專利名稱：用作抗有絲分裂以及抗腫瘤藥物的氟化喹諾酮的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及喹諾酮鹽衍生物、包含該化合物的藥用制劑、所述化合物作為抗有絲分裂以及抗腫瘤藥物的使用方法，特別用于治療腫瘤例如乳腺癌和卵巢癌。
背景技術(shù)：
微管是開(kāi)發(fā)抗癌化療化合物最重要的亞細(xì)胞靶之一。長(zhǎng)春花生物堿類以及紫杉類(taxoids)為眾所周知的抗有絲分裂藥物實(shí)例，此類藥物臨床廣泛用于治療不同的癌癥(E.Rowinsky等，Pharmacol. & Ther.1992，52，35-84；J.Verweij等，Ann.Oncol.1994，5，495-505)。秋水仙堿(

圖1)是另一種眾所周知的抑制微管裝配藥物(S.Hastie，Pharm. & Ther.1991，51，377-401；S.Hastie，Pharm. & Ther.1991，51，377-401)。盡管秋水仙堿用于癌癥治療效果有限，但是該藥物已成為研究微管結(jié)構(gòu)和功能的重要工具。長(zhǎng)春花生物堿類、紫杉類以及秋水仙堿各自通過(guò)獨(dú)特的機(jī)制與微管蛋白相互作用，所述機(jī)制可能涉及微管蛋白的獨(dú)特結(jié)合部位。
作為抗有絲分裂和抗腫瘤藥物的2-苯基-4-喹諾酮系列的合成及生物學(xué)評(píng)價(jià)已有報(bào)道(S.Kuo等，J.Med.Chem.1993，36，1146-1156；L.Li等，J.Med.Chem.1994，37，1126-1135；L.Li等，J.Med.Chem.1994，37，3400-3407)。用國(guó)立癌癥研究所的60種人腫瘤細(xì)胞系(HTCL)的體外篩選以及微管蛋白聚合抑制作用分析來(lái)評(píng)價(jià)所述化合物。HTCL篩選顯示大多數(shù)化合物具有細(xì)胞毒性，其GI50值在低的微摩爾至納摩爾濃度范圍。一般來(lái)說(shuō)，細(xì)胞毒性與微管蛋白聚合抑制間具有良好相關(guān)性。SAR研究發(fā)現(xiàn)2’-氟-6，7-亞甲二氧基-2-苯基-4-喹諾酮(化合物1；圖1)(L.Li等，J.Med.Chem.1994，37，1126-1135)，在HTCL篩選中顯示其細(xì)胞毒性的log GI50平均值為-6.47(使細(xì)胞生長(zhǎng)減少50％的對(duì)數(shù)濃度)?；衔?也是微管蛋白聚合的抑制劑，其IC50值為0.85μM。還證實(shí)化合物1具有良好的抗OVCAR-3卵巢細(xì)胞系的體內(nèi)活性，延長(zhǎng)帶有腫瘤的小鼠的生命期達(dá)130％。
因此，本發(fā)明的目的是開(kāi)發(fā)可以用作抗有絲分裂藥物、抗腫瘤藥物或者兩種作用的藥物的其它化合物。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明的第一方面是一種式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基(優(yōu)選H或低級(jí)烷基；最優(yōu)選H)；R2選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基(優(yōu)選H或低級(jí)烷基；最優(yōu)選H)；R3選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基(優(yōu)選H或低級(jí)烷基；最優(yōu)選H)；
R4選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基(優(yōu)選H或低級(jí)烷基；最優(yōu)選H)；R5選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基(優(yōu)選H或低級(jí)烷基；最優(yōu)選H)；n為0、1、2、3或4(應(yīng)當(dāng)理解的是當(dāng)n為0時(shí)，則所有位置都由H取代)。
作為以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，F(xiàn)取代優(yōu)選在苯基的鄰位，或者多個(gè)F取代位于鄰位和其它位置 本發(fā)明第二方面是藥用制劑，所述制劑包含或本質(zhì)上包含式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體(例如水性載體)。
本發(fā)明第三方面是治療腫瘤的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明第四方面是抑制細(xì)胞有絲分裂的方法，所述方法包括使細(xì)胞與抑制細(xì)胞有絲分裂有效量的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸。
本發(fā)明第五方面是式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中
R1選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代、氨基以及雜環(huán)；R2選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基(優(yōu)選H或低級(jí)烷基；最優(yōu)選H)；R3選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基(優(yōu)選H或低級(jí)烷基；最優(yōu)選H)；R4選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基(優(yōu)選H或低級(jí)烷基；最優(yōu)選H)。
