專(zhuān)利名稱(chēng)：：TNF－α抑制劑的制作方法發(fā)明的領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種腫瘤壞死因子(TNF-α)產(chǎn)生或分泌的抑制劑，它含有作為活性組分的一種喹諾酮化合物或其可藥用的鹽。
背景技術(shù)：
：已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了各式各樣的細(xì)胞因子，它們是一種抑制生物功能表現(xiàn)(例如生物體內(nèi)的免疫應(yīng)答，炎癥反應(yīng)和造血功能)的蛋白質(zhì)，其結(jié)構(gòu)和活性已逐漸弄清。隨著這一澄清，還明白了它們不僅對(duì)免疫系統(tǒng)，而且對(duì)于許多生物功能也有影響，同時(shí)還與生物體的生殖、分化、體內(nèi)穩(wěn)態(tài)和病理生理學(xué)很有關(guān)系。在這些細(xì)胞因子之中，已發(fā)現(xiàn)TNF是一種抗腫瘤細(xì)胞因子并預(yù)期可用作抗腫瘤藥劑。但是，后來(lái)發(fā)現(xiàn)它與一種惡病質(zhì)誘發(fā)因子惡液質(zhì)素完全相同。據(jù)報(bào)道，TNF具有刺激諸如IL-1等其它細(xì)胞因子產(chǎn)生的活性，成纖維細(xì)胞增殖活性，內(nèi)毒素休克誘發(fā)活性，通過(guò)增多細(xì)胞間粘附分子(ICMA-1，ICAM-2)或內(nèi)皮-白細(xì)胞粘附分子-1(ELAM-1)而促進(jìn)白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞粘附的活性，骨吸收活性和誘發(fā)關(guān)節(jié)炎的活性(例如軟骨分解活性)〔參見(jiàn)，Beutler.B等，自然，316，552-554(1985)；Peeter，C.等，臨床研究雜志，78，1694-1700(1986)；Kurt-Jones，E.A.等，免疫學(xué)雜志，139，2317-2324(1987)；Bevilacqua，M.P.等，科學(xué)，241，1160-1165(1989)；Akatu.K和Suda，T.，醫(yī)學(xué)實(shí)踐，8(9)，1393-1396(1991)〕。另外還報(bào)道說(shuō)，在細(xì)菌或寄生蟲(chóng)傳染病中，血液和腦脊液中含有的TNF濃度較高〔參見(jiàn)，Mituyama，M.醫(yī)學(xué)的進(jìn)展(日)，159(8)，467-470(1971)；和Nakao，M.，醫(yī)學(xué)的進(jìn)展(日)，159(8)，471-474(1991)〕。還有報(bào)道說(shuō)，在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中，關(guān)節(jié)液和血清具有TNF-α活生〔參見(jiàn)Saxne.T.等，關(guān)節(jié)炎與風(fēng)濕病，31，1041(1988)；Chu，C.Q.等，關(guān)節(jié)炎與風(fēng)濕病，34，1125-1132(1191)；Macnaul，K.L等，免疫學(xué)雜志，145，4154-4166(1990)；Brennan，F(xiàn).M.等免疫學(xué)雜志，22，1907-1912(1992)；和Brennan，F(xiàn).M.等，英國(guó)風(fēng)濕病雜志，31，293-298(1992)〕。還有報(bào)道說(shuō)，在患有嚴(yán)重的呼吸道疾病成人呼吸窘迫綜合癥(ARDS)的患者的粘液中，TNF的含量增高〔參見(jiàn)Millar，A.B.等，自然，324，73(1986)〕，而且TNF還與病毒性肝炎的嚴(yán)重性有關(guān)〔參見(jiàn)Mato，Y等，柳葉刀，ii，72-74(1986)〕。還報(bào)道說(shuō)，在心肌局部缺血(如急性心肌梗塞形成)的情形下TNF-α的血液濃度升高〔參見(jiàn)Latini.R等，心血管藥理學(xué)雜志，23，1-6(1994)〕，并提出TNF-α與這類(lèi)疾病有關(guān)〔參見(jiàn)Lefer，A.M等，科學(xué)，249，61-64(1990)〕。