專利名稱：治療核苷的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有不飽和碳環(huán)代替糖基的嘌呤核苷類似物，它的藥理學(xué)上可以接受的衍生物及其在醫(yī)療上的應(yīng)用，尤其是用于治療某些病毒性感染。
AIDS(獲得性免疫缺乏綜合癥)是一種使患者易受致死性偶然感染的免疫抑制性或免疫破壞性疾病。其特點是，AIDS與T-細胞的，尤其是攜帶OKT4表面標記的輔助誘發(fā)物亞群的進行性衰竭相聯(lián)系。
從AIDS患者或時常有先于AIDS癥狀的患者體內(nèi)，可再生地分離出了人類免疫缺乏病毒(HIV)。HIV是細胞病毒，似乎優(yōu)先感染并破壞帶有OKT4標記的T-細胞，現(xiàn)在普遍認為HIV是AIDS的病原物。
自從發(fā)現(xiàn)HIV是AIDS的病原物，已經(jīng)提出過許多可能對治療AIDS患者有效的抗-HIV化學(xué)治療劑。例如，美國專利4，724，232公開了3′-疊氮基-3′-脫氧胸苷(它具有已被審定的名稱疊氮胸苷)，它的藥理學(xué)上可接受的衍生物及其在治療人類逆病毒感染，它包括AIDS及有關(guān)的臨床病癥。Vin等(Antiviral Research，9(1/2)，120(1988))公開了一些碳環(huán)核苷類似物及其抗HIV的作用。在第二屆抗病毒研究國際會議上(VA，1988年4月10-14日)，Willia-msburg公開了(±)-9-(順-4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯基)鳥嘌呤(NSC-614846)，它也被稱作Carbovir。
在世界范圍內(nèi)，乙型肝炎病毒(HBV)是另一個能產(chǎn)生嚴重后果的病毒病原體。它在亞洲國家最為普遍，并在非洲亞撒哈拉地區(qū)流行。從病原學(xué)上來講，這種病毒與原發(fā)性肝細胞癌有關(guān)。
據(jù)估計美國現(xiàn)有50萬至1百萬的傳染性攜帶者人群。25%以上的攜帶者會發(fā)展成慢性活動性肝炎，而且常發(fā)展為肝硬化。據(jù)估計，在美國每年有5千人死于與HBV有關(guān)的肝硬化，而且，可能有1千人是死于與HBV有關(guān)的肝癌。即使有了通用的HBV疫苗，對抗-HBV有效化合物的需求也仍然存在。據(jù)估計，世界上有2億個持久性感染攜帶者，這一龐大的寄主群將不能從接種疫苗中獲益，并繼續(xù)處于發(fā)生HBV誘發(fā)的肝病的高危狀態(tài)。該攜帶者群體作為易受感染個體的感染源，使這種疾病的影響永久存在，尤其是在疾病的流行地區(qū)或高危人群中，如IV藥物濫用者和同性戀者。因此，對于控制慢性感染和減少發(fā)展成肝細胞癌二者來說，都亟需有效的抗病毒制劑。
感染HBV病毒的臨床表現(xiàn)有頭痛、發(fā)燒、不適、惡心、嘔吐、厭食和腹痛。病毒的復(fù)制通常會受到免疫響應(yīng)的控制，對于人類，有一個持續(xù)數(shù)周或數(shù)月的復(fù)原過程。但是，感染可能更為嚴重，會導(dǎo)致如上所述的持久的慢性肝病。
歐洲專利說明書No.349242中公開了一些6-取代嘌呤碳環(huán)核苷及其在醫(yī)療方面的應(yīng)用，尤其是在治療HIV和HBV感染方面的用途。這類核苷中有(±)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇和(±)-順-4-〔2-氨基-6-環(huán)丙基甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇這兩種化合物，即，每一種化合物都以它的相關(guān)對映體的外消旋混合物形式存在。
現(xiàn)在，我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，上面提及的兩種化合物分離的單個對映體及其藥用衍生物具有有益的抗病毒活性，尤其是抗HIV和HBV感染，并具有低細胞毒性和/或用它作為制備具有這種活性的化合物的中間體。
根據(jù)本發(fā)明的一個特征，提供了具有下列通式的對映體化合物
(其中，R表示環(huán)丙氨基或N-環(huán)丙基-N-甲氨基基團，而A表示(1S，4R)或(1R，4S)構(gòu)型的2-環(huán)戊烯-1-甲醇-4-基)及其衍生物(如酯，鹽和酯的鹽)，所述化合物及其衍生物是以基本上不含(例如，低于10%(W/W)，低于5%(W/W)更好)相應(yīng)對映體的一種對映體形式存在。
應(yīng)理解，式(Ⅰ)化合物包括具有下列構(gòu)型的化合物
(這里R是如前面所定義的基團)。
式(Ⅰ)的對映體化合物，即基本上不含相應(yīng)對映體，包括1)(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇;
2)(1R，4S)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇;
3)(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(N-環(huán)丙基-N-甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇;
4)(1R，4S)-順-4-〔2-氨基-6-(N-環(huán)丙基-N-甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇。
上述化合物1)和3)，以下被稱作式(Ⅰ)的(1S，4R)對映體化合物，具有負(-)旋光性，發(fā)現(xiàn)它具有抗HIV和HBV感染的特別有效的活性，而且，這些化合物及其藥理學(xué)上可接受的衍生物代表了本發(fā)明的優(yōu)選實施方案。該化合物還具有另外的優(yōu)點使用后，能夠透過血-腦障礙，為中樞神經(jīng)系統(tǒng)提供高含量的該化合物或它的活性代謝物，特別使HIV感染現(xiàn)象減弱?？紤]到它的抗HIV和HBV感染的異常有效的活性，特別優(yōu)選的是上述化合物1)。還發(fā)現(xiàn)，該化合物對骨髓原細胞的毒性明顯比上述3′-疊氮-3′-脫氧胸苷(疊氮胸苷)的低。
我們還發(fā)現(xiàn)上述化合物2)和4)的磷酸酯衍生物，以下稱作式(Ⅰ)的(1R，4S)對映體化合物，具有正(+)旋光性，并有抗病毒感染的有效活性，如上所述。因此，這些磷酸酯衍生物代表本發(fā)明另一個優(yōu)選實施方案。
式(Ⅰ)的(1R，4S)對映體化合物的“磷酸酯衍生物”在這里是指那些磷酸基團與式(Ⅰ)的1-甲醇基團相連的衍生物，包括一磷酸、二磷酸和三磷酸酯衍生物。
式(Ⅰ)的母體(1R，4S)對映體化合物及其非磷酸酯衍生物，可用作制備上述磷酸酯衍生物的中間體。
上述式(Ⅰ)的(1S，4R)對映體化合物及其藥理學(xué)上可接受的衍生物，以及式(Ⅰ)的(1R，4S)對映體化合物的磷酸酯衍生物以下被稱作本發(fā)明的抗病毒化合物。
根據(jù)本發(fā)明的其它特征，我們還提供了a)用于醫(yī)療，尤其是用于治療或預(yù)防逆病毒感染或乙肝病毒感染的本發(fā)明的抗病毒化合物;
b)一種治療或預(yù)防逆病毒和乙肝病毒對發(fā)病體，例如哺乳動物如人感染的方法，包括用治療學(xué)上有效量的本發(fā)明的抗病毒化合物處理發(fā)病體;以及c)本發(fā)明抗病毒化合物在生產(chǎn)用于治療或預(yù)防上述任何感染或癥狀的藥劑方面的用途。
能用本發(fā)明方法治療和預(yù)防的逆病毒感染的例子，包括人的逆病毒感染，如人類免疫缺乏病毒(HIV)、HIV-1、HIV-2和人的T-細胞親淋巴病毒(HLTV)，例如HTLV-Ⅰ或HTLV-Ⅱ感染。本發(fā)明的抗病毒化合物對AIDS和有關(guān)的臨床癥狀，如與AIDS相關(guān)的綜合癥(ARC)、進行性全面淋巴結(jié)病(PGL)，與AIDS相關(guān)的神經(jīng)病，如多發(fā)性硬化或熱帶下身輕癱，以及抗-HIV抗體陽性和HIV陽性無癥狀病人，和血小板減少紫斑癥的治療特別有用。該化合物還可用于牛皮癬的治療和預(yù)防。
與式(Ⅰ)的(1S，4R)對映體化合物有關(guān)的“藥理學(xué)上可接受的衍生物”，是指式(Ⅰ)的(1S，4R)對映體化合物的任何藥理學(xué)上可接受的鹽、酯或酯的鹽，或其它任何在受體使用以后，能夠生成(直接地或間接地)這樣一種對映體化合物，或它的有抗病毒活性的代謝物或殘余物的化合物。
優(yōu)選的式(Ⅰ)的(1S，4R)對映體化合物的酯包括羧酸酯類，其中酯基的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基，例如正丙基、叔丁基、正丁基，烷氧基烷基(例如甲氧基甲基)，芳烷基(如芐基)，芳氧基烷基(如苯氧基甲基)，芳基(如，選擇性地被鹵素、C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基);磺酸酯類，如烷基-或芳烷基磺酰酯(例如，甲基磺酰酯);氨基酸酯類(例如，L-纈氨酰酯或異亮氨酰酯);以及一磷酸、二磷酸或三磷酸酯類。
式(Ⅰ)化合物的磷酸酯，可以通過C1-20醇或其活性衍生物進一步酯化，或通過2，3-二(C6-24)?；视?，如2，3-雙-(己酰氧基)丙基磷酸氫酯和2，3-雙-(十六酰氧基)丙基磷酸氫酯衍生物進一步酯化。除了這些進一步酯化的式(Ⅰ)化合物的磷酸酯衍生物之外，本發(fā)明還包括式(Ⅰ)的外消旋化合物的衍生物。
至于上述酯類，除非有其它說明，存在的任何烷基部分以含有1～18個碳原子為宜，尤其是含有1-4個碳原子更好。存在于這種酯上的任何芳基部分以包括一個苯基為宜。
式(Ⅰ)的(1S，4R)對映體化合物的藥理學(xué)上可接受的酸加成鹽，包括與合適的酸，例如有機羧酸，如乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、羥乙磺酸、乳糖酸和琥珀酸;有機磺酸，如甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸和對甲苯磺酸，和無機酸，如鹽酸、硫酸、磷酸、和硫酸鹽、甲磺酸鹽、氨基磺酸產(chǎn)生的一代鹽或二代鹽。特別優(yōu)選的是鹽酸鹽(即，一代和二代鹽酸鹽)。
本發(fā)明的上述抗病毒化合物可以與其它治療劑一起使用，用于治療上述感染和病癥。這類其他治療劑的例子包括對治療病毒感染或相關(guān)的病癥有效的藥劑，如3′-疊氮-3′-脫氧胸苷(疊氮胸苷)、2′，3′-二脫氧核苷，如2′，3′-二脫氧胞苷、2′，3′-二脫氧腺苷和2′，3′-二脫氧肌苷，無環(huán)核苷(例如，無環(huán)鳥苷)，干擾素，如α-干擾素，腎排泄抑制劑，如內(nèi)磺舒，核苷轉(zhuǎn)移抑制劑，如潘生丁、克冠二氮
、邁阿氟嗪、利多氟嗪或索羅氟嗪、或克冠二胺，免疫調(diào)節(jié)劑，如白細胞間素Ⅱ和粒性白細胞巨噬細胞刺激因子，可溶的CD4或它的遺傳工程衍生物，以及膦?；姿?。這種綜合治療的化合物組分可以以單個制劑或混合制劑的形式同時使用，或者在不同時間，例如順續(xù)地使用，以取得綜合效果。
本發(fā)明的抗病毒化合物在此處還被稱作活性成份，可采用任何適當途徑在治療時使用，包括口服、直腸使用、鼻吸、局部使用(包括在面頰和舌下使用)，陰道和非經(jīng)腸道使用(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈和真皮內(nèi)的)?？梢灾纼?yōu)選的使用途徑是隨著受治療者的病情和年齡、感染的性質(zhì)及選擇的活性成分而改變的。