作為以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，優(yōu)選F取代在苯基的鄰位，或者多個(gè)F取代在鄰位和其它位置 本發(fā)明第六方面是藥用制劑，所述制劑包含或本質(zhì)上包含式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體(例如水性載體)。本發(fā)明第七方面是治療腫瘤的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明第八方面是抑制細(xì)胞有絲分裂的方法，所述方法包括使細(xì)胞與抑制細(xì)胞有絲分裂有效量的式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸。
本發(fā)明上述以及其它目的和方面利用本發(fā)明附圖以及以下說(shuō)明書(shū)詳細(xì)說(shuō)明。
附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明圖1圖示本發(fā)明部分化合物以及現(xiàn)有技術(shù)部分化合物。
圖2圖示制備本發(fā)明化合物的第一個(gè)流程，即流程1。
圖3圖示制備本發(fā)明化合物的第二個(gè)流程，即流程2。
圖4圖示制備本發(fā)明化合物的第三個(gè)流程，即流程3。
優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)說(shuō)明本文使用的“烷基”是指直鏈或支鏈、飽和或不飽和烴基鏈，包括例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基和叔丁基。
本文使用的“烷氧基”是指直鏈或支鏈、飽和或不飽和烴氧基鏈，包括例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。
本文使用的“氨基”是指取代基-NR1R2，其中R1和R2各自獨(dú)立選自H和C1-C4烷基。
本文使用的“鹵代”、“鹵化物”或“鹵素”是指氟、氯、溴和碘。
本文使用的“雜環(huán)”是指任何雜環(huán)，特別是包含一個(gè)或兩個(gè)選自N、S和O的雜原子的5元或6元雜環(huán)。
本文使用的“治療”是指使患有疾病的患者受益的任何類型的治療，包括改善患者病情(例如改善一種或多種癥狀)、延緩疾病發(fā)展等。
本文使用的“藥學(xué)上可接受”是指所述化合物或組合物適合給予患者以實(shí)現(xiàn)本文所述治療，而且根據(jù)疾病嚴(yán)重性和治療需要沒(méi)有過(guò)度的有害副作用。1.活性化合物2’-氟-6，7-亞甲二氧基-2-苯基-4-喹諾酮(1)的合成以前已有報(bào)道(L.Li等，J.Med.Chem.1994，37，1126-1135)。烯醇醚衍生物(2-5)的合成如流程1所示。用NaH的DMF溶液處理1，接著用氯代乙酸乙酯或4-氯代丁酸乙酯烷基化獲得2和4。用10％NaOH的MeOH溶液分別水解2和4獲得羧酸3和5。用Lawesson氏試劑的甲苯溶液處理1獲得硫酮6。在室溫下用叔丁氧基羰基(Boc)的CH2Cl2溶液將1中的氮原子轉(zhuǎn)化成氨基甲酸酯(7)。
根據(jù)文獻(xiàn)方法(L.Li等，J.Med.Chem.1994，37，1126-1135)合成13(圖2)。硝化3’-氯代苯乙酮(8)獲得2’-硝基-5’-氯代苯乙酮。用吡咯啉親核置換5’-氯基團(tuán)，接著氫化獲得11。在THF中使11和2-氟代苯甲酰氯縮合生成聯(lián)芳酰胺(12)。在叔丁氧化物(叔丁氧鉀)存在下環(huán)化12獲得13。
圖4所示化合物的制備可以通過(guò)縮合適當(dāng)?shù)?-氨基苯乙酮和2-氟代苯甲醛，接著在酸催化下環(huán)化獲得終產(chǎn)物。
本發(fā)明公開(kāi)的活性化合物可以如上所述制備成它們的藥學(xué)上可接受的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽保持所需要的母體化合物生物學(xué)活性并且不會(huì)產(chǎn)生不需要的毒性作用。這樣的鹽的實(shí)例有(a)與以下無(wú)機(jī)酸生成的鹽例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等；以及與以下有機(jī)酸生成的鹽例如乙酸、乙二酸、酒石酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、富馬酸、葡萄糖酸、檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸、苯甲酸、鞣酸、棕櫚酸、藻酸、多聚谷氨酸、萘磺酸、甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸、萘二磺酸、聚半乳糖醛酸等；(b)與元素陰離子(例如氯、溴和碘)形成的鹽；(c)由堿獲得的鹽，例如銨鹽、堿金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如鈣鹽和鎂鹽)以及與有機(jī)堿(例如二環(huán)己胺和N-甲基-D-葡糖胺)形成的鹽。2.藥用制劑上述活性化合物可以按照已知技術(shù)以藥用載體配制用于給藥。參見(jiàn)例如Remington，The Science And Practice of Pharmacy(第9版，1995)。在制造根據(jù)本發(fā)明藥用制劑時(shí)，所述活性化合物(包括其生理學(xué)可接受的鹽)通常還特別與可接受的載體混合。所述載體當(dāng)然必須為可接受的，也就是與制劑任何其它成分相容，并且必須對(duì)患者無(wú)害。所述載體可以為固體或液體，或者固體和液體兩種狀態(tài)，并且優(yōu)選用所述化合物配制為單位劑量制劑(例如片劑)，它可以包含從0.0％或0.5％至95％或99％(重量)的所述活性化合物。一種或多種活性化合物可以加入本發(fā)明制劑中，它可以通過(guò)藥學(xué)上已知的任何技術(shù)制備，基本包括混合各種組分，任選包含一種或多種輔助成分。
