用于增強認(rèn)知性能的方法和組合物的制作方法
【專利說明】用于增強認(rèn)知性能的方法和組合物 與相關(guān)申請的交叉引用
[00011 本申請要求于2013年6月10日提交的美國申請No.61/833,389的優(yōu)先權(quán)和利益，該 申請全文引入作為參考。
【背景技術(shù)】
[0002] 老年人常經(jīng)歷記憶和認(rèn)知衰退，并且這已從認(rèn)知老化的縱向研究中得到了證明。 Zelinski等人，Psychol .Aging，13，622-30( 1998)。身體不好、身體活動減少、高血壓、藥物 治療和維生素缺乏消極地影響記憶，而身體健康、身體與精神活動增加、較高的教育水平和 減輕的抑郁均對記憶有著積極影響。這些發(fā)現(xiàn)暗示著預(yù)防性策略有可能用于在暮年維持高 智力表現(xiàn)。Calvaresi等人，Journal Gerontology:Psychological Sciences ,56(6) ,P327-P339(2001)。這些為人們所適應(yīng)的策略中的一些是使用營養(yǎng)藥物(nutraceuticals)。
[0003] 營養(yǎng)藥物通常被定義為被認(rèn)為是有益健康(包括預(yù)防和/或治療疾病）的食物、食 物的一部分、維生素、礦物質(zhì)或草藥(herb)的任何物質(zhì)。營養(yǎng)藥物包括一種新類別的產(chǎn)品： 膳食補充劑，其被認(rèn)為既非食物也非藥物，并且不受與處方及非處方藥物相同的管理障礙。 此類產(chǎn)品包括維生素、礦物質(zhì)、草藥、氨基酸和其它非旨在作為食物代用品的物質(zhì)。隨著對 營養(yǎng)藥物的日益關(guān)注，關(guān)注整體實踐的醫(yī)療及相關(guān)保健專業(yè)人員(包括醫(yī)療與研究科學(xué)家） 正在進行臨床試驗以確定這些療法是否有任何價值或產(chǎn)生所聲稱的結(jié)果。Sand-Jeckl in等 人，Journal of Holistic Nursing，21(4)，383_397(2003)。
[0004] 增強并保持記憶功能的營養(yǎng)藥物的市場正在快速發(fā)展。報道了針對美國成年人的 兩項全國性調(diào)查。在第一項調(diào)查中，研究人員發(fā)現(xiàn):年齡大于60歲的成年人較低年齡組對所 有類型的補充劑都有更高的使用量。Radimer等人，American Journal Epidemiology，160， 339-349(2004)。在另一項調(diào)查中，65%的老年人報告其使用過膳食補充劑。例子包括:草藥 銀杏(Ginkgo Biloba)(作為記憶增強劑售賣）、積雪草(Gotu Kola)(用作興奮劑）以及石杉 堿(源自苔蘚的生物堿，其已在中國被用于治療癡呆）。然而，存在許多與現(xiàn)有的用于認(rèn)知衰 退和記憶增強的營養(yǎng)藥物相關(guān)的問題。首先，一些成分是完全順勢療法的并且含有在順勢 療法領(lǐng)域之外無人知曉的組分。其次，治療功效的證據(jù)常常是矛盾的。最后，往往少有或沒 有研究證明營養(yǎng)藥物的有效性。 發(fā)明概述
[0005] 本文描述了用于營養(yǎng)組合物的磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸的組合產(chǎn)品。各自有效 量的磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸的組合產(chǎn)品具有有益的協(xié)同和/或互補作用方式，其對于改 善認(rèn)知性能與腦健康有效。
[0006] 本文提供了改善認(rèn)知性能的方法，包括讓個體口服包含各自有效量的磷脂酰絲氨 酸、膽堿及油酸的組合物。本文還提供了用于改善人的認(rèn)知性能的組合產(chǎn)品，其包含磷脂酰 絲氨酸、膽堿及油酸。本文還公開了包含磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸的組合產(chǎn)品在制備改善 人的認(rèn)知性能的營養(yǎng)組合物中的用途。
[0007] 本文還提供了包含磷脂酰絲氨酸、膽堿、油酸、至少一種碳水化合物來源以及至少 一種蛋白質(zhì)來源的營養(yǎng)組合物。 附圖簡述
[0008] 圖IA說明了膽堿(30微摩爾)對海馬切片(體外)場興奮性突觸后電位(fEPSP)振幅 的影響，如實施例4中所分析的。
[0009] 圖IB說明了膽堿(40微摩爾)對海馬切片(體外)fEPSP振幅的影響，如實施例4中所 分析的。
[001 0]圖IC說明了膽堿(50微摩爾)對海馬切片(體外)fEPSP振幅的影響，如實施例4中所 分析的。
[0011]圖ID說明了膽堿(60微摩爾)對海馬切片(體外)fEPSP振幅的影響，如實施例4中所 分析的。
