專利名稱：富含對映體的咪唑并吖庚因酮化合物的制作方法
富含對映體的咪唑并吖庚因酮化合物
背景技術(shù)：
在遇到抗原時，天然⑶4+T輔助細胞前體(Thp)細胞分化成兩種不同亞型，即1型 T輔助細胞(Thl)和2型T輔助細胞(Th2)。這些分化的Th細胞根據(jù)其不同的功能能力和 獨特的細胞因子特性來確定。特別地，Thl細胞產(chǎn)生干擾素Y、白細胞介素(IL)-2和腫瘤 壞死因子(TNF)-i3，它們活化巨噬細胞并且負責(zé)細胞介導(dǎo)的免疫和吞噬細胞-依賴性保護 應(yīng)答。相反，已知Th2細胞產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13，它們負責(zé)強抗體產(chǎn) 生、嗜酸性粒細胞活化和幾種巨噬細胞功能抑制，由此提供吞噬細胞-依賴性保護應(yīng)答。因 此，Thl和Th2細胞與不同免疫病理學(xué)應(yīng)答相關(guān)。此外，每型Th細胞的發(fā)育由不同細胞因子途徑介導(dǎo)。特別地，已經(jīng)證實IL-4促進 Th2分化并且同時阻斷Thl發(fā)育。相反，IL-12、IL-18和IFN- γ是對Thl細胞發(fā)育而言關(guān) 鍵的細胞因子。因此，細胞因子自身形成正和負反饋系統(tǒng)，其驅(qū)動Th極化和保持Thl與Th2 之間的平衡。Thl細胞涉及各種器官特異性自體免疫疾病、克羅恩病、幽門螺桿菌-誘導(dǎo)的消 化性潰瘍、急性腎同種異體移植物排斥和無法解釋的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)病機制。相反，變應(yīng) 原-特異性Th2應(yīng)答負責(zé)一般易感個體中的特應(yīng)性疾病。此外，Th2對仍然未知的抗原的 應(yīng)答在歐門綜合征(Omerm' s syndrome)、特發(fā)性肺纖維化和進行性系統(tǒng)性硬化中站優(yōu)勢。對研發(fā)用于治療各種與Thl/Th2細胞分化失衡相關(guān)的疾病的新治療方法仍然是 醫(yī)學(xué)上十分未得到滿足的需求。就許多這些疾病而言，目前可利用的治療選擇不足。因此， Thl/Th2范例為研發(fā)治療過敏性和自身免疫疾病的策略提供了基礎(chǔ)理論。發(fā)明概述本發(fā)明的第一個方面是式I的對映體純化合物(本文有時稱作"活性化合 物〃) 或更具體地說是式Ia或式Ib的對映體純化合物
其中R1 是 C1^ 烷基；X是亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞乙烯基、亞丙烯基或亞丁烯基；R5是苯基、吡咯基、苯并咪唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑并噻唑基、喹啉基、異喹啉 基、噴唑基、吡啶基、咪唑并吡啶基、噴哚基、苯并三唑基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻二唑 基、嘧啶基、苯并吡喃酮基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、批唑基、喹喔啉基或萘基，且 被0-5個取代基取代，所述取代基獨立地選自CV4烷基、CV3烷氧基、羥基、C"烷硫基、環(huán)丙 基、環(huán)丙基甲基、三氟甲氧基、5-甲基異噁唑基、吡唑基、芐氧基、乙?；?、(氰基烷基、 (苯基)C2_3烯基；和鹵素；R8是H、甲基、乙基、丙基、(C"烷氧基)(V3烷基、(C"烷硫基)Ci_3烷基、C"羥基 烷基、苯基、芐基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基和 噻吩基；其中R8被0-3個取代基取代，所述取代基獨立地選自甲基、乙基、鹵素、羥基、CV3 烷氧基、CV3烷硫基、(C1^3烷氧基)CV3烷基、(C1^3烷硫基)CV3烷基、Ch羥基烷基、((V3巰基 烷基)苯基、芐基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基和噻吩基； 且Ra、Rb和IT各自獨立地選自氫、羥基、甲氧基、芐氧基、氟、氯、氨基、甲基氨基、二甲 氨基和苯氧基；或選自Ra 和 Rb，以及 Rb 和 Re 的一對一起是-0- (CH2) _0_ 或-O-CH2-CH2-O-；或其藥學(xué)可接受的鹽、C1^6烷基酯或酰胺或C2_6烯基酯或酰胺。本發(fā)明的第二個方面是包含在藥學(xué)可接受載體中的如本文所述的活性化合物的 組合物。本發(fā)明的第三個方面是對需要的受試者治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的方法，包括對該受 試者給予治療有效量的如本文所述的活性化合物，本發(fā)明的第三個方面還有如本文所述的 活性化合物在制備治療有此需要的受試者的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的第四個方面是對需要的受試者治療多發(fā)性硬化的方法，包括對該受試者給予治療有效量的如本文所述的活性化合物，本發(fā)明的第四個方面還有如本文所述的活性 化合物在制備治療有此需要的受試者的多發(fā)性硬化的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的第五個方面是對需要的受試者治療自身免疫病的方法，包括對該受試者 給予治療有效量的如本文所述的活性化合物，本發(fā)明的第五個方面還有如本文所述的活性 化合物在制備治療有此需要的受試者的自身免疫病的藥物中的應(yīng)用，其中所述的自身免疫 病選自系統(tǒng)性紅斑狼瘡、1型糖尿病、銀屑病和動脈粥樣硬化。本文公開了本發(fā)明的其他方面并且更詳細討論如下。本發(fā)明一些實施方案的詳細描述A.定義本文所用的“對映體純“意指立體異構(gòu)體純化合物或化合物的組合物，該化合物 具有一個手性中心。本文所用的"立體異構(gòu)體純"意指化合物或其組合物，其包含化合物的一種立體 異構(gòu)體并且基本上不含該化合物的其他立體異構(gòu)體。例如，具有一個手性中心的化合物的 立體異構(gòu)體純組合物基本上不含該化合物的相反異構(gòu)體。具有兩個手性中心的化合物的立 體異構(gòu)體純組合物基本上不含該化合物的其他的非對映異構(gòu)體。典型的立體異構(gòu)體純化合 物包含大于約80%重量的該化合物的一種立體異構(gòu)體和小于約20%重量的該化合物的其 他立體異構(gòu)體，更優(yōu)選大于約90%重量的該化合物的一種立體異構(gòu)體和小于約10%重量 的該化合物的其他立體異構(gòu)體，甚至更優(yōu)選大于約95%重量的該化合物的一種立體異構(gòu)體 和小于約5%重量的該化合物的其他立體異構(gòu)體，且最優(yōu)選大于約97%重量的該化合物的 一種立體異構(gòu)體和小于約3%重量的該化合物的其他立體異構(gòu)體。例如，參見美國專利US 7，189，715。本文所用的“穩(wěn)定的”意指在接觸能夠?qū)ζ渖a(chǎn)、檢測和優(yōu)選其回收、純化和用于 本文公開的一種或多種目的的條件時基本上不改變的化合物。在一些實施方案中，穩(wěn)定的 化合物或化學(xué)上適宜的化合物是在保持在40°C以下的溫度下、在沒有濕度或其他化學(xué)反應(yīng) 條件的存在下時基本上至少1周不改變的化合物。本文所用的“烷基”或“烷基基團”意指完全飽和的直鏈(即非支鏈的)、支鏈或環(huán) 狀烴鏈。在一些實施方案中，烷基包含1-3個碳原子。在其他實施方案中，烷基包含2-3個 碳原子，在另外其他實施方案中，烷基包含1-2個碳原子。在一些實施方案中，術(shù)語“烷基” 或“烷基基團”意指環(huán)烷基、也稱作碳環(huán)。典型的Ch烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基和環(huán)丙基。本文所用的“烯基”或“烯基基團”意指具有一個或多個雙鍵的直鏈(即非支鏈 的)、支鏈或環(huán)狀烴鏈。在一些實施方案中，烯基包含2-4個碳原子。在其他實施方案中，烯 基包含3-4個碳原子，在另外其他實施方案中，烷基包含2-3個碳原子。根據(jù)另一個方面，術(shù) 語烯基意指具有兩個雙鍵的直鏈烴、也稱作“二烯”。在其他實施方案中，術(shù)語“烯基”或“烯 基基團”意指環(huán)烯基。典型的C2_4烯基包括-CH = CH2、-CH2CH = CH2 (也稱作烯丙基)、-CH =CHCH3> -CH2CH2CH = CH2, -CH2CH = CHCH3> -CH = CH2CH2CH3^ -CH = CH2CH = CH2 和環(huán)丁烯 基。本文所用的“烷氧基”或“烷硫基”意指如上述定義的通過氧(“烷氧基”)或硫 (“烷硫基”)原子鍵合主碳鏈的烷基。