本發(fā)明制劑包括適合以下給藥途徑的制劑口服、直腸、局部、口腔(例如舌下)、陰道、胃腸外(例如皮下、肌內(nèi)、真皮內(nèi)或靜脈內(nèi))、局部(即皮膚以及粘膜表面，包括氣道表面)以及透皮，但是在任何特定情況下最適合的給藥途徑取決于所治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性以及所用具體活性化合物的性質(zhì)。
適合口服給藥的制劑可以為獨(dú)立單位，例如膠囊劑、扁囊劑、錠劑或片劑，每個(gè)單位包含預(yù)定量的活性化合物；粉劑或顆粒劑；水性或非水性液體的溶液劑或混懸劑；或者水包油或油包水乳劑。所述制劑可以用任何藥學(xué)上適當(dāng)?shù)姆椒ㄖ苽?，包括使活性化合物與適當(dāng)載體(可以包括一種或多種上述輔助成分)混合的步驟。通常，本發(fā)明制劑的制備是將活性化合物與液體或微細(xì)固體載體或這兩類載體均勻、緊密地混合，如果需要，然后將所得混合物成型。例如可以通過(guò)壓制或模塑包含所述活性化合物以及任選與一種或多種輔助成分的粉末或顆粒制備片劑。壓縮片劑的制備是可以用合適的機(jī)器壓制自由流動(dòng)形式的所述化合物(例如粉末或顆粒)，任選混合粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑和/或表面活性/分散劑。模塑片劑的制備可以用合適的機(jī)器模塑經(jīng)惰性液體粘合劑潤(rùn)濕的粉狀化合物。
適合口腔(舌下)給藥的制劑包括所述活性化合物包含在調(diào)味基質(zhì)(通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃芪膠)中的錠劑以及所述活性化合物包含在惰性基質(zhì)(例如明膠和甘油或者蔗糖和阿拉伯膠)中的錠劑。
適合胃腸外給藥的本發(fā)明制劑包括所述活性化合物的無(wú)菌水性和非水性注射溶液，優(yōu)選與預(yù)定接受者血液等滲的制劑。這些制劑可以包含抗氧劑、緩沖劑、制菌劑以及使所述制劑與預(yù)定接受者血液等滲的溶質(zhì)。水性或非水性無(wú)菌混懸劑可以包括混懸劑以及增稠劑。所述制劑可以裝在單位劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿以及小瓶，可以貯存在冷凍干燥環(huán)境下，在臨用前只需要直接加入無(wú)菌液體載體，例如鹽水或注射用水。臨時(shí)配制的注射溶液劑和混懸劑可以用前述類型的無(wú)菌粉劑、顆粒劑及以及片劑制備。例如本發(fā)明一個(gè)方面提供包含式(I)化合物或其鹽的可注射的穩(wěn)定無(wú)菌組合物，該組合物以單位劑型包裝于密封容器中。所述化合物或鹽以凍干品的形式提供，凍于制品能夠用適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)上可接受載體復(fù)原以形成適合注射到患者的液體組合物。單位劑型通常包含約10mg～約10g所述化合物或鹽。當(dāng)所述化合物或鹽基本不溶于水時(shí)，可以用足以使所述化合物或鹽在水性載體中乳化的足夠量生理學(xué)上可接受的乳化劑。一種這樣的有效乳化劑為磷脂酰膽堿。
適合直腸給藥的制劑優(yōu)選為單位劑量的栓劑。它們的制備可以是將所述活性化合物與一種或多種常規(guī)固體載體(例如可可脂)混合，然后將所得混合物成型。
適合皮膚局部給藥的制劑優(yōu)選采用以下形式軟膏、乳膏、洗劑、糊劑、凝膠、噴霧劑、煙霧劑或油?？梢允褂玫妮d體包括凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇類、透皮增強(qiáng)劑以及兩種或多種所述載體的組合物。
適合透皮給藥的制劑可以為離散型貼劑，貼劑適合與接受者表皮保持長(zhǎng)時(shí)間緊密接觸。適合透皮給藥的制劑還可以通過(guò)離子電滲療法給藥(參見(jiàn)例如Pharmaceutical Research 3(6)318(1986))，典型采用所述活性化合物的任選緩沖的水溶液形式。合適的制劑包含檸檬酸鹽或雙\三緩沖劑(pH6)或乙醇/水并且包含0.1～0.2M活性成分。
進(jìn)一步，本發(fā)明提供本文公開(kāi)的化合物及其鹽的脂質(zhì)體制劑。形成脂質(zhì)體混懸劑的技術(shù)在本領(lǐng)域眾所周知。當(dāng)所述化合物或其鹽為水溶性鹽時(shí)，用常規(guī)脂質(zhì)體技術(shù)可以將前述化合物摻入到脂質(zhì)囊中。在這種情況下，由于所述化合物或鹽的水溶性，所述化合物或鹽基本上被帶入親水中心或脂質(zhì)體核。使用的脂質(zhì)層可以為任何常規(guī)組合物，可以包含膽固醇也可以不包含膽固醇。當(dāng)目標(biāo)化合物或鹽不溶于水時(shí)，再使用常規(guī)脂質(zhì)體形成技術(shù)，則所述鹽可能基本上被帶入形成脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)的疏水性脂質(zhì)雙分子層。在任一情況下，所制備的脂質(zhì)體可以通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)超聲處理或者均化技術(shù)減小粒徑。
當(dāng)然，可以冷凍干燥包含本文公開(kāi)的化合物或其鹽的脂質(zhì)體制劑制備凍干制品，該制品可以用藥學(xué)上可接受載體(例如水)復(fù)原再生脂質(zhì)體混懸劑。
其它藥用組合物可以用本文公開(kāi)的不溶于水的化合物或其鹽制備，例如水性基質(zhì)乳劑。在這樣的情況下，所述組合物包含足夠量的藥學(xué)上可接受的乳化劑以乳化需要量的所述化合物或其鹽。特別有效的乳化劑包括磷脂酰膽堿以及卵磷脂。
