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      一種黃芪超微飲片及其制備方法與質(zhì)量檢測(cè)方法

      文檔序號(hào):9933659閱讀:1477來(lái)源:國(guó)知局
      一種黃芪超微飲片及其制備方法與質(zhì)量檢測(cè)方法
      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001] 本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域,具體涉及一種黃芪超微飲片及其制備方法與質(zhì)量檢測(cè)方 法。
      【背景技術(shù)】
      [0002] 中藥超微飲片是將單味中藥飲片經(jīng)過(guò)科學(xué)加工并提取其有效成分制成的中藥飲 片新劑型,具有服用方便、計(jì)量準(zhǔn)確、安全衛(wèi)生、便于調(diào)配等優(yōu)點(diǎn)。
      [0003] 本發(fā)明超微飲片是以黃芪飲片為原料,經(jīng)水提取、濃縮、干燥、超微粉碎等工藝制 備而成的中藥超微飲片,在此特定的制備工藝下制備的本發(fā)明超微飲片對(duì)治療子宮內(nèi)膜異 位能夠發(fā)揮意想不到的突出的治療優(yōu)勢(shì)。
      [0004] 子宮內(nèi)膜異位癥是婦科常見(jiàn)疾病之一,育齡婦女中的發(fā)病率約百分之十,且發(fā)病 率呈上升趨勢(shì)。由于子宮內(nèi)膜異位癥的多發(fā)性、復(fù)發(fā)性及治療的難度大,并且有惡變傾向, 為婦科疾病中的疑難雜癥之一,目前主要采用手術(shù)治療和激素治療。子宮內(nèi)膜異位癥引起 的盆腔痛、痛經(jīng)和不孕嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量和健康,已引起眾多醫(yī)家的重視。中醫(yī)藥 是治療子宮內(nèi)膜異位癥的主要方法之一,與西藥相比具有毒性作用小、可長(zhǎng)期服、療效穩(wěn)定 等特點(diǎn)。
      [0005] 目前關(guān)于本發(fā)明超微飲片尚無(wú)含量測(cè)定方法的報(bào)道。羽扇烯酮是黃芪中的活性成 分之一,對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定,可以保證臨床用藥的安全、有效。本發(fā)明提供了對(duì)本發(fā)明超微 飲片中羽扇烯酮含量測(cè)定的方法。
      [0006] 本發(fā)明所述黃芪的基原為豆科黃芪屬植物蒙古黃芪和膜莢黃芪的根。

      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0007] 本發(fā)明的目的是提供一種黃芪超微飲片。
      [0008] 本發(fā)明的另一目的是提供該黃芪超微飲片的制備方法。
      [0009] 本發(fā)明還提供了該黃芪超微飲片的質(zhì)量檢測(cè)方法。
      [0010] 本發(fā)明還提供了該黃芪超微飲片的制藥用途。
      [0011] 本發(fā)明的目的是由以下方式實(shí)現(xiàn)的: 一種黃芪超微飲片是由以下重量份的原料制成的:黃芪飲片10%~20%重量份的水提取 物、黃芪飲片80%~90%重量份的超微粉碎物。
      [0012] 該黃芪超微飲片的制備方法如下: (1) 取黃芪飲片10%~20%重量份,加5~15倍量水,煎煮1~4次,每次0.5~2.5小時(shí),合 并水煎液,濃縮成浸膏,得到黃芪飲片的水提取物; (2) 取黃芪飲片80%~90%重量份,進(jìn)行超微粉碎,得到黃芪飲片的超微粉碎物; (3) 將上述黃芪飲片的水提取物與黃芪飲片的超微粉碎物合并,制粒,干燥,得黃芪超 微飲片。
      [0013] 該黃芪超微飲片中的黃芪飲片的水提取物的優(yōu)選制備方法如下:取黃芪飲片10% ~20%重量份,加8~12倍量水,煎煮2~3次,每次1~2小時(shí),合并水煎液,濃縮成浸膏,得到 黃芪飲片的水提取物。
      [0014] 該黃芪超微飲片中的黃芪飲片的水提取物的更為優(yōu)選的制備方法如下:取黃芪飲 片,加1 〇倍量水,煎煮2次,每次1小時(shí),合并水煎液,濃縮成浸膏,得到黃芪飲片的水提取物。
      [0015] 該黃芪超微飲片中的黃芪飲片的超微粉碎物的制備方法如下:取黃芪飲片80%~ 90%重量份,采用粉碎機(jī)對(duì)黃芪飲片進(jìn)行超微粉碎,超微粉碎后,黃芪飲片的超微粉碎物的 粒徑為10~75μπι。
