專利名稱：：一組尿苷肽類抗生素和其藥學(xué)上可接受的鹽、及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一組尿苷肽類抗生素和其藥學(xué)上可接受的鹽，及其制備方法和用途，屬于微生物發(fā)酵領(lǐng)域。目前尿苷肽類抗生素已有報(bào)道，如Mureidomycins(美國(guó)專利No.5039663)和pacidamycins(美國(guó)專利No.6228842B)，這類化合物主要作用于細(xì)胞壁，抑ft細(xì)胞壁肽聚糖的合成，毒性非常小，而且目前臨床上沒(méi)有作用于這一靶點(diǎn)的藥物，因此這類化合物的研究對(duì)發(fā)現(xiàn)抗耐藥菌藥物具有重要的意義。本發(fā)明研究人員在研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了一株能夠產(chǎn)生新型尿苷肽類抗生素SS-1、SS-2和SS-3的菌株，該抗生素SS-1、SS-2和SS-3的結(jié)構(gòu)已闡明，和該類化合物已知的品種不同，而且具有抗結(jié)核桿菌和抗綠膿桿菌的活性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一組新型尿苷肽類抗生素，具有抗結(jié)核桿菌和抗綠膿桿菌的活性作用。本發(fā)明的另一目的是提供一組尿苷肽類抗生素在藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的再一目的是提供一組尿苷肽類抗生素及其在藥學(xué)上可接受的鹽的微生物發(fā)酵產(chǎn)生方法。本發(fā)明的另一目的是提供一種能夠產(chǎn)生新型尿苷肽類抗生素SS-1、SS-2和SS-3的鏈霉菌屬菌株。本發(fā)明的另一目的是提供一組尿苷肽類抗生素及其在藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗感染藥物上的用途。本發(fā)明提供具有結(jié)構(gòu)式(I)的尿苷肽類抗生素及其所形成的在藥學(xué)上可接受的鹽
背景技術(shù)：
結(jié)構(gòu)式(I)中R為—(Met)的化合物簡(jiǎn)稱SS-1，R為^(Leu)的化合物簡(jiǎn)稱SS-2，R為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>(Methionesulfoxide)的化合物簡(jiǎn)稱SS-3。所逑的藥學(xué)上可接受的鹽為氨鹽、鈉鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、有機(jī)堿鹽或有機(jī)酸鹽。與本發(fā)明化合物具有類似結(jié)構(gòu)的微生物產(chǎn)物已報(bào)道的有Murddomyciris(美國(guó)專利5039663)和pacidamycins(美國(guó)專利6228842B),但本發(fā)明所述的化合物與它們不同，Mureidomycins的C末端是間酪氨酸；而本發(fā)明C末端為色氨酸，pacidamycins中含有丙氨酸，而本發(fā)明SS-1中含有甲硫氨酸，SS-2中含有亮氨酸，SS-3中含有甲硫亞砜。本發(fā)明所述SS-1、SS-2和SS-3尿苷肽類化合物可先采用適宜的培養(yǎng)基培養(yǎng)歸屬于鏈霉菌屬的SS菌株或它的變株；然后從發(fā)酵液中分離含有本發(fā)明的粗提物，再?gòu)拇痔嵛镏蟹蛛x精制出SS-1、SS-2和SS-3。本發(fā)明所述尿苷肽類抗生素化合物的制備方法，包括發(fā)酵培養(yǎng)、分離、提取和精制，發(fā)酵培養(yǎng)所用的菌株為鏈霉菌。其中所述鏈霉菌為鏈霉菌(Sterptomycessp.)SSCGMCCNo.1764。本發(fā)明利用微生物獲得具有更優(yōu)異藥理活fe的物質(zhì)。本發(fā)明從天然土壤中分離出多種微生物，并進(jìn)行了抗菌活性的篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鏈霉菌變株(StreptomycesSP.)SS菌株能產(chǎn)生具有優(yōu)異抗菌活性的新化合物SS-1、SS-2和SS-3。