本發(fā)明屬于化妝品制備技術(shù)中的載體系統(tǒng)技術(shù)領(lǐng)域。涉及一種同時(shí)負(fù)載白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑的納米級(jí)載體的制備方法及其處方優(yōu)化研究。

背景技術(shù)：

我國西部高原地區(qū)日照時(shí)間長，紫外線輻射強(qiáng)度高，人體皮膚易受到損傷，加之高原空氣干燥、風(fēng)沙大，皮膚容易失水脫皮，更進(jìn)一步加重了紫外線對(duì)皮膚的損傷。因此日光性皮炎已成為常見疾病。根據(jù)人們所受紫外線照射強(qiáng)度、時(shí)間長短及病變反應(yīng)，可將曬傷分為“即時(shí)性曬傷”和“累積性曬傷”兩大類。即時(shí)性是在短時(shí)間內(nèi)皮膚受到強(qiáng)烈的日光暴曬所致。累積性曬傷沒有即時(shí)性曬傷那樣強(qiáng)烈的短期反應(yīng)，是由慢性光毒反應(yīng)所致。此類癥狀多出現(xiàn)于經(jīng)常暴露在陽光下的人們。太陽光中的紫外線(uv)輻射是一種非常顯著的環(huán)境因子，它主要作用于人的皮膚。根據(jù)波長大小，太陽光中的紫外線可以分為三類：l)長波紫外線(uva)，波長為320～400nm，幾乎全部到達(dá)地面,能穿透真皮；2)中波紫外線(uvb)，波長為280～320nm，可以穿透皮膚，大部分可到達(dá)地面；3)短波紫外線(uvc)，波長為200～280nm，均被臭氧層所吸收，不能到達(dá)地面。在對(duì)市售的高原防曬產(chǎn)品的調(diào)研中發(fā)現(xiàn)：(1)多數(shù)產(chǎn)品通過采用w/o型乳化體系，同時(shí)負(fù)載物理和化學(xué)防曬劑，產(chǎn)品油膩不清爽，駐高原官兵在使用本類產(chǎn)品時(shí)會(huì)產(chǎn)生不適感。同時(shí)該類產(chǎn)品保濕性較差。(2)由于強(qiáng)光照射導(dǎo)致活性成分的穩(wěn)定性嚴(yán)重下降。(3)化學(xué)防曬劑部分經(jīng)皮吸收，可產(chǎn)生皮膚刺激性。隨著使用防曬劑人員的增加，有關(guān)防曬劑收劑引起過敏現(xiàn)象和光過敏癥的報(bào)道越來越多。(4)市售防曬凝膠多用水溶性的化學(xué)防曬劑，雖然具有保濕作用，但是可用的防曬劑受到限制，防曬效果也不明顯，而且處方中表面活性劑含量較高，對(duì)皮膚刺激性較大。

白藜蘆醇為天然多酚類化合物，具有顯著的抗氧化作用，皮膚涂抹白藜蘆醇能夠抑制uvb引起的皮膚水腫、發(fā)炎，能有效改善駐訓(xùn)高原官兵因長時(shí)間受到強(qiáng)烈紫外線照射而引起的日光性皮炎。體外研究表明，在輻照之前使用白藜蘆醇能夠抵御uva射線引起的氧化應(yīng)激。研究顯示：白藜蘆醇在皮膚中的結(jié)合位點(diǎn)主要位于表皮的角質(zhì)形成細(xì)胞，并且白藜蘆醇可以保護(hù)hacat細(xì)胞免受no釋放snp的損傷；白藜蘆醇亦可通過抑制1l-1β和nf-κb及其介導(dǎo)的mmps表達(dá)從而抑制uva照射對(duì)人成纖維細(xì)胞造成的光損傷。但純白藜蘆醇在紫外光的照射下轉(zhuǎn)化為其順式異構(gòu)體，活性減弱，對(duì)遇光、熱不穩(wěn)定。使白藜蘆醇在化妝品領(lǐng)域的使用受到限制。