一般，上述每種情況(例如AIDS)的合適劑量是在每天每公斤受體(例如人)體重使用3.0～120毫克范圍內(nèi)，在每天每公斤體重6～90毫克范圍內(nèi)更好，在每天每公斤體重15-60毫克范圍內(nèi)最好。最好將需要的劑量再分成2、3、4、5、6或更多的次分劑量，在一天中以適當?shù)拈g隔使用。這些次分劑量可以單位劑量的形式使用，例如，每單位劑量形式含活性成份10～1500毫克，20～1000毫克更好，50～700毫克最好。理想地，活性成份的使用以能獲得活性化合物的峰血漿濃度在大約1～75μM范圍內(nèi)，在大約2～50μM范圍內(nèi)更好，在大約3～30μM范圍內(nèi)最好。這可以通過靜脈注射0.1～5%的活性成份溶液(可選擇鹽水溶液)，或口服含有大約1～100毫克/公斤活性成份的大藥丸來實現(xiàn)?？梢酝ㄟ^連續(xù)輸液以提供每小時每公斤約0.01～5.0毫克活性成份或通過間歇輸液輸入每公斤含有約0.4～15毫克活性組分的液體來維持理想的血液含量。
盡管可以單獨使用活性成份，但最好將它制成藥物制劑形式。本發(fā)明的制劑包括至少一種上述活性成份，和至少一種藥理學(xué)上可接受的載體或賦形劑。制劑包括適于口服、直腸、鼻吸、局部(包括面頰和舌下)、陰道或非腸道(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈和真皮內(nèi))使用的制劑。這些制劑可很方便地制成單位劑量形式，并能用藥學(xué)領(lǐng)域任何熟知的方法制備。這些方法包括將活性成份同構(gòu)成一種或一種以上附屬成份的載體混合的步驟。一般，該配方通過將活性成份同液態(tài)載體或細碎的固體載體或二者均一而緊密的混合在一起來制備，然后，如果必要，使產(chǎn)品成型。
本發(fā)明用于口服的制劑可以制成分離的單位，如含有預(yù)定量的活性成份的膠囊劑和片劑;粉劑和顆粒劑;溶解在水溶液或非水液體里的溶液和懸浮液;水包油型乳狀液或油包水型乳狀液。還可將活性成份制成大藥丸、藥糖劑或軟膏。
片劑可以通過壓縮和模制生產(chǎn)，可有選擇地含有一種或一種以上的附加成份。壓縮的片劑可以通過在一臺合適的機器里壓縮自由流動形式的活性成份，如粉或顆粒來制備，并有選擇地同粘合劑(例如，聚烯吡酮、明膠、羥丙基甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如，羥基乙酸淀粉鈉、交聯(lián)的聚烯吡酮、交聯(lián)的羧基甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑混合。
通過在一臺合適的機器中模制用惰性液體稀釋劑濕潤的粉狀化合物的混合物，可生產(chǎn)出模制片劑。可以有選擇的將片劑包衣或刻痕并可以調(diào)配，以便使活性成份能緩慢地或有控制的釋放出來，例如，用不同比例的羥丙基甲基纖維素，能產(chǎn)生理想的釋放形式?？梢杂羞x擇地讓藥片具有腸涂層，以使其在腸子里部分釋放，而不是在胃里。
適于在口腔局部使用的制劑，包括由活性成份在香料基質(zhì)，通常為蔗糖和阿拉伯樹膠或黃蓍膠里組成的錠劑，由活性成份在惰性基質(zhì)，如明膠和甘油、或蔗糖和阿拉伯樹膠里組成的軟錠劑;以及由活性成份在適當?shù)囊后w載體里形成的嗽口劑。
適于直腸使用的制劑可制成具有合適基質(zhì)，包括如可可油或水楊酸鹽的栓劑。
適于陰道使用的制劑可制成除含有活性成份之外還含有本領(lǐng)域已知的合適載體的陰道藥栓、棉塞、乳膏、凝膠、軟膏、泡沫或噴霧劑。
適于非腸道使用的制劑，包括水的和非水的等滲滅菌注射溶液，它可以含有抗氧化劑、緩沖液、抑菌劑和使得制劑與預(yù)計的受體血液等滲的溶解物;和水的和非水的滅菌懸浮液，它可以含有懸浮劑和增稠劑。該制劑可制成單劑量或多劑量密封容器形式，例如，安瓿或管形瓶，并能在冷凍干燥(凍干)條件下保存，使用之前，只需馬上加入滅菌的液體載體，如注射用水。臨時的注射溶液和懸浮液，可以由前文所述的滅菌粉劑、顆粒劑和片劑制備。
優(yōu)選的單位劑量制劑，是如上文所述的那些含有供一天用的有效成份的劑量或單位，供一天用的次分劑量，或這種劑量的合適的分裝。
應(yīng)當理解，除了上面特別提到的那些成份以外，本發(fā)明制劑還包括本領(lǐng)域常見的其他劑，這涉及所述制劑的類型，例如，適于口服的那些制劑可進一步包括增甜劑、增稠劑和調(diào)味劑。
本發(fā)明還包括下列用于制備上述式(Ⅰ)的對映體化合物及其衍生物的方法。如下文所述，在本方法的反應(yīng)中用到的對映體原材料和它的前體都是以基本上不含(例如，純到上面在講述化合物(Ⅰ)時所說的那種程度)另外的對映體的一種對映體形式存在。本發(fā)明的方法包括A)用一種試劑或在一定條件下處理式(Ⅱ)的對映體化合物
(其中，A如上文所定義，而Z表示式(Ⅰ)中所定義的所述的R基團的前體基團)或它的衍生物以便將前體Z基團轉(zhuǎn)化為需要的R基團;或B)將式(Ⅲ)的對映體化合物
(其中，A和R如上文所定義，R2表示氫或甲酰基，而R3則表示氨基保護基團，例如，酰基，如C1-6鏈烷?；?，甲?；⒁阴；虍惗□；?或其衍生物與一種試劑起反應(yīng)，以生成在需要的式(Ⅰ)化合物上的咪唑環(huán)，隨后除去R3氨基保護基團;或C)將式(Ⅳ)的對映體化合物
(其中，A和R如上文所定義，R3是氨基保護基團，例如，上述與式(Ⅲ)有關(guān)的保護基)或它的衍生物與一種試劑起反應(yīng)，以便除去R3氨基保護基團，并有選擇地，以任何需要的順序進行下列轉(zhuǎn)化的一個或二個ⅰ)形成式(Ⅰ)化合物后，將該化合物轉(zhuǎn)化成它的衍生物;或ⅱ)形成式(Ⅰ)化合物的衍生物后，將其轉(zhuǎn)化成式(Ⅰ)的母體化合物或其他的衍生物。
方法A)可以用常規(guī)方法完成，例如，用一種合適的胺，即環(huán)丙胺或N-環(huán)丙基-N-甲胺，處理式(Ⅱ)化合物，其中，Z表示離去基團(例如，鹵基團，如氯基團)。最好引入過量的上述氨基R基團，最好在回流或高于50℃的溫度下，在有機溶劑，如甲醇或乙醇存在條件下反應(yīng)。
方法B)可以通過將式(Ⅲ)化合物與甲酸或甲酸的活性衍生物(例如，原甲酸三乙酯或乙酸二乙氧基甲酯)，并有選擇地用共溶劑，如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺，在高溫下最好在75-90℃起反應(yīng)來完成。通過加入1當量多一點的強無水酸，例如，每當量式(Ⅲ)化合物用1.1當量的乙基磺酸，該反應(yīng)就可以很方便地在較低溫度(例如25℃)下得以完成。
方法C)可以通過將式(Ⅳ)的對映體化合物與一種酸性劑，如稀的含水鹽酸起反應(yīng)來實現(xiàn)。
在方法A)中被用作原料的式(Ⅱ)化合物，可以用與方法B)類似的方法制備，即通過將式(Ⅴ)的相應(yīng)的對映體化合物
(其中，A、Z、R2和R3均如上文所定義)或它的衍生物與一種試劑起反應(yīng)，以形成所需要的式(Ⅱ)化合物中的咪唑環(huán)，并除去R3氨基保護基團?？梢圆捎蒙厦嬷v述方法B)的那些試劑或條件完成該反應(yīng)。
在方法B)中被用作原料的式(Ⅲ)化合物，可以通過與上述方法A)類似的方法，用一種試劑或在一定條件下處理式(Ⅴ)的對映體化合物，以便將前體基團Z轉(zhuǎn)化為需要的R基團來制備。
上文中提到的式(Ⅳ)化合物，可以通過將式(Ⅵ)的對映體化合物
(其中，A、Z和R3如上文所定義)與一種試劑或在一定條件下反應(yīng)，以便將前體基團Z轉(zhuǎn)化為需要的R基團來制備，即與方法A)所述方法類似。
上述式(Ⅵ)化合物，可以通過將式(Ⅴ)的對映體化合物與一種試劑起反應(yīng)，以便形成需要的式(Ⅵ)化合物中咪唑環(huán)。例如，用甲酸或甲酸的活性衍生物進行處理，如在上述方法B)中所述。
上述式(Ⅱ)、(Ⅲ)、(Ⅳ)、(Ⅴ)和(Ⅵ)的對映體化合物，尤其是其中的R2表示甲?；?或R3表示C1-6鏈烷?；?，特別是乙酰基或異丁?；?，和/或Z表示鹵基，如氯基團的那些化合物，是本發(fā)明的另外的特征。
用于制備(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇，即上述優(yōu)選的化合物1)的特別優(yōu)選的中間體包括a)(1R，4S)-順-N-〔6-(環(huán)丙氨基)-9-(4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基)-9H-嘌呤-2-基〕異丁酰胺;
b)(1R，4S)-順-N-〔4-氯-5-甲酰胺基-6-((4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基)氨基)-2-嘧啶基〕異丁酰胺;
c)(1R，4S)-順-N-〔4-氯-5-甲酰胺基-6-((4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基)氨基)-2-嘧啶基〕乙酰胺;
d)(1S，4R)-順-(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇;
e)(1R，4S)-順-N-〔6-氯-9-(4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基)-9H-嘌呤-2-基〕異丁酰胺。
如上所述，被用作原料的式(Ⅴ)的對映體化合物，可以通過將式(Ⅶ)化合物
(其中，Z、R2和R3如上文定義，而R4表示離去基團，例如，鹵基，象氯基團)或它的衍生物與式(ⅧA)或(ⅧB)的對映體化合物或它的衍生物起反應(yīng)來制備。
剛剛提到的反應(yīng)，最好在有堿，如叔胺，象三乙胺或三甲胺存在條件下，在有機溶劑，如二甲氧基乙烷或乙醇中進行。
具有合適對映體構(gòu)型的式(ⅧA)或(ⅧB)化合物，可以通過將相應(yīng)的外消旋化合物，即(±)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇與旋光活性羧酸(例如，聯(lián)苯甲酰-D-酒石酸)絡(luò)合，然后分級結(jié)晶所得非對映體鹽而獲得。另一方面，也可以采用在J.Med.Chem.，1987，30，746和J.Med.Chem.，1985，28，1385中所述的酶催化方法。
式(ⅧA)或(ⅧB)的對映體化合物或它的衍生物，尤其是它與旋光活性羧酸，如聯(lián)苯甲酰-D-酒石酸所形成的鹽，例如(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇和它的聯(lián)苯甲酰-D-酒石酸鹽，是本發(fā)明的又一個特點。
被用作上述原料的式(Ⅶ)化合物，可以用常規(guī)方法制備，例如，通過還原式(Ⅸ)化合物
(其中，Z，R3和R4如上文定義)以進行NO2基團向NH2基團的轉(zhuǎn)化，并有選擇地將所得NH2基團轉(zhuǎn)化為甲酰胺基，例如，通過用甲酸/乙酸酐處理。
可以用常規(guī)方法制備式(Ⅸ)化合物。例如，可以通過用磷酰氯鹵化相應(yīng)于式(Ⅹ)的化合物來制備這些化合物，其中Z表示鹵，如氯基團。
(其中，R3和R4如上文定義)。
式(Ⅹ)化合物也可以用常規(guī)方法制備，例如，通過將式(Ⅺ)化合物
(其中，R4如上文所定義)與一種合適的試劑反應(yīng)，以便引入氨基保護基團，例如，通過與合適的羧酸或它的功能等同物，如異丁酸酐起反應(yīng)。式(Ⅺ)化合物可以通過硝化相應(yīng)的式(Ⅻ)化合物來制備。
(其中，R4如上文所定義)。
式(Ⅶ)、(Ⅸ)、(Ⅹ)、和(Ⅺ)的化合物，尤其是其中的Z表示鹵基，如氯基團，和/或R3表示C1-6鏈烷?；?，特別是乙?；虍惗□；?，和/或R4表示鹵基，如氯基團的那些化合物，是本發(fā)明的另一些特點。
本發(fā)明特別優(yōu)選的式(Ⅶ)、(Ⅸ)和(Ⅹ)化合物包括N-(4，6-二氯-5-甲酰胺基-2-嘧啶基)異丁酰胺;