其實(shí)，所有能夠產(chǎn)生SS-1、SS-2或SS-3的鏈霉菌屬的微生物都在本發(fā)明之列。用于本發(fā)明較好的微生物是鏈霉菌SS。所述菌株為鏈霉菌(Sterptomycessp.)SS，已于2006年7月20曰保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理婆員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏編號(hào)為CGMCCNo.1764。用于培養(yǎng)所述微生物的培養(yǎng)基中，采用可被其利用的營(yíng)養(yǎng)源即碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽和能被其利用的痕量營(yíng)養(yǎng)物，這些成分可預(yù)先一次性地加入培養(yǎng)基中，或者間歇或者連續(xù)地加入培養(yǎng)基中。對(duì)本發(fā)明所用的較好的微生物來(lái)說(shuō)，可釆用如下培養(yǎng)基(按重量計(jì))葡萄糖0.4-0.6&酵母膏0.4-0.6%;蛋白胨0.4-0.6%;牛肉膏0.4-0.6%;玉米漿0.3-0.5%;黃豆餅粉0.5-1.5%;淀粉1-3%;CaC030.3-0.5%;CoCl2611200.3-0.5%。，其余為水；調(diào)PH值為7.2.優(yōu)選為葡萄糖0.5%;酵母膏0.5%;蛋白胨0.5%;牛肉膏0.5%;玉米漿0.4%;黃豆餅粉1%;淀粉2%;CaCO30.4%;CoCl26H200.4%。，其余為水；調(diào)PH值為7.2。培養(yǎng)的方式可采用靜態(tài)培養(yǎng)、搖床培養(yǎng)、攪拌培養(yǎng)、浸沒(méi)培養(yǎng)或其它方式，但對(duì)大量生產(chǎn)來(lái)說(shuō)，優(yōu)選的為浸沒(méi)培養(yǎng)。培養(yǎng)條件(時(shí)間、溫度、PH等)隨菌種不同而變，也隨培養(yǎng)基成分的變化有所不同，本領(lǐng)域技術(shù)人員按照鏈霉菌的培養(yǎng)工藝能夠根據(jù)具體情況而選擇。當(dāng)SS-1、SS-2和SS-3在培養(yǎng)基中積累達(dá)到最大濃度時(shí)終止培養(yǎng)，從發(fā)酵液中分離含有化合物的粗品，可采用發(fā)酵產(chǎn)物的一般提取分離方法進(jìn)行。例如可單獨(dú)地使用吸附層析、離子交換、分子篩等手段，亦可將二種以上的任意組合使用。更詳細(xì)地說(shuō)，按照常規(guī)方法，首先進(jìn)行過(guò)濾或離心，分離出固形的菌絲和培養(yǎng)濾液，本發(fā)明的化合物主要存在于培養(yǎng)濾液中，將培養(yǎng)濾液用大孔樹脂進(jìn)行層析、濃縮，收集活性成分，減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑，減壓冷凍千燥，即得到SS-1、SS-2和SS-3物質(zhì)的粗品。為了從粗品中進(jìn)一步精制，可采用一般兩性水溶性物質(zhì)的分離、精制方法，例如，可使用大孔吸附樹脂吸附層析、離子交換、反相層析等。如果有必要進(jìn)一步精制時(shí)，可重復(fù)釆用上述方法或以含有緩沖鹽的洗脫溶液進(jìn)行反相層析等方法，可以制得高純度的SS-1、SS-2和SS-3。對(duì)分離、提取及精制過(guò)程中SS-1、SS-2和SS-3物質(zhì)的確認(rèn)，可使用本物質(zhì)對(duì)其有抑制作用的微生物，如綠膿桿菌(Pseudomonasaeruginosa)的生物檢測(cè)法或高效液相法，二者并用更好。本發(fā)明所述化合物為兩性化合物，因此可用本領(lǐng)域常規(guī)的方法將其轉(zhuǎn)化成其藥學(xué)上可接受的鹽，如氨鹽、鈉鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、有機(jī)堿鹽或有機(jī)酸鹽中的一種。本發(fā)明所述的尿苷肽類抗生素及其在藥學(xué)上可接受的鹽為細(xì)胞壁肽聚糖合成抑制劑，具有抗結(jié)核桿菌和綠膿桿菌的活性，可用于制備抗感染藥物，如抗結(jié)核桿菌和綠膿桿菌感染藥物。