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本文所用的“亞甲基”、亞乙基”和“亞丙基”分別意指二價部 分-CH2-、-CH2CH2-和-CH2CH2CH2-。本文所用的“亞乙烯基”、“亞丙烯基”和“亞丁烯基”意指二價部分-CH = CH-,-CH =CHCH2-^-CH2CH = CH-,-CH = CHCH2CH2-、-CH2CH = CH2CH2-和-CH2CH2CH = CH-，其中亞乙
烯基、亞丙烯基和亞丁烯基各自可以是順式或反式構(gòu)型。在一些實施方案中，亞乙烯基、亞 丙烯基或亞丁烯基可以是反式構(gòu)型?！皝喭榛币庵竿ㄟ^亞甲基的一或二烷基取代形成的二價烴基。在一些實施方案 中，亞烷基具有1-6個碳原子。在其他實施方案中，亞烷基具有2-6、1-5、2-4或1_3個碳原 子。這種基團包括亞丙基(CH3CH2CH =)、亞乙基(CH3CH =)和異亞丙基(CH3(CH3)CH =)寸寸?！皝喯┗币庵竿ㄟ^亞甲基的一或二烯基取代形成的具有一個或多個雙鍵的二價 烴基。在一些實施方案中，亞烯基具有2-6個碳原子。在其他實施方案中，亞烯基具有2-6、 2-5、2-4或2-3個碳原子。根據(jù)另一個方面，亞烯基具有兩個雙鍵。典型的亞烯基包括CH3CH =C =, CH2 = CHCH =、CH2 = CHCH2CH =禾口 CH2 = CHCH2CH = CHCH = "C1^6烷基酯或酰胺”意指Cp6烷基酯或Cp6烷基酰胺，其中CV6烷基各自如上述所 定義。這種Cp6烷基酯基具有式和_6烷基)oc( = o)-或和_6烷基)c( = 0)0-。這種Ch6 烷基酰胺基具有式(C1^6烷基)NHC ( = 0)-或(C1^6烷基)C ( = 0) NH-?！癈2_6烯基酯或酰胺”意指C2_6烯基酯或C2_6烯基酰胺，其中C2_6烯基如上述所定義。 這種c2_6烯基酯基具有式(c2_6烯基)OC ( = 0)-或(c2_6烯基)C ( = 0) ο-。這種c2_6烯基酰 胺具有(c2_6 烯基)NHC ( = 0)-或(C2_6 烯基)C ( = 0) NH-?！爸委?Treatment) ”、“治療(treat) ”和“治療(treating) ”意指逆轉(zhuǎn)、緩解、延緩 如本文所述的疾病或病癥發(fā)作、抑制其發(fā)展或預(yù)防它們。在一些實施方案中，可以在一種或 多種癥狀發(fā)生后給予治療。在其他實施方案中，可以在沒有癥狀存在下給予治療。例如，可 以在癥狀發(fā)作前對易感個體給予治療(例如根據(jù)癥狀史和/或根據(jù)遺傳或其他易感因素)。 還可以在癥狀消散后持續(xù)治療，例如以預(yù)防或延緩其復(fù)發(fā)。本文所用的“患者”或"受試者"意指動物受試者，優(yōu)選哺乳動物受試者(例如， 狗、貓、馬、牛、綿羊、山羊、猴子等)，特別是人體受試者(包括男性和女性受試者，并且包括 新生兒、嬰生、青少年、青年、成年和老年受試者)。本文所用的“藥學(xué)可接受的載體”意指不破壞與其一起配制的化合物的藥理學(xué)活 性的無毒性載體、佐劑或媒介物。可以用于本發(fā)明組合物的藥學(xué)可接受的載體、佐劑或媒介 物包括、但不限于離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白，例如人血清清蛋白、緩 沖物質(zhì)例如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽 或電解質(zhì)，例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態(tài)二氧化硅、三硅酸 鎂、聚乙烯吡咯烷酮、基于纖維素的物質(zhì)、聚乙二醇、環(huán)糊精、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯 類、蠟、聚乙烯_聚丙烯_嵌段共聚物、聚乙二醇和羊毛脂。除非另作陳述，否則用于描述本文所用的化學(xué)基團或部分的命名法遵循如下規(guī) 定，其中從左到右讀名稱，與分子其余部分的鍵合點位于該名稱的右手側(cè)。例如，基團“(CV3 烷氧基)(V3烷基”在烷基端上與分子的其余部分鍵合。其他實例包括甲氧基乙基，其中鍵 合點位于乙基端；和甲基氨基，其中鍵合點位于胺端。
除非另作陳述，否則可以理解從左到有讀鍵合，其中二價基團根據(jù)其化學(xué)式描述， 包括由“_”所示的兩個末端鍵部分。除非另作陳述，否則本文所示的結(jié)構(gòu)還意指包括該結(jié)構(gòu)的所有對映體、非對映異 構(gòu)體和幾何(或構(gòu)象))形式；例如，每一不對稱中心的R和S構(gòu)型、(Z)和(E)雙鍵異構(gòu)體 和(Z)和(E)構(gòu)象異構(gòu)體。因此，本發(fā)明化合物的單一立體異構(gòu)體和異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體 和幾何(或構(gòu)象)混合物屬于本發(fā)明的范圍。除非另作陳述，否則本發(fā)明化合物的所有互 變體形式屬于本發(fā)明的范圍。另外，除非另作陳述，否則本文所示的結(jié)構(gòu)還意指包括僅在一 個或多個富含同位素的原子的存在下不同的化合物。例如，具有本發(fā)明結(jié)構(gòu)、但氫被氘或氚 替代或碳被富含13C或14C的碳替代的化合物屬于本發(fā)明的范圍。這種化合物例如用作生 物試驗中的分析工具或探針。B.活性化合物如本文所述，本發(fā)明的活性化合物可以任選被一個或多個取代基取代，例如一般 如上述示例或以本發(fā)明的具體類型、亞類和種類為典型。一般而言，術(shù)語“取代的”意指在 指定結(jié)構(gòu)上的氫基被具體取代基替代。除非另作陳述，否則取代基可以在該基團各可取代 位置上帶有取代基，并且在任意指定結(jié)構(gòu)上的一個以上位置上可以被一個以上選自具體基 團的取代基取代時，該取代基在每一位置上可以相同或不同。如上所述，本發(fā)明提供了式I的對映體純化合物或活性化合物 或更具體地說是式Ia或式Ib的對映體純化合物或活性化合物