nlc是采用兩種或者兩種以上的固液或者固固脂質(zhì)材料經(jīng)過高溫加熱后冷卻而制得。作為局部給藥系統(tǒng)的載體，nlc的具有以下優(yōu)勢(shì)：(1)粒徑小，黏附效應(yīng)強(qiáng)；(2)能夠提高化學(xué)防曬劑的穩(wěn)定性；(3)對(duì)紫外線具有散射作用，可減弱紫外線對(duì)皮膚的輻射強(qiáng)度，產(chǎn)生抗磁外線協(xié)同增效作用；(4)可降低化學(xué)防曬劑對(duì)皮膚的刺激性；(4)液態(tài)脂質(zhì)的加入致使晶格缺陷，能夠容納更多的藥物分子，提高藥物的載量，降低藥物在貯存過程中被排擠泄露；(5)nlc的載體原料具有良好的生物相容性，制備過程中不使用有機(jī)溶劑，對(duì)機(jī)體毒性小。水凝膠具有流體的黏性行為，這使得其能與皮膚良好接觸，而且質(zhì)地清爽，具有良好的鎖水、保濕作用，但其只能負(fù)載水溶性抗曬劑，抗曬效果差。將nlc與水凝膠相結(jié)合制備納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體水凝膠，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體水凝膠在保留了nlc和水凝膠優(yōu)點(diǎn)的同時(shí)，克服了nlc和水凝膠的缺點(diǎn)。

若將白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑制備為納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體凝膠，不僅可提高載藥量，增強(qiáng)抗紫外線作用，減少涂抹次數(shù)，而且產(chǎn)品在兼具防曬、保濕功能的同時(shí)，能夠保護(hù)hacat細(xì)胞，降低有機(jī)防曬劑對(duì)皮膚產(chǎn)生的光敏反應(yīng)和光毒效應(yīng)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種納米脂質(zhì)載體防曬凝膠及其制備方法。用該方法制備的防曬凝膠可提高白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑的光穩(wěn)定性，降低有機(jī)防曬劑對(duì)皮膚產(chǎn)生的刺激性，為防曬產(chǎn)品的開發(fā)提供新思路。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種納米脂質(zhì)載體防曬凝膠，其特征是由下列物質(zhì)按質(zhì)量百分比制成：

白藜蘆醇0.25～1.5％；有機(jī)防曬劑7～9％；復(fù)合脂質(zhì)8～16％；復(fù)配乳化劑2～5％；羧甲纖維素鈉0.1～0.4％；透明質(zhì)酸鈉0.2～0.3％；neolonetmmxp0.5～2％；甘油3～8％；維生素e0.5～1％；紅沒藥醇0.1～0.3％；尿囊素0.1～0.25％；edta-2na0.05～0.2％；其余為去離子水；

其中，復(fù)合脂質(zhì)為乳木果酯和辛癸酸甘油，且以質(zhì)量比計(jì)乳木果酯：辛癸酸甘油＝5:1；

有機(jī)防曬劑為：4-甲基芐亞基樟腦(parsol5000)、丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷(parsol1789)、甲氧基肉桂酸乙基己酯(parsolmcx)，且以質(zhì)量比計(jì)parsol5000：parsol1789：parsolmcx＝1:2:5；

復(fù)配乳化劑為olivem1000和olivem800，且以質(zhì)量比計(jì)olivem1000:olivem800＝5:3。

一種納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的制備方法，其特征是以羧甲纖維素鈉為基質(zhì)，液態(tài)油脂和固態(tài)油脂組成脂質(zhì)載體，將白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑共同包裹于脂質(zhì)載體中，經(jīng)乳化、超聲得nlc-gel。其中液態(tài)油脂為辛癸酸甘油酯，固態(tài)油脂為乳木果酯，通過jmp軟件設(shè)計(jì)試驗(yàn)，采用spss軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，優(yōu)選出最優(yōu)處方。