近來(lái)有報(bào)道說(shuō)，TNF-α抑制心肌的收縮〔參見(jiàn)Finkel，M.S.等，科學(xué)，257，387-389(1992)；和Pagani，D.F.等，臨床研究雜志，90，389-398(1992)〕。但是，從未研究出一種對(duì)于例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、內(nèi)毒素休克或ARDS等上述各種疾病有滿意效果的化學(xué)治療藥物，只是從抗病的角度曾用過(guò)某些類(lèi)固醇、消炎藥、血小板凝集抑制劑和抗生素。因?yàn)橐呀?jīng)提出這些疾病與TNF-α的濃度及活性增高有關(guān)，所以近來(lái)曾試圖使用TNF-α的抗體來(lái)治療這些疾病，但未獲得滿意結(jié)果。因此，希望能找到和研制出一種通過(guò)抑制TNF-α的加速產(chǎn)生或分泌的新機(jī)制治療這些疾病的新型藥物。另外，后文所說(shuō)明的式〔I〕喹諾酮化合物作為強(qiáng)心劑公開(kāi)于美國(guó)專(zhuān)利5,053,514中，該專(zhuān)利還公開(kāi)了它的制備方法。還知道這些化合物具有增強(qiáng)心肌收縮的活性(即，增強(qiáng)收縮力活性)，冠狀血流增高活性，降低血壓活性，抑制由去甲腎上腺素誘發(fā)的血管收縮的活性，以及消炎作用(參見(jiàn)上述美國(guó)專(zhuān)利以及美國(guó)專(zhuān)利5,266,577和5,385,914)，可以用來(lái)作為血栓形成治療劑、磷酸二酯酶抑制劑、大腦循環(huán)促進(jìn)劑(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利5,401,754)，抗心律失常藥劑(見(jiàn)WO94/06427)，以及作為抗組胺藥(見(jiàn)日本專(zhuān)利第一次出版物(公開(kāi))No.56-8319)。還有報(bào)道說(shuō)，屬于式〔I〕喹箬酮類(lèi)的一種化合物，即6-〔3-(3，4-二甲氧基芐基)氨基-2-羥基丙氧基〕喹諾酮，對(duì)于患晚期心力衰竭的患者有血液動(dòng)力作用(見(jiàn)，心力衰竭雜志，第一卷第一期，57-62頁(yè)，1994年10月)。但是，這些文獻(xiàn)未提出，甚至未暗示這類(lèi)喹諾酮化合物具有抑制TNF-α的產(chǎn)生或分泌的作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明人研制出一種具有所要求的活性并適合治療上述疾病的新的TNF-α抑制劑，并且發(fā)現(xiàn)，如下所示的式〔I〕喹諾酮化合物，特別是6-〔3-(3，4-二甲氧基芐基)氨基-2-羥基丙氧基〕喹諾酮或其可藥用的鹽可作為T(mén)NF-α抑制劑使用。其中R1是氫原子或低級(jí)烷基，R2是在苯環(huán)上任選存在1-3個(gè)低級(jí)烷氧基取代基的苯基(低級(jí))烷基。本發(fā)明的目的之一是提供一種新的TNF-α抑制劑。本發(fā)明的另一目的是提供已知的式〔I〕喹諾酮化合物及其可藥用鹽作為T(mén)NF-α抑制劑的一種新用途。本發(fā)明的又一目的是提供一種預(yù)防和治療由于TNF-α加速產(chǎn)生或分泌而誘發(fā)的各種疾病的方法，作法是使患有這類(lèi)疾病的人和其它動(dòng)物服用有效量的喹諾酮化合物(I)或其可藥用的鹽。本發(fā)明的TNF-α抑制劑可用于預(yù)防和治療由于TNF-α加速產(chǎn)生或分泌而伴生的各種疾病，特別是類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、內(nèi)毒素休克、成人呼吸窘迫綜合癥(ARDS)、熱灼傷、哮喘、作為一種心肌局部缺血綜合癥的心肌梗塞形成、急性期病毒性心肌癥、自發(fā)擴(kuò)張性心肌病。它也可用在冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)和人工心臟或肺的使用中。