本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，尤其涉及一種抗菌肽在制備抗痤瘡丙酸桿菌藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、痤瘡是一種常見的皮膚問題，尤其好發(fā)于青少年和年輕人。它不僅影響患者的外貌美觀，還可能導致心理問題，如自卑、焦慮和抑郁等。因此，研究有效的痤瘡治療方法，可以顯著改善患者的生活質(zhì)量，增強自信心和社交能力。痤瘡丙酸桿菌是一種親油脂、厭氧的細菌，它在毛囊內(nèi)的大量繁殖是痤瘡發(fā)病的關(guān)鍵因素之一。當毛囊口堵塞、油脂增多時，痤瘡丙酸桿菌就會迅速繁殖，并分解皮脂中的甘油三酯，產(chǎn)生游離脂肪酸。這些游離脂肪酸具有強烈的刺激性，能夠刺激毛囊壁及其周圍組織發(fā)生炎癥反應(yīng)，導致痤瘡的形成。市場中常用的治療藥物包括抗生素、異維a酸等，克林霉素能夠迅速減輕痤瘡癥狀，但停藥后容易復發(fā)，且長期使用容易產(chǎn)生耐藥性，導致療效下降；異維a酸在輕重度痤瘡中有好的治療效果，長期使用也會引起一系列的不良反應(yīng)，如皮膚黏膜的干燥炎癥、肝腎負擔、骨骼肌肉影響、神經(jīng)精神改變和生殖系統(tǒng)影響等。因此，有必要開發(fā)一類新型的抗痤瘡藥物。

2、多肽gky25(kasetty,gopinath,et?al.)在人傷口中被鑒定，一種凝血酶的c-末端宿主防御肽。該肽表現(xiàn)出對革蘭氏陰性細菌大腸桿菌和銅綠假單胞菌、革蘭氏陽性細菌金黃色葡萄球菌和真菌白色念珠菌的抗微生物活性。該肽引起銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌細胞膜的局部擾動和斷裂，減輕小鼠模型中炎癥因子表達，可能涉及與lps的結(jié)合和中和，產(chǎn)生后續(xù)toll樣受體信號傳導的抑制，或包括與cd14、tlrs或細胞內(nèi)受體的相互作用，達到減輕炎癥的效果。

3、本技術(shù)人在多肽數(shù)據(jù)庫中篩選具有抗痤瘡丙酸桿菌的候選多肽中意外發(fā)現(xiàn)，該已知多肽gky25對導致痤瘡的痤瘡丙酸桿菌有顯著的抑制和抗菌作用，可以作為新型的抗痤瘡藥物候選藥物。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，提供一種抗菌肽在制備抗痤瘡丙酸桿菌藥物中的應(yīng)用。該抗菌肽為已知多肽gky25，其對痤瘡丙酸桿菌具有較強的殺菌能力，拓展了多肽gky25的新用途。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明的第一目的是提供一種抗菌肽在制備抗痤瘡丙酸桿菌藥物中的應(yīng)用，所述抗菌肽具體為如下a1)或a2)或a3)：

4、a1)氨基酸序列如seq?id?no.1所示；

5、a2)在a1)的n端或/和c端連接標簽得到的融合蛋白質(zhì)；

6、a3)為seq?id?no.1的氨基酸序列經(jīng)過取代和/或缺失和/或添加若干氨基酸殘基后得到的與seq?id?no.1同一性在90％或以上，且與a1具有相同功能的多肽。

7、為了使a1)中的多肽便于純化，可在由序列表中seq?id?no.1所示的氨基酸序列組成的多肽的氨基末端或羧基末端連接上如下表所示的標簽：poly-arg(rrrrr)、poly-his(hhhhhh)、flag(dykdddk)。

8、進一步的，所述痤瘡丙酸桿菌包括尋常痤瘡丙酸桿菌和耐藥痤瘡丙酸桿菌，所述尋常痤瘡丙酸桿菌為atcc?11827，所述耐藥痤瘡丙酸桿菌為克林霉素或紅霉素的耐藥菌種。