N-(4，6-二氯-5-硝基-2-嘧啶基)異丁酰胺;和
N-(4-氯-1，6-二氫-5-硝基-6-氧代-2-嘧啶基)異丁酰胺。
一般，式(Ⅰ)化合物通過與合適的酯化劑，例如?；u或酐起反應(yīng)，可轉(zhuǎn)化成它的酯。用常規(guī)方法，例如用合適的酸處理，可將式(Ⅰ)化合物，包括它的酯轉(zhuǎn)化成它的鹽。式(Ⅰ)化合物的酯或鹽也可以轉(zhuǎn)化成母體化合物，例如通過水解。
因此，可以通過用磷?；瘎?，例如磷酰氯處理母體制備式(Ⅰ)化合物的O-單磷酸酯，如M.Yoshikawa，T.Kato和T.Takenishi在Bulletin Chem.Soc.Japan，1969，42，3505中所述。通過K.H.Sheit，在“Nucleot-ide Analogs”(John Wiley and Sons，New York，1980，pp.211-215)一書中和D.E.Hoard和D.G.Ott.在J.Amer.Chem.Soc.(1965，87，1785)中所講述的方法，可制備出相應(yīng)的O-二磷酸酯和O-三磷酸酯。例如，通過制成相關(guān)的O-單磷酸酯的咪唑化衍生物，并通過將這種衍生物依次與磷酸酯起反應(yīng)生成O-二磷酸酯或與焦磷酸酯反應(yīng)生成O-三磷酸酯。為了制備上面提到的酯化磷酸酯衍生物，可以用合適的二-烷?；字Ｄ憠A衍生物在合適的磷脂酶，例如磷脂酶D存在的條件下處理式(Ⅰ)的母體化合物，如S.Shuto等在Nucleic Acid Research(1988，20，page 35)中所述;或者通過將式(Ⅰ)化合物與一種合適的磷?；瘎?，如磷酰氯起反應(yīng)，接著再用合適的醇處理，如A.Rosowsky和S.Kim在Nucleic Acid Chemistry，第3冊(編者L.B.Townsend & R.S.Tipson，JohnWiley & Sons，New York，1986，255)中所述。
式(Ⅰ)的對映體化合物可以用常規(guī)方法溶解或分離，例如，通過色譜分離用合適的旋光性羧酸衍生物，如甲氧基甲基萘乙酸(J.Org.Chem.1986，51，1287)酰化環(huán)戊烯基部分的羥基所制備的非對映體酯類。
以下的實施例只是用來說明本發(fā)明的，從任何意義上講都不是用來限制本發(fā)明范圍的。在這些實施例中，旋光度是在20℃相對于鈉D線(589nm)測定的。實施例A-G中所用的術(shù)語“活性成份”是指本發(fā)明的抗病毒化合物，尤其是上述化合物1)。
例 1(±)-順-4-〔(2-氨基-4-氯-6-嘧啶基)氨基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇在氮氣保護下，順-4-乙酰氨基環(huán)戊-2-烯甲基乙酸酯〔美國專利4，268，672〕(14.88g，0.073mol)和氫氧化鋇八水合物(46.19g，0.146mol)在水(300ml)中回流加熱18小時。所得溶液用CO2中和。沉淀物先用水洗，后用乙醇洗。合并的濾洗液蒸發(fā)成漿狀(11.16g)，用2-氨基-4，6-二氯嘧啶(23.91g，0.146mol)和三乙胺(30.5ml，0.219mol)在回流的1-丁醇(100ml)里縮合1.5小時。在加入1N NaOH(73ml)后，將所得混合物蒸發(fā)干燥，并將殘留固體混入CHCl3(200ml)中。將未反應(yīng)的2-氨基-4，6-二氯嘧啶濾出，并用氯仿(100ml)洗滌。將氯仿的濾洗液濃縮，并在硅膠柱上進行色譜分離。多余的嘧啶原材料用2.5%的甲醇-氯仿洗脫。標題化合物用3.5%的甲醇-氯仿洗脫，產(chǎn)物呈灰白色固體泡沫體狀(15.90%，91%)1H-NMR(Me2SO-d6)δ 1.15-1.28和2.26-2.41(2m，2，CH2);2.60-2.71(m，1，1′-H);3.4(m，重疊，H2O，CH2OH);4.625(t，J＝5.3，1，CH2OH);4.95(brs，1，CH-N);5.67-5.87(m，2，CH＝CH);6.38(brs，1，NH2);7.12(brs，1，NH);MS(CI)M+1，241，243。
元素分析計算值(C10H13N4OCl 0.2H2O)C，48.99;H，5.55;N，22.85;Cl，14.46。
測定值C，49.10;H，5.57;N，22.81;Cl，14.40。
例 2(±)-順-4-〔(2-氨基-6-氯-5-〔(4-氯苯基)偶氮〕-4-嘧啶基〕-氨基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將來自例1的(±)-順-4-〔(2-氨基-4-氯-6-嘧啶基)氨基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(11.58g，48.1mmol)和三水合乙酸鈉(97g)溶解在冰醋酸(225ml)和水(225ml)中。由4-氯苯胺(6.74g，52.8mol)、濃鹽酸(14.7ml)、水(52ml)和亞硝酸鈉(4.01g，58.2mmol)在47ml水中的溶液)制備氯化4-氯重氮苯冷溶液(0-5℃)。在5分鐘內(nèi)將該冷溶液滴加到第1個溶液中去。18小時以后過濾所得的黃色沉淀，用水洗滌，并用乙醇萃取，得到標題化合物，暗黃色粉末(12.56g，69%)，m.p.(熔點)218～220℃。
1H-NMR(Me2SO-d6)δ 10.25(d，1，NH);7.69和7.54(二者d，J＝8.9，C6H4)重疊7.6(br，6，NH2);5.80-5.95(m，2，CH＝CH);5.24(m，1，CHN);4.75(t，1，CH2OH);3.41(t，2，CH2OH);2.75(m，1，CH);2.41(m，1，CH);1.41-1.53(m，1，CH)。
元素分析計算值(C16H16N6Cl2O)C，50.67;H，4.25;N，22.16;Cl，18.70。
測定值C，50.59;H，4.29;N，22.10;Cl，18.66。
例 3(±)-順-4-〔(2，5-二氨基-4-氯-6-嘧啶基)-氨基〕-2-環(huán)戊烯-1-醇將例2的標題化合物(11.67g)懸浮于乙醇(235ml)、冰醋酸(30ml)和水(235ml)中。在氮氣保護下加熱該混合物至回流。在30分鐘內(nèi)將鋅粉(13.5g)一小部分一小部分地加入，在此期間化合物被溶解。反應(yīng)混合物再加熱另外20分鐘，然后將多余的鋅從熱溶液中濾出，并用乙醇洗滌。蒸發(fā)濾液，殘余物在硅膠柱上純化，用氯仿(1L)和氯仿∶甲醇/4∶1(1.8L)洗脫。將含有產(chǎn)物的級分合并，在減壓條件下除去溶劑，以得到呈紅黃色油狀的標題化合物(11.2g，產(chǎn)率＞100%)。在另一個小型反應(yīng)中獲得了純的樣品，淺黃色固體產(chǎn)物，產(chǎn)率76%。
1H-NMR(Me2SO-d6)δ 1.29和2.39(m，2，CH2);2.69(t，1，1′-H);3.37(d，2，CH2OH);3.91(br，2，NH2);4.60(br，1，CH2OH);5.02(m，1，CHNH);5.56(brS，2，NH2);5.74(m，1，＝CH);5.86(m，1，＝CH);6.36(d，1，CHNH)。
例 4(±)-順-4-(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將例3的標題化合物(大約9.7g)溶解于乙酸二乙氧基甲酯(100g)中，回流加熱2天。在高真空和50℃條件下除去溶劑，并加入二噁烷(40ml)和0.5N HCl(60ml)。在室溫下，攪拌反應(yīng)混合物1.25小時，然后冷卻。用冷的5N NaOH將反應(yīng)混合物中和至pH7，然后用氯仿∶甲醇/3∶1萃取幾次。有機層用MgSO4干燥，過濾，并蒸發(fā)。殘余物通過色譜法在硅膠柱上純化，用2%MeOH-CHCl3洗脫，得到3.7克標題化合物(產(chǎn)率46%)，m.p.138-139℃。
1H-NMR(Me2SO-d6)δ 1.63和2.61(m，2，CH2);2.87(m，1，1′-H);3.44(d，2，CH2OH);5.44(m，1，CH-N);5.89(m，1，＝CH);6.14(m，1，＝CH);6.82(brs，2，NH2);8.02(s，1，8-H);(CH2OH看不見-在H2O峰下)。UVpH1 λ max 315(ξ 7370);218(26200);λ sh 239.5(5650)pH7.4 λ max 307(ξ8000);245.5(4600);223(26400)。MS(EI)265，267(m)266，268(m+1)。
元素分析計算值(C11H12N5Cl 0.2H2O)C，43.79;H，5.35;N，23.21;Cl，11.75。
測定值C，43.67;H，5.29;N，23.05;Cl，11.70。
例 5(±)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將例4的標題化合物(0.50g)溶解于乙醇(40ml)里，并加入環(huán)丙胺(0.65ml，5當量)。在氮氣保護下，回流反應(yīng)混合物6小時。另外加入0.65ml環(huán)丙胺，再回流反應(yīng)混合物5.5小時。蒸發(fā)溶劑，并加入氯仿(25ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(5ml)。水層用CHCl3萃取數(shù)次，獲得粗制品。將其在硅膠柱上純化，用3%的甲醇-乙酸乙酯洗脫，得到0.43克(80%)的(±)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇。將其從乙腈中重結(jié)晶，得到0.30克白色粉末;m.p.在93-130℃崩遺;在165℃熔化。
1H-NMR(Me2SO-d6)δ0.56和0.63(2m，4，2-環(huán)丙基CH2);1.56和2.60(2m，2，環(huán)戊烯-CH2);2.85(m，1，1′-H);3.02(m，1，環(huán)丙基CH-NH);3.43(m，2，CH2OH);4.71(t，1，CH2OH);5.40(m，1，4′-H);5.77(S，2，NH2)，重疊5.84(m，1，＝CH2);6.09(m，1，＝CH)，7.23(d，1，NH-CH);7.58(s，1，嘌呤-8-H);ms(CI)287(m+1)。UVPH1λ max 296(ξ 14000)，255(10700);pH7.0λ max 284(15900);259(9200);PH13 λmax284(15800)，259(9100)。
元素分析計算值(C14H18N6O 0.25H2O)C，57.82;H，6.41;N，28.90測定值C，57.84;H，6.45;N，28.86。
例 6(±)-順-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙基甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將例4的(±)-順-4-(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(0.53g，2mmol)，N-甲基-N-環(huán)丙胺(Karl Industries，Aurora，OH;0.8477g，12mmol)和甲醇(20ml)放入帕爾瓶(Parr bomb)中，并加熱至62℃，保持5小時。將該溶液濃縮，然后，在用乙醇稀釋之后通過加入1.0N NaOH將pH調(diào)至12。將該溶液濃縮，殘余物用3%的甲醇-氯仿從硅膠柱上洗脫純化(0.547g，91.2%)。該樣品從水-乙醇中結(jié)晶得到白色粉末，m.p.130-131℃。
