疫苗組合物及其在刺激免疫反應(yīng)中的用圖
【專利說明】
[0001] 本申請(qǐng)是2008年2月28日提交的題為"新的方法和組合物"的國(guó)家申請(qǐng)?zhí)枮?200880014359. 7 (PCT/EP2008/052448)的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及新的疫苗組合物及其用于刺激哺乳動(dòng)物尤其人中的免疫反應(yīng)的用途， 特別是用于預(yù)防和治療病原體所致的感染。具體地，本發(fā)明涉及能夠在受試者中誘導(dǎo)CD4+ 和CD8+T細(xì)胞反應(yīng)以及抗體反應(yīng)而不依賴于復(fù)雜的初免-加強(qiáng)（prime-boost)方案的組合 物。
【背景技術(shù)】
[0003] 十九世紀(jì)晚期開始，滅活的整個(gè)有機(jī)體就已成功地用于疫苗接種。近來，采用了 涉及給予提取物、亞基、類毒素和莢膜多糖的疫苗。自從可以使用基因工程技術(shù)以來，重組 蛋白的使用成為了受歡迎的策略，它消除了與使用來自天然來源的純化蛋白相關(guān)的一些風(fēng) 險(xiǎn)。
[0004] 早期的疫苗方法基于在體內(nèi)刺激免疫反應(yīng)的某些方面的蛋白的給藥。隨后理解到 還可以通過給予可以被宿主轉(zhuǎn)錄和翻譯成免疫原性蛋白的DNA來增加免疫反應(yīng)。
[0005] 哺乳動(dòng)物免疫反應(yīng)具有兩個(gè)重要的組分：體液反應(yīng)和細(xì)胞介導(dǎo)的反應(yīng)。體液反應(yīng) 包括循環(huán)抗體的產(chǎn)生，該循環(huán)抗體結(jié)合其所特異性的抗原，從而中和抗原并有助于其隨后 的清除，這種清除是通過涉及其他細(xì)胞毒性或吞噬性細(xì)胞的過程達(dá)成的。B細(xì)胞負(fù)責(zé)產(chǎn)生抗 體（漿B細(xì)胞），并保持免疫性體液記憶（記憶B細(xì)胞），即，在第一次接觸抗原（例如，通 過疫苗接種）后若干年識(shí)別該抗原的能力。細(xì)胞介導(dǎo)的反應(yīng)涉及許多不同類型的細(xì)胞的相 互影響，尤其是T細(xì)胞。T細(xì)胞分為一些不同的亞型，主要是⑶4+和⑶8+細(xì)胞。
[0006] 諸如巨噬細(xì)胞和樹突細(xì)胞等抗原呈遞細(xì)胞（APC)充當(dāng)免疫系統(tǒng)的守衛(wèi)，屏蔽機(jī)體 與外來抗原。當(dāng)APC檢測(cè)到胞外的外來抗原時(shí)，將這些抗原吞噬（吞入）到APC內(nèi)，這些抗 原在此被加工成較小的肽。隨后，這些肽被呈遞到APC表面的II類主要組織相容性復(fù)合體 (MHC II)上，它們?cè)诖丝梢员槐磉_(dá)⑶4表面分子的抗原特異性T淋巴細(xì)胞（CD4+T細(xì)胞） 識(shí)別。當(dāng)CD4+T細(xì)胞在存在其他足夠的共刺激信號(hào)的條件下，識(shí)別它們?cè)贛HC II分子上的 特異性抗原時(shí)，它們被激活，并分泌一批細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子隨后激活其他組的免疫系 統(tǒng)。一般地，⑶4+T細(xì)胞根據(jù)抗原識(shí)別后它們所產(chǎn)生的反應(yīng)類型被分為1類輔助性T細(xì)胞 (Thl)或2類輔助性T細(xì)胞（Th2)亞型。在識(shí)別肽-MHC II復(fù)合體后，Thl⑶4+T細(xì)胞分泌 白細(xì)胞介素和細(xì)胞因子（如干擾素Y)，從而激活巨噬細(xì)胞釋放有毒化學(xué)物質(zhì)，如一氧化氮 和活性氧/氮。IL-2和TNF-a也一般被分為Thl細(xì)胞因子。相比之下，Th2⑶4+細(xì)胞一 般分泌如IL-4、IL-5或IL-13等白細(xì)胞介素。
