本發(fā)明涉及一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液及其制備方法，屬于獸藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
仔豬腹瀉是養(yǎng)豬生產(chǎn)中一個重要問題，對提高仔豬的育成率和斷奶窩重威脅很大，是仔豬多活快長的大敵。哺乳仔豬有兩個時期容易發(fā)生腹瀉。第一次是生后3--5日齡，多為黃??；第二次實為2--3周齡，多為白痢。
該種病癥幾乎遍布世界所有家禽養(yǎng)殖業(yè)國家，分布十分廣泛。目前，治療該病癥最常用的抗菌產(chǎn)品，由于組方不合理，容易產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致臨床效果不是很好。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液及其制備方法，在硫酸慶大霉素溶液的基礎(chǔ)上，添加部分中藥提取物，不僅可以提高仔豬腹瀉的療效，還可以加強(qiáng)仔豬的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能，提高仔豬對寒冷的應(yīng)激能力，最后還有提高飼料轉(zhuǎn)化率的作用。
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，由下述重量配比的原料制成：硫酸慶大霉素45-55份、紫地榆提取物15-17份、三顆針提取物18.6-19.4份、雪膽提取物11-12份、氯化鉀3-5份、蒸餾水900-1100份。
紫地榆提取物的制備方法為：
（1）將紫地榆粉碎，用甲醇60-70℃加熱回流提取，料液比為1g：13-15ml，過濾，得濾液；
（2）把濾液減壓濃縮得相對密度為1.05-1.07的浸膏，把浸膏用2倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅰ；
（3）把水溶液Ⅰ離心，分離得到上清液，把上清液用相等體積的正丁醇萃取，分離得到正丁醇層；
（4）把正丁醇層減壓濃縮得相對密度為1.10-1.12的浸膏，浸膏用3倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅱ；
（5）把水溶液Ⅱ上AB-8大孔吸附樹脂柱，上柱流速為1.5-1.7BV/h，依次以4.5BV的90%乙醇、3.5的70%乙醇、2.5BV的50%乙醇、2BV的蒸餾水進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.5-1.7BV/h，收集50%乙醇洗脫液，減壓濃縮至相對密度為1.14-1.16的浸膏，干燥，即得紫地榆提取物。
其中，水溶液Ⅱ和AB-8大孔吸附樹脂的體積比為3.5:1。
三顆針提取物的制備方法為：
（1）把三顆針粉碎，用乙醇-乙酸乙酯-丙酮混合溶液加熱至50-60℃提取50-70分鐘，料液比為1g：18-22ml，過濾，得到提取液；
（2）把提取液減壓濃縮回收溶劑，得相對密度為1.08-1.10的浸膏，把浸膏用3.5倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液；
（3）把水溶液用相等體積的氯仿萃取，分離得到氯仿層；
（4）把氯仿層減壓濃縮回收氯仿，干燥，即得三顆針提取物。
其中，乙醇-乙酸乙酯-丙酮混合溶液中乙醇、乙酸乙酯、丙酮的體積比為8:3.6:5。
雪膽提取物的制備方法為：
（1）把雪膽粉碎，用16-20倍質(zhì)量的水煎煮100-140分鐘，過濾，得濾液；
（2）把濾液用相等體積的乙酸乙酯萃取，分離得到水層和乙酸乙酯層；
（3）把乙酸乙酯層上HZ002離子交換樹脂柱，上柱流速為1.2-1.4BV/h，依次以2BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液、,1BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液，0.5 BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.2-1.4BV/h，收集所有洗脫液；
（4）把洗脫液和乙酸乙酯層合并，離心分離得到上清液，把上清液減壓濃縮得相對密度為1.09-1.11的浸膏，干燥，即得雪膽提取物。