[0012] 圖IE說明了膽堿(于各種濃度)對海馬切片（體外）fEPSP振幅的百分比的影響，如 實施例4中所分析的。Y軸表示fEPSP振幅的百分比（相比于對照）；* = p < 0 · 05 ;** = p < 0.01; *** = P <0.001 〇
[0013] 圖2A說明了油酸（10微摩爾)對海馬切片(體外)fEPSP振幅的影響，如實施例5中所 分析的。
[0014]圖2B說明了油酸(20微摩爾)對海馬切片(體外)fEPSP振幅的影響，如實施例5中所 分析的。
[0015]圖2C說明了油酸(30微摩爾)對海馬切片(體外)fEPSP振幅的影響，如實施例5中所 分析的。
[0016] 圖2D說明了油酸（于各種濃度)對海馬切片（體外）fEPSP振幅的百分比的影響，如 實施例5中所分析的。 發(fā)明詳述
[0017] 除非另行定義，否則本文中所用的全部技術(shù)與科學(xué)術(shù)語具有與本申請所屬領(lǐng)域普 通技術(shù)人員通常所理解的相同的含義。盡管與本文所述那些類似或等同的方法和材料可用 于實踐或測試示例性實施方案，但仍然在下面描述了合適的方法和材料。在沖突的情況下， 以本說明書(包括定義在內(nèi)）為準(zhǔn)。另外，所述材料、方法和實施例僅為說明性的而非旨在限 制。
[0018] 本文提供了改善認(rèn)知性能的方法，包括讓個體口服包含各自有效量的磷脂酰絲氨 酸、膽堿及油酸的組合物。本文還提供了用于改善人的認(rèn)知性能的組合產(chǎn)品，其包含磷脂酰 絲氨酸、膽堿及油酸。本文還公開了包含磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸的組合產(chǎn)品在制備改善 人的認(rèn)知性能的營養(yǎng)組合物中的用途。
[0019]本文還提供了包含磷脂酰絲氨酸、膽堿、油酸、至少一種碳水化合物來源以及至少 一種蛋白質(zhì)來源的營養(yǎng)組合物。 定義
[0020] 如本文所述的術(shù)語僅用于描述實施方案，并且不應(yīng)理解為限制整個申請。除非另 外指明，否則"一(個、種......（"a"、"an"）、"該(the)"及"至少一(個、種......）"可互換 使用。此外，如本申請的說明書和所附權(quán)利要求書中所用的，單數(shù)形式的"一(個、種......) ("a"、"an" )"和"該(the)"均包括其復(fù)數(shù)形式，除非與其上下文相矛盾。
[0021] 通過端點表述的數(shù)值范圍包括納入該范圍內(nèi)的所有的數(shù)字（例如，1至5包括1、 1·5、2、2·75、3、3·80、4、5等）。
[0022]如本文中所用的措辭"有效量"是指足夠量的活性成分以增強認(rèn)知性能(如記憶或 智力）。精確的所需量將因個體而異，其取決于物種、年齡以及個體的大體情況等。
[0023]如本文中所用的術(shù)語"老年人"是指至少45歲的個體，其包括至少50歲、至少55歲、 至少60歲、至少65歲、至少70歲、至少75歲以及包括至少80歲或以上的年齡。術(shù)語"老年人" 還包括從約45歲至約95歲的年齡組以及從約55歲至約80歲的年齡組。
[0024]個體可以是哺乳動物(如人）、馴養(yǎng)的家畜（如牛、馬、豬)或?qū)櫸?如狗、貓）。更優(yōu)選 地，所述個體是人。在另一個實施方案中，所述個體是女性。在另一個實施方案中，所述個體 是男性。在另一個實施方案中，所述個體是嬰兒。在另一個實施方案中，所述個體是兒童。在 另一個實施方案中，所述個體是幼兒。在另一個實施方案中，所述個體是成年人。在另一個 實施方案中，所述個體是老年人。
[0025] 在另一個實施方案中，"嬰兒"是指1歲以下的個體。在另一個實施方案中，"兒童" 是指18歲以下的個體。在另一個實施方案中，"幼兒"是指7歲以下的個體。在其它實施方案 中，"成年人"是指大于18歲的個體。老年人是45歲或以上的成年人。人類個體可以選自任何 年齡組。例如，個體可以是從1至100+或其間的任何年齡。
[0026] 本文描述了包含各自有效量的磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸的組合物，以及通過給 個體施用該組合物從而將其用于改善認(rèn)知性能的方法。此組合產(chǎn)品的使用已表明可以對認(rèn) 知功能提供協(xié)同或互補效應(yīng)。為了方便起見，磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸的組合產(chǎn)品在本文 中也被稱作活性成分。 活性成分