式(I)的各個(gè)基團(tuán)意義如下“低級(jí)烷基”指的是有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等?！暗图?jí)烷氧基”表示有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。“苯環(huán)上可任選存在1-3個(gè)低級(jí)烷氧基取代基的苯基(低級(jí))烷基”代表一個(gè)苯基烷基，其中烷基部分是有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，在苯環(huán)上有1-3個(gè)1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基取代基，例如芐基、2-苯基乙基、1-苯基乙基、3-苯基丙基、4-苯基丁基、1，1-二甲基-2-苯基乙基、5-苯基戊基、6-苯基己基、2-甲基-3-苯基丙基、2-(3-甲氧基苯基)乙基、1-(4-甲氧基苯基)乙基、2-甲氧基芐基、3-(2-乙氧基苯基)丙基、4-(3-乙氧基苯基)丁基、1，1-二甲基-2-(4-乙氧基苯基)乙基、5-(4-異丙氧基苯基)戊基、6-(4-己氧基苯基)己基、3，4-二甲氧基芐基、3，4，5-三甲氧基芐基、2，5-二甲氧基芐基等。本發(fā)明化合物包括式(I)化合物，其中的R1是氫原子，R2是苯環(huán)上任選有1-3個(gè)低級(jí)烷氧取代基的苯基(低級(jí))烷基，以及這樣的式(I)化合物，其中R1是低級(jí)烷基，R2是苯環(huán)上任選有1-3個(gè)低級(jí)烷氧取代基的苯基(低級(jí))烷基。在式(I)的喹諾酮化合物中，堿性化合物可以容易地與常規(guī)的可藥用酸形成鹽。這些酸包括例如無(wú)機(jī)酸，例如硫酸，硝酸、鹽酸、磷酸、氫溴酸等，以及有機(jī)酸，例如乙酸、對(duì)甲苯磺酸、乙磺酸、草酸、馬來(lái)酸、富馬酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸、苯甲酸等。此外，在式(I)的喹諾酮化合物中，酸性化合物可以容易地與常規(guī)的可藥用堿性化合物形成鹽。這些堿性化合物包括例如金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣等，堿金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽，例如碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈉等。本發(fā)明化合物還包括它們的旋光異構(gòu)體。本發(fā)明式(I)化合物及其鹽以常見(jiàn)的藥物制劑的形式用于人類(lèi)及其它動(dòng)物。這些制劑用常規(guī)的稀釋劑或載體制備，例如填料、增稠劑、粘合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、表面活性劑、潤(rùn)滑劑等。藥物制劑可以根據(jù)所要求的用途選擇各種不同的形式，典型的形式是片劑、丸劑、粉劑、溶液、懸浮液、乳劑、粒劑、膠囊劑、栓劑、注射劑(溶液、乳液、懸浮液等)等。為了形成片劑，使用常規(guī)的載體，例如賦形劑(如乳糖、白糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸鈣、高嶺土、結(jié)晶纖維素、硅酸等)，粘合劑(如水、乙醇、丙醇、單糖漿、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明膠溶液、羧甲基纖維素、蟲(chóng)膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等)，崩解劑(如干淀粉、精氨酸鈉、瓊脂粉、昆布糖粉、碳酸氫鈉、碳酸鈣、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、十二烷基硫酸鈉、硬脂酸單甘油酯、淀粉、乳糖等)、崩解抑制劑(如白糖、硬脂精、可可脂、氫化油等)、吸收促進(jìn)劑(如季銨堿、十二烷基硫酸鈉等)、潤(rùn)濕劑(如甘油、淀粉等)、吸附劑(如淀粉、乳糖、高嶺土、膨潤(rùn)土、膠體硅酸鹽等)、潤(rùn)滑劑(如純化的滑石粉、硬脂酸酯、硼酸粉末、聚乙二醇等)，以及類(lèi)似物質(zhì)。