本發(fā)明可將含有有效劑量的SS-1、SS-2和SS-3物質(zhì)分別與藥學(xué)上允許的載體混合，制成藥劑。也可將含有SS-1、SS-2或SS-3中任意兩種以上的有效劑量的物質(zhì)與藥學(xué)上允許的載體混合，制成藥劑。采用本發(fā)明的微生物發(fā)酵方法而精制得到的SS-1、SS-2和SS-3物質(zhì)，用作醫(yī)藥組成物時(shí)的給藥形態(tài)，可為片劑、膠囊、軟膠囊、散劑、顆粒劑、細(xì)粒劑、液劑、丸劑、乳劑或懸濁劑等口服制劑，亦可為凍干粉、栓劑、軟膏、硬膏、貼劑、噴霧劑或滴眼劑等非口服制劑。這些制劑都可采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知常用的制備方法而獲得。本發(fā)明所用的微生物發(fā)酵方法選擇了能產(chǎn)生具有優(yōu)異抗菌活性的化合物SS-1、SS-2和SS-3的鏈霉菌變株(StreptomycesSR)SS，釆用本領(lǐng)域熟知的鏈霉菌發(fā)酵條件即可，工藝簡(jiǎn)單。本發(fā)明所述菌株為鏈霉菌(Sterptomycessp.)SS,已于2006年7月20曰保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理簍員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏編號(hào)為CGMCCNo.1764。圖1為本發(fā)明所述化合物SS-1的ESI質(zhì)譜圖；圖2為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于d6-DMSO中的iJi-NMR譜圖；圖3為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于d6-DMSO中的13C-NMR譜圖；圖4為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于D20中(PD-8.0)的iH-NMR譜圖；圖5為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于D20中(PD=8.0)的13C-NMR譜圖；圖6為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于d6-DMSO中的HSQC譜圖；圖7為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于d6-DMSO中的HMBC譜圖；圖8為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于d6~DMSO中的DEPT譜圖；圖9為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于D20中(PD-8.0)的DEPT譜圖；圖10為本發(fā)明所迷化合物SS-1溶于D20中(PD=8.0)的GCHSQC譜圖；圖11為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于020中(PD=8.0)的GHMBC譜圖；圖12為本發(fā)明所述化合物SS-1溶于D20中(PD-8.0)的GCOSY譜圖；圖13為本發(fā)明所述化合物SS-2的FAB質(zhì)譜；圖14為本發(fā)明所述化合物SS-2溶于D20中的"C-NMR譜圖；圖15為本發(fā)明所述化合物SS-2溶于D20中(PD-8.8)的^-NMR譜圖；圖16為本發(fā)明所述化合物SS-2溶于D20中(PD-8.8)的DEPT譜圖；圖17為本發(fā)明所述化合物SS-2溶于D20中(PD-8.8)的GHMBC譜圖；圖18為本發(fā)明所述化合物SS-2溶于D20中(PD=8.8)的GHSQC譜圖；圖19為本發(fā)明所述化合物SS-2溶于D20中(PD=8.8)的GCOSY譜圖；圖20為本發(fā)明所述化合物SS-3的ESI譜圖；圖21為本發(fā)明所述化合物SS-3溶于D20中(PD=8.0)的^NMR的譜圖；圖22為本發(fā)明所述化合物SS-3溶于D20中(PD=8.0)13CNMR譜圖；圖23為本發(fā)明所述化合物SS-3溶于D20中(PD=8.0)的DEPT譜圖；圖24為本發(fā)明所述化合物SS-3溶于D20中(PD=8.0)的COSY譜圖圖25為本發(fā)明所述化合物SS-3溶于D20中(PD=8.0)的HSQC譜圖；圖26為本發(fā)明所述化合物SS-3溶于D20中(PD=8.0)的HMBC譜圖。