[0007] 輔助性CD4+T細(xì)胞的其他功能包括為激活B細(xì)胞產(chǎn)生和釋放抗體提供幫助。它們 還可以參與抗原特異性⑶8+T細(xì)胞的激活，⑶8+T細(xì)胞是除⑶4+T細(xì)胞之外的另一主要的T 細(xì)胞亞型。
[0008] 當(dāng)在存在適當(dāng)?shù)墓泊碳ば盘?hào)的條件下，⑶8+T細(xì)胞特異性的肽由I類主要組織相 容性（MHC I)分子呈遞到宿主細(xì)胞表面時(shí)，⑶8+T細(xì)胞識(shí)別它們。為了呈遞到MHC I分子 上，外來抗原需要直接進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)（胞質(zhì)溶膠或核），如在病毒或胞內(nèi)細(xì)菌直接穿過宿主細(xì) 胞或在DNA疫苗接種后的情況下。在細(xì)胞內(nèi)，抗原被加工成小肽，這些小肽將被加載到MHC I分子上，重新定位到細(xì)胞表面。在激活后，⑶8+T細(xì)胞分泌一批細(xì)胞因子，如干擾素y，它 們激活巨噬細(xì)胞和其他細(xì)胞。具體地，CD8+T細(xì)胞的一個(gè)亞組在激活后分泌溶解性和細(xì)胞 毒性分子（如，粒酶（granzyme)、穿孔素）。這種CD8+T細(xì)胞被稱為細(xì)胞毒性T細(xì)胞。
[0009] 最近，描述了抗原呈遞的另一途徑，該途徑涉及將胞外抗原或其片段加載到MHC I 復(fù)合體上，它被稱為"交叉呈遞"。
[0010] T細(xì)胞反應(yīng)的性質(zhì)還受疫苗中所使用的佐劑的組成的影響。例如，已經(jīng)顯 示含有MPL&QS21的佐劑能激活Thl CD4+T細(xì)胞分泌IFN- 丫（Stewart等人Vacci ne. 2006, 24(42-43) : 6483-92)。
[0011] 盡管已熟知佐劑在增強(qiáng)對(duì)蛋白抗原的免疫反應(yīng)中有作用，但它們一般不與DNA或 DNA基載體疫苗接種結(jié)合使用。有一些關(guān)于佐劑為何不與DNA載體基疫苗結(jié)合使用的假說。 確實(shí)，佐劑和載體之間的干涉可能對(duì)它們的穩(wěn)定性有影響。此外，人們可能預(yù)測(cè)到在減毒載 體中添加佐劑能增加此產(chǎn)品誘導(dǎo)的反應(yīng)原性。最后，增加DNA載體基疫苗的免疫原性可以 導(dǎo)致抗載體本身的中和免疫反應(yīng)增強(qiáng)，從而排除了相同載體基疫苗隨后注射的任何加強(qiáng)效 應(yīng)。事實(shí)上，在涉及防止惡性皰原蟲（P.falciparum)感染中，Jones等人（2001，J infect Diseases 183, 303-312)已報(bào)道了在DNA的初次免疫后組合DNA、重組蛋白和佐劑作為加強(qiáng) 組合物的不利后果。確實(shí)，在加強(qiáng)組合物只含有蛋白和佐劑的群組中寄生蟲血癥的水平顯 著較低。推斷在此方法中使用DNA、重組蛋白和佐劑的組合不利地影響了寄生蟲血癥和抗體 反應(yīng)的后果。
[0012] 另一方面，有加佐劑的DNA基載體疫苗效力增強(qiáng)的報(bào)道（Ganne等人 Vaccine (1994) 12(1301190-1196)。具體地，通過添加油佐劑的復(fù)制缺陷型腺病毒載體疫苗 效力的增強(qiáng)與較高的抗體水平相關(guān)，但是未報(bào)道對(duì)CD4和CD8 T細(xì)胞反應(yīng)的影響。