(1)該納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體凝膠的制備方法：稱取處方量的羧甲纖維素鈉、透明質(zhì)酸鈉、防腐劑，用甘油分散均勻，加入去離子水并于磁力攪拌器上快速攪拌，充分溶脹，制成凝膠基質(zhì)。再將處方量的乳木果酯、復(fù)配乳化劑、乳木果脂、維生素e、紅沒藥醇共同置于80℃水浴，加熱融化后加入parsol5000、parsol1789、parsolmcx，待溫度降至50℃，加入白藜蘆醇/辛癸酸甘油酯分散液，制成油相。稱取處方量的尿囊素、edta-2na、去離子水于水浴中80℃加熱至溶解，制成水相。將水相和油相均于75℃油浴、2000r/min中分別剪切5min，同時(shí)將油相以穩(wěn)定的流速緩緩加至水相，2000r/min剪切5min，并于180w的功率下超聲10min，得納米脂質(zhì)載體分散液(nlc)。將nlc分散液室溫放置至40℃，加入凝膠基質(zhì)中，邊加邊攪拌至均勻，得納米脂質(zhì)載體凝膠(nlc-gel)。

(2)處方優(yōu)化方法：以吸光度值為指標(biāo)，通過單因素試驗(yàn)，考察辛葵酸甘油酯與乳木果酯投料比、白藜蘆醇用量、乳化劑用量、剪切速度、超聲功率、剪切時(shí)間、超聲時(shí)間對(duì)指標(biāo)的影響，篩選出試驗(yàn)的顯著性因素?？疾煲蛩亻g的交互作用，以便在使用定制設(shè)計(jì)試驗(yàn)時(shí)，減少添加因子，以達(dá)到通過最少的試驗(yàn)次數(shù)獲得最優(yōu)的試驗(yàn)結(jié)果。在運(yùn)用jmp設(shè)計(jì)并分析預(yù)測(cè)的基礎(chǔ)上，將所得數(shù)據(jù)輸入spss中，采用單變量線性模型分析，優(yōu)化參數(shù)。

jmp是sas公司為全球客戶開發(fā)的六西格瑪統(tǒng)計(jì)軟件，試驗(yàn)設(shè)計(jì)是jmp的強(qiáng)勢(shì)功能之一，目前國內(nèi)還未見將其應(yīng)用于化妝品領(lǐng)域的報(bào)道。該nlc-gel的特征在于其嚴(yán)謹(jǐn)?shù)奶幏絻?yōu)化過程。在考察單因素及交互作用的基礎(chǔ)上，用jmp7設(shè)計(jì)試驗(yàn)，并通過spss軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，得出的最優(yōu)處方為：res用量為1％，剪切時(shí)間為5min，超聲時(shí)間為10min。根據(jù)qb/t2410-1998中uvb防護(hù)評(píng)價(jià)方法,測(cè)其吸光度值為2.358±0.070，表明該nlc-gel具有完全防護(hù)紫外線照射的效果。該制劑中res、parsol5000、parsol1789、parsolmcx的包封率分別為33.36％±2.25、62.58％±3.02、61.13％±2.78、55.18％±1.03。進(jìn)一步的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果提示，其形狀、含量、粒度、黏度、ph能在高溫、高濕及強(qiáng)光條件下保持穩(wěn)定。前期實(shí)驗(yàn)中，建立了hplc法同時(shí)測(cè)定白藜蘆醇和三種有機(jī)防曬劑的含量，其方法學(xué)結(jié)果表明該法準(zhǔn)確、可靠，可用于nlc-gel的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

本發(fā)明在化妝品制備技術(shù)領(lǐng)域構(gòu)建了一種新型納米遞藥系統(tǒng)，此遞藥系統(tǒng)為納米脂質(zhì)載體凝膠，載體由液態(tài)油脂和固態(tài)油脂共同構(gòu)成的固體骨架結(jié)構(gòu)，包裹白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑得載藥凝膠。該凝膠可發(fā)揮防曬作用的同時(shí)，能夠提高白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑的光穩(wěn)定性。

