專利名稱：用作tpo模擬物的化合物和組合物的制作方法
相關(guān)申請(qǐng)的交叉參考
本申請(qǐng)請(qǐng)求2005年7月14日提交的美國臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)朥S60/699,481的優(yōu)先權(quán)權(quán)益。本文引用該申請(qǐng)所有公開內(nèi)容作為參考并用于所有目的。
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明提供了一類新的化合物，包含這類化合物的藥物組合物和使用這類化合物治療或預(yù)防與異常或失調(diào)的TPO活性相關(guān)的疾病或障礙，特別是涉及血小板減少的疾病或障礙的方法。

背景技術(shù)：
巨核細(xì)胞為骨髓衍生的細(xì)胞，它們產(chǎn)生循環(huán)的血小板。造血細(xì)胞因子血小板生成素(TPO)支持造血干細(xì)胞增殖和分化過程并且對(duì)巨核細(xì)胞調(diào)節(jié)而言是必需的。
本發(fā)明的新化合物作為TPO模擬物用于治療參與或?qū)е卵夯蜓“鍦p少的疾病或病癥，包括，但不限于放療、化療、免疫療法、癌癥、病毒感染和移植，諸如骨髓和干細(xì)胞移植。
發(fā)明概述 本發(fā)明在一個(gè)方面中提供了式I的化合物及其N-氧化物衍生物，前體藥物衍生物，被保護(hù)的衍生物，各異構(gòu)體及其異構(gòu)體混合物和這類化合物的藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物(例如水合物)
其中 n選自0、1、2和3； m選自0和1； Y選自CR9R10、NR9、O和S(O)2；其中R9和R10獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基； R1選自氫、鹵素、氰基、硝基、NR9R10、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C3-12環(huán)烷基和C3-8雜環(huán)烷基；其中R9和R10獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基； R2和R3獨(dú)立地選自鹵素、氰基、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C6-10芳基、C1-10雜芳基、C3-8雜環(huán)烷基和C3-12環(huán)烷基；其中R2或R3的任意烷基、鏈烯基、炔基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、-NR12R13、-XOR13、-S(O)2R13、C3-12環(huán)烷基、C3-8雜環(huán)烷基、C6-10芳基和C1-10雜芳基；其中X為鍵或C1-6亞烷基且R12和R13獨(dú)立地選自C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基和鹵素-取代的-C1-6烷氧基；其中R2和R3的任意芳基、雜芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)烷基取代基任選進(jìn)一步被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基和鹵素-取代的-C1-6烷氧基； R4選自氫、鹵素、氰基、硝基、XNR9R10、OXNR9R10、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C3-12環(huán)烷基、C3-8雜環(huán)烷基、C6-10芳基和C1-10雜芳基；其中X為鍵或C1-6亞烷基且R9和R10獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基； R5、R6和R7獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、C3-8雜環(huán)烷基、C1-10雜芳基、C6-10芳基、OS(O)2R11、NR11S(O)2R14、NR11C(O)R14、NR11C(O)NR11R14、NR11C(O)C(O)OR14、NR11C(O)OR14、OC(O)NR11R14、C(O)OR11、C(O)R15、NR11R14、NR11R15和C(O)NR11R14；其中R11和R14獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基和被NR9R10取代的C1-6烷基；R15為任選被1-3個(gè)C1-6烷基取代的C3-8雜環(huán)烷基；其中R5、R6和R7的任意芳基、雜環(huán)烷基或雜芳基可以進(jìn)一步任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、OS(O)2R11、NR11S(O)2R14、NR11C(O)R14、NR11C(O)NR11R14、NR11C(O)C(O)OR14、NR11C(O)OR14、OC(O)NR11R14、C(O)OR11、C(O)R15、NR11R14、NR11R15和C(O)NR11R14；其中R11，R14和R15如上述所定義； R8選自氫、鹵素、氰基、C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基和C1-6烷基。
本發(fā)明在第二個(gè)方面中提供了藥物組合物，它包含式I的化合物或其N-氧化物衍生物，各異構(gòu)體及其異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的鹽與一種或多種合適的賦形劑的混合物。
本發(fā)明在第三個(gè)方面中提供了治療動(dòng)物疾病或病癥的方法，其中血小板水平升高可以抑制或改善所述疾病或病癥的病理學(xué)和/或癥狀學(xué)情況，該方法包含對(duì)所述的動(dòng)物給予治療有效量的式I的化合物或其N-氧化物衍生物，各異構(gòu)體及其異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明在第四個(gè)方面中提供了式I的化合物在制備用于治療動(dòng)物疾病或病癥的的藥物中的用途，其中所述疾病或病癥的病理學(xué)和/或癥狀學(xué)由血小板水平下降引起。
本發(fā)明的第五個(gè)方面中提供了制備式I的化合物及其N-氧化物衍生物，前體藥物衍生物，被保護(hù)的衍生物，各異構(gòu)體及其異構(gòu)體混合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的方法。
發(fā)明詳述 定義 “烷基”作為基團(tuán)和其它基團(tuán)的結(jié)構(gòu)元件，例如鹵素-取代的-烷基和烷氧基，其可以為直鏈或支鏈的。C1-4-烷氧基包括甲氧基、乙氧基、等。鹵素-取代的烷基包括三氟甲基、五氟乙基等。
“芳基”意指含6-10個(gè)環(huán)碳原子的單環(huán)或稠合雙環(huán)芳族環(huán)組合。例如芳基可以為苯基或萘基，優(yōu)選苯基。“亞芳基”意指衍生自芳基的二價(jià)基團(tuán)。
將“雜芳基”如上述對(duì)芳基所定義，其中環(huán)成員中的一個(gè)或多個(gè)為雜原子。例如，C1-10雜芳基包括吡啶基、吲哚基、吲唑基、喹喔啉基、喹啉基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并硫代吡喃基、苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯、咪唑基、苯并-咪唑基、嘧啶基、呋喃基、唑基、異唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、噻吩基等。
“環(huán)烷基”意指包含所示環(huán)原子成員的飽和或部分不飽和的單環(huán)、稠合雙環(huán)或橋連多環(huán)組合。例如C3-10環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。
“雜環(huán)烷基”意指如本申請(qǐng)中定義的環(huán)烷基，條件是所示環(huán)碳中的一個(gè)或多個(gè)被選自-O-、-N＝、-NR-、-C(O)-、-S-、-S(O)-或-S(O)2-的部分所替換，其中R為氫、C1-4烷基或氮保護(hù)基。例如，作為本申請(qǐng)中用于描述本發(fā)明化合物的C3-8雜環(huán)烷基包括嗎啉代、吡咯烷基、吡咯烷基-2-酮、哌嗪基、哌啶基、哌啶基酮、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸-8-基等。
“鹵素(halogen)”(或鹵素(halo))優(yōu)選表示氯或氟，但也可以為溴或碘。
“血小板生成素(TPO)”在本領(lǐng)域中也稱作c-Mpl配體、mpl配體、巨核細(xì)胞生成素和巨核細(xì)胞生長和發(fā)育因子。
“治療(Treat)”、“治療(treating)”和“治療(treatment)”意指緩解或減輕疾病和/或其伴隨癥狀的方法。
優(yōu)選實(shí)施方案的描述 本發(fā)明提供了治療血小板減少的化合物、組合物和方法?？梢詫⒀“鍦p少廣泛解釋為認(rèn)為血小板數(shù)量低于正常值或健康個(gè)體要求的任意下降。
在一個(gè)實(shí)施方案中，涉及式I的化合物，n選自0、1和2； Y選自CR9R10、O和S(O)2；其中R9和R10獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基； R1選自氫、C1-6烷基和鹵素-取代的-C1-6烷基； R2選自鹵素、C6-10芳基、C1-6烷基和C2-6鏈烯基；其中R2的任意芳基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、C1-6烷基和C1-6烷氧基的基團(tuán)取代； R3選自鹵素、羥基、氰基、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C6-10芳基和C1-10雜芳基；其中R3的任意芳基或雜芳基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、-NR12R13、-XOR13、-S(O)2R13和C3-8雜環(huán)烷基；其中X為鍵或C1-6亞烷基且R12和R13獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基； R4選自氫和鹵素； R5選自氫和C1-6烷基； R6選自C1-10雜芳基、OS(O)2R11、NR11S(O)2R14、NR11C(O)R14、NR11C(O)OR14、C(O)OR11、R15、NR11R14和C(O)NR11R14；其中R11和R14獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、羥基-C1-6烷基和鹵素-取代的-C1-6烷基；R15為任選被1-3個(gè)C1-6烷基取代的C3-8雜環(huán)烷基； R7選自氫、羥基、NR11S(O)2R14和NR11R14；其中R11和R14如上述所定義；且 R8選自氫和C1-6烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，n選自0和1；且Y選自CR9R10、O和S(O)2；其中R9和R10獨(dú)立地選自氫和甲基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自氫和三氟甲基；且R2選自氫、溴、氯、碘、烯丙基、三氟甲基和任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自甲基和乙基的基團(tuán)取代的苯基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3選自氫、溴、氯、氰基、三氟甲基、烯丙基、嘧啶基、吡啶基、哌啶基、苯并唑基、噻唑基和苯基；其中所述的嘧啶基、噻唑基和苯基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代氯、氟、甲基、乙基、丙基、丁基、異-丁基、叔-丁基、異丙氧基、丙氧基、甲氧基、二甲基氨基、甲氧基-甲基、羥基、環(huán)己基、吡啶基、甲基磺?；?、乙基磺?；?、嗎啉代、二乙基氨基、吡嗪基、哌啶基、苯基、三氟甲基、己烷基和氰基-甲基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R4選自氫、氟和溴。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R5和R8均為氫。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6選自氨基、脲基、羥基-乙?；被Ⅳ然?、甲氧基羰基、甲氧基羰基-氨基、4H-[1，2，4]二唑-5-酮、四唑基、甲基-氨基羰基、二甲基氨基羰基、甲基-羰基-氨基、嗎啉代-羰基、甲基-哌嗪基-羰基、氰基、四唑基、氨基-羰基、甲基磺酰基氨基、甲基磺酰基氨基-羰基、叔-丁氧基羰基-氨基、羥基-羰基-甲基氨基、羥基-甲基-羰基-氨基、草?；被腿谆?磺酰氧基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7選自氫、羥基、甲基-羰基-氨基、氨基和氨基-羰基。
另一個(gè)實(shí)施方案中詳細(xì)描述了下文實(shí)施例和表中的化合物。
藥理學(xué)和應(yīng)用 可以將血小板減少廣泛解釋為認(rèn)為低于正常值或?qū)】祩€(gè)體所需的血小板數(shù)量的任意下降。已知血小板減少具有許多致病因素，包括，但不限于化療、化療、免疫療法、免疫性血小板減少性紫癜、骨髓異常增生綜合征(MDS)、再生障礙性貧血、AML、CML、病毒感染(包括，但不限于HIV、丙型肝炎病毒、細(xì)小病毒)、肝病、重度骨髓抑制、骨髓移植、干細(xì)胞移植、外周血干細(xì)胞移植、祖細(xì)胞缺陷、干細(xì)胞和祖細(xì)胞多態(tài)現(xiàn)象、TPO缺乏、中性白細(xì)胞減少、樹突細(xì)胞活動(dòng)化、增殖、活化或分化。
TPO在治療患有血小板計(jì)數(shù)減少的患者中具有顯著的治療價(jià)值。特別地，具有許多類型癌癥的患者存在血小板減少，這是因骨髓抑制性化療或放療所致，這種化療或放療可以導(dǎo)致出血風(fēng)險(xiǎn)增加并且通常限制了為接受加強(qiáng)化療或骨髓移植給予的化療劑的劑量。
本發(fā)明的化合物用于治療血小板減少，而與導(dǎo)致該病癥的因素或多種因素?zé)o關(guān)。本發(fā)明的化合物還用于治療在致病因素或多種致病因素未知或尚未得到鑒定時(shí)的血小板減少。本發(fā)明的化合物是有用的，無論是否涉及血液或血小板減少，包括，但不限于移植術(shù)、手術(shù)、分娩前麻醉和腸保護(hù)。
因?yàn)檠“?凝血細(xì)胞)是凝血所必需的并且在其數(shù)量極低時(shí)，患者因突然出血而處于死亡危險(xiǎn)，本發(fā)明的TPO模擬物具有在治療各種出血性障礙中的有用應(yīng)用，例如主要因血小板缺乏導(dǎo)致的疾病。
按照上述所述，本發(fā)明進(jìn)一步提供了有這類治療需要的個(gè)體預(yù)防或治療上述疾病或障礙中的任意種的方法，該方法包含對(duì)所述患者給予治療有效量(參見下文的“施用和藥物組合物”)的式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。就上述用途中的任意種而言，所需劑量根據(jù)施用方式、所治療的特定病癥和所需作用的不同而改變。