1H-NMR(Me2SO-d6)δ 7.61(s，1H，嘌呤H-8);6.10(m，1H，CH＝);5.84(m，1H，CH＝);5.7(brs，2H，NH2);5.40(m，1H，CHN);4.70(brt，1H，OH);3.43(m，2H，CH2OH);3.24(brs，4H，CH3，NCH環(huán)丙基);2.85(m，1H，CH)，2.66-2.57和1.61-1.51(m，2，環(huán)戊烯CH2);0.90～0.65(m，4H，環(huán)丙基的2CH2)。
元素分析計算值(C15H20N6O 0.5H2O)C，58.24;H，6.84;N，27.16。
測定值C，58.15;H，6.86;N，27.14。
例 7(-)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將例5的標題化合物(0.600g，2.00mmol)溶解于1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2-(1H)-嘧啶酮(Aldrich，12ml)中。將磷酰氯(0.76ml，8.0mmol)加入經(jīng)攪拌的，冷卻的(-10℃)該溶液中。3分鐘之后加入冷水(100ml)，并用3M NH4OH中和所得溶液。中和的溶液用水稀釋至1升，加入用50mM碳酸氫銨預(yù)平衡過的2.5×20cm的DEAE Sephadex A25柱(pharmacia)中。該柱首先用4升50mM的碳酸氫銨洗脫。然后，用2升50～300mM的碳酸氫銨梯度溶液洗脫(±)順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的O-單磷酸酯。將含有核苷酸(即，上述的O-單磷酸酯)的級分蒸發(fā)成白色粉狀，以除去碳酸氫銨;通過UV吸收算出含量為71%;HPLC測試(參見下文)有一個峰。將來自大響尾蛇(Crotalus atrox)的蛇毒5′-核苷酸酶(EC 3.1.3.5)(1000IU，Sigma)加入溶解在水(20ml)里的1.4mmol核苷酸溶液中。該溶液在37℃下保溫22小時，在此時還要加入額外的酶(1000IU)。再繼續(xù)保溫3天。此時的HPLC分析(0.4×10cm Whatman Partisil 10強陰離子交換柱;用pH5.5，含有5%甲醇20mM-1M的磷酸銨梯度液洗脫，在284nM處進行UV測試)表明，50%的起始核苷酸已被脫磷酸化，變成了母體核苷。該混合物再加入前面所說的那種DEAE Sephadex柱中。用4升50mM的碳酸氫銨洗脫，得到含有標題化合物的級分。將水分蒸發(fā)，剩下白色粉末。該物質(zhì)通過硅膠柱色譜進一步純化，用MeOH∶CHCl3/1∶9洗脫，生成無色玻璃狀產(chǎn)物。該玻璃狀產(chǎn)物在乙腈中固化，得到(-)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇，白色膠質(zhì)狀固體，在68℃，0.5毫米汞柱壓力下將其干燥成固體泡沫體(260mg，86%外消旋物);在DMSO-d61H-NMR(DMSO-d6)分析和質(zhì)譜分析結(jié)果與外消旋物(例5的標題化合物)的相同;〔α〕20D-59.7°，〔α〕20436-127.8°;〔α〕20365-218.1°;(C＝0.15，甲醇)。
元素分析計算值(C14H18N6O-0.8H2O)
C，55.91;H，6.57;N，27.94。
測定值C，56.05;H，6.65;N，27.88。
接著用2升50～300mM的碳酸氫銨的梯度溶液洗脫上述的Sephadex柱，得到對5′-核苷酸酶穩(wěn)定的(與標題化合物相應(yīng)的(+)對映體的)鄰-單磷酸酯;在例9中對這種單磷酸酯的制備有更詳細的說明。
例 8(-)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇O-單磷酸酯將例7的標題中化合物(0.35g，1.2mmol)溶解在1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2-(1H)-嘧啶酮(Aldrich，5ml)里。將磷酰氯(Aldrich，0.43ml，4.6mmol)加入經(jīng)攪拌和冷卻(-10℃)后的該溶液中。3分鐘之后，加入冷水(20ml)，所得溶液用3M氫氧化銨中和。在水分蒸發(fā)以后，進行如例7中所述的離子交換色譜分離，得到二銨鹽形式的核苷酸，白色粉末(產(chǎn)率95%，通過UV測定);進行例7中所述的HPLC分析表現(xiàn)出一個峰;UV λmax nM(0.1MHCl)254，297;(pH7的磷酸鹽緩沖液)259，284;(0.1M NaOH)259，284。通過B.Ames的方法(Methods in Enzymology 8∶115，1966)確定的堿/磷酸酯比例為1.0/1.3?！拨痢?0D-69.9°，〔α〕20578-73.0°，〔α〕20546-84.0(C＝0.52，MeOH∶H2O/4∶1)。
例 9(+)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇)-單磷酸酯在與5′-核苷酸酶保溫以后，用2升50-300mM的梯度碳酸氫銨洗脫例7中所述的DEAE Sephadex柱，得到含有核苷酸的級分，將水蒸發(fā)掉之后，得到標題化合物的二銨鹽;白色粉末(56%例5的標題化合物);與例7中相同的HPLC分析表現(xiàn)出一個峰;UV λmax nM(0.1MHCl)254，297;(PH7的磷酸鹽緩沖液)259，284;(0.1MNaOH)259，284，堿/磷酸酯之比為1.0/0.98?！拨痢?0D+62.0°，〔α〕20578+65.2°，〔α〕20546+75.0(C＝0.54，MeOH∶H2O/4∶1)。
例 10(+)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將例9的標題化合物(0.67mmol)溶解于水(20ml)中，并加入得自小牛腸子的堿性磷酸酶(EC 3.1.3.1)(3000IU，Boehringer Mannheim)。該溶液在37℃保溫19小時，此時的HPLC分析(與例7相同)表明，所有核苷酸都被脫去了磷酸。將該溶液蒸發(fā)干燥，殘余固體物用回流的乙醇(100ml)萃取。將乙醇可溶的物質(zhì)吸附到硅膠上，并裝入硅膠柱中，用甲醇∶氯仿/1∶9洗脫標題化合物。蒸發(fā)乙腈-乙醇溶液，得到白色固體泡沫體(164mg，79%)，1H-NMR(DMSO-d6)分析和質(zhì)譜分析結(jié)果與外消旋物(例5的標題化合物)的相同;〔α〕20D+58.7°，〔α〕20436+126.2°，〔α〕20365+217.5°，(C＝0.10，甲醇)。
元素分析計算值(C14H18N6O-0.6H2O-0.15EtOH)C，56.49;H，6.66;N，27.64。
測定值C，56.60;H，6.63;N，27.55。
例 11(-)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙基甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將例6的標題化合物(2.00g，6.50mmol)溶解于1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(Aldrich，20ml)里。將磷酰氯(2.28ml，24.0mmol)加進經(jīng)攪拌的、冷卻(-10℃)的該溶液里。3分鐘之后，加入冷水(80ml)。該溶液用氯仿(3×80ml)萃取。水層用乙醇(400ml)稀釋，并用飽和NaOH水溶液將pH調(diào)整至6。將沉淀的無機鹽濾出。濾液進一步用乙醇稀釋至1升的體積，并用另外的NaOH將pH調(diào)整至8。將所得的沉淀濾出，并干燥，得到(±)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙基甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的O-單磷酸酯，白色粉末(4.0mmoles，通過UV吸收測定的含量為62%)，與例7相同的HPLC分析出現(xiàn)一個峰。將這種外消旋的O-單磷酸酯溶解在水(200ml)中，并加入得自大響尾蛇(Crotalus atrox)的蛇毒5′-核苷酸酶(EC 3.1.3.5)(5，000IU，Sigma)。在37℃保溫10天以后，進行的與例7中相同的HPLC分析表明，原始核苷酸的50%已被脫去磷酸變成了核苷。將其在用50mM碳酸氫銨預(yù)平衡的5×14cm的DEAE Sephadex A25柱(Pharmacia)上分離。標題化合物用2升50mM的碳酸氫銨洗脫。將水蒸發(fā)，得到白色粉末，再將其溶解于甲醇里，吸附到硅膠上，并裝入硅膠柱中。標題化合物用甲醇∶氯仿/1∶9洗脫，產(chǎn)物呈無色玻璃狀。將乙腈溶液蒸發(fā)，得到白色固體泡沫體，在P2O5上以0.3mmHg的壓力干燥，得到649mg產(chǎn)物(72%外消旋物);1H-NMR(DMSO-d6)分析和質(zhì)譜分析結(jié)果與外消旋物(例6的標題化合物)的相同;〔α〕20D-48.0°，〔α〕20436-97.1°，〔α〕20365-149°(C＝0.14，甲醇)。
元素分析計算值(C15H20N6O-0.10CH3CN)C，59.96;H，6.72;N，28.06。
實際值C，59.93;H，6.76;N，28.03。
接著，用2升100mM的碳酸氫銨洗脫上述Sephadex柱，然后再用2升200mM的碳酸氫銨洗脫，獲得與標題化合物相應(yīng)的(+)對映體的O-單磷酸酯，它是對5′-核苷酸酶穩(wěn)定的。
例 12(+)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙基甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇合并從例11的Sephadex柱洗脫的含有(+)對映體的O-單磷酸酯的級分，并加入得自小牛腸的堿性磷酸酶(E C 3.1.3.1)(4800IU，Boehringer Mannheim)。該溶液在25℃保溫18小時，此時的HPLC分析表明，所有的核苷酸都被脫磷酸化。將該溶液蒸發(fā)干燥，殘余的固體用回流的乙醇(100ml)萃取。將溶于乙醇的物質(zhì)吸附到硅膠上，并裝入硅膠柱。標題化合物用甲醇∶氯仿/1∶9洗脫，產(chǎn)物呈無色玻璃狀。將乙腈溶液蒸發(fā)，得到白色固體泡沫體，在0.3mmHg壓力下，在P2O5上干燥;得到659mg產(chǎn)物(73%外消旋物);1HNMR(DMSO-d6分析和質(zhì)譜分析結(jié)果與外消旋物(例6的標題化合物)的相同;〔α〕20D+47.0°，〔α〕20436+93.0°，〔α〕20365+141.3°(C＝0.11，甲醇)。
元素分析計算值(C15H20N6O-0.1CH3CN)C，59.95;H，6.72;N，28.06。
測定值C，59.92;H，6.80;N，27.96。