9、進一步的，所述抗菌肽對atcc?11827的最小抑菌濃度為16μg/ml。

10、進一步的，所述抗菌肽對所述耐藥痤瘡丙酸桿菌的最小抑菌濃度為128μg/ml。

11、進一步的，所述抗菌肽能夠抑制痤瘡丙酸桿菌生物膜的活力和脂肪酶的產(chǎn)生。

12、本發(fā)明的第二目的是提供上述的抗菌肽相關(guān)的生物材料在制備抗痤瘡丙酸桿菌藥物中的應(yīng)用，所述生物材料為下述b1)至b6)中的任一種：

13、b1)編碼權(quán)利要求1所述抗菌肽的核酸分子；

14、b2)含有b1)所述核酸分子的表達盒；

15、b3)含有b1)所述核酸分子的重組載體；

16、b4)含有b1)所述核酸分子的重組微生物；

17、b5)含有b2)所述表達盒的重組微生物；

18、b6)含有b3)所述重組載體的重組微生物。

19、進一步的，所述核酸分子為如下1)或2)：

20、1)編碼序列是序列表中seq?id?no.2的dna分子；

21、2)序列表中seq?id?no.2所示的dna分子。

22、進一步的，所述痤瘡丙酸桿菌包括尋常痤瘡丙酸桿菌和耐藥痤瘡丙酸桿菌，所述尋常痤瘡丙酸桿菌為atcc?11827，所述耐藥痤瘡丙酸桿菌為克林霉素或紅霉素的耐藥菌種。

23、本發(fā)明的第三目的是提供包含氨基酸序列如seq?id?no.1所示的抗菌肽或其藥學上可接受的鹽的藥物組合物在制備抗痤瘡丙酸桿菌藥物中的應(yīng)用。

24、進一步的，所述的抗菌肽為唯一有效活性成分。

25、本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選局部給藥，特別用于治療皮膚，可以是軟膏、乳膏、乳劑、香膏劑、粉末、凝膠、噴霧劑、洗液或混懸液形式。也可以是控釋的微球或納米球或者類脂或聚合物囊泡的混懸液、或聚合物貼片和水凝膠的形式。這種局部應(yīng)用的組合物可以是無水形式、含水形式或乳液形式。

26、該藥物組合物可以是含有羥丙甲纖維素和丙二醇的成分的水凝膠。

27、在本發(fā)明中所用的術(shù)語“同一性”是同一性是指氨基酸序列或核苷酸序列的同一性。可使用國際互聯(lián)網(wǎng)上的同源性檢索站點測定氨基酸序列的同一性，如ncbi主頁網(wǎng)站的blast網(wǎng)頁。例如，可在高級blast2.1中，通過使用blastp作為程序，將expect值設(shè)置為10，將所有filter設(shè)置為off，使用blosum62作為matrix，將gap?existence?cost，per?residuegap?cost和lambda?ratio分別設(shè)置為11，1和0.85(缺省值)并進行檢索一對氨基酸序列的同一性進行計算，然后即可獲得同一性的值(％)。

28、在本發(fā)明中所用的術(shù)語“具有相同功能的多肽”與本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)理解的含義相同或相似，均是指某一片段的氨基酸序列是完整蛋白或多肽的氨基酸序列的一部分，具備與完整蛋白或多肽相同或相似的功能或活性。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，在多肽的某些區(qū)域，例如非重要區(qū)域改變少數(shù)氨基酸殘基基本上不會改變生物活性，例如，適當替換某些氨基酸得到的序列并不會影響其活性(可參見watson等，molecular?biologyof?thegene，第四版，1987，the?benjamin/cummings?pub.co.p224)。因此，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠?qū)嵤┻@種替換并且確保所得分子仍具有所需生物活性。

29、在本發(fā)明中所用的術(shù)語“尋常痤瘡丙酸桿菌”意指痤瘡丙酸桿菌與尋常痤瘡相關(guān)。

30、在本發(fā)明中所用的術(shù)語“耐藥痤瘡丙酸桿菌”意指痤瘡丙酸桿菌針對某些抗生素耐藥。本發(fā)明中的耐藥性是耐紅霉素和耐克林霉素。

31、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

32、本發(fā)明提供了一種抗菌肽在制備抗痤瘡丙酸桿菌藥物中的應(yīng)用，該抗菌肽為已知多肽gky25，該多肽對導致痤瘡的痤瘡丙酸桿菌有顯著的抑制和抗菌作用，為痤瘡的臨床治療提供一種新的先導候選分子。