施用和藥物組合物 一般而言，通過本領(lǐng)域常用和可接受的已知方式中的任意種給予治療有效量的本發(fā)明化合物，可以將其單獨(dú)給予或與一種或多種治療劑聯(lián)合給予。治療有效量可以根據(jù)疾病的嚴(yán)重性、個(gè)體的年齡和相對(duì)健康情況、所用化合物的功效和其它因素的不同而廣泛改變。一般而言，顯示以約0.03-2.5mg/kg/體重的每日劑量獲得令人滿意的結(jié)果。在較大哺乳動(dòng)物，例如人中的所示每日劑量在約0.5mg-約100mg的范圍，便利地例如以達(dá)每日4次的分次劑量或以延遲劑型給予。用于口服施用的合適的劑型包含約1-50mg活性組分。
可以通過任意常規(guī)途經(jīng)給予作為藥物組合物的本發(fā)明化合物，特別是經(jīng)腸道，例如口服，例如以片劑或膠囊形式；或通過非腸道，例如以可注射溶液或混懸液的形式；通過局部，例如以洗劑、凝膠、軟膏劑或霜?jiǎng)┗虮怯脛┬突蛩▌┬问??？梢酝ㄟ^混合、制?；虬路椒ò凑粘Ｒ?guī)方式制備包含游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式與至少一種藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物。例如，口服組合物可以為片劑或明膠膠囊，它們包含活性組分與a)稀釋劑，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素和/或甘氨酸；b)潤滑劑，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、其鎂或鈣鹽和/或聚乙二醇；就片劑而言還包含c)粘合劑，例如硅酸鎂鋁、淀粉糊、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要，還包含d)崩解劑，例如淀粉、瓊脂、藻酸或其鈉鹽，或泡騰混合物；和/或e)吸收劑、著色劑、矯味劑和甜味劑?？勺⑸浣M合物可以為等滲水溶液或混懸液，并且可以由脂肪乳劑或混懸液制備栓劑。可以將這些組合物滅菌和/或其包含輔助劑，諸如防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑或乳化劑、溶解促進(jìn)劑、用于調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑。此外，它們還可以包含其它治療上有價(jià)值的物質(zhì)。用于透皮施用的合適的制劑包括有效量的本發(fā)明化合物與載體。載體可以包括可吸收的藥理學(xué)可接受的溶劑以便輔助通過宿主皮膚。例如，透皮裝置可以為包含裱背部件、包含化合物任選與載體的儲(chǔ)庫、任選的在延長時(shí)間期限內(nèi)以受控和預(yù)定速率將化合物遞送至宿主皮膚的速率控制屏障和將裝置與皮膚固定的用具。還可以使用骨架透皮制劑。用于局部施用，例如皮膚和眼的合適的制劑優(yōu)選為本領(lǐng)域眾所周知的水溶液、軟膏劑、霜?jiǎng)┗蚰z。這類制劑可以包含增溶劑、穩(wěn)定劑、張力促進(jìn)劑、緩沖劑和防腐劑。
可以將治療有效量的本發(fā)明化合物與一種或多種治療劑聯(lián)合施用(聯(lián)合用藥)。本發(fā)明的TPO模擬物化合物還用于與已知對(duì)存活或增殖細(xì)胞起作用的其它已知活性劑一起對(duì)存活或增殖細(xì)胞起作用。這類活性劑包括，但不限于G-CSF、GM-CSF、TPO、M-CSF、EPO、Gro-β、IL-11、SCF、FLT3配體、LIF、IL-3、IL-6、IL-1、Progenipoietin、NESP、SD-01或IL-5或上述活性劑中任意種的生物活性衍生物。
已經(jīng)證實(shí)人樹突細(xì)胞表達(dá)TPO受體并且TPO為樹突細(xì)胞的強(qiáng)效轉(zhuǎn)移物。本發(fā)明的TPO模擬物化合物還用作疫苗佐劑，即它們?cè)黾訕渫患?xì)胞的活性和活動(dòng)。本發(fā)明的藥物活性化合物因增加樹突細(xì)胞活性和活動(dòng)而用作免疫佐劑，與口服、透皮或皮下遞送的疫苗和/或免疫調(diào)節(jié)劑一起給予。
已知TPO對(duì)巨核細(xì)胞、血小板和干細(xì)胞具有各種作用，包括抗-細(xì)胞凋亡/存活作用和對(duì)干細(xì)胞和巨核細(xì)胞的增殖作用。因此，本發(fā)明的TPO和/或TPO模擬物有效增加干細(xì)胞和祖細(xì)胞的數(shù)量，以便在將TPO與誘導(dǎo)分化的其它細(xì)胞因子聯(lián)用時(shí)存在協(xié)同作用。
如果將本發(fā)明的化合物與其它療法聯(lián)合施用，那么共同施用的化合物劑量當(dāng)然要根據(jù)所用的共同藥物、使用的具體藥物、所治療的疾病等的不同而改變。
本發(fā)明還提供了藥物組合產(chǎn)品，例如藥盒，它包含a)為如本文披露的游離或藥學(xué)上可接受的鹽形式的本發(fā)明化合物的第一種活性劑；和b)至少一種共同的活性劑。該藥盒可以包含用于其施用的說明書。
如本文所用的術(shù)語“共同施用”或“聯(lián)合施用”等意指包括對(duì)單一患者給予選擇的治療劑并且指定包括治療方案，其中不一定通過相同施用途徑或同時(shí)施用所述的活性劑。
本文所用的術(shù)語“藥物組合產(chǎn)品”意指因混合或合并一種以上活性組分產(chǎn)生并且包括活性組分的固定和不固定組合的產(chǎn)品。術(shù)語“固定組合”意指以單一本體的形式或劑量同時(shí)對(duì)患者給予活性組分，例如式I的化合物和共同活性劑。術(shù)語“不固定組合”意指沒有特定時(shí)間限制的同時(shí)，同時(shí)或依次對(duì)患者給予活性組分，例如式I的化合物和共同活性劑，這類施用在患者體內(nèi)提供了治療有效水平的2種化合物。后者也適用于雞尾酒療法，例如給予3種或3種以上活性組分。
制備本發(fā)明化合物的方法 本發(fā)明還包括制備本發(fā)明化合物的方法。在所述的反應(yīng)中，有必要保護(hù)反應(yīng)官能團(tuán)，例如羥基、氨基、亞氨基、硫代或羧基，其中這些基團(tuán)為終產(chǎn)物中所需的，以避免其參與不需要的反應(yīng)?？梢园凑諛?biāo)準(zhǔn)實(shí)踐使用常用的保護(hù)基，例如，參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts在“ProtectiveGroups in Organic Chemistry”，John Wiley和Sons，1991中所述。
可以如下列反應(yīng)方案I中所述的方法制備式I的化合物 反應(yīng)方案I
其中n、m、Y和R1-R8如本發(fā)明概述中所定義。可以通過在有合適的路易絲酸(例如氯化鋅等)或質(zhì)子酸(例如HCl等)存在下和合適的溶劑(例如乙酸、乙醇等)中式2化合物與式3的化合物反應(yīng)合成式I的化合物。該反應(yīng)在約80℃-約120℃的溫度下進(jìn)行并且可能需要約達(dá)24小時(shí)完成。
合成式I的化合物的詳細(xì)實(shí)施例可以在下文實(shí)施例中找到。
制備本發(fā)明化合物的額外方法 可以通過使游離堿形式的化合物與藥學(xué)上可接受的無機(jī)酸或有機(jī)酸反應(yīng)將本發(fā)明的化合物制備成藥學(xué)上可接受的酸加成鹽?；蛘撸梢酝ㄟ^游離酸形式的化合物與藥學(xué)上可接受的無機(jī)堿或有機(jī)堿反應(yīng)制備本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的堿加成鹽。
或者，可以使用原料或中間體的鹽制備本發(fā)明化合物的鹽形式。
可以分別由相應(yīng)的堿加成鹽或酸加成鹽制備本發(fā)明化合物的游離酸或游離堿。例如，可以通過用合適的堿(例如氫氧化銨溶液、氫氧化鈉等)處理將酸加成鹽形式的本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的游離堿?？梢酝ㄟ^用合適的酸(例如鹽酸等)處理將堿加成鹽形式的本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的游離酸。
可以通過在0-80℃下用還原劑(例如硫、二氧化硫、三苯膦、硼氫化鋰、硼氫化鈉、三氯化磷、三溴化物等)在合適的惰性有機(jī)溶劑(例如乙腈、乙醇、含水二烷等)中處理由本發(fā)明化合物的N-氧化物制備的未氧化形式的本發(fā)明化合物。
可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備本發(fā)明化合物的前體藥物衍生物(進(jìn)一步的詳細(xì)內(nèi)容例如參見Saulnier等，(1994)，Bioorganic andMedicinal Chemistry Letters，Vol.4，p.1985)。例如，可以通過使本發(fā)明非衍生的化合物與合適的氨基甲?；噭?例如1，1-acyloxyalkylcarbanochloridate、碳酸對(duì)-硝基苯酯等)反應(yīng)制備合適的前體藥物。
可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的方式制備本發(fā)明化合物的被保護(hù)的衍生物。適合于產(chǎn)生保護(hù)基及其除去的技術(shù)的詳細(xì)描述可以在T.W.Greene，“Protecting Groups in Organic Chemistry”，第3版，John Wiley和Sons，Inc.1999中找到。
本發(fā)明的化合物可以便利地制備或在本發(fā)明方法過程中形成，如溶劑合物(例如水合物)?？梢酝ㄟ^使用有機(jī)溶劑，諸如二英、四氫呋喃或甲醇從含水/有機(jī)溶劑混合物中重結(jié)晶便利地制備本發(fā)明化合物的水合物。
可以通過使化合物的外消旋混合物與旋光活性拆分試劑反應(yīng)而形成非對(duì)映異構(gòu)體化合物對(duì)，分離非對(duì)映體并且回收光學(xué)純的對(duì)映體將本發(fā)明的化合物制備成其各個(gè)立體異構(gòu)體。盡管可以使用本發(fā)明化合物的共價(jià)非對(duì)映異構(gòu)體衍生物對(duì)對(duì)映體進(jìn)行拆分，但是優(yōu)選易離解的復(fù)合物(例如結(jié)晶非對(duì)映異構(gòu)體鹽)。非對(duì)映體具有不同的物理特性(例如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、溶解度、反應(yīng)性等)并且易于通過利用這些不同性分離?？梢酝ㄟ^色譜法或優(yōu)選通過基于溶解度差異的分離/拆分技術(shù)分離非對(duì)映體。然后通過不會(huì)產(chǎn)生外消旋化的任何實(shí)施方式回收光學(xué)純的對(duì)映體與拆分試劑。適合于從外消旋混合物中拆分化合物的立體異構(gòu)體的技術(shù)的更詳細(xì)描述可以在Jean Jacques，Andre Collet，Samuel H.Wilen，“Enantiomers，Racemates andResolutions”，John Wiley和Sons，Inc.1981中找到。
總之，可以通過一種方法制備式I的化合物，包括 (a)反應(yīng)方案I的方法；和 (b)任選將本發(fā)明的化合物轉(zhuǎn)化成藥學(xué)上可接受的鹽； (c)任選將本發(fā)明的化合物的鹽形式轉(zhuǎn)化成非鹽形式； (d)任選將本發(fā)明化合物的未氧化形式轉(zhuǎn)化成藥學(xué)上可接受的N-氧化物； (e)任選將本發(fā)明化合物的N-氧化物形式轉(zhuǎn)化成其未氧化形式； (f)任選從異構(gòu)體的混合物中拆分本發(fā)明化合物的各異構(gòu)體； (g)任選將本發(fā)明的未衍生化合物轉(zhuǎn)化成藥學(xué)上可接受的前體藥物衍生物；和 (h)任選將本發(fā)明化合物的前體藥物衍生物轉(zhuǎn)化成其非衍生形式。
就未特別描述原料的生產(chǎn)而言，化合物為已知的或可以按照與本領(lǐng)域公知或下文實(shí)施例中披露的方法類似的方式制備。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解上述轉(zhuǎn)化僅為制備本發(fā)明化合物方法的代表，并且可以類似地使用其它眾所周知的方法。
實(shí)施例 本發(fā)明進(jìn)一步以如下實(shí)施例為典型，這些實(shí)施例用于解釋本發(fā)明式I化合物的制備，但不起限定作用。
實(shí)施例1 8-溴-10-氟-2-羥基-9-三氟甲基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯
步驟13-羥基-5-氧代-4a，5，6，7，8，8a-六氫-萘-2-甲酸甲酯
向在Parr Bomb中的3，5-二羥基-2-萘甲酸(30g，147mmol)在MeOH(400mL)中的溶液中加入分散于MeOH(30mL)中的Pd(OH)2(20％wt/碳，1.5g)。用H2給該混合物增壓至1000psi并且在50℃下攪拌過夜。然后給該系統(tǒng)釋壓并且使用甲醇通過短硅膠墊過濾該混合物。濃縮濾液并且重新溶于乙醚(250mL)和MeOH(50mL)。然后加入三甲代甲硅烷基重氮甲烷(在乙醚中2M，70mL)。在攪拌10分鐘后，濃縮該混合物并且通過硅膠閃式色譜法純化(洗脫液20～25％在己烷中的乙酸乙酯)而得到11.5g黃白色固體狀的3，5-二羥基-4a，5，6，7，8，8a-六氫-萘-2-甲酸甲酯。
向3，5-二羥基-4a，5，6，7，8，8a-六氫-萘-2-甲酸甲酯(3g，13.5mmol)在DCM(100mL)中的溶液中加入PDC(5.33g，14.2mmol)。將該混懸液在室溫下攪拌過夜。在反應(yīng)完成時(shí)，通過短硅膠墊過濾該混合物，用DCM沖洗。在蒸發(fā)溶劑后，獲得粗產(chǎn)物，為淡黃色固體。使用DCM和己烷重結(jié)晶而得到2.4g 3-羥基-5-氧代-4a，5，6，7，8，8a-六氫-萘-2-甲酸甲酯，為白色結(jié)晶固體；[M+H]+C12H12O4的LC/MS的理論值221.1，實(shí)測(cè)值221.1。
步驟2(4-溴-2-氟-3-三氟甲基-苯基)-肼
將4-溴-2-氟-3-三氟甲基-苯基苯胺(4g，15.5mmol)的樣品懸浮于濃HCl(36mL)中并且在冰/鹽浴中冷卻。然后用NaNO2(1.12g，16.3mmol)在水(36mL)中的溶液滴加處理該反應(yīng)。將該反應(yīng)攪拌30分鐘且然后用SnCl2二水合物(17.5g，77.5mmol)在濃HCl(36mL)中的溶液處理。然后將該反應(yīng)在冰/水浴中攪拌1小時(shí)，隨后在室溫下攪拌1小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)并且用50％NaOH水溶液(30mL)和乙醚(50mL)處理固體。用乙醚將水相萃取一次以上并且用MgSO4干燥合并的有機(jī)相且過濾。用5mL 4M在二烷中的HCl處理所得溶液，同時(shí)攪拌并且收集所得固體且在高度真空中干燥而得到2.44g(4-溴-2-氟-3-三氟甲基-苯基)-肼鹽酸鹽；[M+H]+C7H5BrF4N2的LC/MS的理論值273.0，實(shí)測(cè)值272.9。