[0027] 磷脂酰絲氨酸(PS)，化學(xué)名稱:2_二酰基-sn-甘油-3-磷酸-L-絲氨酸，廣泛存在于 動物、植物和微生物中。由于腦富含PS，所以相比其它磷脂，可優(yōu)先膳食攝入PS?；谂R床研 究結(jié)果，PS對認(rèn)知的益處得到了 Π )Α準(zhǔn)予的健康聲明的支持，該聲明陳述道"食用磷脂酰絲 氨酸可降低老年人患癡呆或認(rèn)知功能障礙的風(fēng)險"。膜PS已表明是激活磷脂酰肌醇3-激酶 (ΡΙ3Κ)/ΑΚΤ絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(AKT)/哺乳動物雷帕霉素靶激酶(mTOR)信號傳導(dǎo)途徑 所必需的。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Κ) /AKT絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(AKT)/哺乳動物雷帕霉 素靶激酶(mTOR)信號傳導(dǎo)途徑在學(xué)習(xí)與記憶、神經(jīng)元存活、神經(jīng)發(fā)生及細(xì)胞凋亡方面之間 起連接作用。因此，PS似乎與磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/AKT絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(AKT)/ 哺乳動物雷帕霉素靶激酶(mTOR)信號傳導(dǎo)途徑的調(diào)節(jié)有關(guān)，該信號傳導(dǎo)途徑在學(xué)習(xí)與記憶 中起關(guān)鍵作用。
[0028]膽堿(C)，化學(xué)名稱：2-羥基-N，N，N-三甲基乙銨，是水溶性的必需營養(yǎng)物，其通常 被劃入復(fù)合維生素 B。膽堿是一種季銨鹽，其中帶正電的三甲基乙銨離子與負(fù)離子(如氯離 子、氫氧離子或酒石酸根離子)配對。膽堿陽離子存在于磷脂酰膽堿和鞘磷脂(細(xì)胞膜中富 含的兩類磷脂）的頭部基團中。膽堿還是神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的前體分子，而乙酰膽堿則與包 括記憶和肌肉控制在內(nèi)的許多功能有關(guān)。
[0029]油酸(OA)是天然存在于各種動物與植物脂肪和油類中的脂肪酸。依照化學(xué)術(shù)語， 油酸被歸為單不飽和Ω-9脂肪酸。其具有式：CH3(CH2)7CH = CH(CH2)7C00H以及化學(xué)名稱： (9Z)-十八碳-9-烯酸。食用油酸已顯示降低低密度脂蛋白（LDL)水平并提高高密度脂蛋白 (HDL)水平，并因此已被指出用于促進心臟健康。
[0030]多項分子機制促成了神經(jīng)變性疾病中認(rèn)知缺損和腦功能障礙的病理生理學(xué)。本文 所述的方法采用了磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸的組合產(chǎn)品來影響多項分子機制，從而導(dǎo)致 了增強認(rèn)知性能和腦健康的加性或協(xié)同效應(yīng)。
[0031 ] 磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸還在某些神經(jīng)化學(xué)途徑上具有共享的效應(yīng)。例如，這些 化合物可增強N-甲基-D-天冬氨酸受體(匪DAR)依賴型海馬長時程增強(LTP)，這是對突觸 可塑性的測量，是一項與認(rèn)知有關(guān)的重要分子機制。因此，在本文所公開的方法與組合物的 某些實施方案中，給個體施用各自有效量的磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸導(dǎo)致了NMDAR依賴型 海馬LTP的增強，從而導(dǎo)致了該個體認(rèn)知性能的增強。磷脂酰絲氨酸、膽堿及油酸還均可影 響腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)，這是一種增強隨意身體活動對突觸可塑性的影響的神經(jīng)營養(yǎng) 因子。因此，在本文所公開的方法與組合物的某些實施方案中，給個體施用各自有效量的磷 脂酰絲氨酸、膽堿及油酸導(dǎo)致了 BDNF的改善，從而導(dǎo)致了該個體認(rèn)知性能的增強。 認(rèn)知性能
[0032] 認(rèn)知性能可由多種方式歸類和測試。主要的認(rèn)知性能類別包括記憶和智力。然而， 已知種類繁多的更復(fù)雜的認(rèn)知功能，包括:言語記憶(verbal memory )、內(nèi)隱記憶(imp I i c i t memory)和學(xué)習(xí)以及由個體的組織信息的能力所支持的那些功能，如執(zhí)行功能。
[0033] 如本文中所用的術(shù)語"改進"或"改善"認(rèn)知性能總的來說是指增加個體的記憶能 力或智力。在某些實施方案中，該術(shù)語是指增加或改善個體記憶或智力的基線水平。在其它 實施方案中，該術(shù)語是指增加或改善個體記憶或智力的水平。