例 13(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇二苯甲?；?D-酒石酸鹽(±)-順-4-乙酰氨基環(huán)戊-2-烯甲基乙酸酯〔美國專利4，268，672〕(14.88g，0.073mol)和氫氧化鋇的八水合物(46.19g，0.146mol)，在氮氣保護下，在水中(300ml)回流加熱18小時。所得溶液用CO2中和。沉淀先用水洗滌，后用乙醇洗滌。合并的洗濾液蒸發(fā)成漿狀((±)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的乙酸鹽)，通過與過量的Amberlite IRA-400(OH-)樹脂一起在水中攪拌，將其轉(zhuǎn)變成游離胺。將樹脂濾出去，用水洗滌，并將濾洗液蒸發(fā)成淡黃色漿體，通過將乙醇部分蒸發(fā)而使其干燥。將這種胺的試樣(2.26g 20.0mmol)和二苯甲酰-D-酒石酸(Aldrich，3.62g，10.0mmol，99%)溶解于熱無水乙醇(35ml)中。將回流的乙腈(大約150ml)加入使至濁點，并使該溶液緩慢冷卻至室溫。所形成的白色針狀結(jié)晶從相同的溶劑混合物中重結(jié)晶3次，得到標題化合物，白色片狀體(1.07g，37%);m.p.160-162℃;〔α〕20D+66.9°，〔α〕20436+165°〔α〕20365+325°(C＝0.28，甲醇)。對這種鹽的X-射線結(jié)晶衍射，使得陽離子的絕對構(gòu)型能通過D-二苯甲酰酒石酸二價陰離子的已知構(gòu)型來確定。這種鹽在間隔基團C2上結(jié)晶，有一個C6H12NO陽離子和1/2個C18H14O8二價陰離作為不對稱單元。
元素分析計算值(C6H11NO-1/2(C18H14O8))C，61.63;H，6.21;N，4.79。
測定值C，61.56;H，6.24，N;4.74。
例 14(1R，4S)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇二苯甲酰-L-酒石酸鹽按照實施例13中所述方法一樣生成這種鹽，并結(jié)晶，只是所采用的是二苯甲酰-L-酒石酸。從乙醇-乙腈中重結(jié)晶3次，得到標題化合物，白色片狀體(1.00g，34%);m.p.160-162°;〔α〕20D-68.2°，〔α〕20436-169°，〔α〕20365-333°，(C＝0.24，甲醇)。
元素分析
計算值(C6H11NO-1/2(C18H14O8))C，61.63;H，6.21;N，4.79。
測定值C，61.59;H，6.21;N，4.76。
例 15(±)-順-N-〔4-氯-5-甲酰胺基-6-〔〔4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基〕氨基〕-2-嘧啶基〕乙酰胺通過向溶解在乙酐(20ml)里的N-(5-氨基-4，6-二氯嘧啶-2-基)乙酰胺(J.Org.Chem.1975，40，3141)(0.75g，3.4mmol)溶液中加入96%的甲酸(20ml)，將其甲?；?。所得溶液在25℃下攪拌1小時，然后蒸發(fā)得到N-(4，6-二氯-5-甲酰氨基-2-嘧啶基)乙酰胺的褐色粉末(0.77g，91%);通過1H-NMR和質(zhì)譜分析確定其結(jié)構(gòu)。
在氮氣保護下，這種褐色粉末(840mg，3.37mmol)、(±)-順-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(940mg，8.2mmol)和三乙胺(0.80g，8.0mmol)在乙醇(50ml)里置于油浴(70-80℃)中加熱50分鐘，蒸發(fā)成暗色油狀物，然后在硅膠上進行色譜分析。標題化合物用5%的甲醇-氯仿洗脫，產(chǎn)物為粉紅色固定泡沫體(840mg)。從甲醇中結(jié)晶得到白色顆粒(575mg，52%);m.p.189-193°;1H-NMR(DMSO-d6)δ 10.23(br，1.0，NHAc)，9.3(br，1.0，NHCHO)，8.15和7.90(二者s，總1.0，HC＝0來自兩種構(gòu)象體，在60℃峰結(jié)合)，7.42和7.22(二者d，J＝8.3，總1.0，CH-NH來自兩種構(gòu)象體，在60℃峰結(jié)合，5.9和5.7(二者m，2.0，CH＝CH)，5.05(m，1，CH-N)，4.73(m，1，OH)，3.39(m，2，CH2OH)，2.72(m，1，CH)，2.40(m，1，1/2CH2)，1.36(m，1，1/2CH2)。
元素分析計算值(C13H16N5O3Cl)C，47.93;H，4.95;N，21.50;Cl，10.88。
測定值C，47.99;H，4.96;N，21.42;Cl，10.96。
例 16(±)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將例15的標題化合物(0.91g，2.79mmol)溶解于無水DMF(1ml)中。加入原甲酸三乙酯(10ml)和乙基磺酸(0.29ml，3.4mmol)，并將該溶液在65℃加熱24小時。將該溶液蒸發(fā)成漿體。該漿體溶解于1N HCl(15ml)中，并攪拌3小時。用5N NaOH將pH調(diào)整到7，所得到的混合物(油狀)用異丙醇∶氯仿/1∶3(3×100ml)萃取。將合并的有機層干燥(MgSO4)，并蒸發(fā)成紅色玻璃體(0.93g)將這種玻璃體的甲醇(20ml)溶液與環(huán)丙胺(2ml)一起在帕爾瓶中于70℃加熱18小時。所得溶液被蒸發(fā)成暗色玻璃體，并吸附到硅膠上。用7%的甲醇-乙酸乙酯洗脫，得到標題化合物(148mg，19%)，用乙腈研制，得到白色粉末;1H-NMR(DMSO-d6)分析結(jié)果與例5標題中化合物的相同。
例 17(+)-(1R，4S)-順-N-〔4-氯-5-甲酰胺基-6-｛〔4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基〕氨基｝-2-嘧啶基〕乙酰胺按照例13中所述方法制備的(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇二苯甲酰-D-酒石酸鹽(2.76g，9.02mmol)溶解于水(20ml)中，并裝入65ml的Amberlite IA-400(OH-型)陰離子交換樹脂柱中。該柱用水洗脫。堿性級分被合并，蒸發(fā)成殘油，通過無水乙醇蒸發(fā)干燥，然后在0.5mmHg壓力下干燥，得到(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(1.2g)的淺黃色油狀體(在空氣中很快變黑)，該產(chǎn)物要馬上使用。將該油狀體溶解于乙醇(5L)里，并加入到N-(4，6-二氯-5-甲酰胺基-2-嘧啶基)乙酰胺(2.07g，8.31mmol)(按照例15所述方法制備)和三乙胺(2.50g，24.8mmol)的溶液中。所得黑色溶液在氮氣保護下加熱(油浴75-80℃)50分鐘。將該溶液蒸發(fā)成漿狀物，并裝入硅膠柱。用3-5%的甲醇-氯仿洗脫標題化合物，產(chǎn)物為一種淺黃色固體泡沫體(1.59g，54%);1H-NMR分析結(jié)果與結(jié)晶樣品的相同。這種樣品從乙醇中結(jié)晶，得到白色顆粒，m.p.194-195℃;1H-NMR(DMSO-d6)分析結(jié)果與例15標題化合物的相同;〔α〕20D+2.7°，〔α〕20578+3.6°，〔α〕20546+2.9°，〔α〕20436-2.5°;〔α〕20365-41.2°(C＝0.238，甲醇)。
例 18(-)-(1S，4R)-順-(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇在氮氣保護下，例17的標題化合物(1.15g，3.53mmol)在乙酸二甲氧基甲基酯(45ml)中輕輕回流3.5小時。所得淺黃色溶液在0.5mmHg壓力下濃縮成黃色漿狀體。在1N HCl(50ml)里攪拌該漿體1.0小時。該溶液用碳酸氫鈉中和，并蒸發(fā)至干燥。殘余固體物用甲醇萃取，并將可溶于甲醇的物質(zhì)裝入硅膠柱。該柱用10%甲醇-乙酸乙酯洗脫，得到標題化合物，淺黃色固體泡沫體(730mg，78%);1H-NMR(DMSO-d6)分析結(jié)果與外消旋物(例4的標題化合物)的相同;〔α〕20D-114.9°(C＝0.26，MeOH)。-114.9°(C＝0.26，MeOH)。
例 19(-)-(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將溶解在甲醇(12ml)里的例18的標題化合物(560mg，2.11mmol)與環(huán)丙胺(2.4ml)一起在帕爾瓶中于78℃加熱17小時。將溶劑蒸發(fā)，殘余物在硅膠上進行色譜分離。用5-7%的甲醇-乙酸乙酯洗脫標題化合物，產(chǎn)物是無色固體泡沫體(367mg，59%);1H-NMR(DMSO-d6)分析結(jié)果與例7的相同，〔α〕20D-59.0°，(C＝0.28，MeOH)證實為例7標題化合物的絕對構(gòu)型。
例 20(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇二苯甲酰-D-酒石酸鹽將2-氮雜雙環(huán)〔2.2.1〕庚-5-烯-3-酮〔Daluge和Vince，J.Org.Chem.1978，43，2311和美國專利4，268，672〕(44.0g，0.400mole)在2N HCl的甲醇溶液(0.5L)里于25℃攪拌1.5小時。將揮發(fā)性物蒸發(fā)掉，剩下(±)-順-甲基-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-羧酸酯鹽酸鹽的灰白色粉末(71.1g)。用乙醚研制這種樣品，得到白色粉末，m.p.92.5-95℃〔J.Org.Chem 1981，46，3271;m.p.82-83℃〕;1H-NMR(DMSO-d6)δ 8.25(brs，3，NH+3)，6.1和5.9(二者m，2，CH＝CH)，3.64(s)重疊，3.75-3.6(m，總4，OMe和CH)，2.65-2.45和2.05-1.85(二者m，2，CH2)。
元素分析計算值(C7H11NO2-HCl)C，47.33;H，6.81;N，7.89;Cl，19.96。
測定值C，47.41;H，6.84;N，7.85;Cl，19.89。
將(±)-順-甲基-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-羧酸酯鹽酸鹽(17.7g，0.100mole)和氫化二異丁基鋁(0.500mole，為1M的己烷溶液)在己烷(200ml)中回流6小時。將所得溶液冷卻，加入10ml 1M氯化銨水溶液，然后再加入甲醇(200ml)。混合物回流30分，并加入MgSO4(10g)。將固體濾出，并用另外的甲醇沖洗。將濾洗液蒸發(fā)成黑色油狀物(15.5g);1H-NMR(DMSO-d6)分析結(jié)果與在例13中制備的(±)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲基的相同。這種樣品在通過硅膠色譜純化以(EtOH∶CHCl3∶NH4OH/10∶90∶1)后，再用二苯甲酰-D-酒石酸結(jié)晶，得到標題化合物。
例 21〔順-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-基〕甲基R-2，3-雙-(十六烷酰氧基)丙基磷酸氫酯將溶解于6ml氯仿里的L-α-二(十六烷酰)磷脂酰膽堿(150mg，0.2mmol Sigma)溶液加入裝有(±)-順-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(300mg，1.03mmol)磷脂酶D(Ⅶ型)(由鏈絲菌屬菌(Streptomyces)制備，1.0mg，比活性185單位/mg，Sigma)和pH4.5的緩沖液(1.5ml，250mM CaCl2，200mM NaOAc，用加入0.1N HCl調(diào)至pH4.5)的燒瓶中。所得雙相在45℃(油浴)下攪拌1小時。分離水層和有機層，并用氯仿(3×6ml)萃取水層。合并的有機層用1N HCl洗滌，干燥并濃縮。通過用12%的甲醇-氯仿從2個硅膠柱上洗脫將這種樣品純化，得到標題化合物120mg(47%)。該物質(zhì)用乙酸乙酯-乙腈固化，生成淺黃色粉末，m.p.155-157℃;1H-NMR(CD3CD-CDCl3)δ 7.78(s，重疊溶劑，嘌呤H-8)，6.12和5.88(m，2，HC＝CH)，5.53(m，1，CHN環(huán)戊烯)，5.22(m，1，CO2CH)4.37(dd，J＝3，12;1，0.5POCH2甘油)，4.12(m，1，0.5POCH2甘油)，3.42(m，4，OCH2甘油，OCH2)，3.11(brm，1，CH)，2.90(m，1，NCH)，2.78(m，1，0.5CH2環(huán)戊烯)，2.27(m，4，2CH2CO2)，1.70(m，1，0.5CH2環(huán)戊烯)，1.56(brm，4，2CH2CH2CO2)，1.27(brm，38，24CH2)，0.88(m，6，2CH3)，0.83(m，2，CH2環(huán)丙基)，0.60(m，2，CH2環(huán)丙基)。