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例l由葡萄糖0.5%;可溶性淀粉2.4%;牛肉膏0.3%;酵母膏0.5%;蛋白胨0.5%;玉米漿0.4%;CoCl20.002%;CaCO30.4%，其余為水，組成的培養(yǎng)基(PH值為7.2)100毫升裝到500亳升的三角瓶中，滅菌后，接種鏈霉菌SS(StreptomycesSP.)CGMCCNo.1764,在27°C下旋轉(zhuǎn)振蕩(220次/分，振幅7cm)培養(yǎng)2天，作為種子。然后將葡萄糖0.5%;酵母膏0.5%;蛋白胨0.5%;牛肉膏0.5%;玉米漿0.4%;黃豆餅粉1%;淀粉2%;CaCO30.4%;CoCl2.6H2O0.4%。，真余為水，組成發(fā)酵培養(yǎng)基(PH值為7.2)，500毫升的三角瓶中分裝100毫升，滅菌后加入2%的上述培養(yǎng)的種子，在27。C下旋轉(zhuǎn)振蕩(220次/分，振幅7cm)培養(yǎng)4天得發(fā)酵液。取上述培養(yǎng)取得的發(fā)酵液(20升)，過(guò)濾分離，濾液過(guò)l升的大孔吸附樹脂(AmberliteXAD陽(yáng)4)，分別用水(5L)、水丙酮(2:1;5L)及水丙酮(1:1，5L)洗脫，收集活性部分，減壓濃縮，冷凍干燥得到粗品12g。將12g粗品溶于100亳升水中，用NaOH調(diào)PH為10.5，過(guò)X-5柱(2L),先用14L水洗脫，沒(méi)有活性，再用水丙酮(4:1,40L)洗脫，分管收集(70/管/13分鐘)，得到分別含有SS-l(660亳克)、SS-2(120毫克)和SS-3(150毫克)的粗品。將SS-1，SS-2粗品分別溶于含有1%(NH4)2C03的45%和40%的甲醇的水溶液中，分別用HPLC進(jìn)行制備(SS-1的條件為流動(dòng)相為45%的甲醇水溶液，流速為5亳升/分鐘；SS-2，SS-3的條件為流動(dòng)相為40%的甲醇水溶液，流速為5毫升/分鐘)。分別得到純度大于95%的白色樣品，SS-1為80毫克，SS-2為20毫克,SS-3為40毫克。經(jīng)檢驗(yàn)分析，SS-1具有如下理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)1.分子量為863,分子式為CwH^OuS;2.顏色狀態(tài)白色或類白色固體粉末；3.溶解性易溶于水、甲醇，不溶于氯仿、丙酮；4.紫外光譜甲醇中入max為259(s=4642),221(s=9656)，204(10571);5.質(zhì)譜其ESI質(zhì)譜如圖1所示，其[M+H]+峰為864，高分辨ESI質(zhì)譜分析[M+H+為864.33505，[M+H]+的實(shí)驗(yàn)式為C奶H5oN90uS。6.核rf共振譜圖2,3分別是，萁溶于d6-DMSO中的^-NMR和13C-NMR譜圖，圖4，5分別是其溶于D20中的iH-NMR和nC-NMR譜圖，由于肽鏈的旋轉(zhuǎn)使其核磁共振圖譜中變的較為復(fù)雜，出現(xiàn)雙峰，如圖2中位移分別為0.672和1.039的兩個(gè)峰，其本為一個(gè)-CH3上的三個(gè)氫，但分裂為兩個(gè)峰，根據(jù)圖6、7(為其溶于d6-DMSO中的HSQC和HMBC譜圖)，可知其對(duì)應(yīng)14.067和14.721兩個(gè)信號(hào)峰，這兩個(gè)信號(hào)峰對(duì)應(yīng)SS-1上的一個(gè)-CH3。通過(guò)與Pacidamycins、Mureidomycins的NMR進(jìn)行比較，并氺艮據(jù)二維NMR分析，最終對(duì)SS-1的碳信號(hào)和氫信號(hào)進(jìn)行歸屬，其中甲硫氨酸的結(jié)構(gòu)由SS-1溶于d6-DMSO中的NMR譜圖確定。