[0013] W02007/016715公開了非致病性病毒作為佐劑的用途。它未提出所述病毒可以含 有任何異源多核苷酸。
[0014] 通常認(rèn)為CD4+和CD8+細(xì)胞兩者的刺激都是最佳保護(hù)性免疫所需的，尤其是在某 些疾病中，如HIV感染/AIDS。為預(yù)防性或治療性地誘導(dǎo)最佳的免疫反應(yīng)，需要刺激CD4+和 ⑶8+細(xì)胞兩者。這是"初免-加強(qiáng)"疫苗接種策略的主要目的之一，其中蛋白基疫苗（主要 誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞）與DNA載體基疫苗（即，裸DNA、病毒載體或胞內(nèi)細(xì)菌載體，如李斯特菌 (listeria))(主要誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞）的交替給藥或相反情況很可能激活CD4+和CD8+T細(xì) 胞反應(yīng)。
[0015] 然而，盡管"初免-加強(qiáng)"疫苗策略一般可能產(chǎn)生更強(qiáng)或更平衡的反應(yīng)，不止一次， 且當(dāng)然是超過兩次接種的需要可能是繁瑣的或甚至不可能的，尤其是在發(fā)展中國(guó)家的大量 免疫程序中。
[0016] 此外，如上面已經(jīng)提到的，通常不可能加強(qiáng)病毒載體組分，因?yàn)榭赡墚a(chǎn)生抗載體本 身的免疫。
[0017] 因此，本發(fā)明的目的包括下列的一個(gè)或多個(gè)：(a)提供完整的疫苗接種方法和疫 苗組合物，該疫苗組合物刺激CD4+和/或CD8+細(xì)胞和/或抗體產(chǎn)生，尤其是能消除或減輕 重復(fù)免疫接種的需要；(b)提供疫苗接種方法和疫苗組合物，該疫苗組合物與僅含有免疫 原性多肽或僅含有多核苷酸的疫苗組合物相比，或與包括單獨(dú)給予免疫原性多肽和多核苷 酸的傳統(tǒng)初免_加強(qiáng)方法相比，更好地刺激CD4+細(xì)胞和/或CD8+細(xì)胞和/或抗體產(chǎn)生；（c) 提供刺激或更好地刺激Thl反應(yīng)的疫苗組合物；(d)提供疫苗組合物和疫苗接種方法，其中 組分的所需劑量，尤其是病毒載體的所需劑量是最小的；和（e)更一般地提供可用于治療 或防止病原體引起的疾病的疫苗組合物和疫苗接種方法。所謂"更好地刺激"是指反應(yīng)的 強(qiáng)度和/或持久性增強(qiáng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0018] 因此，根據(jù)本發(fā)明，提供一種引起抗病原體的免疫反應(yīng)的方法，包括給予⑴源自 所述病原體的一種或多種第一免疫原性多肽；（ii)包含一種或多種異源多核苷酸的一種 或多種腺病毒載體，所述一種或多種異源多核苷酸編碼源自所述病原體的一種或多種第二 免疫原性多肽；和（iii)佐劑；其中所述一種或多種第一免疫原性多肽、所述一種或多種腺 病毒載體和所述佐劑并行給予。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明的具體方面，提供一種疫苗組合物，包含（i)源自病原體的一種或多 種第一免疫原性多肽；（ii)包含一種或多種異源多核苷酸的一種或多種腺病毒載體，所述 一種或多種異源多核苷酸編碼源自所述病原體的一種或多種第二免疫原性多肽；和（iii) 佐劑。
[0020] 還提供一種免疫原性組合物，包含（i)源自病原體的一種或多種第一免疫原性多 肽；（ii)包含一種或多種異源多核苷酸的一種或多種腺病毒載體，所述一種或多種異源多 核苷酸編碼源自所述病原體的一種或多種第二免疫原性多肽；和（iii)佐劑。