除了式(I)化合物或它們的鹽外，藥用組合物還可以包含其它添加劑，例如pH-調(diào)節(jié)添加劑。具體地講，有效的pH-調(diào)節(jié)劑包括酸(例如鹽酸)、堿或緩沖劑(例如乳酸鈉、乙酸鈉、磷酸鈉、檸檬酸鈉、硼酸鈉或葡萄糖酸鈉)。進(jìn)一步，所述組合物可以包含微生物防腐劑。有效的微生物防腐劑包括對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯以及芐醇。通常在所述制劑置于多劑量使用的小瓶時(shí)使用微生物防腐劑。當(dāng)然，如上所述，本發(fā)明藥用制劑可以用本領(lǐng)域熟知的技術(shù)冷凍干燥。3.給藥劑量和給藥途徑本文介紹的活性化合物抑制微管蛋白聚合和/或具有抗有絲分裂活性。這樣的化合物用于治療的病癥包括牛皮癬、痛風(fēng)、乳頭狀瘤(papiloma)、疣以及各種腫瘤，特別是實(shí)體瘤，包括但不限于肺癌(例如非小細(xì)胞肺癌)、結(jié)腸癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、黑素瘤、卵巢癌、前列腺癌以及乳腺癌。
用本發(fā)明方法治療的患者通常為人類患者，但是本發(fā)明方法可以用于任何本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的合適患者，特別是哺乳動(dòng)物患者，除人外還包括馬、牛、狗、兔、雞、綿羊等。如上所述，本發(fā)明提供藥用制劑，所述制劑包含式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的以下給藥途徑的載體口服、直腸、局部、口腔、胃腸外、真皮內(nèi)或靜脈內(nèi)以及透皮。
任何具體化合物(其用途屬于本發(fā)明范圍)的治療有效劑量在化合物與化合物之間、患者與患者之間略有不同并且取決于患者的病癥以及給藥途徑。一般建議是，劑量約0.1～約50mg/kg具有治療作用，但是口服和/或煙霧劑給藥時(shí)可能使用更高劑量。在更高水平涉及的毒性可能限制靜脈內(nèi)劑量至更低的水平，例如至多約10mg/kg，所有重量計(jì)算基于活性基質(zhì)的重量，包括使用鹽的情況。靜脈內(nèi)或肌內(nèi)給藥可以使用的典型劑量為約0.5mg/kg～約5mg/kg?？诜o藥可以使用的劑量為約10mg/kg～約50mg/kg。
本發(fā)明用以下的非限制性實(shí)施例作更詳細(xì)的說(shuō)明。
實(shí)施例1抗有絲分裂、抗腫瘤藥物氟化2-苯基-4-喹諾酮合成氟化2-苯基-4-喹諾酮衍生物并用NCI的60種人腫瘤細(xì)胞系在體外篩選評(píng)價(jià)。所得結(jié)果說(shuō)明酮部分起關(guān)鍵的活性作用。在所測(cè)試的化合物中，發(fā)現(xiàn)2’-氟-6-吡咯-2-苯基-4-喹諾酮(13)對(duì)腎腫瘤細(xì)胞系和黑素瘤腫瘤細(xì)胞系具有最有效的細(xì)胞毒性活性(log GI50＜-8.00)。化合物13也是有效的微管蛋白聚合抑制劑(IC50＝0.46μM)，放射性標(biāo)記的秋水仙堿結(jié)合微管蛋白，其活性相當(dāng)于有效抗有絲分裂天然產(chǎn)物秋水仙堿、鬼臼毒素以及考布他汀A-4。A.實(shí)驗(yàn)熔點(diǎn)用Fisher-Johns熔點(diǎn)裝置測(cè)定，沒(méi)有校正。用AtlanticMicrolabs，Atlanta，GA進(jìn)行元素分析。旋光性用DIP-1000旋光計(jì)測(cè)定。1H-NMR譜用Bruker AC-300分光計(jì)測(cè)定，用TMS作內(nèi)標(biāo)，CDCl3作溶劑?？焖偕V法在硅膠上進(jìn)行(篩目25-150μM)，用己烷-乙酸乙酯混合物作洗提液。2’-氟-6，7-(亞甲二氧基)-2-苯基-4-喹諾酮(1)將2-乙?；?4，5-(亞甲二氧基)-苯胺(3.0mmol)溶于20mL THF和10mL三乙胺?；旌衔镌诒≈欣鋮s。滴加2-氟代苯甲酰氯(3.0mmol)溶液。在0℃30分鐘后，將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，傾入50mL冰水中。收集沉淀，依次用水和甲醇洗滌。真空干燥固體，然后懸浮于20mL叔丁醇中。加入叔丁醇鉀(1.17g，10.5mmol)，再將混合物在氮?dú)夥障掠?0℃加熱24小時(shí)。將混合物冷卻后傾入到30mLNH4Cl水溶液。收集固體，依次用水以及CHCl3和MeOH的混合物(10∶1)洗滌。粗產(chǎn)物用CHCl3和MeOH的混合物(20∶1)重結(jié)晶。1HNMR(DMSO-d6)δ 6.20(s，1H，H-3)，6.17(s，2H，OCH2O)，7.09(s，1H，H-8)，7.43(s，1H，H-5)，7.44(m，2H，H-3’，H-6’)，7.62，7.69(兩者均為t，J＝7.5Hz，分別為1H，H-4’，H-5’)；分析(C16H10FNO3)C，H，N。2’-氟-6，7-(亞甲二氧基)-2-苯基-4-(O-乙酸乙酯)喹啉(2)。
將化合物1(283mg，1mmol)溶于無(wú)水DMF(12mL)，然后在40℃攪拌下分批加入NaH(60％的油溶液，110mg，2.8mmol)。加入氯代乙酸乙酯(500mg，4.08mmol)，然后在60℃將反應(yīng)物攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入冰水后過(guò)濾。所得沉淀用水洗滌，用CH2Cl2-MeOH重結(jié)晶獲得260mg化合物2，收率71.2％；mp 119-120℃；1HNMR(CDCl3)δ1.31(t，J＝3.7Hz，3H，CH3)，4.32(q，J＝7.2Hz，2H，CH2CH3)，4.88(s，2H，OCH2COO)，6.13(s，2H，OCH2O)，7.04(s，1H，H-3)，7.17(m，1H，H-3’)，7.30(m，1H，H-5’)，7.40(m，1H，H-4’)，7.42(s，1H，H-8)，7.60(s，1H，H-5)，8.06(m，1H，H-6’)；分析(C20H16FNO5)C，H，N。2’-氟-6，7-(亞甲二氧基)-2-苯基-4-(O-乙酸)喹啉(3)。