本發(fā)明的創(chuàng)新性在于：1.將nlc與水凝膠相結(jié)合制備納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體水凝膠，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體水凝膠在保留了nlc和水凝膠優(yōu)點(diǎn)的同時(shí)，克服了nlc和水凝膠的缺點(diǎn)。2.納米脂質(zhì)載體的固體骨架結(jié)構(gòu)提高了白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑的光穩(wěn)定性。3.白藜蘆醇兼具抗紫外線和細(xì)胞保護(hù)功能，為防曬產(chǎn)品易產(chǎn)生光敏反應(yīng)和光毒性的困境提供新策略。4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)采用jmp7軟件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用spss分析，數(shù)據(jù)嚴(yán)謹(jǐn)、結(jié)果可靠。

附圖說明

圖1是納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的粒徑分布(dls)圖。

圖2是納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的電位分布圖。

圖3是預(yù)測(cè)刻畫器。

圖4是高溫、高濕和強(qiáng)光條件下，納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的含量分別在0天、5天和10天的變化圖，其中，n＝3。

圖5是高溫、高濕和強(qiáng)光條件下，納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的粒度分別在0天、5天和10天的變化圖，其中，n＝3。

圖6是高溫、高濕和強(qiáng)光條件下，納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的黏度分別在0天、5天和10天的變化圖，其中，n＝3。

圖7是高溫、高濕和強(qiáng)光條件下，納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的ph分別在0天、5天和10天的變化圖，其中，n＝3。

圖8是在uva和uvb照射條件下，res、parsol5000、parsol1789、parsolmcx原料藥的含量分別在0h、1h、2h和3h天的變化圖，其中，n＝3。

圖9是在uva和uvb照射條件下，防曬乳液中res、parsol5000、parsol1789、parsolmcx的含量分別在0h、1h、2h和3h天的變化圖，其中，n＝3。

圖10是在uva和uvb照射條件下，納米脂質(zhì)載體防曬凝膠中res、parsol5000、parsol1789、parsolmcx的含量分別在0h、1h、2h和3h天的變化圖，其中，n＝3。

具體實(shí)施方式

一種納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的處方如下：0.1g羧甲基纖維素鈉、0.3g透明質(zhì)酸鈉、1mlneolonetmmxp、8ml甘油、12.5g乳木果酯、2.5golivem1000、1.5golivem800、0.5g維生素e、0.1g紅沒藥醇、1gparsol5000、2gparsol1789、5gparsolmcx、1g白藜蘆醇、2.5g辛癸酸甘油酯、0.2g尿囊素、0.1gedta-2na、去離子水61.7g。

上述納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的制備方法如下：稱取處方量的羧甲纖維素鈉、透明質(zhì)酸鈉、neolonetmmxp，用甘油分散均勻，加入去離子水，于磁力攪拌器上快速攪拌，充分溶脹，制成凝膠基質(zhì)；再將處方量的乳木果酯、olivem1000、olivem800、維生素e、紅沒藥醇共同置于80℃水浴，加熱融化后加入parsol5000、parsol1789、parsolmcx，待溫度降至50℃，加入白藜蘆醇與辛癸酸甘油酯的分散液，制成油相；稱取處方量尿囊素、edta-2na，加入去離子水，于水浴中80℃加熱至溶解，制成水相；將水相和油相分別于75℃油浴、2000r/min中剪切5min，同時(shí)將油相以穩(wěn)定的流速緩緩加至水相，2000r/min剪切5min，并于180w的功率下超聲10min，得納米脂質(zhì)載體分散液(nlc)；將nlc分散液室溫放置至40℃，加入凝膠基質(zhì)中，邊加邊攪拌至均勻，得納米脂質(zhì)載體凝膠(nlc-gel)。

納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的處方優(yōu)化及其質(zhì)量評(píng)價(jià)

1目的：確定最適宜的制備方案以及其質(zhì)量評(píng)價(jià)