步驟3用無水ZnCl2(219mg，1.60mmol)和乙酸(8mL)處理(4-溴-2-氟-3-三氟甲基-苯基)-肼鹽酸鹽(199mg，642μmol)和3-羥基-5-氧代-4a，5，6，7，8，8a-六氫-萘-2-甲酸甲酯(141mg，642μmol)的樣品。將該反應(yīng)加熱至105℃下過夜。在冷卻至室溫后，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑。然后用乙酸乙酯處理該反應(yīng)并且用1M HCl萃取兩次。然后用MgSO4干燥有機(jī)層并且過濾。然后使殘余物從甲醇中結(jié)晶而得到標(biāo)題化合物，為白色固體；1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.58(s，1H)，10.56(s，1H)，7.93(s，1H)，7.73(s，1H)，7.54(s，1H)，3.92(s，3H)，3.00-2.88(m，4H)；(M++H+)的ESIMS m/z理論值458.0，實(shí)測(cè)值458.0。
實(shí)施例2 8-溴-10-氟-2-羥基-9-三氟甲基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸
用乙醇(0.3mL)和水(0.5mL)，隨后用LiOH(4mg，190μmol)處理8-溴-10-氟-2-羥基-9-三氟甲基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯(28.9mg，63.4μmol)的樣品。然后將該反應(yīng)在50℃下攪拌過夜。然后用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)并且用1M HCl萃取。然后用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾并且除去溶劑。使用UV啟動(dòng)的HPLC純化所得殘余物而得到22mg標(biāo)題化合物，為白色固體；1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.78(s，1H)，7.76(s，1H)，7.32(s，1H)，3.00(m，2H)，2.95(2，H)；[M+H]+C18H11F4NO3的LC/MS的理論值445.1，實(shí)測(cè)值445.9。
通過使用合適的原料重復(fù)上述實(shí)施例中所述的方法獲得如表1中所鑒定的下列式I的化合物。
表1



就化合物17而言3-(4，6-二甲基-嘧啶-2-基)-苯胺的制備
用N2將2-氯-4，6-二甲基-嘧啶(92mg，0.645mmol，1eq.)、3-氨基苯硼酸(100mg，0.645mmol，1eq.)、Na2CO3(137mg，1.29mmol，2eq.)和Pd(PPh3)2Cl2(23mg，0.032mmol.5mol％)在1∶1 v/v的CH3CN/H2O混合物(2.6mL)中的混合物凈化5分鐘且然后在150℃下的微波中加熱5分鐘。在冷卻至室溫后，用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且依次用飽和NaHCO3水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液。濃縮后，通過硅膠色譜法純化殘余物(1∶1己烷/EtOAc)而得到3-(4，6-二甲基-嘧啶-2-基)-苯胺，為黃色半固體。[MS(ES+)200.1(M+1)+]。
然后按照與如實(shí)施例1步驟2中所述相同的方式將該物質(zhì)轉(zhuǎn)化成肼。
就化合物18而言3-(4，5-二甲基-噻唑-2-基)-苯胺的制備
向3-氨基-硫代苯甲酰胺(200mg，1.31mmol，1eq.)在EtOH(4mL)中的溶液中加入3-氯-2-丁酮(140mg，1.31mmol，1eq.)。將該混合物在100℃下加熱72小時(shí)。在冷卻至室溫后，用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且依次用飽和NaHCO3水溶液、H2O和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液。濃縮后，通過硅膠色譜法純化殘余物(2∶1己烷/EtOAc)而得到3-(4，5-二甲基-噻唑-2-基)-苯胺，為黃色油狀物。[MS(ES+)205.1(M+1)+]。
然后按照與如實(shí)施例1步驟2中所述相同的方式將該物質(zhì)轉(zhuǎn)化成肼。
實(shí)施例19 2-羥基-8-苯基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸
步驟18-溴-2-羥基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯
向在密封試管中的4-溴肼(225mg，1mmol)、3-羥基-5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酸甲酯(220mg，1mmol)和ZnCl2(272mg，2mmol)的混合物中加入乙酸(2mL)。用氮?dú)鈨艋摶旌衔锊⑶以?05℃下加熱過夜。使該反應(yīng)冷卻下來并且用水稀釋。加入飽和NaHCO3溶液以便中和乙酸。用EtOAc(3x20 mL)萃取該混合物。用NaHCO3(飽和)溶液和鹽水洗滌合并的有機(jī)相并且用NaSO4干燥。在蒸發(fā)溶劑后獲得粗產(chǎn)物，為黃色固體，并且將其用于下一步。
步驟2和3在微波管中向來自上述步驟的粗產(chǎn)物(20mg，0.054mmol)、苯基硼酸(13mg，0.11mmol)、氟化銫(32mg，0.22mmol)在二烷(2mL)中的混合物中加入雙(三-叔-丁膦)鈀(3mg，10％mmol)。密封該管。用N2將該混合物凈化3分鐘且然后在120℃和微波照射下加熱10分鐘。冷卻該混合物，過濾并且濃縮。將殘余物轉(zhuǎn)入微波管并且用乙醇/H2O(1mL/0.1mL)，隨后用LiOH(12mg，0.54mmol)處理。然后將該混合物在120℃下和微波照射中加熱6分鐘。過濾粗產(chǎn)物并且應(yīng)用于質(zhì)量啟動(dòng)的制備型HPLC以純化。在3步內(nèi)獲得標(biāo)題化合物，為黃色固體1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.59(s，1H)，11.3(br，1H)，7.82-7.80(m，1H)，7.72-7.69(m，3H)，7.48-7.42(m，4H)，7.33-7.29(m，1H)，7.26(s，1H)，2.97(s，4H)；ESMS m/z356.2(M+H+)。
實(shí)施例20 8-烯丙基-10-氟-2-羥基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸
在微波反應(yīng)管中向8-溴-10-氟-2-羥基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯(50mg，0.13mmol)(實(shí)施例19，步驟1)、烯丙基三丁基錫(56mg，0.15mmol)、氟化銫(38mg，0.25mmol)、二烷(2mL，無水)的混合物中加入雙(三-叔-丁膦)鈀(4mg，5％mmol)。密封該管。用N2將該混合物凈化3分鐘且然后在100℃下加熱3小時(shí)。然后將該混合物冷卻至室溫并過濾。濃縮濾液并重新溶于EtOH/H2O(1mL/0.1mL)。向該混合物中加入氫氧化鋰(30mg，1.3mmol)。將該混合物在120℃下和微波照射中加熱6分鐘。然后過濾粗混合物并且應(yīng)用于質(zhì)量啟動(dòng)的制備型HPLC以純化。獲得標(biāo)題化合物，為黃色固體；ESMS m/z 338.1(M+H+)。
實(shí)施例21 10-氟-2-羥基-8-丙基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸
遵循實(shí)施例20的方法，但在Stille反應(yīng)完成后，濃縮濾液并且重新溶于乙醇/EtOAc(5mL/3mL)。向該溶液中加入Pd/C(10％)。給該反應(yīng)混合物脫氣并且用H2凈化幾次并且在氫氣環(huán)境中攪拌過夜。將該混合物通過硅藻土過濾并且水解且如實(shí)施例20純化而得到標(biāo)題化合物1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.72(s，1H)，11.29(br，1H)，7，67(s，1H)，7.41(s，1H)，7.16(s，1H)，6.85(d，1H，J＝12.4Hz)，2.94-2.87(m，4H)，2.62(t，2H，J＝7.6Hz)，1.63(qt，2H，J＝7.6，7.2Hz)，0.91(t，3H，J＝7.6Hz)，ESMS m/z 339.1(M+H+)。
通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例19-21中所述的方法獲得下列表2中鑒定的化合物。
表2

實(shí)施例30 9-(苯基)-2-羥基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸
步驟19-溴-2-羥基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯
在密封試管內(nèi)向3-溴-苯基肼(225mg，1mmol)、3-羥基-5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酸甲酯(220mg，1mmol)和ZnCl2(272mg，2mmol)的混合物中加入乙酸(2mL)。用氮?dú)鈨艋摶旌衔锊⑶以?05℃下加熱過夜。冷卻該反應(yīng)并且用水稀釋。加入NaHCO3飽和溶液以中和乙酸。用EtOAc(3x20mL)萃取該混合物。用NaHCO3(飽和)溶液和鹽水洗滌合并的有機(jī)相并且用NaSO4干燥。濃縮后，獲得粗產(chǎn)物，為1∶1比例的7-和9-溴-2-羥基-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯并且用于下一步。
步驟2在微波管中向來自上述步驟的粗產(chǎn)物(50mg，0.13mmol)、苯基硼酸(32mg，0.26mmol)、氟化銫(78mg，0.52mmol)在二烷(3mL，無水)中的混合物中加入雙(三-叔-丁膦)鈀(6mg，10％mmol)。密封該管。用N2將該混合物凈化3分鐘且然后在120℃和微波照射下加熱10分鐘。冷卻該混合物，過濾并且濃縮。將殘余物轉(zhuǎn)入含有乙醇/H2O(1mL/0.1mL)的微波管。加入LiOH(12mg，0.54mmol)。將該混合物在120℃下和微波照射中加熱6分鐘。過濾粗混合物并且應(yīng)用于質(zhì)量啟動(dòng)的制備型HPLC以純化。獲得標(biāo)題化合物，為黃色固體1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.59(s，1H)，11.3(br，1H)，7.82-7.80(m，1H)，7.72-7.69(m，3H)，7.48-7.42(m，4H)，7.33-7.29(m，1H)，7.26(s，1H)，2.97(s，4H)；ESMS m/z 356.2(M+H+)。
通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例30中所述的方法獲得下列表3中鑒定的化合物。
表3





實(shí)施例57 9-氯-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸
步驟15-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酸甲酯
將商購的5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酸(200mg，1.05mmol)樣品溶于二氯甲烷與甲醇的混合物(5∶1，10mL)。然后用三甲代甲硅烷基重氮甲烷在四氫呋喃中的溶液(2M)處理該溶液，直到黃色持續(xù)出現(xiàn)。然后用少量乙酸處理該反應(yīng)以便破壞過量的試劑且除去溶劑。用硅膠純化殘余物而得到標(biāo)題化合物，為黃色固體。ESMS m/z 204.1(M+H+)。
步聚2-3將5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酸甲酯和2-氟-3-氯苯基肼鹽酸鹽樣品用于制備Fischer產(chǎn)物，隨后如實(shí)施例1步驟3和實(shí)施例2皂化而得到標(biāo)題物質(zhì)1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ12.12(s，1H)，7.88(m，3H)，7.39(m，1H)，7.11(dd，J＝6.5，1.9Hz，1H)，3.08(m，2H)，2.94(m，2H)；[M+H]+C17H12FClNO2的LC/MS的理論值316.7，實(shí)測(cè)值316.1。
實(shí)施例58 9-(3，5-二甲基-4-丙氧基-苯基)-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯
步驟12-(3，5-二甲基-4-丙氧基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷
將2，6-二甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-苯酚(500mg，2.02mmol，1eq.)、1-溴丙烷(793mg，6.45mmol，3.2eq.)和K2CO3(334mg，2.42mmol，1.2eq.)在丙酮(20mL)中的混合物在65℃下加熱4天。在冷卻至室溫后，濃縮該反應(yīng)，用EtOAc稀釋并且依次用H2O和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液并且濃縮得到2-(3，5-二甲基-4-丙氧基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷，為澄清油狀物。
步驟2如實(shí)施例19步驟2中偶聯(lián)9-氯-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯(如實(shí)施例57步驟2中制備)和2-(3，5-二甲基-4-丙氧基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊烷粗樣品而得到標(biāo)題物質(zhì)ESMS m/z458(M+H+)。
實(shí)施例59 9-(3，5-二甲基-4-丙氧基-苯基)-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸
如實(shí)施例1步驟2中皂化9-(3，5-二甲基-4-丙氧基-苯基)-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酯樣品而得到標(biāo)題物質(zhì)；(丙酮-d6)δ11.07(bs，1H)，7.99(s，1H)，7.97(d，1H)，7.86(d，1H)，7.42(d，1H)，7.24(s，2H)，7.12(dd，1H)，3.82(t，2H)，3.17(t，2H)，3.08(t，2H)，2.31(s，6H)，1.94-1.84(m，2H)，1.10(t，3H)；ESMS m/z 444(M+H+)。
通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例57-59中所述的方法獲得下列表4中鑒定的化合物。
表4 化合物# 結(jié)構(gòu) NMR和/或ESMS


就化合物63而言如下制備硼酸 2-(4-氟-3-丙氧基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷
將5-溴-2-氟-苯酚(通過Elliott，M.等GB2187731的方法制備)(500mg，2.62mmol，1eq.)、1-溴丙烷(322mg，2.62mmol，1eq.)和K2CO3(434mg，3.14mmol，1.2eq.)在丙酮(20mL)中的混合物在65℃下加熱24小時(shí)。在冷卻至室溫后，濃縮該反應(yīng)，用EtOAc稀釋并且依次用1N NaOH水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液。濃縮后，通過硅膠色譜法純化殘余物(3∶1己烷/EtOAc)而得到4-溴-1-氟-2-丙氧基-苯，為黃色油狀物。
用N2將4-溴-1-氟-2-丙氧基-苯(224mg，0.961mmol，1eq.)、聯(lián)硼酸頻那醇酯(bis(pinacolato)diboron)(268mg，1.057mmol，1eq.)、KOAc(283mg，2.88mmol，3eq.)和Pd(dppf)2Cl2(7mg，0.01mmol.1mol％)在DMF(無水，1mL)中的混合物凈化10分鐘且然后在密封試管內(nèi)在80℃下加熱12小時(shí)。在冷卻至室溫后，用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且用H2O洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液。在濃縮后，通過硅膠色譜法純化殘余物(1∶2己烷/CH2Cl2)而得到2-(4-氟-3-丙氧基-苯基)-4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷，為澄清油狀物[MS(ES+)281.2(M+1)+]。
就化合物69而言使用烯丙基三丁基錫替代硼酸。
實(shí)施例70 9-(4-丁基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸
步驟14′-丁基-聯(lián)苯-3-基胺
將3-溴苯胺(2.00g，11.6mmol)、4-丁基苯基硼酸(3.1g，17.4mmol)和氟化銫(5.3g，35mmol)的樣品加入到微波反應(yīng)瓶中并且用無水二烷(12mL)和雙(三-叔-丁膦)(600mg，1.16mmol)處理。密封該瓶并且用氮?dú)鈨艋?分鐘。然后將該反應(yīng)加熱至120℃下5分鐘并且用硅藻土過濾，用乙酸乙酯洗滌。除去溶劑并且通過UV啟動(dòng)的反相HPLC純化粗物質(zhì)而得到標(biāo)題化合物ESMS m/z 226.2(M+H+)。
步驟2(4′-丁基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽
如實(shí)施例1步驟2制備該物質(zhì)。
步驟3用氯化鋅(134mg，0.99mmol)和乙酸(5mL)處理商購的5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酸(75mg，0.39mmol)和(4′-丁基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(115mg，0.41mmol)的樣品。然后將該反應(yīng)加熱至105℃下過夜并且冷卻至室溫。過濾該反應(yīng)并且用甲醇洗滌濾液且在高度真空路徑上干燥而得到標(biāo)題物質(zhì)，為單一區(qū)域異構(gòu)體。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.63(s，1H)，7.90-7.84(m，2H)，7.75-7.71(m，1H)，7.62-7.57(m，4H)，7.35-7.31(m，1H)，7.28(d，J＝8.0Hz，2H)，3.11-3.05(m，2H)，2.99-2.92(m，2H)，2.62(dd，J＝7.6，7.6Hz，2H)，1.65-1.55(m，2H)，1.40-1.29(m，2H)，0.92(dd，J＝7.3，7.3Hz，3H)；(M++H+)的ESIMS m/z的理論值396.2，實(shí)測(cè)值396.2。
實(shí)施例71 9-(4-丁基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸甲酰胺
將9-(4-丁基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酸(116.2mg，41μmol)的樣品溶于DMF(1mL)并且用HATU(16.3mg，41μmol)和甲胺(2M)在四氫呋喃(0.1mL，100μmol)中的溶液處理。在攪拌過夜后，用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)并且用水萃取兩次。用MgSO4干燥有機(jī)層并且除去溶劑。通過質(zhì)量啟動(dòng)的HPLC純化所得殘余物而得到標(biāo)題產(chǎn)物，凍干后為白色固體。[M+H]+C28H29N2O的LC/MS的理論值409.5，實(shí)測(cè)值409.1。
通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例71中所述的方法獲得下列表5中鑒定的化合物。
表5

實(shí)施例75 7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸
步驟11-氧代-茚滿-5-腈
向在密封試管內(nèi)的5-溴-茚滿-1-酮(1g，4.7mmol)、氰化鋅(1.11g，9.4mmol)在NMP/THF(2mL/4mL)中的混合物中加入雙(三-叔-丁膦)鈀(120mg，5％mmol)。用N2凈化該混合物并且在120℃下加熱3小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至rt，用H2O稀釋并且用EtOAc(3x20mL)萃取。用飽和氯化銨水溶液和鹽水洗滌有機(jī)相并且用Na2SO4干燥。通過硅膠柱色譜法純化在濃縮后獲得的粗產(chǎn)物，用己烷/EtOAc(5/1～3/1)的混合溶劑洗脫而得到1-氧代-茚滿-5-腈，為淡黃色固體ESMS m/z 158.0(M+H+)。
步驟21-氧代-茚滿-5-甲酸甲酯
向在0℃下1-氧代-茚滿-5-腈(100mg，0.64mmol)在KOH(25％，0.21mL)中的混懸液中加入H2O2(0.32mL)。將該混合物在rt下攪拌30分鐘，然后在50℃下攪拌1小時(shí)。在冷卻至室溫后，用EtOAc(3x10mL)萃取該混合物。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相并且用Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑而得到1-氧代-茚滿-5-甲酰胺，為白色固體。向該固體中加入HCl水溶液(4N，3mL)。將該混合物加熱至90℃達(dá)2小時(shí)。然后用EtOAc(3x10mL)萃取該反應(yīng)混合物。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相。向該溶液中滴加MeOH(5mL)，隨后滴加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(在乙醚中2M)，直到全部甲酸耗盡。蒸發(fā)溶劑而得到粗產(chǎn)物1-氧代-茚滿-5-甲酸甲酯，其純度足以用于下一步。ESMS m/z 191.1(M+H+)。
步驟2-4將1-氧代-茚滿-5-甲酸甲酯和2-氟-3-氯苯基肼鹽酸鹽的樣品用于制備Fischer產(chǎn)物，隨后進(jìn)行與4-丁基苯基硼酸的Suzuki反應(yīng)并且如實(shí)施例30步驟1和2皂化而得到標(biāo)題物質(zhì)1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ11.32(s，1H)，8.22(s，1H)，8.09(d，1H，J＝7.6Hz)，7.79(d，1H，J＝8Hz)，7.58-7.53(m，3H)，7.34(s，1H)，7.32(s，1H)，7.24-7.20(m，1H)，3.88(s，2H)，2.68(t，2H，J＝7.6Hz)，1.66(tt，2H，J＝7.6，7.6Hz)，1.40(qt，2H，J＝7.6，7.6Hz)，0.95(t，3H，J＝7.60Hz)，ESMS m/z 400.1(M+H+)。
實(shí)施例76 6-氟-7-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸
使用3-甲基4-氟苯基硼酸作為步驟3中的偶聯(lián)配偶體，按照與實(shí)施例75相同的方法獲得收率類似的標(biāo)題化合物。ESMS m/z 376.1(M+H+)。
實(shí)施例77 7-(4-丁基-苯基)-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸
通過使(4′-丁基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例70，步驟1)和1-氧代-茚滿-5-甲酸甲酯如實(shí)施例1中所述反應(yīng)，隨后如實(shí)施例2中所述水解獲得收率類似的標(biāo)題化合物。ESMS m/z 382.1(M+H+)。
實(shí)施例78 7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-腈
步驟1(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽
按照與實(shí)施例70步驟1中類似的方式制備該物質(zhì)，但將2-氟-3-氯苯胺用作鹵化物輸入物。[M+H]+C16H19FN2的LC/MS的理論值259.2，實(shí)測(cè)值259.2。
步驟2使1-氧代-茚滿-5-腈(133.5mg，0.85mmol)(實(shí)施例74，步驟1)和(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(250.4，0.85mmol)的樣品彼此如實(shí)施例1步驟3中反應(yīng)，隨后通過UV啟動(dòng)的反相HPLC純化而得到標(biāo)題化合物，為白色固體。[M+H]+C26H21FN2的LC/MS的理論值381.2，實(shí)測(cè)值381.2。
實(shí)施例79 9-(4-丁基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-腈
按照如實(shí)施例1步驟3中相同的方式和類似的收率由商購6-氰基四氫萘酮和(4′-丁基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例70，步驟1)制備該物質(zhì)。[M+H]+C27H25N2的LC/MS的理論值377.2，實(shí)測(cè)值377.1。
實(shí)施例80 9-(4-丁基-苯基)-3-(1H-四唑-5-基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑
步驟16-(1H-四唑-5-基)-3，4-二氫-2H-萘-1-酮
將6-氰基四氫萘酮(102mg，0.60mmol)溶于DMF(1mL)并且用疊氮化鈉(96.8mg，1.5mmol)、氯化銨(31.9mg，0.60mmol)和氯化鋰(25.3mg，0.60mmol)處理且加熱至120℃過夜。用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)并且用水萃取兩次。通過UV啟動(dòng)的反相HPLC純化殘余物而得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
步驟2按照如實(shí)施例1步驟3中相同的方式和類似的收率使6-(1H-四唑-5-基)-3，4-二氫-2H-萘-1-酮和(4′-丁基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例70，步驟1)反應(yīng)，但用乙酸而非甲醇洗滌固體。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.66(s，1H)，7.97(m，2H)，7.84(d，J＝8.9Hz，1H)，7.63(m，4H)，7.34(d，J＝8.2Hz，2H)，7.29(d，J＝8.1Hz，2H)，3.13(t，J＝7.5Hz，2H)，2.99(t，J＝7.6Hz，2H)，2.63(m，2H)，1.60(m，2H)，1.35(m，2H)，0.93(t，J＝7.3Hz，3H)；[M+H]+C27H26N5的LC/MS的理論值420.5，實(shí)測(cè)值420.1。
實(shí)施例81 9-(4-丁基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-甲酰胺
步驟15-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酰胺
如實(shí)施例75步驟2將商購6-氰基四氫萘酮樣品水解成酰胺。[M+H]+C11H11NO2的LC/MS的理論值189.1，實(shí)測(cè)值189.2。
步驟2按照與實(shí)施例1步驟3相同的方式和類似的收率使5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酰胺和(4′-丁基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例70，步驟1)反應(yīng)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)

11.60(s，1H)，7.83(m，2H)，7.70(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(m，3H)，7.27-7.35(m，4H)，3.05(m，2H)，2.96(m，2H)，2.62(m，2H)，1.60(m，2H)，1.35(m，2H)，0.92(m，3H)；[M+H]+C27H27N2O的LC/MS的理論值395.5，實(shí)測(cè)值395.1。
實(shí)施例82 6-氟-7-(4-氟-3-甲基-苯基)-10，10-二甲基-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酰胺
步驟16-甲氧基-1，1-二甲基-茚滿
用二甲基鋅(2M，30mL)在甲苯中的溶液處理在N2環(huán)境中的四氯化鈦在無水二氯甲烷中的攪拌的冷卻(-40℃)溶液(1M，20mL)。30分鐘后，通過注射器加入6-甲氧基-茚滿-1-酮(1.62g，10mmol)在二氯甲烷(無水，10mL)中的溶液。在添加完成后，將該反應(yīng)溫?zé)嶂羠t并且持續(xù)攪拌3小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至-40℃并且用甲醇(1mL)謹(jǐn)慎淬滅。用DCM和飽和氯化銨水溶液稀釋該混合物。分離各相并且用二氯甲烷(2x20mL)萃取水相。用Na2SO4干燥合并的有機(jī)相，過濾，并且在真空中蒸發(fā)而得到6-甲氧基-1，1-二甲基-茚滿，為油狀物1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.19-7.20(m，1H)，7.10-7.12(m，1H)，6.69-6.68(m，1H)，3.82(s，3H)，2.82(t，2H，J＝7.2Hz)，1.92(t，2H，J＝7.2Hz)，1.24(s，6H)。
步驟25-甲氧基-3，3-二甲基-茚滿-1-酮