      [0016] 該黃芪超微飲片中的黃芪飲片的超微粉碎物的優(yōu)選制備方法如下:采用氣流粉碎 機(jī)對(duì)黃芪飲片進(jìn)行超微粉碎,氣流粉碎機(jī)的氣流壓力為1000~1200kPa,進(jìn)料速度為160~ 200r · min-S分級(jí)頻率為30~40Hz,粉碎時(shí)間為40~50min,得到黃芪飲片的超微粉碎物。 [0017]該黃芪超微飲片中的黃芪飲片的超微粉碎物的更為優(yōu)選的制備方法如下:采用氣 流粉碎機(jī)對(duì)黃芪飲片進(jìn)行超微粉碎,氣流粉碎機(jī)的氣流壓力為1 lOOkPa,進(jìn)料速度為180r · mirT1,分級(jí)頻率為35Hz,粉碎時(shí)間為45min,得到黃芪飲片的超微粉碎物。
      [0018] 所述的黃芪超微飲片可以采用高效液相色譜法對(duì)該黃芪超微飲片中的羽扇烯酮 進(jìn)行含量測(cè)定,測(cè)定方法為: (1) 色譜條件:色譜柱:C18柱;流動(dòng)相:比例為83 :17的乙腈-0.5%磷酸溶液;流速: 1. OmL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):210nm;柱溫:35°C ;進(jìn)樣量:20yL;理論板數(shù)按羽扇稀酮計(jì)算應(yīng)不低于 5000; (2) 對(duì)照品溶液的制備:取羽扇烯酮對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每lmL含 0.0773mg的溶液,作為對(duì)照品儲(chǔ)備液;再精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液2mL至25mL量瓶中,加甲醇 稀釋至刻度,搖勻,即得; (3) 供試品溶液的制備:取本發(fā)明超微飲片,研細(xì),精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加 入甲醇25mL,密塞,稱定重量,超聲處理30min,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量, 搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得; (4 )測(cè)定:精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液各20yL,注入高效液相色譜儀中測(cè)定。
      [0019] 所述的黃芪超微飲片還可以采用高效液相色譜法對(duì)該黃芪超微飲片中的異微凸 劍葉莎醇進(jìn)行含量測(cè)定,測(cè)定方法為: (1) 色譜條件:色譜柱為C18柱;流動(dòng)相:比例為10:90的乙腈-0.1%磷酸;柱溫:30°C ;流 速:1.0 ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng):207 nm;進(jìn)樣量:20yL;理論板數(shù)按異微凸劍葉莎醇計(jì)算應(yīng)不低 于5000; (2) 對(duì)照品溶液的制備:精密稱取異微凸劍葉莎醇對(duì)照品10.13 mg,置100 ml量瓶中, 用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取2 ml,置25 ml量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖 勻,則每1 ml含異微凸劍葉莎醇8.1 yg; (3) 供試品溶液的制備:精密稱取黃芪超微飲片約0.2 g至100 ml量瓶中,加甲醇80 ml 超聲15min,冷卻后用甲醇定容至刻度,搖勾,移取1 ml至10 ml量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻 度,搖勻,0.45 μπι濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液作為供試品溶液; (4 )測(cè)定:精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液各20yL,注入高效液相色譜儀中測(cè)定。
      [0020] 所述的黃芪超微飲片可用于制備治療子宮內(nèi)膜異位癥的藥物。
      [0021] 所述的黃芪超微飲片還可用于制備治療膝關(guān)節(jié)炎的藥物。
      [0022] 通過(guò)如下實(shí)驗(yàn)研究驗(yàn)證本發(fā)明的技術(shù)效果: 實(shí)驗(yàn)一:本發(fā)明超微飲片治療子宮內(nèi)膜異位癥的實(shí)驗(yàn)研究 1實(shí)驗(yàn)材料 1.1動(dòng)物 健康未交配雌性Wistar大鼠,體重200~250g,購(gòu)自甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。