2研究方法：

2.1納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的表征

稱取適量的nlc-gel，用去離子水稀釋，渦旋振蕩，使其分散均勻，用納米粒度及zeta電位分析儀測(cè)定nlc-gel的粒徑和電位。

2.2包封率測(cè)定

采用凝膠柱sephadexg-25，以去離子水作為洗脫劑分離納米粒于游離藥物，出現(xiàn)藍(lán)色乳光后開始收集，16ml后乳光消失，精密量取收集液5ml，用甲醇破乳，hplc-pda法測(cè)定破乳后的含量，以破乳后含量占總量的百分比為包封率。

包封率＝(包裹的藥物量/藥物總量)×100％

2.3uvb防護(hù)作用的評(píng)價(jià)

根據(jù)qb/t2410-1998，采用紫外吸光度法評(píng)價(jià)防曬化妝品的uvb防曬效果。將醫(yī)用膠帶剪成1㎝×4㎝的長方形，將粘貼面貼在石英池透光一側(cè)的表面上。紫外預(yù)熱后，設(shè)定檢測(cè)波長：280nm、290nm、300nm、310nm、320nm。精密稱取(8±0.2)㎎，帶上醫(yī)用乳膠指套后，將樣品涂敷均勻，稱5個(gè)平行樣品。室溫放置30min后，將待測(cè)樣品置于樣品光路中，另一貼有膠帶的石英池置于參比光路中。測(cè)定280nm、290nm、300nm、310nm、320nm五個(gè)波長的ai，將測(cè)定值求算術(shù)平均值依次測(cè)定五個(gè)平行樣品，將求算術(shù)平均值，即為樣品的紫外吸光度

2.4處方優(yōu)化

以吸光度值為指標(biāo)，通過單因素試驗(yàn)，考察辛葵酸甘油酯與乳木果酯投料比、白藜蘆醇投藥量、乳化劑用量、剪切速度、超聲功率、剪切時(shí)間、超聲時(shí)間對(duì)指標(biāo)的影響，篩選出試驗(yàn)的顯著性因素。基于jmp軟件中的定制設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方法，優(yōu)化參數(shù)。事先考察因素間的交互作用，以便在使用定制設(shè)計(jì)試驗(yàn)時(shí)，減少添加因子，以達(dá)到減少次數(shù)的效果。以吸光度值和4種有效成分的包封率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選最適宜處方組成和制備工藝。

2.5質(zhì)量評(píng)價(jià)

2.5.1外觀

2.5.2含量測(cè)定

將納米脂質(zhì)載體凝膠分散于去離子水中，用甲醇破乳，hplc法檢測(cè)含量。

2.5.2ph的測(cè)定稱取適量nlc-gel，去離子水稀釋，渦旋振蕩，使其分散均勻，用精密ph計(jì)測(cè)定，儀器用ph4.0和ph6.86的磷酸緩沖鹽校正。

2.5.3黏度的測(cè)定

調(diào)節(jié)兩個(gè)水平調(diào)節(jié)腳，直至粘度計(jì)頂部的水泡在中央位置。稱取適量nlc-gel，旋動(dòng)升降架旋鈕，使粘度計(jì)緩慢的下降，轉(zhuǎn)子逐漸浸入被測(cè)液體當(dāng)中，直至轉(zhuǎn)子上的標(biāo)記與液面相平為止。下“測(cè)量”鍵，步進(jìn)電機(jī)開始旋轉(zhuǎn)，適當(dāng)時(shí)間(讀數(shù)大致穩(wěn)定)后即可同時(shí)測(cè)得當(dāng)前轉(zhuǎn)子、該轉(zhuǎn)速下的粘度值和百分計(jì)標(biāo)度。

：相對(duì)黏度；k：系數(shù)(k＝1000)m：測(cè)定馬達(dá)轉(zhuǎn)動(dòng)產(chǎn)生的扭矩；ω：角速度(ω＝6r/min)轉(zhuǎn)子號(hào)：1號(hào)