元素分析計算值(C49H85N6O8P-2.4H2O)C，61.28;H，9.42;N，8.75;P，3.22。
測定值C，60.97;H，9.12;N，8.78;P，2.96。
例 22〔順-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-基〕甲基R-2，3-雙-(己酰氧基)丙基磷酸氫酯將溶解在15ml CHCl3里的L-α-二己酰磷脂酰膽堿(300mg，0.66mmol，Sigma)的溶液加入盛有(±)-順-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(378mg，1.32mmol)，磷脂酶D，TypeⅦ(由鏈絲菌屬菌制備，1.04mg，比活185單位/mg，Sigma)，pH4.5的緩沖液(4.5ml，250mM CaCl2，200mM NaOAc，用HCl調(diào)至pH4.5)和CHCl3的燒瓶中。所產(chǎn)生的雙相在45℃(油浴)下攪拌4小時。將水層和有機層分離，并用1N HCl(2×4ml)洗滌有機層。合并的水層用氯仿(10ml)洗滌。將合并的有機層干燥(MgSO4)并濃縮。殘余物放在硅膠柱上，標題化合物用16%的甲醇-氯仿洗脫，并濃縮，得到細的黃色粉末。將該物質(zhì)溶解于乙醇中并濃縮(3×50ml)，然后在高真空下干燥，得到103mg(產(chǎn)率21%)淺黃色粉末，m.p.182-185℃。
1H-NMR(DMSO-d6)α 7.61(s，1，嘌呤H8)，7.22(brs，1，NH)，6.09(m，1，0.5CH＝CH)，5.89(m，在5.83處重疊brs，3，0.5CH＝CH，NH2)，5.41(brm，1，CHN)，5.09(brm，1，CO2CH)，4.30(dd，J＝2.7，12;1，0.5POCH2甘油)，4.08(m，1，0.5POCH2甘油)，3.80(brm，在3.75處重疊brm，4，OCH2甘油，OCH2)，3.02(brm，2，CH，NCH環(huán)丙基)，2.65(m，1，0.5CH2環(huán)戊烯)，2.23(+，J＝7.5，4，2CH2CO2)，1.48(brm，5，2CH2CH2CO2，0.5CH2環(huán)戊烯)，1.23(brm，8，2(CH2)2)，0.84(m，6，2CH3)，0.67和0.58(m，4，2CH2環(huán)丙基)。
元素分析計算值(C29H45N6O8P-3.9H2O，0.2CHCl3，0.05EtOH)C，48.00;H，7.33;N，11.46;Cl，2.9。
測定值C，48.65;H，6.61;N，10.81;Cl，2.5。
上述實施例是Satoshi Shuto等的方法(TetrahedronLetters，Vol.28，No.2，pp.199-202，1987)的改進。
例 23N-(4-氯-1，6-二氫-5-硝基-6-氧代-2-嘧啶基)異丁酰胺通過在異丁酸酐(250ml)和濃硫酸(3-4滴)里加熱6-氯-5-硝基異胞嘧啶黃色固體(14.88g，78.09mmol)至100℃，1小時，將其保護起來。所得溶液用無水甲醇(100ml)處理，在50℃下攪拌半小時，濃縮至原體積的1/3，標題化合物通過過濾收集(14.97g，74%)，為淡黃色結(jié)晶;m.p.196-199℃(分解);
1H-NMR(DMSO-d6)δ 1.12(d，J＝6.9Hz，6H，(CH3)2OH)，2.75(m，J＝6.9Hz，1H，(CH3)2CH)，12.41(brs，1H)。
元素分析計算值(C8H9N4O4Cl)C，36.87;H，3.48;N，21.50;Cl，13.60。
測定值C，36.94;H，3.48;N，21.44;Cl，13.53。
例 24N-(4，6-二氯-5-硝基-2-嘧啶基)異丁酰胺在氮氣保護下，將例23的標題化合物(10.0g，38.37mmol)在磷酰氯(200ml)和N，N-二乙基苯胺(3-4滴)里加熱回流5小時。然后將該溶液冷卻至室溫，濃縮至干燥，并將漿體溶解于冷的(約-10℃)二氯甲烷(200ml)中。在強力攪拌下，有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)處理，當固體碳酸氫鈉一部分一部分地加入把pH升高到5-7之間時溫度保持在5℃以下。將有機層和水層分離，并用二氯甲烷萃取水相。合并的有機層在分相器紙上過濾，濃縮，并在真空下干燥，得到標題化合物黃白色固體(7.71g，72%)，在下一步驟中使用是足夠純的。將該固體從己烷/二氯甲烷中重結(jié)晶得到分析樣品，m.p.166-169℃;1H-NMR(DMSO-d6)δ 1.09(d，J＝6.9Hz，6H，(CH3)2CH)，2.79(m，J＝6.9Hz，1H，(CH3)2CH)，11.61(S，1H)。
元素分析計算值(C8H8N4O3Cl2)C，34.43;H，2.89;N，20.08;Cl，25.41。
測定值C，34.53;H，2.89;N，20.02;Cl，25.40。
例 25N-(4，6-二氯-5-甲酰胺基-2-嘧啶基)異丁酰胺將例24的標題化合物(6.77g，24.26mmol)加入在氫氣(40 psi)下預(yù)先搖動了10分鐘的盛有220ml無水乙醇和10.0g(濕重)阮內(nèi)鎳催化劑的帕爾瓶中。該混合物在氫氣(40psi)下?lián)u動1小時，通過硅藻土過濾，將濾液濃縮成黃白色固體，在真空下干燥過夜。在0℃下，在1，2-二氯乙烷(250ml)里攪拌該固體。在氮氣保護下滴加乙酐(30ml)，接著再滴加甲酸(30ml)。所得到的混合物在室溫下攪拌2小時，濃縮至原體積的1/2，與甲苯共沸，以除去殘余的甲酸乙酸。將粗制固體用甲醇研制，得到標題化合物的灰白色固體(4.92g，73%);m.p.206-209℃(分解);1H-NMR(DMSO-d6)δ 1.08(d，J＝6.8Hz，6.0(CH3)2CH)，2.74(m，J＝6.8Hz，1.0(CH3)2CH)，8.18(d，J＝10.3Hz)，10.26(brs)〔總1.0，NHCHO來自兩種構(gòu)象體〕，11.17(brs，1.0)元素分析計算值(C9H10N4O2Cl2)C，39.01;H，3.64;N，20.22;Cl，25.59測定值C，39.13;H，3.68;N，20.12;Cl，25.67例 26(+)(1R，4S)-順-N-〔4-氯-5-甲酰胺基-6-｛〔4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基〕氨基｝-2-嘧啶基〕異丁酰胺將用例13所述方法制備的(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇二苯甲酰-D-酒石酸鹽(2.44g，8.15mmol)溶解于90%的乙醇(20ml)中，并將所得溶液加進Amberlite IRA-400(OH-)柱中，該柱曾用相同溶劑預(yù)先洗過。用90%的乙醇洗脫，得到堿性級分，將其濃縮，并蒸發(fā)掉甲苯-乙醇部分，留下淺黃色油狀的(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(1.4g)。該化合物立即與按照例25中所述方法制備的N-(4，6-二氯-5-甲酰胺基-2-嘧啶基異丁酰胺(2.26g，8.15mmol)，在1，2-二甲氧基乙烷(100ml)和三乙胺(2.3ml，16.3mmol)里，在95-110℃下縮合1.5小時。所得溶液被蒸發(fā)成暗黃色漿狀物，在硅膠柱上進行色譜分離。用5-7.5%的甲醇-氯仿洗脫，得到標題化合物的淺黃色固體(2.45g，84%)。該樣品從乙腈中結(jié)晶，可得到標題化合物的細的白色結(jié)晶，m.p.194.5-195.5℃。
1H-NMR(DMSO-d6)δ 10.21(s，1，NHCOCHMe2)，9.29(s，1，NHCHO)，8.12(s，1，CHO)，7.18(d，J＝7.9，1，CHNH)，5.8和5.7(二者m，2，CH＝CH)，5.08(m，1，CHN)，4.71(t，J＝5.06，1，OH)，3.37(m，2，CH2OH)，2.9-2.6(m，2，CHMe2和CH)，2.40(m，1，0.5CH2)，1.33(m，1，0.5CH2);〔α〕20D+4.4°，〔α〕20365-20.7°(C＝0.237，MeOH)。
元素分析計算值(C15H20N5ClO3)C，50.92;H，5.70;N，19.79;Cl，10.02。
測定值C，50.67;H，5.78;N，19.62;Cl，9.92。
例 27(-)-(1R，4S)-順-N-〔6-(環(huán)丙氨基)-9-(4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基)-9H-嘌呤-2-基〕異丁酰胺把按照例26的方法制備的(+)-(1R，4S)-順-N-〔4-氯-5-甲酰氨基-6-｛〔4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基〕氨基｝-2-嘧啶基〕異丁酰胺(1.949g，5.44mmol)與原甲酸三乙酯(30ml)一起在冰水浴中攪拌，與此同時，用2分鐘時間把濃鹽酸(2.0ml)滴加進去。所得的透明溶液在環(huán)境溫度下攪拌過夜。在真空下除去揮發(fā)性物質(zhì)，殘余漿狀物(含有(1R，4S)-順-N-〔6-氯-9-(4-羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基)-9H-嘌呤-2-基〕異丁酰胺原酸酯共軛物)在乙醇(30ml)里與環(huán)丙胺(10g)一起回流2.5小時。蒸發(fā)后留下漿狀體，將其溶解于10%的異丙醇-氯仿(200ml)里。將該溶液與飽和碳酸氫鈉水溶液(25ml)一起強力攪拌。分離有機層，并用另外的10%異丙醇-氯仿洗滌水層。干燥(MgSO4)合并的有機層。蒸發(fā)后留下淺黃色玻璃體(2.4g)，將其在硅膠柱上進行色譜分離。標題化合物用2-3%的甲醇-乙酸乙酯洗脫，產(chǎn)物為白色固體(1.02g，53%);這種樣品從甲醇-乙腈中重結(jié)晶，得到標題化合物的白色針狀結(jié)晶;m.p.197.5-198.5℃。
1H-NMR(DMSO-d6)δ 9.75(s，1，NHCO)7.93(s，1，嘌呤H-8)，7.82(br，1，NH-環(huán)丙基)，6.12和5.92(二者m，2，CH＝CH)，5.50(m，1，CH-N)，4.73(t，J＝5.3，1，OH)，3.46(m，2，CH2-O)，3.25-3.00(m，2，CHMe2和CH)，2.91(m，1，CH)，2.75-2.6(m，1，0.5CH2)，1.7-1.6(m，1，0.5CH2)1.07(d，J＝6.8，6，CHMe2)，0.75-0.6(m，4，2環(huán)丙基，CH2)，〔α〕20D-70.7，〔α〕20436-159.0°(C＝1.02，MeOH)。