另外，片劑也可以是常規(guī)的包衣片劑的形式，例如糖包衣片劑、明膠包衣片劑、腸溶包衣片劑、薄膜包衣片劑或者二層或三層片劑。在丸劑的制備中，載體包括任何常用的載體，例如，賦形劑(如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、高嶺土、滑石粉等)、粘合劑(如阿拉伯樹(shù)膠粉、黃蓍膠粉、明膠、乙醇等)、崩解劑(如昆布糖，瓊脂等)及類(lèi)似物質(zhì)。在栓劑的制備中，載體包括任何常規(guī)的載體，例如，聚乙二醇、可可脂、高級(jí)醇、高級(jí)醇酯、明膠、半合成的甘油酯及類(lèi)似物質(zhì)。膠囊可以通過(guò)將本發(fā)明化合物與上述載體的混合物以常用方式裝入硬明膠膠囊或軟膠囊中來(lái)制備。在注射劑的制備中，將溶液、乳液或懸浮液滅菌并最好制成與血液等滲透壓。在這些溶液、乳液和懸浮液的制備中，使用常規(guī)的稀釋劑，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、聚烴氧基化的異硬脂醇、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯及類(lèi)似物質(zhì)。在這種情形中，藥物制劑也可以與數(shù)量足以使其等滲透的氯化鈉、葡萄糖或甘油相摻混，并且也可以摻入常規(guī)的增溶劑、緩沖劑、麻醉劑。另外，藥物制劑中還可以任選地?fù)饺胫珓?、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑以及需要時(shí)的其它藥物。要摻入到本發(fā)明藥物組合物中的活性化合物的數(shù)量不是定值，而是可以在很寬的范圍內(nèi)選擇，但通常是組合物重量的1-70％，優(yōu)選約1-30％。本發(fā)明的藥物組合物可以用任何方式給藥，合適的用藥方法可以根據(jù)制劑的不同形式，患者的年齡、性別及其它情況，疾病的嚴(yán)重程度等決定。例如，片劑、丸劑、溶液、懸浮液、乳液、粒劑和膠囊經(jīng)口服用藥、注射劑則單獨(dú)地或與一種常用的輔助液體(例如，葡萄糖、氨基酸溶液)一起靜脈內(nèi)用藥，如果需要，還可任選地單獨(dú)地以肌內(nèi)、皮內(nèi)、皮下或腹膜內(nèi)等途徑單獨(dú)用藥。栓劑由直腸內(nèi)途徑給藥。本發(fā)明藥物組合物的劑量可以根據(jù)用途，患者的年齡、性別及其它狀況，疾病的嚴(yán)重程度等選擇，但經(jīng)常是每1kg患者體重每天約0.1-10mg本發(fā)明活性化合物的范圍。此日劑量可以分成每天1-4次用藥。每個(gè)劑量單位含有的活性化合物優(yōu)選為約1-200mg。實(shí)施本發(fā)明的最佳模式本發(fā)明用以下藥理實(shí)驗(yàn)和制備例示例說(shuō)明。藥理實(shí)驗(yàn)利用6-〔3-(3，4-二甲氧基芐基)氨基-2-羥基丙氧基〕喹諾酮(以后稱(chēng)作“化合物1”)作為試驗(yàn)化合物，進(jìn)行以下試驗(yàn)。將得自健康志愿者的10％肝素化外周血、試驗(yàn)化合物(30μg/ml)和脂多糖(LPS，3.3μg/ml)加到RPMI-1640培養(yǎng)基(補(bǔ)充了100單位/ml的青霉素和0.1μg/ml的鏈霉素)中，該混合物在5％CO2氣氛下于37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。離心收集培養(yǎng)物的上清液。此上清液作為試驗(yàn)樣品使用。TNF-α用酶免疫分析法(EIA)測(cè)定。試驗(yàn)樣品中的TNF-α量根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定。檢測(cè)極限為20pg/ml。結(jié)果列在下表中。</tables>制備例1用以下組分制備片劑組分?jǐn)?shù)量6-〔3-(3，4-二甲氧基芐基)氨基-2-羥基丙氧基〕喹諾酮5mg淀粉132mg硬脂酸鎂18mg乳糖45mg總計(jì)200mg按照常規(guī)方法制備片劑，每片藥片中含有上述數(shù)量的以上組分。