]用于控制制劑的非藥典和色譜分析方法總結(jié)如下：
[0077] 描述
[0078] 對于接受標(biāo)準(zhǔn)的一致性，視覺檢查多個容器。
[0079] 鑒別（HPLC)
[0080] 活性成分的鑒別通過使用反相HPLC法比較藥物制劑樣品的保留時間和參照標(biāo)準(zhǔn) 的保留時間而得到確保。該方法也用于活性成分測定的確定、相關(guān)化合物和雜質(zhì)的確定和 防腐劑間甲酚和苯酚的量化。
[0081] 測定（HPLC)
[0082]通過反相液相色譜(HPLC)實施了測試。該方法也用于活性成分測定的鑒別、確定， 用于相關(guān)化合物和雜質(zhì)的確定和用于防腐劑間甲酚和苯酚的量化。
[0083] 柱:十八烷基甲硅烷基化硅膠(C18)，粒度3μπι，孔徑200龍（250mm X 4 · Omm)，在+41 °C自動調(diào)溫。自動進(jìn)樣器:在^ +10°C自動調(diào)溫。流動相A:緩沖溶液pH 2.2/乙腈/水(55:20: 25v/v)。流動相B:緩沖溶液pH 2.2/乙腈(55:45v/v)。梯度示于表1。
[0084] 表1: HPLC 梯度
LUUbbj 沭迷：U · (jmL/min。汪射懷枳：l^iL。恆側(cè)：t沽?生成分）和11日J(rèn) 中 酚和苯酚）。典型的運(yùn)行時間:90分鐘。
[0087]活性成分、間甲酚和苯酚的測定通過外部標(biāo)準(zhǔn)計算。雜質(zhì)使用峰區(qū)域百分比方法 計算。
[0088] 相關(guān)化合物和雜質(zhì)(HPLC)
[0089] 使用了與對于"測定(HPLC)"相同的色譜條件以用于相關(guān)化合物和雜質(zhì)的確定。相 關(guān)化合物和雜質(zhì)使用峰區(qū)域百分比方法計算。
[0090] 高分子量蛋白（HMWP)
[0091] 高分子量蛋白使用高壓尺寸排阻色譜法(HPSEC)確定。柱：Shodex蛋白KW 802.5 (硅膠，二元醇）120-7-二元醇，分離范圍2000-80000道爾頓（300mm X 8mm)，在室溫自動調(diào) 溫。自動進(jìn)樣器:在< +l〇°C自動調(diào)溫。流動相：乙酸/乙腈/水(200:300:400v/v)，用25% (v/ V)氨水溶液調(diào)整至pH 3.0。等度洗脫。流速:0.5mL/分鐘。注射體積：IOOyL。檢測：276nm。典 型的運(yùn)行時間：65分鐘。
[0092] HMWP使用峰區(qū)域百分比方法計算。
[0093]抗微生物防腐劑測定
[0094]使用了與對于"測定(HPLC)"相同的色譜條件以用于確定間甲酚和苯酚測定。間甲 酚和苯酚通過外部標(biāo)準(zhǔn)化計算。
[0095] (C)接受標(biāo)準(zhǔn)的論證
[0096]如上文所述的測試和接受標(biāo)準(zhǔn)基于ICH Q6B和公開的專著、獲得的分析結(jié)果、使用 的方法的精確性、藥典和/或調(diào)節(jié)性準(zhǔn)則進(jìn)行選擇，且與在該開發(fā)階段的標(biāo)準(zhǔn)限定吻合。 [0097]制劑形成濃縮溶液的可行性
[0098]包括了 100-900單位/mL的制劑以研究賴谷胰島素濃縮溶液的可行性。在目標(biāo)pH 7.3的水中最大溶解度確定為約1100單位/mL。可確認(rèn)100-900單位/mL的制劑的化學(xué)和物理 穩(wěn)定性。
[0099]制劑的穩(wěn)定性 [0?00] (a)制劑的穩(wěn)定性
[0101] 制劑的穩(wěn)定性根據(jù)下表所述的穩(wěn)定性方案總結(jié)起始。穩(wěn)定性批次的組成和制造方 法代表該材料。針對在長期、加速和壓力測試條件下的儲存根據(jù)ICH指導(dǎo)評估了穩(wěn)定性分 布。包裝樣品并保存在3mL帶凸緣的鋁蓋和插入夾層的密封盤的盒中。直至目前，可從正在 進(jìn)行的制劑穩(wěn)定性研究獲得12個月的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。
[0102] 表2:保存條件
[0104] 在穩(wěn)定性測試過程中實施了下列測試:外觀、測定、相關(guān)蛋白、高分子量蛋白、pH、 顆粒物質(zhì)(可見和不可見顆粒）、抗微生物防腐劑測定（間甲酚和苯酚）、鋅含量。當(dāng)在推薦保 存條件保存時，對在+5 °C的長期保存條件保存6個月后物理性質(zhì)和在+5 °C的長期保存條件 保存12個月的化學(xué)性質(zhì)的研究確認(rèn)了制劑的穩(wěn)定性。僅能夠觀察到相關(guān)雜質(zhì)非常微小的變 化。
[0105] 當(dāng)在加速條件(6個月在+25°C/60%RH)保存時，相關(guān)蛋白和高分子量蛋白略微增 加。當(dāng)在加速條件（1個月在+40 °C/75%RH)保存時，相關(guān)蛋白和高分子量蛋白增加?；钚猿?分、間甲酚和苯酚的含量在加速條件下基本保持不變。
[0106] 由制劑穩(wěn)定性研究給出的結(jié)果，可確認(rèn)制劑的化學(xué)和物理穩(wěn)定性。
[0107] 表3和4展示了長期、加速和壓力穩(wěn)定性的結(jié)果，其中批次號"_114"、"j72"、"_ 173"和"_174"指代根據(jù)本發(fā)明的制劑。
[0111] 實施例3
[0112] U300和UlOO賴谷胰島素制劑的藥代動力學(xué)和藥效動力學(xué)