[0034] 在另一個實施方案中，"改善"認(rèn)知性能（如記憶或智力）是指使其產(chǎn)生10% (或更 大）的改善。在另一個實施方案中，該術(shù)語是指使認(rèn)知性能（如記憶、智力或二者同時)產(chǎn)生 20% (或更大）的改善。在另一個實施方案中，該術(shù)語是指使認(rèn)知性能（如記憶、智力或二者 同時)產(chǎn)生30% (或更大)的改善。在另一個實施方案中，該術(shù)語是指使認(rèn)知性能(如記憶、智 力或二者同時）產(chǎn)生40% (或更大）的改善。在另一個實施方案中，該術(shù)語是指使認(rèn)知性能 (如記憶、智力或二者同時)產(chǎn)生50% (或更大)的改善。在另一個實施方案中，該術(shù)語是指使 認(rèn)知性能(如記憶、智力或二者同時)產(chǎn)生60% (或更大)的改善。在另一個實施方案中，該術(shù) 語是指使認(rèn)知性能（如記憶、智力或二者同時)產(chǎn)生70% (或更大）的改善。在另一個實施方 案中，該術(shù)語是指使認(rèn)知性能(如記憶、智力或二者同時)產(chǎn)生80% (或更大）的改善。在另一 個實施方案中，該術(shù)語是指使認(rèn)知性能（如記憶、智力或二者同時)產(chǎn)生90% (或更大）的改 善。在另一個實施方案中，該術(shù)語是指使認(rèn)知性能(如記憶、智力或二者同時)產(chǎn)生100% (或 更大)的改善。應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)提到更大百分比的改善(例如，20 %的認(rèn)知性能改善)時，其必然 包括較小量的改善(例如，1 〇 %的改善）。換言之，實現(xiàn)了 1 〇 %的改善的個體也可(在某些實 施方案中）實現(xiàn)20%的改善，因而不應(yīng)當(dāng)一定將該10%的改善理解為限于不超過10%的改 善。
[0035] 在另一個實施方案中，認(rèn)知性能（如記憶或智力）的改善是相對于治療開始前的認(rèn) 知記憶或智力進行評估的。在另一個實施方案中，認(rèn)知記憶或智力的改善是相對于未經(jīng)治 療的個體進行評估的。在另一個實施方案中，認(rèn)知性能（如記憶或智力）的改善是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn) 化的規(guī)范(例如，測試等)進行評估的。
[0036]執(zhí)行功能是智力的一個方面。執(zhí)行功能是用于描述許多不同的、可指明的'控制' 功能的術(shù)語，這些'控制'功能有別于處理速度、記憶和運動功能。執(zhí)行功能的例子包括：'轉(zhuǎn) 變'或'改變'（例如，在行為間或信息源間交替）、'抑制'（阻抑自動的和習(xí)慣性的反應(yīng)或行 為的能力、'更新'（拋棄和替換信息的能力、'持續(xù)的注意力'（需要持續(xù)的專注和監(jiān)控技 能）、'戰(zhàn)略性的記憶搜索'（對結(jié)構(gòu)化信息有意識的、有控制的檢索)和'計劃'（應(yīng)付新信息、 產(chǎn)生目標(biāo)并就合適的行動方針作出決定的能力hRabbitt P./Methodology of frontal and executive function."Psychology Press，Hove(1997)。上述所有過程均依賴于'工作 記憶'，一種用于描述對基于語言的和/或視覺空間信息進行臨時處理與保持的假想體系的 心理學(xué)概念，其要求對注意資源(attentional resources)的控制。
[0037] 就記憶和學(xué)習(xí)而言，可在下述名詞間進行各種區(qū)分：短時記憶（例如，數(shù)字廣度或 數(shù)字回憶任務(wù))與長時記憶(例如，情節(jié)即時或延遲回憶與識別）、有意識過程或無意識過程 (例如，外顯型與內(nèi)隱型記憶和學(xué)習(xí)）、事件記憶(情節(jié)記憶)或意義記憶(語義記憶）、記起執(zhí) 行動作(前瞻記憶(prospective memory))、技能記憶(程序性記憶(procedural memory)) 以及圖像和/或空間方位記憶(視覺空間或空間記憶）。在具備或不具備認(rèn)知組分(例如，運 動速度或精神性運動速度）的情形中對運動功能進行測量，并可將IQ進一步細(xì)分為晶體智 力（crystalIized intelligence)(測量獲得的知識）與流體智力（fluid intelligence) (測量獨立于獲得的知識的非語言能力、問題解決和模式識別）。
[0038] 應(yīng)當(dāng)利用廣泛的任務(wù)來全面評估磷脂酰絲氨酸、膽堿及