表1SS-1溶于D20中的NMR數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結(jié)合圖1-12以及表2，可確定SS-1的結(jié)構(gòu)式如下:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>經(jīng)檢驗(yàn)分析，SS-2具有如下理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì):1.分子量為845，分子式為CuH^NgOu;2.顏色狀態(tài)白色或類白色固體粉末；3.溶解性易溶于水、甲醇，不溶于氯仿、丙酮；4.紫外光譜甲醇中入max為257(e=3667),220(￡=8010)，202(9600)，5.質(zhì)譜其FAB質(zhì)譜如圖13所示，其[M+H]+峰為846;6.核磁共振譜其NMR如圖14-19。與SS-1的NMR圖譜相比，SS陽(yáng)2少了一個(gè)16.997ppm的-CH3碳信號(hào)及一個(gè)33.762ppm的-CH2碳信號(hào)，在23.786和24.809ppm多了兩個(gè)-CH3凌信號(hào)，在24.809ppm多了一個(gè)-CH的碳信號(hào)，這表明SS-2結(jié)構(gòu)中不是含有甲硫氨酸，而是含有亮氨酸。表2SS-2溶于D20中的NMR數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>經(jīng)檢驗(yàn)分析，SS-3具有如下理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)1.分子量為879,分子式為C4QH49N9012S;2.顏色狀態(tài)白色或類白色固體粉末；3.溶解性易溶于水、甲醇，不溶于氯仿、丙酮；4.紫外光譜甲醇中入max為258(s=4786),221(s=9813),204(10388);5.質(zhì)譜其FAB質(zhì)譜如圖20所示，其[M+H]+峰為880;6.核磁共振譜其NMR如圖21-26。與SS-1的NMR圖譜相比，原來(lái)甲硫氨酸上的CH3碳信號(hào)向低場(chǎng)移動(dòng)了22.5個(gè)ppm，并且SS-3的分子量比SS-1多16個(gè)質(zhì)量數(shù)，所以可以初步判斷SS-3中含有甲硫亞砜(methioninesulfoxide);仔細(xì)核對(duì)SS-3與SS-1的13CNMR，發(fā)現(xiàn)其差別只存在于甲硫氨酸的第3，4,5個(gè)碳原子上，這三個(gè)碳原子的化學(xué)位移分別由原來(lái)的33.8,32.1，17ppm變?yōu)?7.5(25.7),51.7，39.5ppm，這進(jìn)一步確定了SS-3的結(jié)構(gòu)中含有甲硫亞砜。表3SS-3溶于D20中的NMR數(shù)據(jù)cHDEPTAssignmentCHDEPTAssignmentshiftshiftshiftshift16.01.29CH3AMBA499.86.08-CH=Sugar-516.50.68CH3AMBA-4105.15.56-CH=Uracil-527.52.05CH2Met-35.96-CH=Uracil-52.19CH2Met-3113.4ArCTrp-3,27.72.05CH2Met-3114.47.54ArCHtyr-7，2.19CH2Met-3117.16.93ArCHm-Tyr-4,30.72.79CH3AMBA-NCH3118.96.85ArCHm-Tyr誦2，31.13.40CH2Trp-3121.57.75ArCHtyr-4，3.22CH2Trp-3121.97.20ArCHtyr-5'32.93.05CH3AMBA-NCH3123.96.86ArCHm-Tyr-6,35.72.77CH2Sugar-3124.47.31ArCHTrp-6，2.99CH2Sugar-3126.97.31CHTrp-2，35.82.77CH2Sugar-3130.2ArCTrp-3，a2.88CH2Sugar-3133.1735CHm-tyr-5，39.52.74CH3Met-6138.8ArCTrp-7，a41.82.68CH2m-Tyr-3140.8ArCm-lTyr陽(yáng)r3.00CH2m-Tyr-3142.37.00CHUracil-643.22.85CH2m-Tyr-3143.17.40CHUracil