2.5.4儲(chǔ)藏穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

依據(jù)2015版《中國藥典》四部通則《原料藥物與制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則》對(duì)納米脂質(zhì)防曬凝膠的穩(wěn)定性進(jìn)行試驗(yàn)研究。

2.5.6紫外穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

稱取適量的納米脂質(zhì)載體防曬凝膠于稱量瓶中，將石英板蓋在瓶口上，距光源垂直距離20㎝，經(jīng)照度計(jì)測(cè)量uva及uvb強(qiáng)度分別為280.0μw/cm²±28μw/cm²及172μw/cm²±17.2μw/cm²，并分別于1h、2h、3h取樣，hplc法測(cè)其含量，觀察不同照射時(shí)間下含量的變化。同時(shí)，以原料藥和自制防曬乳作為兩種對(duì)照，試驗(yàn)方法同上。自制防曬乳的油脂中只含液體油脂(辛癸酸甘油酯)，即未與固體油脂(乳木果酯)形成具有骨架結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)載體，其處方量和制備工藝均等同于納米脂質(zhì)載體防曬凝膠。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

3.1納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的表征

納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的平均粒徑為184.8nm，zeta電位為-51.57mv。結(jié)果見圖1、圖2。

3.2包封率

納米脂質(zhì)載體防曬凝膠中的白藜蘆醇、parasol5000、parasol1789、parasolmcx的包封率分別為33.36％±2.25、62.58％±3.02、61.13％±2.78、55.18％±1.03。結(jié)果提示本專利設(shè)計(jì)的納米脂質(zhì)載體凝膠在含多種有效成分的前提下具有較高的包封率。

3.3uvb防護(hù)作用的評(píng)價(jià)

納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的吸光度為2.358±0.070，據(jù)qb/t2410-1998中uvb防護(hù)評(píng)價(jià)方法,提示本專利設(shè)計(jì)的納米脂質(zhì)載體防曬凝膠具有完全防護(hù)紫外線照射的效果。

3.4處方優(yōu)化結(jié)果

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，影響吸光度值的顯著性因素為白藜蘆醇投藥量(a)、剪切時(shí)間(b)、超聲時(shí)間(c)。根據(jù)定制設(shè)計(jì)原理，各因素設(shè)置3水平(a1、a2、a3分別為0.05g、0.25g、1g，b1、b2、b3分別為5min、10min、20min，c1、c2、c3分別為1min、5min、10min)。交互作用的考察結(jié)果提示白藜蘆醇用量與剪切時(shí)間之間沒有交互作用，剪切時(shí)間與超聲時(shí)間有明顯的交互作用，白藜蘆醇使用量與超聲時(shí)間有可能存在交互作用。添加因子a、b、c、a×c、b×c，添加效應(yīng)吸光度值和4種有效成分的包封率，運(yùn)用jmp定制設(shè)計(jì)出15組試驗(yàn)，將所得數(shù)據(jù)錄入分析，以最小二乘法進(jìn)行模型擬合，通過預(yù)測(cè)刻畫器的得出最優(yōu)處方為a1b1c3，結(jié)果見圖3。

在運(yùn)用jmp設(shè)計(jì)并分析預(yù)測(cè)的基礎(chǔ)上，將所得數(shù)據(jù)輸入spss中，采用單變量線性模型分析，以各指標(biāo)為因變量，因素a、b、c、a×c、b×c為固定因子，檢驗(yàn)主體間的效應(yīng)，采用tukeyhsd法進(jìn)行兩兩比較的方差齊性檢驗(yàn)。結(jié)果提示：在單因素方差分析主體間效應(yīng)的檢驗(yàn)結(jié)果中所構(gòu)建的總體模型f統(tǒng)計(jì)量依次為(按照吸光度、白藜蘆醇、parsol5000、parsol1789、parsolmcx的順序)：5.571、765.169、6.271、38.268、45.329，所對(duì)應(yīng)的p值幾乎為0，可以認(rèn)為總體擬合的線性效果非常好。