元素分析計算值(C18H24N6O2)C，60.66;H，6.79;N，23.58。
測定值C，60.62;H，6.83;N，23.51。
接著用5%的甲醇-乙酸乙酯洗脫柱，得到混雜有約10%的(-)-(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的標題化合物的淺黃色固體泡沫體(928mg)。
例 28(-)-(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將用例27的方法制備出的(-)-(1S，4R)-順-N-〔6-(環(huán)丙氨基)-9-(4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基)-9H-嘌呤-2-基〕異丁酰胺(1.33g，3.73mmol)與1N鹽酸(40ml)一起在環(huán)境溫度下攪拌2天。用氫氧化鈉將pH調(diào)整至7.0，并將混合物蒸發(fā)至干燥。殘余固體物用熱乙醇(3×25ml)研制。將乙醇蒸發(fā)，留下黃色玻璃體，在硅膠柱上進行色譜分離。標題化合物用3%甲醇-乙酸乙酯洗脫，產(chǎn)物是無色固體泡沫體(857mg，80%)，1H-NMR和〔α〕20D結(jié)果與例19標題化合物的相同。
例 29(-)-(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇鹽酸鹽將(-)-(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(1.90g，約6.3mmol，通過1H-NMR測定)溶解于1N鹽酸(7.0ml)和乙醇里。將該溶液蒸發(fā)至干燥，殘余物溶解在乙醇(15ml)里。緩慢加入乙酸乙酯至總體積為80ml。將產(chǎn)生的灰白色粉末濾出，并在真空下干燥，得到標題化合物(2.07g，97%);m.p.在125-130℃塌陷，138℃以上分解，〔α〕20589-27.1°〔α〕20436-52.3°(C＝0.199，MeOH)。
元素分析計算值(C14H18N6O.HCl.0.8H2O)C，49.87;H，6.16;N，24.92;Cl，10.51。
測定值C，49.91;H，6.16;N，24.96;Cl，10.52。
例 30(-)-(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇二鹽酸鹽將(-)-(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(857mg，3.00mmol)溶解于乙醇-乙酸乙酯里，并加入1N乙醚鹽酸(12ml)。精細白色沉淀用乙酸乙酯洗滌，并在真空下干燥，得到標題化合物(642mg，75%);m.p.176-180°，分解。
元素分析計算值(C14H18N60.2HCl)
C，46.81;H，5.61;N，23.39;Cl，19.74。
測定值C，46.82;H，5.64;N，23.33;Cl，19.67。
例 31(1R，4S)-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇O-二磷酸酯通過把含有0.5mmol用例9方法制備的(+)-(1R，4S)-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇O-單磷酸酯的溶液與10ml 0.5M碳酸氫三乙基銨結(jié)合，將這種單磷酸酯轉(zhuǎn)化成三乙基銨鹽在真空下干燥，接著，再加入10ml 0.5M碳酸氫三乙基銨，再干燥。然后，3次加入10ml乙腈，并在真空下干燥。將其溶解于10ml的1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(Aldrich)里，加入0.43g的1，1′-羰基二咪唑(Aldrich，2.6mmol)，并在室溫下攪拌2小時。加入甲醇(0.18ml，4.5mmol)并攪拌30分鐘。加入焦磷酸三丁基銨(Sigma，1.2g，2.6mmol)，在室溫下攪拌18小時，再加入1g焦磷酸三丁基銨(2.2mmol)并在40℃下攪拌8小時;然后加入50ml的水。由于焦磷酸三丁基銨中含有正磷酸鹽雜質(zhì)，所以產(chǎn)生了O-二磷酸酯和O-三磷酸酯兩種酯。
反應(yīng)產(chǎn)物通過DEAE Sephadex離子交換色譜法在一個用50mM碳酸氫銨(ABC)平衡的2.5×18cm的DEAE Sephadex A25柱(Pharmacia)上分離。該柱先用1升50mM的ABC沖洗，然后再用2升線性梯度的50-800mM的ABC洗脫標題中的化合物，接下來洗脫三磷酸酯，這將在例32中作更詳細說明。將含有二磷酸酯的級分合并，在真空下干燥;重新溶解于水中，并再次干燥，得到標題化合物的銨鹽(0.077mmol，產(chǎn)率15%)。UV掃描在0.1M HCl中，λmax＝254和298nm;在pH7時，λmax＝259和284nm;在0.1M NaOH，λmax＝259和284nm。
將二磷酸酯的等分試樣用堿性磷酸酯(小牛腸，Boehringer Mannheim)處理;在不同時間取樣，并在薄層色譜上展開(PEI-纖維素，Brinkman，1M LiCl/1M甲酸1∶1)。觀察到了由二磷酸酯到一磷酸酯再到核苷的連續(xù)轉(zhuǎn)化。釋放出的磷酸的最終量通過Bencini的方法確定(Bencini，D.A.，Wild，J.R.，and O′Donovan，G.A.Analytical Biochemistry，132254-258(1983))，測定的堿/磷酸酯之比為1.0/11.5，說明有無機磷酸酯存在，在分析HPLC上的UV純度為99.8%(強陰離子交換柱，用10mM-1M的梯度磷酸銨溶液洗脫，pH5.5)。
例 32(+)-(1R，4S)-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇O-三磷酸酯繼續(xù)洗脫例31中所述的色譜柱，將所得洗脫液蒸發(fā)后得到標題化合物的銨鹽。通過Dowex AG50W-X8(Bio-Rad)樹脂柱(鈉型，20ml)將這種鹽轉(zhuǎn)化成鈉鹽。將含有核苷酸的級分在真空中濃縮，得到0.31mmol的產(chǎn)物(61%)。UV掃描在0.1M HCl中，λmax＝254和299nm;在pH7時，λmax＝259和284nm;在0.1M NaOH中，λmax＝259和284nm。在水中，濃度為3.83g/100ml時的旋光度為〔α〕20＝+43.2°(589nm)。在分析HPLC上的UV純度為99.1%(強陰離子交換柱，用10mM-1M的梯度磷酸銨溶液洗脫，pH5.5)，混雜有0.9%的二磷酸酯。將三磷酸酯等分試樣用堿性磷酸酶(小牛腸，Boehringer Mannheim)處理，在不同時間取樣，并在薄層色譜上展開(PEI-纖維素，Brinkman，1M LiCl/1M甲酸1∶1)。觀察了由三磷酸酯到二磷酸酯到一磷酸酯再到核苷的連續(xù)轉(zhuǎn)化。釋出的磷酸的最終量通過Bencini的方法測定(Bencini，D，A.Wild，J.R.，和O′Donovan，G.A.Analytical Biochemistry 132254-258(1983))，并測定堿/磷酸酯之比為1.0/2.7。
例 33(1S，4R)-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇O-二磷酸酯通過把含有0.49mmol的用例8所述方法制備的(-)-(1S，4R)-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇0-單磷酸酯的溶液與5ml 0.5M碳酸氫三乙基銨結(jié)合，將這種單磷酸酯轉(zhuǎn)化為三乙基銨鹽。并在真空下干燥，接著再用5ml 0.5M碳酸氫三乙基銨處理，并再重復(fù)2次。然后，重復(fù)3次，加入5ml乙腈并在真空下干燥。將其溶解于7ml的1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(Aldrich)中，然后加入0.39克1，1′-羰基二咪唑(Aldrich，2.4mmol)，并在室溫下攪拌30分鐘。加入甲醇(0.16ml，4.0mmol)并攪拌30分鐘。加入焦磷酸三丁基銨(通過在離子交換樹脂上將焦磷酸四鈉的鹽交換成氫，然后用三丁胺中和并干燥而制成，2.4mmol)，在室溫下攪拌18小時，然后加入50ml水。由于焦磷酸三丁基銨中含有正磷酸鹽雜質(zhì)，所以，形成了O-二磷酸酯和O-三磷酸酯。
反應(yīng)產(chǎn)物通過DEAE Sephadex離子交換色譜法在一個用50mM碳酸氫銨(ABC)平衡的、2.5×18cm的DEAE Sephadex A25柱(Pharmacia)中分離。該柱先用1升100mM的ABC洗滌，然后用2升100-800mM的ABC線性梯度溶液洗脫標題化合物，接下來的是洗脫三磷酸酯，這一點將在例34中作更詳細的說明。將含有二磷酸酯的級分合并，在真空下干燥，重新溶于水中，然后重復(fù)2次，以生成標題化合物的銨鹽(0.032mmol，產(chǎn)率6%。UV掃描在0.1M HCl中，λmax＝254和298nm;在pH7時，λmax＝259和284nm;在0.1M NaOH中λmax＝258和284nm。
將二磷酸酯的等分試樣用堿性磷酸酯(小牛腸，Boehringer Mannheim)處理，在不同的時間取樣，并在薄層色譜上展開(PEI纖維素，Brinkman，1M Licl/甲酸1∶1)。觀察到了由二磷酸酯到一磷酸酯再到核苷的連續(xù)轉(zhuǎn)化。釋出的磷酸的最終量通過Bencini的方法(Bencini，D.A.，Wild，J.R.，和O′Donovan，G.A.Analytical Biochemistry 132254-258(1983))測定，并測定堿/磷酸酯之比為1.0/4.7，表明有無機磷酸酯存在。在分析HPLC(強陰離子交換柱，用10mM-1M的磷酸銨梯度 溶液洗脫，pH5.5)上的UV純度為97%。
例 34(1S，4R)-4-(2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇O-三磷酸酯繼續(xù)洗脫例33中所述的色譜柱，將所得洗脫液蒸發(fā)后得到標題化合物的銨鹽。通過一個Dowex AG 50W-X8(Bio-Rad)樹脂柱(鈉型，20ml)將這種鹽轉(zhuǎn)化成鈉鹽。將含有核苷酸的級分在真空中濃縮，得到0.4mmol的產(chǎn)物(81%)。UV掃描在0.1M HCl中，λmax＝254和299nm;在pH7時，λmax＝259和284nm;在0.1M NaOH中，λmax＝259和284。在水中，濃度為6.14g/100ml時在589nm旋光度〔α〕20＝-47.1°在分析HPLC(強陰離子交換柱，用10mM-1M磷酸銨梯度溶液洗脫，pH5.5)上的UV純度為99.5%，有0.5%的二磷酸酯存在。將等分的三磷酸酯用堿性磷酸酶(小牛腸，Boehringer Mannheim)處理，在不同時間取樣，并在薄層色譜上展開(PEI-纖維素，Brinkman，1M LiCl/1M甲酸1∶1)。觀察到了由三磷酸酯到二磷酸酯到一磷酸酯再到核苷的連續(xù)轉(zhuǎn)化。釋出的磷酸的最終量通過Bencini的方法(Bencini，D.A.，Wild，J.R.，和O′Donovan，G.A.Analytical Biochemistry，132254-258(1983))測定，并測定出堿/磷酸酯之比為1.0/2.8。