-63.01CH2m-Tyr-3146.8>C=Sugar-451.72.91CH2Met-4147.5>C=Sugar-453.84.99CHAMBA-3154.1N-CO-NUracil-254.34.43CHm-Tyr-2154.2N-CO-NUracil-254.84.17CHm-Tyr-2158.8Ar-C-0m-Tyr-3,55.34.45CHMet-2158.9Ar-C-0m-Tyr-3,55.64.40CHMet-2161.1N陽(yáng)CO-Nureido<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>結(jié)合圖20-26以及表3，可確定SS-3的結(jié)構(gòu)式如下:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>實(shí)施例2與實(shí)施例l基本相同，不同的是，發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖0.4%;酵母膏0.4%;蛋白胨0.6%;牛肉膏0.6%;玉米漿0.3%;黃豆餅粉0.5%;淀粉3%;CaCO30.5%;CoCl26H2O0.3%。，其余為水，PH值為7.2。將發(fā)酵獲得的含SS-1、SS-2和SS-3的粗品進(jìn)行分離、提取、精制，得含SS-1、SS-2和SS-3的抗生素。然后釆用中和反應(yīng)制成氨鹽。再將其氨鹽50克，與基質(zhì)半合成甘油酯100克，加熱混勻置于模具中，冷卻后制成栓劑。實(shí)施例3與實(shí)施例l基本相同，不同的是，發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖0.6%;酵母奢0.6%;蛋白胨0.4%;牛肉膏0.4%;玉米漿0.5%;黃豆餅粉1.5%;淀粉1%;CaCO30.3%;CoCl26H2O0.5%。，其余為水，PHii為7.2。實(shí)施例4將實(shí)施例1獲得的SS-210克，制成l升的水溶液，灌裝于安瓿瓶中，冷凍，干燥，封口，即得注射干粉。實(shí)施例5將實(shí)施例l獲得的30克含SS-l和SS-2的抗生素，與乳糖100克，淀粉20克，用水混合均勻，制粒，干燥，再加0.1克硬脂酸鎂，壓片，即得片劑。實(shí)施例6將實(shí)施例1獲得的SS-210克，與蔗糖150克，混合均勻，制粒，裝入膠囊，即得膠囊劑。實(shí)施例7將實(shí)施例1獲得的10克含SS-2、SS-1和SS-3的抗生素，與入植物油300克，蜂蠟20克，以膠體磨混合30分鐘，混合物以自動(dòng)旋轉(zhuǎn)軋囊機(jī)制粒，在溫度2(TC、相對(duì)濕度52%的條件下干燥24小時(shí)，取出，用乙醇洗滌，在上述條件下干燥48小時(shí)，即得軟膠囊劑。實(shí)驗(yàn)例1本實(shí)驗(yàn)例在于研究所述鏈霉菌(Sterptomycessp.)SSCGMCCNo.1764的菌學(xué)性質(zhì)。1.形態(tài)孢子形成菌絲的分枝法單分枝；孢子形成的形態(tài)直狀或柔曲狀、偶爾呈初旋類，孢子的形態(tài)為圓狀、卵圓狀或圓柱狀；孢子的數(shù)目6到60個(gè)孢子或以上；孢子的表面構(gòu)造光滑，1.6-2.1xi.8-l8微米；鞭毛孢子的有無(wú)無(wú)，；孢子囊的有無(wú)無(wú)；孢子柄的著生位置氣生菌絲。2.在各種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)狀況如下表4:表4在不同培養(yǎng)基上ss的培養(yǎng)特征<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>4.菌體組成全細(xì)胞酸水解物分析顯示有L，L-二氨基庚二酸存在。以上該菌的特征，特別是由基內(nèi)菌絲形成的許多孢子組成鏈狀的氣生菌絲，細(xì)胞壁組成的氨基酸是L，L-二氨基庚二酸，不形成鞭毛孢子和孢子囊等特性，說(shuō)明本菌應(yīng)歸屬于鏈霉菌，因?yàn)槠洚a(chǎn)物為新化合物，故將本菌稱為鏈霉菌(Streptomycessp.)SS。實(shí)驗(yàn)例2釆用試管稀釋法測(cè)定SS-1、SS-2和SS-3的抗菌活性。