16 其中R1 是 C1^ 烷基；X是亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞乙烯基、亞丙烯基或亞丁烯基；R5是苯基、吡咯基、苯并咪唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑并噻唑基、喹啉基、異喹啉 基、噴唑基、吡啶基、咪唑并吡啶基、噴哚基、苯并三唑基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻二唑 基、嘧啶基、苯并吡喃酮基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、批唑基、喹喔啉基或萘基，且 被0-5個取代基取代，所述取代基獨立地選自CV4烷基、CV3烷氧基、羥基、C"烷硫基、環(huán)丙 基、環(huán)丙基甲基、三氟甲氧基、5-甲基異噁唑基、吡唑基、芐氧基、乙?；?氰基烷基、 (苯基)C2_3烯基；和鹵素；R8是H、甲基、乙基、丙基、(C"烷氧基)(V3烷基、(C"烷硫基)Ci_3烷基、C"羥基 烷基、苯基、芐基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基和 噻吩基；其中R8被0-3個取代基取代，所述取代基獨立地選自甲基、乙基、鹵素、羥基、CV3 烷氧基、CV3烷硫基、(C1^3烷氧基)CV3烷基、(C1^3烷硫基)CV3烷基、Ch羥基烷基、((V3巰基 烷基)苯基、芐基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基和噻吩基； 且Ra、Rb和IT各自獨立地選自氫、羥基、甲氧基、芐氧基、氟、氯、氨基、甲基氨基、二甲 氨基和苯氧基；或選自Ra 和 Rb，以及 Rb 和 R。的一對一起是 _0_ (CH2) _0_ 或-O-CH2-CH2-O-；或其藥學(xué)可接受的鹽、C1^6烷基酯或酰胺或C2_6烯基酯或酰胺。在上述的一些實施方案中R1 是 C"烷基;R5是苯基、吡咯基、苯并咪唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑并噻唑基、喹啉基、異喹啉 基、噴唑基、吡啶基、咪唑并吡啶基、噴哚基、苯并三唑基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻二唑 基、嘧啶基、苯并吡喃酮基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、批唑基、喹喔啉基或萘基，且被0-5個取代基取代，所述取代基獨立地選自CV4烷基、CV3烷氧基、羥基、C"烷硫基、環(huán)丙 基、環(huán)丙基甲基、三氟甲氧基、5-甲基異噁唑基、吡唑基、芐氧基、乙?；?、(氰基烷基、 (苯基)C2_3烯基；和鹵素；R8是甲基、乙基或丙基，其中R8被0-3個羥基取代基取代；X是亞甲基或亞乙基；且Ra、Rb和Re各自獨立地選自H和甲氧基；或其藥學(xué)可接受的鹽、C1^6烷基酯或酰胺或C2_6烯基酯或酰胺。在上述的一些實施方案中R1是甲基；R5是苯基、吡咯基或吡唑基，它們各自被甲基取代0、1或2次；R8是乙基；X是亞甲基；Ra和Re各自是甲氧基；且Rb 是 H ；或其藥學(xué)可接受的鹽。在上述具體實施方案中，化合物是 或其藥學(xué)可接受的鹽。本發(fā)明的活性化合物包括上述化合物的藥學(xué)可接受的鹽。藥學(xué)可接受的鹽包括 衍生自藥學(xué)可接受的無機和有機酸和堿的這樣的鹽。適宜的酸式鹽的實例包括乙酸鹽、己 二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、 樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡 庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、乙醇酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、 2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸煙、硝酸鹽、草 酸鹽、撲酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水 楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一酸鹽。其他酸例如草酸， 盡管自身并非藥學(xué)可接受的，但是可以用于制備用作得到本發(fā)明化合物及其藥學(xué)可接受的 酸加成鹽的中間體。衍生自適宜堿的鹽包括堿金屬(例如鈉和鉀)、堿土金屬(例如鎂)、銨和N+ (C1^4 烷基)4鹽。本發(fā)明還關(guān)注本文公開的化合物的含有任意堿性氮的基團的季銨化物。可以 通過這種季銨化得到水_或油-溶性或可分散的產(chǎn)物。C.藥物制劑可以將本發(fā)明的活性化合物與藥學(xué)可接受的載體合并，得到其藥物制劑。載體和 制劑的具體選擇取決于對指定組合物的特定給藥途徑。本發(fā)明的組合物可以適合于口服、胃腸外、吸入噴霧、局部、直腸、鼻部、口含、陰道 或植入儲器給藥等。優(yōu)選通過口服、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給予組合物。本發(fā)明組合物的無菌可 注射形式可以是水或油混懸液?？梢愿鶕?jù)本領(lǐng)域公知的技術(shù)、使用適宜的分散或濕潤劑和 混懸劑配制這些混懸液。無菌可注射制劑還可以是在無毒性胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑 中的無菌注射溶液或混懸液，例如在1，3_ 丁二醇中的溶液。在可以使用的可接受的媒介物 和溶劑中有水、林格液和等滲氯化鈉溶液。此外，固定油常用作溶劑或混懸介質(zhì)。就該目的而言，可以使用任意溫和的固定油，包括合成單酸甘油酯或二脂酸甘油 酯。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物用于制備注射劑，因為它們是天然藥學(xué)可接受的油 例如橄欖油或蓖麻油，尤其是其聚乙氧基化形式。這些油溶液或混懸液還可以包含長鏈醇稀釋劑或分散劑，例如羧甲基纖維素或常用于配制藥學(xué)可接受劑型包括乳劑和混懸液的類 似分散劑。其他常用的表面活性劑例如Tweer^Spans和其他常用于制備藥學(xué)可接受固體、 液體或其他劑型的乳化劑或生物利用度促進劑也可以用于制劑目的?？梢酝ㄟ^口服以任意口服可接受的劑型給予本發(fā)明藥學(xué)可接受的組合物包括、但 不限于膠囊、片劑、水性混懸液或溶液。就口服應(yīng)用的片劑而言，常用載體包括乳糖和玉米 淀粉。還典型地加入潤滑劑例如硬脂酸鎂。就以膠囊形式口服給藥而言，有用的稀釋劑包 括乳糖和干玉米淀粉。當(dāng)需要水性混懸液口服應(yīng)用時，將活性成分與乳化劑和混懸劑合并。 如果需要，還可以加入甜味劑、矯味劑或著色劑?；蛘撸梢砸杂糜谥蹦c給藥的栓劑形式給予本發(fā)明藥學(xué)可接受的組合物?？梢酝?過將活性劑與適宜的無刺激性賦形劑混合制備它們，所述適宜的無刺激性賦形劑在室溫是 固體、而在直腸溫度下是液體，且由此在直腸中熔化以釋放藥物。這種材料包括可可脂、蜂
