滑肌收縮(圖7)。但是用苦丁皂苷預(yù)處理細(xì)胞，不再引發(fā)鈣離子信號增高，同時也不產(chǎn)生收縮(圖7)。這些結(jié)果表明，苦丁皂苷可以在平滑肌舒張時減少鈣離子內(nèi)流。如果降低胞內(nèi)鈣離子濃度是苦丁皂苷產(chǎn)生舒張作用的原因，那么固定胞內(nèi)鈣離子濃度應(yīng)該能夠阻止舒張。當(dāng)平滑肌被破膜后，pCa4.5溶液可以引發(fā)平滑肌持續(xù)地收縮?？喽≡碥誅處理不能使處于該收縮狀態(tài)下的破膜平滑肌舒張，相反，還輕微加強了張力。這些結(jié)果表明，苦丁皂苷D不能使已固化鈣離子濃度的平滑肌舒張。這些結(jié)果還表明，鈣離子內(nèi)流的改變是苦丁皂苷介導(dǎo)舒張所必需的，苦丁皂苷介導(dǎo)舒張的機理與改變鈣離子內(nèi)流有關(guān)。平滑肌細(xì)胞中增強的Ca2+信號可能是電耦合和藥物耦合引起的收縮的第二信號。在這兩種常見的激發(fā)方式中，L型鈣離子通道對在收縮狀態(tài)時產(chǎn)生的Ca2+內(nèi)流起到重要作用。為了驗證苦丁皂苷的靶點，利用膜片鉗技術(shù)來檢測苦丁皂苷處理后的L型鈣離子通道電流變化。在膜片鉗研究中，在室溫下利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄電壓鉗制方案下的VDCC電流(保持電位-80mV，去極化電壓范圍-60到+50mV，去極化保持時間200ms)。與溶媒對照相比，50μM苦丁皂苷A可以使L型鈣離子通道產(chǎn)生的電流降低60％(圖9)。這一結(jié)果表明，L型鈣離子通道可能是苦丁皂苷的主要靶點。然而，陽性對照，1μM硝苯地平(確定的L型鈣離子通道拮抗劑)幾乎消除了L型鈣離子通道電流(圖9)。也許還有更多苦丁皂苷的靶點有待被確認(rèn)。實施例7苦丁茶提取物對哮喘患者的治療效果選擇了年齡為20至50周歲、依據(jù)全球哮喘防治創(chuàng)議(GINA)的標(biāo)準(zhǔn)診斷為中度哮喘的患者為志愿者(表2)。在哮喘發(fā)作期間，所有患者均需使用以下藥物才能控制癥狀，包括吸入糖皮質(zhì)激素、倍氯米松、長效β2-腎上腺素激動劑、沙美特羅、或其它具有相似作用的藥物。隨機選取10名已接受吸入式治療的患者。因為患者哮喘癥狀均較為溫和，可治愈或部分可治愈，故治療前自身可作為對照。主要效果為呼吸困難的快速緩解。表3.兩周治療后患者統(tǒng)計和臨床特征特征備注患者數(shù)量108男/2女年齡(周歲)26-51哮喘嚴(yán)重程度6中度/4輕微季節(jié)性過敏表現(xiàn)10表4.患者接受一次治療后的結(jié)果十名志愿者分別來自中國西北和南方，在季節(jié)、文化和生活習(xí)慣上具有巨大的地緣差異。所有患者皆在哮喘期間接受1至2噴的苦丁茶提取物(KE)(55mg/mL)治療，呼吸困難和哮鳴癥狀在5分鐘內(nèi)得到明顯改善，且在30分鐘內(nèi)不再復(fù)發(fā)(表3)。大部分病例中(8/10)，12小時內(nèi)志愿者無需進行第二次噴霧治療。KE治療也能有效改善一次噴霧后的咳嗽頻率，但不能抑制氣道分泌物的產(chǎn)生和鼻塞的狀況(P>0.05)。一個有趣的結(jié)果是，KE反復(fù)治療后，4/10的志愿者的支氣管炎得到顯著性改善。整個治療過程中，未發(fā)現(xiàn)包括呼吸、嘔吐、過敏、口干以及其它不適感覺的任何不良反應(yīng)。這些結(jié)果表明，苦丁茶提取物可以快速完全有效地緩解哮喘引起的呼吸困難癥狀。為了測試苦丁茶提取物中單一物質(zhì)對于哮喘的治療效果，兩個患有嚴(yán)重哮喘癥狀的志愿者(男51歲，女72歲)通過霧化裝置接受苦丁皂苷A(20mM)的治療。吸入15秒后，男性志愿者在5分鐘時呼吸困難癥狀得到緩解，PEF值從100增加至320。緩解效果持續(xù)一晚。將沙丁胺醇作為對照，該男性志愿者在3分鐘時呼吸困難癥狀得到緩解，但效果不能持續(xù)一晚，需要再次吸入一次藥物。對于女性志愿者，也表現(xiàn)出同樣的結(jié)果。這一結(jié)果表明，苦丁茶提取物的其中一種活性成分，苦丁皂苷A對于緩解哮喘的呼吸困難癥狀同樣具有顯著的療效。當(dāng)前第1頁1 2 3