用PH7.6的肉湯培養(yǎng)基對(duì)化合物進(jìn)行對(duì)倍稀釋，每管含稀釋藥液1.0毫升，然后加入37X:,培養(yǎng)18個(gè)小時(shí)的1/200稀釋的菌液0.1亳升。37"C孵育15個(gè)小時(shí)觀察結(jié)果。SS-1、SS-2和SS-3抗結(jié)核桿菌H37Ra的活性用微孔板alarmblue染色法在BACTEC12B培養(yǎng)基中測(cè)得，結(jié)果如表6。表6SS-1、SS-2和SS-3的〗虎菌活性<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實(shí)#例3毫克f一i毒性SS-1，SS-2，SS-3的半數(shù)致死量(LD50，小鼠)均為2400結(jié)論本發(fā)明所述的SS-1、SS-2和SS-3的毒性小，可安全使用。、力弄經(jīng)'丄豐文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施方案對(duì)水發(fā)明作了樣尺的誠(chéng)1』雄S著礎(chǔ)擊，u可妥對(duì)之作-些5錢錢錢栗牆f，tii疋fim明rmii本發(fā)暢神的基礎(chǔ)上所^魏杳^權(quán)利要求1、具有結(jié)構(gòu)式(I)的尿苷肽類抗生素及其所形成的在藥學(xué)上可接受的鹽其中，R為或2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的化合物，其特征在于，所述的藥學(xué)上可接受的鹽為氨鹽、鈉鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、有機(jī)堿鹽或有機(jī)酸鹽。3、一種制備權(quán)利要求l所述化合物的方法，包括發(fā)酵培養(yǎng)、分離、提取和精制，其特征在于所述發(fā)酵培養(yǎng)中所用的菌株為鏈霉菌。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述化合物的制備方法，其特征在于，所述鏈霉菌為鏈霉菌(Sterptomycessp.)SSCGMCCNo.1764。5、根據(jù)權(quán)利要求3或4所述化合物的制備方法，其特征在于，所述的發(fā)酵培養(yǎng)釆用靜態(tài)培養(yǎng)、搖床培養(yǎng)、攪拌培養(yǎng)或浸沒(méi)培養(yǎng)。6、根據(jù)權(quán)利要求3所述化合物的制備方法，其特征在于，所述的提取采用吸附層析、離子交換或分子篩中任意一種或二種以上的組合。7、一種用于發(fā)酵培養(yǎng)權(quán)利要求1或2所述化合物的鏈霉菌。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的鏈霉菌為鏈霉菌(Sterptomycessp.)SSCGMCCNo.1764。9、權(quán)利要求1或2所述的化合物及其所形成的在藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗感染藥物中的用途。10、權(quán)利要求9所述的化合物及其所形成的在藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗綠膿桿菌或結(jié)核桿菌感染藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明提供了一組具有結(jié)構(gòu)式(I)的尿苷肽類抗生素及其所形成的在藥學(xué)上可接受的鹽，可通過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)其產(chǎn)生菌而獲得，本發(fā)明所述的化合物為一組細(xì)胞壁肽聚糖合成抑制劑，具有抗結(jié)核桿菌和綠膿桿菌的活性，可用于制備抗感染藥物。文檔編號(hào)C07K5/00GK101153052SQ20061014107公開日2008年4月2日申請(qǐng)日期2006年9月29日優(yōu)先權(quán)日2006年9月29日發(fā)明者解云英,許鴻章,陳汝賢申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所