其中，乙酸乙酯層和HZ002離子交換樹脂柱的體積比為2.8:1，2BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為3:1，1BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為2:1，0.5BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為1:1。
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，制備方法為：
把硫酸慶大霉素、氯化鉀溶解在蒸餾水中，攪拌30-40分鐘；加入紫地榆提取物，升溫至50-55℃，攪拌70-80分鐘；繼續(xù)加入三顆針提取物和雪膽提取物，升溫至70-75℃，攪拌100-140分鐘；冷卻至室溫，即得。
本發(fā)明的優(yōu)點在于：
1、在硫酸慶大霉素的基礎(chǔ)上添加紫地榆、三顆針、雪膽提取物，不僅可以提高仔豬腹瀉的療效，還可以降低耐藥性。
2、紫地榆、三顆針、雪膽提取物依據(jù)藥材加工特性，采用特定的提取方法，得到的有效成分和硫酸慶大霉素聯(lián)用，不僅可以加強(qiáng)仔豬的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能，提高仔豬對寒冷的應(yīng)激能力，還有提高飼料有效成分轉(zhuǎn)化率的作用。
具體實施例：
實施例1：
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，由下述重量配比的原料制成：硫酸慶大霉素45份、紫地榆提取物15份、三顆針提取物18.6份、雪膽提取物11份、氯化鉀3份、蒸餾水900份。
紫地榆提取物的制備方法為：
（1）將紫地榆粉碎，用甲醇60℃加熱回流提取，料液比為1g：13ml，過濾，得濾液；
（2）把濾液減壓濃縮得相對密度為1.05的浸膏，把浸膏用2倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅰ；
（3）把水溶液Ⅰ離心，分離得到上清液，把上清液用相等體積的正丁醇萃取，分離得到正丁醇層；
（4）把正丁醇層減壓濃縮得相對密度為1.10的浸膏，浸膏用3倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅱ；
（5）把水溶液Ⅱ上AB-8大孔吸附樹脂柱，上柱流速為1.5BV/h，依次以4.5BV的90%乙醇、3.5的70%乙醇、2.5BV的50%乙醇、2BV的蒸餾水進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.5BV/h，收集50%乙醇洗脫液，減壓濃縮至相對密度為1.14的浸膏，干燥，即得紫地榆提取物。
其中，水溶液Ⅱ和AB-8大孔吸附樹脂的體積比為3.5:1。
三顆針提取物的制備方法為：
（1）把三顆針粉碎，用乙醇-乙酸乙酯-丙酮混合溶液加熱至50℃提取50分鐘，料液比為1g：18ml，過濾，得到提取液；
（2）把提取液減壓濃縮回收溶劑，得相對密度為1.08的浸膏，把浸膏用3.5倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液；
（3）把水溶液用相等體積的氯仿萃取，分離得到氯仿層；
（4）把氯仿層減壓濃縮回收氯仿，干燥，即得三顆針提取物。
其中，乙醇-乙酸乙酯-丙酮混合溶液中乙醇、乙酸乙酯、丙酮的體積比為8:3.6:5。
雪膽提取物的制備方法為：
（1）把雪膽粉碎，用16倍質(zhì)量的水煎煮100分鐘，過濾，得濾液；
（2）把濾液用相等體積的乙酸乙酯萃取，分離得到水層和乙酸乙酯層；
（3）把乙酸乙酯層上HZ002離子交換樹脂柱，上柱流速為1.2BV/h，依次以2BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液、,1BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液，0.5 BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.2BV/h，收集所有洗脫液；
（4）把洗脫液和乙酸乙酯層合并，離心分離得到上清液，把上清液減壓濃縮得相對密度為1.09-1.11的浸膏，干燥，即得雪膽提取物。
其中，乙酸乙酯層和HZ002離子交換樹脂柱的體積比為2.8:1，2BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為3:1，1BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為2:1，0.5BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為1:1。