將化合物2(160mg，0.44mmol)用NaOH水溶液(10％，15mL)處理。將反應(yīng)混和物回流2小時(shí)，冷卻至室溫。加入HCl水溶液(10％)直至pH＝1～2。過(guò)濾收集所得沉淀，用MeOH/CHCl3重結(jié)晶獲得淺黃色固體化合物3，130mg，收率87.0％；mp＞300℃；1H NMR(DMSO-d6)δ5.18(s，2H，OCH2COO)，6.33(s，2H，OCH2O)，7.42(s，1H，H-3)，7.45(s，1H，H-8)，7.48(m，2H，H-3’和H-5’)，7.54(s，1H，H-5)，7.65(m，1H，H-4’)，7.91(m，1H，H-6’)；分析(C18H12FNO5·0.25H2O)C，H，N。2’-氟-6，7-(亞甲二氧基)-2-苯基-4-(O-4’-丁酸乙酯)喹啉(4)由化合物1和4-氯代丁酸乙酯獲得；收率77.6％；mp 93-94℃；1H NMR(CDCl3)δ1.27(t，3H，CH3，J＝7.0Hz)，2.29(m，2H，CH2CH2CH3)，2.62(t，J＝7.29Hz，2H，H-3’)，4.18(q，J＝7.0Hz，2H，OCH2CH3)，4.28(q，J＝6.0Hz，2H，OCH2CH2)，6.12(s，2H，OCH2O)，7.13(s，1H，H-3)，7.15-7.30(m，3H，H-3’，H-4’，H-5’)，7.41(s，1H，H-8)，7.46(s，1H，H-5)，8.02(m，1H，H-6’)；分析(C22H20FNO5)C，H，N。2’-氟-6，7-(亞甲二氧基)-2-苯基-4-(O-乙基4’-丁基乙酸)喹啉(5)按照合成3的相同步驟用NaOH水溶液水解4獲得以上化合物；收率82.5％；mp＞300℃；1H NMR(DMSO-d6)δ2.10(m，2H，CH2CH2CH2)，2.49(t，2H，CH2COO)，4.29(t，2H，OCH2)，6.22(s，2H，OCH2O)，7.23(s，1H，H-3)，7.33(m，1H，H-3’)，7.35(m，1H，H-5’)，7.38(s，1H，H-8)，7.44.(s，1H，H-5)，7.52(m，1H，H-4’)，7.95(m，1H，H-6’)；分析(C20H16FNO5)C，H，N。2’-氟-6，7-(亞甲二氧基)-2-苯基喹啉基-4-硫酮(6)將化合物1(500mg，1.77mmol)的30mL無(wú)水甲苯溶液在室溫下攪拌幾分鐘，在連續(xù)攪拌下加入Lawessen試劑(1.07g，2.65mmol)。將混合物在110-120℃攪拌24小時(shí)，變?yōu)樯畛壬吻迦芤?。將混合物冷卻至室溫，傾入水中，用CH2Cl2萃取。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮。用洗提液為CH2Cl2/CH3OH的色譜法處理獲得430.6mg 6；收率81.5％；mp 226-228℃；1H NMR(DMSO-d6)δ6.24(s，2H，、OCH2O)，7.18(s，1H，H-3)，7.33(s，1H，H-8)，7.50(m，2H，H-3’，H-5’)，7.72(m，1H，H-4’)，7.77(m，1H，H-6’)，8.08(s，1H，H-5)，12.93(s，1H，NH)；分析結(jié)果(C16H10FNO2S·1.05 H2O)C，H，N。N-Boc-2’-氟-6，7-(亞甲二氧基)-2-苯基-4-喹諾酮(7)1(283mg，1mmol)的6ml二氯甲烷溶液中加入三乙胺(0.15mL，1mmol)、二碳酸二叔丁酯(436mg，2mmol)和4-二甲基氨基吡啶(61.25mg，1mmol)。將溶液在氮?dú)夥障掠谑覝財(cái)嚢?4小時(shí)。將混合物傾入水中，用CH2Cl2萃取，用水洗滌。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮。用洗提液為EtOAc/己烷的色譜法處理獲得7；收率86.8％；mp 118-120℃，1H NMR(CDCl3)δ1.61(s，9H，3xCH3)，6.14(s，2H，OCH2O)，7.14(m，1H，H-3’)，7.20(s，1H，H-3)，7.29(s，1H，H-5)，7.40(m，1H，H-5’)，7.46(s，1H，H-8)，7.71(m，1H，H-4’)，8.07(m，1H，H-6’)；分析結(jié)果(C21H18FNO5)C，H，N。2’-氟-6-吡咯甲酰-2-苯基-4-喹諾酮(13)將2-氨基-5-吡咯甲酰-苯乙酮(8，1g，4.9mmol)溶于10mL THF和2ml三乙胺?；旌衔镌诒≈欣鋮s。滴加2-氟代苯甲酰氯(855mg，5.39mmol)溶液。在0℃30分鐘后，將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，傾入50mL冰水中。收集沉淀，依次用水和甲醇洗滌。真空干燥固體，懸浮于20mL叔丁醇中。加入叔丁醇鉀(1.65g，14.7mmol)，將混合物在氮?dú)夥障掠?0℃加熱16小時(shí)。將混合物冷卻，傾入30mL冰水中。加入10％HCl水溶液至pH＝6。收集固體，用水洗滌幾次。粗產(chǎn)物用CH2Cl2和MeOH的混合物重結(jié)晶獲得13；收率59.3％；1HNMR(DMSO-d6)δ2.01(m，4H，CH2CH2CH2CH2)，3.33(m，4H，CH2CH2CH2CH2)，6.04(s，1H，H-3)，7.04(d，J＝2.5Hz，1H，H-8)，7.10(dd，J＝2.5，9.1Hz，1H，H-7)，7.39(d，J＝9.0Hz，1H，H-5)，7.43-7.71(M，4H，H-3’，H-4’，H-5’，H-6’)；分析(C19H17FN2O·0.25 H2O)C，H，N。
化合物1-7和13用國(guó)立癌癥研究所的HTCL篩選法(M.Grever等，Seminars Oncol.1992，19，622-638；A.Monks等，J.Natl.CancerInst.1991，83，757-766)測(cè)試。該分析涉及測(cè)定受試藥物對(duì)一組約60種人腫瘤細(xì)胞系(大部分來(lái)自實(shí)體瘤)的生長(zhǎng)參數(shù)的影響。各化合物的細(xì)胞毒性效能用log GI50值表示，它表示對(duì)所選擇的細(xì)胞系產(chǎn)生50％抑制作用所需要的克分子藥物濃度對(duì)數(shù)。還分析這些化合物的微管蛋白聚合抑制劑作用，并分析結(jié)合微管蛋白的最有效抑制劑[3H]秋水仙堿。