蠟和聚乙二醇。還可以通過局部給予本發(fā)明藥學(xué)可接受的組合物，尤其是在治療靶標(biāo)包括通過局 部施用易于接近的區(qū)域或器官，包括眼、皮膚或下腸道的疾病。易于制備用于這些區(qū)域或器 官的各自的適宜的局部用制劑。可以用直腸栓劑(參見上文)或適宜的灌腸劑對下腸道進行局部施用。還可以適 宜局部透皮貼劑。就局部施用而言，可以將藥學(xué)可接受的組合物配制成適宜的軟膏劑，其包含混懸 于或溶于一種或多種載體的活性成分。用于本發(fā)明化合物局部給藥的載體包括、但不限于 礦物油、液體石蠟、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水。或者，可以 將藥學(xué)可接受的組合物配制成適宜的洗劑或霜劑，其包含混懸于或溶于一種或多種藥學(xué)可 接受載體的活性成分。適宜的載體包括、但不限于礦物油、硬脂山梨坦、聚山梨醇酯60、鯨蠟 酯蠟、棕櫚油、2辛基十二烷醇、芐醇和水。就眼部應(yīng)用而言，可以將藥學(xué)可接受的組合物配制成在等滲pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水 中的微粉化混懸液，或優(yōu)選配制成在等滲PH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中的溶液，它們含有或不含防 腐劑例如苯扎氯銨?；蛘撸脱鄄繎?yīng)用而言，可以將藥學(xué)可接受的組合物配制在軟膏劑例如 凡士林油中。還可以通過鼻部噴霧或吸入給予本發(fā)明藥學(xué)可接受的組合物。根據(jù)藥物制劑領(lǐng)域 眾所周知的技術(shù)制備這種組合物，并且可以使用芐醇或其他適宜防腐劑、提高生物利用度 的吸收促進劑、氟烴類和/或其他常用增溶劑或分散劑將其制備成在鹽水中的溶液。最優(yōu)選將本發(fā)明藥學(xué)可接受的組合物配制成可口服給藥。D.受試者和使用方法可以將本發(fā)明的活性化合物給予患者或受試者以治療各種不同的疾病，特別是患 有如下疾病的患者或受試者(A)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；(b)多發(fā)性硬化；(c)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(例如，參見 T-bet regulates IgG classswitching and pathogenic auto Ab production, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99(8) 5545-50 (2002)； Imbalance of Thl/Th2transcription factors in patients with lupus nephritis,
20Rheuma tology (Oxford)45(8) :951_7 (2006))；(d)l 型糖尿病(例如，參見 Identification of a novel type ldiabetes susceptibility gene, T-bet, Human Genetics 111 (3) :177-84(2004) ；T-bet controls autoaggressive CD81 ymphocyteresponse in type I diabetes, J. Exp. Med. 199(8) 1153-62(2004))；(e)銀屑病(例如，參見 J.Mol.Med 81(8) =471-80(2003))；禾口(f)動脈粥樣硬化(例如，參見 Proc.Natl.Acad. Sci.USA102(5) 1596-601(2005))?？梢匀我膺m宜的途徑對受試者給予活性化合物，包括口服、胃腸外、通過吸入噴 霧、局部、直腸、鼻部、口含、陰道或通過植入儲器。本文所用的術(shù)語"胃腸外"包括皮下、靜 脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)、損害內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。優(yōu)選通過 口服、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給予組合物?？梢砸灾委熡行Щ蛑委熒嫌行У牧繉⒒钚曰衔锝o予受試者?？梢耘c載體物質(zhì)合 并制備單一劑型的組合物的本發(fā)明化合物用量根據(jù)所治療宿主和具體給藥途徑的不同而 改變。優(yōu)選應(yīng)將組合物配制，以使可以將0. Ol-lOOmg/kg體重/天的抑制劑的劑量給予接 受這些組合物的患者。在一些實施方案中，本發(fā)明的組合物提供0.01mg-50mg的劑量。在 其他實施方案中，提供0. l-25mg或5mg-40mg的劑量。還應(yīng)理解，針對任何特定患者的具體劑量和治療方案取決于各種因素，包括所用 具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、膳食、給藥時間、排泄速率、藥物組合 和主治醫(yī)師的判斷以及所治療具體疾病的嚴(yán)重性。組合物中本發(fā)明化合物的用量還取決于 該組合物中的具體化合物。為了更完整地理解本文所述的本發(fā)明，給出了下列實施例。應(yīng)理解這些實施例僅 用于示例目的，而不視為以任何方式限定本發(fā)明。實施例1-41化合物的合成使用Biotage Corporation提供的Emrys Liberator儀器進行微波輔助的反應(yīng)。 使用BUchi旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或Genevac離心蒸發(fā)器除去溶劑。使用Waters自動純化儀器、應(yīng)用 正相或反相HPLC柱、在酸性、中性或堿性條件下進行分析型和制備型色譜法。如根據(jù)ELSD 色譜圖的面積百分比測定的，將化合物估計為> 90%純度。使用Varian 300MHz光譜儀記 錄NMR光譜。制備本發(fā)明化合物的一般方法和實驗如下所述。在一些情況中，特定化合物作為 實例描述。然而，可以理解在每種情況中，根據(jù)下述合成路線和實驗制備本發(fā)明的化合物。合成路線1H2O, MeOH
ER-811160 ER-811160。如上述合成路線1所示，將氰化鉀(22. 5g,0. 335mol)的水(50mL) 溶液在5分鐘內(nèi)滴加到I-Boc-哌啶酮(32. 48g，0. 1598mol)和碳酸銨(33. 8g，0. 351mol)
在水(90mL)和甲醇(IlOmL)中的溶液中。 應(yīng)燒瓶，將該混懸液在室溫攪拌72小時。 ER-811160 (37. Ig, 86% )，為無色固體。合成路線2
添加完成后不久灰白色沉淀開始形成。密封反 過濾得到的淡黃色沉淀，用少部分水洗滌，得到 ER-818039。如上述合成路線 2 所示，將 ER-811160 (30. Og, 0. lllmol)、3，5_ 二甲 氧基芐基溴(30. 9g，0. 134mol)和碳酸鉀(18. 5g，0. 134mol)在丙酮(555mL)中的混懸液在 回流狀態(tài)下加熱過夜。將該反應(yīng)溶液冷卻至室溫，過濾，真空濃縮。將粗的橙色殘余物溶于 少量MTBE(250mL)。加入少量己烷(50mL)，使產(chǎn)物沉淀出來( 2小時內(nèi))，為無色固體，其 通過真空過濾分離。用少量MTBE洗滌濾餅，真空干燥，得到ER-818039 (39. 6g，85% )，為無 色固體。合成路線3 ER-823143-010 如上述合成路線 3 所示，向含有 ER_818039(2. 15g，0. 00512mol) 的I-頸圓底燒瓶中緩慢加入4N HCl的1，4_ 二噁烷(3.8mL，0.049mol)溶液。原料在20 分鐘內(nèi)緩慢溶解，30分鐘后無色沉淀形成。然后加入MTBE (3ml)。2小時后，過濾該反應(yīng)體 系，用MTBE洗滌，得到ER-823143-01 (1. 81g,99% ),為無色固體。合成路線4 ER-817098 如上述合成路線4所示，在氮氣氣氛中向ER-823143-01 (41. 5mg， 0. 000117mol)和4 A分子篩在1，2_ 二甲氧基乙燒(0. 5mL，0. 004mol)中的混懸液中加入3， 5-二甲氧基苯甲醛(21.3mg，0. 000128mol)，然后加入三乙胺(16. 2 μ L，0. 000117mol)。將 該反應(yīng)體系攪拌1小時。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(34. 6mg，0. 000163mol)，將該反應(yīng)體系 攪拌過夜。進行硅膠快速色譜法，得到ER-817098(45.3mg，83%)，為無色固體。合成路線5 ER-817116 如上述合成路線 5 所示，向 ER-817098-00 (50. Omg，0. 