[0113] 在具有約30kg體重的閹割的雄性尤卡坦(Yucatan)小型豬中，實驗前通過用四氧 嘧啶處理約3周來誘導(dǎo)糖尿病。四氧嘧啶處理的小型豬是人中I型糖尿病的模型。
[0114] 第一組四氧嘧啶處理的小型豬(n = 4)皮下接受0.3U/kg賴谷胰島素 UlOOaOOU/ mLhUlOO組成對應(yīng)商品〃 Apidra 〃制劑。第二組(n = 4)皮下接受0.3U/kg賴谷胰島素 U300 (300U/mL)。
[0115] 賴谷胰島素的血漿濃度通過特定的LC-MS/MS測定確定(0.1 ng/mL的檢測水平）。在 UlOO和U300治療的小型豬中未檢測到賴谷胰島素血漿濃度的區(qū)別。
[0116] 用U100或U300賴谷胰島素治療時，血漿中的葡萄糖濃度迅速減少。U100和U300組 間未檢測到對血漿葡萄糖影響的差異。在兩種治療組的全部動物中，血漿葡萄糖濃度在治 療后3小時內(nèi)低于檢測閾值。
[0117]該實驗證明賴谷胰島素的U300制劑適于治療糖尿病。
【主權(quán)項】
1. 一種水性藥物制劑，其包含200-1000U/mL的賴谷胰島素。2. -種水性藥物制劑，其包含200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、 800、850、900、950或1 OOOU/ml濃度的賴谷胰島素。3. 權(quán)利要求1的水性制劑，其包含200-500U/mL的賴谷胰島素。4. 權(quán)利要求3的水性藥物制劑，其包含270-330U/mL的賴谷胰島素。5. 權(quán)利要求4的水性藥物制劑，其包含300U/mL的賴谷胰島素。6. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其基本上不含鋅或包含20yg/mL或更少的鋅。7. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其包含至少一種選自以下的物質(zhì)：緩沖物質(zhì)、 防腐劑和張度劑。8. 權(quán)利要求7的水性藥物制劑，其中所述緩沖物質(zhì)是氨丁三醇。9. 權(quán)利要求8的水性藥物制劑，其包含3-10mg/mL的氨丁三醇。10. 權(quán)利要求6-8任一項的水性藥物制劑，其中所述防腐劑是苯酚和/或間甲酚。 11 ·權(quán)利要求10的水性藥物制劑，其包含1 · 5-3 · 5mg/mL的間甲酚和/或0 · 5-3 · Omg/ml的 苯酸。12. 權(quán)利要求8-11任一項的水性藥物制劑，其中所述張度劑是甘油。13. 權(quán)利要求12的水性藥物制劑，其包含5-26mg/mL的甘油。14. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其基本上不含磷酸鹽。15. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其包含選自以下的氨基酸:精氨酸和甲硫氨 酸。16. 權(quán)利要求15的水性藥物制劑，其包含1 -30mg/ml濃度的氨基酸。17. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其包含非離子表面活性劑。18. 權(quán)利要求17的水性藥物制劑，其中所述非離子表面活性劑選自聚山梨酯20、聚山梨 酯80和泊洛沙姆171。19. 權(quán)利要求18的水性藥物制劑，其中所述非離子表面活性劑以l-200μg/ml的濃度存 在。20. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其中所述pH為3.5-9.5。21. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其中所述pH為6-8.5。22. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其中所述pH為7-7.8。23. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其基本上不含氯化物。24. 權(quán)利要求1-23任一項的水性藥物制劑，其用于注射。25. 權(quán)利要求1-23任一項的水性藥物制劑，其用于通過胰島素栗給藥。26. 上述權(quán)利要求任一項的水性藥物制劑，其用于I型糖尿病或II型糖尿病的治療。27. 治療I型糖尿病或II型糖尿病的方法，其包括給藥權(quán)利要求1 -24任一項的制劑至患 有I型糖尿病或II型糖尿病的患者。28. 權(quán)利要求27的方法，其中所述制劑通過注射給藥。29. 權(quán)利要求27的方法，其中所述制劑通過胰島素栗給藥。30. 權(quán)利要求1-23任一項的制劑在制備用于治療I型糖尿病或II型糖尿病的藥物中的 用途。31. 醫(yī)療裝置，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-26任一項的制劑。
【專利摘要】一種水性藥物制劑，其包含200-1000U/mL的賴谷胰島素。
【IPC分類】A61K9/08, A61K38/28, A61P3/10, A61K47/10, A61K47/00
【公開號】CN105705161
【申請?zhí)枴緾N201480058603
【發(fā)明人】P·盧斯, T·格爾曼, H·伯克托爾德, U·沃納, M·甘茲
【申請人】賽諾菲-安萬特德國有限公司
【公開日】2016年6月22日
【申請日】2014年10月24日
【公告號】CA2928320A1, US20150119323, WO2015059302A1