[0021 ] 所述疫苗和免疫原性組合物適當(dāng)?shù)卮碳げ≡w特異性⑶4+T細(xì)胞和/或⑶8+T細(xì) 胞和/或抗體的產(chǎn)生。
[0022] 所謂"病原體特異性CD4+T細(xì)胞和/或CD8+T細(xì)胞和/或抗體"是指特異性識(shí)別整 個(gè)病原體或其部分（如，免疫原性亞基）的CD4+T細(xì)胞和/或CD8+T細(xì)胞和/或抗體。所 謂"特異性識(shí)別"是指CD4+T細(xì)胞和/或CD8+T細(xì)胞和/或抗體以免疫特異性方式而不是 非特異性方式識(shí)別所述病原體（或其部分）。
[0023] 還提供一種刺激哺乳動(dòng)物中免疫反應(yīng)的方法，該方法包括給予受試者免疫有效量 的此種組合物。
[0024] 還提供此種組合物在制造用于刺激哺乳動(dòng)物中免疫反應(yīng)的藥物中的用途。
[0025] 還提供此種組合物用于刺激哺乳動(dòng)物中的免疫反應(yīng)。
[0026] 還提供刺激哺乳動(dòng)物中病原體特異性CD4+T細(xì)胞和/或CD8+T細(xì)胞和/或抗體產(chǎn) 生的方法，包括給予所述哺乳動(dòng)物（i)源自病原體的一種或多種第一免疫原性多肽；（ii) 包含一種或多種異源多核苷酸的一種或多種腺病毒載體，所述一種或多種異源多核苷酸編 碼源自所述病原體的一種或多種第二免疫原性多肽；和（iii)佐劑；其中所述一種或多種 第一免疫原性多肽、所述一種或多種腺病毒載體和所述佐劑并行給予，例如通過給予免疫 有效量的上述組合物。
[0027] 還提供了上述組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于刺激哺乳動(dòng)物中病原體 特異性的CD4+和/或CD8+細(xì)胞和/或抗體的產(chǎn)生。
[0028] 例如，刺激⑶4+T細(xì)胞或⑶8+T細(xì)胞或抗體產(chǎn)生。
[0029] 合適的是刺激⑶4+T細(xì)胞和/或⑶8+T細(xì)胞和/或抗體中的2種、尤其是3種的 產(chǎn)生。
[0030] 合適的是刺激⑶8+T細(xì)胞的產(chǎn)生。合適的是刺激⑶4+和⑶8+T細(xì)胞的產(chǎn)生。合 適的是刺激⑶4+和⑶8+T細(xì)胞和抗體的產(chǎn)生。
[0031] 另外合適的是刺激⑶4+T細(xì)胞的產(chǎn)生。合適的是刺激⑶4+和抗體的產(chǎn)生。
[0032] 另外合適的是刺激抗體的產(chǎn)生。
[0033] 本發(fā)明的方法旨在適合地提供用于引起免疫反應(yīng)的完整方法的足夠步驟（盡管 需要時(shí)可以重復(fù)該方法）。因此合適的是該方法不包括使用初免劑量的任何免疫原性多肽 或編碼任何免疫原性多肽的多核苷酸（例如，載體形式，如腺病毒載體）。
[0034] 例如，提供了引起抗病原體的免疫反應(yīng)的方法，該方法由下列組成：(a)給予（i) 源自所述病原體的一種或多種第一免疫原性多肽；（ii)包含一種或多種異源多核苷酸的 一種或多種腺病毒載體，所述一種或多種異源多核苷酸編碼源自所述病原體的一種或多種 第二免疫原性多肽；和（iii)佐劑；其中所述一種或多種免疫原性多肽、所述一種或多種腺 病毒載體和所述佐劑并行給予；和（b)任選地重復(fù)步驟（a)。
[0035] 如果重復(fù)能產(chǎn)生改善的免疫反應(yīng)則可以重復(fù)該方法的步驟?？梢圆恍枰魏沃貜?fù) 而獲得足夠的反應(yīng)，至少是就T細(xì)胞反應(yīng)來說。