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，制備方法為：
把硫酸慶大霉素、氯化鉀溶解在蒸餾水中，攪拌30分鐘；加入紫地榆提取物，升溫至50℃，攪拌70分鐘；繼續(xù)加入三顆針提取物和雪膽提取物，升溫至70℃，攪拌100分鐘；冷卻至室溫，即得。
實施例2：
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，由下述重量配比的原料制成：硫酸慶大霉素50份、紫地榆提取物16份、三顆針提取物19份、雪膽提取物11.5份、氯化鉀4份、蒸餾水1000份。
紫地榆提取物的制備方法為：
（1）將紫地榆粉碎，用甲醇65℃加熱回流提取，料液比為1g：14ml，過濾，得濾液；
（2）把濾液減壓濃縮得相對密度為1.06的浸膏，把浸膏用2倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅰ；
（3）把水溶液Ⅰ離心，分離得到上清液，把上清液用相等體積的正丁醇萃取，分離得到正丁醇層；
（4）把正丁醇層減壓濃縮得相對密度為1.11的浸膏，浸膏用3倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅱ；
（5）把水溶液Ⅱ上AB-8大孔吸附樹脂柱，上柱流速為1.6BV/h，依次以4.5BV的90%乙醇、3.5的70%乙醇、2.5BV的50%乙醇、2BV的蒸餾水進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.6BV/h，收集50%乙醇洗脫液，減壓濃縮至相對密度為1.15的浸膏，干燥，即得紫地榆提取物。
其中，水溶液Ⅱ和AB-8大孔吸附樹脂的體積比為3.5:1。
三顆針提取物的制備方法為：
（1）把三顆針粉碎，用乙醇-乙酸乙酯-丙酮混合溶液加熱至55℃提取60分鐘，料液比為1g：20ml，過濾，得到提取液；
（2）把提取液減壓濃縮回收溶劑，得相對密度為1.09的浸膏，把浸膏用3.5倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液；
（3）把水溶液用相等體積的氯仿萃取，分離得到氯仿層；
（4）把氯仿層減壓濃縮回收氯仿，干燥，即得三顆針提取物。
其中，乙醇-乙酸乙酯-丙酮混合溶液中乙醇、乙酸乙酯、丙酮的體積比為8:3.6:5。
雪膽提取物的制備方法為：
（1）把雪膽粉碎，用18倍質(zhì)量的水煎煮120分鐘，過濾，得濾液；
（2）把濾液用相等體積的乙酸乙酯萃取，分離得到水層和乙酸乙酯層；
（3）把乙酸乙酯層上HZ002離子交換樹脂柱，上柱流速為1.3BV/h，依次以2BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液、,1BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液，0.5 BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.3BV/h，收集所有洗脫液；
（4）把洗脫液和乙酸乙酯層合并，離心分離得到上清液，把上清液減壓濃縮得相對密度為1.10的浸膏，干燥，即得雪膽提取物。
其中，乙酸乙酯層和HZ002離子交換樹脂柱的體積比為2.8:1，2BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為3:1，1BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為2:1，0.5BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為1:1。
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，制備方法為：
把硫酸慶大霉素、氯化鉀溶解在蒸餾水中，攪拌35分鐘；加入紫地榆提取物，升溫至52℃，攪拌75分鐘；繼續(xù)加入三顆針提取物和雪膽提取物，升溫至72℃，攪拌120分鐘；冷卻至室溫，即得。
實施例3：
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，由下述重量配比的原料制成：硫酸慶大霉素55份、紫地榆提取物17份、三顆針提取物19.4份、雪膽提取物12份、氯化鉀5份、蒸餾水1100份。
紫地榆提取物的制備方法為：