例 35(1S，4R)-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙基甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(1S，4R)-4-〔2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-2-環(huán)戊烯-1-甲醇(274mg，1.00mmol)，N-環(huán)丙基-N-甲胺(0.71g，10mmol)和無水乙醇(6ml)。將殘余物在硅膠柱上進行色譜分離。標題化合物用10%的甲醇-氯仿洗脫，產(chǎn)物為無色玻璃體。將乙醇溶液蒸發(fā)，并在0.2mmHg壓力下用五氧化二磷干燥，得到標題化合物，白色固體泡沫體(293mg，98%);1H-NMR和〔α〕20589結(jié)果與例11標題化合物的相同。
例 A片劑下面的制劑A、B、C是通過各種成份與聚烯吡酮的濕成粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓縮而制成的。
制劑A mg/片 mg/片(a)活性成份 250 250(b)乳糖B.P 210 26(c)聚烯吡酮B.P. 15 9(d)羥基乙酸淀粉鈉 20 12(e)硬脂酸鎂 5 3500 300
制劑B mg/片 mg/片(a)活性成份 250 250(b)乳糖 150 -(c)微晶纖維素pH101 60 26(d)聚烯吡酮B.P. 15 9(e)羥基乙酸淀粉鈉 20 12(f)硬脂酸鎂 5 3500 300制劑C mg/片活性成份 100乳糖 200淀粉 50聚烯吡酮 5硬脂酸鎂 4359下面的制劑D、E是通過直接壓縮混合好的成分而制備的。用在制劑E中的乳糖是直接壓縮型的(Dairy Crest-“Zeparox”)。
制劑D mg/片活性成份 250預(yù)膠化淀粉NF15 150400制劑E mg/片活性成份 250
乳糖 150微晶纖維素 100500制劑F(控制釋放制劑)該制劑是通過以下成份與聚烯吡酮溶液的濕成粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓縮而制成的。
mg/片(a)活性成份 500(b)羥丙基甲基纖維素 112(甲基纖維素K4M，優(yōu)級)(c)乳糖B.P. 53(d)聚烯吡酮B.P. 28(e)硬脂酸鎂 7700藥物釋放持續(xù)6-8小時，在12小時以后完全釋放。
例 B膠囊劑制劑A膠囊劑，是通過將上述例A制劑D的成份混合并裝入由兩部分組成的硬膠囊中制成的。制劑B(見下文)是用類似方法制備的。
制劑B mg/膠囊(a)活性成份 250(b)乳糖B.P. 143
(c)羥基乙酸淀粉鈉 25(d)硬脂酸鎂 2420制劑C mg/膠囊(a)活性成份 250(b)聚乙二醇4000B.P. 350600制劑C是通過熔化聚乙二醇4000B.P.，將活性成份分散在熔化物里，并將熔化物裝入由兩部分組成的硬質(zhì)明膠囊中。
制劑D mg/膠囊活性成份 250卵磷脂 100花生油 100450制劑D的膠囊，是通過將活性成分分散在卵磷脂和花生油中，并將分散體裝入柔軟、彈性的明膠囊中而制備的。
制劑E(控制釋放膠囊)下列控制釋放膠囊劑的制備，是通過用擠壓機擠壓成份a、b和c，隨后是壓出物的球化和干燥，干燥的小球用釋放控制膜(d)包覆，并裝進由兩部分組成的硬明膠囊中。
mg/膠囊(a)活性成份 250(b)微晶纖維素 125(c)乳糖B.P. 125
(d)乙基纖維素 13513例 C注射劑制劑A活性成份 0.200g鹽酸溶液，0.1M或氫氧化鈉 4.0～7.0溶液，0.1M適量，至pH無菌水，適量至 10ml活性成份溶解在大部分水中(35-40℃)，并用適量的鹽酸或氫氧化鈉溶液將pH調(diào)整到4.0～7.0之間。用水將溶液調(diào)至定量，并通過無菌微孔過濾器，裝入無菌的10ml琥珀玻璃瓶(1型)中，并用無菌密封物和包縫物密封。
制劑B活性成份 0.125g滅菌的，不含焦精，pH7的磷酸鹽緩沖液，適量至 25ml例 D肌內(nèi)注射劑活性成份 0.20g芐醇 0.10g四氫呋喃醇聚乙二醇醚75 1.45g注射用水，適量至 3.00ml活性成份溶解在四氫呋喃醇聚乙二醇醚中，然后加入芐醇并溶解，加水至3ml。混合物通過無菌微孔過濾器，并密封在無菌的3ml琥珀色玻璃瓶內(nèi)(1型)。
例 E糖漿劑活性成份 0.25g山梨醇溶液 1.50g甘油 2.00g苯甲酸鈉 0.005g香料，Peach17.42.3169 0.0125ml凈化水，適量至 5.00ml將活性成份溶解于甘油和大部是凈化水的混合物里。然后加入苯甲酸鈉水溶液，接著加入山梨醇溶液，最后加入香料。用凈化水調(diào)到規(guī)定的體積，并充分混合。
例 F栓劑 mg/栓活性成份 250硬脂，BP(Witepsol H15 1770-Dynamit NOBEL2020在最高45℃，于蒸氣夾套鍋里將1/5的Witepsol H15熔化。活性成份用200微米的篩子篩分，加入熔化的基質(zhì)中，同時用一支裝有切割頭的銀棒攪拌(Silverson)混合，直至達到均勻分散。將混合物保持在45℃溫度，把其余的Witepsol H15加入懸浮液并攪拌，達到均勻混合。所有懸浮液通過250微米的不銹鋼篩，連續(xù)攪拌使其冷卻至40℃。在溫度38-40℃，將2.02克的該混合物填入合適的，2ml的塑膜中。讓栓劑冷卻至室溫。
例 G陰道栓 mg/栓活性成份 250脫水右旋糖 380馬鈴薯淀粉 363硬脂酸鎂 71000將上述成份直接混合，通過直接壓縮所得混合物制成陰道栓。
抗病毒活性a)抗HIV活性按照Averett，D.R.所述方法(J.Virol.Methods 23，1989，263-276)，在MT4細胞上試驗了(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的抗HIV活性，發(fā)現(xiàn)IC50值為4.0±1.4μM(10次測定的平均值)。
b)抗HBV活性由Sells等所描述和表征的人類HBV發(fā)生細胞系Hep G2，2.2.15(PNAS841005，1987和J，Virol.，622836，1988)已被證實具有許多HBV慢性感染肝細胞的特征。它被證實具有引起黑猩猩發(fā)病的感染能力。
為了試驗這類化合物抗HBV活性，用試驗化合物(50-200μM)處理單層培養(yǎng)物10天。在第3、6和10天，收集含有胞外病毒粒子DNA(Dane粒子)的上清介質(zhì)，用蛋白酶K(1mg/ml)和十二烷基磺酸鈉(1%)處理，在50℃保溫1小時。用等體積的苯酚萃取DNA，接著用氯仿萃取，然后用乙酸銨和丙醇沉淀。用Schleicher和Schuell的方法(S & S，10 Optical Ave.，Keene，NH03431，Publication＃700，1987)將DNA沉淀溶解并收集到硝化纖維素上，并用Southern所描述的方法(J.Mol.Biol.，98，503，1975)進行處理。采集細胞，在用異硫氰酸胍將細胞裂解以后得到胞內(nèi)DNA。以與處理胞外DNA相同的方式處理胞內(nèi)DNA。在用乙酸銨和丙醇沉淀之后，將胞內(nèi)DNA沉淀溶解，用限制性核酸內(nèi)切酶HindⅢ酶切，裝入瓊脂糖凝膠中，然后按Southern所述方法處理以確定復(fù)制的中間體的量。通過測定滲入培養(yǎng)基里的Dane顆粒量下降了至少100倍，以及胞內(nèi)復(fù)制中間體的類似的減少，測定了這種藥物的抗病毒活性。
用上述方式試驗了(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(N-環(huán)丙基-N-甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇，發(fā)現(xiàn)它在濃度為100μM時具有高效抗HBV活性。
權(quán)利要求
1.制備下列通式
(其中，R表示環(huán)丙氨基或N-環(huán)丙基-N-甲氨基，而A表示(1S，4R)或(1R，4S)構(gòu)型的2-環(huán)戊烯-1-甲醇-4-基)的對映體化合物及其衍生物的方法，所說化合物及其衍生物都是以基本上不含相應(yīng)的對映體的一種對映體形式存在，包括A)用一種試劑或在一定條件下處理式(Ⅱ)的對映體化合物
(其中，A如上文所定義，而Z表示在式(Ⅰ)中定義的R基因的前體基團)或它的衍生物，以便將前體Z基團轉(zhuǎn)化成需要的R基團；或B)將式(Ⅲ)的對映體化合物
(其中，A和R如上文所定義，R2表示氫或甲酰基，而R3表示氨基保護基團)或它的衍生物與一種試劑反應(yīng)，以便生成在需要的式(Ⅰ)化合物上的咪唑環(huán)，并除去R3氨基保護基團；或C)將式(Ⅳ)的對映體化合物
(其中，A和R如上文所定義，R3表示氨基保護基團)或它的衍生物與一種試劑起反應(yīng)，以便除去R3保護基團，并有選擇地、按任何需要的順序進行下列轉(zhuǎn)化的一個或兩個i)形成式(Ⅰ)化合物后，將該化合物轉(zhuǎn)化為它的衍生物；或ii)形成式(Ⅰ)化合物的衍生物后，將該衍生物轉(zhuǎn)化為式(Ⅰ)的母體化合物或其化的衍生物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中式(Ⅰ)的對映體化合物是基本上不含相應(yīng)的(1R，4S)對映體的(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙氨基)-9H-嘌呤-9基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中式(Ⅰ)的對映體化合物是基本上不含相應(yīng)的(1R，4S)對映體的(1S，4R)-順-4-〔2-氨基-6-(N-環(huán)丙基-N-甲氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，用于制備式(Ⅰ)的(1S，4R)對映體化合物的藥理學(xué)上可接受的鹽、酯或酯的鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，用于制備式(Ⅰ)的(1R，4S)對映體化合物的磷酸酯衍生物。
6.制備式(Ⅳ)(如權(quán)利要求1中所定義)的對映化合物的方法，包括將式(Ⅵ)的對映體化合物
(其中A和R3如權(quán)利要求1中所定義，而Z表示如在式(Ⅰ)中所定義的R基團的前體基團)與一種試劑或在一定條件下反應(yīng)，以便將前體基團Z轉(zhuǎn)化為需要的R基團。
7.制備式(Ⅵ)(如權(quán)利要求6中所定義)的對映體化合物的方法，包括將式(Ⅴ)的對映體化合物
(其中，A，Z和R3如權(quán)利要求6中所定義，而R2表示氫或甲?；?與一種試劑反應(yīng)，以便在需要的式(Ⅵ)化合物上形成咪唑環(huán)。
8.制備式(Ⅴ)(如權(quán)利要求7中所定義)的對映體化合物的方法，包括將式(Ⅶ)的化合物
(其中，Z，R2和R3如權(quán)利要求7中所定義，而R4表示離去基團)與式(ⅧA)或(ⅧB)的對映體化合物
或它的衍生物反應(yīng)。
9.制備式(Ⅶ)(如權(quán)利要求8中所定義)的化合物的方法，包括還原式(Ⅸ)化合物
(其中，Z、R3和R4如權(quán)利要求8中所定義)，以將NO2基團轉(zhuǎn)化為NH2基團，并有選擇地將所得到的NH2基團轉(zhuǎn)化為甲酰胺基。
全文摘要
本發(fā)明涉及6-取代嘌呤碳環(huán)核苷及其在醫(yī)療上的用途，特別是對HIV和HBV感染的治療作用。本發(fā)明環(huán)涉及藥物制劑和制備本發(fā)明化合物的方法。
文檔編號A61K31/505GK1054981SQ9110067
公開日1991年10月2日 申請日期1990年12月21日 優(yōu)先權(quán)日1989年12月22日
發(fā)明者蘇珊·瑪麗·達盧格 申請人:惠爾康基金會集團公司