[0036] 還提供了引起抗病原體的免疫反應(yīng)的方法，該方法包括（a)給予（i)源自所述病 原體的一種或多種第一免疫原性多肽；（ii)包含一種或多種異源多核苷酸的一種或多種 腺病毒載體，所述一種或多種異源多核苷酸編碼源自所述病原體的一種或多種第二免疫原 性多肽；和（iii)佐劑；其中所述一種或多種第一免疫原性多肽、所述一種或多種腺病毒載 體和所述佐劑并行給予；所述方法不包括給予任何初免劑量的免疫原性多肽或編碼免疫原 性多肽的多核苷酸。
[0037] 還提供了一種試劑盒，所述試劑盒包含（i)源自病原體的一種或多種第一免疫原 性多肽；（ii)包含一種或多種異源多核苷酸的一種或多種腺病毒載體，所述一種或多種異 源多核苷酸編碼源自所述病原體的一種或多種第二免疫原性多肽；和（iii)佐劑；具體地， 包含（i)源自病原體的一種或多種第一免疫原性多肽和佐劑；和（ii)包含一種或多種異源 多核苷酸的一種或多種第二腺病毒載體，所述一種或多種異源多核苷酸編碼源自所述病原 體的一種或多種免疫原性多肽；所述試劑盒用于根據(jù)本發(fā)明的方法。
[0038] 本發(fā)明的組合物和方法可用于預(yù)防未感染過病原體的（naive)受試者中由病原 體所致的感染，或預(yù)防之前病原體感染過的受試者再次感染，或治療被病原體感染的受試 者。
[0039] 附圖簡(jiǎn)述
[0040] 圖1顯示質(zhì)粒p73i_Tgrn的構(gòu)建的代表圖；
[0041] 圖2-8顯示實(shí)施例1中所討論的實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，具體地：
[0042] 圖2a、2b、3a、3b :在各種免疫方法之后在不同的時(shí)間點(diǎn)，響應(yīng)于源自p24、RT、Nef 和P17的肽庫(kù)的再次刺激的⑶4+和⑶8+T細(xì)胞反應(yīng)；
[0043] 圖4 :抗F4的抗體反應(yīng)；
[0044] 圖5-8 :分別抗F4組分p24、RT、pl7和Nef的抗體反應(yīng)；
[0045] 圖9顯示實(shí)施例2中所討論的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，具體地：在各種免疫方法后，響應(yīng)于源自 p24和RT的肽庫(kù)的再次刺激的⑶4+T細(xì)胞反應(yīng)。
[0046] 圖10-12顯示實(shí)施例3所討論的實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，具體地：
[0047] 圖10顯示兔PBMC抗含有F4序列的肽庫(kù)的淋巴增殖性反應(yīng)；
[0048] 圖11顯示抗F4的抗體反應(yīng)的時(shí)程；
[0049] 圖12a和12b分別顯示抗F4組分p24和RT的抗體反應(yīng)（第77天）；
[0050] 圖13顯示HIV-1特異性⑶4 T細(xì)胞的定量；
[0051 ] 圖14顯示在兩次免疫后7天F4特異性⑶4 T細(xì)胞的頻率分布；
[0052] 圖15顯示兩次免疫后7天F4特異性⑶4 T細(xì)胞的細(xì)胞因子產(chǎn)生；
[0053] 圖16顯示HIV-1特異性⑶8 T細(xì)胞的定量；
[0054] 圖17顯示在兩次免疫后7天F4特異性⑶8 T細(xì)胞的細(xì)胞因子產(chǎn)生；
[0055] 圖18顯示CSP特異性⑶4 T細(xì)胞的定量；
[0056] 圖19顯示CSP特異性⑶8 T細(xì)胞的定量；
[0057] 圖20顯示CSP (N末端）特異性⑶4 T細(xì)胞的定量；
[0058] 圖21顯示CSP (C末端）特異性⑶4 T細(xì)胞的定量；