（1）將紫地榆粉碎，用甲醇70℃加熱回流提取，料液比為1g：15ml，過濾，得濾液；
（2）把濾液減壓濃縮得相對密度為1.07的浸膏，把浸膏用2倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅰ；
（3）把水溶液Ⅰ離心，分離得到上清液，把上清液用相等體積的正丁醇萃取，分離得到正丁醇層；
（4）把正丁醇層減壓濃縮得相對密度為1.12的浸膏，浸膏用3倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅱ；
（5）把水溶液Ⅱ上AB-8大孔吸附樹脂柱，上柱流速為1.7BV/h，依次以4.5BV的90%乙醇、3.5的70%乙醇、2.5BV的50%乙醇、2BV的蒸餾水進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.7BV/h，收集50%乙醇洗脫液，減壓濃縮至相對密度為1.16的浸膏，干燥，即得紫地榆提取物。
其中，水溶液Ⅱ和AB-8大孔吸附樹脂的體積比為3.5:1。
三顆針提取物的制備方法為：
（1）把三顆針粉碎，用乙醇-乙酸乙酯-丙酮混合溶液加熱至60℃提取70分鐘，料液比為1g：22ml，過濾，得到提取液；
（2）把提取液減壓濃縮回收溶劑，得相對密度為1.10的浸膏，把浸膏用3.5倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液；
（3）把水溶液用相等體積的氯仿萃取，分離得到氯仿層；
（4）把氯仿層減壓濃縮回收氯仿，干燥，即得三顆針提取物。
其中，乙醇-乙酸乙酯-丙酮混合溶液中乙醇、乙酸乙酯、丙酮的體積比為8:3.6:5。
雪膽提取物的制備方法為：
（1）把雪膽粉碎，用20倍質(zhì)量的水煎煮140分鐘，過濾，得濾液；
（2）把濾液用相等體積的乙酸乙酯萃取，分離得到水層和乙酸乙酯層；
（3）把乙酸乙酯層上HZ002離子交換樹脂柱，上柱流速為1.4BV/h，依次以2BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液、,1BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液，0.5 BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.4BV/h，收集所有洗脫液；
（4）把洗脫液和乙酸乙酯層合并，離心分離得到上清液，把上清液減壓濃縮得相對密度為1.11的浸膏，干燥，即得雪膽提取物。
其中，乙酸乙酯層和HZ002離子交換樹脂柱的體積比為2.8:1，2BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為3:1，1BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為2:1，0.5BV的乙醇-乙酸乙酯洗脫液中乙醇和乙酸乙酯的體積比為1:1。
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，制備方法為：
把硫酸慶大霉素、氯化鉀溶解在蒸餾水中，攪拌40分鐘；加入紫地榆提取物，升溫至55℃，攪拌80分鐘；繼續(xù)加入三顆針提取物和雪膽提取物，升溫至75℃，攪拌140分鐘；冷卻至室溫，即得。
對比例1：
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，由下述重量配比的原料制成：硫酸慶大霉素60份、紫地榆提取物20份、三顆針提取物15份、雪膽提取物15份、氯化鉀2份、蒸餾水800份。
其余同實施例1。
對比例2：
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，由下述重量配比的原料制成：硫酸慶大霉素50份、紫地榆提取物16份、三顆針提取物19份、氯化鉀4份、蒸餾水1000份。
其余同實施例2。
對比例3：
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，
紫地榆提取物的制備方法為：
（1）將紫地榆粉碎，用無水醇75℃加熱回流提取，料液比為1g：14ml，過濾，得濾液；
（2）把濾液減壓濃縮得相對密度為1.06的浸膏，把浸膏用2倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅰ；
（3）把水溶液Ⅰ離心，分離得到上清液，把上清液用相等體積的正丁醇萃取，分離得到正丁醇層；