000106mol)禾口 1-溴-2-甲氧基乙燒(15. 6μ L,0. 000160mol)在N-甲基吡咯燒酮(1. OmL，0. OlOmo)中的 溶液中加入1. OM六甲基二硅氮化鋰(lithium hexamethyldisilazide)于四氫呋喃的溶液 (0. 16mL)。使溫度增加至80°C，將該反應(yīng)混合物攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用 水淬滅，然后用MTBE萃取幾次。合并MTBE萃取物，用水(2x)和鹽水(Ix)洗滌。用硫酸鎂 干燥有機層，過濾，真空濃縮。進行快速色譜法，得到ER-817116(32.2mg，58%)，為無色油 狀物。合成路線6 ER-817118 如上述合成路線 6 所示，向 ER-817098 (2. 85g，0. 00607mol)在 N， N-二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液中加入氫化鈉(364mg，0.00910mol)，然后加入碘乙烷 (758 μ L，0. 00910mol)。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜。極緩慢地加入水，用MTBE將該反應(yīng)混 合物萃取幾次。合并MTBE萃取物，用水(2x)和鹽水(Ix)洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，過 濾，真空濃縮。使用乙酸乙酯作為洗脫液進行快速色譜法，得到ER-817118(2.89g，96%)， 為無色油狀物。合成路線7 ER-823914 如上述合成路線 7 所示，在-78°C 向 ER-823143-01 (5. 03g，0. 0141mol) 在四氫呋喃(30.0mL，0. 370mol)中的溶液中緩慢加入1. OM溴化烯丙基鎂的乙醚溶液 (71mL)。將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物冷卻至_78°C，用三氟乙 酸逐滴處理(21.8mL，0.283mol)，然后真空濃縮至小殘留體積。加入三乙胺以中和殘留的 TFA，然后真空濃縮該混合物至干。將殘余紅色油狀物溶于甲醇(138mL，3. 41mol)，用二叔丁 基二碳酸酯(3. 34g，0.0148mol)，然后用三乙胺(2. 38mL, 0. 0169mol)處理，在室溫攪拌過 夜。真空濃縮該反應(yīng)混合物，通過快速色譜法純化(洗脫液50%己烷的乙酸乙酯溶液)， 得到 ER-823914 (3. 25g,52% )，為無色固體。合成路線8 ER-823915 如上述合成路線 8 所示，向 ER-823914 (2. 20g，0. 00496mol)在 N，N-二 甲基甲酰胺(12.4mL，0. 160mol)中的溶液中加入氫化鈉(298mg，0. 00744mol)，然后加入碘 乙烷(607 μ L，0. 00744mol)。然后將該反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后用水淬滅，用MTBE萃取幾 次。合并MTBE萃取物，用水和鹽水洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，過濾，真空濃縮。進行快速 色譜法(洗脫液40%己烷的乙酸乙酯溶液)，得到ER-823915 (0. 80g，34% )，為無色泡沫。合成路線9 ER-823917-01 如上述合成路線 9 所示，將 ER-823915 (799. 2mg，0. 001695mol)溶 于4M氯化氫的1，4-二噁烷溶液(10mL)。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后真空濃縮，得到 ER-823917-01 (0. 69g，定量)，為橙色固體。合成路線10 ER-824184&ER-824185 如上述合成路線 10 所示，將 ER-823915 (200mg)在乙腈 (Iml)中的溶液注射在CHIRALPAK AS-H SFC柱(30mmx 250mm，5微米粒度)上，用 95 5正-庚烷異-丙醇以40ml/min流速洗脫。使用具有設(shè)定在290nm波長的UV檢測 器檢測洗脫的級分。分離第一種洗脫級分，通過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到ER-824184 ；分離 第二次洗脫的級分，通過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到ER-824185。合成路線11 ER-824188-01 如上述合成路線 11 所示，將 ER-824184 (25. 33g，0. 05371mol)溶于4M氯化氫的1，4-二噁烷溶液(135mL)。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后真空濃縮，得到 ER-824188-01 (21. 9g，定量)，為橙色固體。ER-824188-01的單晶X-射線衍射分析顯示立 體中心的絕對構(gòu)型是S，如合成路線11中所示。合成路線12 ER-824280-01 如上述合成路線 12 所示，將 ER-824185 (457. 2mg,0. 0009695mol) 溶于4M氯化氫的1，4-二噁烷溶液(2.5mL)。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后真空濃縮，得 到 ER-824280-01 (383. 2mg,97% )，為橙色固體。ER-824188-01 的 Mosher 酰胺衍生物的單 晶X-射線衍射分析顯示立體中心的絕對構(gòu)型是R，如合成路線11中所示。合成路線13 ER-819924 如上述合成路線 13 所示，將 ER-824188-01 (62. 4mg，0. 000153mol)禾口 N-甲基吡咯-2-甲醛(0. 000229mol)溶于/混懸于N，N- 二甲基甲酰胺(0. 62mL)。攪拌 30分鐘后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(47. 8mg,0. 000214mol)。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜， 然后通過反相色譜法純化，得到ER-819924 (71. lmg，83. 4% )，為油狀物。合成路線14 ER-819925 如上述合成路線 14 所示，將 ER-824280-01 (59. 5mg,0. 000146mol 和 N-甲基吡咯-2-甲醛(0. 000219mol)溶于/混懸于N, N' _ 二甲基甲酰胺(0. 60mL)。攪拌 30分鐘后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(45. 6mg,0. 000204mol)。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜， 然后通過反相色譜法純化，得到ER-819925 (51. 9mg，76. 6% )，為油狀物。合成路線15 ER-819762 如上述合成路線 15 所示，將ER-824188-01 (5. 7g，0. 0140mol)、1，8-二 氮雜雙環(huán)[5. 4. 0] i^一 -7-烯(4. 4mL，0. 029mol)和 3，5-二甲基芐基溴(4. 7g，0. 024mol) 在N，N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液在97C加熱過夜。進行水后處理和通過快速色譜法 純化，得到ER-819762 (4. 86g，71% ),為無色固體。