苯丙胺類成癮小鼠的學(xué)習(xí)與記 憶有明顯的促進(jìn)作用，反映坎地沙坦具有治療甲基苯丙胺成癮的作用，說明坎地沙坦可用 于戒斷甲基苯丙胺的成癮，以開發(fā)作為新的戒毒藥物。
【附圖說明】
[0040] 圖1 :大鼠注射甲基苯丙胺后產(chǎn)生的行為敏化模型圖；
[0041] 圖2 :坎地沙坦腹腔給藥對甲基苯丙胺成癮大鼠自發(fā)行為影響的結(jié)果圖；
[0042] 圖3 :坎地沙坦腹腔給藥對甲基苯丙胺成癮大鼠溫度影響的結(jié)果圖；
[0043] 圖4 :坎地沙坦腹腔給藥對甲基苯丙胺成癮大鼠的水迷宮訓(xùn)練影響的結(jié)果圖； [0044] 圖5 :大鼠甲基苯丙胺自身給藥模型圖；
[0045] 圖6 :坎地沙坦腹腔給藥對甲基苯丙胺成癮大鼠甲基苯丙胺注射量的影響；
[0046] 圖7 :坎地沙坦腹腔給藥對甲基苯丙胺成癮大鼠自身給藥動機(jī)的影響；
[0047] 圖8 :坎地沙坦對甲基苯丙胺大鼠的氧化應(yīng)激各參數(shù)指標(biāo)的影響結(jié)果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0048] 以下通過結(jié)合附圖及實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0049] 本發(fā)明實(shí)施例中所使用的甲基苯丙胺為標(biāo)準(zhǔn)品，來自寧波市微循環(huán)與莨菪類藥 研宄所，采用靜脈注射給藥方式；坎地沙坦購自百靈威科技有限公司，溶于二甲基亞砜 (DMS0)，并采用腹腔給藥。
[0050] 實(shí)施例1坎地沙坦給藥對于甲基苯丙胺誘導(dǎo)的大鼠自發(fā)活動行為有抑制作用
[0051] 自發(fā)活動試驗(yàn)是一個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)安全藥理學(xué)評價(jià)及神經(jīng)科學(xué)學(xué)科研宄的常用 方法，能為包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)安全藥理學(xué)研宄在內(nèi)的多種藥理學(xué)研宄目的提供參數(shù)的重要 方法。
[0052] 方法：大鼠連續(xù)14天腹腔注射甲基苯丙胺，然后每天讓其在自發(fā)活動箱中作自發(fā) 活動，觀察大鼠行為。第15天將所有大鼠分為4組，每組8只，分別為生理鹽水組、低劑量 坎地沙坦組、高劑量坎地沙坦組和溶媒組：
[0053] ①生理鹽水組：測試前腹腔給予0.37ml生理鹽水；②低劑量組：測試前2h灌胃給 予5mg/kg的坎地沙坦0. 37ml，（其中，5mg/kg坎地沙坦的配制方法為1. 5g坎地沙坦溶解在 0. 3ml的DMSO中，具體注射劑量按大鼠體重為計(jì)）；③高劑量組：測試前2h灌胃給予10mg/ kg坎地沙坦0. 37ml，（其中，10mg/kg坎地沙坦的配制方法為3g坎地沙坦溶解在0. 3ml的 DMS0中，具體注射劑量按大鼠體重為計(jì)）；④溶媒組：測試前2h灌胃注射0. 37mlDMS0 ;觀 察4組的小鼠自發(fā)活動，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，
[0054] 結(jié)果如圖（1和2)，從圖1可以看出，隨著連續(xù)不斷的注射甲基苯丙胺，大鼠產(chǎn)生了 行為敏化，其自發(fā)活動性增強(qiáng)。
[0055] 從圖2中可以看出，高劑量坎地沙坦組的自發(fā)活動與METH組相比，自發(fā)活動反應(yīng) 明顯降低（與METH組比較，p值〈0. 05)，表明坎地沙坦給藥對于甲基苯丙胺誘導(dǎo)的大鼠自 發(fā)活動行為有明顯的抑制作用。低劑量坎地沙坦組和跟METH組無明顯差別（與METH組 比較，P值>0.05)。而溶媒組和生理鹽水組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（與生理鹽水比，？值> 0. 05) 〇
[0056] 從圖1和圖2的結(jié)果可以看出中樞興奮藥物甲基苯丙胺可以明顯增加自主的活動 而減少探宄行為，一定劑量的坎地沙坦可以減少探宄行為而影響自主行為。
[0057] 實(shí)施例2坎地沙坦對于大鼠吸甲基苯丙胺后的溫度有調(diào)節(jié)作用
[0058] 方法：將大鼠進(jìn)行吸食14天的甲基苯丙胺后，分為四組如實(shí)施例1，測量大鼠體 溫，結(jié)果如下圖：