將6-甲氧基-1，1-二甲基-茚滿(1g，5.67mmol)在乙酸(5mL)中的溶液冷卻至0℃并且用三氧化鉻(1.3g，13mmol)在乙酸/H2O(5mL/4mL)中的溶液處理。然后將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度并且攪拌3小時(shí)。稀釋該反應(yīng)混合物并且用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌合并的有機(jī)相并且用Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑而得到5-甲氧基-3，3-二甲基-茚滿-1-酮，為黃色油狀物ESMS m/z 191.1(M+H+)。
步驟35-羥基-3，3-二甲基-茚滿-1-酮
在微波反應(yīng)管中，用N2凈化5-甲氧基-3，3-二甲基-茚滿-1-酮(880mg，4.63mmol)、苯硫酚(510mg，4.63mmol)和碳酸鉀(64mg，0.46mmol)在NMP(5mL)中的混合物。將該反應(yīng)混合物在220℃下和微波照射中加熱30分鐘。使用1N NaOH水溶液(10mL)使該反應(yīng)混合物呈堿性并且用Et2O(3x20mL)萃取。使用6N HCl在冰浴中酸化含水部分并且用Et2O(3x20mL)萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相并且用Na2SO4干燥。濃縮后，用硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物(30％在己烷中的乙酸乙酯)而得到5-羥基-3，3-二甲基-茚滿-1-酮，為黃色固體1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.63(d，1H，J＝8Hz)，6.88(d，1H，J＝2Hz)，6.84(dd，1H，J＝2，8Hz)，6.14(s，1H)，2.59(s，2H)，1.40(s，6H)，ESMS m/z 177.1(M+H+)。
步驟4三氟-甲磺酸3，3-二甲基-1-氧代-茚滿-5-基酯
向5-羥基-3，3-二甲基-茚滿-1-酮(480mg，2.72mmol)在DCM(無水，10mL)中的混懸液中加入三乙胺(1.2mL，8.16mmol)。該混懸液變澄清。將該溶液冷卻至-78℃并且用在DCM(無水，3mL)中的N-苯基三氟甲磺酰胺(1.07g，3.0mmol)處理。將該反應(yīng)混合物逐步溫至環(huán)境溫度并且攪拌過夜。用DCM稀釋該反應(yīng)混合物并且用飽和氯化銨水溶液(2x50mL)和鹽水洗滌并且用Na2SO4干燥。在真空中蒸發(fā)后，使用硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物(10～15％在己烷中的乙酸乙酯)而得到所需產(chǎn)物三氟-甲磺酸3，3-二甲基-1-氧代-茚滿-5-基酯，為油狀物ESMS m/z 309.10(M+H+)。
步驟53，3-二甲基-1-氧代-茚滿-5-腈
按照與實(shí)施例74步驟1中所述相同的方法獲得3，3-二甲基-1-氧代-茚滿-5-腈，為白色固體1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.82(s，1H)，7.78(d，1H，J＝8Hz)，7.65(dd，1H，J＝1.2，7.6Hz)，2.66(s，1H)，1.46(s，6H)，ESMS m/z186.1(M+H+)。
步驟6和7如實(shí)施例1步驟3使3，3-二甲基-1-氧代-茚滿-5-腈和(4′-氟-3′-甲基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(如實(shí)施例70步驟1和2制備，但使用3-甲基-4-氟苯基硼酸和3-氯-2-氟苯胺作為偶聯(lián)配偶體)彼此反應(yīng)。然后使該粗產(chǎn)物如實(shí)施例19步驟3進(jìn)行水解而得到6-氟-7-(4-氟-3-甲基-苯基)-10，10-二甲基-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酰胺，為淡黃色固體1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ11.18(s，1H)，8.14(s，1H)，7.95(dd，1H，J＝1.2，7.6Hz)，7.68(d，1H，J＝8Hz)，7.57(d，1H，J＝8.4Hz)，7.54(dd，1H，J＝0.8，7.6Hz)，7.46-7.45(m，2H)，7.20-7.25(m，2H)，6.65-6.50(br，2H)，225(d，3H，J＝1.6Hz)，1.66(s，6H)，ESMS m/z 403.2(M+H+)。
通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例81的方法獲得下列表6中鑒定的化合物。
表6 化合物# 結(jié)構(gòu) NMR和/或ESMS

實(shí)施例87 三氟-甲磺酸9-(4-丁基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基酯
步驟1三氟-甲磺酸5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-基酯
按照?qǐng)?bào)導(dǎo)的方法制備該已知物質(zhì)(Tetrahedron Lett.1992，33(38)，5499)。
步驟2通過按照與實(shí)施例1步驟3類似的方式和類似的收率使三氟-甲磺酸5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-基酯和(4′-丁基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例70，步驟2)反應(yīng)制備標(biāo)題物質(zhì)，但通過反相UV啟動(dòng)的HPLC進(jìn)行純化。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)d11.63(s，1H)，7.78(m，2H)，7.58(m，4H)，7.46(s，1H)，7.33(d，J＝6.7Hz，1H)，7.28(m，2H)，3.09(m，2H)，2.95(m，2H)，2.64(m，2H)，1.60(m，2H)，1.35(m，2H)，0.94(m，3H)；[M+H]+C27H25F3NO3S的LC/MS的理論值500.5，實(shí)測(cè)值500.0。
實(shí)施例88 N-{3-[10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-苯基}-甲磺酰胺
步驟1N-[3-(5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-基)-苯基]-甲磺酰胺
將按照已知方法制備的已知(Tetrahedron Lett.1992，33(38)，5499)三氟-甲磺酸5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-基酯(77.6mg，0.26mmol)和3-甲磺酰氨基-苯硼酸(85.1mg，0.40mmol)的樣品加入到微波反應(yīng)容器中并且用無水二烷(1mL)和氟化銫(94mg，0.62mmol)，隨后用雙(三-叔-丁膦)鈀(13.5mg，0.026mmol)處理。用氮?dú)鈱⒃摲磻?yīng)凈化5分鐘且然后在微波照射下加熱至120℃下15分鐘。用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)并且用水萃取。然后用MgSO4干燥有機(jī)層并且除去溶劑。通過質(zhì)量啟動(dòng)的反相HPLC純化殘余物[M+H]+C17H17NO3S的LC/MS的理論值316.1，實(shí)測(cè)值316.1。
步驟2按照實(shí)施例1步驟3類似的方式使N-[3-(5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-基)-苯基]-甲磺酰胺和(4′-氟-3′-甲基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(如實(shí)施例70步驟1和2中制備，但使用3-甲基-4-氟苯基硼酸和3-氯-2-氟苯胺作為偶聯(lián)配偶體)反應(yīng)制備標(biāo)題產(chǎn)物，但通過反相UV啟動(dòng)的HPLC進(jìn)行純化1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ12.66(s，1H)，9.88(s，1H)，8.82(d，J＝8.7Hz，1H)，8.31(m，1H)，8.29(d，J＝8.6Hz，1H)，8.08(d，J＝8.2Hz，1H)，7.94(m，1H)，7.80(d，J＝8.6Hz，1H)，7.66(m，1H)，7.61(m，2H)，7.48(m，1H)，7.30(m，2H)，3.09(m，2H)，3.04(s，3H)，2.97(m，2H)，2.08(s，3H)；[M+H]+C30H25F2N2O2S的LC/MS理論值515.6，實(shí)測(cè)值515.0。
實(shí)施例89 [10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-氨基甲酸叔丁酯
用叔丁醇(10mL)、二苯基磷?；?343mg，1.25mmol)和三乙胺(126mg，1.25mmol)處理實(shí)施例61(441.5mg，1.13mmol)的樣品。然后將該反應(yīng)回流過夜，濃縮并且通過UV啟動(dòng)的反相HPLC純化而得到標(biāo)題化合物。[M+H]+C28H27F2N2O2的LC/MS的理論值461.5，實(shí)測(cè)值461.2。
實(shí)施例90 10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基胺
用二氯甲烷(1mL)和三氟乙酸(1mL)處理[10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例89)(33mg，0.072mmol)的樣品并且在室溫下攪拌2小時(shí)。然后濃縮該反應(yīng)并且通過反相質(zhì)量啟動(dòng)的HPLC純化而得到標(biāo)題化合物的TFA鹽。[M+H]+C23H19F2N2的LC/MS的理論值361.4，實(shí)測(cè)值361.2。
實(shí)施例91 N-[10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-甲磺酰胺
用二氯甲烷(1mL)和吡啶(0.5mL)處理10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基胺三氟乙酸鹽(實(shí)施例90)(17.8mg，0.038mmol)的樣品。然后用甲磺酰氯(8.6mg，7.5mmol)處理該反應(yīng)并且將該反應(yīng)在室溫下攪拌過夜。然后濃縮該反應(yīng)并且通過反相質(zhì)量啟動(dòng)的HPLC純化而得到標(biāo)題化合物，在凍干后為白色固體1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.82(s，1H)，11.21(s，1H)，7.79(d，J＝8.2Hz，1H)，7.55(m，2H)，7.45(m，1H)，7.38(m，1H)，7.32(d，J＝8.1Hz，1H)，7.20(m，1H)，7.02(dd，J＝8.0，7.0Hz，1H)，2.95(m，2H)，2.87(m，2H)，2.26(s，3H)，1.29(s，3H)；[M+H3O]+C24H23F2N2O3S的LC/MS的理論值457.1，實(shí)測(cè)值457.0。
實(shí)施例92 N-[6-氟-7-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基]-甲磺酰胺
步驟1N-(1-氧代-茚滿-5-基)-甲磺酰胺
用吡啶(59mg，0.75mmol)在二氯甲烷(1.5mL)和四氫呋喃(1.5mL)混合物中的溶液處理5-氨基-茚滿-1-酮樣品(100mg，0.68mmol)。然后在冰浴中冷卻該反應(yīng)。滴加甲磺酰氯(86mg，0.75mmol)在四氫呋喃(1.5mL)中的溶液并且將該反應(yīng)在冰浴溫度下攪拌2小時(shí)并且在室溫下攪拌過夜。用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)并且用1M HCl萃取兩次。用MgSO4干燥有機(jī)相并且除去溶劑而得到標(biāo)題物質(zhì)(64mg，收率42％)，不對(duì)其純化，但照此進(jìn)行[M+H]+C10H11NO3S的LC/MS的理論值226.0，實(shí)測(cè)值226.0。
步驟2按照與實(shí)施例1步驟3類似的方式，通過使N-(1-氧代-茚滿-5-基)-甲磺酰胺和(4′-氟-3′-甲基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(如實(shí)施例70步驟1和2中制備，但使用3-甲基-4-氟苯基硼酸和3-氯-2-氟苯胺作為偶聯(lián)配偶體)反應(yīng)制備標(biāo)題物質(zhì)，但通過反相UV啟動(dòng)的HPLC進(jìn)行純化，收率為29％1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ12.08(s，1H)，9.75(s，1H)，7.61(d，J＝8.1Hz，1H)，7.55-7.50(m，1H)，7.48-7.40(m，3H)，7.28-7.22(m，2H)，7.14-7.09(m，1H)，3.74(s，2H)，3.01(s，3H)，2.34-2.31(m，3H)；[M+H]+C23H18F2N2O2S的LC/MS的理論值425.1，實(shí)測(cè)值425.1。
實(shí)施例93 N-[6-氟-7-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基]-甲磺酰胺
按照與實(shí)施例92類似的方式制備該物質(zhì)，但在步驟1中，酰化試劑為草酰氯且在步驟2中，肼為(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例78，步驟1)；對(duì)[M]+C27H23FN2O3的LC/MS的理論值442.2，實(shí)測(cè)值442.1。
實(shí)施例94 N-[10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-乙酰胺
用二烷(1mL)和乙酐(43mg，0.42mmol)處理10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基胺三氟乙酸鹽(實(shí)施例88)(16.5mg，0.035mmol)的樣品并且溫?zé)嶂?0℃下過夜。將該反應(yīng)冷卻至室溫并且濃縮且通過反相質(zhì)量啟動(dòng)的HPLC純化而得到標(biāo)題化合物，凍干后為白色固體1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ12.49(s，1H)，10.21(s，1H)，8.63(d，J＝8.7Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.18(d，J＝8.7Hz，1H)，8.02(d，J＝8.1Hz，1H)，7.75(d，J＝8.2Hz，1H)，7.59(m，1H)，7.53(s，1H)，7.30(m，1H)，2.97(m，2H)，2.91(m，2H)，2.35(s，3H)，2.13(s，3H)；[M+H]+C25H21F2N2O的LC/MS的理論值403.4，實(shí)測(cè)值403.1。