合成路線16 ER-819762-01 如上述合成路線 16 所示，將 ER-819762 (4. 77g，0. 00974mol)、乙腈(IOmL)和IM HCl的水溶液(IlmL)在室溫攪拌約5分鐘。濃縮該溶液，凍干后得到 ER-819762-01 (5. Ig,定量)，為無色結(jié)晶。ER-819762-01單晶X-射線衍射分析顯示立體中 心的絕對構(gòu)型是S，如合成路線16中所示。合成路線17 ER-819763 如上述合成路線 17 所示，將 ER-824280-01 (66. 9g，0. 1640mol)、l， 8_ 二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(54mL，0. 361mol)和 3，5-二甲基芐基氯(42. 4g， 0. 213mol)在N-甲基吡咯烷酮(669mL)中的溶液在72C加熱2小時。冷卻后，加入水以沉 淀期望的產(chǎn)物。過濾，真空干燥，得到ER-819763(74.4g，92% )，為無色固體。合成路線18 ER-824102 如上述合成路線 18 所示，在室溫向 ER-823143-01 (4. 00g，0. 0112mol) 在N，N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液中加入α -溴代芪(bromomesitylene) (3. 13g， 0. 0157mol)，然后加入DBU(4. 37mL，0. 0292mol)。攪拌1小時后，用半飽和NH4C1水溶液使 反應(yīng)停止，用乙酸乙酯稀釋，攪拌lh，得到兩澄清層。分離有機層，用乙酸乙酯(2x)萃取水 層。用Na2S04干燥合并的萃取物，過濾，真空濃縮。從MTBE中結(jié)晶，得到ER-824102 (4. 30g， 87% )，為無色固體。合成路線19 ER-819929 如上述合成路線 19 所示，在 _65°C在 IOmin 內(nèi)向 ER-824102(3. 72g, 0. 0085mol)在四氫呋喃(35mL)中的溶液中加入1. OM溴化烯丙基鎂的乙醚溶液(25. 5mL， 0.0255mol)，保持內(nèi)部溫度低于-50°C。將該反應(yīng)混合物溫至0°C。在0°C 3h后，用飽和 NH4C1水溶液使反應(yīng)停止，用乙酸乙酯和水稀釋，攪拌lOmin，得到兩澄清層。分離有機層， 用乙酸乙酯萃取水層。用水、鹽水洗滌合并的萃取物，用Na2S04干燥，過濾，真空濃縮，得到 粗產(chǎn)物ER-819929 (4. 15g，定量)，為無色固體，不經(jīng)進一步純化用于下一步。合成路線20 ER-819930 如上述合成路線 20 所示，將ER-819929 (37mg，0. 000077mol)在三氟乙 酸(0. 5mL)中的溶液在室溫攪拌16小時。用EtOAc (5mL)稀釋深棕紅色反應(yīng)混合物，用飽 和NaHC03水溶液中和(5mL，謹(jǐn)慎氣體放出)。將兩層混合物攪拌lOmin，得到兩澄清幾乎 無色的層。分離有機層；用EtOAc萃取水層。用Na2S04干燥合并的有機萃取物，過濾，真空 濃縮。通過快速色譜法純化，用1 1庚烷-EtOAcU 3庚烷-EtOAc、100% EtOAc洗脫， 得到ER-819930 (26mg, 73% ),為無色固體。合成路線21 ER-820006 和 ER-820007 如上述合成路線 21 所示，向 ER-819930 (llOmg， 0. 000238mol)和甲基烯丙基溴(72 μ L，0. 000715mol)在DMF(1.5mL，)中的溶液中加入 1.0M六甲基二硅氮化鋰的四氫呋喃溶液(0. 52mL，0.00052mol)。在室溫攪拌18h后，用 MTBE稀釋該反應(yīng)混合物，用半飽和NH4Cl水溶液淬滅。分離水層，用MTBE萃取。用Na2SO4 干燥合并的萃取物，過濾，真空濃縮。通過快速色譜法純化，用3 2庚烷-EtOAcU 1 庚烷-EtOAc洗脫，得到外消旋產(chǎn)物(68mg，55% )，為無色油狀物。將外消旋產(chǎn)物(55mg) 上Chiralpak AS柱進行手性HPLC，用庚烷-異丙醇(9 1)洗脫，得到第一種洗脫的對 映體 ER-820006(21mg，38%，[α ]D = +83. 7° (c = 0. 35，CHCl 3)和第二種洗脫的對映體 ER-820007 (23mg, 42%, [α ]D = -74. 2° (c = 0. 38, CHCl 3)?；谂c ER-819762/ER-819763 對映體對的旋光度和手性HPLC保留時間的類似暫時指定絕對立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。合成路線22 ER-819786和ER-819787 如上述合成路線22所示，給安裝了攪棒的5mL微 波反應(yīng)器中添加 ER-8I993O (110mg，0. 000238mol)、DMF (1. 5mL) ,2-(2-溴乙氧基)四 氫-2H-吡喃(108 μ L，0. 000715mol)和1. OOM六甲基二硅氮化鋰的四氫呋喃溶液 (520μ ，0.00052πιΟ1)。將反應(yīng)瓶在200°C微波照射15min。再加入2_(2_溴乙氧基)四 氫-2H-吡喃(108 μ L，O. 000715mol)和1. OOM六甲基二硅氮化鋰的四氫呋喃溶液(520 μ L, 0.00052mol)，通過在20(TC微波照射將該反應(yīng)混合物再加熱15min。通過制備型反相 HPLC純化，得到外消旋產(chǎn)物(25mg，21% )，為無色玻璃狀油狀物。將外消旋產(chǎn)物(17mg)上ChiralpacAS柱進行手性HPLC，用庚烷-異丙醇(9 1)洗脫，得到第一種洗脫的對映 體 ER-819786(7. 2mg，42%，[α ]D = +72. O ° (c = 0. 1，CHCl 3)和第二種洗脫的對映體 ER-819787(7. 5mg,44%, [α ]D = -73. 0° (c = 0. 1,CHC13)?；谂c ER-819762/ER-819763 對映體對的旋光度和手性HPLC保留時間的類似暫時指定絕對立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。合成路線23 ER-819993和ER-819994 如上述合成路線23所示，給安裝了攪棒的5mL微波反應(yīng) 器中添加 ER-819930(110mg，0. 000238mol)、DMF(1. 5mL)、4_ 甲基苯磺酸((4S)-2，2_ 二甲 基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲酯(205mg，0. 000715mol)和1. OOM六甲基二硅氮化鋰的四氫 呋喃溶液(520 μ L，0. 00052mol)。通過在200°C微波將反應(yīng)瓶照射15min。再加入4-甲基 苯磺酸((4S)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲酯(157mg，0. 000548mol)和 1. OOM六 甲基二硅氮化鋰的四氫呋喃溶液(477 μ L，0. 000477mol)，通過在200°C微波照射將該反應(yīng) 混合物再加熱15min。通過制備型反相HPLC純化，得到丙酮化合物ER-819993 (40mg, 30% ) 和二醇物質(zhì)(18mg，14% )，為1 1的非對映異構(gòu)體混合物。通過手性HPLC、用Chiralpac AS柱分離非對映異構(gòu)體二醇類，用庚烷-異丙醇(9 1)洗脫，得到第一種洗脫的非對 映異構(gòu)體ER-819788(5. Omg)和第二種洗脫的非對映異構(gòu)體ER-819789 (5. 2mg)?