對(duì)于指標(biāo)吸光度，因素a、b、a×c、b×c對(duì)吸光度的影響都非常顯著，因素c對(duì)吸光度值無顯著性差異。而進(jìn)一步的兩兩比較結(jié)果表明，a1與a3的之間的均值差值最大，b3與b1的之間的均值差值最大，c2與c1之間的均值差值最大。因此，對(duì)于指標(biāo)吸光度，最優(yōu)的組合應(yīng)為a1b3c2。

對(duì)于指標(biāo)白藜蘆醇包封率，a、b、c、a×c、b×c對(duì)白藜蘆醇包封率的影響都非常顯著。而進(jìn)一步的兩兩比較結(jié)果表明，a3與a1的之間的均值差值最大，剪切時(shí)間為b1與b2的之間的均值差值最大，超聲時(shí)間為c2與c1的之間的均值差值最大。因此，對(duì)于指標(biāo)白藜蘆醇的包封率，最優(yōu)的組合應(yīng)為a3b1c2。

對(duì)于指標(biāo)parsol5000的包封率，因素a、c、a×c、b×c對(duì)parsol5000的包封率影響都非常顯著，因素b對(duì)parsol5000的包封率沒有顯著性影響。而進(jìn)一步的兩兩比較結(jié)果表明，a1與a3的之間的均值差值最大，剪切時(shí)間為b3與b2的之間的均值差值最大，超聲時(shí)間為c3與c1的之間的均值差值最大。因此，對(duì)于指標(biāo)parsol5000的包封率，最優(yōu)的組合應(yīng)為a1b3c3。

對(duì)于指標(biāo)parsol1789的包封率，因素a、c、a×c、b×c對(duì)parsol1789的包封率影響都非常顯著，因素b對(duì)parsol1789的包封率沒有顯著性影響。而進(jìn)一步的兩兩比較結(jié)果表明，a1為％與a3的之間的均值差值最大，剪切時(shí)間為b1與b3的之間的均值差值最大，超聲時(shí)間為c3與c1的之間的均值差值最大。因此，對(duì)于指標(biāo)parsol1789的包封率，最優(yōu)的組合應(yīng)為a1b1c3。

對(duì)于指標(biāo)parsolmcx的包封率，因素a、b、c、a×c、b×c對(duì)parsolmcx的包封率影響都非常顯著。而進(jìn)一步的兩兩比較結(jié)果表明，a1與a3的之間的均值差值最大，剪切時(shí)間為b1與b3的之間的均值差值最大，超聲時(shí)間為c3與c1的之間的均值差值最大。因此，對(duì)于指標(biāo)parsolmcx的包封率，最優(yōu)的組合應(yīng)為a1b1c3。

綜上所述，最優(yōu)組合應(yīng)為a1b1c3。即白藜蘆醇投藥量為1g，剪切時(shí)間為5min，超聲時(shí)間為10min。與預(yù)測(cè)刻畫器的結(jié)果一致。所測(cè)得的吸光度值為2.358±0.070，據(jù)qb/t2410-1998中uvb防護(hù)評(píng)價(jià)方法,表明該nlc-gel具有完全防護(hù)紫外線照射的效果。白藜蘆醇、parasol5000、parasol1789、parasolmcx的包封率分別為33.36％±2.25、62.58％±3.02、61.13％±2.78、55.18％±1.03。進(jìn)一步的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果提示，其形狀、含量、粒度、黏度、ph能在高溫、高濕及強(qiáng)光條件下保持穩(wěn)定。

3.5質(zhì)量評(píng)價(jià)

3.5.1外觀

本專利設(shè)計(jì)的納米脂質(zhì)載體防曬凝膠為乳白色膠狀，均勻細(xì)膩，無分層現(xiàn)象，不干涸或液化，涂展性良好。

3.5.2含量測(cè)定

納米脂質(zhì)載體防曬凝膠中的白藜蘆醇、parasol5000、parasol1789、parasolmcx的含量101.38％±1.36、102.98％±0.89、99.67％±1.31、95.25％±0.07。