[0059] 圖22顯示CSP (N末端）特異性⑶8 T細(xì)胞的定量；
[0060] 圖23顯示CSP (C末端）特異性⑶8 T細(xì)胞的定量；
[0061] 圖24顯示CSP特異性抗體效價(jià)的定量。
[0062] 序列表總結(jié)
[0063]
[0064]
[0065] 上面所列的序列可以作為本發(fā)明示例性方面中所用的多肽或編碼多肽的多核苷 酸使用。所述多肽可以由上述序列組成或包含上述序列。任選初始Met殘基。任選N末端 His殘基（包括緊隨初始Met之后的His殘基，如SEQ ID No 9)或者可以采用不同長(zhǎng)度的 N末端His標(biāo)簽（如，通?？梢圆捎米疃?個(gè)His殘基以有助于蛋白分離）?？梢圆捎门c參 考序列的全長(zhǎng)具有顯著序列同一性的類似蛋白，如大于80 %，如大于90 %，如大于95 %，如 大于99%的序列同一性，尤其是在類似蛋白具有類似的功能時(shí)，具體是在類似蛋白具有類 似的免疫原性時(shí)。例如可以接受最多20個(gè)，如最多10個(gè)，如1-5個(gè)取代（如，保守取代）。 可以采用與上述那些不同但是編碼相同蛋白或上述類似蛋白的核酸?？梢酝ㄟ^常規(guī)方法測(cè) 定序列同一性，如使用BLAST。在可能提到的一個(gè)SEQ ID No 16的特定變體中，殘基398是 Ser而不是Cys。
[0066] 發(fā)明詳述
[0067] 如本文所用，術(shù)語"并行（concomitantly) "意指所述一種或多種免疫原性多肽、一 種或多種腺病毒載體和佐劑在不超過12小時(shí)的期間內(nèi)給予，如在不超過1小時(shí)的期間內(nèi)， 通常是在一次的情況下，例如，在對(duì)健康專家的同一次探訪過程中，例如所述一種或多種免 疫原性多肽、一種或多種腺病毒載體和佐劑順序給予或同時(shí)給予。
[0068] 如本文所用，術(shù)語"表位"是指免疫原性氨基酸序列。表位通常是指通常6-8個(gè) 氨基酸的最小氨基酸序列，該最小序列在從其天然環(huán)境移出時(shí)是免疫原性的，如移植到異 源多肽中時(shí)。表位還可指蛋白的免疫原性部分，其中含有表位的多肽被稱為抗原（或者有 時(shí)稱為"多肽抗原"）。多肽或抗原可以含有一個(gè)或多個(gè)（如2個(gè)或3個(gè)或更多個(gè)）不同的 表位。術(shù)語"表位"包括B細(xì)胞和T細(xì)胞表位。術(shù)語" T細(xì)胞表位"包括⑶4+T細(xì)胞表位和 CD8+T細(xì)胞表位（有時(shí)也稱為CTL表位）。
[0069] 術(shù)語"免疫原性多肽"是指免疫原性的多肽，也就是說能夠在哺乳動(dòng)物中引起免疫 反應(yīng)，因此含有一個(gè)或多個(gè)表位（如，T細(xì)胞和/或B細(xì)胞表位）。免疫原性多肽可以含有 一個(gè)或多個(gè)多肽抗原（如非天然排列的，如在融合蛋白中）。
[0070] 免疫原性多肽通常為重組蛋白，通過（例如）在諸如細(xì)菌宿主、酵母或培養(yǎng)的哺乳 動(dòng)物細(xì)胞等異源宿主中表達(dá)來制備。
[0071] 術(shù)語"源自病原體的多肽"是指部分或完整地含有在病原體中天然出現(xiàn)的序列 (即，抗原）或與其具有高度序列同一性（如，在一段至少10個(gè)，例如至少20個(gè)氨基酸的長(zhǎng) 度上大于95%的同一性）的多肽。
[0072] 免疫原性多肽可以含有一個(gè)或多個(gè)（例如，1、2、3或4個(gè)）多肽抗原。
[0073] 除非另外指明，否則"免疫反應(yīng)"可以是細(xì)胞反應(yīng)和/或體液反應(yīng)。