      [0023] 1.2藥物 1.2.1本發(fā)明黃芪超微飲片:處方:黃芪飲片200g的水提取物、黃芪飲片800g的超微粉 碎物。制法:(1)取黃芪飲片200g,加水2000mL,煎煮2次,每次1小時(shí),合并水煎液,濃縮成浸 膏,得到黃芪飲片的水提取物;(2)取黃芪飲片800g,采用氣流粉碎機(jī)對(duì)黃芪飲片進(jìn)行超微 粉碎,氣流粉碎機(jī)的氣流壓力為llOOkPa,進(jìn)料速度為180r · mirT1,分級(jí)頻率為35Hz,粉碎時(shí) 間為45min,采用激光粒徑儀濕法測(cè)定粉體的粒徑分布,細(xì)粉的D 5Q,D9Q分別為29.758μπι, 58.376μπι,得到黃芪飲片的超微粉碎物;(3)將黃芪水提取物與黃芪超微粉碎物混合,得到 本發(fā)明黃芪超微飲片。配置成〇. 5g/mL藥物混懸液,備用。
      [0024] 1.2.2對(duì)比黃芪超微飲片A:處方:黃芪飲片200g的水提取物、黃芪飲片800g的超微 粉碎物A。制法:(1)取黃芪飲片200g,加水2000mL,煎煮2次,每次1小時(shí),合并水煎液,濃縮成 浸膏,得到黃芪飲片的水提取物;(2)取黃芪飲片800g,采用氣流粉碎機(jī)對(duì)黃芪飲片進(jìn)行超 微粉碎,采氣流粉碎機(jī)的氣流壓力為1300kPa,進(jìn)料速度為150r · mirT1,分級(jí)頻率為50Hz,粉 碎時(shí)間為60min,采用激光粒徑儀濕法測(cè)定粉體的粒徑分布,細(xì)粉的D5Q,D9〇分別為4.658μηι, 8.951μπι,得到黃芪飲片的超微粉碎物A;(3)將黃芪水提取物與黃芪超微粉碎物Α混合,得到 對(duì)比黃苗超微飲片A。配置成0.5g/mL藥物混懸液,備用。
      [0025] 1.2.3對(duì)比黃芪粉碎飲片B:處方:黃芪飲片200g的水提取物、黃芪飲片800g的粉碎 物B。制法:(1)取黃芪飲片200g,加水2000mL,煎煮2次,每次1小時(shí),合并水煎液,濃縮成浸 膏,得到黃芪飲片的水提取物;(2)取黃芪飲片800g,采用常規(guī)的齒式中藥粉碎機(jī)粉碎,過(guò) 120目篩,采用激光粒徑儀濕法測(cè)定粉體的粒徑分布,細(xì)粉的D 5Q,D9Q分別為95.658μπι, 118.95Ιμπι,得到黃芪飲片的粉碎物Β; (3)將黃芪飲片的水提取物與黃芪飲片的粉碎物Β混 合,得到對(duì)比黃芪粉碎飲片Β。配置成0.5g/mL藥物混懸液,備用。
      [0026] 1.2.4丹那唑膠囊:200 mg/粒,江蘇聯(lián)環(huán)藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。
      [0027] 1.3試劑及儀器 雌二醇(E2)放免藥盒、孕酮(P)放免藥盒,由天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司提供。ER、 PR、VEGF、NK細(xì)胞免疫組化試劑盒,由武漢博士德生物工程有限公司提供。2008 G/r自動(dòng) 計(jì)數(shù)儀。顯微鏡:OLYMPUS,型號(hào)1X70。
      [0028] 2實(shí)驗(yàn)方法 2.1造模 動(dòng)物模型建立取成年雌性大鼠陰道涂片檢查動(dòng)情周期。取動(dòng)情期大鼠參考文獻(xiàn)方法 (常暖.大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型的建立及其病理學(xué)觀察[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 1998,14(1): 67-69.),戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉,于下腹部正中靠左上方做一長(zhǎng) 約1.5 cm切口,挑出左側(cè)子宮角,結(jié)扎子宮系膜血管,再結(jié)扎需切除的子宮段的兩端,切取 一段1.5 cm長(zhǎng)的子宮。在無(wú)菌的戴克隆氏液中分離子宮內(nèi)膜,然后切取5 mmX5 mm的內(nèi)膜 組織片段,將上皮層對(duì)著腹壁,縫合于腹壁上。建模后3周,擇動(dòng)情期大鼠,開(kāi)腹見(jiàn)移植子宮 內(nèi)膜體積增大,形成內(nèi)有液體積聚并有血管形成的透明小囊泡,以體積^ 20 mm3,內(nèi)膜囊泡 可見(jiàn)透明積液為造模成功標(biāo)準(zhǔn)。
      [0029] 2.2分組與給藥 分組及給藥取建模成功60只大鼠,按異位內(nèi)膜體積大小隨機(jī)分為6組,即模型組、丹那 唑陽(yáng)性藥物組、本發(fā)明黃芪超微飲片組、對(duì)比黃芪超微
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