3.5.2ph的測(cè)定

納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的平均ph值為6.31±0.08。根據(jù)qb/t-2286-1997，潤膚乳液的ph值限量范圍為4.5～8.5。結(jié)果提示本專利設(shè)計(jì)的納米脂質(zhì)載體凝膠的ph值符合潤膚乳液的理化指標(biāo)。

3.5.3黏度的測(cè)定

測(cè)量結(jié)果顯示納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的黏度在15～20pa·s之間。3.5.4儲(chǔ)藏穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

儲(chǔ)藏穩(wěn)定性結(jié)構(gòu)見圖4～圖7。結(jié)果顯示，在影響因素試驗(yàn)條件下，納米脂質(zhì)載體防曬凝膠的含量、黏度、粒度、ph均未出現(xiàn)顯著性差異，其形狀也未發(fā)生改變。提示本專利設(shè)計(jì)的納米脂質(zhì)載體防曬凝膠穩(wěn)定性良好。

3.5.5紫外穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

結(jié)果顯示，原料藥經(jīng)過uva照射后1h，res、parsol5000、parsol1789、parsolmcx的含量均有顯著性降低，經(jīng)過uvb1h射后，res、parsol5000、parsolmcx的含量均有顯著性降低，而parsol1789的含量未見變化。這是因?yàn)閞es在uva和uvb的320～360nm和280～320nm波段均有吸收；parsol5000和parsolmcx雖是強(qiáng)效uvb吸收劑，但其分別在uva的320～350nm和320～360nm均有不同程度的吸收；而parsol1789是uva吸收劑，在uvb波段沒有吸收，因此含量沒有顯著性變化,結(jié)果見圖8。

防曬乳液經(jīng)過uva照射2h后，res和parsol1789、的含量均有顯著性降低，經(jīng)過uvb射2h后，res的含量有顯著性降低，uvb照射3h后，res、parsol5000、parsolmcx的含量均有顯著性降低，而parsol1789的含量沒有顯著性變化。結(jié)果提示基質(zhì)能夠防止白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑產(chǎn)生光降解，但結(jié)果見圖9。

納米脂質(zhì)防曬凝膠經(jīng)過uva照射3h后，res、parsol5000和parsolmcx的含量均未見顯著性變化，僅parsol178的含量在照射3h后降低了2.0％；經(jīng)uvb照射后，parsol5000、parsol1789、parsolmcx的含量均未發(fā)生顯著性變化，而res的含量降低了3.9％。表明納米脂質(zhì)載體防曬凝膠中的白藜蘆醇和有機(jī)防曬劑能在uva和uvb的照射2h內(nèi)穩(wěn)定，不發(fā)生光降解。結(jié)果提示，與原料藥和防曬乳液的紫外線穩(wěn)定性評(píng)價(jià)結(jié)果相比，該制劑能顯著提高res和有機(jī)防曬劑的光穩(wěn)定性,結(jié)果見圖10。

4結(jié)論：

處方優(yōu)化結(jié)果表明，白藜蘆醇用量為1％，剪切時(shí)間為5min，超聲時(shí)間為10min時(shí)，所測(cè)得的吸光度值為2.358±0.070，表明該納米脂質(zhì)載體防曬凝膠具有完全防護(hù)紫外線照射的效果。res、parsol5000、parsol1789、parsolmcx的包封率分別為33.36％±2.25、62.58％±3.02、61.13％±2.78、55.18％±1.03。儲(chǔ)藏穩(wěn)定性結(jié)果提示該制劑穩(wěn)定，便于儲(chǔ)存；紫外穩(wěn)定性結(jié)果提示本專利設(shè)計(jì)的納米脂質(zhì)載體防曬凝膠能夠有效提高res、parsol5000、parsol1789和parsolmcx的光穩(wěn)定性，具有一定的市場前景。