；谂c ER-819762/ER-819763對映體對的旋光度和手性HPLC保留時間的類似暫時指定絕對立體 化學(xué)結(jié)構(gòu)。合成路線24 ER-81990 如上述合成路線 24 所示，將 ER-824220-00 (51. 8mg，0. 000139mol)、 三乙胺(97yL，0.00070mol)、4-二甲氨基吡啶(3. 4mg,0. 000028mol)和(R)-(-)-a-甲 氧基-α-三氟甲基苯基乙酰氯(0. 052mL，0. 00028mol)在二氯甲烷(500 μ L)中的溶液 在室溫攪拌5小時。通過快速色譜法純化，然后從乙酸乙酯/庚烷/戊烷中結(jié)晶，得到 ER-819990 (49. 2mg,60% )，為晶體?？梢允褂门c合成路線13和/或合成路線15 —致的一般方法合成以如下部分和下 表1-2中舉例的、但并非上文清楚描述的化合物。就以鹽酸鹽形式舉例的化合物而言，可以 通過使相應(yīng)游離堿接觸如合成路線16中所述的一般條件制備它們。表1.式I的典型化合物的分析數(shù)據(jù) 分析方法方法Al溶劑A :0. 2% Et3N 水溶液溶劑B :0. 2 % Et3N乙腈溶液流速2.Oml/min線性梯度 方法Cl
流動相0. 1% Et2NH的乙醇溶液
流速1. Oml/min
寸/又。
實施例42-126
體外牛物活件
HEKT-bet-luc測定本試驗測定在表達驅(qū)動熒光素酶報道基因的人T_bet和
T-box效應(yīng)元件的改造的HEK細胞中的T-bet依賴性報道基因(熒光素酶)活性。將 HEKT-bet細胞以2x104/孔在96-孔培養(yǎng)板上鋪板，將化合物加入細胞培養(yǎng)物24小時。 通過添加50 μ 1 Steady-Glo試劑(Promega)測定熒光素酶活性，用Victor V讀數(shù)器 (PerkinElmer)讀取樣品。通過比較化合物處理的樣品與無化合物處理的媒介物對照組確 定化合物活性。使用相當(dāng)于無測試化合物的存在下熒光素酶的量的最大值與相當(dāng)于最大抑 制下得到的測試化合物的最小值計算IC5tl值。標(biāo)準(zhǔn)化HEKT-bet IC50值的測定用微量滴定板測定化合物。每個板包括是 ER-819544的參比化合物。用具體化合物的未校準(zhǔn)的IC5tl值除以對同一微量滴定板中參比 化合物測定的IC5tl值，得到相對效力值。然后將該相對效力值乘以建立的參比化合物的效 力，得到校準(zhǔn)的HEKT-bet IC5tl值。在本測定法中，對ER-819544建立的效力是0. 035 μ M0 使用該校準(zhǔn)法得到本文提供的IC5tl值。根據(jù)如上所述HEKT-bet-luc測定法中所述的方法測定本發(fā)明的典型化合物。下 表2列出了本發(fā)明的典型化合物，其具有最高至如通過上述校準(zhǔn)HEKT-bet-luc測定法測定 的所示量的IC50(UM)o表2.典型化合物的IC5tl值 實施例126體內(nèi)牛物活件主動免疫接種CIA中關(guān)節(jié)炎發(fā)生的抑制。在第0天給DBA1/J小鼠免疫接種bCII/CFA，然后在第 21天加強接種bCII/IFA。在研究過程中監(jiān)測關(guān)節(jié)炎發(fā)生。如下進行關(guān)節(jié)炎評分0=正常 爪，評分1 = 1-2個指發(fā)炎爪；評分2 = 3個指或1-2個指+腕或踝發(fā)炎，評分3 =手+超 過2個指發(fā)炎；和評分4 =多指(3-4)+重大腕或踝炎癥。(A)化合物的部分治療評價。通過在膠原蛋白II的抗體誘導(dǎo)后第20天、在疾病發(fā) 生前以所示的劑量每日口服給予一次給予活性化合物。(B)化合物的完整治療評價。在疾 病發(fā)生后給予活性化合物(從第二次免疫接種后第7天開始。(C)來自完整治療CIA研究 的小鼠爪的χ-射線分析。χ-射線評分是骨質(zhì)減少、骨質(zhì)侵蝕和新骨生成組合的測定指標(biāo)。 (D)有代表性的X-射線顯影圖。數(shù)據(jù)如下表3中所示。一般而言，這些數(shù)據(jù)有利地比較了該模型中的甲氨蝶呤活 性。實施例127體內(nèi)生物活性被動免疫接種CAIA中關(guān)節(jié)炎發(fā)生的抑制。第0和第3天給BALB/c小鼠i. v.注射Img抗-II型 膠原蛋白抗體，之后在i. P.注射25yg LPS與活性化合物，并且從第0到第7天每日PO給 予一次甲氨蝶呤(MTX)。在研究過程中監(jiān)測關(guān)節(jié)炎評分和體重。數(shù)據(jù)如下表3所示。這些數(shù)有利地與在該模型中并非特別具有活性的甲氨蝶呤進 行比較。
盡管我們已經(jīng)描述了本發(fā)明的許多實施方案，但是顯而易見，可以改變我們的基 本實施例以提供使用本發(fā)明化合物和方法的其他實施方案。因此，可以理解本發(fā)明的范圍 由隨附的權(quán)利要求書而非作為實施例表示的具體實施方案定義。
權(quán)利要求
式Ia的對映體純化合物其中R1是C1-3烷基；X是亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞乙烯基、亞丙烯基或亞丁烯基；R5是苯基、吡咯基、苯并咪唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、吡啶基、咪唑并吡啶基、吲哚基、苯并三唑基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻二唑基、嘧啶基、苯并吡喃酮基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、喹喔啉基或萘基，且被0-5個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基、C1-3烷氧基、羥基、C1-3烷硫基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基、三氟甲氧基、5-甲基異噁唑基、吡唑基、芐氧基、乙酰基、(氰基)C1-3烷基、(苯基)C2-3烯基；和鹵素；R8是H、甲基、乙基、丙基、(C1-3烷氧基)C1-3烷基、(C1-3烷硫基)C1-3烷基、C1-3羥基烷基、苯基、芐基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基和噻吩基；其中R8被0-3個取代基取代，所述取代基獨立地選自甲基、乙基、鹵素、羥基、C1-3烷氧基、C1-3烷硫基、(C1-3烷氧基)C1-3烷基、(C1-3烷硫基)C1-3烷基、C1-3羥基烷基、(C1-3巰基烷基)苯基、芐基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基和噻吩基；且Ra、Rb和Rc各自獨立地選自氫、羥基、甲氧基、芐氧基、氟、氯、氨基、甲基氨基、二甲氨基和苯氧基；或選自Ra和Rb，以及Rb和Rc的一對一起是-O-(CH2)-O-或-O-CH2-CH2-O-；或其藥學(xué)可接受的鹽、C1-6烷基酯或酰胺或C2-6烯基酯或酰胺。FPA00001151475000011.tif
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是CV2烷基；R5是苯基、吡咯基、苯并咪唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、 吲唑基、吡啶基、咪唑并吡啶基、噴哚基、苯并三唑基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻二唑基、 嘧啶基、苯并吡喃酮基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、喹喔啉基或萘基，且被 0-5個取代基取代，所述取代基獨立地選自Cy烷基、C"烷氧基、羥基、C"烷硫基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基、三氟甲氧基、5-甲基異噁唑基、吡唑基、芐氧基、乙?；?、(氰基)cv3烷基、(苯 基)Cp3烯基；和鹵素；R8是甲基、乙基或丙基，其中R8被0-3個羥基取代基取代； X是亞甲基或亞乙基； R\ Rb和R。各自獨立地選自H和甲氧基； 或其藥學(xué)可接受的鹽。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中 R1是甲基;R5是苯基、吡咯基或吡唑基，它們各自被甲基取代0、1或2次；R8是乙基；X是亞甲基；Ra和Re各自是甲氧基；RlH;或其藥學(xué)可接受的鹽。