[0074] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述一種或多種第一免疫原性多肽的一種或多種基 本上與所述一種或多種第二免疫原性多肽的一種或多種相同。例如，至少一種第一免疫原 性多肽之一和至少一種第二免疫原性多肽之一的整體序列同一性沿一個(gè)或另一個(gè)免疫原 性多肽的長(zhǎng)度可以為90%或更高，如95%或更高，如98%或99%或更高。
[0075] 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述一種或多種第一免疫原性多肽的一種或多種 含有至少一個(gè)與所述第二免疫原性多肽的一種或多種中所含的抗原基本上相同的抗原。例 如，至少一種第一免疫原性多肽之一和至少一種第二免疫原性多肽之一的整體序列同一性 在一段20個(gè)氨基酸或更多，如40個(gè)氨基酸或更多，如60個(gè)氨基酸或更多的長(zhǎng)度上可以為 90%或更高，如95%或更高，如98%或99%或更高。
[0076] 合適地，一種或多種第一免疫原性多肽含有至少一個(gè)T細(xì)胞表位。
[0077] 合適地，一種或多種第二免疫原性多肽含有至少一個(gè)T細(xì)胞表位。
[0078] 合適地，一種或多種第一免疫原性多肽含有至少一個(gè)B細(xì)胞表位。
[0079] 合適地，一種或多種第二免疫原性多肽含有至少一個(gè)B細(xì)胞表位。
[0080] 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述一種或多種第一免疫原性多肽的一種或多種 和所述第二免疫原性多肽的一種或多種共有一個(gè)或多個(gè)相同的B細(xì)胞和/或T細(xì)胞表位。 合適地，它們共有一個(gè)或多個(gè)相同的氨基酸序列，所述氨基酸序列長(zhǎng)度為10個(gè)氨基酸或更 多，如15個(gè)氨基酸或更多，如25個(gè)氨基酸或更多。
[0081] 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述一種或多種第一免疫原性多肽的一種或多種 沒有一種與所述一種或多種第二免疫原性多肽的一種或多種相同或與其含有任何共同抗 原，例如它們?cè)谝欢?0個(gè)氨基酸或更多，如40個(gè)氨基酸或更多，如60個(gè)氨基酸或更多的長(zhǎng) 度上的整體序列同一性小于90%。
[0082] 因此，它們可能不共有任何B細(xì)胞或T細(xì)胞表位。例如它們可以不共有任何長(zhǎng)度 為10個(gè)氨基酸或更多，如15個(gè)氨基酸或更多，如25個(gè)氨基酸或更多的相同氨基酸序列。
[0083] 在本發(fā)明的一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，第一免疫原性多肽和第二免疫原性多肽含有相 同排列或不同排列（如，不同排列）的相同抗原。所謂"不同排列"意指它們可以不同的順 序排列和/或它們可以分開。在本發(fā)明的另一【具體實(shí)施方式】中，第一免疫原性多肽和第二 免疫原性多肽是相同的。
[0084] 根據(jù)本發(fā)明的組合物可以含有一種第一免疫原性多肽作為組合物中僅有的免疫 原性多肽?；蛘?，根據(jù)本發(fā)明的組合物可以含有不止一種第一免疫原性多肽，如2或3或4 或更多種免疫原性多肽。
[0085] 根據(jù)本發(fā)明的組合物可以含有一種腺病毒載體?；蛘咚鼈兛梢院胁恢挂环N腺病 毒載體，如2種腺病毒載體。
[0086] 在根據(jù)本發(fā)明的組合物中，腺病毒載體可以含有異源多核苷酸，該異源多核