[0059] 從圖3觀察到：Saline組平均體溫35. 2 °C，DMS0組平均體溫35. 0 °C， METH+lOCandesartan組平均體溫 35. 4 °C，METH+lOCandesartan組平均體溫 35. 3 °C， METH+DMS0組平均體溫36. 6°C，與METH組相比，高劑量組和低劑量組都使溫度明顯降低 (與METH組比較，p值〈0. 05)，表明坎地沙坦對于大鼠吸藥后的溫度有明顯的調(diào)節(jié)作用。同 時(shí)，高劑量組和低劑量組跟生理鹽水差別不大，所以坎地沙坦能使大鼠的體溫更接近正常 值。（與生理鹽水組比較，P值> 0. 05)，同時(shí)也說明坎地沙坦能緩解因中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變 引起體溫調(diào)節(jié)中樞的異常而產(chǎn)生的發(fā)熱。
[0060] 實(shí)施例3坎地沙坦對于大鼠吸甲基苯丙胺后的學(xué)習(xí)記憶的影響
[0061](1)定位航行實(shí)驗(yàn)（placenavigation)，用于測量小鼠對水迷宮學(xué)習(xí)和記憶的獲 取能力。實(shí)驗(yàn)歷時(shí)4天，上、下午各訓(xùn)練1次，共計(jì)8次。實(shí)驗(yàn)觀察和記錄小鼠尋找并爬上 平臺的路線圖及所需時(shí)間，即記錄其潛伏期和游泳速度。
[0062] 從圖4觀察到：與METH組相比，高劑量組的潛伏期明顯降低（與METH組比較，p值 〈0. 05):低劑量組的潛伏期和METH組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p值> 0. 05,高劑量組更接近生理鹽水 組，P值>0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明高劑量組給藥對于大鼠水迷宮有明顯的促進(jìn)作用，坎 地沙坦能改善大鼠吸甲基苯丙胺后的學(xué)習(xí)記憶能力。
[0063] 實(shí)施例4坎地沙坦對甲基苯丙胺成癮大鼠自身給藥的抑制作用
[0064] (1)建立穩(wěn)定的大鼠甲基苯丙胺自身給藥模型
[0065] 經(jīng)典的大鼠甲基苯丙胺甲基苯丙胺自身給藥模型可以很好的模擬臨床上吸毒患 者的甲基苯丙胺吸食行為，大鼠經(jīng)過訓(xùn)練可以產(chǎn)生對甲基苯丙胺的自我給藥，同時(shí)訓(xùn)練過 程中不斷上升的對甲基苯丙胺的行為反應(yīng)率和給藥量可以反映吸毒患者從一開始接觸甲 基苯丙胺到大量吸食甲基苯丙胺成癮的這樣一個(gè)過程。
[0066]我們采用如下方法來建立大鼠的自身給藥模型：首先，SD大鼠進(jìn)行頸靜脈插管手 術(shù)，在右頸靜脈插入一段PE管，并經(jīng)背部穿出體外，手術(shù)后抗菌和恢復(fù)一周以上。隨后，大 鼠分別在自身給藥操作籠內(nèi)進(jìn)行訓(xùn)練，每次訓(xùn)練前連通大鼠背部的PE管與操作籠內(nèi)的甲 基苯丙胺注射系統(tǒng)；操作籠內(nèi)設(shè)左右兩個(gè)鼻觸器，其中一個(gè)為有效鼻觸器，大鼠觸鼻一下有 效鼻觸器將獲得一針甲基苯丙胺注射，同時(shí)操作籠內(nèi)的籠燈亮起（作為一種伴藥的線索）， 計(jì)算機(jī)記錄；另外一個(gè)為無效鼻觸器，大鼠觸鼻一下無效鼻觸器沒有任何甲基苯丙胺注射 和燈光，僅計(jì)算機(jī)記錄。兩次甲基苯丙胺注射之間有20秒的不應(yīng)期，期間觸鼻有效鼻觸器 將不會有甲基苯丙胺注射和燈光，僅計(jì)算機(jī)記錄，每天的甲基苯丙胺注射針數(shù)限制為50針 (防止過量注射死亡）。32個(gè)操作籠采用大型服務(wù)器的計(jì)算機(jī)同時(shí)控制，自身給藥訓(xùn)練軟件 為自主編寫的AniLabV652,訓(xùn)練程序?yàn)楣潭ū嚷实腇R1，即大鼠觸鼻一次有效鼻觸器獲得 一針甲基苯丙胺注射。大鼠經(jīng)過3天，每天4小時(shí)的訓(xùn)練后，有效觸鼻反應(yīng)率和注射量均明 顯上升，在最后幾天趨于穩(wěn)定，從而形成了穩(wěn)定的甲基苯丙胺成癮狀態(tài)（見圖5)。
[0067] (2)坎地沙坦對大鼠甲基苯丙胺自身給藥的抑制作用
[0068] 大鼠經(jīng)過3天訓(xùn)練達(dá)到穩(wěn)定的甲基苯丙胺成癮狀態(tài)以后，隨后將大鼠分成四組 (具體分組方法如實(shí)施例1)而進(jìn)行2小時(shí)的甲基苯丙胺的自身給藥測試，方法跟之前的訓(xùn) 練方法一樣，程序也是采用固定比率F...