所述微管蛋白聚合以及[3H]秋水仙堿結(jié)合分析按照以前的介紹進(jìn)行(S.Kuo等，J.Med.Chem.1993，36，1146-1156)。在所述聚合分析中，反應(yīng)混合物包含10μM微管蛋白，而在秋水仙堿結(jié)合分析中包含1.0μM微管蛋白和5.0μM[3H]秋水仙堿。B.結(jié)果與討論1-7和13的細(xì)胞毒性活性總結(jié)于表1，對(duì)基于微管蛋白的影響分析總結(jié)于表2。結(jié)果顯示當(dāng)酮型1轉(zhuǎn)化為烯醇醚(2-5)時(shí)，細(xì)胞毒性降低約100倍?；衔?-5缺少胺氫以及酮O，這兩個(gè)官能團(tuán)都在B環(huán)，而這些化合物對(duì)微管蛋白聚合影響很小或沒(méi)有影響。發(fā)現(xiàn)6的細(xì)胞毒性活性也降低，而其中只是由硫酮部分代替了酮基。硫酮6類似于烯醇醚，對(duì)微管蛋白聚合只有極小的影響。這些觀測(cè)結(jié)果說(shuō)明在2-苯基-4-喹諾酮衍生物與微管蛋白的相互作用中以及所述相互作用引起的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用中，其酮部分起決定性作用。盡管還不確定準(zhǔn)確的原因，可能的因素有立體化學(xué)以及電子的影響和/或藥物與靶蛋白間H-鍵合的能力減弱。當(dāng)保護(hù)基團(tuán)取代胺氫，所得化合物(7)顯示了有趣的細(xì)胞毒性數(shù)據(jù)?；衔?在抗HCT-116結(jié)腸癌細(xì)胞系、OVCAR-3卵巢癌細(xì)胞系時(shí)與1等效，而抗SF-295 CNS腫瘤細(xì)胞系活性低于1，抗NCI-H226非小細(xì)胞肺癌的活性幾乎為1的20倍。這些細(xì)胞為對(duì)抗微管蛋白藥物特別敏感的細(xì)胞(K.Paull等，CancerRes.1992，52，3892-3900)，而7保持微管蛋白聚合抑制劑適度活性。也有可能是7細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化為更有效的化合物。相對(duì)于1，7與微管蛋白相互作用的減弱可能源于立體化學(xué)的因素(龐大的叔丁基)或失去胺氫(改變與微管蛋白的H鍵性相互作用)。N-甲基喹諾酮(15對(duì)14，圖1)(S.Kuo等，J.Med Chem.1993，36，1146-1156)和2-苯基-喹唑啉酮(17對(duì)16)(E.Hamel等，Biochem.Pharmacol.1996，51，53-59)的抗微管蛋白活性喪失支持需要氮?dú)涞挠^點(diǎn)。但是，當(dāng)非活性化合物17的苯基被苯乙烯基替代(化合物18)時(shí)，出現(xiàn)活性顯著增強(qiáng)(E.Hamel等，Biochem.Pharmacol.1996，51，53-59)。支持由于某些因素使7相對(duì)1活性喪失，但是也有可能是2-苯基-4-喹諾酮以及喹唑啉酮(苯基C環(huán)直接連接B環(huán))的結(jié)合位點(diǎn)不完全重疊在苯基C環(huán)和B環(huán)間含連接基的2-苯乙烯基喹唑啉-4(3H)-酮(18)的結(jié)合位點(diǎn)。
在所述新化合物中，在6位含雜環(huán)的氟化喹諾酮13在所有的分析中是最有效的化合物。事實(shí)上在所有情況下，它比1有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性，尤其是抗RXF-393腎癌細(xì)胞和SK-Mel5黑素瘤癌細(xì)胞，logGI50值＜-8.00。如log GI50平均值所示，對(duì)所有60種細(xì)胞系13的活性約為1的6倍。具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性的同時(shí)，作為微管蛋白裝配抑制劑13比6更有效，但是13相對(duì)于6有更大親和力的最有力證明是13作為[3H]秋水仙堿結(jié)合到微管蛋白的抑制劑的活性明顯更高。在后一分析中，13的活性幾乎與具有高度有效活性的考布他汀A-4一樣(C.Lin等，Biochemistry 1989，28，6984-6991)。
以前發(fā)現(xiàn)2-苯基-4-喹諾酮抑制微管蛋白聚合并且抑制放射性標(biāo)記的秋水仙堿結(jié)合到微管蛋白(C.Lin等，Biochemistry 1989，28，6984-6991；S.Kuo等，J Med Chem.1993，36，1146-1156；S.Kuo等，J.Med.Chem.1993，36，1146-1156)。研究了許多在A環(huán)和C環(huán)具有各種取代基的化合物。由A環(huán)和C環(huán)組成的“聯(lián)芳體系”很可能(Y.Xia等，J.Med.Chem.，1998，41，1155-1162)類似于在許多抗有絲分裂天然產(chǎn)物(例如秋水仙堿、鬼臼毒素或考布他汀A-4)中存在的類似聯(lián)芳體系(S.Hastie，Pharm. & Ther.1991，51，377-401)(圖1)。但是，苯基喹諾酮中B環(huán)的藥效基團(tuán)幾乎沒(méi)有研究，而本文指出酮基官能團(tuán)部分是與微管蛋白產(chǎn)生強(qiáng)相互作用的關(guān)鍵，為配體在秋水仙堿位置結(jié)合的機(jī)制提供新的見(jiàn)解。所述酮基氧以及最重要的酮型B環(huán)似乎參與此類化合物與微管蛋白的結(jié)合。7的活性降低提示，B環(huán)的胺氫也可能對(duì)最大抗微管蛋白活性很重要，但是在解釋該化合物活性降低時(shí)尚需排除立體因素。