4.權(quán)利要求1的化合物，選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
5.權(quán)利要求1的化合物，選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
6.權(quán)利要求1的化合物，選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
7.權(quán)利要求1的化合物，選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
8.組合物，包含在藥學(xué)可接受的載體中的權(quán)利要求1的化合物。
9.對需要的受試者治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的方法，包括對該受試者給予治療有效量的權(quán) 利要求1的化合物。
10.權(quán)利要求9的方法，其中R1是CV2烷基；R5是苯基、吡咯基、苯并咪唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、 吲唑基、吡啶基、咪唑并吡啶基、噴哚基、苯并三唑基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻二唑基、 嘧啶基、苯并吡喃酮基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、喹喔啉基或萘基，且被 0-5個取代基取代，所述取代基獨立地獨立地選自CV4烷基、C1^3烷氧基、羥基、C1^3烷硫基、 環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基、三氟甲氧基、5-甲基異噁唑基、吡唑基、芐氧基、乙酰基、(氰基)CV3烷 基、(苯基)C2_3烯基；和鹵素；R8是甲基、乙基或丙基，其中R8被0-3個羥基取代基取代；X是亞甲基或亞乙基；R\ Rb和R。各自獨立地選自H和甲氧基；或其藥學(xué)可接受的鹽。
11.權(quán)利要求9的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
12.權(quán)利要求9的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
13.權(quán)利要求9的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
14.權(quán)利要求9的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
15.對需要的受試者治療多發(fā)性硬化的方法，包括對該受試者給予治療有效量的權(quán)利 要求1的化合物。
16.權(quán)利要求15的方法，其中R1是CV2烷基；R5是苯基、吡咯基、苯并咪唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、 吲唑基、吡啶基、咪唑并吡啶基、噴哚基、苯并三唑基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻二唑基、 嘧啶基、苯并吡喃酮基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、喹喔啉基或萘基，且被 0-5個取代基取代，所述取代基獨立地選自CV4烷基、C"烷氧基、羥基、C"烷硫基、環(huán)丙基、 環(huán)丙基甲基、三氟甲氧基、5-甲基異噁唑基、吡唑基、芐氧基、乙?；?氰基)CV3烷基、(苯 基)C2_3烯基；和鹵素；R8是甲基、乙基或丙基，其中R8被0-3個羥基取代基取代；X是亞甲基或亞乙基；R\ Rb和R。各自獨立地選自H和甲氧基；或其藥學(xué)可接受的鹽。
17.權(quán)利要求15的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
18.權(quán)利要求15的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
19.
20.權(quán)利要求15的方法，所述化合物選自
21.權(quán)利要求15的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
22.對需要的受試者治療自身免疫病的方法，包括對該受試者給予治療有效量的權(quán)利 要求1的化合物；其中所述自身免疫病選自系統(tǒng)性紅斑狼瘡、1型糖尿病、銀屑病和動脈粥樣硬化。
23.權(quán)利要求22的方法，其中R1是CV2烷基；R5是苯基、吡咯基、苯并咪唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、 吲唑基、吡啶基、咪唑并吡啶基、噴哚基、苯并三唑基、咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻二唑基、 嘧啶基、苯并吡喃酮基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、喹喔啉基或萘基，且被 0-5個取代基取代，所述取代基獨立地選自CV4烷基、C"烷氧基、羥基、C"烷硫基、環(huán)丙基、 環(huán)丙基甲基、三氟甲氧基、5-甲基異噁唑基、吡唑基、芐氧基、乙?；?、(氰基)CV3烷基、(苯 基)C2_3烯基；和鹵素；R8是甲基、乙基或丙基，其中R8被0-3個羥基取代基取代；X是亞甲基或亞乙基；R\ Rb和Re各自獨立地選自H和甲氧基；或其藥學(xué)可接受的鹽。
24.權(quán)利要求22的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
25.權(quán)利要求22的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
26.權(quán)利要求22的方法，所述化合物選自 及其藥學(xué)可接受的鹽。
27.權(quán)利要求22的方法，所述化合物選自 的應(yīng)用。
28.權(quán)利要求1-8的化合物在制備治療有此需要的受試者的多發(fā)性硬化的藥物中的應(yīng)用。
29.權(quán)利要求1-8的化合物在制備治療有此需要的受試者的自身免疫病的藥物中的應(yīng) 用，其中所述自身免疫病選自系統(tǒng)性紅斑狼瘡、1型糖尿病、銀屑病和動脈粥樣硬化。
全文摘要
本發(fā)明提供了式I的對映體純化合物及其包含它們的藥物制劑和使用方法。
文檔編號C07D471/20GK101889014SQ200780101839
公開日2010年11月17日 申請日期2007年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月15日
發(fā)明者B·M·賽勒提斯奇, C·J·莎弗, M·斯拜韋, R·伯伊溫, S·舍爾勒, X·Y·L·李, 劉佳, 陳前 申請人:衛(wèi)材R&D管理有限公司