實(shí)施例95 N-[7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基]-2-羥基-乙酰胺
步驟1乙酸(1-氧代-茚滿-5-基氨基甲?；?-甲酯
向5-氨基-茚滿-1-酮(商購，100mg，0.679mmol，1eq.)在DCM(5mL)中的溶液中加入吡啶(0.066mL，0.815mmol，1.2eq.)。將所得溶液冷卻至0℃，隨后加入乙酰氧基乙酰氯(0.073mL，0.679mmol，1eq.)。在0℃下攪拌15分鐘后，將該反應(yīng)溫?zé)嶂?5℃并且攪拌12小時(shí)。用DCM稀釋該反應(yīng)并且依次用1N HCl(水溶液)和飽和NaHCO3水溶液洗滌。用Na2SO4干燥所得有機(jī)溶液。在濃縮后，通過硅膠色譜法純化殘余物(1∶6己烷/EtOAc)而得到乙酸(1-氧代-茚滿-5-基氨基甲?；?-甲酯，為米色固體(136mg，收率81％)。[MS(ES+)248.1(M+1)+]。
步驟2和3按照與實(shí)施例1步驟3類似的方式，通過使(1-氧代-茚滿-5-基)-氨基甲酸甲酯和(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例78，步驟1)反應(yīng)，隨后如實(shí)施例2中水解并且通過反相質(zhì)量啟動(dòng)的HPLC純化制備標(biāo)題物質(zhì)1H NMR(DMSO-d6)δ12.01(s，1H)，9.70(s，1H)，8.00(s，1H)，7.68(d，1H)，7.63-7.54(m，3H)，7.41(d，1H)，7.29(d，2H)，7.11(dd，1H)，5.70(bs，1H)，4.03(s，2H)，3.75(s，2H)，2.64(t，2H)，1.68-1.60(m，2H)，1.41-1.32(m，2H)，0.94(t，3H)；[M+H]+C27H25FN2O2的LC/MS的理論值429.2，實(shí)測(cè)值429.2。
實(shí)施例96 7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基]-氨基甲酸甲酯
步驟1(1-氧代-茚滿-5-基)-氨基甲酸甲酯
向5-氨基-茚滿-1-酮(商購，100mg，0.679mmol，1eq.)在2∶1v/vEtOAc/H2O混合物(6mL)中的混懸液中加入NaHCO3(114mg，1.36mmol，2eq.)。將所得混合物冷卻至0℃，隨后添加氯甲酸甲酯(0.052mL，0.679mmol，1eq.)。在0℃下攪拌15分鐘后，將該反應(yīng)溫?zé)嶂?5 ℃并且攪拌12小時(shí)。用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且依次用1N HCl(水溶液)和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥所得有機(jī)溶液，濃縮而得到(1-氧代-茚滿-5-基)-氨基甲酸甲酯，為黃褐色固體(124mg，收率89％)。[MS(ES+)206.1(M+1)+]。
步驟2按照與實(shí)施例1步驟3類似的方式，通過使(1-氧代-茚滿-5-基)-氨基甲酸甲酯和(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例78，步驟)反應(yīng)制備標(biāo)題物質(zhì)，但通過反相質(zhì)量啟動(dòng)的HPLC進(jìn)行純化1H NMR(丙酮-d6)δ11.09(s，1H)，8.76(s，1H)，7.90(s，1H)，7.67-7.54(m，4H)，7.47(d，1H)，7.32(d，2H)，7.18(dd，1H)，3.79(s，2H)，3.75(s，3H)，2.72(t，2H)，1.72-1.64(m，2H)，1.49-1.38(m，2H)，0.96(t，3H)；[M+H]+C27H25FN2O2的LC/MS的理論值429.2，實(shí)測(cè)值429.2。
實(shí)施例97 [10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-脲
用甲苯(1mL)、二苯基磷?；?22.2mg，0.081mmol)和三乙胺(8.2mg，8.1mmol)處理6-氟-7-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸(實(shí)施例61)樣品(30mg，0.075mmol)并且加熱至回流，同時(shí)攪拌2小時(shí)。然后用濃氨水處理該反應(yīng)且在回流狀態(tài)下加熱過夜。然后通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮該反應(yīng)并且使用UV啟動(dòng)的HPLC純化而得到8.4mg(收率27％)[10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-脲；[M+H]+C24H20F2N3O的LC/MS的理論值404.2，實(shí)測(cè)值404.0。
實(shí)施例98 [7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基]-脲
步驟17-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基胺
按照與實(shí)施例1步驟3類似的方式，通過使5-氨基-茚滿-1-酮(商購)和(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例78，步驟)反應(yīng)制備標(biāo)題物質(zhì)，收率為17％；[M+H]+C25H23FN2的LC/MS的理論值371.2，實(shí)測(cè)值371.2。
步驟2向7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基胺(25mg，0.068mmol，1eq.)在1∶1v/v AcOH/H2O混合物(1mL)中的混懸液中加入NaOCN(4.4mg，0.068mmol，1eq.)在H2O(1mL)中的溶液。將所得混合物在25℃下攪拌2小時(shí)，此時(shí)再向反應(yīng)中添加NaOCN(4.4mg，0.068mmol，1eq.)。將所得混合物在25℃下再攪拌12小時(shí)。用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且用H2O、飽和NaHCO3水溶液和飽和NaCl水溶液依次洗滌。用Na2SO4干燥所得有機(jī)溶液。在濃縮后，通過制備型RP LC-MS純化粗產(chǎn)物而得到[7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基]-脲(10mg，收率36％)1H NMR(丙酮-d6)δ11.09(s，1H)，8.26(s，1H)，7.89(s，1H)，7.59(d，2H)，7.58(s，1H)，7.48(d，1H)，7.42(d，1H)，7.33(d，2H)，7.18(dd，1H)，5.53(bs)，3.72(s，2H)，2.72(t，2H)，1.72-1.64(m，2H)，1.49-1.36(m，2H)，0.96(t，3H)；[M+H]+C26H24FN3O的LC/MS的理論值414.2，實(shí)測(cè)值414.2。
實(shí)施例99 N-[9-(4-丁基-苯基)-10-氟-5，1-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-羰基]-甲磺酰胺
步驟1N-(5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-羰基)-甲磺酰胺
用K2CO3(36.5mg，0.26mmol)、KOH粉末(32.9mg，0.82mmol)和硫酸氫四丁基銨(2.6mg，0.008mmol)依次處理5-氧代-5，6，7，8-四氫-萘-2-甲酰胺(實(shí)施例81，步驟1)(29.4mg，0.16mmol)在四氫呋喃(71μL)中的樣品。將該反應(yīng)升溫至55℃并且劇烈攪拌20分鐘。然后在20分鐘內(nèi)加入甲磺酰氯(23.2mg，0.20mmol)在四氫呋喃(140μL)中的溶液并且將該反應(yīng)在55℃下攪拌過夜。然后將該反應(yīng)冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋并且用水萃取兩次。然后用MgSO4干燥有機(jī)相，過濾并且除去溶劑。在不進(jìn)行純化時(shí)獲得磺酰胺粗品(35.5mg收率86％)；[M+H]+C12H13NO4S的LC/MS的理論值268.1，實(shí)測(cè)值268.1。
步驟2按照與實(shí)施例1步驟3類似的方式，通過使5-氨基-茚滿-1-酮(商購)和(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例78，步驟1)反應(yīng)制備標(biāo)題物質(zhì)；[M+H]+C28H28FN2O3S計(jì)算的LC/MS的理論值491.6，實(shí)測(cè)值491.1。
實(shí)施例100 3-乙酰氨基-7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸
步驟16-硝基-5-乙烯基-茚滿-1-酮
將5-溴-6-硝基-茚滿-1-酮(58mg，0.23mmol)(J.Med.Chem.2003，46，399-408)、乙烯基硼酸二丁酯(74μL，0.34mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(7.8mg，0.0011mmol)和Na2CO3(167mg，1.57mmol)在4∶1 THF/H2O(1.4mL/360μL)中的溶液加熱至80℃下過夜。用硅藻土過濾粗反應(yīng)并且用EtOAC萃取。干燥有機(jī)相(MgSO4)，過濾并且濃縮。對(duì)粗物質(zhì)進(jìn)行色譜(SiO2)而得到36mg(79％)6-硝基-5-乙烯基-茚滿-1-酮；[M+H]+C11H9NO2的LC/MS的理論值204.1，實(shí)測(cè)值204.1。
步驟26-硝基-1-氧代-茚滿-5-甲酸
將6-硝基-5-乙烯基-茚滿-1-酮(36mg，0.18mmol)、RuCl3·H2O(1.8mg，8.9μmol)和NaIO4(152mg，0.713mmol在CCl4(300μL)、H2O(445μL)和乙腈(300μL)的混合物中的溶液加熱至50℃下2小時(shí)且然后冷卻至RT并且用硅藻土過濾且在真空中濃縮。通過質(zhì)量啟動(dòng)的HPLC純化甲酸粗品而得到26mg(66％)6-硝基-1-氧代-茚滿-5-甲酸；[M+H]+C10H7NO5的LC/MS的理論值222.0，實(shí)測(cè)值222.0。
步驟37-(4-丁基-苯基)-6-氟-3-硝基-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸
給可密封的小瓶中加入6-硝基-1-氧代-茚滿-5-甲酸(26mg，0.12mmol)、(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例78，步驟1)(25mg，0.12mmol)、氯化鋅(II)(24mg，0.18mmol)和醋酸(1.5mL)，密封并且加熱至105℃過夜。然后將該反應(yīng)冷卻至RT，在真空中濃縮并且通過UV-啟動(dòng)的HPLC純化而得到22 mg(41％)的7-(4-丁基-苯基)-6-氟-3-硝基-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸；[M+H]+C26H21FN2O4的LC/MS的理論值445.1，實(shí)測(cè)值445.1。
步驟4和5用10％Pd/C-DeGussa型(5mg)處理7-(4-丁基-苯基)-6-氟-3-硝基-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸(20mg，0.055mmol)在乙醇(2mL)和THF(1mL)中的溶液并且進(jìn)行H2(g)發(fā)泡15分鐘。將該反應(yīng)維持在H2(g)氣環(huán)境中過夜且然后用硅藻土過濾并且濃縮。[M+H]+C26H23FN2O2的LC/MS的理論值415.2，實(shí)測(cè)值415.2。用THF(1mL)稀釋粗氨基-化合物，冷卻至0℃并且用Et3N(16μL，0.12mmol)隨后用乙酐(11μL，0.12mmol)處理。將該反應(yīng)溫?zé)嶂罵T，攪拌過夜并且濃縮且通過UV-啟動(dòng)的HPLC純化而得到4.4mg(17％)的所需標(biāo)題化合物；1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ12.43(s，1H)，11.45(s，1H)，8.92(s，1H)，8.14(s，1H)，7.54(m，2H)，7.50(d，J＝8.2 Hz，1H)，7.31(d，J＝8.1Hz，2H)，7.17(dd，J＝8.0，7.3Hz，1H)，3.77(s，2H)，2.64(t，J＝7.6Hz，2H)，2.20(s，3H)，1.61(m，2H)，1.35(m，2H)，0.93(t，J＝7.3Hz，3H)；[M+H]+C28H28FN2O3S的LC/MS的理論值491.2，實(shí)測(cè)值491. 實(shí)施例101 10-(4-丁基-苯基)-11-氟-5，6，7，12-四氫-苯并[6，7]環(huán)庚[1，2-b]吲哚-3-甲酸
按照與實(shí)施例1步驟3類似的方式，通過使5-氧代-6，7，8，9-四氫-5H-苯并環(huán)庚烯-2-甲酸(J.Org.Chem.1962，27(1)，p 70-76)和(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(如實(shí)施例69步驟1和2中所述制備，但使用4-正-丁基苯基硼酸作為偶聯(lián)配偶體)反應(yīng)制備標(biāo)題化物質(zhì)，收率為34％，但通過反相質(zhì)量啟動(dòng)的HPLC進(jìn)行純化1H NMR(丙酮-d6) 10.72(bs，1H)，8.09(d，1H)，7.99(d，1H)，7.92(s，1H)，7.58(d，2H)，7.45(d，1H)，7.31(d，2H)，7.17(dd，1H)，3.18(t，2H)，3.10-3.04(m，2H)，2.72(t，2H)，2.22-2.14(m，2H)，1.73-1.64(m，2H)，1.45-1.38(m，2H)，0.96(t，3H)；[M+H]+C28H26FNO2的LC/MS的理論值428.2，實(shí)測(cè)值428.2。
實(shí)施例102 9-(4-丁基-苯基)-5，5-二氧代-6，11-二氫-5H-516-硫雜-11-氮雜-苯并[a]芴-3-甲酸
步驟11，1，4-三氧代-116-硫代色滿-7-甲酸甲酯
用30％過氧化氫(30mg，0.26mmol)在乙酸(1mL)中的溶液處理已知的(US2003158413)4-氧代-硫代色滿-7-甲酸甲酯(24.2mg，0.11mmol)的樣品。然后將該反應(yīng)加熱至100℃下1.5小時(shí)并且除去溶劑而得到標(biāo)題物質(zhì)，但不純化，而照此進(jìn)行[M+H]+C11H10O5S的LC/MS的理論值254.0，實(shí)測(cè)值254.1。