制備例2用以下組分制備注射劑組分?jǐn)?shù)量6-〔3-(3，4-二甲氧基芐基)氨基-2-羥基丙氧基〕喹諾酮500mg聚乙二醇(分子量4000)0.3g氯化鈉0.9g聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯0.4g焦亞硫酸鈉0.1g對(duì)羥苯甲酸甲酯0.18g對(duì)羥苯甲酸丙酯0.02g注射用蒸餾水100ml將以上的對(duì)羥苯甲酸酯、焦亞硫酸鈉和氯化鈉藉助80℃下攪拌溶在以上蒸餾水中。將所形成的溶液冷卻到40℃，向其中依次溶入本發(fā)明活性化合物、聚乙二醇和聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯，向其中加入注射用蒸餾水以便調(diào)節(jié)最終體積。將溶液用濾紙過(guò)濾滅菌，每1ml溶液裝入一只安瓿瓶中，得到所要的注射液。工業(yè)應(yīng)用本發(fā)明的TNF-α抑制劑可用于預(yù)防和治療由于TNF-α的加速產(chǎn)生或分泌而誘發(fā)的各種疾病，例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，內(nèi)毒素休克，成人呼吸窘迫綜合癥，熱灼傷，哮喘，以及心肌硬塞形成、急性期病毒性心肌病等。權(quán)利要求1.一種抑制TNF-α的產(chǎn)生或分泌的方法，該方法包括對(duì)治療對(duì)象施用有效量的式(I)喹諾酮化合物或其可藥用的鹽其中R1是氫原子或低級(jí)烷基，R2是一個(gè)苯環(huán)上任選有1-3個(gè)低級(jí)烷氧取代基的苯基(低級(jí))烷基。2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中活性成分是6-〔3-(3，4-二甲氧基芐基)氨基-2-羥基丙氧基〕喹諾酮或其可藥用的鹽。3.一種預(yù)防和治療由于TNF-α加速分泌而誘發(fā)的疾病的方法，該方法包括對(duì)治療對(duì)象施用有效量的式〔I〕喹諾酮化合物或其可藥用的鹽其中R1是氫原子或低級(jí)烷基，R2是苯環(huán)上任選有1-3個(gè)低級(jí)烷氧取代基的苯基(低級(jí))烷基。4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中由于TNF-α加速分泌而誘發(fā)的疾病是選自類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、內(nèi)毒素休克、成人呼吸窘迫綜合癥、熱灼燒和哮喘的一種疾病。5.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中由于TNF-α加速分泌而誘發(fā)的疾病是選自心肌梗塞形成或急性期病毒性心肌病的一種疾病。6.根據(jù)權(quán)利要求4或5的方法，其中的活性成分是6-〔3-(3，4-二甲氧基芐基)氨基-2-羥基丙氧基〕喹諾酮或其可藥用的鹽。7.式(I)喹諾酮化合物或其可藥用鹽在制備TNF-α抑制劑方面的應(yīng)用其中R1是氫原子或低級(jí)烷基，R2是在苯環(huán)上任選有1-3個(gè)低級(jí)烷氧取代基的苯基(低級(jí))烷基。8.根據(jù)權(quán)利要求7的應(yīng)用。其中的活性化合物是6-〔3-(3，4-二甲氧基芐基)氨基-2-羥基丙氧基〕喹諾酮或其可藥用的鹽。全文摘要一種方法,用于預(yù)防和治療由于TNF－α加速分泌而誘發(fā)的疾病,例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、內(nèi)毒素休克、成人呼吸窘迫綜合癥、熱灼傷、哮喘、心肌梗塞形成、急性期病毒性心肌癥等,該方法包括對(duì)治療對(duì)象施用一種式[Ⅰ]的喹諾酮化合物或其可藥用的鹽:其中R文檔編號(hào)A61K31/4704GK1177296SQ9519773公開(kāi)日1998年3月25日申請(qǐng)日期1995年12月18日優(yōu)先權(quán)日1995年1月9日發(fā)明者森豐樹(shù),富永道明,小野幸久申請(qǐng)人:大制藥株式會(huì)社