（4）把正丁醇層減壓濃縮得相對密度為1.11的浸膏，浸膏用3倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液Ⅱ；
（5）把水溶液Ⅱ上D101大孔吸附樹脂柱，上柱流速為1.6BV/h，依次以4.5BV的90%乙醇、3.5的70%乙醇、2.5BV的50%乙醇、2BV的蒸餾水進(jìn)行梯度洗脫，洗脫流速為1.6BV/h，收集50%乙醇洗脫液，減壓濃縮至相對密度為1.15的浸膏，干燥，即得紫地榆提取物。
其中，水溶液Ⅱ和AB-8大孔吸附樹脂的體積比為3.5:1。
其余同實施例2。
對比例4：
一種防治仔豬腹瀉的復(fù)方溶液，
三顆針提取物的制備方法為：
（1）把三顆針粉碎，用乙醇-丙酮混合溶液加熱至60℃提取70分鐘，料液比為1g：22ml，過濾，得到提取液；
（2）把提取液減壓濃縮回收溶劑，得相對密度為1.10的浸膏，把浸膏用3.5倍質(zhì)量的水溶解，得水溶液；
（3）把水溶液用相等體積的氯仿萃取，分離得到氯仿層；
（4）把氯仿層減壓濃縮回收氯仿，干燥，即得三顆針提取物。
其中，乙醇-丙酮混合溶液中乙醇、丙酮的體積比為8:5。
其余同實施例3。
1、本發(fā)明對仔豬腹瀉的防治作用試驗
選擇年齡胎次近似、健康母豬所生產(chǎn)日期相近的仔豬90窩，每組10窩，分成對照組、硫酸慶大霉素組、實施例1-3組，對比例1-4組。實施例1-3組，對比例1-4組從斷奶前7d開始到斷奶后14d為止，每天在飼料中按每kg體重分別添加相應(yīng)組制得的的藥物0.5g，對照組不給藥。每天早晚定時觀察仔豬糞便情況，糞便分為正常、稀軟、黏稠、水樣和血便5個等級，后4個等級均判定為腹瀉。計算仔豬腹瀉發(fā)生率和死亡率。仔豬腹瀉發(fā)生率=（試驗期間腹瀉次數(shù)/（仔豬數(shù)×試驗時間））×100%；仔豬死亡率 =（試驗仔豬死亡數(shù)/試驗初仔豬數(shù)）×100%。結(jié)果如表1所示。
表1 本發(fā)明對仔豬腹瀉的防治作用
從表1可知，本發(fā)明制得的復(fù)合溶液（實施例1-3）可以明顯降低仔豬的腹瀉發(fā)生率和死亡率，效果優(yōu)于對比例1（原料配比不同）和對比例2（未添加雪膽提取物）、對比例3（紫地榆提取物制備方法不同）、對比例4（三顆針提取物制備方法不同）和硫酸慶大霉素組，尤其是以實施例2的效果最優(yōu)，可見本發(fā)明原料的配比、配方及中藥提取物的制備方法均對制得的產(chǎn)品的療效有影響，因此本發(fā)明采用了特定的原料配比、選用一定的中藥提取物及特定的中藥提取物的制備方法，制得的復(fù)方溶液對防治仔豬腹瀉的療效較優(yōu)。
2、本發(fā)明對實驗性腹瀉的影響
將90只小鼠（23.1±2.2）ｇ隨機(jī)分為模型對照組、硫酸慶大霉素組、實施例1-3組、對比例1-4組，共9組，每組10只。實驗前禁食16h，自由飲水。模型對照組以0.2mL／g生理鹽水灌胃，硫酸慶大霉素組、實施例1-3組和對比例1-4組都以相應(yīng)組制得的藥物0.5 g／kg灌胃給藥。均1d1次，連續(xù)5d。末次給藥前12h動物禁食，末次給藥后0.5h給動物灌服蓖麻油0.4 mL／只，建立腹瀉動物模型。
腹瀉模型建立后，將小鼠單個置于代謝籠內(nèi)，籠下墊濾紙，觀察小鼠大便情況，共6h，期間及時更換濾紙。小鼠大便分為：正常便、外形正常但水份較多、軟便、黏液便及水樣便。其中后3種屬腹瀉，按濾紙上的腹瀉便灘數(shù)計為稀便次數(shù)。試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果如表2所示。
從表2可知，本發(fā)明制得的復(fù)合溶液（實施例1-3）可以明顯降低動物的腹瀉次數(shù)，效果優(yōu)于對比例1（原料配比不同）和對比例2（未添加雪膽提取物）、對比例3（紫地榆提取物制備方法不同）、對比例4（三顆針提取物制備方法不同）和硫酸慶大霉素組，尤其是以實施例2的效果最優(yōu)，可見本發(fā)明原料的配比、配方及中藥提取物的制備方法均對制得的產(chǎn)品的效果均有影響，因此本發(fā)明采用了特定的原料配比、選用一定的中藥提取物及特定的中藥提取物的制備方法，制得的復(fù)方溶液對腹瀉有顯著的治療作用，而且見效快。
3、本發(fā)明抗應(yīng)激動物實驗
（1）對小鼠負(fù)重游泳的影響
小鼠80只，18-22g，雌雄各半，隨機(jī)分為實施例1-3組、對比例1-4組、對照組共8組，每組各10只。實施例1-3組和對比例1-3組分別按各組制得的產(chǎn)品0.5g/kg灌胃，對照組按0.5g/kg蒸餾水灌胃。每日給藥1次，連續(xù)7 d。于末次給藥30min后，按小鼠體重的10％增加負(fù)荷，即將負(fù)重物束于小鼠尾根部。然后將小鼠單個放入水溫為25±1℃、水深20 cm的水槽中。小鼠頭部沉入水巾10 s不能浮出水面者即為體力耗竭，記錄小鼠游泳時間。