步驟2用(4′-丁基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例70，步驟2)(39mg，0.142mmol)和氯化鋅(37mg，0.27mmol)和乙酸(1mL)處理來自步驟1的粗物質(zhì)并且加熱至105℃下過夜。冷卻后，用乙酸乙酯和水處理該反應(yīng)。存在不溶的固體，但將其懸浮于乙酸乙酯中。用水將有機(jī)相洗滌一次以上且然后與固體一起導(dǎo)流入燒瓶。除去溶劑并且將粗混合物溶于熱二烷(5mL)并且用乙醇(3mL)、水(1mL)和過量的氫氧化鋰(～100mg)處理。將該反應(yīng)在70℃下攪拌2小時(shí)，冷卻至室溫并且用1M HCl酸化至酸性。除去溶劑并且使該反應(yīng)分配在乙酸乙酯與水之間。棄去水相。用水將有機(jī)相萃取3次并且棄去。用濃HCl酸化堿性萃取物并且用乙酸乙酯萃取兩次。用MgSO4干燥合并的有機(jī)相并且除去溶劑。通過UV啟動(dòng)的反相HPLC純化殘余物而得到標(biāo)題物質(zhì)，為白色固體。該物質(zhì)中污染有～15％的7-(4-丁基-苯基)-5，5-二氧代-6，11-二氫-5H-5l6-硫雜-11-氮雜-苯并[a]芴-3-甲酸。僅對(duì)標(biāo)題物質(zhì)給出NMR數(shù)據(jù)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.30(s，1H)，8.39-8.31(m，2H)，8.15-8.10(m，1H)，7.82-7.77(m，1H)，7.68(s，1H)，7.64(d，J＝8.1Hz，1H)，7.47-7.44(m，1H)，7.36(s，1H)，7.31(d，J＝8.1Hz，1H)，5.12(s，2H)，2.64(dd，J＝7.6，7.6Hz，2H)，1.64-1.56(m，2H)，1.39-1.29(m，2H)，0.93(dd，J＝7.3，7.3Hz，3H)；(M++H+)的ESIMS m/z理論值446.1，實(shí)測(cè)值446.1。
實(shí)施例103 10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-6，11-二氫-5-氧雜-1-氮雜苯并[a]芴-3-甲酰胺
步驟17-羥基-色滿-4-酮
向間苯二酚(5g，45.5mmol)和3-氯丙酸(5.2g，48mmol)的攪拌混合物中一次加入三氟甲磺酸(25g，166mmol)。將該混合物在室溫下攪拌10分鐘，然后在80℃下加熱30分鐘。將該反應(yīng)冷卻至室溫并且用DCM(200mL)稀釋該混合物。將該溶液緩慢傾入冰水(200mL)。分離雙-層并且用DCM(2x40mL)萃取水相。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相并且用用硫酸鈉干燥。在蒸發(fā)溶劑并且照此進(jìn)行后獲得3-氯-1-(2，4-二羥基-苯基)-丙-1-酮粗品，為橙色固體(6.9g)。
在0℃下將3-氯-1-(2，4-二羥基-苯基)-丙-1-酮(6.9g)溶于氫氧化鈉(2N，100mL)。將該溶液攪拌2小時(shí)并且用HCl(5N)酸化至pH＝3。用乙酸乙酯(3x50mL)萃取該混合物。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相并且用硫酸鈉干燥。在蒸發(fā)溶劑后獲得7-羥基-色滿-4-酮，為黃色固體1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.70(d，1H，J＝8.8Hz)，6.47(dd，1H，J＝2.4，8.8Hz)，6.30(d，1H，J＝2.0Hz)，4.47(t，2H，J＝6.4Hz)，2.70(t，2H，J＝6.4Hz)。
步驟24-氧代-色滿-7-腈
按照與實(shí)施例81步驟4和5中所述相同的轉(zhuǎn)化順序獲得4-氧代-色滿-7-腈，為白色固體1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.98(d，1H，J＝8Hz)，7.30(s，1H)，7.27(d，1H，J＝8Hz)，4.60(t，1H，J＝6.4Hz)，2.88(t，1H，J＝6.4Hz)。
步驟3使4-氧代-色滿-7-腈和(4′-氟-3′-甲基-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(如實(shí)施例70步驟1和2中所述制備，但使用3-甲基-4-氟苯基硼酸作為偶聯(lián)配偶體)如實(shí)施例1步驟3中所述一起反應(yīng)。然后使粗產(chǎn)物如實(shí)施例19步驟3進(jìn)行水解而得到10-氟-9-(4-氟-3-甲基-苯基)-6，11-二氫-5-氧雜-11-氮雜苯并[a]芴-3-甲酰胺，為黃色固體1H NMR(400MHz，MeOD)δ 7.68(d，1H，J＝8Hz)，7.51(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.48-7.39(m，2H)，7.29(d，1H，J＝8Hz)，7.14-7.08(m，2H)，5.64(s，2H)，2.33(d，3H，J＝1.6Hz)。ESMS m/z390.1(M+H+)。
實(shí)施例104 N-[7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基]-甲磺酰胺
按照與實(shí)施例92中類似的方式制備標(biāo)題物質(zhì)，但在步驟2中，肼為(4′-丁基-2-氟-聯(lián)苯-3-基)-肼鹽酸鹽(實(shí)施例78，步驟1)1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ11.17(bs，1H)，8.59(bs，1H)，7.69(d，1H)，7.62(s，1H)，7.58(d，2H)，7.46(d，1H)，7.36(d，1H)，7.32(d，2H)，7.19(dd，1H)，3.82(s，2H)，3.05(s，3H)，2.69(t，2H)，1.71-1.62(m，2H)，1.50-1.40(m，2H)，0.98(t，3H)；ESMS m/z449.2(M+H+)。
實(shí)施例105 N-[9-(4-丁基-苯基)-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-2-羥基-乙酰胺
按照與實(shí)施例95中類似的方式使用合適的原料制備標(biāo)題物質(zhì)ESMSm/z 443.2(M+H+)。
實(shí)施例106 N-[9-(4-丁基-苯基)-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-甲磺酰胺
按照與實(shí)施例92中類似的方式使用合適的原料制備標(biāo)題物質(zhì)ESMSm/z 463.2(M+H+)。
實(shí)施例107 N-[7-(4-二乙氨基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基]-乙酰胺
步驟1二乙基-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-苯基]-胺
將4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-苯胺(500mg，2.28mmol，1eq.)溶于無水DMF(5mL)并且冷卻至0℃。加入NaH(60％分散液，201mg，5.02mmol，2.2eq.)并且將所得混合物在0℃下攪拌30分鐘，此后向該反應(yīng)混合物中滴加碘乙烷(0.38mL，2.1eq)。一旦這一添加完成，就將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?天。用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且依次用H2O(5x)和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液并且濃縮而得到二乙基-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-苯基]-胺，為黃褐色粘性固體ESMS m/z 276.1(M+H+)。
步驟2將來自步驟1的產(chǎn)物(200mg，0.7268mmol)、3-溴-2-氟-苯胺(165mg，0.7268mmol，1eq.)、Na2CO3(616mg，5.814mmol.8eq.)和Pd(PPh3)4(84mg，0.1eq.)部分溶于DMF(10mL)和H2O(2mL)混合物中。使N2氣體通過該反應(yīng)混合物發(fā)泡5分鐘。將所得混合物在密封試管內(nèi)和微波照射下加熱至150℃下10分鐘。用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且依次用H2O、1N NaOH(aq)和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液并且濃縮。使用硅膠純化所得殘余物(2∶1己烷/EtOAc)而得到苯胺產(chǎn)物，為黃色油狀物。ESMS m/z 259.1(M+H+)。
步驟3-4按照與實(shí)施例1步驟2和3類似的方式，使用來自實(shí)施例107步驟2的產(chǎn)物和商購的N-(1-氧代-茚滿-5-基)-乙酰胺制備標(biāo)題物質(zhì)1HNMR(400MHz，CD3OD，TFA鹽)δ7.89(d，2H)，7.81(s，1H)，7.61(d，2H)，7.56-7.48(m，2H)，7.42(d，1H)，7.13(dd，1H)，3.78-3.65(m，6H)，2.12(s，3H)，1.18(t，6H)；ESMS m/z 428.2(M+H+)。
實(shí)施例108-124 通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例17、30、57、75和/或107的方法獲得下列表7中鑒定的化合物。
表7






實(shí)施例125-136 通過使用合適的甲酸作為原料(通過實(shí)施例30、57、75、107和/或143中所述的方法獲得)重復(fù)實(shí)施例97中所述的方法獲得下列表8中鑒定的化合物。
表8




實(shí)施例137-141 通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例30、92和/或107中所述的方法獲得下列表9中鑒定的化合物。
表9


實(shí)施例142 7-(4-丁基-苯基)-6-氟-10，10-二甲基-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸
將實(shí)施例84(10mg，0.023mmol)溶于甲醇(2mL)和HCl(5N，2mL)的混合物。將該溶液在95℃下加熱過夜。用水稀釋該混合物并且用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。濃縮合并的有機(jī)萃取物。用乙醇(1mL)和水(0.3mL)隨后用LiOH(3mg，0.115mmol)處理殘余物。然后將該混合物在120℃下和微波照射中加熱7分鐘。過濾該混合物并且通過反相HPLC純化而得到標(biāo)題化合物，為黃色固體。[M+H]+C28H27FNO2的LC/MS的理論值428.2，實(shí)測(cè)值428.2。
實(shí)施例143 6-氟-10，10-二甲基-7-(4-哌啶-1-基-苯基)-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸
通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例82、107和142中所述的方法獲得標(biāo)題化合物，為黃褐色固體1H NMR(400MHz，CD3OD，HCl鹽)δ8.12(s，1H)，8.06(d，1H)，7.89(d，2H)，7.74(d，2H)，7.65(d，1H)，7.56(d，1H)，7.19(dd，1H)，3.80-3.70(m，4H)，2.12-2.06(m，4H)，1.92-1.78(m，2H)，1.66(s，6H)；ESMS m/z 455.2(M+H+)。
實(shí)施例144 N-[10-氟-5，5-二甲基-9-(4-哌啶-1-基-苯基)-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-甲磺酰胺
通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例82(步驟1和2)中所述的方法獲得標(biāo)題化合物，為黃褐色固體1H NMR(400MHz，DMSO-d6，HCl鹽)δ11.85(s，1H)，9.79(s，1H)，7.84(d，2H)，7.68(bs，2H)，7.36(d，2H)，7.29(d，2H)，7.15(m，1H)，7.10(m，1H)，3.56(s，2H)，3.51-3.45(bs，4H)，3.03(s，3H)，2.84(s，2H)，1.93-1.82(bs，4H)，1.72-1.85(bs，2H)，1.29(s，6H)；ESMS m/z518.1(M+H+)。
實(shí)施例145 N-(7-苯并唑-2-基-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基)-乙酰胺
通過使用合適的原料(如WO03/074516中所述制備的3-苯并唑-2-基-苯胺)重復(fù)實(shí)施例1(步驟2和3)中所述的方法獲得標(biāo)題化合物，為固體1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.01(s，1H)，10.06(s，1H)，8.27(s，1H)，7.92(m，2H)，7.90(m，1H)，7.77(m，2H)，7.71(d，J＝8.4Hz，1H)，7.59(s，2H)，7.39(m，2H)，3.76(s，2H)，2.09(s，3H)；ESMS m/z 380.2(M+H+)。
實(shí)施例146 [9-(4-丁基-苯基)-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-脲
通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例98中所述的方法獲得標(biāo)題化合物，為黃褐色固體1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ10.84(bs，1H)，8.16(bs，1H)，7.68(d，1H)，7.53(d，2H)，7.48(d，1H)，7.45(s，1H)，7.33(d，1H)，7.29(d，2H)，7.11(dd，1H)，5.50(bs，2H)，3.08-2.90(m，4H)，2.69(t，2H)，1.69-1.60(m，2H)，1.45-1.33(m，2H)，0.98(t，3H)；ESMS m/z 428.2(M+H+)。
實(shí)施例147 3-氨基-7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-甲酸
通過使用反相HPLC純化實(shí)施例100步驟4的產(chǎn)物獲得標(biāo)題物，為黃褐色固體1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ11.18(s，1H)，8.00(s，1H)，7.55(dd，2H)，7.50(d，1H)，7.32(d，2H)，7.22-7.18(m，1H)，7.10(s，1H)，3.71(s，2H)，2.69(t，2H)，1.71-1.63(m，2H)，1.44-1.34(m，2H)，0.95(t，3H)；ESMS m/z415.2(M+H+)。
實(shí)施例148 7-(4-丁基-苯基)-6-氟-2-四唑-1-基-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚
將7-(4-丁基-苯基)-6-氟-5，10-二氫-茚并[1，2-b]吲哚-2-基胺(實(shí)施例98，步驟1，60mg，0.1620mmol)溶于AcOH(1.6mL)。在室溫下向原料溶液中依次加入原甲酸三乙酯(38mg，0.2591mmol，1.6eq.)和疊氮化鈉(15mg，0.2429mmol，1.5eq.)。將所得反應(yīng)混合物加熱至80℃下3.5小時(shí)。在冷卻至室溫后，用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且依次用H2O、1N HCl(水溶液)和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液并且濃縮。通過反相HPLC純化所得殘余物而得到標(biāo)題化合物，為黃褐色固體1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ11.31(bs，1H)，9.77(s，1H)，8.15(s，1H)，7.97(s，2H)，7.62-7.52(m，3H)，7.38(d，2H)，7.21(dd，1H)，3.99(s，2H)，2.69(t，2H)，1.72-1.63(m，2H)，1.50-1.40(m，2H)，0.99(t，3H)；ESMS m/z 424.1(M+H+)。
實(shí)施例149 3-[9-(4-丁基-苯基)-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-基]-4H-[1，2，4]二唑-5-酮
步驟1將9-(4-丁基-苯基)-10-氟-5，11-二氫-6H-苯并[a]咔唑-3-腈(通過使用合適的原料重復(fù)實(shí)施例78中所述方法獲得，76mg，0.1927mmol，1eq.)、羥基胺HCl鹽(27mg，0.3853mmol，2eq.)和Na2CO3(61mg，0.5780mmol，3eq.)加入到EtOH(3.5mL)、H2O(1.0mL)和1N NaOH(0.35mL)中。使N2氣通過該反應(yīng)混合物發(fā)泡5分鐘。將該反應(yīng)在80℃下密封試管內(nèi)加熱過夜。將該反應(yīng)濃縮至干并且取前面的粗產(chǎn)物在不純化的情況下用于下一步ESMS m/z 428.1(M+H+)。
步驟2將來自步驟1的粗產(chǎn)物和吡啶(12mg，0.15mmol)溶于無水THF(2mL)并且冷卻至0℃。滴加氯甲酸2-乙基己基酯(0.03mL，0.15mmol)。將所得反應(yīng)混合物在0℃下攪拌45分鐘。用EtOAc稀釋該反應(yīng)并且依次用H2O和飽和NaCl水溶液洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)溶液并且濃縮。用硅膠純化所得殘余物(2∶1己烷/EtOAc)而得到?；a(chǎn)物，為米色固體。
步驟3將來自步驟2的產(chǎn)物(23mg，0.04mmol)溶于無水甲苯(2mL)。使N2氣通過該反應(yīng)混合物發(fā)泡5分鐘。將該反應(yīng)在125℃下的密封試管內(nèi)加熱過夜。將該反應(yīng)混合物濃縮至干并且通過反相HPLC純化而得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體ESMS m/z 454.2(M+H+)。
測(cè)定 檢測(cè)本發(fā)明的化合物以便測(cè)定其作為TPO模擬物在體外使用人TPO受體(TPO-R)轉(zhuǎn)染的鼠BaF3細(xì)胞系的增殖測(cè)定中的功效 螢光素酶報(bào)道分子測(cè)定 洗滌Ba/F3-TpoR細(xì)胞并且重新懸浮于以8x104個(gè)細(xì)胞/mL補(bǔ)充了1％或20％FBS、MS、HS或(人血清清蛋白+α1酸糖蛋白)、1％Pen-Strep-Glu和1mM或25μM ZnSO4的RPMI-1640中并且以50mL/孔配入384-孔平板過夜饑餓(18-20小時(shí))。在第2天，在37℃、5％CO2下用0.5mL DMSO、化合物或rhTpo(30ng/mL)將饑餓細(xì)胞處理7小時(shí)。將在水中稀釋至60％的Perkin Elmer Britelite(25mL)加入到各孔中并且在幾分鐘后，在CLIPR上讀取平板以便記錄發(fā)光信號(hào)。
增殖測(cè)定 洗滌Ba/F3-TPO-R細(xì)胞并且重新懸浮于以8x104個(gè)細(xì)胞/mL補(bǔ)充了1％FBS，1％Pen-Strep-Glu和1mM或25μM ZnSO4的RPMI-1640中并且以50mL/孔配入384-孔平板過夜饑餓(18-20小時(shí))。在第2天，在37℃，5％CO2下用0.5mL DMSO、化合物或rhTpo(30ng/mL)將饑餓細(xì)胞處理48小時(shí)。將Alamar Blue試劑(在～7％終濃度下的3.5μL)加入到各孔中，將平板孵育4小時(shí)并且在Analyst GT上讀取以便記錄熒光信號(hào)。
CFU-Meg測(cè)定 將CD34+細(xì)胞和MegaCult-C試劑盒(StemCell Technologies，Inc.Vancouver，Canada)用于本測(cè)定。將CD34+細(xì)胞以104個(gè)細(xì)胞/載玻片與MegaCult-C膠原蛋白溶液按照制造商的方案混合。在以不同濃度添加TPO或本發(fā)明的化合物后，將載玻片在37℃、5％CO2下孵育12天，固定，染色人CFU-Meg并且使用倒置顯微鏡對(duì)集落定量。
游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的式I的化合物表現(xiàn)出有價(jià)值的藥理學(xué)特性，例如本申請(qǐng)中所述的體外試驗(yàn)中所示。本發(fā)明的化合物優(yōu)選表現(xiàn)出TPO模擬物活性，其中IC50在1x10-9-1x10-5M的范圍，優(yōu)選低于500nM，更優(yōu)選低于250nM。式I的化合物表現(xiàn)出相對(duì)于TPO 25％-150％范圍的有效性。
應(yīng)理解本文所述的實(shí)施例和實(shí)施方案僅用于解釋目的，并且可以提示本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)其進(jìn)行各種變型或改變并且它們均包括在本申請(qǐng)的實(shí)質(zhì)和范圍內(nèi)以及待批權(quán)利要求范圍內(nèi)。為所有目的而將本文引述的全部公開文獻(xiàn)、專利和專利申請(qǐng)引入本文作為參考。
權(quán)利要求
1.式I的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑合物和異構(gòu)體
其中
n選自0、1、2和3；
m選自0和1；
Y選自CR9R10、NR9、O和S(O)2；其中R9和R10獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基；
R1選自氫、鹵素、氰基、硝基、NR9R10、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C3-12環(huán)烷基和C3-8雜環(huán)烷基；其中R9和R10獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基；
R2和R3獨(dú)立地選自鹵素、氰基、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C6-10芳基、C1-10雜芳基、C3-8雜環(huán)烷基和C3-12環(huán)烷基；其中R2或R3的任意烷基、鏈烯基、炔基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、-NR12R13、-XOR13、-S(O)2R13、C3-12環(huán)烷基、C3-8雜環(huán)烷基、C6-10芳基和C1-10雜芳基；其中X為鍵或C1-6亞烷基且R12和R13獨(dú)立地選自C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基和鹵素-取代的-C1-6烷氧基；其中R2和R3的任意芳基、雜芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)烷基取代基任選進(jìn)一步被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基和鹵素-取代的-C1-6烷氧基；
R4選自氫、鹵素、氰基、硝基、XNR9R10、OXNR9R10、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C3-12環(huán)烷基、C3-8雜環(huán)烷基、C6-10芳基和C1-10雜芳基；其中X為鍵或C1-6亞烷基且R9和R10獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基；
R5、R6和R7獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、C3-8雜環(huán)烷基、C1-10雜芳基、C6-10芳基、OS(O)2R11、NR11S(O)2R14、NR11C(O)R14、NR11C(O)NR11R14、NR11C(O)C(O)OR14、NR11C(O)OR14、OC(O)NR11R14、C(O)OR11、C(O)R15、NR11R14、NR11R15和C(O)NR11R14；其中R11和R14獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基和被NR9R10取代的C1-6烷基；R15為任選被取代1-3個(gè)C1-6烷基取代的C3-8雜環(huán)烷基；其中R5、R6和R7的任意芳基、雜環(huán)烷基或雜芳基可以任選進(jìn)一步被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、羥基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、OS(O)2R11、NR11S(O)2R14、NR11C(O)R14、NR11C(O)NR11R14、NR11C(O)C(O)OR14、NR11C(O)OR14、OC(O)NR11R14、C(O)OR11、C(O)R15、NR11R14、NR11R15和C(O)NR11R14；其中R11、R14和R15如上述所定義；
R8選自氫、鹵素、氰基、C1-6烷氧基、鹵素-取代的-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基和C1-6烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中
n選自0、1和2；
Y選自CR9R10、O和S(O)2；其中R9和R10獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基；
R1選自氫、C1-6烷基和鹵素-取代的-C1-6烷基；
R2選自鹵素、C6-10芳基、C1-6烷基和C2-6鏈烯基；其中R2的任意芳基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、C1-6烷基和C1-6烷氧基的基團(tuán)取代；
R3選自鹵素、羥基、氰基、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、鹵素-取代的-C1-6烷基、C6-10芳基和C1-10雜芳基；其中R3的任意芳基或雜芳基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷基、鹵素-取代的-C1-6烷氧基、-NR12R13、-XOR13、-S(O)2R13和C3-8雜環(huán)烷基；其中X為鍵或C1-6亞烷基且R12和R13獨(dú)立地選自氫和C1-6烷基；
R4選自氫和鹵素；
R5選自氫和C1-6烷基；
R6選自C1-10雜芳基、OS(O)2R11、NR11S(O)2R14、NR11C(O)R14、NR11C(O)OR14、C(O)OR11、R15、NR11R14和C(O)NR11R14；其中R11和R14獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、羥基-C1-6烷基和鹵素-取代的-C1-6烷基；R15為任選被1-3個(gè)C1-6烷基取代的C3-8雜環(huán)烷基；
R7選自氫、羥基、NR11S(O)2R14和NR11R14；其中R11和R14如上述所定義；
R8選自氫和C1-6烷基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中n選自0和1；且Y選自CR9R10、O和S(O)2；其中R9和R10獨(dú)立地選自氫和甲基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R1選自氫和三氟甲基；且R2選自氫、溴、氯、碘、烯丙基、三氟甲基、和任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自甲基和乙基的基團(tuán)取代的苯基。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R3選自氫、溴、氯、氰基、三氟甲基、烯丙基、嘧啶基、吡啶基、哌啶基、苯并唑基、噻唑基和苯基；其中所述的嘧啶基、噻唑基和苯基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)取代氯、氟、甲基、乙基、丙基、丁基、異-丁基、叔-丁基、異丙氧基、丙氧基、甲氧基、二甲基-氨基、甲氧基-甲基、羥基、環(huán)己基、吡啶基、甲基磺?；?、乙基磺酰基、嗎啉代、二乙基氨基、吡嗪基、哌啶基、苯基、三氟甲基、己烷基和氰基-甲基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R4選自氫、氟和溴；且R5和R8均為氫。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R6選自氨基、脲基、羥基-乙酰基-氨基、羧基、甲氧基羰基、甲氧基羰基-氨基、4H-[1，2，4]二唑-5-酮、四唑基、甲基-氨基羰基、二甲基-氨基羰基、甲基-羰基-氨基、嗎啉代-羰基、甲基-哌嗪基-羰基、氰基、四唑基、氨基-羰基、甲基-磺?；?氨基、甲基-磺?；?氨基-羰基、叔-丁氧基-羰基-氨基、羥基-羰基-甲基-氨基、羥基-甲基-羰基-氨基、草酰基-氨基和三氟甲基-磺酰氧基；且R7選自氫、羥基、甲基-羰基-氨基、氨基和氨基-羰基。
8.藥物組合物，其包含治療有效量的權(quán)利要求1的化合物與藥學(xué)上可接受的賦形劑。
9.治療動(dòng)物疾病的方法，其中血小板水平升高可以抑制或改善所述疾病或病癥的病理學(xué)和/或癥狀學(xué)情況，該方法包含對(duì)所述的動(dòng)物施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
10.權(quán)利要求1的化合物在制備用于治療動(dòng)物疾病的藥物中的用途，其中所述疾病或病癥的病理學(xué)和/或癥狀學(xué)由血小板水平的下降引起。
全文摘要
本發(fā)明提供了一類新的化合物、包含這類化合物的藥物組合物和使用這類化合物治療或預(yù)防與異常或失調(diào)的TPO活性相關(guān)的疾病或障礙特別是涉及血小板減少的疾病或障礙的方法。
文檔編號(hào)C07D403/04GK101213190SQ200680024338
公開日2008年7月2日 申請(qǐng)日期2006年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月14日
發(fā)明者P·阿爾佩爾, T·馬爾希杰, A·查特吉, 陸文碩, D·穆特尼克, M·J·羅伯茨, 耘 賀 申請(qǐng)人:Irm責(zé)任有限公司