表1.氟化喹諾酮衍生物體外抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)a，b細(xì)胞毒性log GI50(M)c平均化合物K562 NCI-H226 HCT116 OVCAR-3 RXF-393SK-Mel5 SF-268SF-295 log GI501ntd-6.35-7.22-7.09 nt -7.68 -5.64-7.26 -6.872 -4.42 ＞-4.00 -4.14 nt ＞-4.00 -4.14＞-4.00 ＞-4.00-4.103 ＞-4.00 ＞-4.00 ＞-4.00 ＞-4.00 ＞-4.00＞-4.00 ＞-4.00 ＞-4.00 ＞-4.004 -4.41-4.31 ＞-4.00 -4.82 -4.60 -4.24＞-4.00 -4.21 -4.325 -5.68-5.07-5.40-5.63 -5.11 -5.40 -4.79-5.56 -5.336 -4.25-4.78-5.26-4.67 -4.53 -5.39 -4.70-4.93 -4.817 ＞-4.00 -7.60-7.35-7.49＞-4.00 ntnt -6.93 -6.2313 -7.49-7.51-7.47-7.35＜-8.00＜-8.00-7.41-7.73 -7.62a數(shù)據(jù)從NCI疾病定向性人腫瘤細(xì)胞的體外篩選獲得。bK-562，白血病細(xì)胞系；NCI-H226，非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系；HCT-116，結(jié)腸癌細(xì)胞系；OVCAR-3，卵巢癌細(xì)胞系；RXF-393，腎癌細(xì)胞系；RXF-393，腎癌細(xì)胞系；SK-Mel5，黑素瘤；SF-286和SF-295，CNS腫瘤細(xì)胞系。c減少細(xì)胞生長(zhǎng)50％的Log濃度。d“nt”表示沒(méi)有測(cè)試表2.氟化喹諾酮衍生物的抗微管蛋白作用ITPaICBb(％抑制±SD)化合物IC50(μM)±SD 5μMc1μMc1 0.68±0.0239±22 ＞403 ＞204 ＞405 12±36 24±27 3.2±113 0.46±0.003 93±1 76±514d 7.3±115d＞4016e 14±0.917e＞4018e50±0.6秋水仙堿f0.80±0.07鬼臼毒素f0.46±0.02考布他汀A-4f0.53±0.05 92±3 88±0.4aITP＝對(duì)微管蛋白聚合的抑制作用。bICB＝對(duì)秋水仙堿結(jié)合的抑制作用；僅當(dāng)聚合作用IC50≤1.0μM時(shí)評(píng)價(jià)。c在秋水仙堿結(jié)合實(shí)驗(yàn)中，這些值是指使用的抑制劑濃度。[3H]秋水仙堿濃度為5μM，微管蛋白濃度為1μM。d數(shù)據(jù)得自S.Kuo等，J.Med.Chem.1993，36，1146-1156.6.。e數(shù)據(jù)得自E.Hamel等，biochem.Pharmacol.1996，51，53-59。f數(shù)據(jù)得自Y.Xia等，J.Med.Chem.1998，4，1155-1162。
前面為本發(fā)明的示例性說(shuō)明，不能解釋為對(duì)本發(fā)明的限制。本發(fā)明通過(guò)以下權(quán)利要求限定，與權(quán)利要求等同的實(shí)施方案也包括在本發(fā)明內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R2選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R3選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R4選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R5選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；n為0-4。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1選自H和低級(jí)烷基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R2選自H和低級(jí)烷基。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R3選自H和低級(jí)烷基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R4選自H和低級(jí)烷基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R5選自H和低級(jí)烷基。
7.權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1選自H和低級(jí)烷基；R2選自H和低級(jí)烷基；R3選自H和低級(jí)烷基；R4選自H和低級(jí)烷基；R5選自H和低級(jí)烷基。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中n為0或1。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中F取代在苯基的鄰位上。
10.權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，所述化合物具有下式結(jié)構(gòu)
11.一種藥用制劑，所述制劑包含權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體。
12.權(quán)利要求11的藥用制劑，其中所述載體為水性載體。
13.一種治療腫瘤的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R2選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R3選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R4選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R5選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；n為0-4。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述腫瘤為實(shí)體瘤。