（2）對小鼠耐缺氧的影響
小鼠80只，18-22g，雌雄各半，隨機(jī)分為實施例1-3組、對比例1-4組、對照組共7組，每組各10只。實施例1-3組和對比例1-4組分別按各組制得的產(chǎn)品0.5g/kg灌胃，對照組按0.5g/kg蒸餾水灌胃。每日給藥1次，連續(xù)7 d。于末次給藥30min后，將小鼠放人盛有10 g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)(每瓶只放1只小鼠)，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán)，使之不漏氣。以呼吸停止為死亡判斷指標(biāo)，記錄小鼠存活時間。
（3）對小鼠耐低溫的影響
小鼠80只，18-22g，雌雄各半，隨機(jī)分為實施例1-3組、對比例1-4組、對照組共8組，每組各10只。實施例1-3組和對比例1-4組分別按各組制得的產(chǎn)品0.5g/kg灌胃，對照組按0.5g/kg蒸餾水灌胃。每日給藥1次，連續(xù)7 d。于末次給藥30 min后，將小鼠單個放人5℃的恒溫箱內(nèi)。觀察小鼠，以呼吸停止為死亡判斷指標(biāo)，記錄小鼠存活時間。試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果如表3所示。
試驗從抗疲勞、耐缺氧、耐低溫3個方面研究了本發(fā)明對動物機(jī)體抗應(yīng)激反應(yīng)能力的影響。從表3可知，本發(fā)明制得的復(fù)合溶液（實施例1-3）可以明顯提高小鼠的負(fù)重游泳時間、缺氧存活時間和低溫存活時間，效果優(yōu)于對比例1（原料配比不同）和對比例2（未添加雪膽提取物）、對比例3（紫地榆提取物制備方法不同）、對比例4（三顆針提取物制備方法不同）和硫酸慶大霉素組，尤其是以實施例2的效果最優(yōu)，可見本發(fā)明原料的配比、配方及中藥提取物的制備方法均對制得的產(chǎn)品的效果均有影響，因此本發(fā)明采用了特定的原料配比、選用一定的中藥提取物及特定的中藥提取物的制備方法，制得的復(fù)方溶液具有較強(qiáng)的抗疲勞、耐缺氧、耐低溫等抗應(yīng)激的作用，可使處于應(yīng)激狀態(tài)下的機(jī)體體力增強(qiáng)，耐疲勞能力增強(qiáng)，耗氧降低，耐低溫環(huán)境，加強(qiáng)仔豬的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能。
4、日糧中營養(yǎng)物質(zhì)的消化率測定
選擇年齡胎次近似、健康母豬所生產(chǎn)日期相近的仔豬180頭，分成9組，每組20頭，公母各半，其中8組作為試驗組，分別飼喂實施例1-3組、對比例1-4組制得的藥物，每噸日糧中添加1kg藥物。剩余1組為空白對照組，不給藥，其他同試驗組。試驗仔豬自由飲水，自由采食，日喂兩次，以吃凈不剩為度。試驗期為15天，于試驗期第13天開始收集各圈糞樣，連續(xù)3 天，鮮糞中加1/10鮮糞重的10 %硫酸，-20℃保存，然后，將3天收集的糞便混勻，于70 ℃下烘干，除去初水，置室溫條件下回潮24 小時，稱重、記錄、粉碎(過40目篩)，分裝于樣品袋中。采用內(nèi)源指示劑法測定主要營養(yǎng)成分表觀消化率，飼料、糞中營養(yǎng)成分參照楊勝(1999)測定。然后計算飼料中各營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，結(jié)果見表4。
從表4可知，本發(fā)明制得的復(fù)合溶液（實施例1-3）可以明顯提高仔豬日糧中粗蛋白質(zhì)、粗纖維和礦物元素等營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，效果優(yōu)于對比例1（原料配比不同）和對比例2（未添加雪膽提取物）、對比例3（紫地榆提取物制備方法不同）、對比例4（三顆針提取物制備方法不同）和硫酸慶大霉素組，尤其是以實施例2的效果最優(yōu)，可見本發(fā)明原料的配比、配方及中藥提取物的制備方法均對制得的產(chǎn)品的效果均有影響，因此本發(fā)明采用了特定的原料配比、選用一定的中藥提取物及特定的中藥提取物的制備方法，制得的復(fù)方溶液有提高飼料有效成分轉(zhuǎn)化率的作用。