15.權(quán)利要求13的方法，其中所述腫瘤選自肺癌、結(jié)腸癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、黑素瘤、卵巢癌、前列腺癌和乳腺癌。
16.權(quán)利要求13的方法，其中所述腫瘤為乳腺癌。
17.權(quán)利要求13的方法，其中所述腫瘤為前列腺癌。
18.一種抑制細(xì)胞有絲分裂的方法，所述方法包括使細(xì)胞與式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸 其中R1選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R2選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R3選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R4選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；R5選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、羥基、鹵代和氨基；n為0-4。
19.權(quán)利要求18的方法，其中所述接觸步驟在體內(nèi)進(jìn)行。
20.權(quán)利要求18的方法，其中所述接觸步驟在體外進(jìn)行。
21.一種式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代、氨基以及雜環(huán)；R2選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基；R3選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基；R4選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中R1選自H和低級(jí)烷基。
23.權(quán)利要求21的化合物，其中R2選自H和低級(jí)烷基。
24.權(quán)利要求21的化合物，其中R3選自H和低級(jí)烷基。
25.權(quán)利要求21的化合物，其中R4選自H和低級(jí)烷基。
26.權(quán)利要求21的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1選自H和低級(jí)烷基；R2選自H和低級(jí)烷基；R3選自H和低級(jí)烷基；R4選自H和低級(jí)烷基。
27.權(quán)利要求21的化合物，其中F取代在苯基鄰位上。
28.權(quán)利要求21的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，所述化合物具有下式結(jié)構(gòu)
29.一種藥用制劑，所述制劑包含權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體。
30.權(quán)利要求29的藥用制劑，其中所述載體為水性載體。
31.一種治療腫瘤的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代、氨基以及雜環(huán)；R2選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基；R3選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基；R4選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基。
32.權(quán)利要求31的方法，其中所述腫瘤為實(shí)體瘤。
33.權(quán)利要求31的方法，其中所述腫瘤選自肺癌、結(jié)腸癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、黑素瘤、卵巢癌、前列腺癌和乳腺癌。
34.權(quán)利要求31的方法，其中所述腫瘤為乳腺癌。
35.權(quán)利要求31的方法，其中所述腫瘤為前列腺癌。
36.一種抑制細(xì)胞有絲分裂的方法，所述方法包括使細(xì)胞與式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸 其中R1選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代、氨基以及雜環(huán)；R2選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基；R3選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基；R4選自以下基團(tuán)H、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代和氨基。
37.權(quán)利要求36的方法，其中所述接觸步驟在體內(nèi)進(jìn)行。
38.權(quán)利要求36的方法，其中所述接觸步驟在體外進(jìn)行。
全文摘要
本發(fā)明提供在其苯基上氟化的氟化喹諾酮、包含該化合物的藥用制劑、通過(guò)給予所述化合物治療腫瘤和癌癥的方法以及通過(guò)給予所述化合物抑制細(xì)胞有絲分裂的方法。
文檔編號(hào)C07D215/38GK1476435SQ01819216
公開(kāi)日2004年2月18日 申請(qǐng)日期2001年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月25日
發(fā)明者K·-H·李, Y·夏, Z－Y·楊, S－C·郭, K -H 李 申請(qǐng)人:北卡羅來(lái)納查佩爾山大學(xué)